COM.TEC型血细胞分离机采集外周血单个核细胞效果分析
血细胞分离单采术在血液系统疾病中的应用及疗效
血细胞分离单采术在血液系统疾病中的应用及疗效目的：观察分析血细胞分离单采术在血液系统疾病中的应用及治疗效果。
方法：选取2014年12月-2015年11月在笔者所在医院进行治疗的33例血液系统疾病患者作为本次研究对象，对33例患者采用血细胞分离单采术进行治疗，并对治疗后的评价指标进行统计分析。
结果：红细胞单采术治疗后患者的WBC、RBC、Hb、HCT水平均低于治疗前，PLT水平较治疗前明显升高，前后差异有统计学意义（P＜0.05）；白细胞单采术治疗后患者的WBC、RBC、PLT较治疗前明显下降，比较差异均有统计学意义（P＜0.05），Hb、HCT治疗前后差异无统计学意义（P>0.05）；血小板单采术后患者的WBC、Hb、PLT水平较治疗前明显下降，比较差异均有统计学意义（P＜0.05），RBC、HCT治疗前后差异无统计学意义（P>0.05）。
血浆置换治疗后患者的TP、GLB、IgG水平较治疗前显著降低（P＜0.05），而ALB、IgA、IgM治疗前后无显著变化（P>0.05）。
结论：对血液系统疾病患者采用血细胞分离单采术可显著改善患者的主要血液指标值，提高患者的治疗效果，促进患者康复进程，值得临床治疗借鉴。
标签：血细胞分离单采术；血液系统疾病；应用；疗效血液系统疾病是指血液和造血组织及器官等疾病的总称[1]，在临床上血液系统疾病主要包括各类贫血、红细胞及血红蛋白的异常、各种良、恶性白细胞疾病及各类出、凝血性疾病，以及血浆中各种成分发生异常所致疾病。
根据已有研究引起血液系统疾病的因素很多如化学因素、物理因素、生物因素、遗传、免疫、污染等，都是引发血液系统疾病的诱因或直接原因[2-3]。
血细胞分离单采术是利用血细胞分离机将血液系统疾病患者血液中异常或危害患者的成分分离删除的一种较为先进的治疗方法[4-5]，已得到广泛应用。
为此笔者进行血细胞分离单采术在血液系统疾病中的应用及疗效的研究，现报道如下。
外周血核酸提取实验报告
一、实验目的1. 掌握外周血中核酸的提取方法。
2. 了解核酸提取的原理及实验操作步骤。
3. 学会检测提取的核酸浓度和纯度。
二、实验原理外周血中包含有核细胞和无核细胞，核酸提取实验主要是从有核细胞中提取DNA和RNA。
DNA和RNA都是生物大分子，具有独特的结构。
在提取过程中，通过破碎细胞、去除杂质、纯化核酸等步骤，最终得到纯净的核酸。
三、实验材料1. 实验仪器：高速离心机、恒温水浴锅、移液器、吸管、离心管、烧杯等。
2. 实验试剂：外周血、细胞裂解液、蛋白酶K、RNA酶抑制剂、Tris-HCl缓冲液、氯化钠、异丙醇、无水乙醇、70%乙醇、TE缓冲液、核酸蛋白分离液、核酸纯化柱等。
四、实验步骤1. 样本采集：取外周血2-3ml，加入等体积的细胞裂解液，充分混匀，室温放置5分钟。
2. 细胞裂解：将混匀后的样本放入离心管中，室温下高速离心10分钟，取上清液。
3. 蛋白质消化：向上清液中加入蛋白酶K，混匀，55℃水浴消化30分钟。
4. 核酸蛋白分离：向消化后的样本中加入RNA酶抑制剂，混匀，室温放置5分钟。
加入等体积的核酸蛋白分离液，混匀，室温放置10分钟。
5. 离心纯化：将混合液转移至离心管中，室温下高速离心10分钟，取上清液。
6. 核酸沉淀：向上清液中加入等体积的无水乙醇，混匀，室温放置2小时或-20℃放置10分钟。
7. 离心洗涤：将混合液转移至离心管中，室温下高速离心5分钟，弃去上清液。
8. 核酸溶解：向沉淀中加入适量的TE缓冲液，混匀，室温下溶解核酸。
9. 浓度检测：采用紫外分光光度法检测核酸浓度。
10. 纯度检测：采用琼脂糖凝胶电泳法检测核酸纯度。
五、实验结果与分析1. 核酸浓度：通过紫外分光光度法检测，提取的核酸浓度为100ng/μl。
