一、实验目的与要求: 掌握石蜡切片制作的基本过程及其注意...新版120
石蜡切片制作注意事项

石蜡切片制作注意事项
制作石蜡切片时需要注意以下事项:
1. 选择合适的石蜡:石蜡应具备良好的可切性和固化性能,以确保制作出的切片质量高。
2. 切片仪的选择与调整:使用合适的切片仪,并根据需要调整刀片的切割厚度和速度,以保证切片的精细度和均匀度。
3. 样本的处理:在制作石蜡切片前,需要对待切割的样本进行适当的处理,如固定、去水化等,以确保样本的结构和形态不发生变化。
4. 切片过程的控制:在切割过程中,要确保刀片的刀口清洁度和角度正确,避免产生切口缺陷或剪切变形。
同时,要控制好切割速度,避免过快或过慢导致切片质量不佳。
5. 切片后的处理:制作出的石蜡切片需要进行一系列的处理,如染色、清洗和固定等,以便后续的显微镜观察和分析。
6. 保持实验环境清洁:制作石蜡切片的实验室应保持清洁,避免灰尘或异物的污染,以确保切片质量。
总之,制作石蜡切片需要仔细控制每个步骤和参数,以获得高质量的切片样品,从而保证后续的研究准确性和可信度。
石蜡切片制作实验报告(二)

石蜡切片制作实验报告(二)石蜡切片制作实验报告实验目的掌握石蜡切片的制作方法,了解其在生物学研究中的应用。
实验原理通过将样品置于石蜡中,使其固定后切割成薄片,然后染色观察样品中的细胞和组织结构。
实验材料•组织样品•石蜡•石蜡切片机•切片染色盒•水、乙醇、甲醇等试剂实验步骤1.取适量的组织样品,放入石蜡中固定。
2.用石蜡切片机将固化后的石蜡和组织样品切割成薄片。
3.用甲醇或乙醇脱除石蜡。
4.进行染色处理,如使用伊红染色。
5.将染好色的切片放入切片染色盒中,加入水并覆盖。
实验结果通过显微镜观察切片中的细胞和组织结构,可窥见其微观世界。
依据样品的不同,可看到各种细胞器、细胞分裂、组织的形态、结构和功能等信息。
实验注意事项1.操作时应戴手套和护目镜以保护手部和眼睛。
2.切片机的切割速度应适中,避免快过头造成样品损伤。
3.染色剂应均匀覆盖于切片表面,以免造成不必要的误差。
实验结论石蜡切片技术是生物学科研中必不可少的一种技术手段,能够突显样品中的微观结构,帮助科研工作者更好地了解和研究生物体的各种组织和器官。
实验应用石蜡切片技术在生命科学与医学领域得到了广泛的应用,如: - 组织学研究:观测组织中各种细胞器、细胞分裂、细胞凋亡等现象。
- 免疫学研究:确定免疫组织化学定位,如免疫组织化学染色等。
- 病理学研究:观测肿瘤等病理组织的构造特征。
- 分子生物学研究:观测基因的表达、蛋白质的结构等。
- 药理学研究:观察药物对细胞和组织的影响。
实验可能出现的问题及解决方法1.样品切面出现粗糙、污染现象:可能是切割速度太快,应适当降低切割速度。
2.切片中出现气泡或破损:可能是样品固定不够完整或者太多切片被叠加在一起,应减少切割深度或重新采集样品。
3.切片上未能完全染色:可能是涂抹染色剂时没有均匀涂抹,应均匀涂抹液体染色剂或更换染色试剂。
4.显微镜观察时出现模糊影响:可能是显微镜镜头或平台不够清洁,应及时清理。
结语石蜡切片技术是生物学研究中不可或缺的重要手段,在多个领域都得到了广泛应用。
石蜡超薄切片实验报告

1. 掌握石蜡超薄切片的制作技术,包括组织固定、脱水、包埋、切片、染色和封片等步骤。
2. 学习观察和分析石蜡超薄切片,了解组织细胞的结构和功能。
二、实验原理石蜡超薄切片是一种重要的组织学制片方法,用于观察细胞和亚细胞结构。
其基本原理是:将组织标本进行固定、脱水、包埋、切片、染色和封片等步骤,制成超薄切片,然后在电子显微镜下观察。
三、实验材料与试剂1. 实验材料:小鼠肝脏、肾脏、心肌等组织。
