721E型分光光度计原理和使用方法
721分光光度计的使用方法
721可见分光光度计仪器的使用方法1．在接通电源之前，电表的指针必须位于“0”刻线上，否则应旋动电表上的校正螺丝调节到位。
2．打开比色皿室的箱盖和电源开关，使光电管在无光照射的情况下预热15分钟以上。
3．旋转波长调节器，选择测定所需的单色光波长。
选择适当的灵敏度，一般先将灵敏度旋钮至中间位置，用零点调节器调节电表指针至T值为0%处。
若不能调到，应适当增加灵敏度。
4．放入空白溶液和待测溶液，使空白溶液置于光路中，盖上比色皿室箱盖，使光电管受光，调节光量调节旋钮使电表指针在T值为100%处。
5．打开比色皿室箱盖（关闭光门），调节零点调节旋钮使针在T值为0%处，然后盖上箱盖（打开光门），调节光量调节旋钮使指针在T值为100%处。
如此反复调节，直到关闭光门进和打开光门时指针分别指在T值为0%和100%处为止。
6．将待测溶液置于光路中，盖上箱盖，由此时指针的位置读得待测溶液的T值或A值。
7．测量完毕后，关闭开关取下电源插头，取出比色皿洗净擦干，放好。
盖好比色皿暗箱，盖好仪器。
注意事项1．使用比色皿时，只能拿毛玻璃的两面，并且必须用擦镜纸擦干透光面，以保护透光面不受损坏或产生斑痕。
在用比色皿装液前必须用所装溶液冲洗3次，以免改变溶液的浓度。
比色皿在放入比色皿架时，应尽量使它们的前后位置一致，以减小测量误差。
2．需要大幅度改变波长时，在调整T值为0%和100%之后,应稍等片刻(因钨丝灯在急剧改变亮度后,需要一段热平衡时间)，待指针稳定后再调整T值为0%和100%。
3．当被测溶液浓度太大时，可在空白溶液处加一块中性滤光片（所谓中性是指它们在很宽的波长范围内的透光率基本相同），其A值有0.5，1，和1.5三种。
所谓A值为1是标称值，实际在1左右，须经使用的仪器在实际使用的波长下测定其实际数值，例如：测得吸光片的实际数值为0.95，在空白溶液处加此吸光片后，被测溶液在电表上的读数为0.74，则该溶液的实际值为：0.74+0.95=1.694．根据溶液的含量大小选择不同光程长度的比色皿,使用权电表读数A在0.1~1之间，这样可以得到较高的准确度。
721分光光度计的使用方法和步骤
721分光光度计的使用方法和步骤721分光光度计是一种广泛应用于化学、生物、医药等领域的实验仪器，其主要功能是测量溶液中物质的吸光度或透过率。
下面将介绍721分光光度计的使用方法和步骤。
一、仪器准备1. 将721分光光度计放置在水平台上，并插入电源线。
2. 打开仪器的电源开关，并等待仪器启动。
二、样品处理1. 准备待测溶液，并使用量筒等工具准确称取所需的溶液体积。
2. 将待测溶液转移到专用的样品池中，确保溶液充满样品池。
三、仪器调试1. 选择适当的波长，根据待测溶液中物质的特性选择合适的波长。
常用的波长有可见光范围内的450nm、550nm、600nm等。
2. 调节光程，根据溶液浓度的不同，选择合适的光程以保证测量的准确性。
光程的选择应根据仪器的使用说明进行操作。
3. 零点校准，使用纯水或空白溶液进行零点校准，将仪器的显示值调整为零。
四、测量操作1. 将样品池放入光度计的样品槽中，并确保样品池与光路平行。
2. 关闭样品槽，开始测量。
3. 读取测量结果，记录显示屏上的吸光度或透过率数值。
五、数据处理1. 根据实验需要，对测得的数据进行进一步处理，如计算溶液的浓度或进行数据分析等。
六、仪器的维护1. 使用完毕后，关闭仪器的电源开关。
2. 清洁样品池，避免样品残留污染下次测量。
3. 定期对仪器进行维护和保养，如清洁光路、校准仪器等。
721分光光度计的使用方法和步骤如上所述。
在使用过程中，需要注意的是选择合适的波长和光程，进行零点校准以及正确放置样品池等。
此外，对仪器的维护和保养也是使用过程中需要重视的事项。
通过正确操作和维护，可以保证721分光光度计的正常使用和准确测量。
721可见分光光度计使用方法
721可见分光光度计使用方法721型可见分光光度计是一种常用的实验室仪器，主要用于测量溶液中物质的吸光度。
下面将详细介绍721型可见分光光度计的使用方法。
一、仪器检查与准备1.检查光度计，确认仪器外观完好无损，仪器与电源连接正常。
