葡萄糖测定试剂盒

葡萄糖测定试剂盒
葡萄糖测定试剂盒

葡萄糖测定试剂盒(已糖激酶法)说明书

【产品名称】

通用名称:葡萄糖测定试剂盒(已糖激酶法)

商品名称:葡萄糖测定试剂盒(已糖激酶法)

英文名称:Glu-HK

【预期用途】用于定量测定人血清,血浆和全血中的葡萄糖浓度。

葡萄糖是生物体细胞能源中心。最一般的供给是多聚碳水化合物水解而来,大体上是淀粉。葡萄糖是单糖,餐后在血中浓度5mmol/L,同时是服务细胞功能不可缺少的能源供给。葡萄糖分解经糖酵解发生作为第一步,接着是柠檬酸循环和氧化磷酸化作用。

葡萄糖是用于诊断和糖类新陈代谢疾病的过程控制,如糖尿病,新生儿低血糖症,先天性低血糖症和胰岛瘤。

【检验原理】样品中的葡萄糖经酶反应(HK,G6P-DH),结果是辅酶NAD+转变成NADH。

在334,340或365 nm 处测得吸光度的增加与样品中葡萄糖的浓度成正比。

【主要组成成份】

磷酸缓冲液,pH7.6---------------------------------100 mmol/l

三磷酸腺苷(ATP) ------------------------------------4 mmol/l

醋酸镁------------------------------------------------10 mmol/l

氧化型辅酶I------------------------------------------3 mmol/l

己糖激酶(HK)--------------------------------------≥25 KU/l

葡萄糖6-磷酸脱氢酶(G6P-DH)-----------≥75 KU/l

去蛋白试剂:

高氯酸----------------------------------------------165 mmol/l

高氯酸盐-------------------------------------------165 mmol/l

标准品:

葡萄糖-------------------------------5.55 mmol/l (100mg/dl)

【储存条件及有效期】储存在冰箱(+2°至+8°C) ,有效期至少一年。

【适用仪器】本试剂盒适用于日立、东芝、岛津、贝克曼、雅培等生化分析仪。【样本要求】全血,血清,血浆(肝素化或乙二胺四乙酸)。尽可能早从细胞成分中分离出血清或血浆。全血应立即去蛋白。1.0 ml 样品中加入1.0 ml 去蛋白试剂。高速离心5-10分钟。取上清液分析。1份标准品与10份去蛋白试剂稀释。

【检验方法】

试剂的准备

工作液的准备:随时可用。开启后的稳定性:见瓶签所示有效期。试剂的准备

标准品的准备:随时可用。

工作液的准备(R1):随时可用。

工作液的准备(R2):随时可用。

注:

缓冲液和酶试剂(R2)按5+1(如10ml+2ml)即可获得小量单试剂。

初始用后的稳定性(单试剂):

6周(在仪器+2o- 8℃里冷藏)

室温下2周(达+ 25℃)。

校准

用VOBO&MUGE提供的标准品或选择你认为可靠的标准品。

操作

1.用标准品

葡萄糖浓度 (mmol/L)=B

S B T A -A A -A ×标准品的浓度(双试剂操作) 葡萄糖浓度 (mmol/L)= B

S B T A -A A -A ×标准品的浓度(单试剂操作) 2

【参考值(参考范围)】餐后:4.2 - 6.4 mmol/l (75 - 115 mg/dl) 全血: 3.9 - 5.6 mmol/l (70 – 100mg/dl)

建议每个实验室应建立自己的参考值。

【检验结果的解释】

【检验方法的局限性】可以检测人血清、血浆标本,推荐使用EDTA 肝素抗凝血,避免使用草酸盐抗凝血。

【产品性能指标】

线性范围: 葡萄糖浓度可达700 mg/dL

试剂空白吸光度:≤0.2

灵敏度: 灵敏度是指检出葡萄糖的最低检出量。葡萄糖测定试剂盒检测灵敏度规定为≤0.2mmol/L

准确性:所得结果应在质控血清给定值的范围内

批内精密度≤8% 批间精密度≤8%

【注意事项】试剂里含叠氮钠 (0.095 %)。不要吞咽。避免与接触皮肤和粘膜。

【参考文献】

1.

Bablock W et al. A General Regression Procedure for Method Transformation: J Clin ChemClin Biochem 1988;26:783-790. 2. Bassing H, Bablok W.A New Biometrical Procedure for Testing the Equality of Measurements from Two Diferent Analytical Methods. J Clin Chem Clin Biochem 1983;21:709-720.

3. Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphicel Comparisons of Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem 1986; 24:863-869.

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Greiling H, Gressner AM ed. Lehrbuch der Klinischen Chemie und Pathobiochemie, 3rd ed., Stuttgart / New York; Schattauer Verlag: 1995. 5. Krieg M et al. Vergleichende quantitative Analytik klinisch-chemischer Kenngr??en im 24 Stunden- Urin und Morgenurin. J Clin Chem Clin Biochem 1985;24:863-869.

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Schmidt FH, Klein Wschr 1961:39:1244 8.

Thomas L ed. Labor und Diagnose, 4. ed. Marburg: Die Medizinische Verlagsgesellschaft, 1992. 9. Tietz NW ed Clinical Guide to Laboratory Tests, 2nd ed Philadelphia, PA: WB Saunders Company, 1990:246-250.

10. Tietz NW ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3. Auflage. Philadelphia. PA: WB Saunders Company: 1995:266-273.

【生产企业】

【医疗器械经营企业许可证编号】【医疗器械注册证书编号】

【生产标准编号】

【说明书批准及修改日期】

食物中葡萄糖的测定

食物中葡萄糖的测定 葡萄糖氧化酶法 1.原理 葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下产生葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶的作用下使邻联甲苯胺生成蓝色物质,此有色物质在625nm 波长下与葡萄糖浓度成正比。通过测定蓝色物质的吸光度可计算样品中葡萄糖的含量。 2.适用范围 适用于谷类、乳类、饮料、酒类等食物样品和血液样品。检出量为0.02 mg。 3.仪器 722分光光度计。 4.试剂: 除特殊说明外,实验用水为蒸馏水,试剂为分析纯。 (1)乙醇。 (2) 40% 三氯乙酸:称取40g 三氯乙酸,用水溶解并稀释至100ml。 (3) 2 mol/L NaOH 溶液:称取8g NaOH,用水溶解并稀释至100ml。 (4) 1 % 邻联甲苯胺溶液:称取0.1 g 邻联甲苯胺溶解于10 ml无水乙醇中,倒入棕色瓶中,4 ℃冰箱保存。 (5)乙酸缓冲液(pH 5.0):称取14.28 g 乙酸钠(CH3COONa?3H2O)溶于水中,加入2.7 ml 冰乙酸,并调节pH 5.0,用水定容至1 L。 (6)葡萄糖氧化酶溶液:称取一定量的葡萄糖氧化酶(Sigma 公司)用水溶解,使酶含量为100 U/ml。4 ℃冰箱保存一周。 (7)过氧化物酶溶液: 0.010 g 辣根过氧化物酶溶于10 ml 水中,4 ℃冰箱保存一周。(8)酶溶液:取100 ml 乙酸缓冲液,分别加入邻联甲苯胺溶液、葡萄糖氧化酶溶液、过氧化物酶溶液各1 ml,混匀。4℃冰箱可保存七周。 (9)酶空白液:取100 ml 乙酸缓冲液,分别加入邻联甲苯胺溶液、过氧化物酶溶液各1 ml,混匀。4℃冰箱保存一周。(注意酶空白液中不含葡萄糖氧化酶) (10)葡萄糖标准液:将葡萄糖标准品(纯度大于99%)于80 ℃干燥至恒量。精确称取0.050 g,用水移入100 ml 容量瓶中,定容至刻度线。相当于浓度为0.5 mg/ml。 5.操作步骤: 5.1样品处理: (1)固体样品:称取0.5~5g已粉碎的样品于锥形瓶中,加入50ml水后沸水浴15min。冷

