微生物标本采集手册

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微生物标本采集手册

来源:感染管理科2011-3-24 9:47:16 被阅读2829次编辑:感染管理科石慧

微生物标本采集手册

目录

第一章血液及骨髓标本的微生物检验 (1)

第二章痰标本的微生物检验 (5)

第三章上呼吸道标本的微生物检验 (8)

第四章尿液标本的微生物检验 (10)

第五章粪便标本的微生物检验 (12)

第六章化脓和创伤标本的微生物检验 (14)

第七章脑脊液标本的微生物检验 (16)

第八章胆汁标本的微生物检验 (18)

第九章胸水标本的微生物检验 (20)

第十章腹水标本的微生物检验 (22)

第十一章心包液标本的微生物检验 (24)

第十二章关节液标本的微生物检验 (26)

第十三章鞘膜积液标本的微生物检验 (28)

第十四章生殖道标本的微生物检验 (30)

第十五章外眼部标本的微生物检验 (33)

第十六章感染性疾病相关检测 (35)

第一节降钙素原检查 (35)

第二节内毒素检查 (37)

第三节1-3-β-D-葡聚糖检查 (39)

血液、骨髓液的细菌培养

二、标本采集

【标本采集前的注意事项】

应在抗生素应用前或停药一周后采集标本,如不能停用抗生素,应于下次抗生素应用前采集。

【标本送检指征】

病人出现以下临床表现,或同时具备以下几种临床表现时应采集血培养。

1发热(≥38℃)或低温(≤36℃)

2寒战

3白细胞增多(>10×109/L,特别有“核左移”时)

4粒细胞减少(成熟的多形核白细胞<1×109/L)

5血小板减少

6皮肤、粘膜出血

7昏迷

8多器官衰竭

9血压降低

10呼吸加快

几种特殊情况:

1可疑新生儿败血症时,除发热或低温外,很少培养出细菌,应增加尿液和脑脊液培养。

2老年菌血症病人可能不发热或不低温,如伴有身体不适、肌痛或中风,可能是感染性心内膜炎,也应采取血培养。

骨髓培养与血液培养的送检指征是基本一致的,临床常规血液感染有指征时以抽取血培养为主。但当骨髓炎时或长期使用抗菌药物患者,抽取骨髓培养阳性率会远高于血培养。

【标本采集的容器】

美国BD公司血培养仪配套血培养瓶(我院),各种血培养仪配套血培养瓶或手工血培养瓶。

【样本条码粘贴要求】

同时打印两份清晰的条形码,分别粘贴在两个血培养瓶上,应沿血培养瓶的长轴粘贴,病人的姓名端向上,条码区的任何区域不得被覆盖,注意不要在条码上涂写,保持条码的完整和清晰。

【标本的采集方法】

防止皮肤寄生菌或环境微生物引起的污染是血培养的关键问题,采血前严格执行消毒程序是十分重要的。

1皮肤消毒程序:

严格按以下三步法进行:

(1) 70%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上。

(2)用一根碘酊或聚维酮碘(碘伏)棉签消毒皮肤,1~2%碘酊作用30s或聚维酮碘作用60s,从穿刺点向外以1.5~2cm直径画圈进行消毒。

(3) 70%酒精脱碘。

对碘过敏的病人只能用70%酒精消毒,消毒60s,待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。

2培养瓶消毒程序

(1)用70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子。

(2)酒精作用60s。

(3)在血液注入血培养瓶之前,用无菌纱布或棉签清除橡皮塞子表面剩余的酒精,然后注入血液。

3培养瓶接种程序

抽取血液后,不要换针头,直接注入血培养瓶中,轻轻颠倒混匀,以防血液凝固。如果同时作需氧和厌氧培养,应先将标本接种到厌氧瓶中,然后再注入需氧瓶,严格防止将空气注入厌氧瓶中。

【标本采集注意事项】

1血培养采集的时间和频率

(1)采血培养应尽量在抗菌药物使用之前,在24h内采集2~3份血培养(一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养),每次2瓶。因为研究已证实,2~3份血培养足以检测所有的菌血症和真菌血症。

(2)入院前2周内接受抗菌药物治疗的患者,连续3天,每天采集2份,可选用能中和或吸附抗菌药物的培养基。

(3)对间歇性寒战或发热的患者,应在寒战或体温高峰到来之前0.5~1h 采集血液,或于寒战或发热后1h采集。因为发热时血液中可能没有细菌。

(4)可疑为急性原发性菌血症、真菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎的患者,应在不同部位采集2~3份血培养。

(5)不明原因发热,如隐性脓肿、伤寒热和波浪热,先采集2~3份血标本,24~36h后估计体温升高之前,再采集2份以上。

(6)可疑为菌血症或真菌血症,但血培养持续阴性,应改变血培养方法,选择其它种类的培养瓶,如高渗培养瓶,中和抗生素培养瓶,结核菌培养瓶等,以获得罕见的或苛氧的微生物。

(7)可疑为细菌性心内膜炎,在1~2h内多部位采集3份血标本,如果24h 阴性,再采取3份以上的血标本。

2采血量

成人:推荐每个血培养瓶应加的血量为5~10ml,血液和肉汤比为1:5~10(体积:体积)。

儿童:因很难获得大量的血液,一般静脉采血1~5ml用于血培养。

血液量太多或太少都不利于细菌的检出,血液的培养量每增加1ml,阳性率增加3~5%。人体血液内包含各种抑制细菌生长的因子或抗生素,注入血液太多可能会抑制细菌的生长。

骨髓采血量一般为1~2ml。

【标本的送检地点】

检验科微生物室,非正常上班时间送检验科急诊化验室。

*标本运送过程中必须保证其安全,防止溢出,避免细菌污染。

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