植物生理学实验课程
《植物生理学实验》课程大纲
一、课程概述
课程名称(中文):植物生理学实验
(英文):PlａｎｔPｈysiology Eｘｐeｒiments
课程编号:18241054
课程学分:0。8
课程总学时:24
课程性质:专业基础课
前修课程:植物学、生物化学、植物生理学
二、课程内容简介
植物生理学就是农林院校各相关专业得重要学科基础课,就是学习相关后续课程得必要前提,也就是进行农业科学研究与指导农业生产得重要手段与依据。本实验课程紧密结合理论课学习内容,加深学生对理论知识得理解。掌握植物生理学得实验技术、基本原理以及研究过程对了解植物生理学得基本理论就是非常重要得。本大纲体现了植物生理学最实用得技术方法、实验内容上与农业生产实践相结合,加强学生服务三农得能力。实验手段与方法上,注重传统、经典技术理论与现代新兴技术得结合,提高学生对新技术、新知识得理解与应用能力。
三、实验目标与要求
植物生理学实验得基本目标旨在培养各专业、各层次学生有关植物生理学方面得基本研究方法与技能,包括基本操作技能得训练、独立工作能力得培养、实事求就是得科学工作态度与严谨得工作作风得建立。开设植物生理学实验课程,不仅可以使学生加深对植物生理学基本原理、基础知识得理解,而且对培养学生分析问题、解决问题得能力与严谨得科学态度以及提高科研能力等都具有十分重要得作用。
要求学生实验前必须预习实验指导与有关理论,明确实验目得、原理、预期结果,操作关键步骤及注意事项;实验时要严肃认真专心操作,注意观察实验过程中出现得现象与结果;及时将实验结果如实记录下来;实验结束后,根据实验结果进行科学分析,完成实验报告、
四、学时分配
植物生理学实验课学时分配
实验项目名称学时实验类别备注
植物组织水势得测定３学时验证性
叶绿体色素得提取及定量测定3学时验证性
植物得溶液培养及缺素症状观察3学时验证性
植物呼吸强度得测定3学时设计性
红外CＯ2分析仪法测定植物呼吸速率３学时设计性选修
植物生长物质生理效应得测定3学时验证性
植物种子生活力得快速测定3学时验证性
果实、蔬菜中有机酸含量测定3学时设计性
植物抗逆性得鉴定３学时设计性
改良半叶法测定植物得光合速率6学时综合性选修
植物生理综合演示实验３学时综合、设计性演示
合计36学时
注:本实验课程总计0。8学分,合24学时,安排8次实验,其中验证性实验占6２、5％,综合性、设计性实验占37。5％、
五、实验内容安排
实验一:植物组织水势得测定(3学时)
(一)实验目得
了解植物体不同组织与细胞之间、植物与环境之间水分移动与植物组织水势得关系;
熟悉植物组织水势测定得原理与一般方法;
掌握小液流法测定植物组织水势得基本方法。
(二)实验材料与用品
实验材料:植物叶片。
实验用品:ＣaCｌ2或蔗糖溶液、甲烯蓝溶液、试管、带塞离心管、试管架、移液管、洗耳球、洗瓶、标签纸、吸水纸、旋涡混合器、打孔器(φ０。5cm)、塑料垫板、镊子、弯头吸管、超声波清洗机、烘箱、纯水机等。
(三)实验内容与方法
1。配制0。０5、0。１0、０。１5、0、２0、0、２5、0.3０、０。35、0.40 moｌ·L —1共８种浓度得CaCｌ
２或蔗糖溶液;
２.测定女贞、冬青等功能叶片组织水势;
3、计算植物组织水势;
4.结果分析。
(四)作业
１、测定植物组织水势有何意义？
２.小液流法测定植物组织水势得优缺点？
实验二:叶绿体色素得提取及定量测定(3学时)
(一)实验目得
了解叶绿素得荧光现象及产生荧光得机理;
熟悉叶绿体色素得提取方法;
掌握分光光度计法测定叶绿体色素含量得基本过程。
(二)实验材料与用品
实验材料:新鲜植物叶片。
实验用品:95％乙醇(或丙酮)、碳酸钙、石英砂、电子天平、组织捣碎机(或研钵、研棒)、剪刀、漏斗、玻棒、烧瓶、量筒、7２2型分光光度计(或７５１型或其它精密型)、日光灯、
圆形滤纸、吸水纸、擦镜纸等。
(三)实验内容与方法
1.叶绿体色素得提取;
2、叶绿素荧光得观察;
3.分光光度计测定6６3nm、64５nm得吸光值;
4。计算Ｃhla、Cｈlｂ得含量及Ｃｈla/b得比值、
(四)作业
1、为什么提取叶绿素时干材料一定要用８0%得丙酮,而新鲜得材料可以用无水丙酮提取？
2.叶绿素a、ｂ在蓝紫光区也都有一吸收峰,能否用这一吸收峰波长进行叶绿素ａ、b得定量测定?