2.检查吸收池，确保池内干净，并无水迹或其他杂质。
3.打开电源，确保电源正常并进行预热操作。
二、仪器校准1.从设备专用校准控制板上选择合适的波长，然后调整校准旋钮，使显示屏上的波长与选择的波长一致。
2.使用被称为“空白溶液”的无色或纯溶剂（如无气泡的水或乙醇）进行校准。
将空白溶液置于吸收池中，将波长选择盘旋转到“0”位置。
3.按下“闪烁”按钮，将自动调整光源和感测器的位置以平衡出零点。
三、样品的制备1.准备样品溶液，注意选择与要测量的物质相适应的溶剂。
2.保持样品溶液的浓度和体积相对恒定，以确保测量值的准确性。
3.如果需要，使用滤纸或其他过滤材料过滤溶液，以去除悬浮固体或杂质。
四、测量样品的吸光度1.将校准好的吸光度计波长调整到想要测量的波长。
2.将样品溶液倒入吸收池中，注意不要过多，以免溅出或浸湿仪器。
3.将吸光度计封上，使吸收池与光源和感测器相对应。
4.读取示数值，注意记录值是正还是负。
正值表示吸光，负值表示透光。
5.如果需要，可以进行多次测量并取平均值，以提高数据的准确性。
五、结果的记录与分析1.将测量结果记录在实验记录本上，包括样品的名称、浓度、测量波长和吸光度值。
2.利用所得数据进行进一步的分析，如制作吸光度曲线、计算样品浓度等。
3.可以根据需要进行相关的统计分析，如平均值、标准差等。
六、仪器的关机与清洁1.测量完成后，先调整波长选择至“0”位置，然后才能关机。
2.使用干净的抹布或纸巾清洁吸收池，并确保池内干燥。
3.将仪器放置在干燥通风的地方，避免阳光直射和尘埃积聚。
721型分光光度计的基本原理
721型分光光度计的基本原理引言：721型分光光度计是一种常用的实验室仪器，广泛应用于化学、生物学、医学等领域。
它通过测量样品在不同波长下的吸光度，来分析物质的浓度或反应动力学等参数。
本文将介绍721型分光光度计的基本原理，以及其工作原理和应用。
一、光的性质和传播光是一种电磁波，具有波动性和粒子性。
光波的传播速度是固定的，即光速。
光波的波长决定了光的颜色，不同波长的光对物质具有不同的相互作用。
二、分光光度计的构成和工作原理721型分光光度计主要由光源、单色器、样品室、光电探测器和信号处理系统等组成。
下面将详细介绍每个组件的作用和工作原理。
1. 光源：分光光度计通常采用白炽灯、氘灯或钨灯作为光源。
光源发出的光经过透镜聚焦后，成为平行光束。
2. 单色器：单色器的作用是将白光分解成不同波长的单色光。
它通常由棱镜或光栅组成。
当光通过单色器时，不同波长的光会发生折射或衍射，使得光束被分离为不同颜色的光。
3. 样品室：样品室是放置样品的容器，通常由玻璃或石英制成。
样品室中的样品会与入射光发生相互作用，吸收或散射部分光线。
4. 光电探测器：光电探测器是将光信号转化为电信号的装置。
常用的光电探测器有光电二极管和光电倍增管。
当光通过样品室后，被光电探测器接收并转化为电信号。
5. 信号处理系统：信号处理系统用于测量和记录光电探测器输出的电信号。
它通常由放大器、滤波器和数据记录仪等组成。
信号处理系统将电信号放大、滤波后，得到与样品吸光度相关的信号，并将其记录下来。
三、分光光度计的工作流程721型分光光度计的工作流程如下：1. 调节单色器：根据需要选择特定的波长，调节单色器使得只有该波长的光通过。
2. 校准仪器：使用标准溶液进行校准，调节零点和100%T（透过率）。
3. 测量样品：将待测样品放入样品室，并选择合适的波长。
启动光源和信号处理系统，测量样品的吸光度。
4. 计算结果：根据所测得的吸光度，结合标准曲线或公式，计算样品的浓度或其他参数。
721分光光度计使用规范
摘要：分光光度法是利用物质的分子结构不同，对光的吸收能力不同这一特征对不同物质进行定性或定量分析的方法。
关键词：光源可见光波长范围比色皿Lambert-Bear 定律主要内容：一，工作原理光是一种电磁波,具有一定的波长和频率。
可见光的波长范围在400~760nm，紫外光为200~400nm，红外光为760~500000nm。
可见光因波长不同呈现不同颜色，这些波长在一定范围内呈现不同颜色的光称单色光。
太阳或钨丝等发出的白光是复合光，是各种单色光的混合光。