2. 核酸纯度：通过琼脂糖凝胶电泳法检测，提取的核酸呈现单一峰，说明纯度较高。
六、实验结论本实验成功从外周血中提取了DNA和RNA，并验证了提取的核酸浓度和纯度。
COBE Spectra血细胞分离机MNC程序和Auto PBSC程序外周血造血干细胞采集效果评价
甘肃医药2020年39卷第12期Gansu Medical Journal ，2020，Vol.39，No.12外周血造血干细胞移植（peripheral blood hemato-poietic stem cell trans plantation ，PBSCT ）因其外周血干细胞采集、冻存方便，安全性高［1-2］，移植后患者免疫和造血系统功能重建较快，移植相关的死亡率低，已成为治疗恶性血液病及免疫性疾病的重要手段［3-4］。
外周血造血干细胞（peripheral blood hematopoietic stem cell ，PBSC ）的质量和数量是影响PBSCT 成功的关键因素之一。
目前，国内外对不同血细胞分离机PBSC 采集效果的报道较多，但对COBE Spectra 血细胞分离机MNC 和Auto PBSC 程序采集效果的报道并不多见。
本研究回顾了我院2017年1月~2019年12月应用COBE Spectra 血细胞分离机两种采集程序对66例患者进行149次PBHSC 采集，对采集效果、采集前后部分血常规指标的变化和采集过程中发生的不良反应进行了回顾性分析评估，现报道如下。
1材料和方法1.1一般资料选择2017年1月至2019年12月，利用COBE Spectra 血细胞分离机的MNC 和Auto PB －SC 程序采集我院血液科患者外周血自体干细胞66例（共149人次），年龄17~66岁，平均（43.5±9.19）岁，其中男性38例，女性28例，多发性骨髓瘤（Multiplemyeloma ，MM ）19例，非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin lym-phoma ，NHL ）15例，霍奇金淋巴瘤（Hodgkin lymphoma ，HL ）4例，急性髓系白血病（acute myelocytic leukemia ，AML ）23例，急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia ，ALL ）5例。
血细胞分离单采术在血液病护理中的应用分析
血细胞分离单采术在血液病护理中的应用分析摘要：目的：研究血细胞分离单采术在血液病护理中的应用效果。
方法：选择2022年4月—2023年5月在本院进行治疗的60例血液系统疾病患者作为本次研究对象，对60例患者采用血细胞分离单采术进行治疗，并对治疗后的评价指标进行统计学分析。
结果：在 RBC、WBC、PLT 等血常规指标上，各指标在治疗后的变化程度明显，对比有统计学意义（P<0.05）；患者满意度方面，治疗后患者满意度较高，总体满意度为98.33%。
结论：血液病护理中运用血细胞分离单采术可以有效的保证治疗疗效，提高患者满意度。
关键词:血细胞分离单采术；血液病；护理随着医学技术的不断发展与进步，血细胞成分分离单采术已广泛地应用于恶性肿瘤、血液病、免疫性疾病等[1]。
如今，随着血液疾病患者的不断增多，治疗方式也变得更加多样化，过去对血液恶性疾病的治疗常常依赖化学药物，对人体伤害大，化疗反应严重，副作用也大，治疗过程往往影响病人生活质量[2]。
血细胞分离单采术，是利用血细胞分离机将患者血液通过离心使全血分离成不同成分的层面，根据需要对某一层面的血液成分进行采集或置换，然后将剩余部分的血液回输给患者的一种技术，以达到迅速改善临床症状或减少发生相关并发症风险的目的[3]。
血细胞分离单采可以去除患者血液中的某些病理性成分，然后回输正常血液成分，是一种较为简便、安全、高效的治疗方法[4]。
