721型分光光度计的结构及各部件功能
分光光度计及其操作ppt课件
0.575
光源
单色器 吸收池 接收器
以下分别介绍各部件
6
为了规范事业单位聘用关系，建立和 完善适 应社会 主义市 场经济 体制的 事业单 位工作 人员聘 用制度 ，保障 用人单 位和职 工的合 法权益
1. 光源 用6～12V白炽灯 作用：提供光强一定的复合光(白光) 性能要求: 亮度稳定(以使入射光通量强度 故需电源电压稳定, 一般用稳压器提供稳压。
误差越小。 4.分光光度法，其他条件一定，ε越大，测定的灵
敏度越高。 5.朗伯-比尔定律不仅使用于可见分光光度法,也使
用于紫外分光光度法。 6. 透光率T与吸光物质浓度成反比。
16
为了规范事业单位聘用关系，建立和 完善适 应社会 主义市 场经济 体制的 事业单 位工作 人员聘 用制度 ，保障 用人单 位和职 工的合 法权益
721型分光光度计 应用
1. 测定组分浓度与含量: 依据A= -lgT= bc
2. 测定配合物的组成
14
为了规范事业单位聘用关系，建立和 完善适 应社会 主义市 场经济 体制的 事业单 位工作 人员聘 用制度 ，保障 用人单 位和职 工的合 法权益
小结
1.熟练掌握分光光度计的基本组成 部件 2.了解分光光度计的基本组成部件的作用 3.明确参比溶液的作用
作业:P232-10.12 15
自测题 为了规范事业单位聘用关系，建立和完善适应社会主义市场经济体制的事业单位工作人员聘用制度，保障用人单位和职工的合法权益 判断题 1.可见分光光度法所用参比溶液的作用是调A=0.00 2.可见分光光度法测定KMnO4时,应选紫色光为
入射光。 3.光度分析中,测定的吸光度越大,测定结果的相对
光源 参比
样品
721型分光光度计的使用.
实训721型分光光度计的使用一、实训目的正确使用与维护721分光光度计。
二、仪器与试剂仪器：721型分光光度计，容量瓶，吸耳球等试剂：参比溶液，待测溶液等三、实训原理光是一种电磁波,具有一定的波长和频率。
可见光的波长范围在400~760nm，紫外光为200~400nm，红外光为760~500000nm。
可见光因波长不同呈现不同颜色，这些波长在一定范围内呈现不同颜色的光称单色光。
太阳或钨丝等发出的白光是复合光，是各种单色光的混合光。
利用棱镜可将白光分成按波长顺序排列的各种单色光，即红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等，这就是光谱。
有色物质溶液可选择性地吸收一部分可见光的能量而呈现不同颜色，而某些无色物质能特征性地选择紫外光或红外光的能量。
物质吸收由光源发出的某些波长的光可形成吸收光谱，由于物质的分子结构不同，对光的吸收能力不同，因此每种物质都有特定的吸收光谱，而且在一定条件下其吸收程度与该物质的浓度成正比，分光光度法就是利用物质的这种吸收特征对不同物质进行定性或定量分析的方法。
在比色分析中，有色物质溶液颜色的深度决定于入射光的强度、有色物质溶液的浓度及液层的厚度。
当一束单色光照射溶液时，入射光强度愈强，溶液浓度愈大，液层厚度愈厚，溶液对光的吸收愈多，它们之间的关系，符合物质对光吸收的定量定律，即Lambert-Bear 定律。
这就是分光光度法用于物质定量分析的理论依据。
四、实训内容1.检查仪器各调节钮的起始位置是否正确，接通电源开关，打开样品室暗箱盖，使电表指针处于“0”位，预热20min后，再选择须用的单色光波长和相应的放大灵敏度档，用调“0”电位器调整电表为T=0%。
2.盖上样品室盖使光电管受光，推动试样架拉手，使参比溶液池（溶液装入4/5高度，置第一格）置于光路上，调节100%透射比调节器，使电表指针指T=100%。
3.重复进行打开样品室盖，调0，盖上样品室盖，调透射比为100%的操作至仪器稳定。
4.盖上样品室盖，推动试样架拉手，使样品溶液池置于光路上，读出吸光度值。
分光光度计 原理
72型分光光度计原理72型分光光度计是可见光分光光度计，波长范围为420nm～700nm，它由三大部分组成:磁饱和稳压器、光源、单色光器和测光机构、微电计。