利用棱镜可将白光分成按波长顺序排列的各种单色光，即红、橙、黄、绿、青、蓝、紫等，这就是光谱。
有色物质溶液可选择性地吸收一部分可见光的能量而呈现不同颜色，而某些无色物质能特征性地选择紫外光或红外光的能量。
物质吸收由光源发出的某些波长的光可形成吸收光谱，由于物质的分子结构不同，对光的吸收能力不同，因此每种物质都有特定的吸收光谱，而且在一定条件下其吸收程度与该物质的浓度成正比，分光光度法就是利用物质的这种吸收特征对不同物质进行定性或定量分析的方法。
在比色分析中，有色物质溶液颜色的深度决定于入射光的强度、有色物质溶液的浓度及液层的厚度。
当一束单色光照射溶液时，入射光强度愈强，溶液浓度愈大，液层厚度愈厚，溶液对光的吸收愈多，它们之间的关系，符合物质对光吸收的定量定律，即Lambert-Bear 定律。
这就是分光光度法用于物质定量分析的理论依据。
二，721分光光度计的使用2.1 721分光光度计使用前准备工作2.1.1检查仪器各调节钮的起始位置是否正确，接通电源开关，打开样品室暗箱盖，使电表指针处于“0”位，预热20min后，再选择须用的单色光波长和相应的放大灵敏度档，用调“0”电位器调整电表为T=0％2.1.2 盖上样品室盖使光电管受光，推动试样架拉手，使参比溶液池（溶液装入4／5高度，置第一格）置于光路上，调节100％透射比调节器，使电表指针指T＝100％。
721分光光度计使用说明
721分光光度计使用说明分光光度计是一种用来测量物质在不同波长下对光的吸收、透射或反射性质的仪器。
它广泛应用于化学、生物、医药和环境等领域的实验室研究和工业生产中。
本文将介绍721分光光度计的使用方法，包括仪器组成、操作步骤、常见故障及解决办法等内容。
一、仪器组成1.光源：提供可见光或紫外光源，一般为氘灯或钨灯。
2.准直器：将光源发出的光线准直到样品表面，保证光线射向样品时平行。
3.分光器：将光线按照不同波长进行分散，通过单色器选择所需波长的光线。
4.样品室：放置待测物质的容器。
一般为石英或玻璃杯，样品室可调节高低，以便调整光线的路径长度。
5.探测器：将透射或反射的光线转化为电信号进行检测。
6.数字显示屏：显示测量结果。
7.控制面板和操作按钮：用于选择波长、调节光强和进行其他操作。
二、操作步骤1.打开分光光度计电源，待仪器稳定后，校准零点。
2.加载样品：将待测物质转移到样品室中，保持样品室的外壁清洁，以免影响测量结果。
3.选择波长：根据需要选择所需的波长。
可以通过旋转单色器上的波长选择钮进行调节。
调节完成后，等待稳定。
4.开始测量：按下开始按钮，仪器开始进行测量。
测量完成后，读取数字显示屏上的结果。
5.清洁样品室：清除样品室中的残留物，使用纯净溶剂擦拭样品室外壁。
三、常见故障及解决办法1.仪器显示异常或无显示：检查电源是否接通，确认电源是否正常。
2.波长选择困难：检查单色器运动是否灵活，是否需要维护。
3.光强不足：检查光源是否需要更换，确认光源是否正常工作。
4.操作按钮无响应：检查操作按钮是否损坏，尝试重启仪器。
5.测量结果不稳定或不准确：检查样品室是否干净，样品是否均匀分布，样品室是否对齐正确。
总结：721分光光度计是一种常用的光学仪器，具有测量灵敏度高、测量范围广、操作简便等优点。
正确的操作方法和对仪器故障的及时处理是保证测量结果准确性的关键。
在使用过程中，用户应仔细阅读仪器的使用说明，按照操作步骤进行操作，并保证仪器的日常维护和保养。
721可见分光光度计使用方法
721可见分光光度计使用方法721可见分光光度计使用方法：721可见分光光度计是一种用于测量可见光范围内溶液或物质吸收光强的仪器。
下面将介绍其使用方法，以帮助您正确地操作该设备。
1. 准备工作：a. 确保721可见分光光度计处于稳定的工作环境，远离振动和干扰源。
b. 检查设备是否正常运转，并将其接通电源。
2. 样品处理：a. 准备待测样品，在使用前确保样品清洁无杂质。
b. 根据需要，将样品与试剂混合或稀释。
3. 设置参数：a. 打开分光光度计软件或直接通过仪器面板设置所需的波长范围。
b. 选择所需的波长，并在仪器上进行设置。
4. 校准仪器：a. 使用标准溶液进行校准。
校准样品将提供一个已知吸光度值，以便校准仪器。
