黄精药材中黄精多糖的含量测定
黄精多糖的分离、鉴定及免疫调节功效研究
・2944・光明中医2019年10月第34卷第19期CJGMCM October2019.Vol34.19【实验研究】黄精多糖的分离、鉴定及免疫调节功效研究**基金项目：开封市科技发展计划项目(No.1703008)作者单位：河南大学第一附厲医院营养科(河南开封475001)余亚英摘要:黄精是一种药食同源的中草药，经过研究发现,黄精多糖含有多种活性成分，能增强免疫力、抗衰老、抗动脉粥样硬化、降血糖、降血脂、抗肿瘤等，医学对于黄精多糖的研究已经比较丰富，但对于黄精多糖的结构、对细胞的免疫调节作用研究的篇章较少，文章以黄精多糖为研究对象，研究黄精多糖的分离、鉴定、免疫调节作用。
关键词：黄精多糖；分离；鉴定；免疫调节功效；实验研究doi：10.3969/j.issn.1003-8914.2019.19.017文章编号：1003-8914(2019)-19-2944-02黄精是一种中草药⑷，是百合科黄精属植物，种类繁多，常见以根茎入药，能提高人体的免疫功能⑵，能补气、润肺、健脾，还可以抗衰老、抗动脉粥样硬化、降血糖、降血脂、抗肿瘤等⑶，研究黄精所含黄精多糖的结构，对细胞免疫调节作用具有重要的意义⑷，本文以研究黄精多糖的分离、鉴定及免疫调节功效为主题，现报道如下。
1黄精多糖的分离与鉴定1.1材料与试剂实验材料黄精，购买于河南的药材市场；使用莱阳经济技术开发区精细化工厂研制的硫酸，北京索莱宝科技公司生产的DPPH、DEAE-Sepharose Fast Flow、ABTS,美国Sigma公司生产的甘露糖、葡萄糖、木糖、鼠李糖、半乳糖、PMP。
1.2仪器上海天宇新企业发展有限公司生产的多功能粉碎机、日本岛津的GC-17AATF气相色谱仪，Alpha l-2LDplus牌的冷冻干燥机，北京浦西通用仪器公司生产的紫外可见分光光度计(TU-1900)。
1.3实验方法1-3.1黄精多糖的提取取适量的干燥黄精为实验材料，将黄精研磨粉碎，并过30目筛，然后再碾碎以后的黄精中加入相当于黄精10倍剂量的95%的乙醇溶液，进行回流提取1h,收集滤渣，进行干燥处理。
黄精炮制辅料的优选
豆、蜜）进行炮制，通过对炮制品感官性状
10h，置蒸制容器内，蒸制一定时间后，使药
（5）各炮制品感官性状比较。在保持 的比较结合含糖量及浸出物的比较之后
物里面和外面都呈棕黑色时，取出晾凉， 润焖时间与炮制时间相一致的前提下，分 相对较优的辅料是酒。综上所述，对于黄
置干燥箱内干燥。
别选用不同的辅料（酒、蔓荆子、黑豆、熟 精来说，酒为黄精较优的炮制辅料，酒在
燥，备用。
见分光光度法测定的其吸光度，绘制标准
（2）加酒炮制。
曲线。
取药材，按照药材和辅料 5：1 的比例
（3）供试品溶液制备。精密称取 0.25g
加入黄酒，搅拌均匀，闷润 10h，置蒸制容 黄精细粉，置于干燥箱内干燥至恒重，温
器内，蒸制一定时间，酒被药材吸尽，药材 度调至 60℃，然后将其放在烧瓶中，在向
加入蔓荆子汁搅拌均匀后，闷润 10h，置蒸 流约 1h，热滤，清洗掉残渣。然后在放入烧 本实验将不同辅料炮制的黄精饮片的横
制容器内，蒸制一定时间，使药物里面和 瓶，向烧瓶加热水 4 次，每次 10ml，将滤液 断面的色泽、麻舌感、甜味、透明程度以及
外面都呈棕褐色时，取出晾凉，置干燥箱 与洗涤液混合，冷却，转移至 25ml 的容量 酸味等作为性状评判指标。黄精炮制后酸
（2） 绘制标准曲线。分别取 0.1ml、 0.2ml、0.3ml、0.4ml、0.5ml、0.6ml 的 标 准 溶 液，分别放入具塞的 10ml 的试管中，加水
由表 1 可知，黄精药材中多糖含量很 高，经过炮制后多糖含量会有不同程度的 下降。同一批次黄精，加入不同辅料炮制 后，多糖含量变化的规律如下：酒黄精﹥ 蔓荆子制黄精﹥黑豆制黄精﹥蜜制黄精， 浸出物含量的规律如下：酒黄精﹥蜜制黄 精﹥黑豆制黄精﹥蔓荆子制黄精。
不同炮制方法对黄精多糖含量的影响
不同炮制方法对黄精多糖含量的影响瞿昊宇;冯楚雄;谢梦洲;朱建平;孙毅中;崔培梧;肖作为【摘要】目的探究湖南本土种植及加工的鸡头黄精、多花黄精采用不同炮制方法对黄精多糖含量的影响. 方法超声提取法提取多糖,用 Sevage 法除去蛋白,采用苯酚-硫酸法测定多糖含量.结果鸡头黄精经二蒸二晒、四蒸四晒、七蒸七晒、九蒸九晒炮制后,多糖含量分别为7.973%、3.584%、2.845%、2.194%;多花黄精经二蒸二晒、四蒸四晒、五蒸五晒、七蒸七晒炮制后,多糖含量分别为9.602%、3.185%、2.572%、2.043%;精密度良好(RSD=0.274%)、平均回收率99.29%、试验在60 min内稳定性良好(RSD=1.36%). 结论炮制过程蒸晒次数越多,黄精多糖含量越少.%Objective To explore different processing methods on polysaccharide content of Polygonatum sibiricum Red. and Polygonatum cyrtonema Hua, which cultivated and processed in Hunan. Methods The polysaccharidewas extracted by ultrasonic extraction and the protein was removed by Sevage's method. The content of polysaccharide was determined by phenol-sulfuric acid method. Results The polysaccharide content of Polygonatum sibiricum Red. with different times of steaming and