葡萄糖检测试剂盒(己糖激酶比色法)

葡萄糖检测试剂盒(己糖激酶比色法) 简介: 葡萄糖(Glucose, Dextrose,Glu)又称玉米葡糖,简称葡糖,化学式C6H12O6,分子量为180.16,是自然界分布最广、最重要的一种单糖,属于多羟基醛。用酶学方法测定葡萄糖是生化检测中的常用方法,最常用的有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法。上述酶学法特点是:1、灵敏度、准确度、精密度均高;2、使用温和的反应条件;3、操作简便;4、适用于自动分析仪。 Leagene葡萄糖检测试剂盒(己糖激酶比色法)其检测原理是在己糖激酶的催化下,葡萄糖和ATP发生磷酸化反应生成葡萄糖-6-磷酸,后者与NAPD在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶催化下发生氧化还原反应,生成6-磷酸葡萄糖酸和NAPDH,NADPD的生成量与葡萄糖浓度成正比,分光光度计进行比色测定。本试剂盒专门用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、尿液、细胞、组织等样本中葡萄糖含量定量测定,特异性高,不受尿酸和抗坏血酸的干扰,故可以检测尿液中葡萄糖。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。 组成: 自备材料: 1、生理盐水或PBS 2、离心管、小试管或96孔板 3、水浴锅或恒温箱 4、分光光度计或酶标仪编号 名称TC0703 20T TC0703 50T Storage 试剂(A): 显色试剂10ml2×12.5ml -20℃避光试剂(B): 酶试剂10ml 2×12.5ml -20℃避光临用前,按显色试剂:酶试剂混匀,即HK工作液,4℃保存。 试剂(C): Glu标准(5mmol/L) 1ml1ml -20℃使用说明书1份

5、全自动或半自动生化分析仪 操作步骤(仅供参考): 1、样本处理: ①血清、血浆、脑脊液、尿液样本:从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血,直接检测,如超过线性范围,用生理盐水稀释后检测。 ②细胞样本: a、取适量的细胞(一般推荐>106以上),离心,弃上清,留取沉淀。 b、用PBS或生理盐水清洗,离心,弃上清,留取沉淀。 c、加入的PBS或生理盐水匀浆,冰浴条件下超声破碎细胞,功率300W,每次3~5s,间隔30s,重复3~5次。亦可手动匀浆,制备好的匀浆液不可离心,待用。亦可用1~2% Triton X-100冰浴30~60min,制备好的裂解液不可离心,待用。 ③组织样本:准确称取适量组织样本,按质量(g):生理盐水或PBS(ml)的比例,加入生理盐水或PBS,冰浴条件下手动或机械匀浆。离心,取上清待用。 2、分光光度计(1ml比色杯)、半自动生化分析仪Glu测定操作: ①按下表依次加入试剂: 空白管(B)对照管(C)标准管(S)待测管(U)生理盐水(ml) 0.01 1.0 Glu标准(5mmol/L)(ml) 0.01 待测样本(ml) 0.01 0.01 HK工作液(ml) 1.0 1.0 1.0 ②充分混匀,水浴中孵育。 ③分光光度计测定340nm波长处吸光度。以空白管调零,读取标准管和各待测管的吸光度。 3、普通分光光度计(2ml比色杯)Glu测定操作: ①按下表依次加入试剂: 空白管(B)对照管(C)标准管(S)待测管(U)生理盐水(ml) 0.02 2.0 Glu标准(5mmol/L)(ml) 0.02 待测样本(ml) 0.02 0.02 HK工作液(ml) 2.0 2.0 2.0 ②充分混匀,水浴中孵育。 ③分光光度计测定波长处吸光度。以空白管调零,读取标准管和各待测管的吸光度。 4、酶标仪Glu测定操作: ①按下表依次加入试剂:

血清葡萄糖GLU测定

血清葡萄糖GLU测定 1 检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目,确保检测结果的准确。 2 实验原理 本试剂基于在精密度和准确性方面具有很高可靠性的Trinder’S方法,在防止已知化合物(如尿酸、谷胱甘肽和肌酐等)的干扰进行了进一步的改良。 GOD 葡萄糖+ H2O+ O2 H2O2+葡萄糖酸 POD H2O+AAP + HBA 醌亚胺(红色)H2O 式中:AAP 为4-氨基安替比林;HBA 为4-羟基苯甲酸上述反应中,红色醌亚胺色素的生成量与样本中葡萄糖的浓度成正比,通过在波长500nm波长处测定吸光度的变化值,即可测得样本中葡萄糖的浓度。 3 标本:

3.1 病人准备:12小时禁食。 3.2 类型:血清,标本最好不要溶血。迅速分离血清或,减少红细胞糖酵解时葡萄糖的损失。随机收集尿样。 3.3 标本存放:血清应在血液采集1小时内,尽早分离。加入糖分解抑制剂(NaF,KF)后的稳定性:15~25℃保存可稳定1天,4~8℃保存可稳定7天。血清中的葡萄糖,无溶血,无细菌污染,没有添加的防腐剂,在25℃下可稳定8个小时,在4℃下可稳定72小时。尿样应保存在2~8℃下并尽快进行分析。脑脊髓液如果避免蒸发可在2~8℃下稳定至少5天,5天内不检验的标本应在收集后立即储存在-20℃的条件下。 3.4 标本运输:常温条件下保存运输。 3.5标本拒收标集:细菌污染、超时送检的的标本。 4 实验材料 4.1 试剂:上海复星长征医学科学有限公司GLU试剂盒(沪食药监械(准)字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014)4.1.1 试剂组成