b. 将标准样品放入仪器中，并根据仪器指南进行校准。
5. 进行测量：a. 使用准备好的样品架，将待测样品放入样品室中。
b. 关闭样品室，确保环境光线尽量少干扰测量结果。
c. 运行仪器软件或通过面板启动测量。
d. 仪器将测量样品吸光度，并显示结果。
6. 分析结果：a. 仔细观察测得的吸光度值，并根据需要进行记录。
b. 根据分光光度计和实验要求，将数据转化为所需的浓度或吸光度单位。
7. 清洁和保养：a. 在使用完毕后，关闭仪器并断开电源。
b. 清洁样品室和光学部件，以确保仪器保持良好的工作状态。
c. 定期进行仪器维护和校准，以保证准确性和稳定性。
请务必按照以上顺序和步骤进行721可见分光光度计的使用，以获得准确的测量结果。
使用前请详细参阅仪器操作手册，以确保操作正确无误，并严格遵守相关安全操作规范。
简述721分光光度计的使用方法
简述721分光光度计的使用方法
721分光光度计是一种常用的实验室仪器，用于测量物质的吸光度和浓度。
下面将介绍721分光光度计的使用方法。
打开721分光光度计的电源开关，待仪器启动后，将所需的样品放入样品池中。
注意，样品池应该干净、透明，且没有气泡或杂质。
如果需要测量多个样品，可以使用多个样品池，但需要确保每个样品池都是相同的。
接下来，选择所需的波长。
721分光光度计可以测量不同波长下的吸光度和浓度，因此需要根据实验需要选择合适的波长。
在仪器上方的波长选择器上选择所需的波长，然后调节波长选择器旁边的光强调节旋钮，使得光强适合所选波长。
然后，调节样品池的位置，使得样品池中的样品与光路对准。
可以通过调节样品池的高度和角度来实现这一步骤。
接下来，将空白样品放入样品池中，调节零位调节旋钮，使得读数为零。
然后将所需的样品放入样品池中，记录吸光度读数。
如果需要测量浓度，可以使用标准曲线法或者比色法来计算样品的浓度。
清洗样品池和仪器。
使用纯水或者适当的溶液清洗样品池，然后用纸巾或者吹风机将样品池和仪器表面擦干净。
721分光光度计的使用方法相对简单，但需要注意样品池的清洁和
光路的对准。
只有正确使用仪器，才能得到准确的实验结果。
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(Intensity of the absorbant light)
•Ir为反射光
(Intensity of the reflecting light)
•It为透射光强度
(Intensity of the transmitted light)
透光率(T)与吸光度(A)
• 透光率(Transmittance，T)
可用不加试样的“试剂空白”(reagent blank)作参比溶液；
c、若被测试液本身在测定波长处有吸收，而显色剂等
无吸收时，
可用不加显色剂等的“试样空白” (sample blank)作参比溶
• 吸光光度法的原理 • 吸光度的测量 • 定量分析方法 • 721E分光光度计的操作方法 • 721E分光光度计操作练习
吸光光度法(Spectrophotometry )的原理
• 问题：如何测定溶液中某一物质的浓度？ • 提示(酸碱滴定、氧化还原、络合滴定、沉淀等)
• 分光光度法：利用溶液对单色光的吸收度来 确定溶液中有色物质的含量
光透射过去，溶 液呈现透射光的 颜色。
– 被吸收的光与透 射过去的光称为 互补色光
物质的颜色 吸收光颜色
黄绿 黄 橙红 红紫 紫 蓝 绿蓝 蓝绿
紫 蓝 绿蓝 绿 黄绿 黄 橙 红
吸收光波长 范围(nm) 380~435 435~480 480~500 500~560 560~580 580~595 595~650 650~760
• 物体的颜色是哪里来的？
物质对光的选择性吸收
物质对光的选择性吸收
结论：
– 物质对光的吸收具有选择性，同一种物质对不 同波长的光的吸收能力不同，不同物质对同一 波长的光的吸收能力也不同
– 物质所呈现的颜色正是它对不同波长光选择性 吸收产生的在人视觉上的反映
• 溶液的颜色
– 当白光通过某一 溶液时，该溶液 会选择性地吸收 某些波长光而让 那些未被吸收的
•条件：单色光，稀溶液 •Lambert’s Law（1760年）：It=Io×10-kb，A=kb •Beer’s Law（1852年）： It=Io×10-kc ，A=kc b：液层厚度
