高二生物微生物的实验室培养知识点整理

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微生物的实验室培养知识清单

一、基础知识填空1、培养基（1）概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质。

（2）营养构成：一般都含有水、、和无机盐。

此外，还要满足微生物生长对、以及氧气的需求。

例如，培养乳酸菌时需要在培养基中添加，培养霉菌时p H调至，培养细菌时pH调至。

培养厌氧微生物提供环境。

（3）种类：按物理性质可分为培养基和培养基。

固体培养基中需添加。

（注：加入培养基中的琼脂只能起到凝固作用，一般不能被微生物利用。

）2、无菌技术（1）获得纯净培养物的关键是。

（2）对实验操作空间，操作者的衣着和手，进行；对培养器皿、接种工具、培养基进行；实验操作应在进行，3、制备培养基（1）配制步骤：计算、、、、倒平板。

调pH应在灭菌前进行。

（2）牛肉膏蛋白胨固体培养基所需的原料：、、、、。

（3）在烧杯中加入琼脂后，要不断用玻棒搅拌，防止。

待培养基冷却至左右时，在附近倒平板，严格遵循课本上的操作步骤。

4、纯化大肠杆菌5、菌种的保存对于频繁使用的菌种，采用的方法；需要长期保存的菌种，采用的方法。

二、简答题注：自养微生物所需碳源、氮源来自含碳、含氮无机物，异养微生物所需碳源来自含碳有机物；含氮无机物既可作为氮源，也可提供能源，如NH3。

2、牛肉膏蛋白胨培养基中的碳源、氮源分别是什么？提供能源的物质是什么？3、无菌技术的目的？使用后的培养基能否直接丢弃，为什么？4、倒平板时，为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？如果将培养基溅在皿盖和皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？5、平板划线操作中第一次、每次划线之前及划线结束后灼烧接种环的目的？在第二次以及其后的划线中，为什么总是从上一次划线的末端开始？6、为什么将接种后的培养基和未接种的培养基或接种无菌水的培养基都放入恒温箱中培养？7、培养大肠杆菌结束后，若无菌操作基本符合要求，观察到的现象是怎样的？如果培养基上的菌落连成一片，可能的原因是什么？。

人教版高中生物选修一课件：2.1微生物的实验室培养 (共60张PPT)

专题2 微生物的培养与应用
课题1 微生物的实验室培养
1
（一）培养基
1、定义：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 2、培养基成分:碳源、氮源、水和无机盐等4类 ★另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。如:培养乳酸菌时需添加维生素、霉菌PH调成酸性、细菌PH调成中性或微碱性、厌氧微生物提供无菌条件。 ★ 4类成分齐全的培养基叫基本培养基，例如牛肉膏蛋白胨培养基
根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指
示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同种类的
微生物。
3
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
沉淀生长
4
固体培养基：菌落
单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。
菌落特征是鉴定菌种的重要依据。
5
于计算平均值，因为它不接近真实值，应重新实验
并注意：将菌液摇匀后再接种 P22
35
㈤.微生物的培养与观察
培养不同微生物往往需要不同培养温度。细菌：30～37℃培养1～2d 放线菌：25～28℃培养5～7d 霉菌：25～28℃的温度下培养3～4d。
在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。
半固体培养基：
无动力
有动力(弥散)
(是否运动) 6
选择培养基:从微生物群中选择具有特定表型的细胞. 使之进行繁殖所用的培养基,称为选择培养基.
加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌
加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌

高二生物选修一知识点总结（2）

高二生物选修一知识点总结(2)高二生物选修一知识点总结二：专题二微生物的培养与应用课题一微生物的实验室培养·培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。

·培养基按照物理性质可分为液体培养基半固体培养基和固体培养基。

在液体培养基中加入凝固剂琼脂(是从红藻中提取的一种多糖，在配制培养基中用作凝固剂)后，制成琼脂固体培养基。

微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。

根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。

液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。

·按照成分培养基可分为人工合成培养基和天然培养基。

合成培养基是用成分已知的化学物质配制而成，其中成分的种类比例明确，常用于微生物的分离鉴定。

天然培养基是用化学成分不明的天然物质配制而成，常用于实际工业生产。

·按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。

选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。

鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。

·培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源 (生长因子)等。

·碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。

如CO2、NaHCO3等无机碳源;糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。

异养微生物只能利用有机碳源。

单质碳不能作为碳源。

·氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。

如N2、NH3、NO3-、NH4+(无机氮源)蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨(有机氮源)等。

只有固氮微生物才能利用N2。

·培养基还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求。

例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性，培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性，培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件·无菌技术·获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方面：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。