其光学系统如图5-11所示。
72型分光光度计的基本依据是朗伯—比耳定律，它是根据相对测量原理工作的，即先选定某一溶剂作为标准溶液，设定其透光率为100%，被测试样的透光率是相对于标准溶液而言的，即让单色光分别通过被测试样和标准溶液，二者能量的比值就是在一定波长下对于被测试样的透光率。
如图所示，白色光源经入射狭缝、反射镜和透光镜后，变成平行光进入棱镜，色散后的单色光经镀铝的反射镜反射后，再经过透镜并聚光于出射狭缝上，狭缝宽度为0.32nm。
反射镜和棱镜组装在一可旋转的转盘上并由波长调节器的凸轮所带动，转动波长调节器便可以在出光狭缝后面选择到任一波长的单色光。
单色光透过样品吸收池后由一光量调节器调节为适度的光通量，最后被光电电池吸收，转换成电流后由微电计指示，从刻度标尺上直接读出透光率的值。
分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。
常用于核酸，蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。
分光光度计的简单原理分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光源透过测试的样品后，部分光源被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。
样品的吸光值与样品的浓度成正比。
核酸的定量核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。
可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。
核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。
每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。
定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。
如：1OD的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig。
测试后的吸光值经过上述系数的换算，从而得出相应的样品浓度。
测试前，选择正确的程序，输入原液和稀释液的体积，尔后测试空白液和样品液。
简述分光光度计的主要部件
简述分光光度计的主要部件分光光度计是一种常用的实验室仪器，可以测量物质的吸收光谱并计算出其浓度。
它由主要部件光源、光栅、样品室、检测器以及计算机等组成。
首先，光源是分光光度计的核心之一，它通常采用高亮度的氘灯或钨灯作为光源。
在光谱测量中，光源会发出连续的光线，在经过光栅的分光作用后，被分解成不同波长的光谱，随后进入样品室进行测量。
其次，光栅也是分光光度计重要的组成部分，它能够将光线按照波长进行分散，使不同波长的光线依次落在检测器的不同位置。
市面上常见的光栅有反射式光栅和透射式光栅两种，反射式光栅通常用于紫外光谱仪，透射式光栅则通常用于可见光谱仪。
第三，样品室是分光光度计进行样品测量的空间，它通常由一个光学透明的、可调节的容器组成，可以根据不同的实验需要选择不同大小的室内空间。
在进行样品测量时，样品会放置在容器中，同时光谱仪测量系统会通过容器壁将可见光或紫外光辐射到样品中，测量样品对于不同波长光的吸光度，从而得到样品的光谱图像。
第四，检测器是分光光度计实现信号转换和放大的重要元件。
在可见光谱仪中，常用的检测器有光电二极管、电荷耦合器件（CCD）、钙钛矿光电二极管等等。
而在紫外光谱仪中，探测器的类型则有气冷化硅探测器、气冷化铟探测器、碲化锡探测器等等。
最后，分光光度计的计算机部分也是其不可缺少的部分。
计算机通过控制调节样品室温度及空气流通，控制光源光强、波长、光栅角度等参数，以及记录和处理测量数据。
将测量得到的样品数据进行处理，通过校准曲线得到样品的浓度，而且现在随着技术的发展，现代分光光度计已经可以实时输出光谱图像，让实验室工作者在测量中可以更加方便的观察光谱曲线。
