植物组织中可溶性糖含量测定
设计性实验报告植物可溶性蛋白质和糖含量的测定
设计性实验报告题目植物可溶性蛋白质和糖含量的测定课程名称：基础生物化学实验实验学期：2011至2012学年第一学期植物组织中可溶性蛋白质和糖含量的测定摘要本文以生菜、苹果为材料，采用考马斯亮蓝法（蛋白质）、蒽酮法（糖）、分光光度计法进行了可溶性糖和可溶性蛋白含量的测定。
结果表明：生菜的蛋白质含量为5.88（mg/g），糖含量为0.0739g/100g；苹果中蛋白质含量为0.2926（mg/g），糖含量为0.2126g/100g。
即说明：生菜中蛋白质含量高于苹果，但苹果中的糖含量更高。
关键词可溶性蛋白、可溶性糖，考马斯亮蓝G-250染色法，蒽酮法，含量测定1、材料与方法1.1 蛋白质含量测定标准蛋白质溶液、考马斯亮蓝试剂、生菜、苹果分光光度计、离心机、研钵、烧杯、电子秤、移液管、试管等1.2 糖含量测定200ug/ml标准葡萄糖、蒽酮试剂、浓硫酸、生菜、苹果试管、水浴锅、分光光度计、研钵、电子秤、移液管、量筒、试管架2、实验步骤蛋白质含量的测定（考马斯亮蓝G-250染色法）2.1标准曲线的绘制取六只试管，按下表加入试剂，摇匀，向个管加入5ml考马斯亮蓝试剂，摇匀，并放置5min左右，以0号试管为空白对照，在595nm下比色测定吸光度。
以蛋白质含量为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
2.2样品测定2.2.1样品提取分别秤取生菜、苹果鲜样 0.25～0.5g，用5ml蒸馏水或缓冲液研磨成匀浆后，3000r/min离心10min，上清液备用。
2.2.2 吸取样品提取液1.0ml（蛋白质含量适当稀释），放入试管中，加入5ml考马斯亮蓝试剂，摇匀，放置2min后在595nm下比色，测定吸光度，并通过标准曲线查得蛋白质含量。
糖含量测定2.3.葡萄糖标准曲线的制作取6支20ml具寒试管，编号，按下表数据配制一系列不同浓度的标准葡萄糖溶液。
在每管中均加入0.5ml蒽酮试剂，再缓慢地加入5ml浓H2SO4，摇匀后，打开试管塞，置沸水浴中煮沸10分钟，取出冷却至室温，在620nm波长下比色，测各管溶液的光密度值（OD），以标准葡萄糖含量为横坐标，光密度值为纵坐标，作出标准曲线。
植物体内可溶性糖和可溶性蛋白含量的测定
学生设计性实验论文题目：植物体内可溶性糖和可溶性蛋白含量的测定姓名魏会会学号2012132119专业生物技术班级123班相关实验课程名称基础生物化学实验指导老师单树花实验学期2013~2014学年第二学期植物体内可溶性糖和可溶性蛋白含量的测定摘要：目的通过标准曲线的绘制，测定白菜、芹菜、菠菜中可溶性蛋白和可溶性糖的含量，了解可溶性糖和可溶性蛋白的测定方法。
方法分别用蒽酮法和考马斯亮蓝染色法来测定植物体内可溶性糖和可溶性蛋白的含量。
结论关键词：白菜；芹菜；菠菜；可溶性蛋白含量；可溶性糖含量；蒽酮法；考马斯亮蓝染色法1 引言植物体内的可溶性糖和可溶性蛋白含量是重要的生理生化指标。
在作物的碳素营养中，作为营养物质主要是指可溶性糖和淀粉。
它们在营养中的作用主要有：合成纤维素组成细胞壁；转化并组成其他有机物如核苷酸、核酸等；分解产物是其他许多有机物合成的原料，如糖在呼吸过程中形成的有机酸，可作为NH 3 的受体而转化为氨基酸；糖类作为呼吸基质，为作物的各种合成过程和各种生命活动提供了所需的能量。
由于碳水化合物具有这些重要的作用，所以是营养中最基本的物质，也是需要量最多的一类。
可溶性蛋白是植物体内氮素存在的主要形式，其含量的多少与植物的代谢和衰老有密切的关系，同时它与植物体维持渗透压抗脱水也有很大关系。