微生物的实验室培养高二年级生物培训讲解

细菌培养流程
细菌培养流程包括前期处理、培养基制备、接种、培养和观察。深入了解每个步骤的重要性和操作要点可以获得准确的实验结果。
观察方法和仪器介绍
学习如何观察和分析培养的细菌，介绍常见的观察方法和相关仪器，例如显微镜和染色技术。
常见细菌与真菌种类
了解常见的细菌与真菌种类可以帮助我们更好地理解它们的特性、文化方法以及在实验室环境中的处理方式。
实验室安全操作规范
实验室安全是极为重要的，详细了解实验室操作规范和安全措施可以保护我们自己和他人的安全。
设备介绍
了解实验室中使用到的常见设备，包括显微镜、培养箱等。学习如何正确操作这些设备可以提高实验效果。
微生物的实验室培养高二年级生物培训讲解
培养，包括培养基介绍、细菌与真菌种类、实验室操作规范、设备介绍等内容。
什么是微生物实验室培养？
微生物实验室培养是指在控制的环境下，在培养基中培养和繁殖微生物。这是研究微生物和进行相关实验的基础。
培养基介绍
培养基是用于培养和繁殖微生物的营养物质和添加剂的混合物。了解不同类型的培养基对于选择适合的培养方法和细菌菌株非常重要。

微生物的实验室培养(课件)

详细描述
分批培养是将微生物接种到一定量的培养基中，在一定时间内完成生长繁殖的过程。该方法可以控制微生物的生长环境，便于观察和控制。连续培养则是让微生物在恒定条件下持续生长繁殖的方法，通过不断地补充新鲜的培养基和排除老的培养基，使微生物在恒定的条件下快速生长繁殖。该方法适用于大规模工业生产，可以提高生产效率和产品质量。
微生物培养
在适宜的温度、湿度、 pH等条件下，将纯化的微生物菌株接种到培养基中，让其生长繁殖。根据需要，可以选择不同的培养方式和培养
基类型。
微生物观察与检测
在培养过程中，定期观察微生物的生长情况，记录生长曲线、菌落形态等数据，并进行相关的检测和鉴定，如生化反应、抗原抗体反应等
。
微生物保藏与利用
微生物的生长需求。
培养基的pH值
培养基的pH值对微生物的生长具有重要影响，不同微生物对pH值的要求不同，因此需根据实际情况调整。
培养基的灭菌
灭菌是培养基制备的重要环节，通过高温或高压灭菌，消除培养基中的杂菌，保证微生物纯种培养。
实验室设备与器材
显微镜
观察微生物形态和生长情况，是微生物实验室的基本设备。
实验室安全防护措施
实验室应配备必要的安全设施，如灭火器、急救箱、洗眼器等，
并定期进行检查和维护。
实验室应保持通风良好，确保空气流通，以降低感染和污染的风
险。
实验室应定期进行消毒和清洁，确保实验环境的卫生和安全。
实验废弃物的处理与环保要求
实验废弃物应按照规定进行分类和处理，避免对环境和人类健康造成危害。
培养获得的微生物可以用于后续的研究和应用，如生产生物制品、进行疾病诊断和治疗等。同时，对于有价值的菌种可以进行长期保藏，

微生物实验知识点

微生物实验知识点微生物实验是指对微生物进行观察、培养、检测及相关实验操作的科学研究方法。

下面是一些关于微生物实验的知识点：1.实验室安全：进行微生物实验时，必须遵守实验室的安全规范，包括佩戴实验手套、口罩和实验服。

同时，实验室的环境要定期消毒，以防止微生物的交叉污染。

2.微生物培养基：微生物实验常用的培养基有固体培养基和液体培养基。

固体培养基可以用于分离纯培养和观察菌落形态，而液体培养基常用于大规模培养微生物。

3.纯培养与混合培养：纯培养是指从一种微生物中分离出单一的菌株进行培养，得到纯净的培养物；混合培养是指将两种或多种微生物一起培养，观察它们之间的相互作用。

纯培养和混合培养的选择取决于实验的目的和研究内容。

4.微生物的分离与鉴定：微生物实验常用的分离方法包括涂布法、稀释法和过筛方法。

通过形态特征观察、生理生化测试、分子生物学技术等方法，可以鉴定微生物的种属和菌株。

5.微生物生长曲线：微生物生长曲线是研究微生物生长动力学的重要实验方法，通过连续测量微生物的生物量、代谢产物或生长速率，可以得到微生物在一定条件下的生长曲线，以了解微生物的生长特性。