特别是在某些重症疾病，如急性白血病、骨髓增殖性肿瘤、某些免疫性疾病、中毒、急性肝功能衰竭等，早期应用血细胞分离单采治疗技术可以为抢救患者生命赢得时间。
1资料与方法1.1一般资料选择2022年4月—2023年5月在本院进行治疗的60例血液系统疾病患者作为本次研究对象，60例患者中，其中男性34例，女性26例，年龄处于22岁~73岁之间，平均年龄（53.93±5.93）岁，其中真性红细胞增多症16例、继发性红细胞增多症4例、急性淋巴细胞白血病10侧、急性粒细胞白血病17例、慢性粒细胞白血病13例、原发性血小板增多症 8例、继发性血小板增多症2例。
应用血细胞分离机大容量白细胞单采术采集小儿外周血干细胞
变化 比较 ， 异无 显 著 意 义 （ ＞ Ｏ ０ ） ６例 次 大 容量 外 周 血 干 细胞 采 集 过 程 中 ， 生 相关 不 良反 应 １ 差 Ｐ ． ５ 。７ 发 ４例 次 （８４ ，４ ７ ） 机器 出现 报警 或 故 障 ６ １． １ ／６ ， ７例 次 （８ ２ ，７ ７ ）处 理 后 均 顺 利 完成 采 集 。结论 ８ ． ６ ／６ ，
Ｐ＜０ ０ ） 与 采 集 前外 周 血 白细 胞 、 周 血单 个核 细 胞 和外 周 血 Ｃ 。 细胞 数 呈 显 著 正 相 关 （ 一０ ６ ， ＜ ．５ ， 外 Ｄ ．０ ， Ｊ
０ ０ ） （一０ ６ ， ．５ ；ｒ ． ８ Ｐ＜０ ０ ） （一０ ７ ， ． ５ ；ｒ ． ５Ｐ（０ ０ ） 采 集 后 ， 周 血 血红 蛋 白 （ ） 血 小板 （ Ｉ 下 降 ， ２ ．５。 外 Ｈｂ 和 Ｐ Ｔ） 第
・３ ５・
・
论 著
・
应用 ． 周血干细胞
徐 宏 贵 黎 阳 夏 焱 梁 洁 云 黄 绍 良 方 建 培
【 要 】 目的 总结 血 细 胞 分 离 机 大 容 量 白 细胞 单 采 术 （ ｒｅ ｖ ｌｍｅｌ ｋ ｐ ｅｅ ｉ，Ｉ ｓ 采 集 小 摘 １ ｇ —ｏｕ ｕ ａ ｈ ｒｓ ａ ｅ ｓ ＶＬ ） 儿 外 周 血干 细 胞 （ ｅ ｉｈ ｒ ｌ ｌ ｄｓｅ ｅ ， Ｂ Ｃ 的经 验 ， 讨 采 集效 果 及 其 影 响 因 素 。 ｐ ｒ ｅ ａ ｂｏ ｔｍ ｃ ｌ Ｐ Ｓ ） ｐ ｏ ｌ 探 方法 中山 大学 附 属第 二 医 院 儿 科造 血 干 细 胞 移植 中心 自 １ ９ ９年 １月 至 ２ ０ 年 ｌ ９ ０７ ２月 采 用 Ｃ ０ ０Ｐ ｕ 血 细 胞 分 离 机 ， Ｓ ３ ０ ｌｓ 选 择 儿 童单 个 核 细胞 （ ＭＮＣ） 收集 程 序 ， 行 ４ 进 Ｏ例 患 儿 大容 量 外 周 血 干 细胞 采 集 。采 取 回顾 性 分 析 法分 析
肿瘤患者单个核细胞机采细胞量相关因素临床观察
肿瘤患者单个核细胞机采细胞量相关因素临床观察目的探讨影响单个核细胞的采集数量的因素，以便在采血护理过程中采取合适的措施，提高机采效果。
方法按照患者血常规结果（WBC总数、淋巴细胞和单核细胞总数）调整采血机内循环血量，计数获得的单个核细胞数，采用多重线性回归进行分析。
结果共收集79例进行机采的患者，体外平均循环血量（3358±959）ml，获得的单个核细胞总数平均（1.3±0.53）×109个。
多重线性回归分析后，由标准回归系数发现，采血机的循环血量对采集的细胞数影响最大。
结论体外循环血量是影响采集细胞数的主要因素，淋巴细胞计数和WBC总数是影响采集效果的次要因素，因此为了采集足量的外周血单个核细胞，应以增加体外循环血量为主。
标签：机采；单个核细胞；体外循环血量肿瘤已经成为了一种常见疾病，目前还没有十分有效的防治手段。
细胞免疫治疗是近年发展起来的一种极具发展前景的治疗模式，其中细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）及树突状细胞（DC）瘤苗治疗应用最为广泛。