白菜是十字花科芸薹属叶用蔬菜，味道鲜美可口，营养丰富，素有“菜中之王”的美称，为广大群众所喜爱。
芹菜属伞形科植物，富含蛋白质、碳水化合物、胡萝卜素、B族维生素、钙、磷、铁、钠等，同时，具有有平肝清热，祛风利湿，清肠利便、润肺止咳、降低血压、健脑镇静的功效。
菠菜藜科一年生草本植物，菠菜含有丰富的维他命A、维他命C及矿物质，它对各种贫血症和糖尿病、肺结核、高血压、风火赤眼等诸多疾病可起辅助治疗作用。
2 材料与方法2.1 植物体内可溶性糖含量的测定2.1.1材料新鲜的白菜、芹菜、菠菜叶片（剪碎后各取0.5—1.0g）2.1.2试剂葡萄糖标准溶液（200ug/ml)、蒽酮试剂2.1.3仪器设备分光光度计；分析天平；恒温水浴；试管；三角瓶；移液管；剪刀；玻璃棒；滤纸；研钵2.1.4测定方法样品中可溶性糖的提取：称取剪碎混匀的新鲜样品0.5 ～1.0 g （或干样粉5～100 mg ），放入大试管中，加入15 ml 蒸馏水，在沸水浴中煮沸20 min，取出冷却，过滤入100 ml 容量瓶中，用蒸馏水冲洗残渣数次，定容至刻度。
设计性实验报告植物可溶性蛋白质和糖含量的测定
设计性实验报告题目植物可溶性蛋白质和糖含量的测定课程名称：基础生物化学实验实验学期：2011至2012学年第一学期植物组织中可溶性蛋白质和糖含量的测定摘要本文以生菜、苹果为材料，采用考马斯亮蓝法（蛋白质）、蒽酮法（糖）、分光光度计法进行了可溶性糖和可溶性蛋白含量的测定。
结果表明：生菜的蛋白质含量为5.88（mg/g），糖含量为0.0739g/100g；苹果中蛋白质含量为0.2926（mg/g），糖含量为0.2126g/100g。
即说明：生菜中蛋白质含量高于苹果，但苹果中的糖含量更高。
关键词可溶性蛋白、可溶性糖，考马斯亮蓝G-250染色法，蒽酮法，含量测定1、材料与方法1.1 蛋白质含量测定标准蛋白质溶液、考马斯亮蓝试剂、生菜、苹果分光光度计、离心机、研钵、烧杯、电子秤、移液管、试管等1.2 糖含量测定200ug/ml标准葡萄糖、蒽酮试剂、浓硫酸、生菜、苹果试管、水浴锅、分光光度计、研钵、电子秤、移液管、量筒、试管架2、实验步骤蛋白质含量的测定（考马斯亮蓝G-250染色法）2.1标准曲线的绘制取六只试管，按下表加入试剂，摇匀，向个管加入5ml考马斯亮蓝试剂，摇匀，并放置5min左右，以0号试管为空白对照，在595nm下比色测定吸光度。
以蛋白质含量为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
蛋白质含0 20 40 60 80 100量（ug）2.2样品测定2.2.1样品提取分别秤取生菜、苹果鲜样 0.25～0.5g，用5ml蒸馏水或缓冲液研磨成匀浆后，3000r/min离心10min，上清液备用。
2.2.2 吸取样品提取液1.0ml（蛋白质含量适当稀释），放入试管中，加入5ml考马斯亮蓝试剂，摇匀，放置2min后在595nm下比色，测定吸光度，并通过标准曲线查得蛋白质含量。
糖含量测定2.3.葡萄糖标准曲线的制作取6支20ml具寒试管，编号，按下表数据配制一系列不同浓度的标准葡萄糖溶液。
在每管中均加入0.5ml蒽酮试剂，再缓慢地加入5ml浓H2SO4，摇匀后，打开试管塞，置沸水浴中煮沸10分钟，取出冷却至室温，在620nm波长下比色，测各管溶液的光密度值（OD），以标准葡萄糖含量为横坐标，光密度值为纵坐标，作出标准曲线。
植物组织中可溶性糖和
实验十三、植物组织中可溶性糖和淀粉含量的测定——硫酸蒽酮法一、实验目的和意义可溶性糖和淀粉是粮食作物、蔬菜和水果中C素营养的主要营养物质。