drying processing methods were 7.973%, 3.584%, 2.845%, 2.194%, and the polysaccharide content of Polygonatum cyrtonema Hua with different processing methods were 9.602%, 3.185%, 2.572%, 2.043%; The precision was good (RSD=0.274%); The average recovery rate was 99.29%; the test has good stability in 60min (RSD=1.36%). Conclusion The content of polysaccharide was reduced with the more times of steaming and drying processing methods.【期刊名称】《湖南中医药大学学报》【年(卷),期】2015(035)012【总页数】3页(P53-55)【关键词】黄精;多花黄精;黄精多糖;炮制;苯酚-硫酸法;酶标仪【作者】瞿昊宇;冯楚雄;谢梦洲;朱建平;孙毅中;崔培梧;肖作为【作者单位】湖南中医药大学中医诊断学重点学科,湖南长沙 410208;湖南省药食同源功能性食品工程技术研究中心,湖南长沙 410208;湖南中医药大学中医诊断学重点学科,湖南长沙 410208;湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室,湖南长沙 410208;湖南省药食同源功能性食品工程技术研究中心,湖南长沙 410208;湖南中医药大学中医诊断学重点学科,湖南长沙 410208;湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室,湖南长沙 410208;湖南省药食同源功能性食品工程技术研究中心,湖南长沙 410208;湖南中医药大学中医诊断学重点学科,湖南长沙 410208;湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室,湖南长沙 410208;湖南省药食同源功能性食品工程技术研究中心,湖南长沙 410208;新化绿源农林科技有限公司,湖南娄底 417000;湖南省药食同源功能性食品工程技术研究中心,湖南长沙 410208;湖南中医药大学药学院,湖南长沙 410208;湖南省药食同源功能性食品工程技术研究中心,湖南长沙 410208;湖南中医药大学药学院,湖南长沙 410208;湖南省药食同源功能性食品工程技术研究中心,湖南长沙 410208【正文语种】中文【中图分类】R283;R575.54黄精为百合科植物滇黄精Polygonatum kingianum Coll.et Hemsl、黄精Polygonatum sibiricum Red.、多花黄精Polygonatum cyrtonema Hua的干燥根茎。
不同产地黄精中多糖含量的比较
Ｗ Ｎ ｉｏｄ ｎ ，ＴＡ ａ ｇ ， ｉ ｕ—ｕ Ｈ Ｏ Ｊ－ Ｌ ｏｇｄ Ａ ＧＸａ —ａ ＩＮ Ｆ ｎ Ｓｌ Ｇ ｉ ｎ ， Ａ ｉｕ ， ＩＴｎ —ｅ ｌ ｙ ｆ
（ ．Ｄ ｐ．ｏ Ｐ ａｍａｏ ｇ ， ａ ｈ ｎＭｅ ｉ ｌ ｏｌ ｅ ａａ ７ ０ ０ ｈｎ ； １ ｅｔ ｆ ｈｒ ｃｌ ｙ Ｔ ｉ ａ ｄ ａ Ｃ ｌｇ ，Ｔ ｉ ２ １０ ，Ｃ ｉａ ｏ． ｓ ｃ ｅ ｎ ２ ｆｌ ｔｄＨ ｓｉ ｌ ｆ ａ ｈｎＭｅ ｉ ｌ ｏｌ ｅ ａａ ７ ００，Ｃ ｉａ ．Ａ ｆｉｅ ｏｐｔ ｉ ａ ｄｃ ｌ ｇ ，Ｔ ｉ ２ １０ ｉａ ａ ｏＴ ｓ ａＣ ｅ ｎ ｈｎ ）
中图 分 类 号 ： ２ ４ ２ 文 献 标 识 码 ： 文章 编 号 ：０ ４７ １ （０ ８ ０ －６ ７０ Ｒ ８． Ａ １０ －１５ ２０ ）９０ ５ － ２
不 同产地 黄精 中多糖含量差 异明显 ， 中以泰 山生黄精 多糖含量 为最高 ； 其 炮
Ｃｏ ｐ ｉｏ ｏ Ｏｌ ａｃ ｈａ ｉ ｎ Ｐｏ ｙ ｏ ｔ ｍ ａｒｓ ｎ ｆｐ ｙｓ ｃ ｒｄｅ ｉ ｌ ｇ ｎａ ｕｍ ｉ ｒ ｃ ｓｂｉｉｕｍ ｒ ｍ ｉ ｅ ｅ ｔｐｌ ｃ ｓ ｆｏ ｄｆ ｒ ｎ ａ ｅ
Ｋｅ ｒ ｙ ｗｏ ｄｓ： ｌｇ ｎ ｔ ｐｏｙ ｏ ａｕｍ ｉ ｒｃ ｓｂｉｉｕｍ ； ｐ ｌｓ ｅ ｈａｉ ｅ；ｃ ｎａｉ ｏｙ ａ ｃ ｒｄ ｏｔ ｎ
黄精 （ ｏ ｇｎｔｍ ｓ ｉｃｍ Ｒ ｄ ） 百 合 科 多 Ｐ ｌ ｏａｕ ｉｒ ｕ ｅ． 为 ｙ ｂｉ 年生 草本植 物 ， 别名 鸡头 黄精 、 头根 、 鸡 黄鸡 菜 ， 常生
（ ．泰山医学院药学院 ， １ 山东 泰安 ２ １０ ２ ７０ ０； ．泰 山医学 院附属 医院 山东 泰安 ２ １０ ） ７ ０ ０
黄精
黄精黄精 53HuangjingRHIZOMA POLYGONATI本品为百合科植物滇黄精Polygonatum kingianum Coll. et Hemsl.、黄精Polygonatum sibiricum Red.或多花黄精Polygonatum cyrtonema Hua的干燥根茎。
按形状不同，习称“大黄精”、“鸡头黄精”、“姜形黄精”。
春、秋二季采挖，除去须根，洗净，置沸水中略烫或蒸至透心，干燥。
【性状】大黄精呈肥厚肉质的结节块状，结节长可达10cm以上，宽3～6cm，厚2～3cm。
表面淡黄色至黄棕色，具环节，有皱纹及须根痕，结节上侧茎痕呈圆盘状，圆周凹入，中部突出。
质硬而韧，不易折断，断面角质，淡黄色至黄棕色。
气微，味甜，嚼之有黏性。
鸡头黄精呈结节状弯柱形，长3～10cm，直径0.5～1.5cm。
结节长2～4cm，略呈圆锥形，常有分枝；表面黄白色或灰黄色，半透明，有纵皱纹，茎痕圆形，直径5～8mm。
