血细胞计数板的使用
血球计数板计数法
精度高
血球计数板由精密的网格构成，能够精确地 计算细胞数量，误差较小。
样本用量少
血球计数板计数法需要的样本量较少，适用 于珍贵样本的计数。
缺点
主观性强
血球计数板计数法需要人工识别和计数细胞，因此容易受到主观因素 的影响，不同操作者之间可能存在差异。
无法计数非网格区域细胞
血球计数板上的网格区域有限，对于非网格区域的细胞无法计数，可 能会造成计数误差。
改进样本处理方法，提高细胞分散效果，降低细胞聚集现象， 提高计数的准确性。
增加血球计数板的网格密度，以减少计数误差，提高计数的准 确性。
将血球计数板计数法与其他检测方法相结合，如染色法、流式 细胞术等，以提高计数的准确性和可靠性。
06 血球计数板计数法：血常规检测中的血细胞计数
红细胞计数降低
常见于缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血、溶血性贫血等，也 可见于慢性病、肿瘤、月经期、孕妇等生理性贫血。
白细胞计数结果解读
白细胞计数正常值
成人（4.0~10.0） × 10^9/L，新生儿 （15.0~20.0） × 10^9/L。
白细胞计数升高
常见于感染、炎症、组织损伤、恶性肿瘤等，也可 见于生理性升高，如剧烈运动、体力劳动、月经期 和排卵期等。
常见于免疫性血小板减少症、再 生障碍性贫血、骨髓增生异常综 合征等，也可见于某些药物影响 或放化疗后骨髓抑制。
05 血球计数板计数法的优缺点
CHAPTER
优点
操作简便
血球计数板计数法是一种直接、快速的细胞 计数方法，操作简便，易于掌握。
适用范围广
该方法适用于各种类型的细胞计数，包括细 菌、红细胞、白细胞等。
总结词
血球计数板计数法在血常规检测中广 泛应用，用于准确计数红细胞、白细 胞和血小板等血细胞数量，为临床诊 断提供重要依据。
血细胞计数板的应用
血细胞计数板及其应用(1)血细胞计数板：通常有两种规格，一种是一个大方格分成16个中方格，每个中方格又分成25个小方格；另一种是一个大方格分成25个中方格，每个中方格又分成16个小方格。
但无论哪种规格的计数板，每个大方格都有16×25＝400个小方格。
一个大方格长和宽各为1 mm，深度为0.1 mm，体积为0.1 mm3。
(2)计数方法：对于16×25的计数板而言，计四角的4个中方格共计100个小方格中的个体数量；而对于25×16的计数板而言，计四角和正中间的(共5个)中方格共计80个小方格中的个体数量。
(如图所示)(3)计算方法：①16×25型的计数板：酵母细胞个数/mL＝(100个小方格细胞总数/100)×400×10000×稀释倍数。
②25×16型的计数板：酵母细胞个数/mL＝(80个小方格细胞总数/80)×400×10000×稀释倍数。
附：1.镜检计数方法①方格内细胞的计数顺序为左上→右上→右下→左下。
②压在方格线上的细胞只计左线和上线上的细胞数。
③酵母细胞若有粘连，要数出团块中的每一个细胞。
④出芽酵母的芽体体积若超过细胞体积的1/2，则算独立个体。
⑤计数总数不少于300个细胞。
2．注意事项（1）进行计数前，应先将试管摇匀，目的是使酵母菌在培养液中混合均匀，以减少计数误差。
（2）显微镜计数时，对于压在小方格界线上的酵母菌，应取相邻两边及顶角计数。
（3）若一个小方格内酵母菌数量过多，难以数清时，则可将培养液稀释一定倍数后再计数。
（4）本实验无另设对照实验，酵母菌每天的数量变化可形成前后对照。
（5）血细胞计数板使用后，切勿用硬物洗刷，可采用浸泡和冲洗的方法清洗。
例1：检测员将1 mL水样稀释10倍后，用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量；将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室，并用滤纸吸去多余液体。
血球计数板16x25公式
血球计数板16x25公式血球计数板是临床常见的一种实验用具，主要用于进行血液检查。
其尺寸为16x25，板面上通常有两个棱形池，分别为大池和小池，用来盛放血液样本以及进行计数。
在进行血球计数时，需要按照一定的规律来进行计数。
具体计数方法为：在显微镜下观察大池和小池中的血细胞，以小池中的九宫格为单位进行计数。
记下每个九宫格中红细胞和白细胞的数量，然后利用公式进行计算，最后得出血球计数结果。