试剂1(R1):过氧化物酶 375U/L 4-羟基苯 甲酸 15mmol/L 4-氨基安替比林0.75mmo l/L 磷酸盐缓 冲液 110mmol/L 试剂2(R2):葡萄糖氧化 酶 6000U/L 磷酸盐缓 冲液 110mmol/L 4.1.2 试剂稳定性与贮存:在2~8℃避光、密封的储存条件下,试剂盒自生产之日起有效期为12个月 4.1.3 变质指示:当试剂有看得见的微生物生长,有浊度,或者未开盖的液体有沉淀时,表明试剂已变质,不能继续使用。 4.1.4 注意事项:试剂中含有防腐剂叠氮化钠,可能存在一定的刺激作用,请勿直接接触皮肤、眼睛。一旦接触,即用大量清水冲洗。请勿吞服。 4.2 校准品:使用上海复星长征医学科学有限公司提供的GLU校准品对自动分析仪进行校准。 4.3 质控品:使用正常值、病理值复合控制品。

葡萄糖含量测定——碘量法

实验十三 葡萄糖含量的测定——碘量法 一、实验目的 1、 学会间接碘量法测定葡萄糖含量的方法原理,进一步掌握返滴定法技能。 2、 进一步熟悉酸滴定管的操作,掌握有色溶液滴定时体积的正确读法。 二、实验原理 I 2与NaOH 作用可生成次碘酸钠(NaIO),次碘酸钠可将葡萄糖(C 6H 12O 6)分子中的醛基定量地氧化为羧基。未与葡萄糖作用的次碘酸钠在碱性溶液中歧化生成NaI 和NaIO 3,当酸化时NaIO 3又恢复成I 2析出,用Na 2S 2O 3标准溶液滴定析出的I 2,从而可计算出葡萄糖的含量。涉及到的反应如下: 1、I 2与NaOH 作用: I 2+2NaOH=NaIO+NaI+H 2O 2、C 6H 12O 6和NaIO 定量作用: C 6H 12O 6+ NaIO=C 6H 12O 7+NaI 3、总反应式: I 2+C 6H 12O 6+2NaOH=C 6H 12O 7+2NaI+H 2O 4、C 6H 12O 6作用完后,过量的NaIO 发生歧化反应: 3NaIO=NaIO 3+2NaI 5、在酸性条件下NaIO 3和NaI 作用: NaIO 3+5NaI+6HCl=3I 2+6NaCl+3H 2O 6、析出过量的碘用Na 2S 2O 3标准溶液滴定: I 2+2Na 2S 2O 3=Na 2S 4O 6+2NaI 实验还涉及到Na 2S 2O 3和 I 2溶液的标定 1、Na 2S 2O 3的标定 Cr 2O 72-+6I -+14H +=2Cr 3++3I 2+7H 2O I 2+2S 2O 32-=S 4O 62-+2I - Cr 2O 72-~3I 2~6S 2O 32- 32232272232200.256)(6O S Na O S Na O Cr K O S Na V c V cV c ??=?= 2、碘的标定 I 2+2S 2O 32-=S 4O 62-+2I - V V c 322322O S Na O S Na c 2/1= 3、葡萄糖注射液中葡萄糖的含量 计算式:%100506126?=L g O H C W 标示量葡萄糖含量 三、实验仪器及材料 1、 仪器 称量瓶、电子台秤、分析天平、容量瓶(250ml )、移液管(25ml )、量筒(10ml )、锥形瓶(25ml ,3个)、酸式滴定管(50ml )、烧杯(50ml )、玻璃棒、碘量瓶 2、 药品 K 2Cr 2O 7(S )、盐酸(6mol/L )、KI 溶液(100g/L)、淀粉(5g/L)、Na 2S 2O 3溶液(0.1mol/L )、I 2溶液(0.05mol/L )、NaOH 溶液(1mol/L )、葡萄糖注射液(5%) 四、 实验步骤 1、 0.1mol/L Na 2S 2O 3标准溶液的标定 ()()()()())(100000.25100021101612632232222-??????????-?L g O H C M O S Na v O S Na c I v I c 葡萄糖含量=

葡萄糖-6-磷酸酶(G6P)试剂盒使用说明

葡萄糖-6-磷酸酶(G6P)试剂盒使用说明 分光光度法货号:BC0930 规格:50管/48样 产品内容: 提取液:60mL×1瓶,4℃保存; 试剂一:液体47.5mL×1瓶,4℃保存; 试剂二:粉剂×1支,-20℃保存; 试剂三:粉剂×1支,-20℃保存; 试剂四:液体×1支,-20℃保存; 产品说明: 葡萄糖-6-磷酸酶((glucose6phosphatase,G6Pase,EC3.1.3.9)广泛存在于动物、植物、微生物和细胞中,是糖异生过程水解葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖的限制酶,在保证血糖的动态平衡方面起着重要的作用。 G6P催化葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖,变旋酶和葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NAD+还原生成NADH,在340nm下测定NADH生成速率,即可反映G6P活性。 需自备的仪器和用品: 紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。操作步骤: 一、样本的前处理: 1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞 数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加

入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 2、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组 织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。 3、血清(浆)样品:直接检测。 二、测定步骤: 1、分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。 工作液的配制:临用前将试剂二、试剂三和试剂四转移到试剂一中混合待用;用不完的试剂4℃保存一周; 2、将工作液置于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热5分钟。 3、在1mL石英比色皿中加入50μL样本和950μL工作液,立即混匀,记录340nm处 初始吸光值A1和2min后的吸光值A2,计算ΔA=A2-A1。 注意:在该试剂盒中,若ΔA大于0.3,需将样本用提取液稀释适当倍数后测定,使ΔA小于0.3可提高检测灵敏度。计算公式中乘以相应稀释倍数。 G6P活性计算: 1、血清(浆)G6P活力计算 单位定义:每毫升血清(浆)每分钟生成1nmol NADH定义为一个酶活力单位。 G6P(U/mL))=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷V样÷T=1608×ΔA 2、组织、细菌或细胞中G6P活力计算 (1)按样本蛋白浓度计算 单位定义:每mg组织蛋白每分钟生成1nmol NADH定义为一个酶活力单位。 G6P(U/mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr)÷T=1608×ΔA÷Cpr

