淫羊藿总黄酮清除DPPH自由基的紫外-可见吸收光谱研究
淫羊藿总黄酮胶囊指纹图谱研究
淫羊藿总黄酮胶囊指纹图谱研究张小强;张小龙;杨晶;李英;吴云;丁岗;王振中;萧伟【摘要】目的:建立淫羊藿总黄酮胶囊HPLC指纹图谱测定方法.方法:以淫羊藿苷为参照物,色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18(250 nmn ×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-水,梯度洗脱;流速为1.0 mL· min-1;柱温为25℃;检测波长为270 nm.结果:建立了淫羊藿总黄酮胶囊的指纹图谱,确定了淫羊藿总黄酮胶囊中14个共有峰,10批成品指纹图相似度在0.95以上,同时指认了淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C和宝霍苷I各色谱峰.结论:建立的HPLC指纹图谱有较好的精密度、重复性和稳定性,适用于淫羊藿总黄酮胶囊的质量控制.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2016(018)008【总页数】4页(P1051-1054)【关键词】指纹图谱;淫羊藿总黄酮胶囊;高效液相色谱法;淫羊藿苷;宝霍苷Ⅰ【作者】张小强;张小龙;杨晶;李英;吴云;丁岗;王振中;萧伟【作者单位】江苏康缘药业股份有限公司,江苏连云港222001;中药制药过程新技术国家重点实验室,江苏连云港222001;江苏康缘药业股份有限公司,江苏连云港222001;中药制药过程新技术国家重点实验室,江苏连云港222001;江苏康缘药业股份有限公司,江苏连云港222001;中药制药过程新技术国家重点实验室,江苏连云港222001;江苏康缘药业股份有限公司,江苏连云港222001;中药制药过程新技术国家重点实验室,江苏连云港222001;江苏康缘药业股份有限公司,江苏连云港222001;中药制药过程新技术国家重点实验室,江苏连云港222001;江苏康缘药业股份有限公司,江苏连云港222001;中药制药过程新技术国家重点实验室,江苏连云港222001;江苏康缘药业股份有限公司,江苏连云港222001;中药制药过程新技术国家重点实验室,江苏连云港222001;江苏康缘药业股份有限公司,江苏连云港222001;中药制药过程新技术国家重点实验室,江苏连云港222001【正文语种】中文淫羊藿为常用中药，为小檗科(Berberidaceae)淫羊藿属Epimedium多种植物的干燥地上部分，其性辛，味甘，具有补肾阳、强筋骨、祛风湿之功能。
膜分离纯化药酒中淫羊藿总黄酮的工艺研究
膜分离纯化药酒中淫羊藿总黄酮的工艺研究下载温馨提示：该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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淫羊藿总黄酮体外抗氧化实验
淫羊藿总黄酮体外抗氧化实验赵文红;邓泽元;范青生;张维民【期刊名称】《南昌大学学报（理科版）》【年(卷),期】2009(033)001【摘要】对淫羊藿有效成分总黄酮进行了体外抗氧化实验.离体培养大鼠肝组织,建立体外组织的过氧化模型,通过测定淫羊藿提取物对多种自由基的清除效果,以验证其抗氧化功能.其中对肝匀浆的自氧化及诱导性氧化均有较好的抑制作用,并成一定的对数曲线关系,其IC50分别为34.87ug/mL和198.45 ug/mL;对肝线粒体的诱导性氧化亦有较好的抑制作用,其IC50剂量为332.65 ug/mL;对DPPH·OH、·O2-的清除作用IC50分别为4.67 ug/mL、598.17 ug/mL和413.21 ug/mL.结果表明:该提取物对大鼠肝组织及肝线粒体的自发和诱导的脂质过氧化均有很好的抑制效果;并能对超氧自由基、羟自由基及DPPH自由基进行清除,具有较好的抗氧化功能.【总页数】4页(P53-55,60)【作者】赵文红;邓泽元;范青生;张维民【作者单位】南昌大学,国家食品科学重点实验室,江西,南昌,330047;南昌大学,国家食品科学重点实验室,江西,南昌,330047;南昌大学,中德联合研究院,江西,南昌,330047;南昌大学,中德联合研究院,江西,南昌,330047【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.