紫外-可见分光光度计的基本组成和操作
2、仪器的维护与日常保养 分光光度计是精密光学仪器，正确安装、使用和保养对 保持仪器良好的性能和保证测试的准确度有重要作用。 （1）对仪器工作环境的要求： ①仪器应安放在干燥的房间内； ②仪器应放置在坚固平稳的工作台上； ③室内照明不宜太强；
④尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设 备；
在可见光区检验波长准确度最简便的方法是绘制镨钕滤 光片的吸收光谱曲线。镨钕滤光片的吸收峰为528.7nm和 807.7nm。
在紫外光区检验波长准确度比较实用和简便的方法是： 用苯蒸气的吸收光谱曲线来检查。
谱 钕 滤 光 片 吸 收 曲 线
苯 蒸 汽 的 吸 收 曲 线
（2）吸光度校正 其中应用最普遍的是以重铬酸钾水溶液的吸收曲线为标 准值校正。 （3）吸收池成套性检验 简便的方法进行配套检验： 用铅笔在洗净的吸收池毛面外壁编号并标注光路走向。
缺点：有微小暗电流（Dark current，40K的放射线激
发）。
阴极e光束 阳来自丝（Ni）抽真空直流放大
R - 90V DC +
（3）光电倍增管 石英套
阳极
栅极，
光束 屏蔽
光电倍增管示意图
优点：高灵敏度；响应快；适于弱光测定，甚至对单一 光子均可响应。
缺点：热发射强，因此暗电流大，需冷却（-30℃)。不 得置于强光(如日光)下，否则可永久损坏 PMT！
4、检测器 利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号。 常用的检测器有光电池、光电管及光电倍增管。 （1）硒光电池 优点：光电流直接正比于辐射能；使用方便、便于携带 （耐用、成本低）；
缺点：电阻小，电流不易放大；响应较慢。只在高强度 辐射区较灵敏；长时间使用后，有“疲劳”现象。
Se Fe(Cu)
分光光度计的基本部件
分光光度计的基本部件
分光光度计是一种常用的光谱测量仪器，用于测量物质的吸光度或透射率。
分光光度计的基本部件包括：
1. 光源：通常使用可见光源，如白炽灯或钨丝灯，可以发射连续光谱的光线。
2. 分光装置：将光源发出的光谱分解成不同波长的组成部分，常见的分光装置有棱镜或光栅。
3. 样品室：放置待测物质的区域，光线通过样品室时与样品发生相互作用，并产生吸收或透射。
4. 探测器：用于测量经过样品室的光的强度，常见的探测器有光电二极管或光电倍增管。
5. 电子分析系统：对探测器输出的信号进行放大、滤波、放大和数字化处理，以得到样品的吸光度或透过率。
6. 数据显示和处理：将处理后的数据显示在屏幕上，并通过计算机系统进行数据分析和存储。
这些基本部件共同组成了分光光度计，用于测量物质在特定波长范围内的吸光度或透射率，并可应用于分析化学、生物化学、环境科学等领域。
721型分光光度计的调校及常见故障排除
故障二 ：电流表指针无偏转 （ 不动） 。
故 障排 除 ： （）电流 表 活 动 线 圈不 通 （ １ 电表 线 圈 内阻 约 ２ ）将 电表取 下修 理或 更换新 的电表 。
位置） 。使 光束 反射 到 进 光 狭缝 ，进 入单 色 光 器 内 色 散 ，调 节光 源灯 的正确 位置 观察 白色卡 片纸上 的 单 色光 ，色黄 、光强 、边缘 无 光晕或 杂色 现象 即可 固定 灯架 上 的二只螺 钉 。 （）仪 器单 色光 的调整 ：在调 整 波长时 可 以干 ２ 涉滤 光 片 或用 钕 镨 滤 光 片 ５９ｎ ２ ｌ 收 峰来 校 对 波 ｎ吸 长 准确性 。在 调整波 长 时只能轻 微旋 动左边 的一 只 螺 杆 ，其余 二 只螺杆 不要 任意旋 动 ，其余二 只螺 杆 主要 用来 调整单 色光 在光孔 的上 下位 置 。 （ ）仪 器光 电管 暗电流 的调整 ：是靠 仪器 面板 ３ 上和底 板上 的二 只 电位 器来 达 到 ，Ｗ３是 细调 ，在 面板上 ，Ｗ４ 粗 调 ，在底 板 上 靠 仪 器左 侧 有 一小 是 长方 形盖板 ，要 调节 时先取 下此 板 ，即可找 到粗调 电位 器 。 ２ 常见 故 障分析及 排 除方法