姜形黄精呈长条结节块状，长短不等，常数个块状结节相连。
表面灰黄色或黄褐色，粗糙，结节上侧有突出的圆盘状茎痕，直径0.8～1.5cm。
味苦者不可药用。
【鉴别】本品横切面：大黄精表皮细胞外壁较厚。
薄壁组织间散有多数大的黏液细胞，内含草酸钙针晶束。
维管束散列，大多为周木型。
鸡头黄精、姜形黄精维管束多为外韧型。
【检查】水分照水分测定法(附录Ⅸ H第二法)测定，不得过18.0%。
总灰分取本品于80℃干燥6小时，粉碎后测定，不得过4.0%(附录Ⅸ K)。
酸不溶性灰分不得过1.0%(附录Ⅸ K)。
【浸出物】照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法(附录Ⅹ A)测定，用稀乙醇作溶剂，不得少于45.0%。
【含量测定】对照品溶液的制备精密称取经105℃干燥至恒重的无水葡萄糖对照品33mg，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml中含无水葡萄糖0.33mg)。
标准曲线的制备精密量取对照品溶液0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml、0.5ml、0.6m1,分别置10ml具塞刻度试竹中。
不同产地黄精品种的成分分析
不同产地黄精品种的成分分析作者：田迎秋李玲杨玉玲黄玉玲王春全杨清松蔡群虎来源：《农家科技下旬刊》2018年第02期摘要：目的：对不同产地黄精品种进行多糖含量和浸出物测定，为黄精品种选育和种植奠定基础；同时对不同生长年限的滇黄精以及三年生滇黄精不同采收期的多糖含量进行比较，确定其适宜的采收期。
方法：黄精浸出物按《中国药典》2015年版醇溶性测定法的热浸法测定，多糖含量采用硫酸蒽酮法测定。
结果：产自云南文山的滇黄精（黄断面类型）的浸出物和多糖含量最高，分别为54.6%和24.62%；不同生长年限的滇黄精多糖含量以十年生滇黄精多糖含量最高，为35.83%；三年生不同采收期的滇黄精以11月采收的多糖含量最高，为25.93%。
结论：不同产地黄精的多糖和浸出物含量均有较大差异，滇黄精的生长年限和采收期影响多糖含量。
关键词：滇黄精；多花黄精；鸡头黄精；浸出物；多糖；采收期黄精为百合科黄精属（Liliaceae）多年生草本植物，有黄精（Polygonatum sibiricum Red.）、滇黄精（Polygonatum kingianum Coll. et Hernsl.）和多花黄精（Polygonatum cyrtonema Hua）等，按形状不同，习称“鸡头黄精”、“大黄精”、“姜形黄精”。
具补肾益精、滋阴润燥之功，用于滋补强身和治疗肾虚精亏、肺虚燥咳以及脾胃虚弱之症已有很长历史，是中医常用药物之一[2，3]。
现代药理学研究表明其活性成分主要为黄精多糖（polygonatum sibiricum polysaccharides， PSP），具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎抗菌、调节血糖血脂、调节免疫、改善记忆力等功能[5-11]。
并且黄精中的多糖含量普遍在10%以上，因此黄精多糖的研究对黄精的开发利用具有重要意义[12]。
但当前已报告黄精多糖的研究大多是关于提取工艺的研究[13]。
本研究主要对不同品种黄精进行多糖和浸出物含量的测定，为黄精品种选育及利用提供理论依据。
不同产地黄精主要化学成分比较及主成分分析
摘 要： 通过科学 实验手段 ， 对不 同产地的黄精原植物 中含有的化 学成分进行 比较研 究 ， 同时对黄精 中的主要 成分进行分析 ， 为精 选 黄精种质提供科 学的方法依据 。实验 中是采用分光光度 计法对黄精 中含有 主要成分 的含量 比值进行检 测分析 ， 主要针对广 东、 湖北 、 河南 以及贵 州等地 的黄精进行成分试验 比较。 实验结果显示各地所产的黄精 中成分 比例各有差 异， 并且不 同产地 的黄精 主成分也不相 同， 但 对 于黄精优 良种质 筛选均 以多糖、 薯蓣 皂苷 源含量为评价指标 。 关键词 ： 黄精； 多花黄精 ； 滇黄精； 黄精 多糖； 薯蓣皂苷元 黄精植物 中主要包括多糖 、 总酚、 总黄铜 以及薯蓣皂苷元等多种化 ３结 果与 分析 学成分 ， 我 国很多地 区对黄精的种植 比较注重 ， 但是 因为地 区的不同 ， ３ ． １ 不同产地黄精多糖含量的比较 。上述实验中的黄精多糖含量测 黄精的化学成分也有＿定的差异性。 作为重要的药材原料， 对人体补气 定 与我国药典分析结果大致相 同， 由于产地的不 同， 多糖含量也有明显 养阴、 健脾和 胃、 降血糖 、 降血脂 、 抗菌消炎 、 抗病毒等方面有着非常好 差异 ， 目前广东地带的多花黄精多糖含量相对较高 ， 江西黄精多糖含量 的功效，加强对不同产地黄精的学化成分以及主要成分的试验分析对 相对较低 ，按黄经品种进行多糖含量高低比较结果为：多花黄精 ＞黄 提高优质黄精种质筛选有重要的作用意义，下面是对不同产地黄精主 精 ＞ 滇黄精 ， 经过同一品种不同产地的黄精多糖含量比 较， 其含量也会 要化学成分及主成分的试验分析。 有明显的不同。 黄精多糖最高含量可超出最低含量的 ２ 倍左右， 多花黄 １材 料与 仪器 精最高含量可超出最低含量 ５ ． ３ 左右， 滇黄精最高含量可超 出最低含量 本次实验所选用 的黄精原植物材料来 自于广东 、 贵州 、 河南 、 安徽 １ ． ５ 倍左右。 等多个省市地区， 其黄精品种多样 ， 有野生黄精 、 多花黄精 、 滇黄精等。 ３ ． ２ 不同产地黄精薯蓣皂苷元含量的比较。根据各地区的黄精薯蓣 实验 中主要 以这些种类的黄精的根茎为实验对象 ，根茎的新鲜度完全 皂苷元含量测定结果发现 ，湖北地区的黄精薯蓣皂苷元含量成分相对 符合实验要求， 均与刚出土时的新鲜标准无太大差异 。 