淫羊藿总黄酮对实验性糖尿病大鼠肾脏保护作用 [J], 钱虹;杨钧杰;潘定一;唐文涛;许可佳;齐敏友2.淫羊藿总黄酮对大鼠动脉血压影响及其机制的实验研究 [J], 付立波;夏映红;于丽;吴江;赵华3.淫羊藿总黄酮对实验性脑缺血的保护作用初探 [J], 杨娟;许立;方泰惠4.淫羊藿总黄酮对小鼠实验性隐睾复位固定手术后生精功能恢复的作用 [J], 曾晓;袁丁;王婷;狄国杰;刘苗苗;李靳;刘朝奇;张长城5.淫羊藿总黄酮延缓秀丽隐杆线虫衰老的实验研究 [J], 蔡外娇;张新民;黄建华;沈自尹因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
淫羊藿黄酮类成分指纹图谱研究
淫羊藿黄酮类成分指纹图谱研究牛晓静，鲁静，段晓颖，徐立然河南中医药大学第一附属医院，河南郑州 450008摘要：目的 建立淫羊藿中黄酮类成分HPLC指纹图谱。
方法 采用Agilent ZORBAX Eclispse SB-C18色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 µm），以乙腈（A）-水（B）为流动相，梯度洗脱（0～8 min，15%→25%A；8～25 min，25%A；25～32 min，25%→33%A，32～48 min，33%→38%A；48～60 min，38%→60%A；60～70 min，60%→85%A；70～75 min，15%A），流速1.0 mL/min，柱温30 ℃，检测波长为270 nm，进样量10 µL。
对11批淫羊藿指纹图谱进行相似度分析及方法学考察。
结果 11批淫羊藿药材有21个共有峰，相似度为0.845～0.952，对5个色谱峰进行了归属；方法学考察结果表明，建立的分析方法重复性、精密度、稳定性良好；相似度分析将11批淫羊藿分为4大类，与淫羊藿物种鉴定结果一致。
结论 不同产地淫羊藿有一定的相似性，HPLC指纹图谱能够为淫羊藿的物种鉴定及内在质量评价提供依据。
关键词：淫羊藿；黄酮类成分；指纹图谱；高效液相色谱法中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304(2019)03-0088-05DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2019.03.019 开放科学（资源服务）标识码（OSID）：Study on Fingerprints of Flavonoids Ingredients in Epimedii FoliumNIU Xiaojing, LU Jing, DUAN Xiaoying, XU LiranThe First Affiliated Hospital of Henan University of Chinese Medicine, Zhengzhou 450008, ChinaAbstract:Objective To establish HPLC fingerprints of flavonoids ingredients in Epimedii Folium. Methods Thechromatographic fingerprint was obtained with Agilent ZORBAX Eclispse SB-C18 (4.6 mm × 150 mm, 5 µm) aschromatographic column, with acetonitrile (A) - water (B) as the mobile phase for gradient elution (0–8 min, 15%→25% A; 8–25 min, 25% A; 25–32 min, 25%→33% A; 32–48 min, 33%→38% A; 48–60 min, 38%→60% A; 60–70 min,60%→85% A; 70～75 min, 15% A). The flow rate was 1.0 mL/min, and the column temperature was maintained at30 ℃. The detection wavelength was set at 270 nm. The similarity analysis and methodological investigation wereconducted to fingerprints