c:溶液浓度
光吸收基本定律
• Lambert-Beer定律(Lambert-Beer’s Law)
数学表达式：
生物化学基本实验技能训练（二）
721E型分光光度计的原理
(Spectrophotometry )
实验目的(Purpose)
1、掌握721E分光光度计的原理、结构与操 作 方法
2、学习未知溶液的浓度测定方法 3、制作CuSO4标准曲线，并用以求得未知
CuSO4溶液的浓度
主要内容(Contents)
分光光度计
仪器结构： 光源
钨丝灯 氢灯或氘灯
可见光 (Visible Light) 紫外光 (UV Light)
单色器
棱镜 光栅
吸收池（比色杯、比色皿）
检测器
光电管 光电倍增管
玻璃 可见光 石英 紫外光
显示器
检流计 数码管显示
测量条件的选择
• 入射光波长
– 一般选用被测物质溶液的λmax。可以获得较 高的灵敏度
吸光光度法(Spectrophotometry )的原理
• 分光光度法：利用溶液对单色光的吸收度来 确定溶液中有色物质的含量
– 有色物质溶液颜色的深浅与其浓度有关，浓度 愈大，颜色愈深
• 吸收曲线(absorbance curve)
– 以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，即可得到一
条吸光度随波长变化的曲线，称之为吸收曲线或吸收光 谱。 – 光吸收程度最大处的波长，称为最大吸收波长 (maximal absorbance wavelength)，常用λmax表示。 – 在正常情况下，选用不同浓度的某种溶液，最大吸收 波长是固定不变的。
– 有色物质溶液颜色的深浅与其浓度有关，浓度 愈大，颜色愈深
光的基本性质
• 光是一种电磁波，具有波动性和微粒性。 • 波长(λ)、频率(υ)和光速(c)之间的关系是
υ=c/λ • 电磁波谱图
图1－1 电磁波谱
• 人的眼睛能感知的光区称为可见光区(Visible
Light) ，其波长范围约为380~760nm。
Io A= lg
= -lgT=abc
It
吸光度 吸光系数 液层厚度 （absorbance） (absorptivity (path
coefficient) length)
溶液浓度
(analyte concentration)
•吸光系数是物质的特征性常数
Lambert-Beer定律的偏离
(Limitations of the Lambert-Beer’s law )
A
应用：
• 可作为物质定性、定量 分析的依据
图1-2 KMnO4溶液的吸收曲线
λ(nm)
光吸收的基本概念
条件：一束平行单色光照射到均匀的、非散射的介质如溶液时
散射光
入射光Io
吸收光Ia
反射光
•I0=Ia+Ir+It
透射光It
•I0为入射光强度
(Intensity of the incident light)
– T=It/I0×100％ – 透光率的变化范围：?
• 吸光度(absorbance，A)：
– 透光率的负对数，又称为光密度(Optical density，OD) – A= -lgT= lg(I0/It) – 吸光度的变化范围： ?
光吸收基本定律
• Lambert-Beer定律(Lambert-Beer’s Law)
• 控制适当的吸光度测量范围
– 最小误差出现在T%=20-65% (A=0.2 -0.7)的 范围内
• 选择适当的参比溶液参比溶液 Nhomakorabea选择a、当被测试液、显色剂及其他试剂在测定波长处都无 吸收时
可用纯溶剂(如蒸馏水 distilled water)作参比溶液；
b、当被测试液无吸收，而显色剂或其他试剂在测定波 长处有吸收时
• 偏离的原因
– 物质浓度太高，改变了被吸收光的折射 率。
– 仪器的局限性:入射光、杂散光、吸光度 读数（0.2-0.7）
– 非对称的化学平衡
• 因其浓度、pH、溶剂和温度的改变，发生 解离、缔合、溶剂化和互变异构等化学变 化而发生偏离。
• 吸光光度法的原理 • 吸光度的测量 • 定量分析方法 • 721E分光光度计的操作方法 • 721E分光光度计操作练习