缺血性脑卒中的动物模型
大鼠脑缺血模型制作
大鼠脑缺血模型制作大鼠脑缺血是一种神经病理学状态，常用于研究脑缺血和再灌注相关的疾病，如中风和心脑血管疾病。
制作大鼠脑缺血模型可以帮助研究者深入了解脑缺血的机制，并探索治疗方法。
下面将介绍一种常用的大鼠脑缺血模型制作方法。
材料准备：1.正常健康的大鼠（约250-300g）2.异氟醚（用于麻醉大鼠）3.氧化氮（用于麻醉大鼠）4.0.9%氯化钠溶液（生理盐水，用于预先裂解血栓）5.弹簧夹（用于阻断大脑供血）6.血管夹（用于再灌注）7.生理盐水或PBS（用于清洗伤口和冲洗大脑）操作步骤：1.麻醉大鼠-以适当的浓度向氧化氮罩中送气，让大鼠吸入异氟醚麻醉。
-确定大鼠是否处于麻醉状态，如失去帕金森反射。
-为了确保大鼠的安全性和麻醉质量，要定期监测大鼠的许多生理参数，如呼吸频率、血氧饱和度和体温。
2.颅窗手术-将大鼠固定在手术台上，用5%碘伏消毒实验区域的皮肤。
-在头部进行剃发和消毒。
- 用手术刀在头部切开皮肤，在颅骨上切开一个直径约 1 cm的圆洞。
-清除头骨上的组织，暴露出颅骨。
-用电动开骨钻在颅骨上进行微抖动，直到打开一个圆洞。
通过控制速度和钻头的压力来避免损伤脑组织。
-用细钳将头皮撕开，暴露出脑膜。
3.制作脑缺血-用生理盐水或PBS洗涤脑膜，以确保大脑的清洁。
-用弹簧夹仔细阻断大脑的供血。
通常选择大脑的前动脉（MCA）或双侧MCA，使大脑区域发生缺血。
-检查大鼠是否出现神经功能缺陷，如软瘫、不对称性和意识丧失等。
-记录缺血时间，通常在20-30分钟之间。
-选择再灌注时间，通常是60分钟。
4.再灌注-在再灌注前，用生理盐水或PBS冲洗大脑。
通过防止缺血时间和再灌注时间的太长，以减少实验操作引起的伤害。
-用血管夹将阻断的血管解除，实现再灌注。
-观察大鼠是否恢复神经功能，例如排尿、动作和体位等。
-保持大鼠体温适宜，定期监测大鼠身体参数。
5.实验后处理-在实验结束后，用生理盐水或PBS冲洗伤口。
-给大鼠提供足够的水和食物，让其恢复。
缺血性卒中无复流动物模型建立和多维度评价方案
缺血性卒中无复流动物模型建立和多维度评价方案杨馨漩;田昊;赵家慧;郑丽娜;刘丽萍【期刊名称】《中国神经精神疾病杂志》【年(卷),期】2024(50)1【摘要】目的建立脑无复流模型并对灌注减低进行多维度评价。
方法利用激光散斑对比成像和双光子活体成像,比较C57BL/6(n=16)和BALB/c小鼠(n=37)短暂性大脑中动脉闭塞,以及BALB/c小鼠缺血1h或1.5h灌注改变情况。
结合激光散斑对比成像、低倍率和较高放大倍率的灌注脑片图像,以及双光子显微镜监测红细胞流速和流量对短暂性大脑中动脉闭塞后脑灌注下降进行活体动态以及全脑切片和微血管的评估。
用微管相关蛋白2染色和行为学评分评估梗死面积和行为学缺损。
结果在C57BL/6小鼠中,大脑中动脉区域大多数毛细血管在缺血期间仍然流动,而在BALB/c小鼠中,大多数毛细血管被阻断。
此外,BALB/c小鼠缺血1.5 h后,24 h后再通时的皮质灌注减少至基线76.1%(与BALB/c sham组89.0%相比减少,P=0.046),而缺血1 h减少至79.9%,与BALB/c sham组无明显差异(P=0.299)。