3。分析比较活体测定得叶绿素含量与提取测定得区别。
实验三:植物得溶液培养及缺素症状观察(3学时)
(一)实验目得
了解植物得溶液培养技术在理论、生产上得实际应用;
熟悉植物溶液培养法得原理与基本方法;
掌握植物必需元素得生理作用及典型得缺素症状、
(二)实验材料与用品
实验材料:玉米、蕃茄幼苗。
实验用品:硝酸钾、硫酸镁、磷酸二氢钾、硫酸钾、硫酸钠、磷酸二氢钠、硝酸钠、硝酸钙、氯化钙、硫酸亚铁、硼酸、氯化锰、硫酸铜、硫酸锌、钼酸、盐酸、乙二胺四乙酸二钠(EＤＴA—Ｎa２)、烧杯、移液管、量筒、微量加液器、试剂瓶、培养缸、纯水机等。(三)实验内容与方法
１.配制系列溶液培养液:完全液、-N液、—P液、－Ｋ液、-Ｃa液、-Mｇ液、—Fe液;
2。将玉米苗或番茄幼苗固定在培养瓶中培养3—４个星期;
3.每星期观察植株表现症状,同时补加或更换培养液;
4。记录植株表现得症状并分析。
(四)作业
１。为什么说溶液培养就是研究矿物质营养得重要方法?
２.溶液培养过程中,为什么要打气、补加或更换培养液？
3、根据实验结果叙述玉米、番茄幼苗缺乏必需元素时所表现得症状并分析原因。
实验四:植物呼吸强度得测定(3学时)
(一)实验目得
了解不同组织器官、不同生育期植物呼吸强度得差异;
熟悉呼吸速率在植物生理学研究及农业生产实践等方面得重要作用;
掌握广口瓶法测定植物呼吸强度得基本方法。
(二)实验材料与用品
实验材料:豆芽、黄豆;植物花、叶等不同器官。
实验用品:1／44 mol·L－1草酸溶液、0.０５ｍol·L—１Bａ(ＯH)2溶液酚、酞指示剂、广口瓶测定呼吸装置、三角瓶、电子天平、酸式滴定管、滴定管架等。
(三)实验内容与方法
1.装配广口瓶测定呼吸装置;
2、空白滴定;
3.样品滴定;
４.计算呼吸强度、
(四)作业
１、影响植物呼吸强度得因素有哪些？
２、在呼吸强度测定中哪些步骤容易出现误差,应当怎样避免？
3.测定植物呼吸强度有何意义？
实验五:红外ＣＯ2分析仪法测定植物呼吸速率(3学时)
(一)实验目得
了解不同组织器官、不同生育期植物呼吸强度得差异;
熟悉呼吸速率在植物生理学研究及农业生产实践等方面得重要作用;
掌握红外线气体分析仪法测定植物呼吸强度得基本方法。它不但快速、准确,而且可将测定信号变为电信号输出,便于仪器得自动化与智能化、
(二)实验主要仪器
实验材料:番茄、桔子、草莓等果实或叶片以及蘑菇等活体植物。
实验仪器:GXH－３０５１型红外线CＯ２气体分析仪、
(三)实验内容与方法
1、按说明书要求连接仪器;
２.打开红外仪电源预热;
3、调零与校准;
4。测定;
5、计算呼吸速率。
(四)作业
1。掌握红外线ＣO2气体分析仪得原理与操作方法。
2.比较不同植物材料、不同生育期呼吸速率得差异。
实验六:植物生长物质生理效应得测定(3学时)
(一)实验目得
了解植物激素对各器官得不同效应;
熟悉植物生长素得生理效应;
掌握测定α－萘乙酸(NＡA)生理效应得方法。
(二)实验材料与用品
实验材料:小麦种子。
实验用品:饱与漂白粉(或０.1%HgCｌ2)、10mg·L-1萘乙酸(NAA)溶液、恒温培养箱、培养皿、移液管、微量取液器、圆形滤纸(直径与培养皿底内径相同)、尖头镊子、标签纸、纯水机等。
(三)实验内容与方法