实验 中选用的葡 较高 ， 浙江地区的黄精薯蓣皂苷元含量明显低于其他地区黄精 ， 不同品 萄糖 、薯蓣皂苷元、芦丁以及没食子酸等对照品均来 自正规 的安全渠 种的黄精薯蓣皂苷元含量 比饺结果为 ： 多花黄精＞滇黄精 ＞黄精。同一 道， 采用先进 、 科学的检测仪器 以及分析软件 ， 保证实验的准确性与科 黄精品种不同地区栽种， 黄精的薯蓣皂苷元含量差异较明显 ， 黄精最高 学性。 薯蓣皂苷元含量 比 对低薯蓣皂苷元含量可高达 ７ 倍左右。多花黄精最 ２方 法 高含量可超出最低含量 ３ ０ ０ 左右 ，滇黄精最高含量可超 出最低含量 １ ２ ． １ 黄精多糖含量的测定。 利用比较传统的药典方法进行葡萄糖对 倍左右 照品与黄精多糖含量测定 ，检测结果为 ：葡 萄糖标准品溶 液浓度在 ３ ． ３ 不同产地黄精 中总酚含量的比较。黄精 中的总酚含量在不同地 ０ ． ０ ３ ４ ～ ０ ． ２ ０ ４ ｍ ｇ ／ ｍ Ｌ范围内线 炭 系 良好。 测定黄精多糖含量的标准曲 区中所富含的成分也是不同的 ， 结合本次实验结果分析， 河南地 区黄精 线为 Ｙ ： ３ ． ９ ６ ６ ｘ ＋ Ｏ ． ０ ３ ８ ， ｒ ＝ ０ ． ９ ９ ３ 。 总酚含量相对较高 ， 而关系地区的黄精总酚含量相对较低 ， 不同品种的 ２ ． ２ 薯蓣皂苷元含量测定。 该实验检测中主要针对色谱条件以及标 黄精总酚含量 比较结果为： 黄精总酚含量高于多花黄精与滇黄精， 而多 准曲线的制备两个方面进行分析 ： 首先色谱条件准备。 以乙腈 一 水（ ９ ４： 花黄精与滇黄精的总酚含量值 比较接近，不同产地的黄精总酚含量各 ６ ） 为流动相等度洗脱； 控制 流速 、 色谱柱 的温度 、 检测波长以及样品数 不相 同， 黄精总酚最高含量可超出最低含量的 ２ ． ５ 倍左右 ， 多花黄精最 量。 其次标准 曲线制备。 取对照品 ８ 毫克放置 ２ ５ 毫升的实验器皿中， 以 高含量可超出最低含量 ４ ． ５ 左右 ， 滇黄精最高含量可超出最低含量 ３ 倍 刻度为准 ， 加 入对应量的甲醇， 均匀摇晃 ， 制备成黄精对照品溶液。再分 左 右 。 别取不 同量 的溶液分别放置 １ ０毫升的瓶 中，再加入相应量的甲醇， 继 ３ ． ４ 不同产地黄精 中总黄酮含量的比较。不同地区的黄精总黄酮含 续均匀摇晃 ， 并对精密度 、 稳定 Ｉ 生、 重复性 以及加样 回收率进行 比例确 量各有差异 ，目前河南地 区黄精主要成分 中总黄铜的含量相对其他地 定。 区要高 ， 而浙江地 区黄精 中总黄酮含量明显较． 低。 根据 黄精 品种进 总 薯蓣皂苷元含量测定 ： 取黄精样品细粉 ２ ｇ ， 精密称定 ， 置烧瓶内， 精 黄酮含量比较结果为 ： 黄精高于滇黄精 ， 滇黄精该与多花黄精。不同产 密加入乙醇 ５ ０ ｍＬ ， 摇匀 ， 称重， 加热回流 ４ ｈ ， 放冷 ， 再称定重量 ， 过滤， 取 地的黄精总黄酮含量各不相同，黄精总黄铜最高含量可超出最低含量 ２ ０ ｍ Ｌ续冷液 ， 蒸 干乙醇 ， 残渣加 ８ ０ ｍＬ ３ ｍ ｏ ｌ ／ Ｌ的盐酸溶液溶解， 沸水 回 的 １ 左右 ， 多花黄精最高含量可超 出最低含量 ７ ． ５ 左右 ， 滇黄精最高含 流水解 ４ ｈ ， 冷却 ， 移 至分液漏斗 中， 加氯仿 ４ ０ ｍＬ （ ２ ０ 、 １ ０ 、 １ ０ ｍＬ ） 萃取 ３ 量可超出最低含量 １ 倍左右。 次， 合并氯仿液 ， 减压 回收氯仿至干 ， 残渣加甲醇溶解 ， 移至 ｌ ｍＬ量瓶 结束 语 中， 加甲醇稀释至刻度 ， 摇匀。进样前用 ０ ． ４ ５ ｍ的微孔滤膜过滤。 各地区黄精植物的成分与含量会有 明显 的差异 ，这主要是 因为地 ２ ． ３总酚含量的测定。样品总酚含量测定： 精确称取黄精细粉 ｌ ｇ 于 区之间存在气候差异 、 纬度差异 、 地理条件差异 、 光照度差异、 水肥条件 试管中， 加入 １ ０ ｍ Ｌ ７ ０ ％￣醇， 超声ｆ ２ ５ ０ ｗ， ４ ０ ｋ Ｈ ｚ ） 提取 ３ ０ ｍ ｉ ｎ ， 过滤 ， 取滤 差异以及栽种技术差异等多种因素而引起 ， 不同地区的黄精中多糖、 总 液。 反复提取 ３ 次。 旋干， 并用 ７ ０ ％乙醇定容至 ｌ ｍ Ｌ 。 准确吸取 ４ ０ Ｌ ， 酚 、薯蓣皂苷元以及总黄酮的成本测定都需要利用先进的科学实验手 按“ ２ ． ３ ． １ ” 项下方法测定黄精总酚含量。 没食子酸对照品溶液浓度在 ０ 段进行准确确定 ， 以此作为黄精药材筛选依据 ， 将实验结果分析发现 ， ０ ． ０ ５ ２ ｍｇ ／ ｍＬ范 围内与吸光度线性关 系 良好 ，没食 子酸标准 曲线为 多糖与薯蓣皂苷元含量较多的黄精属 于最优质的黄精 ， 目前， 广东地区 Ｙ＝ ２ ７ ． ７ ２ ４ Ｘ＋ ０ ． ０ ０ ４ ２ ， ｒ － ＝ ０ ． ９ ９ ２ 。 黄精在这两中成分含量上略 占优势。 ２ ４总黄酮含量的测定 。 样品总黄酮含量的测定精 密称取黄精细粉 参考文献 １ ． ５ ｇ ， 置于２ ０ ｍＬ 具塞试管中， 加入 １ ５ ｍＬ ５ ％ 的乙醇溶液仂Ⅱ ０ 人ｌ ％的盐 ［ １ 】 王俊 杰， 刘影， 殷海青等． 不同地 区黄精氨基酸特征分析及聚类分析 酸） ， 超声（ ： ｚ ｓ ｏ ｗ， ４ ０ ｋ Ｈ ｚ ） 提取 １ ｈ ， 过滤 ， 旋干 ， 用５ ％ 乙醇定容至 １ ０ ． ５ ｍＬ 青海大学学￣． ２ ｏ １ ６ ， ３ ４ ０ ） ． 于Ｅ Ｐ管中。取 ０ ． ３ ｍＬ ， 按“ ２ ． ４ ． １ ” 项下方法测定和计算黄精总黄酮含量。 ［ ２ ］ 董治程． 不同产地黄精的资源现状调查与质量分析咧 ． 长沙： 湖南中医 芦丁对照品溶液浓度在 ０— ０ ． ０ ４ ０ ｍｇ ／ ｍＬ范围内与吸光度 线性关 系 良 药大学２ ０ １ ２ ． 好， 芦丁标准曲线为 Ｙ ＝ １ ０ ． ７ ３ Ｘ ＋ ０ ． ０ ０ ２ ４ ８ ， ｒ － ＝ ０ ． ９ ９ ９ 。