糖类作为呼吸基质，为植物的各种合成过程和各种生命活动提供所需的能量，因此通过测定植物组织中可溶性糖和淀粉的含量可以在一定程度上了解植物各组织器官中的营养状况。
测定植物组织中可溶性糖的方法有苯酚法、蒽酮法；测定植物组织中淀粉含量方法有酮法、双波长法、农业部法和国标法。
二、实验方法原理（硫酸蒽酮法）淀粉是由葡萄糖残基组成，在酸性条件下加热使其水解成葡萄糖，然后在浓硫酸的作用下，使单糖脱水生成糠醛类化合物，利用蒽酮试剂与糠醛化合物的显色反应，即可进行比色测定。
1 实验方案高氯酸（2次提取）蒽酮试剂样品中淀粉葡萄糖80%乙醇蒽酮试剂样品可溶性糖浸提液2 显色原理可溶性糖类遇浓硫酸，就会脱水形成羟甲基糠醛，羟甲基糠醛与蒽酮再脱水，形成蓝绿色的糠醛衍生物，其颜色深浅与含糖量高低成正相关。
该蓝绿色在620nm波长处有最大吸收值，故可进行比色测定。
己糖羟甲基糠醛糠醛衍生物（蓝绿色）蒽酮（本法适于测定己糖、蔗糖和可溶性淀粉）3 仪器药品（1）仪器：分光光度计；天平（万分之一）；离心管（4000转/分）；恒温水浴；容量瓶；试管（25*200mm）；移液管（5、1、0.5ml）；量筒；水浴锅；电炉；漏斗；滤纸。
（2）药品：80%乙醇；标准葡萄糖（100ug.l-1）；准确称取100mg分析纯无水葡萄糖，溶于蒸馏水并定容至100ml，使用时再稀释10倍；蒽酮试剂：称取200mg蒽酮，溶于100ml浓硫酸（比重1.84）中，冷却至室温，贮存在棕色瓶内，当天配制当天使用；9.2mol.l-1和4.6mol.l-1高氯酸。
4 测定方法（1）样品中可溶性糖提取对于淀粉含量高的样品，要用80%的乙醇提取。
称取0.1g粉碎过100目筛的烘干样品，置于10ml离心管中，加入6-7ml 80%乙醇，在80℃水浴中提取30分钟，取出离心（3000转/分）5分钟，收集上清夜。
实验8 植物可溶性糖的测定
测定蔗糖
不预处理
间苯二酚比色法
测定果糖
葡萄糖氧化酶法
测定葡萄糖
利用实验间隙，观看视频材料：
《用一种生物材料设计一组生物实验的方法》
1、应用此法测得的糖具体包括哪几种糖类？
2、用此法测定时，什么样的材料需要用活性碳脱色？
3、请设计一实验，用本实验获得的同一份提取液在测 定可溶性糖含量的同时，一并测定蔗糖、葡萄糖和果 糖？这种测定方法比分别测定有什么优点？
蒽酮比色法
测定可溶性总糖
同 一 份 乙 醇 抽 提 液
预处理
间苯二酚比色法
3 绘制标准曲线：取标准葡萄糖溶液将其 稀释0、20、40、60、80μg/mL系列浓度， 按上述方法分别测其OD值，绘制标准曲线。
计算：
V 为植物样品提取液的体积 C 为提取液糖的浓度 W 为植物样重或为颗粒数 可溶性糖 % = CV/W 同一种子类型之间按每粒种子 计算
实验结果：
实验八
植物可溶性糖的测定
实验原理
糖在硫酸作用下生成糠醛，糠醛再 与蒽酮作用生成绿色络合物，颜色 的深浅与糖含量有关，在625 nm波 长下OD值与糖含量成正比，由于蒽 酮试剂与糖反应的呈色强度随时间 变化，故必须在反应后立即在同一 时间内比色。
实验材料
小麦干种子 小麦萌发种子 萝卜干种子 萝卜萌发种子 均为市售，萌发条件为25℃ 下黑暗萌发3天。
实验步骤
1 可溶性糖的提取：
分别取2粒干种子和萌发种子于研 钵中，加80%乙醇少许，磨成匀浆，倒 入大试管中， 再用80%乙醇洗涤，水浴 80℃半小时，冷却后转移至10ml量筒， 并用80%乙醇定容至10ml。过滤，所得 的透明液体即为可溶性糖提取液。
植物组织中可溶性糖与淀粉的测定