2. 实验试剂:中性甲醛固定液、FAA固定液、乙醇、丙酮、二甲苯、石蜡、Epon812包埋剂、苏木素、伊红、封片剂等。
四、实验步骤1. 组织固定:将新鲜组织置于中性甲醛固定液中固定24小时。
2. 脱水:将固定后的组织依次放入30%、50%、70%、85%、95%、100%乙醇中脱水,每级乙醇处理30分钟。
3. 透明:将组织放入丙酮中处理1小时,然后放入二甲苯中处理1小时。
4. 包埋:将脱水和透明的组织浸入Epon812包埋剂中,室温固化过夜。
5. 切片:将包埋好的组织块切成1μm厚的超薄切片。
6. 染色:将切片放入苏木素染液中染色5分钟,然后用蒸馏水洗去多余染料。
7. 封片:将染色后的切片放入封片剂中,盖上盖玻片,制成石蜡超薄切片。
五、实验结果与分析1. 组织切片观察:在光学显微镜下观察,可见细胞核呈蓝色,细胞质呈红色。
2. 电子显微镜观察:在电子显微镜下观察,可见细胞核、细胞质、细胞器等亚细胞结构。
1. 石蜡超薄切片是一种重要的组织学制片方法,可以观察细胞和亚细胞结构。
2. 在实验过程中,应注意组织固定、脱水、包埋、切片、染色和封片等步骤,以保证切片质量。
3. 通过观察石蜡超薄切片,可以了解组织细胞的结构和功能,为病理学、生物学等研究提供重要依据。
七、实验总结本次实验成功制作了石蜡超薄切片,并在光学显微镜和电子显微镜下观察了组织细胞的结构和功能。
通过实验,掌握了石蜡超薄切片的制作技术,为今后的研究奠定了基础。
石蜡制片实验报告

一、实验目的1. 学习石蜡制片的基本原理和操作步骤。
2. 掌握石蜡制片过程中常用的试剂和设备。
3. 了解石蜡制片在组织学、病理学等领域的应用。
二、实验原理石蜡制片是一种将组织固定、脱水、透明、包埋、切片和染色等一系列操作过程结合在一起的实验技术。
通过石蜡制片,可以使组织在显微镜下观察到其形态结构。
石蜡制片的基本原理是利用石蜡的物理和化学性质,将组织固定、脱水、透明、包埋,并使其具有适宜的硬度和透明度,以便于切片和染色。
三、实验器材与试剂1. 器材:石蜡切片机、切片刀、切片刀架、切片夹、载玻片、盖玻片、剪刀、镊子、剪刀、酒精灯、火柴、显微镜、烤箱、离心机、移液器、微量滴管、染色缸、染色瓶、试剂瓶、试管、试管架等。
2. 试剂:4%多聚甲醛固定液、70%酒精、80%酒精、95%酒精、无水乙醇、醇苯、二甲苯、石蜡、石蜡熔融剂、中性树胶、苏木精、伊红、盐酸酒精、磷酸盐缓冲液等。
四、实验步骤1. 组织固定:取新鲜组织,用4%多聚甲醛固定液固定24小时以上。
2. 组织脱水:将固定好的组织放入70%酒精中浸泡2小时,然后依次放入80%酒精、95%酒精、无水乙醇、醇苯中浸泡各2小时。
3. 组织透明:将脱水的组织放入二甲苯中浸泡2小时,使组织透明。
4. 组织包埋:将透明的组织放入石蜡中,加热熔融,使组织浸入石蜡中。
待石蜡凝固后,将组织从石蜡中取出,放入包埋框中,贴上标签。
5. 组织切片:将包埋好的组织块放入石蜡切片机中,调整切片厚度(一般为4μm),进行切片。
6. 组织展平:将切片从石蜡切片机上取下,放入水中展平。
7. 组织染色:将展平的切片放入苏木精染液中染色5分钟,然后用盐酸酒精分化,最后放入伊红染液中复染。
8. 组织封片:将染色的切片放入中性树胶中封片,待树胶凝固后,用盖玻片封片。
9. 显微镜观察:将封片后的切片放入显微镜中观察,记录观察结果。
五、实验结果与分析1. 组织切片:经过石蜡制片,组织切片呈现出良好的透明度和硬度,便于观察。
石蜡制片实验报告

篇一:石蜡切片技术实验报告题目:石蜡切片技术实验报告学院:农学院,专业:植物学,姓名:张永丰,学号:2011202010目的掌握石蜡切片技术,为以后的科研中切出合格的实验装片做准备。