为了获得足够的DC 和CIK细胞，需要足够量的细胞“种子”，一般通过血液采集仪可以从外周血获得高纯度的单个核细胞[1]。
本研究对79例接受DC-CIK生物治疗的肿瘤患者的采血效果进行分析，总结操作过程中的护理经验，尤其是采血效果的经验。
1 对象和方法1.1 临床资料2014年6月至2014年12月本院生物治疗科79例接受机采外周血单个核细胞的化疗后肿瘤患者，治疗前均取得患者及家属的同意并签署知情同意书。
患者生活质量采用Karnofsky评分标准进行评分，卡氏行为状态评分均（KPS）≥50分；外周血WBC接近或达到正常值，无重度肝、肾功能异常。
1.2外周血单个核细胞采集使用Fresenius血细胞分离机采集患者单个核细胞，机采过程中持续心电监护。
1.3 统计学分析采用SPSS19.0软件对数据进行统计学分析，计量资料以均数±标准差表示，进行t检验，计数资料以率表示，进行x2检验，统计方法为多重线性回归法，以P＜0.05为差异有统计学意义。
应用CS—3000Plus血细胞分离机采集健康供者外周血干细胞的护理分析
应用CS—3000Plus血细胞分离机采集健康供者外周血干细胞的护理分析目的分析应用CS—3000Plus血细胞分离机采集血液成分的护理方法与效果。
方法选取2016年3月—2018年3月我科行外周血干细胞采集的健康供者84例，按照护理方法划分为对照组与实验组，各42例，对照组采用常规护理方法，观察组给予全面护理措施，比较两组医嘱依从性与护理服务满意率。
结果观察组医嘱依从性（97.62%）较对照组（73.81%）提升。
差异有统计学意义（x2=19.621，P＜0.05）；观察组护理满意率（95.24%）较对照组（69.05%）提升，差异有统计学意义（P＜0.05）。
结论全面护理措施应用于外周干细胞采集供者中，对提高健康供者医嘱依从性有很大作用，且有助于良好护患关系的构建，进而提高护理满意率，提升护理质量，值得在护理实践中推广应用。
标签：血细胞分离机；供者；外周血干细胞；护理外周血造血干细胞移植（Periphery Blood Stem Cell Trans—planta-tion，PBSCT）因干细胞采集方便、供者不需要麻醉、移植后造血恢复快、而移植物抗宿主病（GVHD）发生率和严重程度并无明显增加的优点，被广泛应用于血液系统疾病的治疗。
随着中华骨髓库骨髓捐献者的增多、造血干细胞技术的成熟以及血细胞分离机的不断完善，采集外周造血干细胞的健康供者不断增加。
本文选取应用CS一3000Plus血细胞分离机采集外周血干细胞的健康供者84例，进行护理研究，总结相关护理经验。
现报告如下。
资料和方法一、一般资料2016年3月一2018年3月至我科行外周血干细胞采集的健康供者84例，根据干细胞采集先后时间分为对照组和实验组，每组各42例。
对照组男36例、女6例；年龄19～45岁，平均年龄（38.27±4.13）岁。
实验组男34例、女8例；年龄20—45岁，平均年龄（39.04±4.06）。
两组研究对象基本资料统计学分析无明显差异，P>0.05。
肿瘤患者外周血单个核细胞采集中常见护理问题及处理方法
３ ． ３ 健 康教 育路 径 化 管 理 有 助 于 提 高患 者 护 理 满 意 度 传统 的健 康 教 育 ， 多 采 用 随 机 口头 灌 输 或 书 面 条文 式发 放 ， 患 者 接受 性 欠 佳 ， 健康教育路径化，
和Ｃ Ｔ 显示椎 管 宽度 良好 ， 椎 板与侧 块 骨性 愈合 。 ３ ． ４ 健康 教育 路径 化管 理 有 助 于 提 高 患 者依 从 性
脊柱 畸 形和稳 定 性是 术后 护理 及 出院 随访 的重点
ｃ ａ ｎ ｃ ｅ ｒ ｃ ｅ ｎ ｔ ｒ ｅ Ｅ Ｊ ］ ． Ｉ ｎ ｔ Ｊ Ｐ ａ ｌ ｌ ｉ ａ ｔ Ｎｕ ｒ ｓ ， ２ ０ ０ ８ ， １ ４ （ １ ０ ） ： ５ １ ０ — ５ １ ５ ．