切片全脑灌注评估BALB/c小鼠短暂性大脑中动脉闭塞1.5 h导致全脑灌注减少至75.1%(与BALB/c sham组100%相比降低,P<0.001),双光子活体成像评估大脑中动脉流域皮质表面毛细血管血流在再通24h,红细胞流速降至基线水平的50.3%(与BALB/c sham组110.7%相比降低,P=0.010),红细胞流量降至基线水平的38.9%(与BALB/c sham组119.2%相比降低,P=0.010);高倍率切片成像评估毛细血管有灌注长度为241μm±33μm(与BALB/c sham组997μm±103μm相比减少,P=0.001),有灌注的毛细血管占据的总体积分数为0.0128±0.0018(与BALB/c sham组0.0539±0.0055相比减少,P<0.001)。
全脑缺血再灌注动物模型建立方法
全脑缺血再灌注动物模型建立方法引言全脑缺血再灌注是一种临床上常见的危重症，常见于心脏骤停、溺水等情况下，出现全脑缺血缺氧，随后通过复苏措施进行再灌注。
建立全脑缺血再灌注动物模型对于深入研究相关疾病的发病机制，评估治疗方法具有重要意义。
本文将介绍一种常用的全脑缺血再灌注动物模型的建立方法。
动物模型选择建立全脑缺血再灌注模型时，主要选择小鼠或大鼠作为实验动物。
一般情况下，小鼠更为常用，因其易于操作、成本较低，且其脑血管结构与人类相似，因此具有较高的可比性。
对于大鼠，其相对较大的体积能够更好地模拟人体情况，但操作相对较为复杂。
手术操作准备在进行全脑缺血再灌注动物模型的建立前，需要进行手术操作的准备工作。
首先需要进行动物的麻醉和固定，确保手术操作的安全性。
其次需要准备全脑缺血再灌注模型所需的仪器和设备，包括导管、监测仪器等。
在手术操作前，还需要对实验动物进行术前处理，包括禁食、定时给予抗生素等。
手术操作步骤1. 麻醉和固定：将实验动物置于麻醉箱内，使用合适的麻醉药物使其达到麻醉状态。
随后将其固定在手术台上，以确保手术操作的稳定性。
2. 手术部位暴露：在麻醉状态下，对实验动物进行皮肤消毒，随后进行手术部位的切开，暴露出颅骨表面。
3. 血管结扎：通过显微外科手术操作，对实验动物的颅骨表面的动脉和静脉进行结扎，以模拟全脑缺血的状态。
4. 缺血时间控制：根据实验设计的需要，控制全脑缺血的时间，一般为15至20分钟。
5. 再灌注：在全脑缺血一定时间后，通过解开血管结扎，使血液重新灌注至大脑。
6. 术后处理：对实验动物进行术后处理，包括给予液体、保暖、饲养等。
检测指标和评价方法建立全脑缺血再灌注模型后，需要对实验动物进行一系列的检测和评价，以评估其神经功能恢复情况。
常用的评价指标包括神经行为学评分、脑组织病理学检测、神经元凋亡检测、脑组织炎症因子检测等。
通过对这些指标的检测和评价，可以全面地评估全脑缺血再灌注模型的建立效果，为后续的实验研究提供可靠的依据。
光化学栓塞法建立缺血性脑卒中动物模型
光化学栓塞法建立缺血性脑卒中动物模型马浚宁;高俊玮;侯博儒;任海军;刘吉星;陈四化;严贵忠【摘要】背景:实验性缺血性脑卒中动物模型是研究缺血性脑卒中病理机制以及研究开发新治疗方案必不可少的工具,光化学栓塞法制作缺血性脑卒中动物模型操作简便,稳定性好,重复性高,可有针对性的控制梗死灶的位置以及大小,是研究缺血性脑卒中病理机制的良好选择.目的:建立光化学栓塞法缺血性脑卒中动物模型,对比不同性别小鼠缺血性脑卒中后梗死体积以及行为学表现的异同.方法:62只昆明小鼠依据检测内容分为病理学检测6只、梗死体积测试16只和行为学测试40只.