下面是血球计数板16x25的计算公式：1. 红细胞计数红细胞计数采用的是五格法，公式如下：每个小方格内红细胞的数量 ÷ 5 × 10^4 = 红细胞计数（/μL）其中，10^4是因为血球计数板的九宫格面积为1/25mm^2，而10^4是将其转换为1mm^2的常数。
2. 血红蛋白计量血红蛋白计量的公式为：血红蛋白浓度（g/dL）= 小池中红细胞总量（个）×每个红细胞的血红蛋白含量（pg）÷ 10^6其中每个红细胞的血红蛋白含量为血红蛋白浓度（g/dL） ÷红细胞计数（/μL） × 10。
3. 白细胞计数白细胞计数需要在小方格内计算白细胞的数量，并根据计数结果乘以适当的倍数进行计算。
常用的倍数为20或25。
因此白细胞计数的公式为：小池中白细胞计数（/μL）= 当前小方格内白细胞数 ÷小方格总数 ×每个立方毫米的血液样本（0.1mm）÷ 20或25其中0.1mm是指使用血球计数板进行血液检测时，通常使用的显微镜目镜的倍数。
以上是血球计数板16x25所使用的计算公式，按照规定的步骤和方法进行计算，可以得出准确的血球计数结果。
但需要注意的是，由于血球分布的不均匀性，计算结果存在误差，所以需要根据实际情况进行调整。
同时，在进行计数过程中需要严格遵守操作规程，避免操作中的误差对结果产生影响。
《血细胞计数板》课件
汇报人：PPT
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血细胞计数板是一种用于计数血细胞的工具
由多个小方格组成，每个方格内可容纳一定数量的血细胞
通过观察血细胞在方格内的分布情况，可以计算出血细胞的数量和比例
血细胞计数板广泛应用于医学、生物学等领域，用于检测血液中的血细胞数量和比例， 了解血液健康状况。
将盖玻片放在血细胞计数板上，使血液 样本均匀分布
在显微镜下观察血细胞计数板，计数血 细胞数量
根据血细胞计数板的刻度，计算血细胞 数量
记录血细胞计数结果，用于诊断和治疗 疾病
血细胞计数板是一种用于计数红细 胞数量的工具
通过观察血细胞在血细胞计数板上 的分布情况，可以计算出红细胞的 数量
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血细胞计数板是诊断血液系统 疾病的重要工具
通过观察血细胞形态和数量， 可以判断血液系统疾病的类型 和严重程度
血细胞计数板可以帮助医生制 定治疗方案
血细胞计数板在血液系统疾病 的诊断中具有较高的准确性和 可靠性
放化疗对血细胞的影响
血细胞计数板在监测放化疗 效果中的应用
血细胞计数板由多个小方格组成， 每个小方格代表一个红细胞
血细胞计数板在实验中具有重要的作 用，可以帮助研究人员更好地了解血 液中的红细胞数量，从而更好地了解 血液的健康状况。
血细胞计数板是一种用于计数血细胞数量的工具 在实验中，血细胞计数板可以帮助我们快速准确地计数白细胞数量 血细胞计数板的使用步骤包括：取样、稀释、涂片、染色、观察和计数 血细胞计数板的使用可以提高实验结果的准确性和可靠性
血细胞计数板在监测放化疗 效果中的注意事项
血细胞计数板原理
血细胞计数板原理
血细胞计数板是一种用于计算血细胞数量的仪器，其原理是通过显微镜放大血液中的血细胞，然后使用计数器进行计数。
血细胞计数板由两个反向的计数室组成，分别用于计算红细胞和白细胞数量，每个计数室中有一个网格，其中每个小格都有特定的面积和深度，以便让细胞沉淀并保持在计数室的平面上。
在使用血细胞计数板进行计数时，首先需要将血液样本稀释至适宜浓度，然后将稀释好的血液样本加入到计数室中，让其在计数室内沉淀约5分钟，然后使用显微镜放大计数室内的细胞。
在观察时，必须注意每个小格子中出现的细胞数并在计数器上记录下来。
根据记录的细胞数，就可以在血液中计算出相应的细胞数量。
血细胞计数板是一种简单而实用的计数方法，因其高度可靠性和准确性而被广泛应用于临床医学、生命科学和环境分析等领域。
它不仅可以用于红细胞和白细胞计数，还可用于血小板计数和血红蛋白浓度测定，是一种常用的血液分析工具。
总之，血细胞计数板的原理和使用方法十分简单，但它给临床医学、
生命科学和环境分析等领域带来了很大的贡献。
随着科技的不断发展，它也将不断地得到完善与发展。
《血细胞计数板》课件
04
血细胞计数板的维护与保养
血细胞计数板的清洁与保养
清洁