植物组织中可溶性糖与淀粉的测定一、蒽酮法测定可溶性糖【仪器与器具】分光光度计；电炉；铝锅； 20ml 刻度试管；刻度吸管 5ml 1 支，1ml 2 支；记号笔；吸水纸适当。
【试剂】1．蒽酮乙酸乙酯试剂：取剖析纯蒽酮 1g，溶于 50ml 乙酸乙酯中，贮于棕色瓶中，在黑暗中可保留数礼拜，若有结晶析出，可微热溶解。
2．浓硫酸（比重）。
【方法】1．标准曲线的制作取 20ml 刻度试管 11 支，从 0～10 分别编号，按表 24-1 加入溶液和水。
表 1各试管加溶液和水的量管号01～23～45～67～89～10100μg/ml 蔗糖液(ml)水(ml)蔗糖量 ( μg)020*********而后按次序向试管内加入 1ml 9%苯酚溶液，摇匀，再从管液正面迅速加入 5ml 浓硫酸，摇匀。
比色液整体积为 8ml，在恒温下搁置30min，显色。
而后以空白为参比，在 485nm波长下比色测定，以糖含量为横坐标，光密为纵坐标，绘制标准曲线，求出标准直线方程。
按表 1 加入标准的蔗糖溶液，而后按次序向试管中加入蒽酮乙酸乙酯试剂和 5ml 浓硫酸，充足振荡，立刻将试管放入开水浴中，逐管均正保证温 1min，拿出后自然冷却至室温，以空白作参比，在630nm 波长下测其光密度，以光密度为纵坐标，以糖含量为横坐标，绘制标准曲线，并求出标准线性方程。
2．可溶性糖的提取取新鲜植物叶片，擦净表面污物，剪碎混匀，称取～ 0.30g ，共 3 份，或干资料。
分别放入3 支刻度试管中，加入5～10ml 蒸馏水，塑料薄膜封口，于开水中提取 30min（提取 2 次），提取液过滤入 25ml 容量瓶中，频频冲刷试管及残渣，定容至刻度。
3．显色测定汲取样品提取液于20ml 刻度试管中（重复 2 次），加蒸馏水，以下步骤与标准曲线测定同样，测定样品的光密度。
4．计算可溶性糖的含量VC n可溶性糖含量 (mg/g)= W 103式中 C －标准方程求得糖量 ( μg) ；a－汲取样品液体积 (ml) ；V－提取液量 (ml) ；n－稀释倍数；W－组织重量（ g）。
可溶性糖测定
引言可溶性糖包括葡萄糖、果糖、蔗糖等单糖和双糖，是植物品质的重要构成性状之一，尤其是以果实为目的产品的植物，可溶性糖与酸的含量及其配比是影响果实风味品质的重要因素。
对于鲜食品种，一般来讲，高糖中酸，风味浓，品质优；低糖中酸，风味淡，品质差。
因此，可溶性糖的定量研究对植物的品质育种、储藏、加工特性等具有重要意义。
而且可溶性糖广泛存在于植物的根、茎块和种子中，是人体热量的最最主要来源，具有较高的营养价值。
本文重点介绍蒽酮比色法、铜还原碘量法、费林试剂法、原子吸收法、气相色谱法、液相色谱-蒸发光散射法，及连续流动法这几种实验如何定量测定可溶性糖含量。
1 蒽酮比色法1.1 原理糖在硫酸作用下生成糠醛，糠醛再与蒽酮作用形成绿色络合物，颜色的深浅与糖含量有关。
在625 nm波长下的OD值与糖含量成正比。
由于蒽酮试剂与糖反应的呈色强度随时间变化，故必须在反应后立即在同一时间内比色。
1.2 仪器与材料1.2.1实验仪器分光光度计，电炉，铝锅，电子天平，20ml刻度试管，刻度吸管5ml 1支、1ml 2支，漏斗。
1.2.2实验试剂（1）蒽酮乙酸乙酯试剂：取分析纯蒽酮1g，溶于50ml乙酸乙酯中，贮于棕色瓶中，在黑暗中可保存数星期，如有结晶析出，可微热溶解。
（2）浓硫酸（比重1.84）。
1.2.3实验材料植物叶片。
1.3 实验方法1.3.1标准曲线的制作取20ml刻度试管11支，从0～10分别编号，按表24-1加入溶液和水。
然后按顺序向试管内加入1ml 9%苯酚溶液，摇匀，再从管液正面快速加入5ml浓硫酸，摇匀。