充 分考 虑 了患者 的心 理 、 生理 、 社会需求 ， 实 施 时 有 严 格 的时 间框架 ， 医 护共 同协 作 ， 结合手术进程 ， 使 健 康教 育标 准化 、 程 序化 、 具体 化 ， 项 目不易 遗漏 ， 易
话 回访 ， 出院 １ 个月 ， 观察 组 患者轴 式 翻身 习惯 和佩
护 理 问题 与 正 确 的 处 理 方 法 ， 可 有 效 解 决 采 血 过 程 中遇 到 的常 见 问题 。 关键 词 肿瘤 ； 自体 免疫 细 胞 ； 血 细 胞 采 集 ； 护 理 问题 ； 处 理 方 法
力恢复、 锻 炼手 捏握 功 能 。同时需 坚持 使 用颈 围 、 腰
［ ４ ３ 邹 慧， 李艳凤 ， 刘慧敏 ， 等．健康教育路径在 经皮间盘切吸联合 臭氧 消融术治疗腰椎问盘突出症 中的实施及效 果评价Ｅ Ｊ ３ ．护
士进 修 杂 志 ， ２ ０ １ ３ ， ２ ８ （ ３ ） ： ２ １ ７ — ２ １ ８ ．
论文-Cobe Spectra血细胞分离机采集外周血干细胞的效果观察
毕业设计报告（论文）课题名称Cobe Spectra血细胞分离机采集外周血干细胞的效果观察专业学号学生姓名指导教师起讫日期工作地点Cobe Spectra血细胞分离机采集外周血干细胞的效果观察[摘要]目的观察Cobe Spectra血细胞分离机MNC程序采集外周血造血干细胞效果。
方法用Cobe Spectra血细胞分离机MNC 程序采集16 例血液系统肿瘤患者外周血干细胞，患者采用化疗加G—CSF动员，采集的干细胞用流式细胞仪检测CD34+抗原表达细胞数。
16例患者共采集32 次，每例采集2 次，每次处理时间( 185±40) min，抗凝全血(9350 ±2554) mL，抗凝剂( 923±228) mL。
结果采集CD34+细胞数为( 2.35± 0.33)×106/ kg, MNC 采集效率为( 78.53±15.48)%，单采后患者血小板( plt) 、血红蛋白( Hb) 、红细胞比容( Hct) 分别下降15.38%、7.2%、11.37%, 在整个采集过程中未观察到严重的不良反应。
结论Cobe Spectra血细胞分离机MNC程序能采集到血小板含量低、产量高而有效的自体CD34+ 细胞，采集方法可靠，可以满足临床治疗要求。
[关键词]: 血细胞分离机；外周血干细胞；采集；CD34+自体外周血干细胞移植已成为治疗多种白血病和实体瘤以及组织修复治疗的有效方法，外周血干细胞能恢复衰竭骨髓的造血功能，且采集具有无需麻醉、痛苦小、安全性高及受者粒细胞和血小板恢复更迅速等优点，已逐渐被患者接受。
本文对用Cobe Spectra 血细胞分离机MNC 程序采集干细胞效果进行了分析, 主要内容如下。
1 材料与方法1.1 采集对象血液系统肿瘤患者16例，男10例，女6例，年龄14—62岁，平均41岁，平均身高160cm，平均体重57kg；患者中9例慢性粒细胞白血病，5例为急性淋巴细胞白血病，非霍奇金淋巴瘤1例，粒细胞肉瘤1例，采前常规检测HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、TP等。
血细胞分离机在肿瘤患者生物治疗过程中的应用效果
血细胞分离机在肿瘤患者生物治疗过程中的应用效果
杨丹;李蕊;方艳秋
【期刊名称】《求医问药（学术版）》
【年(卷),期】2013(011)007
【摘要】目的:探讨Fresenius kabi血细胞分离机分离和采集肿瘤患者外周血单个核细胞的注意事项.方法:对我科1330例肿瘤患者行外周血单个核细胞采集术过程中遇到的问题及其处理方法进行回顾性分析.结论:正确使用血细胞分离机有利于提高单个核细胞的采集质量和采集数量,从而为细胞培养提供最基本的保障.