其中病理学检测小鼠分为假手术组和模型组,各3只;梗死体积测试小鼠分为雌性模型组和雄性模型组,各8只;行为学测试小鼠分为雌性模型组、雌性假手术组、雄性模型组和雄性假手术组,各10只.模型组(含雌性模型组和雄性模型组)小鼠采用光化学栓塞法制备局部缺血性卒中模型,假手术组(含雌性假手术组和雄性假手术组)小鼠不注射孟加拉玫瑰红染料.结果与结论:尼氏染色显示模型组小鼠梗死中心出现神经元变性坏死,空泡样病理改变,Fluoro-Jade C染色可见模型组小鼠梗死中心中出现变性神经元,且雌性小鼠脑梗死体积显著小于雄性小鼠,模型组小鼠行为运动功能受损程度显著大于假手术组小鼠,其中雌性小鼠运动功能受损程度小于雄性小鼠.表明光化学栓塞法可以成功建立缺血性脑卒中动物模型,且相同条件下缺血性脑卒中对于雄性造成的神经功能损伤更为严重.【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2015(019)049【总页数】7页(P7951-7957)【关键词】实验动物模型;脑及脊髓损伤动物模型;光化学法;缺血性脑卒中;动物模型;尼氏染色;Fluoro-Jade C染色;行为学;疲劳转棒;前肢抓力;甘肃省自然科学基金【作者】马浚宁;高俊玮;侯博儒;任海军;刘吉星;陈四化;严贵忠【作者单位】兰州大学第二临床医院神经外科,甘肃省兰州市730000;兰州大学生命科学院,甘肃省兰州市730000;兰州大学第二临床医院神经外科,甘肃省兰州市730000;兰州大学生命科学院,甘肃省兰州市730000;兰州大学第二临床医院神经外科,甘肃省兰州市730000;兰州大学第二临床医院神经外科,甘肃省兰州市730000;兰州大学生命科学院,甘肃省兰州市730000;兰州大学第二临床医院神经外科,甘肃省兰州市730000;兰州大学第二临床医院神经外科,甘肃省兰州市730000;兰州大学第二临床医院神经外科,甘肃省兰州市730000【正文语种】中文【中图分类】R318文章亮点：采用光化学栓塞法建立缺血性脑卒中动物模型，并对比不同性别小鼠缺血性脑卒中后梗死体积以及行为学表现的异同，证实光化学栓塞法可以成功建立缺血性脑卒中动物模型，且相同条件下缺血性脑卒中对于雄性造成的神经功能损伤更为严重。
缺血性脑中风的动物模型研究进展
缺血性脑中风的动物模型研究进展摘要】脑中风是世界引起死亡的第二大病因，目前常用动物模型来研究脑中风。
本文详细阐述了缺血性脑中风的三类动物模型，并指出缺血性脑中风动物模型的有关问题和发展前景。
【关键词】急性缺血性脑中风动物模型【中图分类号】R322.8-3 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）06-0017-021.前言脑中风是世界引起死亡的第二大疾病，在存活的病人中，它又有高致残率。
脑中风一般可分为缺血性脑中风（占所有脑中风的85%）和出血性脑中风（占所有脑中风的15%）。
其中缺血性脑中风的定义是血流减少导致正常细胞的功能改变。
大脑组织对局部缺血非常敏感，即使神经元的短时间缺血也会引发一系列的事件，最终导致细胞的死亡。
许多的实验模型用来研究中风损伤，对细胞损伤机制的研究是在特定模型中测试各种不同处理对细胞应激和死亡的影响。
三个主要的缺血性中风动物模型是：（1）全脑缺血模型，（2）局灶性缺血模型，（3）体外研究模型。
2.全脑缺血中风模型局灶性中风模型被认为是与人脑中风模型最接近的模型。
然而，全脑缺血模型能模拟人的心搏停止和昏厥等临床症状[1]。