比色液总体积为8ml，在恒温下放置30min，显色。
然后以空白为参比，在485nm 波长下比色测定，以糖含量为横坐标，光密为纵坐标，绘制标准曲线，求出标准直线方程。
按表1加入标准的蔗糖溶液，然后按顺序向试管中加入0.5ml蒽酮乙酸乙酯试剂和5ml浓硫酸，充分振荡，立即将试管放入沸水浴中，逐管均准确保温1min，取出后自然冷却至室温，以空白作参比，在630nm波长下测其光密度，以光密度为纵坐标，以糖含量为横坐标，绘制标准曲线，并求出标准线性方程。
植物可溶性糖检测
植物可溶性糖检测
可溶性糖（soluble sugar）是指在生物细胞内呈溶解状态，可被水和其他极性溶剂提取出来的糖，单糖和寡糖均为可溶性糖。
植物可溶性糖，如葡萄糖、蔗糖等，不仅可促进植物种子萌发和早期幼苗的发育，还可调节植物衰老、叶片形成、果实成熟等过程。
迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)和生化法，可高效、精准的检测植物可溶性糖的含量变化。
对于稀有的糖代谢物，如提供标准样品，迪信泰检测平台可提供定制检测。
对于无法用HPLC检测的样品，迪信泰检测平台可提供定制检测或试剂盒代测定服务。
此外，我们还提供其他糖代谢物检测服务，以满足您的不同需求。
样品制备
糖代谢物提取方法（此部分涉及到公司的核心工艺，以下提供常规的提取工艺）
1）称取500 mg的固体样品；
2）加入5 mL去离子水；
3）超声处理30 min；
4）取2 mL，用乙腈定容至10 mL；
5）用HPLC-ELSD检测。
HPLC测定植物可溶性糖样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）
2. 相关质谱参数（中英文）
3. 质谱图片
4. 原始数据
5. 植物可溶性糖含量信息。
植物组织中可溶性糖、淀粉、氨基酸及蛋白质的系列测定
实验四植物组织中可溶性糖、淀粉、氨基酸及蛋白质的系列测定一、目的从一份植物样品中系统分离和测定可溶性糖、淀粉、氨基酸及蛋白质等多种成分，不仅对研究植物体内碳、氮代谢，了解植物的生长发育状况有重要意义，亦可以作为鉴定其品质的重要指标，而且也有助于训练基本操作技能。
二、原理（一）分离提取原理在80-85%的乙醇中，植物组织中的还原糖、蔗糖以及游离氨基酸和叶绿素等溶解，而淀粉及蛋白质沉淀，再用9.2 mol/L高氯酸溶解淀粉（蛋白质沉淀），最后用0.1 mol/L氢氧化钠溶解蛋白质，然后选用适当的方法测定各个提取液中相应物质的含量。
（二）测定原理1.蒽酮比色法——可溶性糖含量测定碳水化合物及其衍生物经浓硫酸处理，生成糠醛，再与蒽酮脱水缩合而生成蓝绿色化合物，在一定范围内其颜色深浅与碳水化合物含量成线性关系。
蒽酮反应的颜色深浅，随温度条件和加热时间而变化，葡萄糖显色高峰在100℃时，加热10 min后出现，而核糖在相同温度下，加热3 min后出现。
此法灵敏度高，糖含量达30 μg即可测定。
2.茚三酮比色法——氨基酸含量测定氨基酸的游离氨基与水合茚三酮作用后，产生二酮茚胺的取代盐等蓝紫色化合物，在570 nm下有最大光吸收。
在一定范围内，其颜色深浅与氨基酸的含量呈正比。
3.考马斯亮蓝G-250结合法——蛋白质含量测定考马斯亮蓝在游离状态时呈红色，当与蛋白质结合后变为蓝色，后者最大光吸收在595 nm，在一定范围内（0-1000 μg /mL），其颜色深浅与蛋白质的含量呈正比。
此法快速灵敏，反应在2 min内即达到平衡，室温1h内颜色稳定，而且干扰物也少。
三、实验用品（一）实验材料：植物样品。