（５ ，随仪 器稳 定 时间较 长后而 好转 。 １％） 故 障排 除 ：
先调节 “”粗调 电位器 ， ０ 再旋动调 “”电位 ０ 器逆时针方向，而不能使电表指针达到于 “ ” 是 ０，
由于仪器 光 电管 暗盒 内硅 胶受潮 ，取 下硅胶 筒更换 干燥 或烘 干硅胶 ，用 风筒 热风适 当吹吹硅胶 也可 驱 潮达 到调 “”效 果 。 ０ 故障 四 ：电表 指针左 、右摆 动 。
721型分光光度计分光系统常见故障的排除
毛刺并用细砂纸精磨。装入时加油润滑，所有垫圈 接原顺序及划线位置装好。
波段为正，则向长波段方向转动波长刻度盘。重新 校准波长后，紧固波长刻度盘。 ３波长调节器转动时出射光波长无变化 ３．１ 故障原因
参考文献 黄泳分光光度计使用与维修．沈阳：辽宁省计量科学研究院
２“｝】．１０
（Ｉ）连接波长调节器的橡胶轮打滑；
２０
万方数据
721型分光光度计分光系统常见故障的排除
作者： 作者单位： 刊名：
英文刊名： 年，卷(期)： 引用次数：
陈淑琴 安徽省阜阳市技术监督局质量监督检验所,阜阳,236000
化学分析计量 CHEMICAL ANALYSIS AND METERAGE 2003，12(3) 0次
参考文献(1条) 1.黄涛 分光光度计使用与维修 2001
2)根据几何光学和物理光学理论,采用平面闪耀光栅作为分光元件设计完成一套分光系统,并
且设计、计算光线光路,并对光学元件进行选型和购买.很好的将混合光均匀的分开.
3)设计完成本课题的机械装置机构,采用LY12合金材料设计加
工出分光光度计机械装置,并组装调试通过.
4)设计电路系统的软、硬件系统,采用现在流行的控制芯片AT89S52设计光信号检测、运放计算系统,和
２６
＾３６
色谨倪嚣雄护与教摩捧除
２００１
２６
Ｃ１０
最裁产品质量ｊ击解析与适用
２０００
２６
Ｃ１６
遁用计量术语厦定义解释
们０
色蒲分析样品处理（色谱技术丛书）
越７
色谱联用技术
２００ｉ
２６
２０００
２６
ａ∞ｌ
２４
Ｃ６
计量工作者常用手册
欣茂分光光度计723 75系列使用说明书
欣茂仪器上海欣茂仪器有限公司分光光度计使用说明书723系列75系列目录一、仪器用途 (2)二、仪器特点 (2)三、仪器主要技术指标及规格 (2)四、仪器工作原理 (2)五、仪器的结构 (3)六、仪器各部分名称及功能 (3)七、仪器基本操作 (5)八、仪器成套性和工作环境 (11)九、日常保养 (12)附页、故障分析 (13)一、仪器用途基于各种物质的分子及其结构，对不同波长的单色光呈现选择性吸收的特性。
本仪器在紫外可见光光谱范围内，可对物质成分及含量进行定性和定量分析，它在化工、医学、生物、农业、食品、环境保护等方面应用广泛。
二、仪器特点1、“欣茂”分光光度计采用低杂光,光栅CT式单色器结构,使仪器具有良好的稳定性、重现性和精确的测量精度。
2、采用最新微机处理技术,不仅使仪器具有自动设置0%T和100%T的控制功能,以及多种浓度运算和数据处理功能,操作简便、直接、可靠。
3、仪器配有标准的RS-232双向通讯接口和标准并行打印口,可向计算机发送测试数据和接受微机的控制命令(需欣茂仪器应用软件),接并行打印机如(EPSON-LQ-300K)能直接打印测试结果。
4、仪器配有WIN95、98、2000、XP操作平台上运行的欣茂应用软件(PC、PCS型),使仪器具有波长扫描、时间扫描、多波长检测、标准曲线和多种数据处理等功能。