氧化酶法测定血清(浆)葡萄糖

葡萄糖氧化酶法测定操作规程 1实验原理葡萄糖氧化酶将葡萄糖氧化为葡萄糖酸,并成成过氧化氢。过氧化物酶在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解喂水和氧,并使色原性氧受体4-氨基安替比林(4-AAP)和酚去氢缩合为红色醌类化合物,即Trinder反应。在500nm处测得的吸光度与葡萄糖含量成正比。GOD 葡萄糖+O2→葡萄糖酸+H2O2 POD H2O2+4-AAP+酚→红色醌类化合物+H2O 2临床意义1.生理性高血糖可见于餐后或高糖饮食.情绪紧张肾上腺分泌增加等。 2.病理性高血糖(1)糖尿病患者。(2)内分泌腺功能障碍:甲状腺功能亢进,肾上腺皮质及髓质功能亢进等。升高血糖的激素增多引起的高血糖,现已归入特异性糖尿病中。(3)颅内压增高:颅内压增高刺激血糖中枢,如颅外伤.颅内出血.脑膜炎等。(4)脱水引起的高血糖:如呕吐.腹泻和高热等也可使血糖轻度增高。 3.生理性低血糖见于长期饥饿和剧烈运动后。 4.病理性低血糖(特发性功能性低血糖最多见,依次是药源性.肝源性.胰岛素瘤等)。(1)胰岛β细胞增生或胰岛β细胞瘤等,使胰岛素分泌过多。(2)对抗胰岛素的激素分泌不足,如垂体前叶功能减退.肾上腺皮质功能减退和甲状腺功能减退而使相应的激素分泌减少。(3)严重肝病患者,由于肝脏存储糖原及糖异生等功能低下,肝脏不能有效地调节血糖。 3实用仪器蓝韵200(L Y-C200) 4储存条件及有效期试剂盒应避光密封储存在2--8℃环境中,有效期为12个月。开封后,上机在2--8℃避光保存其有效期为28天。

5操作步骤 5.1、全自动生化分析仪操作步骤:参数设置→试剂装载→校准→质控→样品加载→测定→结果审核→报告。 5.2、校准:采用纯化水或生理盐水和校准品两点校准。当试剂更换批号、出现质控漂移、仪器做完保养后及重要零件更换时,须重新校准。 5.3、结果计算:全自动生化分析仪会自动给出检测结果。 5.4、质控程序:建立质控体系,选用适当的质控品进行质量控制。测定结果在质控范围内,方可进行样本测定。 6参考范围 3.89—6.11 mmol∕L 7方法评价本法线性范围0.10 mmol∕L—25.00mmol∕L,精密度批内CV ≤3.00%,批间CV≤4.00%。准确度相对偏差在±10.0%。 8注意事项1.葡萄糖氧化酶对β-D葡萄糖高度特异,溶液中的葡萄糖约36%为α型,64%为β型。葡萄糖的完全氧化需要α型到β型的变旋反应。葡萄糖氧化酶法可直接测定脑脊液葡萄糖含量,但不能直接测定尿液葡萄糖含量,这是因为尿液中尿酸等干扰物质浓度过高,可干扰过氧化物酶反应,造成结果假性偏低。 2.严重黄疸.溶血及乳糜烂血清应先制备无蛋白血滤液,然后再进行测定。

葡萄糖含量测定

葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定 摘要 运用氧化还原滴定的原理设计葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定方案并具体实施。从而进一步掌握Na 2S 2O 3及I 2标准溶液的配制和标定方法,巩固氧化还原滴定的操作技能。学会间接碘量法测定葡萄糖含量的方法和原理,进一步掌握返滴定法技能。其中,葡萄糖分子中含有醛基,能被IO -定量地氧化为羧基。故可将一定量过量的I 2在碱性条件下加入葡萄糖溶液中,使醛基完全转化为羧基。再将其酸化,用Na 2S 2O 3标准溶液滴定析出的I 2。所用指示剂为淀粉。根据所加I 2标准溶液的量及滴定所耗Na 2S 2O 3标准溶液的量结合反应式中各物质之间的计量关系,便可计算葡萄糖的含量。该方法简便易行且准确度高,基本符合实验要求。 关键词 葡萄糖注射液 间接碘量法 返滴定法 1引言 葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定目前有以下几种方法 方案一:旋光测定法 根据葡萄糖分子结构中的五个碳都是手性碳原子,具有旋光性,可采用旋光法测定含量。取出旋光计的测定管,先用蒸馏水为空白对仪器进行校正。用供试液体(5%葡萄糖注射液)冲洗数次,缓缓注入供试液体适量(注意勿使发生气泡)。置于旋光计内,读取旋光度,连续测定3次,取平均值。 方案二:间接碘量法。 碘与NaOH 作用能生成NaIO ,而C 6H 12O 6能定量地被NaIO 氧化。在酸性条件下,未与C 6H 12O 6作用的NaIO 可转变为I 2析出,只要用标准Na 2S 2O 3溶液滴定析出的I 2,便可计算C 6H 12O 6的含量。 本实验采用第二种方案进行葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定。 2实验原理 在碱性溶液中,碘与氢氧化钠作用可生成次碘酸钠(NaIO),葡萄糖能定量的被次碘酸钠氧化成葡萄糖酸(C 6H 12O 7)。过量的NaIO 可以转化为NaIO 3和NaI 。在酸性条件下,NaIO 3和NaI 作用析出I 2,然后用Na 2S 2O 3标准溶液滴定析出的I 2,便可计算出葡萄糖的含量。其反应如下: 1、I 2与NaOH 作用: I 2+2NaOH=NaIO+NaI+H 2O 2、C 6H 12O 6和NaIO 定量作用: C 6H 12O 6+ NaIO=C 6H 12O 7+NaI 3、总反应式: I 2+C 6H 12O 6+2NaOH=C 6H 12O 7+2NaI+H 2O

葡萄糖检测试剂盒(电极法)产品技术要求

医疗器械产品技术要求编号: 葡萄糖检测试剂盒(电极法) 1.产品型号/规格及其划分说明 序号规格 1500ml 22×2000ml 2.性能指标 2.1外观 试剂R溶液黄色、无颗粒、无杂质。 2.2净含量 试剂盒各试剂装量应不小于标示值。 2.3分析灵敏度 灵敏度(检测限)应≤3.31mmol/L。 2.4线性范围 在(0~20)mmol/L范围内,其线性相关系数r≥0.990;浓度≥5.0mmol/L时,相对偏差≤20%;浓度<5.0mmol/L时,绝对偏差≤1.0mmol/L。 2.5测量精密度 2.5.1重复性 用控制血清重复测试所得结果的重复性(变异系数,CV)应≤6.0%。 2.5.2批间差 批间差应≤10.0%。 2.6准确度 用参考物质进行测试,其相对偏差应≤10.0%。 3.检验方法 仪器基本要求 a)恒温装置温度:37℃±1℃。 b)全自动生化分析仪。