（二）器皿：1. 25 mL刻度试管⨯8 ，15 mL试管⨯20；2. 10 mL离心管⨯2；3. 容量瓶：50 mL⨯1 ，25 mL⨯1；4. 移液管：5 mL⨯2，2 mL⨯4，1 mL⨯2，0.1 mL⨯2；5. 恒温水浴锅；6. 离心机；7. 电子天平；8. 分光光度计。
植物样蔗糖,淀粉,可溶性总糖测定
植物样蔗糖，淀粉，可溶性总糖测定蔗糖，淀粉，可溶性总糖测定0.1g干样品（通过100目筛）8ml 80%乙醇80℃水浴冷却30min2000rpm离心20min残渣8ml80%乙醇80℃水浴30min冷却2000rpm离心20min残渣8ml 80%乙醇80℃水浴冷却30min2000rpm离心20min残渣80℃烘干冷却加入2毫升蒸馏水沸水浴20min，不断搅动如果测定是植物样品，向上清液中加入少量活性炭，过滤，然后固定体积。
将上清液混合至50ml的恒定体积，测定总可溶性糖，并在0.1ml2NaOH中吸收0.9ml提取物沸水浴10min吸取1.0ml提取物+1.0ml水4ml摇匀2%蒽酮试剂（用浓硫酸配制）冷却冷却15分钟，沸水浴2ml9 2nhclo41ml0.1%间苯二酚10min不断振荡3ml 10nhcl水6ml冷却80℃水浴60min2000rpm离心25分钟冷却残渣比色法OD620比色法od5002ml4 6nhclo4与上清液混合10分钟，连续摇匀定容至50ml，加入6ml水过滤淀粉的测定（与总可溶性糖的测定方法相同）残渣（注：① 加入蒽酮试剂时，将试管置于冷水浴中；② 用0.9ml蒸馏水+0.1ml2NaOH+1ml0测量蔗糖。
1%间笨二酚+3ml10nhcl作参比；③测可溶性糖用2ml蒸馏水+4ml蒽酮试剂作参比。
）弃去我们也在用同样的方法制作同样的样品。
1：保证每管中加入的5ml（可以使用大肚管）0.2%蒽酮硫酸溶液与3.0ml（可以使用5ml的刻度管，但是必须标定）必须准确！2：确保每根管子的反应时间完全为6分钟（用秒表计算，差值为正负3秒）。
这可以由两个人来协调。
3：摇动时，尽量将溶液混合均匀。
如果不能在短时间内均匀混合，建议摇晃40秒-1分钟。
4：从振荡开始到吸光度测量结束的时间必须控制在30分钟以内（根据标准为20-40分钟）。
5：0.2%蒽酮硫酸溶液必须在实验前就配制好，由于硫酸的密度较大，建议在样品配制好以前1小时配制好，加入试管时一定要摇匀。
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实验报告
课程：植物生理学实验题目：植物组织中可溶性糖含量的测定一.【实验原理】
植物的代谢活动随着植物的发育过程而不断发生着变化，碳水化合物的代谢也不例外，其含量也随之发生变化，在种子萌发过程中，在光合作用受到影响时和受到外界环境的胁迫等情况下植物可溶性糖含量都会发生变化。
了解植物可溶性糖含量的变化，在生理上与实践上都有重要意义。
蒽酮比色法是常用的测定可溶性五碳糖和六碳糖的方法，糖在硫酸的作用下脱水生成糠醛，糠醛再与蒽酮作用形成一种绿色的络合物，在一定的浓度范围内颜色的深浅与糖含量成正比，可以用比色法测定。
该法简便，但没有专一性，绝大部分的碳水化合物都能与蒽酮反应产生颜色。
二.【实验步骤】
1、标准曲线的绘制
2、可溶性糖的提取
3、提取液的显色及比色
三.【实验结果】
实验中测得的数据如下所示：
若以1号管调零，处理后数据如下：
作出标准曲线如下：
将y=0.261，0.269，0.247分别代入上述函数公式，得到：
x=45.000，46.379，42.586；