of 11 batches of Epimedii Folium. Results There were 21 common peaks with similaritiesbetween 0.845 and 0.952 in 11 batches of Epimedii Folium and 5 chromatographic peaks were identified. Themethodological investigation results showed that the established analytical method had good repeatability, precisionand stability. Similarity analysis divided 11 batches of Epimedii Folium into 4 categories, consistent with theidentification results of Epimedii Folium species. Conclusion Epimedii Folium from different producing areas have acertain of similarities. HPLC fingerprints can provide basis for species identification and intrinsic quality evaluationof Epimedii Folium.Keywords: Epimedii Folium; flavonoids ingredient; fingerprints; HPLC淫羊藿为小檗科植物淫羊藿Epimedium brevicornu Maxim.、箭叶淫羊藿Epimedium sagittatum （Sieb.et Zucc.）Maxim.、柔毛淫羊藿Epimedium pubescens Maxim.或朝鲜淫羊藿Epimedium koreanum Nakai的干燥叶，夏、秋季莲叶茂盛时采收，晒干或基金项目：河南省科技发展计划（152300410105）；河南中医学院科研苗圃工程项目（mp2015-03）通讯作者：段晓颖，E-mail：dxy137@ 阴干[1]。
关于辽宁产朝鲜淫羊藿不同药用部位有效成分含量的测定
关于辽宁产朝鲜淫羊藿不同药用部位有效成分含量的测定【摘要】目的测定辽宁不同产区朝鲜淫羊藿不同药用部位中淫羊藿苷及总黄酮的含量。
方法以淫羊藿苷为指标，采用高效液相色谱法测定淫羊藿苷的含量，紫外分光光度法测定总黄酮的含量。
结果叶中淫羊藿苷的含量在0.197%～0.347%范围内，茎中淫羊藿苷的含量在0.043%～0.050%范围内；叶中总黄酮的含量在6.68%～8.85%范围内，茎中总黄酮的含量在1.3%～2.7%范围内。
淫羊藿苷在0.3～1.8 μg(r＝0.999 9)和0.5～3 μg/mL(r＝0.999 9)范围内线性关系良好。
淫羊藿苷的平均回收率为99.43%(n＝6，RSD＝0.29%)，总黄酮为100.38%(n＝9，RSD＝1.60%)。
结论辽宁不同地区的朝鲜淫羊藿有效成分含量不同，不同药用部位的总黄酮和淫羊藿苷含量差异较大，叶中的总黄酮和淫羊藿苷远高于茎。
【关键词】朝鲜淫羊藿；总黄酮；淫羊藿苷；含量测定Abstract：Objective To determine the content of icariin and flavonids in Epimedium koreanum Nakai of different place of production and different pharmaceutical genetic in Liaoning Province. Methods Icariin was used as the chemical reference substance to establish HPLC and ultraviolet spectrophotometry methods for content determination of icariin and total flavonoids. Results The content of icariin in leaves was from 0.197% to 0.347%， and in stem was from 0.043% to 