测试方法按说明书规定,因不同机型使用试剂最终浓度相同。在此推荐以本公司BECKMAN全自动生化分析仪进行测试。 3.1外观和性状 目测检查,试剂R溶液性状应符合2.1的要求。 3.2净含量 用通用量具进行测量,应符合2.2的要求。 3.3分析灵敏度 用蒸馏水作为空白,测定20次,计算空白平均值和SD,按式(1)计算,结果应符合2.3的规定。 检测低限(LLD)=空白的平均值+2SD (1) 注:参照冯仁丰《临床检验质量管理技术基础》58页分析灵敏度(检测限)的操作。 3.4线性范围 用接近线性范围上限高浓度(活性)的样品和接近线性范围下限低浓度(活性)的样品,混合成5个稀释浓度(xi)。分别测试试剂(盒),每个稀释浓度测试3次,分别求出检测结果的均值(yi)。以稀释浓度(xi)为自变量,以测定结果均值(yi)为因变量求出线性回归方程。计算线性回归的相关系数(r)。稀释浓度(xi)代入线性回归方程,计算yi的估计值及yi与估计值的相对偏差或绝对偏差,应符合2.4的要求。 3.5测量精密度 3.5.1重复性 在重复性条件下,用控制物质测试试剂(盒),重复测试至少10次(n≥10),分别计算测量值的平均值(x)和标准差(s),按公式(2)计算变异系数(CV),应符合2.5.1的要求。 =x CV (2) S /? 100 % 式中: CV--变异系数; S--标准差; x--测量值的平均值。 3.5.2批间差

实验一葡萄糖含量测定

实验一、果蔬样品中葡萄糖含量的测定(碘量法) 一、目的要求 1、复习碘量法的原理及操作。 2、掌握还原糖的测定方法。 3、学习样品的前处理方法。 二、原理 果蔬中的葡萄糖可用水提取,除去干扰物质后,其中的葡萄糖可用碘量法测定。 碘与NaOH 作用能生成NaIO (次碘酸钠),而C 6H 12O 6(葡萄糖)能定量地被NaIO 氧化。在酸性条件下,未与C 6H 12O 6作用的NaIO 可转变成I 2析出,析出的I 2可用Na 2S 2O 3标准溶液滴定。反应示意如下: 46应用2: 碘量法测定葡萄糖含量 (返滴定法) 基本单元:1/2(葡萄糖) 三、试剂 I 2标准溶液(0.05 mol ·L -1) Na 2S 2O 3标准溶液(0.1 mol ·L -1) NaOH 溶液(2 mol ·L -1); HCl 溶液(6 mol ·L -1);淀粉指示剂(w 为0.01)。 四、实验步骤 1、样品准备 水果样品去皮、去核后搅碎、匀浆;称量适量的匀浆于250 mL 容量瓶中定容。于40~50 ℃ 的水浴中提取30 min 后用干滤纸抽滤,弃去前面的少量滤液,保留后面的滤液。 2、葡萄糖含量的测定 用移液管吸取25 mL 滤液置于碘量瓶中,准确加入25 mL I 2 标准溶液。一边摇动,一边慢慢滴加2 mol /L NaOH 溶液,直至溶液呈淡黄色(加碱速度不能过快,否则过量NaIO 来不及氧化C 6H 12O 6而歧化为不与葡萄糖反应的NaIO 3和NaI ,使测定结果偏低)。将碘量瓶加塞于暗处放置10~15 min 后,加2 mL 6 mol ·L -1 HCl 溶液酸化,立即用Na 2S 2O 3标准溶液滴定至溶液呈淡黄色,加入1 mL 淀粉指示剂,继续滴定到蓝色消失。记录读数。再重复测定二次。计算样品中葡萄糖的质量分数。

葡萄糖(GLU)测定试剂盒(己糖激酶法)产品技术要求sainuopu

葡萄糖(GLU)测定试剂盒(己糖激酶法) 适用范围:用于体外定量测定人体血清中葡萄糖的含量。 1.1 试剂盒包装规格 试剂1:1×25ml,试剂2:1×5ml;试剂1:2×60ml,试剂2:2×12ml;试剂1:3×40ml,试剂2:3×8ml;试剂1:4×60ml,试剂2:4×12ml;试剂1:2×400ml,试剂2:1×160ml;试剂1:2×40ml,试剂2:2×8ml。校准品(选配):1×1ml;1×3ml。 1.2 试剂盒主要组成成分

2.1 外观 试剂1:无色澄清液体;试剂2:浅黄色澄清液体。 校准品:无色至淡黄色澄清液体。 2.2 净含量 液体试剂的净含量不得低于标示体积。 2.3 试剂空白吸光度 在37℃、340nm波长、1cm光径条件下,试剂空白吸光度应不大于0.3。 2.4 分析灵敏度 测定浓度为5.55mmol/L样本时,吸光度变化值(ΔA)应在(0.2,0.4)范围内。 2.5 线性范围 在(0.5,38.9)mmol/L线性范围内,线性相关系数r不小于0.996。在[5,38.9)mmol/L范围内的线性相对偏差不大于±10%;测定结果(0.5,5)mmol/L时线性绝对偏差不大于±0.5mmol/L。 2.6 重复性 重复测试两份高低浓度的样本,所得结果的变异系数(CV%)应不大于5%。 2.7 批间差 不同批号试剂测试同一份样本,测定结果的批间相对极差应不大于6%。 2.8 准确度 当参考物质浓度在(0,4.16)mmol/L时,实测值与标示值偏差不应超过± 0.833mmol/L;当参考物质浓度在[4.16,38.9)mmol/L时,实测值与标示值偏差应在±20%范围内。 2.9校准品溯源性 依据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求,校准品溯源至中国计量科学研究院生产的有证参考物质(GBW10062)。 2.10稳定性

SIGMA 葡萄糖HK检测试剂盒说明书

SIGMA 葡萄糖HK 检测试剂盒说明书 (Glucose (HK) Assay Kit; Product Code GAHK-20) 一、产品介绍 食品、生化和制药业普遍将酶作为分析工具。酶法具有特异性高、重现性好、敏感性高以及反应快速的特点,是用于分析的理想工具。由于酶具有高的特异性和敏感性,所以不需样品制备即可进行定量分析。本试剂盒以酶法定量测定食品和其他材料中的葡萄糖。 原理: 葡萄糖+ATP Hexokinase 6-磷酸葡萄糖+ADP G6P+NAD G6PDH 6-磷酸葡萄糖酸+NADH 葡萄糖在己糖激酶催化反应中被A TP 磷酸化,然后G6P 在NAD 存在下被6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化,氧化为6-磷酸葡萄糖酸;反应中,等分子量的NAD 被还原为NADH 。随后的340nm 吸光度的增加与葡萄糖含量成正比。 二、试剂组成 1、葡萄糖检测试剂 用20ml 水溶解小瓶内粉剂;加水后立即盖紧瓶塞,反转混匀数次,不可震动。 加水20ml 溶解后,每瓶溶液含有1.5 mM NAD ,1.0 mM ATP ,1.0 U/ml G6PDH ;并含有防腐剂苯甲酸钠和山梨酸钾。 小瓶粉剂保存于2-8℃。如果粉剂受潮结块、加水不能充分溶解、或水溶液浑浊,则应将试剂弃用。 试剂水溶液比较稳定,18-26℃保存7天、2-8度保存4周不会有微生物生长。以水作为空白参照,新配置的溶液340nm 吸光度如果大于0.350,则溶液不适合使用。 2、葡萄糖标准溶液 D-葡萄糖,1.0mg/ml 溶于0.1%苯甲酸;该标准液为即用型,符合美国国家标准技术研究所标准;2-8℃可至少保存半年。期间如果溶液浑浊,则应弃用。 三、需自备的实验仪器 1、可测定340nm 吸光度的分光光度计 2、测量杯 3、10μl-1ml 量程的移液器 四、注意事项和免责声明 本试剂仅供科研使用,不能用于药品、家庭以及其他用途。涉及危害和使用安全性问题,参照材料安全数据表。 五、存储及稳定性 2-8℃保存。 六、实验步骤 1、样品制备 液体:以去离子水稀释样品至0.05-5mg 葡萄糖/ml 。可过滤或去蛋白处理使样品澄清;样品葡萄糖含量较低而颜色较浓时,应予以脱色处理。含碳酸或发酵样品,须脱气处理。 固体:称量0.1mg 样品,用去离子水提取样品。可以加温溶液(<75℃)以助提取。以去离子水稀释提取液至0.05-5mg 葡萄糖/ml 。可过滤或去蛋白处理使样品澄清。 2、测定 吸取0.5-50μg 葡萄糖质量相当的溶液。为使ΔA360在0.03-1.6之间,必要时可重复测定并