使用柔软的湿布定期擦拭计数板 ，以清除灰尘和污垢。避免使用 含有酒精或化学溶剂的清洁剂， 以免损坏计数板表面。
保养
定期检查计数板的边缘和角落， 确保没有损坏或裂纹。如有需要 ，可以使用薄薄的一层防锈油来 保护金属部分。
血细胞计数板的常见故障及排除方法
读数不准确
可能是由于计数板表面有污垢或 磨损造成的。清洁和检查计数板 表面，确保其清晰、干净且无磨
损。
气泡产生
在计数过程中出现气泡可能是由于 温度变化或液体表面张力问题。确 保在恒温环境下操作，并确保计数 板表面干燥。
计数板松动或移位
检查计数板的安装是否稳固，如有 需要，可以重新安装或更换固定装 置。
科学研究
血细胞计数板可用于科研领域，为疾病发病机制、药物研发和生物 医学研究提供有力支持。
公共卫生
在流行病和公共卫生事件中，血细胞计数板可用于快速大规模筛查 和监测，保障公共卫生安全。
血细胞计数板的研究方向与挑战
新型计数板材料的研发
01
探索新型材料，提高计数板的耐用性和稳定性，降低成本。
计数板标准化的研究
血细胞计数板在临床上的应用，有助于医生快速、准确地获取患者的血液指标，为 制定治疗方案提供依据。
血细胞计数板在血常规检测中的应用
血常规检测是临床常见的检查项目，通过血细胞计数板可以快速准确地测定红细胞、白细胞 和血小板数量。
红细胞计数有助于判断贫血、红细胞增多等病症；白细胞计数有助于判断感染、炎症等病症 ；血小板计数有助于判断出血性疾病。
02
血球计数板使用说明
而由于仪器（计数板、盖片、吸管等）不够准确与精密带来的误差称仪器误差；
由于细胞分布不均匀等因素带来的细胞计数误差属于分布误差或计数域误差（filed error）。
仪器误差和分布误差统称为固有误差或系统误差。技术误差和仪器误差可通过规范操作、提高熟练程度和校正仪器而避免或纠正，但细胞分布误差却难于彻底消除。质量控制一般需采用以下措施。
n为测定例数，∑d2为双样之差的平方和。
3．人员质量评价一般用两差比值法或双样试验标准差评价法进行质量评价或工作人员自我考核；变异百分数法通常用于评价细胞计数的结果。
（1）两差比值法用于考核实验结果的精密度。采用同一稀释样间隔2h后进行重复计数，求出两次镜下计数值之差（取绝对值）与两次计数值标准差的比值，即两差比值（r）。
评分：score=100-20.1×r，20.1为失分系数（40/1.99）。评级：90-100为优秀，80-89为良好，70-79为中等，60-69为及格，<60时为不及格。
（2）细胞稀释液应等渗、新鲜、无杂质微粒，同时应该保证细胞没有明显的团块。
（3）严格操作，从取样、重悬、稀释、充池到计数都应规范，尤其应注意的是样品稀释及充池时既要作到充分混匀，又要防止剧烈震荡为破坏红细胞。必须一次性充满计数室，防止产生气泡，充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与血盖片之间的矩形边缘为宜。
血球计数板使用方法
血球计数板介绍用优质厚玻璃制成.每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池.计数池两侧各有一支撑柱,将特制的专用盖玻片笼罩其上,形成高的计数池.计数池画有长.宽各的方格,分为9个大方格,每个大格面积为.容积为（ul）,个中,中心大方格用双线分成25个中方格,位于正中及四角5个中方格是红细胞计数区域,用单线划分为16个小方格.四角的4个大方格是白细胞计数区域,用单线划分为16个中方格.根椐国际尺度局（NBS）划定,大方格每边长度许可误差为±1%.应用办法1．视待测菌悬液浓度,加无菌水恰当稀释（斜面一般稀释100倍）,以每小格的菌数可数为度.2．取干净的血球计数板一块,在计数区上盖上一块盖玻片.3．将菌悬液摇匀,用滴管汲取少许,从计数板中心平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边沿摘入一小滴（不宜过多）,让菌悬液应用液体的概况张力充满计数区,勿负气泡产生,并用吸水纸吸去沟槽中流出的过剩菌悬液.也可以将菌悬液直接滴加在计数区上（不要使计数区双方平台沾上菌悬液,以免加盖盖玻片后,造成计数区深度的升高）,然后加盖盖玻片（勿使产朝气泡）.4．静置少焉,使细胞沉降到计数板上,不再随液体漂移.将血球计数板放置于显微镜的载物台上夹稳,先在低倍镜下找到计数区后,再转换高倍镜不雅察并计数.