并观察植物叶的横切面内部结构。
材料:已经固定好的女贞叶方法与操作步骤一、脱水:依次使用下列浓度的乙醇脱水50%乙醇—70%乙醇—85%乙醇—95%乙醇—100%乙醇—100%乙醇每步两个小时。
二、透明:依次通过下列试剂进行透明1、1/2无水乙醇1/2二甲苯(加少许番红粉末,对材料进行附染)两个小时2、二甲苯两个小时3、二甲苯一个小时三、浸蜡:浸蜡步骤如下1、将材料瓶中的二甲苯取出1/2,加入剩余二甲苯的体积3/2倍的石蜡液于36℃温箱中处理35小时2、换用纯石蜡液于60℃温箱中处理2小时,再换一次纯石蜡液处理2小时四、包埋与切片1、在提前准备好的纸盒中放入少量蜡液。
2、片刻后放入材料,避免形成断层还要注意材料摆放的位置和方向。
3、及时将蜡块冷却,防治形成结晶。
4、修块与粘连:将多余的石蜡切除,使蜡块成为梯形;将蜡块一正确的方向粘连在枕木上。
5、切片:利用切片机将蜡块切成薄片。
切片厚度为8~10μm,以每分钟40~50转为宜。
6、粘片与展片:在载玻片上滴一滴黏贴剂和一滴蒸馏水用牙签涂匀,将蜡带光面朝下固定于载玻片上,放到展片台上经加温使其充分展开。
7、干燥:将展好的片放于36℃温箱中干燥16小时五、脱蜡:切片分别经过下列步骤进行脱蜡二甲苯1/2二甲苯1/2无水乙醇乙醇85%乙醇70%乙醇 5min六、染色:染色分为番红染色和固绿染色两步1、番红染色:将载玻片放入盛有番红染液(1%番红,70%乙醇)的染缸中染色22小时2、固绿复染:载玻片依次经过一下处理固绿染液(0.1%固绿,95%乙醇)20秒3、脱水:95% 1min 100% 1min 100%1min4、透明:1/2二甲苯1/2无水乙醇 1min 二甲苯 1min 二甲苯七、封片中性树胶封片,干燥八、镜检将封好的装片在显微镜下观察,并挑选清晰的具有叶横切面典型结构特征的部位拍照。
石蜡切片的制作过程

使其沉淀或过滤后再使用。浸蜡不透包埋后会出现白色不透明部分,此时需要在浸蜡一次。 6.包埋 包埋就是将已经浸渗好的组织块包埋于浸渗剂中,石蜡包埋法如下。 浸蜡终了时,将预先预热好的和第四杯石蜡相同熔点的石蜡倒入折好的蜡槽内,然后从第四 个蜡杯中取出组织块,放入蜡槽内,摆好位置,注意组织切面的摆放方向。放好组织后可以 自然冷却,也可以放入冷水中直接冷却。 7.塑型和切片 取已经包埋好的蜡块,将纸盒拆下,用加热的刀片或解剖刀将其分成若干块(每块组织占一 块),用解剖刀将组织块周围多余的石蜡切去,注意不要切到组织。把有组织的蜡块修成正 方形或梯形。在进行塑型时一定要注意组织块切面的方向。蜡块塑好后将其粘在小木块上。 注意要粘牢。最后在木块侧面用铅笔记上组织块名称、编号。 切片时采用手摇连续切片机。使用切片机进行切片时,将蜡块固定在切片机上,调好距离和 所要求的切片厚度,然后用右手摇动手柄,即可进行切片了。一般来讲生物切片的厚度在 5~ 10 微米。 对于切下的切片不要用手去取,因为体温可以使蜡片粘到手上,正确的做法是用毛笔或牙签 挑取,然后放在载玻片上进行展片和粘片。 8.展片和粘片 切下的组织蜡片往往带有皱褶,所以在染色前必须进行蜡片的展片和粘片,即把切好的蜡片 平整的粘在载玻片上。展片的温度因石蜡熔点的不同而的不同,一般的 56~58℃的石蜡切 片℃的温水进行展片,48~52℃的石蜡切片用 35℃的温水进行展片。等到蜡片充分展平后, 取一清洁载玻片,载玻片上涂一薄层蛋白甘油,然后在水中捞取蜡片,捞完后将蜡片摆正, 放到格盘内,置 38℃温箱中烘干,然后即可进行染色。 展片和粘片比较简单容易做,但是如果处理不好则无法进行染色,即使能染上色,组织切片 内部的结构也往往被破坏。 9.