三、器主要技术指标及规格紫外/可见分光光度计--技术指标产品型号UV-7502PCS(带宽2nm)UV-7502PC UV-7502CUV-7502CS(带宽2nm)UV-7504PC UV-7504C UV-7504波长范围200～1000nm波长精度±0.5nm±0.5nm±1nm±2nm波长重复性≤0.2nm≤0.2nm≤0.5nm≤1nm光谱带宽0.5、1、2、4nm2nm0.5、1、2、4nm4nm测量范围0-125%T-0.097-3.00A0-1999C0-125%T-0.097-2.70A0-1999C0-125%T-0.097-2.50A0-1999C透射比准确度±0.5%T透射比重复性≤0.2%T杂散光≤0.1%T≤0.15%T≤0.2%T≤0.3%T≤0.5%T(λ220、340nm)基线直线性±0.004A±0.004A//±0.004A//稳定性亮电流3min内透射比示值变化≤0.5%T、暗电流3min内透射比示值变化≤0.2%T漂移≤0.004A/λ500nm/30min电源220V50Hz300W波长显示LCD2×20（带背光）输出RS-232C外形尺寸440×370×200mm重量17kg可见分光光度计--技术指标四、仪器工作原理分光光度法利用物质对某种波长单色光的光能量的吸收特性,根据郎伯-比尔定律以测量物质的成份及含量。
721可见分光光度计使用方法
721可见分光光度计使用方法721型可见分光光度计是一种广泛应用于分析化学、生物化学、环境检测等领域的仪器。
下面将介绍721型可见分光光度计的使用方法。
一、仪器准备1.将721型可见分光光度计放置在水平台面上，并保证周围环境无明显振动。
2.打开电源开关，并等待一段时间，使仪器进行预热。
3.检查仪器的光路系统是否正常，如有问题需要及时调整或修复。
4.准备好所需的样品、试剂等。
二、样品处理1.根据实验要求准备样品，并按照标准方法进行处理和提取。
2.如果需要将样品稀释，可使用纯水或适宜的缓冲液进行稀释，同时保存好备用样品以备测定。
三、仪器校准1.使用标准溶液对可见分光光度计进行校准。
校准前应选择合适的波长和滤光片。
2.将纯水或空白试剂放入比色皿中，将比色皿放置在光路中，调整零位，使示值稳定在零位上。
3.按照使用方法进行滤光片的校准，确保各滤光片的透过率符合标准要求。
4.使用标准溶液进行线性度校准，校准结果应符合要求。
四、测定操作1.打开可见分光光度计的光路盖，将比色皿放置在比色皿台上。
2.根据实验要求选择合适的波长和滤光片，并将其安装到仪器上。
3.将待测样品倒入比色皿中，确保样品填满比色皿，避免气泡和颗粒的存在。
4.调节零位，使示值稳定在零位上。
若示值不在零位上，可通过调整零点手柄或自动调零功能进行调整。
5.打开比色皿室盖，调节比色皿室中的光阑孔大小，使比色皿中的光通过和离开的路线尽量相同。
6.记录示数，即可得到样品的吸光度。
五、数据处理1.根据所测样品的吸光度值，结合标准曲线进行定量计算或定性判断。
2.如果需要进行数据处理和统计分析，可使用计算机软件进行进一步处理。
六、测定结束1.关闭可见分光光度计的电源开关。
2.清理仪器和比色皿，避免样品残留。
3.将仪器放置在干燥、通风的地方。
注意事项：1.使用过程中严禁碰撞光路系统，避免损坏仪器。
2.操作前应仔细阅读仪器的使用说明书，了解仪器的功能和使用方法。
3.根据实验需要选择合适的波长和滤光片，并进行相应的校准。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
紫外可见分光光度计的结构及工作原理
1．721型分光光度计的仪器结构
721型分光光度计外型如图2—1所示，它是目前国内企事业单位最常见、应用较广的
一种可见分光光度计，主要由光源系统、分光系统、测量系统和接收显示系统四部分组成。
该仪器的内部结构和结构方框图见2—2（a）和2—2（b）。
1．光源灯室；2．电源变压器； 3．稳压电路控制板；4．滤波电解电容 ；5.光电管盒；
6.比色部分；7．波长选择磨擦轮机构；8.单色光器组件；9．“0”粗调节电位器；10.读数电
表；11．稳压电源大功率调整管（3DD15）。
图2—2(a) 721型分光光度计内部结构示意图(俯视图)
图2—1
• 1．上盖板固定螺钉；2．稳压电路控制板；3．保险丝座；4．电源输入插座；5．电
源变压器；6．光源灯（12V，25W）；7.稳压电源大功率整流管；8．稳压电源大功
率调整管3DD102（3DD15）。
• 图2—2 (b) 721型分光光度计内部结构示意图（后视）
•
2、721分光光度计的结构方框如图1-3所示
图2—3 可见分光光度计的结构示意图