0.050%. The content of total flavonids in leaves was from 6.68% to 8.85%， and in stem was from 1.3% to 2.7%. The calibration curves of icariin was in good linearity over the range of 0.3～1.8 μg (r＝0.999 9) and total flavonids was 0.5～3 μg/mL (r＝0.999 9). The average recovery oficariin was 99.43% (n＝6， RSD＝0.29%) and total flavonids was 100.38% (n＝9， RSD＝1.60%). Conclusions The content of flavonids in Epimedium koreanum Nakai of different place of production and different pharmaceutical genetic has large difference， the content in leaves is far higher than in stem.Key words：Epimedium koreanum Nakai；total flavonids；icariin；content determination朝鲜淫羊藿(Epimedium koreanum Nakai)为小檗科淫羊藿属植物，系多年生宿根性草本，是淫羊藿的主要来源之一。
淫羊藿有效成分分析及其体内代谢的研究共3篇
淫羊藿有效成分分析及其体内代谢的研究共3篇淫羊藿有效成分分析及其体内代谢的研究1淫羊藿是一种传统中药材，被广泛应用于男性性功能障碍、腰膝酸软等症状的治疗。
它的有效成分主要是类黄酮和多糖等化合物，已经被证明具有多种生物活性和药理作用。
本文对淫羊藿的有效成分分析及其体内代谢进行了研究。
1. 淫羊藿的有效成分淫羊藿含有较高含量的黄酮类化合物，其中主要成分有淫羊藿苷、淫羊藿甙、异淫羊藿苷等。
多糖类是淫羊藿的另一种主要成分。
淫羊藿多糖的结构是葡萄糖、半乳糖和甘露糖等多糖组成，其中以葡萄糖为主。
2. 淫羊藿的生物活性淫羊藿的有效成分具有多种生物活性和药理作用。
其中，最广泛的应用是其在男性性功能方面的效果。
淫羊藿苷、淫羊藿甙等黄酮类化合物具有加强性欲、提高性能力的作用。
同时，多糖类可以增强机体免疫功能、抗氧化、抗肿瘤等。
3. 淫羊藿的体内代谢淫羊藿的多种有效成分在体内代谢过程中会发生变化。
其主要代谢途径是通过肝脏的代谢酶作用被分解和转化。
淫羊藿中的黄酮类化合物在肠道中被胃酸和肠道酵素水解成糖苷和黄酮酸，随后进入肝脏被代谢成各种代谢产物。
而淫羊藿中的多糖类则在胃肠道中就被分解和转化为单糖和短链葡萄糖等物质，然后到达肝脏，被代谢成各种代谢产物。
总的来说，淫羊藿的有效成分具有多种生物活性和药理作用，对男性性功能方面的改善效果较为显著。
其中的黄酮类化合物和多糖类均可以被肝脏代谢分解，形成各种代谢产物。
未来还需要进一步研究淫羊藿的化学成分和药理作用，以及深入探究其体内代谢途径和代谢产物的形成机理综上所述，淫羊藿作为传统中草药已经被证明具有多种生物活性和药理作用，尤其在男性性功能方面有一定的改善效果。
其黄酮类化合物和多糖类可以被肝脏代谢分解，形成各种代谢产物。
然而，还需要更深入的研究探究其化学成分和药理机制，以及代谢产物的形成机理，从而更好地发挥其药用价值淫羊藿有效成分分析及其体内代谢的研究2淫羊藿有效成分分析及其体内代谢的研究淫羊藿作为一种传统中草药，在治疗男性阳痿、早泄等性功能障碍方面具有广泛应用。
基于近红外光谱结合化学计量学对淫羊藿药材中总黄酮的检测研究
基于近红外光谱结合化学计量学对淫羊藿药材中总黄酮的检测
研究
欧阳燕琴;李霞;张勇;张发森;莫传灼;曾艳兰;黄元红
【期刊名称】《药物化学》
【年(卷),期】2024(12)1
【摘要】目的:本研究旨在建立近红外光谱法快速检测淫羊藿药材中总黄酮的方法。
通过使用近红外光谱仪对淫羊藿样品进行扫描,对其光谱进行预处理和波段选择,结
合偏最小二乘法(Partial Least Squares, PLS)建立了总黄酮的快速无损检测方法。
方法:利用近红外光谱仪扫描淫羊藿样品,对其光谱进行预处理和波段选择,同时结合偏最小二乘法(partial least squares, PLS)建立总黄酮快速无损检测方法。
