支原体污染及检测

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支原体污染及检测

1)支原体污染在细胞培养中最常见、不易被查觉,但支原体污染可显著

影响细胞功能干扰实验结果。支原体是介于细菌和病毒之间的目前所知能独立生活的最小微生物,它无细胞壁,形态呈高度多形性,最小直径0.2um,可通过滤器。

支原体在污染细胞后,它通过影响细胞的DNA、RNA 的合成及急速消耗

培养基中的氨基酸来抑制细胞的生长,并能降低细胞的融合率。因此,在运用各种细胞系进行实验研究时,首先要证明所用细胞有无支原体的污染。 2)支原体污染后,培养基可不发生浑浊,细胞病变轻微或不明显,因此

难以发现。目前,支原体检测的方法有以下几种。

(a)相差显微镜观察;

(b)低张处理地衣红染色法;

(c)荧光染色法;

(d)酶标法;

(e)PCR法:基础医学细胞中心使用该方法进行检测。

优点:灵敏度高,检测耗时短,样品量小

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此外,使用高品质的血清培养细胞,可以降低细胞被支原体污染的可能性。Cellmax胎牛血清Max choice, Max cells

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