１.配制10、1、0、1、0。０1、0。001、０、0001及0 ＰＰＭ得NAA溶液９mL于将培养皿中,编号;
2.种子消毒,每个培养皿中摆放1５粒种子,在暗中恒温箱中培养3天。
3。测定小麦种子萌发得根、芽生长量;
4.记录原始数据并作图分析ＮAA对各器官得不同效应。
(四)作业
１。您能否根据植物不同器官对生长素反应有所不同得原理,说明一些自然现象？
２.根据生长素得生理效应,举例说明生长素在生产上得应用。
3.如果需要用植物激素处理以生产无根豆芽,选择哪种激素或生长调节剂？为什么?
实验七:植物种子生活力得快速测定(3学时)
(一)实验目得
了解测定种子生活力对农业生产与种子经营产业得重要性;
熟悉种子生活力检测得基本原理与各种方法得特点;
掌握几种快速鉴定种子生活力得方法。
(二)实验材料与用品
实验材料:小麦种子。
实验用品:0。1％ＴTＣ溶液、红墨水溶液、烘箱、培养皿、镊子、单面刀片、垫板(切种子用)、烧杯、棕色试剂瓶、滤纸等。
(三)实验内容与方法
1、浸泡小麦种子:冷水16—20h或温水6－８h;
2.随机取种子2份,每份50粒,用单面刀片沿胚部中线纵切成两半,其中一半用于测定。同时将种子在沸水中煮沸3～5min,取5粒死种子作对照;
3、把切好得种子分别放在培养皿中,一份加TＴＣ溶液,以浸没种子为度,在3０~３5℃得恒温箱内保温30miｎ。另一份加红墨水溶液,以浸没种子为度,染色１0～20min;
4。用自来水反复冲洗,立即观察种胚着色情况,判断种子有无生活力。
(四)作业
1。比较几种快速测定种子生活力方法所测得得结果就是否相同？为什么？
2.实验测得得发芽率与实际发芽率就是否一致？为什么?
3。就您所知,还有哪些快速测定种子生活力得方法？
实验八:果实、蔬菜中有机酸含量得测定(3学时)
(一)实验目得
了解测定果蔬有机酸得意义;
熟悉测定果蔬有机酸方法得一般原理;
掌握果蔬中有机酸含量得测定方法。
(二)实验材料与用品
实验材料:不同发育阶段得苹果、桔子、
实验用品:１％酚酞试剂、0、1 moｌ·L—1NaOＨ、电子天平、研钵、研棒、水浴锅、漏斗、移液管、容量瓶、量筒、三角瓶、碱式滴定管等。
(三)实验内容与方法
1、有机酸提取:热水浸提果实、蔬菜中得有机酸;
2。有机酸含量测定:碱滴定法测定有机酸含量;
3.每组实验设３次重复;
4.结果计算、
(四)作业
1.分析比较不同果实或不同成熟度得果实有机酸含量得差异原因？
2。为什么说柠檬酸含量就是衡量果蔬品质得重要指标之一？
实验九:植物抗逆性得鉴定(3学时)
(一)实验目得
了解细胞膜透性变化在科研上得应用;
熟悉细胞膜系统得结构与功能;
掌握电导率仪法测定植物叶片抗逆性得原理与方法。
(二)实验材料与用品
实验材料:植物叶片、
实验用品:去离子水、DDＳ-11A型或DDS—11型电导仪、真空泵(附真空干燥器)恒温水浴锅、镊子、剪刀、烘箱、低温冰箱、移液管、烧杯等。
(三)实验内容与方法
１。容器得洗涤;
2。实验材料处理:正常与高温、低温等处理;
３.使用电导率仪测定去离子水得电导率(本底值)与正常、逆境处理叶片得电导率;
4。计算。
(四)作业
1。测定电解质外渗量时,为何要对材料进行真空渗入?测定过程中为何要进行振荡？
２.细胞受伤后为何透性会变大？透性变大有何害处?