结果:所建立的模型的决定系数R为0.9289,交叉验证均方根差值为0.863,经过对验证集样品进行预测并统计分析,预测值与真实值之间无显著差异(P > 0.05)。
结论:所建立
的模型具有高准确度,适用于淫羊藿的总黄酮的快速检测。
【总页数】7页(P61-67)
【作者】欧阳燕琴;李霞;张勇;张发森;莫传灼;曾艳兰;黄元红
【作者单位】华润三九医药股份有限公司深圳;深圳市中药制造业创新中心有限公司深圳
【正文语种】中文
【中图分类】R28
【相关文献】
1.红外光谱结合化学计量学快速预测铁皮石斛中总黄酮含量
2.化学计量学结合近红外光谱在中药材分析中的应用
3.基于近红外光谱结合化学计量学的板蓝根中浸出物含量的检测研究
4.基于近红外光谱结合化学计量学的气滞胃痛颗粒中芍药苷的检测研究
5.基于近红外光谱结合化学计量学的复方感冒灵颗粒原药材南板蓝根中水分的检测研究
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费约果叶总黄酮提取及其DPPH自由基清除活性探讨
费约果叶总黄酮提取及其DPPH自由基清除活性探讨费约果叶总黄酮提取及其DPPH自由基清除活性探讨概述总黄酮是一类天然生物活性物质，广泛存在于植物中，具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗肿瘤、降血脂等多种生物活性。
费约果是一种唇形科植物，具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种保健功效，其叶片中含有丰富的总黄酮。
本文旨在探讨费约果叶总黄酮提取及其DPPH自由基清除活性的相关内容。
材料与方法材料：费约果叶，甲醇，DPPH（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼），维生素C（VC）。
方法：1.费约果叶总黄酮提取（1）取1g费约果叶，加入100 mL甲醇，在60℃水浴中回流提取3 h。
（2）过滤提取液，收集滤液，并将其在旋转蒸发器中浓缩至干燥状态。
（3）用10 mL甲醇重溶，得到费约果叶总黄酮提取物。
2.DPPH自由基清除活性实验（1）将DPPH溶于甲醇中，制备成0.2 mM DPPH溶液。
（2）取0.1 mL总黄酮提取物，加入4.9 mL DPPH溶液中，混匀后在室温下静置30 min。
（3）测定溶液的吸收率（A）值，计算DPPH自由基清除率。
（4）用VC作为正对照，同样方法进行实验。
结果与讨论在对费约果叶进行总黄酮提取后，得到了黄褐色的提取物1.48 g，得率为14.8%。
通过紫外光谱分析，发现总黄酮提取物在285 nm处有一个明显的吸收峰，说明提取物中存在总黄酮。
在进行DPPH自由基清除活性实验中，发现随着总黄酮提取物的浓度增加，其DPPH自由基清除率呈现明显的上升趋势。
当黄酮提取物的浓度为0.6 mg/mL时，其DPPH自由基清除率为59.61%。
VC的清除率为85.17%，但总黄酮提取物的清除活性与VC相差不大，说明费约果叶总黄酮提取物具有较强的DPPH自由基清除活性。
随着DPPH浓度的下降，总黄酮提取物的DPPH清除率逐渐升高，表明总黄酮提取物具有良好的清除自由基活性，可以有效防止一系列自由基引发的相关反应。
结论本实验成功提取了费约果叶总黄酮，并对其DPPH自由基清除活性进行了测定。
淫羊藿苷的提取及纯化工艺研究
淫羊藿苷的提取及纯化工艺研究淫羊藿是一种具有重要药理作用的天然药用植物，淫羊藿所含的黄酮类物质尤其是主要活性成分淫羊藿苷具有广泛的生理活性，可用于调血脂、抗高血压、抗炎、抗骨质疏松、抗衰老、抗肿瘤等方面。
本文以陕西产箭叶淫羊藿为材料，从节约原材料、降低生产成本及提高产能等方面着手，研究淫羊藿苷的提取纯化工艺。
主要研究内容如下：（1）确定了淫羊藿苷的最佳提取工艺条件。
分别采用正交设计法和均匀设计法对淫羊藿苷提取条件进行了探讨。
正交设计法优化的提取条件为：12倍原料重的70％乙醇，回流浸提3次，1.5h／次，此时淫羊藿苷的提取率和含量分别为24.48％和4.25％；均匀设计法优化的提取条件为：10倍原料重的80％乙醇，回流浸提3次，1.5h／次，此时淫羊藿苷的提取率和含量分别为28.04％和6.52％。
结果表明均匀设计所得结果优于正交设计，并将其定为最佳提取工艺。
（2）利用红外光谱和高效液相色谱对淫羊藿苷进行了定性定量分析。