【总页数】2页(P89-90)
【作者】杨丹;李蕊;方艳秋
【作者单位】吉林省人民医院医学实验诊治中心吉林长春130000;吉林省人民医院医学实验诊治中心吉林长春130000;吉林省人民医院医学实验诊治中心吉林长春130000
【正文语种】中文
【中图分类】R730.5
【相关文献】
1.血细胞分离机行外周血单个核细胞采集前后肿瘤患者血电解质变化的比较 [J], 曹宇华;冯国生;邱想英;陈可和
2.血细胞分离机用于肿瘤患者生物治疗的研究 [J], 刘海荣;孙殿水;李岩
3.人文关怀在晚期恶性肿瘤患者护理过程中的应用效果观察 [J], 郭玉娟
4.MCS+与COM.TEC血细胞分离机行白细胞去除术在慢性粒细胞白血病治疗中的
应用效果比较 [J], 杨颉; 郭辉; 陈志华; 侯方; 邵长峰
5.血细胞分离机在恶性肿瘤患者自体LAK细胞制备中的应用 [J], 叶韵斌;陈强;陈秀英;刘艳珍;陈明水
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COM.TEC型血细胞分离机采集外周血单个核细胞效果分析范振海;章涛;余丽梅;魏在荣;彭笳宸;任明强;方宁【摘要】目的观察费森尤斯COM.TEC型血细胞分离机autoMNC程序采集患者外周血单个核细胞的效果.方法粒细胞集落刺激因子动员后,采用COM.TEC型血细胞分离机autoMNC程序采集患者外周血单个核细胞,流式细胞仪检测CD34+细胞和单个核细胞百分比,血常规检测白细胞计数.对外周血单个核细胞采集效率与单个核细胞采集参数及采集物质量指标进行相关性分析.结果 28例患者平均处理血量2.34±1.75 L,采集物体积46.63±28.17 mL,白细胞计数(11.40±10.40)×1010个细胞/L,单个核细胞百分比(83.79％±21.77)％,CD34+细胞百分比(0.81±1.54)％.MNCs采集效率与外周血处理血量呈正相关(rs=0.538,P＜0.05),和采集前外周血MNCs计数呈负相关(rs=-0.379.P ＜0.05);MNCs采集效率与采集物白细胞和单个核细胞总数呈正相关(rs =0.866,rs=0.924,P＜0.05),与采集前外周血白细胞计数、采集物CD34+细胞和单个核细胞百分比之间无相关性(P＞0.05).结论外周血单个核细胞采集效率作为评价COM.TEC型血细胞分离机autoMNC 程序采集效果的指标,可综合反应重要的采集参数与采集物质量.【期刊名称】《遵义医学院学报》【年(卷),期】2016(039)006【总页数】5页(P627-630,634)【关键词】血细胞分离机;外周血;单个核细胞;CD34+细胞【作者】范振海;章涛;余丽梅;魏在荣;彭笳宸;任明强;方宁【作者单位】遵义医学院附属医院贵州省细胞工程重点实验室贵州遵义563099;遵义医学院附属医院贵州省细胞工程重点实验室贵州遵义563099;遵义医学院附属医院贵州省细胞工程重点实验室贵州遵义563099;遵义医学院附属医院烧伤整形外科贵州遵义563099;遵义医学院附属医院骨科贵州遵义563099;遵义医学院附属医院血液科贵州遵义563099;遵义医学院附属医院贵州省细胞工程重点实验室贵州遵义563099【正文语种】中文【中图分类】R457.2经粒细胞集落刺激因子动员，可显著提高外周血中造血干细胞(hematopoietic stem cell，HSCs)和间充质干细胞的含量，通过血细胞分离机采集外周血单个核细胞(mononuclear cells，MNCs)可初步富集外周血干细胞，用于恶性血液病大剂量化疗后，促进患者造血免疫功能恢复，或将富集的外周血干细胞用于糖尿病足等疾病治疗[1-2]，促进组织损伤修复，取得了明显疗效。