6.抗菌药物敏感性试验：抗菌药物敏感性试验是评价微生物对不同抗菌药物的敏感性和抗性的实验方法。

通过测定微生物对抗菌药物的最小抑菌浓度（MIC）或抑菌圈直径，可以判断微生物对抗菌药物的敏感程度。

7.酶活性检测：微生物实验中常用酶活性检测来评估微生物酶的产生与活性。

通过观察酶的底物转化情况、染色反应、电泳分析等方法，可以确定微生物是否具有特定酶的活性。

8.微生物的遗传转化：遗传转化是指微生物通过吸收外源性的遗传物质，如质粒DNA或线性DNA片段，加入到自身的遗传物质中。

通过转化实验可以在微生物中引入外源基因、观察基因的表达和相关功能的变化，进一步研究微生物基因的功能。

这些知识点涵盖了微生物实验的基本概念、常用实验方法和技术应用，希望对你有帮助！。

2.1微生物的实验室培养

有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。特点：对恶劣的环境，如干旱、高温等，有很强的抵抗力。在生物体的一定部位产生一种特殊的生殖细胞叫孢子。孢子的特点是能直接长成新个体。
无菌技术：分类定义方法
灭菌法
物理法：热力、辐射、微波、杀灭一切微生物等离子体化学法：醛类、烷化剂
无机盐功能构成微生物细胞的组成成分调解微生物细胞的渗透压， PH值和氧化还原电位有些无机盐如S、Fe还可做为自养微生物的能源构成酶活性基的组成成分，维持酶活性。Mg、 Ca、K是多种酶的激活剂
（4）特殊营养：
微生物生长不可缺少的微量有机物质，维生素、碱基等（生长因子）。（牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有）
病毒: 微生物
一般指肉眼看不见的生物
无细胞结构原核细胞
原核生物: 细菌、蓝藻原生生物：单细胞的动植物
如草履虫、单细胞藻类等
真菌: 如酵母菌
真核细胞
一、培养基
微生物生存的环境和营养物质在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要 1、培养基的种类的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长。液体培养基根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种例如，在培养基中加入青霉素，以抑制细菌、指示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同种半固体培养基据物理性质分放线菌的生长，从而分离到酵母菌和霉菌。又类的微生物。例如，在培养基中加入伊红和美如，在培养基中加入高浓度的食盐可以抑制多固体培养基常用于工业生产蓝，可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生大肠杆菌等细菌：如果有大肠杆菌，其代谢产长。常用于观察微生物的天然培养基物就与伊红和美蓝结合，使菌落呈深紫色，并运动、鉴定菌种据化学成分分用于微生物的分离、计数带有金属光泽。合成培养基常用于工业生产选择培养基据用途分鉴别培养基常用于分类、鉴定

知识总结：微生物的实验室培养

疑难点拨：微生物的实验室培养
1生物的营养
营养是指生物摄取、利用营养物质的过程。

营养物质是指维持机体生命活动，保证发育、生殖所需的外源物质。

在人及动物，营养物质包括水、无机盐、糖类、脂质、蛋白质、维生素六类；在植物，营养物质包括矿质元素、水、二氧化碳等三类；在微生物，则有水、无机盐、碳源、氮源及其特殊营养物质五类。

2培养基的制作是否合格
如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2天后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。

3无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生
物污染外，还有什么目的
无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。

4平板冷凝后，为什么要将平板倒置
平板冷凝后，培养皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止培养皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。

5为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种
环在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗为什么操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的
微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。

划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。

高二生物1.2.1 微生物的培养技术及应用

具有抗氨苄青霉素能力的菌落
4、培养基的营养构成: 凡是能够为微生物提供C、N等元素的营养物质。
（1）基本成分：碳源、氮源、水、无机盐
无机碳源： CO2、CO32-、HCO3-
1）碳源：
自养微生物
有机碳源：葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等异养微生物
2）氮源：无机氮源： NH4＋、NO3-、NH3等有机氮源：牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等
病毒
SARS病毒禽流感病毒
原核生物 (细菌、蓝细菌等)
原生生物 (如草履虫、衣藻等)
真菌 (如酵母菌、霉菌等)
球菌
蓝细菌
草履虫
衣藻
酵母菌
青霉菌
大型真菌
一、微生物的基本培养技术
微生物结构简单、形体微小，眼睛看不到，若想得到纯净的微生物，就必须对其进行培养和分离。
2、实验室培养微生物条件 1）提供微生物生长繁殖所需营养和环境条件 ——培养基 2）确保其它微生物无法混入 ——无菌技术
芽孢和孢子。
（2）灭菌的方法：
①灼烧灭菌：酒精灯火焰灼烧
效果：最彻底原理：使微生物燃烧对象：接种工具如接种环、接种针，以及接种过程中的试管口或瓶口等易被污染部位
②干热灭菌：干热灭菌箱内160-170 ℃下加热2-3h
原理：使微生物细胞膜破坏、蛋白质变性和原生质干燥等对象：耐高温，需保持干燥的物品，适用于
沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。向滤液中加入20g葡萄糖、
15-20g琼脂，用蒸馏水定容至1000ml.
2）灭菌
将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并
用皮筋勒紧，再放入高压蒸汽灭菌锅中，在压力为100kPa、温度为121℃的条件下，灭菌15-30min.将5-8套培养皿包成一包，用几层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱内，在160-170℃灭菌2h.