染色和封固 为了观察组织内部的细微结构,必须应用某些与固定后的原生质有亲合性的染料,对组织进 行染色,否则有碍观察。普通的染色法有两种即苏木紫伊红染色法(简写为 H•E)染色结果 是细胞核为紫色,细胞质为粉红色;另一种方法为铁苏木紫染色(简写为 I•A),染色的结 果是全部着以深浅不同的蓝色。 苏木紫伊红染色法整个染色过程如下: 取已经干燥的切片,放于盛有二甲苯的染缸内脱蜡 10min 左右,这个过程称为脱蜡。脱完 蜡后的切片即可进行染色,具体染色过程和时间如下: (1)100%酒精洗去二甲苯 2~5min。 (2)95%酒精 2~5min。 (3)90%酒精 2~5min。 (4)80%酒精 2~5min。 (5)70%酒精 2~5min。 (6)50%酒精 2~5min。 (7)蒸馏水洗 2~5min。 (8)苏木紫染液 10~20min。 (9)普通水洗 1min。 (10)盐酸酒精分色数秒~半分钟(70%酒精 100ml+盐酸 1ml),分色到切片为带粉红色 后立即取出。 (11)自来水冲洗数小时。镜检切片呈清朗的蓝色,细胞核非常明显。
石蜡切片制作和HE染色实验报告
石蜡切片制作和HE染色实验报告实验目的:
1. 掌握石蜡切片制作的基本步骤;
2. 熟悉HE染色的操作方法;
3. 观察并分析实验结果。
实验材料和仪器:
1. 组织标本;
2. 石蜡切片机;
3. HE染色试剂盒;
4. 显微镜。
实验步骤:
1. 组织标本处理,将组织标本固定、脱水、透明化和浸渍石蜡;
2. 石蜡切片制作,使用石蜡切片机将处理好的组织标本切成薄片;
3. HE染色,将切片依次浸入hematoxylin染液、脱水、eosin
染液和透明剂中;
4. 实验结果观察,使用显微镜观察染色后的切片,记录并分析
细胞结构和染色效果。
实验结果:
1. 经过石蜡切片制作和HE染色处理后,观察到组织标本的细
胞结构清晰可见;
2. HE染色使细胞核染成蓝色,胞质染成粉红色,对比明显;
3. 实验结果符合预期,证明石蜡切片制作和HE染色操作正确。
实验总结:
通过本次实验,我掌握了石蜡切片制作和HE染色的基本操作方法,对细胞结构和染色效果有了更深入的了解。
在今后的实验中,我将继续加强实验操作技能,提高实验结果的准确性和可靠性。
石蜡的切片实验报告
一、实验目的1. 熟悉石蜡切片的制作过程。
2. 掌握石蜡切片的染色技术。
3. 了解石蜡切片在组织学研究和病理诊断中的应用。
二、实验原理石蜡切片技术是一种常用的组织学制片方法,其原理是将组织标本进行脱水、浸渍、浸蜡等处理,使其在石蜡中充分浸渍,然后用微型切片机将其切成薄片,最终制成组织学切片。
石蜡切片具有切片厚薄均匀、染色效果好、保存时间长等优点,是组织学研究和病理诊断的重要工具。
三、实验材料1. 实验动物:小白鼠2. 实验器材:石蜡切片机、显微镜、载玻片、盖玻片、染色缸、酒精灯、剪刀、镊子等3. 实验试剂:卡诺氏固定液、FAA固定液、各种浓度的酒精、二甲苯、石蜡、埃利希苏木精染液、1%伊红酒精溶液、1%盐酸酒精溶液等四、实验步骤1. 取材:取小白鼠肝脏组织,用剪刀剪成小块。
2. 固定:将剪好的组织块放入卡诺氏固定液中固定24小时。
3. 脱水:将固定好的组织块依次放入70%、80%、90%、95%、100%酒精溶液中,每级酒精溶液浸泡1小时,使组织逐渐脱水。
4. 透明:将脱水的组织块依次放入三个二甲苯溶液中,每缸浸泡1小时,使组织逐渐透明。
5. 浸蜡:将透明的组织块依次放入三个石蜡溶液中,每缸浸泡1小时,使组织完全浸渍在石蜡中。
6. 包埋:将浸好蜡的组织块放入熔蜡中,待石蜡凝固后取出,用剪刀修整蜡块。
7. 切片:将修整好的蜡块固定在石蜡切片机上,调整切片厚度为4微米,制成石蜡切片。