葡萄糖测定试剂盒(葡萄糖氧化酶法)产品技术要求北化

葡萄糖测定试剂盒(葡萄糖氧化酶法) 适用范围:本试剂盒用于体外定量检测人血清中葡萄糖的含量。 1.1包装规格: 试剂1:10ml×10(干粉复溶后的体积);试剂2:100ml×1。 1.2组成成份: 试剂1:4-AAP 0.77mmol/L,葡萄糖氧化酶≥13000U/L,过氧化物酶≥ 900U/L; 试剂2:磷酸盐缓冲液(Na2HPO4,NaH2PO4)pH7.0,苯酚0.5g/L。 2.1 外观:试剂1为干燥粉末,试剂2为澄清溶液,外包装完整。 2.2 净含量:不少于标示值。 2.3 试剂空白吸光度:A<0.05(波长505nm,光径10mm)。 2.4 分析灵敏度:浓度为5.55mmol/L时,吸光度变化△A≥0.20。 2.5 线性区间 2.5.1线性相关系数:[2.2,27.75]mmol/L范围内,线性相关系数r≥ 0.9900。 2.5.2线性偏差:[2.2,5.55]mmol/L时,绝对偏差不超过±0.555mmol/L;(5.55,27.75]mmol/L时,相对偏差不超过±10%。 2.6 精密度 2.6.1重复性:重复测定高、低两个水平浓度的质控血清,变异系数(CV)≤5.0%。 2.6.2批内瓶间差:用高、低两个水平浓度的质控血清重复测试同一批号及同一瓶试剂,CV≤5.0%。 2.6.3批间差:用同一质控血清测试3个不同批号的试剂,相对极差≤10%。

2.7 准确度:测定国家标准物质,如所用标准物质浓度≤4.16mmol/L,绝对偏差应不超过±0.833mmol/L;如所用标准物质浓度>4.16mmol/L,相对偏差应不超过±10%。 2.8 稳定性 2.8.1效期稳定性:试剂盒在2℃~8℃贮存,有效期为24个月。保存至有效期末进行测定,试验结果满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.6.2、2.7的要求。 2.8.2复溶稳定性:工作液18℃~25℃可稳定2天,2℃~8℃可稳定7天。试验结果满足2.5、2.7的要求。

葡萄糖检测方法

葡萄检测方法汇总 与葡萄糖检测相关的国家地方标准汇总: GB/T 30390-2013 油料种籽中果糖、葡萄糖、蔗糖含量的测定高效液相色谱法 DB41/T 321-2003 食品添加剂.?葡萄糖含量测定方法 NY/T 2279-2012 食用菌中岩藻糖、阿糖醇、海藻糖、甘露醇、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、核糖的测定离子色谱法 GB/T 淀粉水解产品还原力和葡萄糖当量测定 GB/T 20379-2006 淀粉衍生物葡萄糖浆、果糖浆和氢化葡萄糖浆成分的测定 GB/T 16285-2008 食品中葡萄糖的测定酶-比色法和酶-电极法 CNS 2874-N5083 葡萄糖浆及干葡萄糖浆 GB/蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量的测定方法液相色谱示差折光检测法 GB/T22221-2008食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定高效液相色谱法 YC/T252-2008烟用料液?葡萄糖、果糖、蔗糖的测定?离子色谱法 国家地方标准检测方法汇总表

葡萄糖的应用范围 葡萄糖作为人体的基本元素和最基本的医药原料,其作用和用途十分广泛。尤其是随着广大人民生活水平的提高,葡萄糖作为蔗糖的替代用糖应用于食品行业,为葡萄糖的应用开拓了更广阔的领域。 (一)发酵工业 微生物的生长需要合适的碳氮比,葡萄糖作为微生物的碳源,是发酵培养基的主料,如抗生素、味精、维生素、氨基酸、有机酸、酶制剂等都需大量使用葡萄糖,同时也可用作微生物发酵多聚糖和有机溶剂的原料。 1.抗生素发酵 葡萄糖是医药工业的重要原料,尤其是抗生素发酵必不可少的原料,抗生素中最主要的品种是青、链霉素,而这两种抗生素发酵都是以葡萄糖或者高DE值的淀粉水解液(即葡萄糖液)为碳底物。链霉素发酵以结晶葡萄糖为主,也可用高DE值的淀粉水解液(即葡萄糖液);其他如利福平也以葡萄糖或者高DE值的淀粉水解液(即葡萄糖液)为主要碳源;沽霉素、红霉索、麦迪霉

葡萄糖测定试剂盒(GOD-PAP法)产品技术要求rzsd

葡萄糖测定试剂盒(GOD-PAP法) 组成: 适用范围:本试剂盒用于体外定量测定人血清中葡萄糖的含量。 1.1产品型号/规格及其划分说明 1.2主要组成成分 2.1外观 2.1.1 试剂(R)应为浅黄色透明溶液,无混浊,无未溶解物; 2.1.2 校准液应为无色透明溶液,无混浊,无未溶解物; 2.1.3 试剂盒标签标识清晰,外包装完整无损。