从一个可逆的全脑缺血模型恢复的过程中，测量生理、生化和功能等方面的因素对于识别分子和细胞机制以及潜在的神经保护剂的药理作用等方面有着重要作用。
因此全脑缺血模型可能与局灶性缺血模型一样有用。
三种最常用的全脑缺血模型是：1、大鼠四血管阻塞（4-VO）或者低血压两血管阻塞（2-VO）；2、沙鼠-2-VO；3、小鼠-2-VO。
小鼠-2-VO模型是为了研究转基因老鼠而发明的，是一个常用的模型 [1]。
另一种全脑缺血模型是通过颈部缚带，心搏停止，或者通过结扎或压紧所有的心脏动脉制造全脑缺血。
在这种模型中血流量小于1%或者为0。
由于该模型的高死亡率，并没有得到广泛的应用。
2.1大鼠全脑缺血模型四血管阻塞（4-VO）：该模型有许多优点，包括制造模型十分容易，可预测的缺血神经损伤的发病率高，惊厥的发病率低和不需要麻醉药。
大脑中动脉闭塞小鼠模型
大脑中动脉闭塞小鼠模型卒中是一种常见的神经系统致命疾病。
88%的缺血性卒中系因血管闭塞。
因为大多数缺血组中发生在大脑中动脉支配区，所以大脑中动脉为卒中小鼠模型重点。
堵塞大脑中动脉的管腔内单线模型用来模仿持久或短暂的闭塞。
这个技术不需要颅骨切除术，切除部分颅骨的外科手术会影响颅内压及体温。
这一技术已广泛应用于模拟持久和短暂局部缺血症状的小鼠。
方案：大脑中动脉闭塞模型1、将5.0单缝线剪成20mm一段，将一端加热烧圆，用显微尺测量直径。
我们最终选直径0.21—0.22mm的缝线，用于25-30g体重小鼠。
2、高压蒸汽灭菌法消毒所有手术用品。
70%乙醇消毒手术台和器械。
3、用5%异氟醚麻醉8-12周小鼠。
诱导麻醉后，将异氟醚调至1.5%小剂量维持。
4、将小鼠仰卧位至于加热板上。
插入一直肠探针，监测并维持小鼠体温在36.5-37.5℃之间。
5、颈部术区备皮。
用70%酒精清洁术区。
6、在立体显微镜下颈部正中1cm切口，拉钩暴露手术部位并找到右侧颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉，并将其与周围神经及筋膜分离。
7、进一步分离ECA远端，用双极电凝器凝固ECA和STA，于凝固点切断ECA和STA8、在ECA根部松放两根8.0丝线，在颈总动脉分叉处放置一个血管夹。
9、在ECA残端做一小切口，测量并记录圆头5.0单缝线的长度，插入小口内并向前送入夹子处。
缩紧两丝线，确保单缝线刚好能顺利进入。
10、移除血管分叉处的血管夹，轻轻向前送入单缝线，从ECA到ICA，大概超过CCA分叉处9-10mm，堵住MCA。
整个手术大概花用30-45分钟。
11、缝合颈部切口，将小鼠放置35℃保温箱中苏醒，然后放回笼中。
小鼠苏醒大概需要5-10分钟。
若需短暂性大脑中动脉闭塞模型，可在0.5-2小时后将小鼠再麻醉然后将缝线退到ECA根部。
12、诱导MCAO24小时后，5%异氟醚麻醉小鼠，颈髓离断法取出大脑。
冠切成四个2mm片，室温下将每片放置2% 2，3，5-氯三苯四唑（TTC）磷酸缓冲液中，以测定缺血面积大小。
脑卒中动物模型的建立与比较
死面积 ； 电凝 近段 ＭＣ Ａ同时合并短 时间阻塞双侧 Ｃ Ａ， Ｃ 但研 究表 明永久性结 扎 比合并 双侧 Ｃ Ａ ： ①手术在 直视 下操作 ， 梗死成 功率高 ，
在一 定程 度上 模拟 了人类 永久 性脑 梗死 ； 实验 条件 较恒 ②
中国需要 棠未 ２１年， ６ 第８ 医学 ０１ 第２卷， 期