黄精炮制的历史沿革及现代研究进展
黄精炮制的历史沿革及现代研究进展摘要：黄精为临床常用中药，其炮制方法源远流长。
历代医方、本草、炮制专著对黄精的炮制均有记载，有传统炮制方法，也有各地用药习惯，致使全国各地炮制方法不够统一，累计达到20多种。
本文对我国黄精的炮制历史进行剖析，并结合当前黄精炮制现状，深入分析在现代科技支持下黄精炮制的发展情况。
关键词：黄精；炮制；历史沿革；研究进展1.黄精炮制的历史沿革在张晓宁等研究中提出，从我国黄精炮制的历史上看，宋代是中药炮制发展最为鼎盛的时期。
当时除了对唐代的炮制方式进行沿用之外，还对黄精进行了精细化的加工，采用细作阴干捣末的方式，其中加用了黄精汁加酒炮制或采取蔓荆子蒸制等方式，这种方式一经推出便得到了广泛认可，为我国黄精炮制添加了新的工艺。
在任洪民等研究中提出，在我国的元代和明代时期，出现了很多著名的医药大家，而对于黄精的炮制而言，主要是承袭了唐朝和宋朝的炮制方式，而后再加以创造。
如将黄精与黑豆进行炮制、酒蒸炮制等，但除此之外并没有涉及到其他的创新，仅仅只是沿袭前人留下的方法而已。
在李钢等研究中提出，在我国清代时期，黄精的炮制方式主要以继承为主，其中包含有水煮炮制、黑黄豆末炮制、蒸制、晒制、熟地制、蜂蜜制、姜制等，到了清代中期，黄精的炮制方式便已经达到了二十多种。
在李玉香等研究中提出，在现代医学飞速发展的背景下，对于黄精的炮制方式而言除了借鉴传统经验之外，还对相应的炮制工艺进行了整理与创新。
在张艳雪等研究中提出，黄精炮制具体的方式分析可分为以下几种：①取黄精原药，洗净后，蒸制5h左右，密封一夜，取出后切厚片，而后摇匀蒸汁，反复蒸制、晒制3次以上，直到黄精变得黑色滋润、味甘无麻等为准，而后晒干；②取原药，洗净后晒干，采用黄酒搅拌，而后放置于药罐当中，密封后隔水加热，取出后晒干切片即可；③取原药，取出杂质后洗净，切片后晒制。
④取原药，加酒后拌匀，置入容器当中，蒸制后取出干燥。
2.黄精炮制的现代研究进展根据现代研究得知，黄精属于一种复合物质，其中包含有甾体皂苷、生物碱、多糖、木脂素、强心苷、蒽醌、氨基酸等物质，在临床入药治疗中能够起到抗衰老、改善记忆力、调节免疫力、降血糖、降血脂、抗炎、抗病毒等功效。
黄精不同炮制工艺研究及其产品质量分析
由表 2 的检测结果可知，酶解黄 精脂肪含量比常压蒸制黄精少，而蛋 白质、多糖和还原糖的含量则有所增 加，酶解炮制后食用无刺激性，黄精 口感滋润，利于直接食用。
3.2.3 不同炮制法黄精的抗氧化 性比较
由表 3 检测结果可知，酶解黄精 自 由 基 清 除 率 比 常 压 蒸 制 黄 精 有 所 增加。 3.3 酶解法黄精产品质量评价
成品率 = 产品重量 / 净黄精重量。 黄 精 多 糖 含 量 测 定： 采 用 苯 酚 硫酸法测定 [4]。制得标准曲线，得出 回 归 方 程 为 Y=0.008 3X+0.052 2， r=0.999 2。于 490 nm 处测定各供试 品的吸光度，计算各个炮制品中的黄 精多糖含量（以葡糖糖计算）。 粗脂肪的测定按 GB/T 5512—2008 进行 [5]。粗蛋白的测定按 GB 5009.5— 2010 进行 [6]。还原糖的测定按 GB/T 5009.7—2008 进 行 [7]。DPPH 自 由 基 清除率法测定抗氧化性 [8]。 3.2 结果与分析
工艺技术
黄精不同炮制工艺研究及其产品质量分析
□ 盛柳青 陈欣怡 徐 珊 戴宇彦 金华职业技术学院 俞陆军 杭州华惟生物医药有限公司
摘 要：采用市场上广泛销售的净黄精为原料，改进炮制工艺，利用果胶酶和纤维素酶酶解法炮制黄精，实现黄精的 减毒增效，以改善口感，将黄精开发成即食型产品，供人们长期食用，改善人体体质，提高免疫水平，增加抗病能力。酶 解黄精与常压蒸制黄精相比，脂肪含量降低，蛋白质、多糖、还原糖含量增高，抗氧化性增强，口感更佳。
关键词：黄精；炮制工艺；质量分析
黄 精， 别 名 老 虎 姜、 鸡 头 参， 为 百合科植物黄精（Polygonatum sibiricum Red）、滇黄精或多花黄精的干燥根茎。 黄精具有养阴、补气、补肾、润肺等 功效，是滋补五脏的药食两用佳品。 但生黄精直接食用会产生口舌麻木， 刺激咽喉的副作用，炮制后不仅可消 除刺激性，同时可时黄精增强药效 [1]。 目前黄精的炮制方法有酒制、黑豆制、 九蒸九曝等 。 [2，3] 现有的炮制方法存 在炮制工艺复杂，炮制时间长等缺点。 采用酶解法等现代生物技术炮制黄精， 用果胶酶和纤维素酶炮制黄精，可以加 速药材中刺激性成分的释放，缩短炮制 时间，并且适量水解药材中的纤维素， 使炮制后黄精的口感更细腻，使消费者 乐于长期食用，更好的发挥黄精的滋补 作用。 1 材料和方法 1.1 主要材料
黄精有效成分提取测定的研究
黄精是中国传统的中药,属于药食同源性中草药,黄精的根状茎黄白色,味稍甜,肥厚而横走,直径达3cm [1].黄精的主要有效成份多糖、皂苷、黄酮类等多种物质.其中黄精多糖占据着主导地位,在黄精多糖的构成部分中,葡萄糖、甘乳糖、半乳糖醛酸占其主要成分,果糖和葡萄糖发生缩合反应后能形成低聚糖[2],其在防治心血管疾病、缓解变老的迹象、降低患肿瘤概率等领域用处广泛.而黄精皂苷,属中性,成分含量低,在黄精和滇黄精中种类偏多.国内外现已研究大约80种甾体皂苷类化合物的临床药用途径,都是分别从10余种药用黄精中提取分离得到的[3].黄精皂苷的药理学作用主要集中抗菌、降血糖血脂、改善提高记忆能力、调节免疫力[4-7]等几个方面.目前黄精有效成份主要的提取方法包括传统的水煎煮提取法[8],溶剂提取法[9]、酸提法[10]、酶解法[11]等,皂苷,这些方法均存在提取时间较长,操作较复杂的缺点.