因为生涯细胞的折光率和水的折光率邻近,不雅察时应削弱光照的强度.5．计数时若计数区是由16个大方格构成,按对角线方位,数左上.左下.右上.右下的4个大方格（即100小格）的菌数.假如是25个大方格构成的计数区,除数上述四个大方非分特别,还需数中心1个大方格的菌数（即80个小格）.为了包管计数的精确性,防止反复计数和漏记,在计数时,对沉降在格线上的细胞的统计应有同一的划定.如菌体位于大方格的双线上,计数时则数上线不数下线,数左线不数右线,以削减误差.即位于本格上线和左线上的细胞计入本格,本格的下线和右线上的细胞按划定计入响应的格中.见右图：即本格上钩数细胞为3个.6．对于出芽的酵母菌,芽体达到母细胞大小一半时,即可作为两个菌体盘算.每个样品反复计数23次（每次数值不该相差过大,不然应从新操纵）,按公式盘算出每mL（g）菌悬液所含细胞数目.7．测数完毕,取下盖玻片,用水将血球计数板冲洗清洁,切勿用硬物洗刷或抹擦,以免破坏网格刻度.洗净后自行晾干或用吹风机吹干,放入盒内保管.计数公式1.16格×25格的血球计数板盘算公式：细胞数/ml=100小格内细胞个数/100×400×10000×稀释倍数1.25格×16格的血球计数板盘算公式：细胞数/ml=80小格内细胞个数/80×400×10000×稀释倍数。
1血球计数板操作规程
耶赛明（南通）保健有限公司目的 Purpose规范计数板的标准操作，确保设备的操作有章可循。
范围 Scope适用于计数板的日常使用。
职责 Responsibility质检部的检验员负责遵守该规程，质检部负责人负责监督与管理。
内容Procedure1 概述1.1 测定微生物细胞和动物细胞数量的方法很多，通常采用的有显微直接计数法和平板计数法。
1.2 显微直接计数法：将小量待测样品悬浮液置于计菌器上，于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。
显微计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液，如酵母、细菌、霉菌孢子等1.3 血球计数板1.3.1 是一块特制的厚型载玻片，载玻片上有4条槽而构成3个平台。
1.3.2 中间平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各有一个方网格（图1）。
图1：血细胞计数板构造（一） 图2：血细胞计数板构造（二）1.3.3 每个方网格分为9个大方格，正中间的大方格为计数室，计数室内的刻度有两种：一种是每个计数室内分为16个中方格（中方格用三线隔开），而每个中方格又分成25个小方格（图2）；另一种是每个计数室内分成25个中方格（中方格之间用双线分开），而每个中方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即计数室内都由400个小方格组成。
1.3.4 计数室边长为1mm，则计数室的面积为lmm2，每个小方格的面积为1/400mm2。
盖上盖玻片后，计数室的高度为0.1mm，所以每个计数区的体积为0.1mm3，每个小方格的体积为1/4000mm3。
1.3.5 使用血球计数板计数时，先要测定每个小方格中微生物或细胞的数量，再换算成每毫升样液（或每克样品）中微生物或细胞的数量。
已知：1cm3体积=10mm×10mm×10mm=1000mm3=1ml；所以：1cm3体积应含有小方格数为1000mm3/1/4000mm3=4×106个小方格，即系数K=4×106。
血球计数板的计数方法
血球计数板的计数方法1. 什么是血球计数板？血球计数板（hemocytometer）是一种用于血细胞计数的实验室设备。
它是一个有规定格数和深度的方形玻璃片，可以用于准确计算血液中红细胞、白细胞和血小板的数量。
2. 血球计数板的结构血球计数板通常由两个玻璃板组成，其中底板具有一个中心深度为0.1毫米的四方形计数室，该计数室被细致刻划成若干方格。
玻璃板上的一个或多个分格中的每个小格通常被标记为N个正方形小方格，每个小方格都具有已知的面积和深度。
3. 使用血球计数板进行计数的步骤步骤一：预处理•必须将计数室灭菌，以确保精确的计数结果。
•清洁和干燥两个玻璃板。
•准备所需的工作液，如盐水溶液。
步骤二：装填血液和计数室•使用大口针头在计数室的两个较深的边缘处，各自放入几滴血液样本。