8. 展片:将切好的石蜡切片展平在载玻片上。
9. 脱蜡:将展平的石蜡切片依次放入二甲苯、无水乙醇中,使切片脱蜡。
10. 染色:将脱蜡后的切片放入苏木精染液中染色5-10分钟,然后放入1%盐酸酒精溶液中分化,最后放入伊红染液中复染30秒。
11. 封片:将染好的切片放入封片液中封片。
五、实验结果制作完成的石蜡切片在显微镜下观察,可见到肝脏组织的细胞结构,如细胞核、细胞质、血管等。
六、实验讨论1. 石蜡切片技术是组织学研究和病理诊断的重要工具,具有切片厚薄均匀、染色效果好、保存时间长等优点。
中学生物实验技能实验报告——石蜡切片的制作
东北师范大学生命科学学院中学生物实验技能实验报告
名称:石蜡切片的制作
姓名:路路
学院:生命科学学院
专业:生物科学(师范)
年级:10级
学号:1241410044
【实验名称】石蜡切片的制作
【实验目的】了解石蜡切片的用途,并掌握其制作过程和方法。
石蜡切片(paraffin section),组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。
石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。
例如在医学上,常常用石蜡切片做病例分析和诊断。
【实验步骤及原理】石蜡切片法包括取材、固定、洗涤和脱水、透明、浸蜡、包埋、切片与粘片、脱蜡、染色、脱水、透明、封片等步骤。
一般的组织从取材固定到封片制成玻片标本需要数日,但标本可以长期保存使用,为永久性显微玻片标本。
以下即为石蜡标本制作的流程图:。
土豆石蜡切片的制作实验报告实验设计
土豆石蜡切片的制作实验报告实验设计实验名称:土豆石蜡切片的制作实验目的:通过制作土豆石蜡切片,了解切片技术的基本原理和操作过程,并观察土豆组织的细胞结构。
器材和试剂:1. 土豆2. 石蜡3. 切片刀4. 切片夹5. 石蜡浸透剂6. 75%酒精7. 甘油、甲醛等固定剂8. 显微镜实验步骤:1. 准备土豆:将土豆洗净,去皮,切成约1cm宽的薄片。
2. 固定土豆组织:将土豆片放入固定剂中,如甲醛、甘油等,固定30分钟至1小时。
3. 脱水处理:将固定后的土豆组织放入70%酒精中浸泡,间歇性更换酒精,直至组织完全脱水。
4. 浸透处理:将脱水后的土豆组织放入石蜡浸透剂中浸泡,时间根据石蜡类型和组织大小而定。
5. 切片:将浸透处理好的土豆组织取出,用切片刀将其切成薄片。
6. 制备石蜡切片:将切好的土豆片用切片夹夹紧,将其浸泡在熔化的石蜡中,然后将切片夹连同石蜡一起放入冷却水中快速冷却。
7. 切片修整:用刀片修整切片,使其变得平整。
如果需要,可以将切片放在温水中浸泡片刻,再用玻片铁丝夹将它们铺好。
8. 染色:如果需要染色,可以将切片放入染色剂中浸泡一段时间,然后将其洗净并封闭。
9. 观察:将制作好的土豆石蜡切片放在显微镜下观察,并记录观察结果。
实验结果和分析:1. 土豆组织的形态及细胞结构可通过显微镜观察到。
2. 制备的石蜡切片是否成功主要依据切片是否完整、清晰。
切片夹的固定程度也会影响切片的质量。
实验注意事项:1. 实验过程中要注意安全,特别是在使用切片刀和夹子时要小心操作,以免划伤手指。
2. 切片时要保持手稳定,切割时用适当的力度。
3. 在切片修整过程中,要小心操作,以免切片变形或损坏。
4. 在显微镜下观察切片时,要调节镜头和光源,以获取清晰的图像。
5. 染色时要注意染色剂的浓度和染色时间,避免过度染色或染色不足。
实验拓展:1. 可以尝试制作其他蔬菜或水果的石蜡切片,并比较它们的细胞结构。
2. 可以尝试使用不同的染色剂对切片进行染色,了解不同染色剂的染色效果。