・
综述 ・
脑 卒中动物模型的建立与 比较
陈茉 弦 敖 丽娟 李 琦 潘 芳
格， 一般为 ２ ０－ ５ ｇ②结 扎枕动脉 、 ８－ ３ ０ ； 甲状腺上 动脉 、 咽舌动 脉、 上颌 外动脉 和翼 腭动 脉有一定 的难度 ； ③该模 型其实质 也是栓塞卒 中 ， 与人类卒中存在一定的差异。
定， 缺血效 果可靠 ， 手术 中出血量 少 。其 缺点 是 ： ①需 要开 颅， 创伤性 大 ； ②不可避 免的引起脑 积液漏 ， 伤脑组织 ， 损 感 染几率大 ； 闭塞血管后无 法进 行再 灌性 损伤研究。 ③
１３ 光 化 学 法 ．
始 端 口一 大脑 前动脉 （ ｔｒ ｒｃｒｂａ ａ ｅｙ Ｃ ） ａ ｅｉ ｅｅｒｌ ￣ ｒ，Ａ Ａ 始段 。特 ｎ ｏ 制 的栓线 头端略大 ， 其直径能 与 Ｉ Ａ内径逐 渐相适 应 。Ｉ Ａ Ｃ Ｃ
１２ 开颅 电凝 法 ．
脑 卒中动物模型早期多选择 高等动物制备 ， 特别是灵长 目动物 ， 目的是更好地 模拟人类 卒 中的发生 ， 其 但是 由于易
得 性较差 ， 格 昂贵 ， 是利用小动 物特别是 啮齿类动 物制 价 于
备 脑缺 血动物 模型逐 渐受 到重视 。Ｍｈ 认 为一 个好 的脑 ａ 卒 中的动物模型必须具备 ： ①能够控制缺 血的时间 、 部位 、 程 度 ； 与脑缺 血或 出血相 关 的因素如血压 、 ② 血气 、 温 、 体 血糖 等 可被密切监视或控制 ； ③避免其他疾病 和脑 血管解剖差异 性 影响 。脑卒 中动 物模 型根 据病理性 质可分 为缺血性 脑卒 中和出血性 脑卒中两大类 ， 以下就分别 阐述各模型 的特点 。
脑卒中动物模型培训课件
脑卒中动物模型培训课件脑卒中动物模型培训课件脑卒中（cerebrovascular accident）是一种常见的神经系统疾病，其发病率和致残率在全球范围内都呈上升趋势。
为了更好地研究和治疗脑卒中，科学家们通常会使用动物模型进行实验研究。
本文将介绍脑卒中动物模型培训课件的内容，以及其在科研中的重要性和应用。
一、脑卒中动物模型的基本原理脑卒中动物模型是通过人工干预的方式，在动物体内模拟脑卒中的病理过程和临床表现。
常用的脑卒中动物模型包括大鼠、小鼠和猪等。
这些模型可以通过血栓栓塞、动脉夹闭、脑缺血再灌注等方法诱导脑卒中。
通过模拟脑卒中的发生过程，科学家们可以更好地理解疾病的机制，并寻找新的治疗方法。
二、脑卒中动物模型培训课件的内容1. 脑卒中的基础知识：在培训课件的开头，会对脑卒中的基本概念、病因和分类进行介绍。
这有助于学员对脑卒中的整体认识，为后续的实验设计和数据分析提供基础。
2. 脑卒中动物模型的建立方法：本部分会详细介绍常用的脑卒中动物模型的建立方法，包括手术操作、药物注射等。
通过图文并茂的方式，学员可以更好地理解操作步骤和注意事项。
3. 脑卒中动物模型的评估指标：在建立脑卒中动物模型后，需要对模型的成功率和损伤程度进行评估。
培训课件会介绍常用的评估指标，如神经行为学评分、组织病理学检查等。
学员可以通过掌握这些评估方法，准确地评估脑卒中动物模型的效果。
4. 脑卒中动物模型的应用：脑卒中动物模型在科研中具有广泛的应用价值。
培训课件会介绍脑卒中动物模型在脑卒中机制研究、药物筛选和治疗方法探索等方面的应用。
通过学习这些应用案例，学员可以更好地理解脑卒中动物模型在科研中的重要性。