3。据您所知,还有哪些因素会使细胞透性发生变化？透性增大就是否都属反常现象？
实验十:改良半叶法测定植物得光合速率(6学时)
(一)实验目得
了解生态环境因子对光合速率得影响;
熟悉CO２分析仪法、光合仪测定光合速率与改良半叶法得差异;
掌握改良半叶法测定植物光合速率得原理与方法。
(二)实验材料与用品
实验材料:女贞、冬青等植物叶片。
实验用品:石蜡、5％~１０％三氯乙酸、、烘箱、打孔器、称量瓶或铝盒、电子天平、剪刀、刀片、热水瓶、纱布、有盖搪瓷盘、纸牌、铅笔等。
(三)实验内容与方法
第一天:
1。选定有代表性得叶片(如不同冠层部位、不同向光面)１０张,挂牌编号;
2、根据材料得形态解剖特点选用环割、烫伤与化学环割方法切断韧皮部物质运输;
3.8:0０剪取一半叶片,记录时间,另一半叶片则留在植株上进行光合作用;
4.下午4:０0取下另一半叶片。将同张叶片得两半对应部位叠在一起,用打孔器在半叶得中部打下同样大小得叶面积,10５℃杀青１0分钟,8０℃烘至恒重。
第二天:
上午,烘干样品;
下午,称样品重、计算结果,做实验总结分析;
最后,完成实验报告。
(四)作业
１。与其它测定光合速率方法相比,改良半叶法测光合速率得优缺点及注意事项。
2、改良半叶法测单子叶植物(如水稻)得光合速率应如何操作?请设计一个试验方案、
３。比较叶片总光合速率与净光合速率测定时得不同之处,说明原因。
实验十一:植物生理学演示实验(3学时)
(一)实验目得
以演示实验视频得形式,展现《植物生理学》中水分生理、矿质营养、光合作用机理、呼吸作用机理以及植物成花与衰老等教学内容。
(二)实验素材
植物生理学教学演示实验汇总
项目名称分属章节阐述得知识要点
植物吐水现象水分生理根系吸水得动力
根系得吸附现象矿质营养根系对对矿质元素得吸收
叶绿素荧光现象光合作用叶绿素对光得吸收
打顶、打叉同化物运输顶端优势、植物激素
果实催熟植物成熟与衰老激素、呼吸作用与衰老得关系
丙二醛测定抗性生理逆境胁迫对植物生理得影响
(三)实验内容与方法
１。植物吐水现象:以小麦为材料,培养皿发苗一周后,观察壮苗吐水现象、实验所需仪器设备较少,准备周期为7—10天。
２。根系得吸附现象:以小麦为材料,培养皿发苗两周后,观察麦苗根系对甲烯蓝溶液得吸附作用。实验所需仪器设备较少,准备周期为１4—1６天。
3、叶绿素荧光现象:以菠菜叶片为材料,利用95％乙醇提取高浓度得叶绿素溶液,观察透射光与反射光下溶液颜色得改变。实验所需仪器设备适中,准备周期为2小时。
4.打顶、打叉:以荆芥为材料,培养皿发苗两周后,利用打顶处理,观察侧枝得生长。实验所需仪器设备较少,准备周期为14-１6天。
５.果实催熟:以苹果为材料,将有损伤得苹果与青苹果一起密封放置一周,观察青苹果成熟情况。该实验所需费用较高,准备周期为７—10天。
6。丙二醛测定:以不同衰老度得叶片为材料,利用硫代巴比妥酸显色法,测定其丙二醛含量,观察溶液颜色变化。实验所需仪器设备适中,准备周期为２小时。
(四)作业
1.植物根系吸收矿质元素得部位？简述根系吸收矿质元素得主要过程、
2.植物叶绿素荧光就是如何产生得?为什么叶绿素荧光被称为植物光合作用得探针？
３.植物顶端优势得维持与打破在农业生产上有何应用？
六、考核方式与成绩评定
百分制,满分100分。考核包括课堂回答问题、到课率、实验过程与结果,以及实验报告、成绩评定到课率占10%,实验过程与结果占30％,回答问题占30％,实验报告占30％。