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高二生物微生物的实验室培养知识点整理
实验题一直都是高中生物考试的大题，也是难点，下面是店铺给
大家带来的高二生物微生物的实验室培养知识点整理，希望对你有帮
助。
高二生物微生物的实验室培养知识点
一、配制时的质量控制
(1)容器：配制和分装培养基的烧瓶、平皿或试管等器材应为中性，
无酸、碱抑制物残留，平皿底部要平，以免琼脂厚薄不一，影响药敏
试验结果。
(2)成分来源：各种成分来源可靠，不含对目的菌生长有抑制的物
质。特殊要求的培养基，如葡萄糖氧化发酵试验(O/F 试验)，除加入葡
萄糖外，不能含有其他糖类，指示剂不能用乙醇溶液，避免O/F试验
的假阳性。培养基配制用水应是蒸馏水。
(3)pH值调整：根据培养基的不同要求调整pH 值，控制在要求范
围的±0.2之内。应当注意，培养基在高压灭菌后其pH 值降低0.1～
0.2，故矫正时应比实际需要p H值高0.1～0.2。
(4)灭菌：根据培养基所含成分及配制数量的不同，选择不同的灭
菌方式，既要达到灭菌效果，又不破坏培养基成分。一般对稳定的培
养基，如MH琼脂、营养琼脂可用高压灭菌，即121℃15min ;而含糖
的培养基则以108℃灭菌为好，以防止糖类破坏。不耐高热的物质如
血清、牛乳等，可采用间隙灭菌法灭菌。
(5)分装：根据使用的目的和要求决定分装量。分装培养基所用的
平皿、试管要求清洁，不残留酸碱;制备平板培养基时，操作台要水平，
以避免琼脂平板厚薄不一，同时确保无菌操作。
二、配制后质量控制
(1)培养基外观情况：包括颜色、透明度、有无沉淀和凝固。如发
现培养基表面有裂纹或与培养皿的边缘分离，说明培养基有脱水现象，
必须丢弃。
(2)无菌试验：每一批配好的培养基均须进行无菌试验。先灭菌后
分装的培养基，可采用抽样方法试验，少于100个样本通常选取5%～
10%的量，如果配制大量培养基，则任意选取10 个培养基;无菌分装
培养基则需全部做无菌试验。样本在35 ℃ 或其他适宜的温度下隔夜
培养，如培养基含有血液，则需再置于室温1天，以检查嗜冷菌。选
择性培养基因含有抑制物质，能抑制许多微生物，因此，可加入10倍
量的无菌液体培养基，稀释抑制物质，以利于检出污染菌。即使做过
无菌试验，接种时，也要检查每个平板上的可见菌落。
(3)性能测试：每一批新制或新购的培养基，使用前均须取已知性
质的库存菌种进行性能测试。培养基按目的不同可分为增菌培养基、
分离培养基和鉴定培养基。
①增菌培养基：接种少量难以生长的细菌，在一定时间内观察增
菌情况，细菌能生长的最小接种浓度越小，说明增菌培养基性能愈好。
②分离培养基：要求目的菌生长良好，非目的菌被抑制。一般要
求生长的目的菌接种量不可过多，较好的方法是将测试菌调成0.5麦氏
浊度的菌悬液，再用0.001ml的标准接种环涂划在培养基上，观察菌
落生长。
③鉴定培养基：应选择具有典型特征的菌株作性能试验。如三糖
铁琼脂，须用弗劳地枸橼酸杆菌、福氏志贺菌及铜绿假单胞菌3种菌
分别接种3支培养基，若反应结果为斜面产酸/高层产酸、硫化氢阳性，
斜面产碱/高层产酸，斜面产碱/高层产碱，质量才算合格。