2.2 净含量 试剂(R)和校准液的净含量不少于标示值。 2.3 试剂空白吸光度 在主波长505nm、副波长700nm处(光径1cm),试剂空白吸光度A ≤0.2。 2.4分析灵敏度 测量1mmol/L的被测物时,吸光度变化ΔA≥0.02。 2.5 线性范围 在[1,25]mmol/L线性范围内,线性相关系数r≥0.990。 在[1,10]mmol/L范围内,绝对偏差不超过±1mmol/L;在(10,25]mmol/L范围内,相对偏差不超过±10%。 2.6 精密度 2.6.1 重复性 重复测定(2.8±0.5)mmol/L、(5±1)mmol/L和 (7± 0.5)mmol/L的样品,变异系数CV≤5%。 2.6.2 批间差 相对极差≤5%。 2.7 准确度 测定标准物质GBW09175,测定值与靶值的相对偏差不超过±10%。 2.8 稳定性 原包装的Glu试剂盒在2℃~8℃避光保存,有效期为18个月。 试剂盒在规定的储存条件下保存至有效期满后,检测2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7项,结果应符合各项目的要求。 2.9 校准液溯源性 按GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》的要求,试剂盒校准液溯源至NIST SRM965。

葡萄糖注射液的含量测定

葡萄糖注射液的含量测定 一、目的要求 ? 1.掌握旋光法测定葡萄糖注射液含量的原理、方法及计算。 ? 2.学会使用自动旋光仪。 二、仪器与试剂 ? 仪器 自动旋光仪,旋光管,移液管(50ml ),容量瓶(100ml)。 ? 试剂 葡萄糖注射液(含量在16%以上), 氨试液(取浓氨溶液400ml ,加水使成1000ml )。 三、方法原理 ? 葡萄糖分子结构中有多个不对称碳原子,具有旋光性,为右旋体。一定条件下的旋光度是旋光性物质的特性常数,测定葡萄糖的比旋度,可以鉴别药物,也可以反映药物的纯杂程度。 ? 旋光度(α)与溶液的浓度(c )和偏振光透过溶液的厚度(L )成正比。当偏振光通过厚1dm 且每1ml 中含有旋光性物质1g 的溶液,使用光线波长为钠光D 线(589.3nm ),测定温度为t ℃时,测得的旋光度称为该物质的比旋度,以[α]Dt=α/Lc 。 ? 2.0852的由来:+52.75为无水葡萄糖的比旋度,按下式计算无水葡萄糖的浓度: ? 无水葡萄糖浓度(c )=100 α /[α]D20l ? 如果换算成一水葡萄糖浓度(c ˊ)时,则应为: ? c ˊ = c × = α× × =α×2.0852 ? 所以,测定葡萄糖溶液的旋光度可以求得其含量。 四、旋光仪的工作原理 1.光源 2.小孔光栏 3.物镜 4.滤光片 5.偏振镜 6.磁旋线圈 7.样品室8.偏振镜9.光电倍增管10.前置放大器 11.自动高压12.选频放大器13.功率放大器 14.伺服电机15.蜗轮蜗杆16.计数器 ? 使用方法 (1)将仪器电源插头插入220V 交流电源,并将接地脚可靠接地。 (2)打开电源开关,这时钠光灯应启亮,需经5min 钠光灯预热,使之发光稳定。 (3)打开电源开关(若光源开关打开后,钠光灯熄灭,则再将光源开关上下重复打开1到2次,使钠光灯在直流下点亮,为正常)。 (4)打开测量开关,这时数码管应有数字显示。 (5)将装有蒸馏水或其他空白溶剂的试管放入样品室,盖上箱盖,待示数稳定后,按清零按钮。试管中若有气泡,应先让气泡浮在凸颈处。通光面两端的雾状水滴,应用软布揩干。试管螺帽不宜旋得过紧,以免产生应为,影响读数。试管安放时应注意标记的位置和方向。 (6)取出试管,将待测样品注入试管,按相同的位置和方向放入样品室内,盖好箱盖。仪器数显窗将显示出该样品的旋光度。 (7)逐次按下复测按钮,重复读几次数,取平均值作为样品的测定结果。 (8)如样品超过测量范围,仪器在±45 处来回振荡。此时,取出试管,打开箱盖按箱内回零按钮,仪器即自动)(16.180)(17.198无水葡萄糖的分子量一水葡萄糖的分子量175.52100 16.18017.198

葡萄糖测定试剂盒-氧化酶法(精)

葡萄糖测定试剂盒-氧化酶法 Glucose使用说明书(液体双试剂) 【用途】: 用于自动生化分析仪体外测定血清葡萄糖含量。 血糖增高:糖尿病、垂体前叶功能亢进、肾上腺皮质功能亢进、脑膜炎、胰癌等。 血糖降低:饥饿、胰岛素分泌过多、甲减、急性肝损害、原发性肝癌等。 【方法学原理】: 葡萄糖+O2+H2O 葡萄糖氧化酶 ?→ ????葡萄糖酸+H2O2 H2O2+4-氨基安替比林+苯酚 过氧化物酶 ?→ ????醌亚胺染料+H2O 【使用方法】: [仪器要求]:适用于各类全自动生化分析仪或半自动生化分析仪。 [标本要求]:标本在30分钟内分离血清,否则由于糖酵解使结果降低;用草酸钾—氟化钠为抗凝剂可抑制糖分解,分离血清(浆)标本在2-8℃可稳定24小时,-20℃冷冻可稳定30天。 [稳定性与保存]:试剂2~8℃贮存可稳定一年;单试剂工作液在2~8℃贮存可稳定一个月。 【结果计算】: GLU含量(mmol/L)=标准 C A A S T? 【正常参考值】: 3.89-6.11mmol/L (70-110mg/dl) 低血糖症临界水平2.7-3.89mmol/L 高血糖症临界水平6.11-7.22mmol/L 建议各实验室建立自己的正常参考值范围 【注意事项】: 1、试剂与样品的用量可按其比例放大缩小,计算公式不变。 2、谷胱甘肽,10mg/dl左旋多巴可能引起负偏差。 3、双试剂法可有效消除维生素C、胆红素等的干扰。 【性能特征】: 1、试剂空白:<0.300 2、线性范围:0-23mmol/L 3、准确度:与质控血清靶值相对偏差应≤10% 4、精密度:n=20 批内CV≤5% 批间极差≤6% 【医疗器械生产企业许可证】:沪药管械生产许2004 【产品注册号】:沪食药监械(准)字号 【执行标准】:YZB/沪0840-40-2005 上海容铸诊断产品有限公司 上海浦东电话:02190761

葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定--实验报告

设计性实验报告 题目:葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定课程名称: 姓名: 学号: 系别: 专业: 班级: 指导教师(职称): 实验学期:至学年第学期

葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定 (,,班,学号) 摘要 运用氧化还原滴定的原理设计葡萄糖注射液中葡萄糖含量的测定方案并具体实施。从而进一步掌握 223Na S O 及2 I 标准溶液的配制和标定方法,巩固氧化还原滴定的操作技能。学会间接碘量法测定葡萄糖含量 的方法和原理,进一步掌握返滴定法技能。其中,葡萄糖分子中含有醛基,能被IO-定量地氧化为羧基。故可将一定量过量的2I 在碱性条件下加入葡萄糖溶液中,使醛基完全转化为羧基。再将其酸化,用223Na S O 标准溶液滴定析出的2I 。所用指示剂为淀粉。根据所加2I 标准溶液的量及滴定所耗223Na S O 标准溶液的量结合反应式中各物质之间的计量关系,便可计算葡萄糖的含量。该方法简便易行且准确度高,基本符合实验要求。 关键词 葡萄糖注射液样品(5%)2I (0.05mol/L)标液 223Na S O (0.1mol/L) 标液 间接碘量法 返滴定法 1 引言 目前已知测定葡萄糖注射液中葡萄糖含量的方法有两种: 第一种方案:间接碘量法:移取一份稀释10倍后的葡萄糖溶液25.00mL ,再加入25.00mL 2I 标准溶液。一边摇动,一边缓慢加入1mol/LNaOH 溶液,直至溶液呈浅黄色。将碘量瓶加塞 放置10~15min 后,用少量水冲洗瓶盖及碘量瓶内壁,然后加入2mL 、6mol/LHCl 使溶液成酸性,立即用223Na S O 标准溶液滴定至溶液呈淡黄色时,加入3mL 、5g/L 淀粉指示剂,继续滴定蓝色恰好消失且半分钟内不褪色即为终点[1] 。根据滴定消耗223Na S O 溶液的体积计算试样中葡萄糖的含量。这种方法简便易行,且准确度较高。 第二种方案:旋光法:由于葡萄糖分子结构中的五个碳都是手性碳原子,具有旋光性,可采用旋光法测定含量。操作方法:取出旋光计的测定管,先用蒸馏水为空白对仪器进行校正。用供试液(5%葡萄糖注射液)冲洗数次,缓缓注入供试液适量(注意勿使发生气泡)。置于旋光计内,读取旋光度,连续测定3次,取平均值。在一定温度下,根据[2]计算试样中葡萄

葡萄糖含量的测定——碘量法

实验九葡萄糖含量的测定——碘量法 一、实验目的 1、学会间接碘量法测定葡萄糖含量的方法原理,进一步掌握返滴定法技能。 2、进一步熟悉酸滴定管的操作,掌握有色溶液滴定时体积的正确读法。 二、实验原理 I2与NaOH作用可生成次碘酸钠(NaIO),次碘酸钠可将葡萄糖(C6H12O6)分子中的醛基定量地氧化为羧基。未与葡萄糖作用的次碘酸钠在碱性溶液中歧化生成NaI和NaIO3,当酸化时NaIO3又恢复成I2析出,用Na2S2O3标准溶液滴定析出的I2,从而可计算出葡萄糖的含量。涉及到的反应如下: 1) I2与NaOH作用生成NaIO和NaI: I2 + 2OH- = IO- + I- + H2O 2) C6H12O6和NaIO定量作用: C6H12O6 + IO- = C6H12O7 + I- 总反应式为:I2 + C6H12O6 + 2OH- = C6H12O7 + 2I- + H2O 3) 未与葡萄糖作用的NaIO在碱性溶液中歧化成NaI和NaIO3: 3IO- = IO3- + 2I- 4) 在酸性条件下,NaIO3又恢复成I2析出: IO3- + 5I- + 6H+ = 3I2 + 3H2O 5) 用Na2S2O3滴定析出的I2 I2 + 2S2O32- = S4O62- + 2I- 因为1mol葡萄糖与1molI2作用,而1molIO-可产生1molI2从而可以测定出葡萄糖的含量。 三、仪器与试剂 分析天平、台秤、烧杯、酸式滴定管、碱式滴定管、容量瓶(250mL)、移液管(25mL)、锥形瓶(250mL)、碘量瓶(250mL) I2(s)(A.R.)、KI(s)(A.R.)、Na2S2O3(s)(A.R.)、Na2CO3(s)(A.R.)、K2Cr2O7(s)(A.R. ,于140℃电烘箱中干燥2h,贮于干燥器中备用)、KI(20%)、HCl(6mol·L-1)、淀粉溶液(0.5%)、NaOH(2mol·L-1)、葡萄糖试样(0.05%)。 四、实验步骤

葡萄糖检测试剂盒(邻甲苯胺比色法)

仅供科研版本号:180720 葡萄糖检测试剂盒(邻甲苯胺比色法) 【产品组成】 【保存条件】 4℃,避光,6个月 【产品概述】 葡萄糖(Glucose,Dextrose,Glu)又称玉米葡糖,简称葡糖,化学式C6H12O6,分子量为180.16,是自然界分布最广、最重要的一种单糖,属于多羟基醛。用酶学方法测定葡萄糖是生化检测中的常用方法,最常用的有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法,上述酶学法特点是:1、灵敏度、准确度、精密度均高;2、使用温和的反应条件;3、操作简便;4、适用于自动分析仪。测定葡萄糖亦可通过邻甲苯胺法、苯胺法、联苯胺法等实现。 葡萄糖检测试剂盒(邻甲苯胺比色法)检测原理是葡萄糖在加热的有机酸中脱水后能与邻甲苯胺缩合呈雪夫氏碱,后者呈蓝绿色,其最高吸收峰为630nm颜色深浅与葡萄糖含量成正比,经分光光度计与标准品进行对比求得葡萄糖量。本试剂盒专门用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的葡萄糖含量定量测定。本试剂盒的特点:1、特异性高,其测定结果为真糖值;2、不受还原物质干扰;3、无需去除血浆或血清中的蛋白质。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。 【使用方法】 1、样本处理: ①血清、血浆、脑脊液样本:从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血,直接检测,如超过线性范围(25mmol/L),用蒸馏水稀释后检测。 ②细胞样本: a、取适量的细胞(一般推荐>106以上),1000g离心10min,弃上清,留取沉淀。 b、用PBS或生理盐水清洗1~2次,1000g离心10min,弃上清,留取沉淀。 c、加入200~300μl的PBS或生理盐水匀浆,冰浴条件下超声破碎细胞,功率300W,每次3~5s,间隔30s,重复3~5次。亦可手动匀浆,制备好的匀浆液不可离心,待用。亦可用1~2%Triton X-100冰浴30~60min,制备好的裂解液不可离心,待用。 ③组织样本:准确称取适量组织样本,按质量(g):生理盐水或PBS(ml)=1:9的比例,加入生理盐水或PBS,冰浴条件下手动或机械匀浆。2500~3000g离心10min,取上清待用。 2、制作葡萄糖标准曲线:取离心管5支,依次加入Glu标准(10mg/ml)0.125ml、0.25ml、0.5ml、0.75ml、1.0ml,再以蒸馏水稀释至2.5ml。 具体见下表: 南京森贝伽生物科技有限公司网址:https://www.360docs.net/doc/e617288106.html,/ 第1页

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