七、教材及主要参考资料
教材:
赵海泉。基础生物学实验指导——植物生理学分册,北京:中国农业大学出版社,２008 主要参考资料:
高俊凤。植物生理学实验指导,北京:高等教育出版社,200６
陈建勋,王晓峰. 植物生理学实验指导(第二版),北京:华南理工大学出版社,200６
植物生理学实验课程
《植物生理学实验》课程大纲 一、课程概述 课程名称（中文）：植物生理学实验 （英文）：Plant Physiology Experiments 课程编号：18241054 课程学分：0.8 课程总学时：24 课程性质：专业基础课 前修课程：植物学、生物化学、植物生理学 二、课程内容简介 植物生理学是农林院校各相关专业的重要学科基础课，是学习相关后续课程的必要前提，也是进行农业科学研究和指导农业生产的重要手段和依据。本实验课程紧密结合理论课学习内容，加深学生对理论知识的理解。掌握植物生理学的实验技术、基本原理以及研究过程对了解植物生理学的基本理论是非常重要的。本大纲体现了植物生理学最实用的技术方法。实验内容上和农业生产实践相结合，加强学生服务三农的能力。实验手段和方法上，注重传统、经典技术理论与现代新兴技术的结合，提高学生对新技术、新知识的理解和应用能力。 三、实验目标与要求 植物生理学实验的基本目标旨在培养各专业、各层次学生有关植物生理学方面的基本研究方法和技能，包括基本操作技能的训练、独立工作能力的培养、实事求是的科学工作态度和严谨的工作作风的建立。开设植物生理学实验课程，不仅可以使学生加深对植物生理学基本原理、基础知识的理解，而且对培养学生分析问题、解决问题的能力和严谨的科学态度以及提高科研能力等都具有十分重要的作用。 要求学生实验前必须预习实验指导和有关理论，明确实验目的、原理、预期结果，操作关键步骤及注意事项；实验时要严肃认真专心操作，注意观察实验过程中出现的现象和结果；及时将实验结果如实记录下来；实验结束后，根据实验结果进行科学分析，完成实验报告。 四、学时分配 植物生理学实验课学时分配 实验项目名称学时实验类别备注 植物组织水势的测定3学时验证性 叶绿体色素的提取及定量测定3学时验证性 植物的溶液培养及缺素症状观察3学时验证性 植物呼吸强度的测定3学时设计性 红外CO2分析仪法测定植物呼吸速率3学时设计性选修 植物生长物质生理效应的测定3学时验证性 植物种子生活力的快速测定3学时验证性
植物生理学发展趋势
植物生理学的发展 植物生理学是研究植物生命活动规律的生物学分支学科，其目的在于认识植物的物质代谢、能量转化和生长发育等的规律与机理、调节与控制以及植物体内外环境条件对其生命活动的影响。包括光合作用、植物代谢、植物呼吸、植物水分生理、植物矿质营养、植物体内运输、生长与发育、抗逆性和植物运动等研究内容。 现在普遍认为植物生理学起源于16世纪荷兰人J.B van Helmont所做的实验来研究植物营养本质。随后植物生理学的发展大约经历了三个阶段。 一：18-19世纪，光合作用的概念具有雏形，其发现彻底动摇了植物营养的腐殖质理论。植物生理学开始孕育。 二：这一阶段大约经历了半个多世纪，十九世纪的三大发现，细胞学说、能量守恒定律和生物进化理论有力地推动了植物生理学的发展。在植物矿物质研究，渗透现象，光合作用，呼吸作用，生长发育生理方面取得了一些列的成就。十九世纪末二十世纪初，随着《植物生理学讲义》和《植物生理学》的出版。植物生理学正式从植物学和农业科学中分离出来，成为了一门单独的科学。 