与骨髓干细胞采集相比，血细胞分离机富集外周血干细胞具有自动化集成度高、无需麻醉、安全、无痛苦及自体粒细胞和血小板恢复快等优势。
外周血MNCs采集过程中，尽管所用厂家与机型不同，细胞自动化采集水平不相上下，但能否合理使用与科学设置采集参数，最终对采集物质量会造成明显影响，一定程度上决定着自体外周血干细胞移植治疗效果[3-5]。
COM.TEC是德国Fresenius Kabi公司推出的血细胞分离机，国内外都是一款外周血MNCs采集、分离和HSCs富集的主流机型。
本文重点分析了COM.TEC型血细胞分离机autoMNC程序的外周血MNCs的采集效率(collection efficiency,CE)与白细胞(white blood cell，WBC)计数、MNCs计数等主要采集参数和采集物质量指标之间的相关性，为采集实施过程中合理设置参数，科学评价外周血MNCs采集物质量提供重要依据。
1.1 临床资料选取2008年12月至2011年04月在我院进行外周血MNCs采集的患者28例，年龄21～72岁，平均41岁，男性19例，女性9例，急性髓系白血病2例，急性淋巴细胞白血病1例，血栓闭塞性脉管炎5例，糖尿病足1例，股骨头坏死5例，骨折不愈合14例。
采集前患者皮下注射粒细胞集落刺激因子5 μg/kg/d，动员期间监测外周血WBC计数，动员3 d WBC计数>20×109 个细胞/L后，行外周血MNCs采集。
1.2 仪器德国Fresenius Kabi公司生产的COM.TEC型血细胞分离机，FACS Calibur流式细胞仪和ProCOUNTCD34+细胞计数试剂盒均为美国BD公司产品。
1.3 方法采集前行血常规检测，采用autoMNC程序，依据患者身高、体重、红细胞压积、WBC、血小板计数、外周血MNCs计数等设置参数，程序将根据输入资料自动预测CD34+细胞采集数，也可根据患者自身情况稍作调整，处理血量1.24～8.96 L，平均2.34 L，抗凝剂枸橼酸葡萄糖与全血的比例设置1∶9～1∶11。
1.4 采集物处理采集物终体积因不同疾病治疗需要设置在26～123 mL，平均体积为46 mL，并将采集物行血常规检查，CD34+细胞百分比及MNCs百分比分别采用绝对计数微球与CD45+CD34+细胞计数、CD45+细胞标记，经FACS Calibur 流式细胞仪检测、分析获得。
1.5 MNCs采集效率计算[6-7] MNCs-CE的计算公式：MNCs的CE=(采集物MNCs总数×100)÷(采集前外周血MNCs计数×总循环血量)，采集前外周血MNCs计数=采前外周血WBC计数×采前外周血MNCs百分比；采集前外周血MNCs百分比=外周血淋巴细胞百分比+外周血单核细胞百分比，采集物MNCs总数=采集物WBC计数×采集物MNCs百分比×采集物体积，采集物中CD34+细胞总数=采集物WBC计数×采集物CD34+细胞百分率×采集物体积。
1.6 统计学处理采用SPSS 13.0软件分析，计量资料以均数±标准差表示，MNCs的CE与采集前外周血MNCs计数、处理血量和采集物WBC计数、CD34+细胞和MNCs百分比之间的关系采用Spearmen’s相关性分析。
2.1 采集参数和外周血MNCs的CE MNCs的CE是评价外周血HSCs采集质量的重要指标，由MNCs的CE计算公式可知，采集物中MNCs总数越高，MNCs的CE越高，而采集前外周血MNCs计数和总循环血量越高，则MNCs的CE越低。
根据COM.TEC血细胞分离机采集参数(见表1)与采集物中重要细胞数量和比例检测(见表2)，按照上述公式计算，采集物MNCs总数为(4.62±7.78)×109个细胞，MNCs的CE为(44.13±80.61)%。