本文拟用微波和超声辅助提取黄精的有效成分多糖和皂苷,在传统基础上,缩短提取测定时间,提高提取效率.1材料与方法1.1仪器与试剂微波化学反应器,超声波发生器,水浴锅,粉碎机,电子天平,真空泵,紫外分光光度计,多花黄精(九华山地区),人参皂苷Rb1标准品(上海源叶生物科技有限公司),实验用水均为二次蒸馏水.1.2黄精预处理本文实验选用的黄精购于安徽省池州市九华山地区,为多花黄精干,取其根茎,低温干燥,再粉碎成粉末,于阴凉干燥的地方密封存放.1.3多糖提取测定准确称量黄精粉末,加入蒸馏水,在适当微波条件下进行提取,冷却后离心,移取适量上清液利用苯酚-硫酸法(SN/T 4260-2015)测量其多糖含量,并探究料液比、微波功率、反应温度、微波处理时间对提取效果的影响.1.4皂苷提取测定准确称量黄精粉末,加入80%乙醇,在一定温度下超声提取一段时间.移取一定量经超声提取后的溶液到试管中,放进60℃的水浴内.蒸发干后在试管内加入0.20mL 的0.05g 香草醛与10.00mL 冰醋酸的混合液,0.80mL 浓硫酸,摇匀.水域温度控制60℃不变,在其内加热15分钟,冷却,移取冰醋酸溶液5.00mL 放入试管内摇晃均匀.在最大吸收峰的波长处测定其吸光度.本实验标准曲线以人参皂苷Rb1为标准品在相同条件下绘制.并探究料液比、乙醇浓度、超声处理时间、提取温度对提取效果的影响.2结果与分析2.1多糖提取工艺优化通过控制变量法,分别改变料液比、微波功率、反应温度、微波处理时间,探究其对多糖提取的影响,结果如图1所示.由图1-A 可知,随着料液比增加,其多糖提取率在缓慢地发生变化.在料液比为1:50g/mL 时,其多糖提取率最高,达到1:50g/mL 之后大致不变,说明其后料液比对多糖提取的影响不是很大.分析其原因:在一定范围内,溶剂的增加使得原料与溶剂边界层浓度差增大,有利于多糖的溶出和扩散;当溶剂即水进一步增加时,三口烧瓶中的水位也上升,此时瓶内的温度不高,升高的趋势趋于缓慢.能耗效率迅速下降,溶解出的杂质逐渐变多,在某种程度上使多糖的浓度降低,则多糖提取效果不好[12].当料液比增加时,内部植物细胞与外部溶剂之间的浓度差越大,导致多糖的传质驱动力越大.提取率变低是因为材料与溶剂的比例高.当比例越高时,扩散内部组织距离越长,就会在传输过程中造成损失.图1-C 表明,在微波处理时间240s 至280s 的时候,提取效果较突出,280s 后曲线急剧下降,分析原因可归结为以下几点:首先,在少许时间内,微波对植物细胞壁及细胞膜Vol.35No.9Sep.2019赤峰学院学报（自然科学版）JournalofChifengUniversity （NaturalScienceEdition ）第35卷第9期2019年9月收稿日期:2019-06-27基金项目:2017年合肥师范学院校级科研项目(2017QN13);2018年国家大学生创新创业训练项目(201814098035)黄精有效成分提取测定的研究陈蕾,万婉,刘艳,周青松(合肥师范学院,安徽合肥230601)摘要:黄精作为药食同源性中草药,其活性成分主要包括多糖、皂苷、黄酮类等多种物质.本文分别研究了提取测定黄精多糖和皂苷的方法,并进行工艺优化.结果表明,利用微波、超声辅助法能够快速提取测定黄精多糖和皂苷的含量,提取操作简单,提取效果优于传统提取方法.关键词:黄精;有效成分;提取中图分类号：TQ460.7文献标识码：A文章编号：1673-260X （2019）09-0037-0337--图2工艺条件对黄精皂苷提取的影响图的破坏效果明显,引起植物细胞中许多物质散失,大大地增强了多糖的提取效果.而后微波对黄精处理时间过长的话,会使多糖分子的结构发生变化,促使多糖快速降解,从而导致多糖提取效果不佳.分析图1-B 和D,适当增加微波功率和温度能够提高多糖的提取率,但过高的功率或者温度提取率反而降低.可能原因是,微波功率越强,散发的能量越多,导致反应体系温度突然升高,破坏了黄精多糖结构,使部分多糖发生降解,减少多糖提取率.2.2皂苷提取工艺优化2.2.1单因素实验利用超声辅助法进行黄精皂苷的提取,通过控制变量图1工艺条件对黄精多糖提取的影响图38--法,分别改变超声时间、乙醇浓度、料液比、温度,探究其对皂苷提取的影响,结果如图2所示.由图2可知,超声提取黄精皂苷时间越长,黄精皂苷的提取量越大,40min后继续提取,提取量无明显提高,可能是继续提取会导致皂苷少量分解成其他物质,或者造成皂苷活性下降.浸取液乙醇的浓度对提取量影响最大,提取温度太高或太低都会使得黄精皂苷提取量降低.而随着料液比的增加,黄精皂苷的提取量虽然下降但波动并不明显.料液比对提取量基本没有太大作用,总体来看,料液比的改变对黄精皂苷的提取没有太大干扰.其中乙醇浓度的影响可能是75%的乙醇溶剂极性的大小与皂苷极性大小接近,皂苷在其中的溶解度最大,提取量自然最大.提取温度在40-60℃内,黄精皂苷提取量明显在不断上升,60℃后皂苷提取量反而下降.可能是因为用乙醇提取时,达到乙醇沸点78℃时对皂苷的溶解有所影响.而且当温度过高时,黄精中某些酸性物质活性可能增大,造成皂苷结构的变化,以致被提取到的皂苷含量较低[13].2.2.2正交实验结果在单因素实验基础上,设计以下正交实验,结果如表1所示.从正交实验结果可以看出,水温、浸取黄精的溶液浓度、物料与溶液的比例对黄精皂苷提取量的大小影响各不相同.根据计算可得出,R B>R A>R C,使提取量改变最为明显的是乙醇浓度大小,较之提取温度的影响稍弱,料液比最次.由此确定出黄精皂苷最优提取方案应为:在料液比1: 15时用75%浓度的乙醇溶液溶解被提取物后,在60℃的水浴中经超声波提取时长40分钟.3结论本文使用微波辅助提取法提取黄精多糖,发现在料液比为1:50g/mL,微波功率为500W,60℃下,提取4min,能够快速提取黄精中多糖,提取量达到640mg/mL,较传统方法快速,提取效果好.选用超声波辅助提取法提取黄精皂苷,通过单因素实验和正交实验,结果均表明乙醇浓度对皂苷提取的影响最大,温度的影响次之,提取温度太大或太小都会使得黄精皂苷提取量降低,而料液比对提取量基本没有太大作用.