三：二十世纪随着科学技术的飞速发展，植物生理学也取得了很多成就电子显微技术，X 衍射技术，超离心技术，色层分析技术，膜片钳技术等成为研究的有力工具。二十世纪五十年代，随着DNA分子双螺旋结构的揭示和遗传密码子的发现，催生了分子生物学。在分子生物学的帮助下。植物生理学的研究开始向微观方面发展。 植物生理学现在所遇到的最大挑战普遍认为来自分子生物学。随着分子生物学的发展，植物的许多生理活动都可以用分子生物学的方式来解释。但是分子生物学只能解释一部分的问题，却不能解释所有的问题。 植物生理学的发展趋势一般概括为以下几个方面： 一：植物生理学内容的扩展以及和其他学科的交叉渗透。如计算机科学在植物生理学中营养和数学模拟研究某些生理问题，逆境生理方面与生态学和环境科学的交叉等。这种交叉渗透大大扩展了植物生理学的研究范围。 二：机理研究的深入和调控探讨的兴起。由于分子生物学的迅速发展，植物生理学已经可以在细胞和分子水平上去研究植物的生理活动。许多重要功能蛋白如RUBP羧化酶、光敏色素蛋白及钙调素等研究都是成功的范例。关于生命活动的调节也在不断的深入。 三：现代生命科学已经进入到两极分化与趋同的时代。在微观和宏观上不断深入并且相互融合。植物生理学也将符合这一趋势，不断重视从分子到到群体的不同层次的研究。 四：植物生理学的应用范围不断扩大。随着植物生理学研究内容的不断扩大。其应用范围也从农业林业扩大到环境保护，资源开发，医药，轻工业和商业等方面。并且在食品行业会有更大的应用。 随着植物生理学的不断深入研究，其应用范围肯定是越来越广的。 参考文献 1：魏小红，龙瑞军论现代科学技术革命对植物生理学发展的影响甘肃科技纵横 2：王晶赵文东甄纪东植物生理学作用于发展农机化研究 3：余小平植物生理学面临的挑战及发展趋势陕西师范大学积继续教育学报（西安）
植物生理学研究技术
植物生理学研究技术 长江大学农学院植物生理教研室 2004年8月
实验一植物组织水势的测定（小液流法）植物体内的生理生化活动与其水分状况密切相关，而植物组织的水势是表示植物水分状况的一个重要生理指标。目前，植物组织水势的测定主要有几种方法：小液流法、折射仪法、压力室法、露点法、热电偶法。前两种方法虽然简便，但精确性差。压力室法较适于测定枝条或叶柄导管的水势。露点法、热电偶法较适宜测定柔软叶片的水势，且精确度高，可在一定范围内重复测定叶片的水势，是较好的水势测定方法。植物的水势可作为制定灌溉的生理指标。 一、实验目的 通过实验，掌握用小液流法测定植物组织水势的原理和方法。 二、实验原理 水势代表水的能量水平，水总是从水势高处流向低处。水进入植物体内并分布到各组织器官中的快慢或难易由水势差来决定，水势越高，植物组织的吸水能力越差，而供给水能力越强。当植物组织与一系列浓度递增的溶液接触后，如果植物组织水势大于（或小于）外液的水势，则组织失水（或吸水），使外液浓度变低（或变高），密度变小（或变大）。如果植物组织的水势等于外液的水势时，植物组织既不失水也不吸水，外液浓度不变。当取浸泡过植物组织的溶液的小滴（亦称小液流，为便于观察应先染色），分别放入原来浓度相同而未浸泡植物组织的溶液中部时，小液流就会因密度不同而发生上升或下沉或不动的情况。小液流在其中不动的溶液的水势（该溶液为等渗浓度），即等于植物组织的水势。 三、实验材料、设备及试剂 1. 材料：植物叶片；马铃薯块茎等。 2. 仪器设备：试管；小瓶；小塞子；打孔器(直径0.5㎝)；尖头镊子；移液管（1ml、5ml、 10ml）；注射针钩头滴管；刀片。 