•使用吸引力将血液吸入计数室中。
步骤三：均匀分布血细胞•轻轻倾斜和旋转计数室，以确保血液在计数室中均匀分布。
•这有助于避免细胞堆积，确保一个合适的血样。
步骤四：开始计数•将计数室放在显微镜上，并使用10倍或40倍增大放大率观察计数室中的血细胞。
•确保血细胞清晰可见，并避免过大的增大放大率，以免难以计数。
步骤五：计数规则•在计数室的每个小方格中计数所选的细胞类型，例如红细胞、白细胞和血小板。
•进行计数时，只计数完全在所选小方格内或者仅靠着四角的细胞。
•对每个细胞类型重复计数多个小方格，以获得更准确的统计结果。
步骤六：计算计数结果•根据所选细胞类型，确定每个小方格中的细胞数。
•使用统计公式计算细胞浓度：细胞数/已知的标定小方格数/标定小方格的面积。
4. 使用血球计数板的注意事项和技巧•需要精确的盖玻片技巧，确保计数室中没有气泡。
•观察血细胞时，确保不受外界因素干扰，如光线、尘埃等。
•避免在计数室内使用过多的血液，以免细胞重叠。
•进行计数时，要细心、耐心，并进行多次重复计数以确保准确性。
•定期校准计数室，以确保精确的计数结果。
5. 血球计数板的应用血球计数板广泛应用于临床诊断、疾病监测和实验室研究等领域。
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• •2．从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡几下，使 酵母菌分布均匀。
• •5．对于压在方格界线上的酵母菌应当计数同侧相邻两边上的菌体数，一般
可采取“数上线不数下线，数左线不数右线”的原则处理，另两边不计数。
• •6．计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值来计算，对每个样品可 计数三次，再取其平均值。计数时应不时调节焦距，才能观察到不同深度的
菌体。按公式计算每1ml（或10mL）菌液中所含的酵母菌个数。
• •3．如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当对培养液进行稀 释以便于酵母菌的计数。具体方法是：摇匀试管，取1mL酵母菌培养 液，加入成倍的无菌水稀释，稀释n倍后，再用血球计数板计数，所 得数值乘以稀释倍数。以每小方格内含有4—5个酵母细胞为宜。特别 是在培养后期的样液需要稀释后计数。 。
• 4．活酵母有芽殖现象，若芽体达到母细胞大小的一半时， 即可作为两个菌体计数，若芽体小于母细胞一半时为1个 酵母细胞。
血球计数板的清洁
• •7．血球计数板的清洁 • 血球计数板使用后，用自来水冲洗，切勿用硬物洗刷，洗
后自行晾干或用吹风机吹干，或用95%的乙醇、无水乙醇、 丙酮等有机溶剂脱水使其干燥。通过镜检观察每小格内是 否残留菌体或其他沉淀物。若不干净，则必须重复清洗直 到干净为止
血细胞计数板
血细胞计数板的使用
•1 • 血细胞计数板的规格 • •人教版建议使用2mm×2mm×0.1mm方格 • •苏教版推荐使用1mm×1mm×0.1mm方格
2 计数室的两种规格
• •1．16×25型的计数板 将计数室放大，可见它含16中格，一般取四 角：1、4、13、16四个中方格（100个小方格）计数 。
• zxxk细胞个数／1mL＝100个小方格细胞总数/ 100
•
×400×10000×稀释倍数
• 2．25×16型的计数板 中央大方格以双线等分成 25个中方格，每个中方格又分成16个小方格，供
细胞计数用（见图三）。一般计数四个角和中央
的五个中方格（80个小方格）的细胞数。
• 细胞个数／1mL＝80个小方格细胞总数/ 80
•
×400×10000×稀释倍数
3 使用步骤
• 1．镜检计数室。在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。若有污 物，则需清洗，吹干后才能进行计数；
• •2．加样品。将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用的盖玻片， 用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行缓 缓渗入，一次性充满计数室，防止产生气泡，充入细胞悬液的量以不 超过计数室台面与盖玻片之间的矩形边缘为宜。多余培养液可用滤纸 吸去；