2.2 采集物MNCs和CD34+细胞总数采集物中CD45+细胞为MNCs的标志，CD45+细胞中CD34+细胞则是公认的HSCs表面标志，CD34+细胞含量的高低与CD34+细胞总数决定着采集物质量的好坏和自体外周血干细胞移植的疗效。
根据公式计算，采集物CD34+细胞总数(5.26±11.8)×107个细胞。
其中恶性血液病患者采集物中MNCs总数为(2.08±1.77)×1010个细胞，CD34+细胞总数(3.73±1.00)×108个细胞，每例患者所采CD34+细胞总数均大于2×106个细胞/kg，显著高于HSCs移植的基本质量要求。
2.3 外周血MNCs的CE与采集参数的相关性分析 MNCs的CE和采集前外周血MNCs计数呈非线性负相关，Spearmen’s相关系数(rs)=-0.379(P<0.05)，而与外周血处理血量呈正相关，相关系数rs=0.538(P<0.05，见图1)。
但与采集前外周血WBC计数和MNCs百分比无明显相关性(P>0.05)。
2.4 外周血MNCs的CE与采集物质量指标的相关性分析外周血MNCs的CE与采集物WBC和MNCs总数呈正相关，rs分别为0.866和0.924(P<0.05)，而与采集物中CD34+细胞总数、CD34+细胞百分比和MNCs百分比无明显相关性(P>0.05，见图2)。
2.5 外周血MNCs采集中的不良反应 28例患者采集过程中有9人出现轻度口唇或手足麻木的低血钙症状，该不良反应发生率为32.14%，给予口服或缓慢静脉推注10%葡萄糖酸钙对症处理后症状消失，未见其它明显不良反应。
自体外周血干细胞移植已逐渐成为常用的临床治疗技术[8]，但外周血干细胞含量很少，约占MNCs的0.01%～0.1%，相当于骨髓干细胞含量的1%～10%，因此能否采集、富集到足够的外周血干细胞是移植治疗成功的前提和关键[9]。
除安全、有效的干细胞动员剂使用外，血细胞分离机的合理使用对干细胞的采集能力是保障短时间高效率获取HSCs的重要因素之一。
尽管目前临床上常以计算CD34+ HSCs采集量占流经血细胞分离机的CD34+细胞总数的比例来进行HSCs 采集效果的评价，CD34+细胞总数则由采集前CD34+细胞的比例与总循环血量的乘积表示[6,10-11]。
采集的外周血MNCs中，富集了CD34+的HSCs，因此采集物中MNCs总数很大程度上影响了CD34+细胞总数，而采集物中的WBC计数则是决定采集物中MNCs总数的关键因素。
尽管因所用血细胞分离机厂家、型号存在差异，外周血MNCs或HSCs采集性能也不尽相同[12-15]，但CE仍是常用的外周血细胞采集效果的重要评价指标。
与文献报道的其他型号血细胞分离机相比[16-17]，本研究所选COM.TEC血细胞分离机autoMNC程序采集外周血MNCs的采集参数及采集物质量指标的结果来看，在采集前外周血的一定WBC计数和MNCs计数范围内，采集所需处理血量较少，采集物体积也较小，而采集物中WBC计数、MNCs百分比、CD34+细胞百分比及CD34+细胞总数均较高，不但可以满足研究所涉及病种对自体干细胞移植所需的要求，且外周血MNCs的CE也较高。
进一步分析外周血MNCs的CE与采集参数及采集物质量指标的相关性，结果显示，外周血MNCs的CE与采集前外周血MNCs计数呈负相关，与文献报道一致[4,18]，即血细胞分离机梯度离心过程中，外周血MNCs所形成的白膜层是主要采集目标，当外周血MNCs过高时，白膜层过厚，可导致采集不完全，而降低CE，这可能是在影响外周血MNCs的CE因素中，COM.TEC血细胞分离机与Cobe Spectra、Fenwal CS 3000 Plus血细胞分离机明显的不同[2]。