在最佳提取工艺条件下,黄精皂苷提取量达到46.96μg/g.———————————————————参考文献:〔1〕徐兵兵,倪穗.野生黄精的多糖含量测定及提取工艺研究[J].中国野生植物资源,2016,35(04):19-22.〔2〕李丽,田丽娜.黄精多糖的结构分析及功能活性研究进展[J].中国实验方剂学杂志,2015,21(15):231-234.〔3〕张沐新,杨晓虹.黄精属植物甾体皂苷类化学成分研究进展[C].中国药学会.第九届全国中药和天然药物学术研讨会大会报告及论文集,2007.352-355.〔4〕孙隆儒,李铣,郭月英.黄精改善学习记忆障碍等作用的研究[J].沈阳药科大学报,2001,18(4):286-289.〔5〕Wang Z J,Zhou Y Ju,Zhang H.Effects of two saponins extracted from the Poly gonatumz anlanscia⁃nense pamp on the human leuk emia(HL-60)cells[J].Biological&Pharmaceutical Bulletin,2001,24(2):159-162.〔6〕祝凌丽,徐维平.黄精总皂苷和多糖的药理作用及其提取方法的研究进展[J].安徽医药,2009,13(7):719-722.〔7〕王冬梅,张京芳,李晓明.卷叶黄精根中甾体皂苷化学成分及其抗菌活性[J].林业科学,2007(08):91-95.〔8〕Yu H S,Ma B P,Kang L P.Saponins from the pro⁃cessed rhizomes of molygonatum kingianum[J].Chemmharm Bull,2009,57(9):1011-1014.〔9〕陈燕文,胡晶红.金银花多糖提取、精制方法和药理活性综述[J].辽宁中医药大学学报,2017,19(01):155-159.〔10〕张燕,张树淼.近年来植物多糖提取方法研究进展[J].农产品加工,2015(11):65-68.〔11〕Yg Wang,YGao.Rapid Determination of lycium bar⁃barum polysaccharide with effective wavelength selec⁃tion using Near-Infrared diffuse reflectance spec⁃troscopy[J].Food analytical methods.2016,09(01):131-138.〔12〕徐冰冰,于勇杰.黄精多糖研究综述[J].中国野生植物资源,2015,34(04):38-41.〔13〕王冬梅,朱玮,张存莉.卷叶黄精总皂苷含量测定方法及提取工艺研究[J].西北林学院学报,2006,21(3):107-110.试验号A(提取温度/℃)B(乙醇浓度/%)C(料液比)皂苷提取量(ug/g)140651:1041.46240751:1544.96340851:2027.44460651:1543.46560751:2046.96660851:1031.44770651:2039.95870751:1044.96970851:1528.94K137.95541.62739.29K240.62645.63339.123因素主次K337.95529.27638.122B>A>CR 2.616.3 1.1表1黄精皂苷提取工艺正交实验结果39--。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
药物鉴定
。 中鱼腥草素钠与相邻杂质峰达到基线分离 （ 图 #）
表#
!""# 年第 $% 卷第 & 期 品在上述试验条件下具有良好的回收率， 满足含量测定的要求。
鱼腥草素钠加样回收试验结果 （ * 0 .） B1 F "#$ B 1 F 样品含量 B )/ F 加入量 B )/ F 测得量 B )/ F 回收率 B 1 F #%$ #*% ! #%$ #*% ! #%$ #*% ! #%$ #*% ! #%$ #*% ! #%$ #*% ! #$ ’&" #$ ’&" !$ -&% & !$ -&% & *$ .’# ’ *$ .’# ’ #.$ -%! * #.$ +.* . #’$ "-# # #+$ ’%* . #’$ ..! . #’$ ’&* % --$ ’. -’$ +% #""$ ". -’$ +& --$ #’ #""$ #& --$ &. "$ 研细， 精密称取适量 （ 约相当于鱼腥草 ） 用流动相溶解并稀释至刻度， 摇匀， 置 %" )C 量瓶中， 素钠 #’ )/ ， 过滤， 精密量取续滤液 ! )C， 置 %" )C 量瓶中， 用流动相稀释至刻 度， 摇匀。 照上述色谱条件， 以 !’* () 表 ! 样品含量测定结果 （ * 0 *） （ ） 含量 1 为检测波长， 取 !" !C 注入液相色谱 仪， 记录色谱图； 另取鱼腥草素钠对照 品适量， 同法测定。 按外标法以峰面积 计算含量， 同时与 《 中国药典 》 中的氧 化还原滴定法 = ! ? 结果比较（ 表 !） 。 . $" # 讨论 鱼腥草素钠对照品溶液的紫外光谱显示， 鱼腥草素钠的最大
批号 7GC2 法 "%"#"# "%"#"! "%"#"* #""$ . #"*$ # #"&$ * 药典法 --$ *% #"!$ & #"!$ ’
吸收波长是 !’* ()， 因此选择 !’* () 为检测波长。 流动相中添加四丁基氢氧化铵， 可以改变色谱峰形， 防止峰 $" ! 的拖尾， 使主峰和杂质峰分离完全。 $" $ 用 7GC2 法测定鱼腥草素钠片含量简便、 快捷， 结果准确可 靠， 因此该法可作为鱼腥草素钠的含量测定方法。 参考文献：
!" !