从淫羊藿苷标准品和样品的红外谱图上可以看到淫羊藿苷主要共有特征峰为：3380cm<sup>-1</sup>，2940cm<sup>-1</sup>，2850cm<sup>-1</sup>，1734cm<sup>-1</sup>，1654cm<sup>-1</sup>，1605cm<sup>-1</sup>，1385cm<sup>-1</sup>，1260cm<sup>-1</sup>，1080cm<sup>-1</sup>，1033cm<sup>-1</sup>等，表明它们含有相同或相似的有效成分，可以作为淫羊藿苷定性分析的依据。
从高效液相色谱图也能看出，淫羊藿苷标准品和样品的保留时间一致。
淫羊藿药材的UPLC指纹图谱研究
川、辽宁等地，淫羊藿基源由天津中医药大学王晖
老师鉴定。 2 方法与结果 2.1 色谱条件 色谱柱：CORTECS誖C18 柱（2.1 mm× 100 mm，1.6 μm）；流动相：A 相 0.1% 甲酸水，B 相乙 腈；梯度洗脱，洗脱梯度为：0~4 min，5%~20% B； 4 ~5 min，20%~25% B；5~10 min，25%~25% B；10~ 11 min，25% ~40% B；11 ~17 min，40% ~48% B；17 ~ 18 min，48%~5% B，流速为 0.3 mL/min；柱温：40 ℃； 进样量：1 μL；检测波长 270 nm。 2.2 溶液的制备 2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取木兰花碱、 朝藿定 A、朝藿定 B、朝藿定 C、淫羊藿苷 、宝藿苷 I 对照品各 5.00 mg，加甲醇定容至 50 mL，配制成 100 μg/mL 的储备液，4 ℃冰箱储存备用。 2.2.2 供试品溶液的制备 分别精密称取不同批 次淫羊藿粗粉（过 60 目筛）50.0 mg，加 70% 乙醇定 容至 5 mL，超声提取 1 h，加 70%乙醇补足失重，取 上清液经 0.45 μm 有机微孔滤膜过滤即得，4 ℃冰 箱储存备用。不同批次淫羊藿的产地及基源见表 1。
淫羊藿药材的临床使用。因此，需要建立快速、可靠
的分析检测方法，以便能够更加全面、系统的评价
淫羊藿药材的质量。
中药指纹图谱是将某种中药材或中成药经过
* 基金项目：国家自然科学基金项目（81673824）；重大新药 创制项目（2015ZX09501004-003-004）。 作者简介：尹艳微（1991-），女，硕士研究生，研究方向为中
药学。 通讯作者：何 俊，E-mail：hejun673@。
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淫羊藿总黄酮清除DPPH自由基的紫外-可见吸收光谱研究作者：姚金龙来源：《医学信息》2020年第20期摘要：目的; 研究淫羊藿总黄酮的提取、分离及纯化工艺，建立紫外-可见吸收光谱滴定法，评价淫羊藿总黄酮清除DPPH自由基的抗氧化活性。
方法; 通过保持其它条件不变，分别考察浸提温度、料液比和乙醇浓度对提取液中淫羊藿总黄酮含量的影响，设计三因素三水平的正交实验，提取温度60 ℃～80 ℃，乙醇浓度50%～70%，料液比1：35～1：15，做3次平行实验，优化淫羊藿总黄酮的最佳提取工艺条件。
结果; 温度70 ℃、60%乙醇浓度和1：25料液比是最优提取工艺条件，淫羊藿精提液中总黄酮质量浓度为10.15 μg/ml，含量为31.72%。
光谱滴定法结果表明，淫羊藿总黄酮的质量浓度≥0.002 mg/ml时，清除率达79.17%。
结论; 淫羊藿总黄酮对DPPH自由基有很好的清除能力，抗氧化活性强。
关键词：淫羊藿总黄酮;紫外-可见吸收光谱;DPPH自由基;抗氧化中图分类号：R285;TS201.2; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ;文献标识码：A; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ;DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2020.20.053文章编号：1006-1959（2020）20-0164-03Study on the UV-Vis Absorption Spectra of Scavenging DPPH Free Radicalsby Total Flavonoids