三、脑卒中动物模型培训课件的重要性脑卒中动物模型培训课件的编制和培训对于科研人员具有重要意义。
首先，它提供了一种系统的学习方式，帮助科研人员全面了解脑卒中动物模型的建立和评估方法。
其次，它促进了科研人员之间的交流和合作，提高了研究的效率和质量。
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缺血性脑卒中研究中的动物模型
1
想要进行一项基础研究，动物模型必不可少。缺血性脑卒中研究如火如荼，动物
模型也多种多样，有哪些常用的动物模型，以及它们各自的特点就成了研究人员
在选择模型时十分关注的问题。
在缺血性卒中过程中，最终的梗死体积和神经功能预后受到多种因素的影响，例
如缺血的持续时间、缺血的严重程度、侧枝循环、系统的血压以及梗死产生的原
因和位置。此外，年龄、性别和相对复杂的药物遗传背景也会对其产生影响。因
为卒中是如此复杂的一个疾病，因而动物模型也往往只能覆盖其中个别方面的特
点。
虽然中风是一种复杂的疾病，但其存在一些共同的特点，这使得我们有机会用实
验来模拟卒中的发生。缺血性脑卒中的一个重要特点是进展，这也解释了缺血半
暗带的存在。当血流量降至基线值的15-20%以下时，只要几分钟就会产生不可
逆的脑损伤核心，并且迅速相周围发展。其周围的脑组织血流减少得相对较轻，
所以此时神经功能缺失而组织结构却是完整的。但如果脑血流不能恢复，那么这
些所谓的半暗带组织就会被纳入梗死核心区。
最常用的一种模型是啮齿动物的线拴法大脑中动脉闭塞模型（MCA），方法是将
普通的血管内缝线或特制的线拴放入大脑中动脉开口处，从而达到阻塞血管造成
血流量减少的目的。这种方法的优点是：不需要开颅的手术，并且通过拔出线拴
的方法还可以达到在特定时间再通血管的目的，虽然瞬间的血管开通与人体一般
的病理生理过程相去甚远，但与近来应用越来越广泛的机械取栓治疗的病理过程
不谋而合。因此，虽然在模型的制作上存在一些问题，但仍是目前最广受认可的
一种脑卒中动物模型。
另一种常用的方法是用各种方式直接地闭塞血管，分为永久地闭塞血管（如凝断）
和暂时闭塞血管（如结扎），但大多都需要开颅的手术操作。
使用内皮素－1（一种强血管收缩剂）可以诱导短暂的局灶性脑缺血，其产生的
病灶可以分布于脑组织任何位置，常常被用于制作腔隙性梗死的模型制作。
光化学法是在系统给予荧光物质后，用可穿透颅骨的光线，激活特定脑区的荧光
剂，从而达到局部梗死的目的。这种方法可以做到高度的可重复性，并且病灶可
以相当局限。但缺点是这种方法制作的模型缺乏缺血半暗带，因而不能很好地模
拟某些病理生理变化。
另外还有血栓栓子模型和栓塞微球模型，这两种方式与实际临床病理生理过程更
为相近，但同时也有梗死位置变异性大，并且有不可预知的血管再通等问题。
尽管有如此众多的动物模型，但由于模式动物本身和人有诸多差异，在许多结构
和功能上都不能完全模拟。随着对脑功能研究的进一步深入，这些简单的动物模
型将不适用于许多高级神经功能的研究。诸如卒中后认知功能损伤、神经精神症
状、抑郁、睡眠呼吸暂停等常见的卒中后并发症的研究均在不同程度上因为缺少
有效的动物模型而受到阻碍。而这也将是卒中动物模型进一步发展所要解决的问
题。
1. Sommer, C.J. Ischemic stroke: experimental models and reality. Acta
Neuropathol 133, 245-261 (2017).