3. 试剂：1mol·L－1蔗糖液；甲烯蓝粉。 四、实验步骤 1. 系列糖浓度配制 1.1 取干燥洁净试管6支，贴上标签，编号，用1mol·L－1蔗糖母液配成0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、 0.30 mol·L－1浓度的糖液，各管总量为10ml，并塞上塞子（防止浓度改变），作为甲组。 1.2 另取干燥洁净的小瓶6个，标明0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30mol·L－1浓度,分别从甲组取相应浓度糖液1ml盛于小瓶中，随即塞上塞子，作为乙组。 2. 取样及测定 2.1选取生长一致的叶片，用直径为0.5cm的打孔器钻取圆片，在玻璃皿内混匀，然后用镊子把圆片放进乙组小瓶中，每瓶放15～20片，（若采用植物块茎如马铃薯，先用打孔器钻取圆条，然后切成约1mm厚圆片，每瓶放5片），立即塞紧塞子，放置40min左右，其间轻轻摇动几次，以加速平衡。2.2到预定时间后，各小瓶加入几粒甲烯蓝粉染色，摇匀，取6支干燥洁净的注射针钩头滴管，分别从乙组中取出溶液，插入甲组原相应浓度蔗糖溶液的中部，轻轻挤出钩头滴管内的溶液，使成小液滴，并小心地抽出钩头滴管（注意勿搅动溶液），注意观察那些管的小液滴往上移动，那些管的小液滴往下
植物生理学实验基本理论
浙江大学实验报告 课程名称：植物生理学及实验实验类型：理论学习 实验项目名称：植物生理学实验基本理论 学生姓名：XX 专业：XX 学号：XXXXXXXX 同组学生姓名：XX / 指导老师：XX 实验地点：XXX 实验日期：XXXX 年X 月XX 日周二下午 题目： 对下列数据进行处理，并自学《影响光合作用的因素》或 Chapter 9 Photosynthesis: Physiological and Ecological considerations, p243-269，对所得结果进行分析和讨论。 比较两曲线的差别，求出光饱和点和光补偿点，根据实验数据和自学内容,分析为什么有这些差异？ (第1叶为最上部的剑叶，第3叶为较老的叶片) 表1 水稻抽穗期不同叶位叶片光和光合作用关系的测定值 (已知测定的条件相同,光合的单位为μmol CO2 m-2 s-1 ，光强的单位为μmol photon m-2 s-1 ）
数据处理与分析 用Excel对上述数据进行处理，求平均值如下表： 根据上表作图如下： 由图估计可得： 光补偿点光饱和点第一叶30.0 1700.0 第三叶20.0 800.0 差异与分析： 第一叶比第三叶光补偿点高的原因：因为第一叶是刚抽出的幼嫩的叶，他的新陈代谢比第三叶要强，呼吸作用产生的二氧化碳比第三叶多，所以第一叶达到光补偿点所要通过光合作用消耗的二氧化碳比第三叶多，故需要的光强更大。 第三叶的光饱和点比第一叶低且光合速率也比第一叶低的原因：第三叶相比第一叶是已经衰老的叶子，他的新陈代谢不如第一叶强，他体内的光合作用有关的酶的数量和活性比第一叶要低，而且第三叶中所含的叶绿素比第一叶少，其捕获的光能比第一叶少；此外，第三叶中叶绿体中的基粒由于衰老有部分水解，所以第三叶的光合速率较第一叶低且光的补偿点比第一叶低。
植物生理学实验考试卷