线性关系考察
精密称取鱼腥草素钠对照品 #’$ %! )/， 置 %" )C 量瓶中， 加流 动相使溶解完全并稀释至刻度， 摇匀， 得鱼腥草素钠对照品贮备 分别置 %" )C 量瓶中， 用 液。 精密量取上述贮备液 # ， !， *， &， % )C， 流动相稀释至刻度， 摇匀， 取 !" !C 注入液相色谱仪， 在上述色谱 条件下， 以 !’* () 为检测波长， 测定峰面积， 以峰面积 5 对鱼腥草 回归， 得回归方程 6 0 +$ !+* . I #$ "!. & J 素钠质量浓度 6（ !/ H )C） 。 鱼腥草素钠质量浓度在 +$ &"’ , *+$ "& !/ H )C #" > ! 5（ ! 0 "$ --- ’ ） 范围内与峰面积线性关系良好。 !" $ 精密度试验 取本品 （ 批号 "%"#"# ） ， 照含量测定项下的方法于同一日和不 同日 （ 日内， 每日测定 次 分别测定 % 次， 计算日内和日间精密 % # ） 日间平均含量 度。 结果日内平均含量为 --$ ’%1 ， "#$ 为 "$ +-1 ； 为 --$ .*1 ， "#$ 为 "$ -!1 。 !" % 稳定性试验 取一批含量测定用供试品溶液， 分别在 " ， 结 !， &， ’， #! E 进样， 果供试品溶液在 ’ E 内稳定， 峰面积的 "#$ 0 "$ .’1 。 !" & 加样回收试验 分别取已知含量的鱼腥草素钠片研细样品 . 份 （ 约相当于鱼腥 草素钠 #% )/） ， 置 !% )C 量瓶中， 分成 * 组， 分别加入 !$ ! 项下鱼腥 按 !$ . 项下的方法， 自“ 加流动相 草素钠对照品贮备液 %， ’， #" )C， 溶解并稀释至刻度 ” 起依法操作， 测定峰面积。 结果见表 #， 表明本
药物鉴定
入上述 . 份样品中， 按拟订的供试品溶液制备方法同法操作， 测定 其吸收度， 结果见表 " 。 !" $ 样品含量测定 分别取备用的供试品溶液 "% $ +5， 置 "$ +5 具塞干燥试管中， 照线性关系考察项下方法， 自“ 加水至 !% $ +5” 起， 依法操作， 测定 吸收度。 结果见表 ! 。
= # ? 国家药典委员会 $ 中华人民共和国药典 （ = K ? $ 北京： 二部 ） 化学工业出 版社， #--% ： &##$
/ 收稿日期： 修回日期： "**+ , *# , "# ； "**+ , && , "# 0
黄精药材中黄精多糖的含量测定
童
（ 贵州 贵阳 #$ 贵州省药品检验所，
红 #， 申
・!"・
中国药业 !"#$% &"%’(%)*+,#)%-.
!""# 年第 $% 卷第 & 期 立即取出置冰水浴中冷却至室温， 即得供试品溶液。 取水约 "$ +34， 置 "$ +5 具塞干燥试管中， 在冰水浴中缓慢滴加 $% !0 蒽 !% $ +5， 摇匀， 放冷后置沸水浴中反应 "$ +34， 立即 酮 6 硫酸溶液至刻度， 取出置冰水浴中冷却至室温， 即得空白溶液。 !" ! 测定波长选择 精密吸取供试品溶液 "% $ +5、 对照品溶液 $% . +5， 分别置 "$ +5 具塞干燥试管中， 各 加 水 至 !% $ +5， 摇匀， 在冰水浴中缓慢滴加 摇匀， 放冷后置沸水浴中反应 "$ +34， $% !0 蒽酮 6 硫酸溶液至刻度， 立即取出置冰水浴中冷却至室温， 然后于 &.$ 7 /$$ 4+ 波长范围 内进行扫描。 由扫描结果可知， 供试品溶液与对照品溶液均在 （ 故确定 .(! 4+ 为测定波长。 .(! 8 ! ） 4+ 波长处有最大吸收， !" # 方法学考察 线性关系考察： 精密吸取对照品溶液 （ $% ))! / +# 2 +5） $， $% " ， ， ， ， ， ， 分别置 具塞干燥试管中， 各加水 $% ! $% ) $% & $% . $% ’ +5 "$ +5 摇匀， 在冰水浴中缓慢滴加 $% !0 蒽酮 6 硫酸溶液至刻 至 !% $ +5， 度， 摇匀， 放冷后置沸水浴中反应 "$ +34， 立即取出置冰水浴中冷 》 却至室温， 照分光光度法 9 !$$$ 年版 《 中国药典 （ 一部 ） 附录 ! : ; ， 以 $ +5 为空白， 在 .(! 4+ 波长处测定吸收度。 以吸收度 （ 为纵 %） 坐标、 无水葡萄糖含量 （ 为横坐标进行回归处理， 得回归方程为 &） 。 结果表明无水葡萄糖 % 1 $% $&" - & 6 $% $"$ " ， ’ 1 $% --- / （ $ 1 ’） 在 ))% !/ 7 "--% ’! "# 范围内具有良好的线性关系。 精密度试验： 精密吸取对照品溶液 . 份（ 各 $% ))! / +# 2 +5） 分 别置 "$ +5 具塞 干燥 试管 中， 照线 性关 系考 察项 下方 $% ! +5， 法， 自“ 加水至 !% $ +5” 起依法操作， 测定吸收度。 结果的 !"# 为 表明仪器精密度良好。 $% !’0 ， 稳定性试验： 精密吸取含量测定项下同一备用供试品溶液 （ 来 源于贵州威宁 ） 分别置 "$ +5 具塞干燥试管中， 照线性关 "% $ +5， 起依法操作， 在室温下每隔一 系考察项下方法， 自“ 加水至 !% $ +5” 定时间测定其吸收度。 结果的 !"# 为 "% !&0 ， 表明供试品溶液在 ! < 内稳定性良好。 重现性试验： 取同一备用供试品 （ 来源于贵州威宁 ） 按拟 . 份， 订的供试品溶液制备方法同法操作， 依法测定吸收度。 结果的 !"# 为 $% ..0 ， 表明方法重现性良好。 加样回收试验： 精密称取同一样品 （ 来源于贵州威宁 ） 另 . 份； 精密称取干燥至恒重的无水葡萄糖 -&% !. +#， 置 "$$ +5 量瓶中， 加蒸馏水至刻度； 精密量取上述无水葡萄糖溶液 "$% $ +5， 分别加