of EpimediumYAO Jin-long（Department of Pharmaceutical Engineering，Jiangxi Medical School，Nanchang 330200，Jiangxi，China）Abstract：Objective; To study the extraction， separation and purification process of total flavonoids of epimedium， and establish a UV-Vis absorption spectrometric titration method to evaluate the antioxidant activity of total flavonoids of epimedium in scavenging DPPH free radicals.Methods; By keeping other conditions unchanged， the effects of extraction temperature，material-to-liquid ratio and ethanol concentration on the total flavonoids content of epimedium in the extract were investigated respectively. An orthogonal experiment with three factors and three levels was designed， and the extraction temperature was 60 ℃～80 ℃，the ethanol concentration is 50%～70%， the material-liquid ratio is 1：35～1：15， three parallel experiments are performed to optimize the optimal extraction process conditions of the total flavonoids of epimedium.Results; Temperature 70 ℃， 60% ethanol concentration and 1：25 solid-liquid ratio were the optimal extraction conditions. The mass concentration of total flavonoids of epimedium extract was 10.15μg/ml and the content was 31.72%. The results of spectrometric titration showed tha t when the mass concentration of total flavonoids of epimedium ≥ 0.002 mg/ml， the clearance rate reached79.17%.Conclusion; The total flavonoids of epimedium had good scavenging ability to DPPH free radicals and strong antioxidant activity.Key words：Total flavonoids of epimedium;UV-Vis absorption spectroscopy;DPPH free radical; Antioxidant現代医学研究表明，自由基氧化损伤是引起多种疾病的根源[1]，自由基的进攻会使生命机体内的生物大分子如核酸（DNA、RNA）、酶、蛋白质、糖等发生氧化损伤，并导致生物膜的脂质过氧化，对内脏器官、免疫系统的形态功能产生影响[2]。
目前，已有研究证实羟基自由基OH·能与DNA碱基发生加成反应造成DNA链的断裂和碱基对的损伤[3];超氧自由基O2-·与生物膜中的磷脂发生过氧化连锁反应，破坏膜的稳定性和完整性，甚至造成细胞的坏死;过剩的O2-·还会引起炎症和肿瘤等[4]。
因此，清除自由基[5]的研究已经成为了当今药学学科领域的一大热点，研究发现，淫羊藿总黄酮[6]具有优越的抗氧化性能，该类化合物可以与自由基发生氧化还原反应，从而调节细胞处于还原状态，抵抗机体损伤，减少疾病的产生[7]，具有较好的研究前景。