即三样品溶液中糖浓度分别为：45.000μg／mL，46.379μg／mL，42.586μg／mL。
样品中可溶性糖含量（m g·g-1）= A × c／(W × 103)
式中，
A——植物样品稀释后的体积（mL）；
C——提取液的含糖量（μg／mL）；
W——植物组织鲜重（g）。
四.【讨论】
1、误差分析
实验中的误差来源主要有：
(1)植物材料称取的误差；
(2)植物样品在转移过程中的损失；
(3)最后过滤得到的提取液中尚有未除尽的醋酸铅；
(4)移液管未润洗等等。
2、注意事项
(1)样品提取液的显色应与标准曲线的绘制同步；
(2)比色时以蒸馏水调零；
(3)醋酸铅一定要除尽；
(4)在样品转移过程中，尽量减少材料的损失；
(5)进行第二次过滤时要更换滤纸，并将漏斗洗净。
3、植物组织中糖的测定方法还有很多种，举例说明它们的原理和优缺点。
(1)苯酚-硫酸法
原理：糖在浓硫酸作用下，脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10~100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485nm 波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。
苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定，方法简单，灵敏度高，实验时基本不受蛋白质存在的影响，并且产生的颜色稳定160min以上。
(2)蒽酮-硫酸法
多糖在浓硫酸水合产生的高温下迅速水解，产生单糖，单糖在强酸条件下与苯酚反应生成橙色衍生物。
在波长490nm左右处和一定浓度范围内，该衍生物的吸收值与单糖浓度呈线性关系，从而可用比色法测定其含量。
要求所用的单糖对照品尽量采用与其多糖组成一致或为含量较高的单糖，这样测得的值才较准确。
(3)3，5-二硝基水杨酸比色法（DNS法）
在碱性条件下显色，较准确测定还原糖与总糖的含量从而求出多糖的含量，可消除还原性杂质的干扰。
(4)分光光度计测糖浓度
先用标准糖试剂用蒸馏水配成已知的标准溶液，分别在分光光度计上测定其在一定波长处的光密度。
以光密度为横坐标，浓度为纵坐标，作标准曲线。
然后
分光光度计上测未知糖溶液的光密度，在标准直线上找到该光密度相对应的浓度。
操作简便，但对糖的纯度要求较高。
(5)旋光法
取溶液，用分光计测定其旋光度，查表得到其旋光率，按公式可求糖浓度。
对糖的纯度及单一性要求较高。
(6)高效液相色谱测糖浓度
高效液相色谱法又叫做高压或高速液相色谱、高分离度液相色谱或近代柱色谱,以液体为流动相，采用高压输液系统，是色谱法的一个重要分支。
它是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入待测样品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。
操作过程复杂，时间长。
(7)直接滴定法（还原糖的测定）
样品经除去蛋白质后，在加热条件下，直接滴定标定过的碱性酒石酸铜液，以次甲基蓝作指示剂，根据样品液消耗体积，计算还原糖量。
只能测定还原糖的含量，具有局限性。
4、制作标准曲线应注意哪些问题？
(1)样品提取液的显色应与标准曲线的绘制同步；
(2) 沸水浴结束后要经冷却再进行比色；
(3) 比色时以蒸馏水调零；
(4) 以糖浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标绘制标准曲线；
(5) 添加趋势线时设置截距为零。