但目前淫羊藿总黄酮的提取工艺较多，提取质量不一，为其在临床的进一步应用造成了困难。
为此，本文以淫羊藿总黄酮为研究对象，采用控制温度、乙醇浓度和料液比正交实验方法来优化淫羊藿总黄酮的最佳提取工艺条件，旨在为淫羊藿总黄酮的进一步研究提供帮助。
1材料与仪器主要仪器包括分光光度计、水浴锅、天平、干燥箱、烘干器等，试剂包括DPPH、淫羊藿苷、乙醇（AR）、乙酸乙酯（AR）等，具体来源情况见表1。
2方法与结果2.1淫羊藿总黄酮粗提液的制备; 取淫羊藿叶粉碎，过60目筛，准确称取淫羊藿粉末5.0 g，置于250 ml圆底烧瓶中，加入60%乙醇45 ml室温浸泡辅助浸提30 min，70 ℃回流2次，2 h/次，将提取液抽滤，得总黄酮粗提液。
保持其它条件不变，分别考察浸提温度、料液比和乙醇浓度3个单因素对提取液中淫羊藿总黄酮含量的影响，设计三因素三水平的正交实验，优化得出淫羊藿总黄酮提取率最高的最佳条件，且每个单因素做三次平行实验。
以淫羊藿总黄酮提取率为标准，因素水平见表2，最后确定一种最优提取工艺，用于淫羊藿总黄酮的提取。
实验结果显示，影响淫羊藿总黄酮提取率的因素大小次序为：C>B>A，B和C因数的R 较大，说明淫羊藿总黄酮提取率主要受乙醇浓度和料液比2个因素制约，而提取温度影响不显著。
根据K值的大小可知，淫羊藿总黄酮提取的最优条件为A2B2C2，即微波功率为中低火-中火（300 W），提取温度为70 ℃，乙醇浓度为60%，料液比为1：25，见表3。
2.2淫羊藿总黄酮的分离纯化; 取淫羊藿粗提液，用乙酸乙酯萃取，萃取液旋转蒸发浓缩，真空低温干燥至恒重，得浸膏，称取适量浸膏加入适量蒸馏水配制成一定浓度的淫羊藿总黄酮精提液备用。
2.3淫羊藿苷标准曲线的绘制; 准确称取淫羊藿苷标准品1.0 mg，用无水乙醇溶液稀释定容至10 ml，摇匀，得淫羊藿苷储备液。
分别精密吸取0、0.25、0.50、0.75、1.0、1.25 ml的淫羊藿苷储备液于一系列25 ml的比色管中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。
以试剂空白作参比，在λmax=260 nm处测量其吸光度A，以吸光度对藿苷溶液的浓度C作图，绘制标准曲线，用最小二乘法进行回归，得到吸光度A和淫羊藿苷标准溶液的浓度C的回归方程：A=14.274C-0.0029（r=0.9989），见图1。
2.4淫羊藿总黄酮含量的测定; 按照2.3中的方法定量测定淫羊藿精提液在不同条件下的吸光度值，对应淫羊藿苷标准曲线方程，查找得到测定液中的总黄酮含量。
经测定，淫羊藿精提液中总黄酮质量浓度为10.15 μg/ml，含量达31.72%。
2.5 DPPH体系稳定性; 研究随着时间的变化，DPPH自由基的醇溶液中吸光度值的变化。
结果发现，在1 h内，A值保持稳定，见图2，因此所有样品应在1 h之内测定完毕。
2.6 DPPH反应体系的吸收光谱及测定波长的确定; 在DPPH自由基清除法中，有机溶剂中的DPPH可形成稳定的具有两个典型的特征吸收峰的自由基，自由基颜色为紫红色。
当反应体系中存在抗氧化剂时，抗氧化剂能提供出相应个数的氢原子和电子给DPPH自由基，使其生成DPPH2，DPPH2可以改变溶液的吸光度值和特征吸收峰，峰值变弱，吸光度降低。
在此反应中，被测物质的抗氧化能力可以有体系颜色的变化来表示，颜色褪色越多，说明抗氧化能力越强。
实验中用UV-Vis光谱对DPPH自由基溶液进行扫描。
结果显示，DPPH溶液在517 nm和328 nm处出现特征吸收峰，而淫羊藿总黄酮的吸收峰在260 nm，见图3。
说明淫羊藿总黄酮本身在517 nm处不会对DPPH测定造成光谱干扰，因此实验以517 nm作为DPPH自由基清除实验的检测波长。
2.7 DPPH稳定性实验; 新鲜配制的DPPH溶液在波长为328 nm和517 nm处有很强的特征吸收峰，见图4。
DPPH溶液在≤1 h时，稳定性好，但若长时间放置在室温下，并且在光照氧化条件下，放置时间越长，DPPH溶液颜色会由紫红色变浅，吸光度值在波长为517 nm处降低明显。
结果表明，DPPH溶液的光吸收值会受到光照强度和温度高低的影响。
因此，为了得到准确的测试结果，DPPH溶液保存环境必须是低温，反应也应在避光低温条件下完成。
2.8 DPPH自由基清除实验; 避光精密称定一定量的DPPH，用乙醇作溶剂，配制成5.0 mmol/L的储备液，-20 ℃存放，现用现配。