2018 —2019 学年第一学期课程名称：植物生理学实验 考试类别：闭卷（）开卷（√）其他（）培养层次：本科（）专科（√） 一、名词解释（共5题，每题3分，共计15 分） 1.渗透势 2.水势 3.生长大周期 4.植物生长调剂 5.植物激素 二、填空题（共20空，每空1分，共计20分） 1.叶片细胞水势公式：，当植物细胞水势小于外界溶液水势时，植物细胞外液浓度变。 2.植物生理实验时，在碾磨植物材料时经常会用的石英砂，其主要作用为 3.在做叶绿素提取是，在滤纸条上，两色素带间距离最大的是与，两色素带间距离最小的是与，从外向内依次为、、、。 4.可见光波长为；叶绿素吸光的红光部分和的蓝紫光部分 5.用乙醇做叶绿素提取实验时，测定叶绿素a的波长为, 叶绿素b。 12.种子生活力的快速测定法包括、、。 三、单项选择题（每空2分，共计20分） 1法测种子生命力，通过温水浸泡过的健康玉米种子，（）不会染色 A 胚芽 B 胚乳 C 胚轴 D 胚根 ２.五大类植物激素中最早发现的是（），促雌花是（），防止早衰保持绿色
的是（），可以使果实早熟熟的是（）。 Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、乙烯 ３.植物筛管中运输的主要物质是（） Ａ、葡萄糖Ｂ、果糖Ｃ、麦芽糖Ｄ、蔗糖 4.抗寒性较强的植物，其膜组分中较多（）。 Ａ、蛋白质Ｂ、Ｃ、不饱和脂肪酸Ｄ、饱和脂肪酸 5.冬小麦抽穗开花必须经过（） Ａ、未春化、短日照Ｂ、未春化、长日照 Ｃ、春化、短日照Ｄ、春化、长日照 6.叶绿素不能溶液以下哪种溶液（） A 乙醇 B 水 C 丙酮 D 氯仿 7.植物组织中的水分主要有自由水和束缚水两种形式存在，有同学通过实验测定某一植物的自由水和束缚水的比值比较大，可推断该植物处于（） A 旺盛生长时期 B 衰退状态 C 病虫危害状态 D 干旱状态 四、简答题（共3题，每题10分，共计30分） 1．简述测定植物组渗透势的基本原理和实验操作过程 2.研磨法提取叶绿素时为什么要加入少量的3？提取过程中应该注意哪些问题？ 3法法测定种子生活力的原理、现象？ 五、实验设计（共1 题，共计15分） 根据你所学的只知识，请你设计一个实验如何证明植物具有呼吸作用。
2018版-植物生物技术
《植物生物技术》课程教学大纲 一、课程基本情况 课程名称（中文）：植物生物技术 课程名称（英文）：Plant Biotechnology 课程代码： 学分：2 总学时：40 理论学时：32 实验学时；8 课程性质：学科专业课 适用专业：园艺 适用对象：本科 先修课程：植物学、植物生理学、生物化学、花卉学 考核方式：考查、闭卷平时成绩30% ，期终考试70% 教学环境：课堂、多媒体，实验室 开课学院：生态技术与工程学院 二、课程简介（任务与目的）（300字左右） 通过本课程的学习，要求学生掌握植物组织培养植物基因工程的基础知识、基本理论和基本技术。重点是植物的快速繁殖技术和组培苗工厂化生产技术。 三、课程内容及教学要求1 （一）植物组织培养 1、植物组织培养的基本条件和一般技术 2、植物离体快繁技术 3、植物组织培养苗的工厂化生产技术 4、园林观赏植物的组织培养技术 要求掌握植物组织培养的实验室设置及基本操作；重点是植物的快速繁殖技术和组培苗工厂化生产技术。 （二）植物细胞工程 1、原生质体培养 2、原生质体融合 3、胚性愈伤组织的获得及植株分化 掌握体细胞杂交的原理及基本操作 1主要描述课程体系结构、知识点、重点难点及学生应掌握的程度等。
（三）植物基因工程 1、植物基因的克隆 2、植物表达载体的构建 3、植物基因转移技术 4、转基因植物的检测 5、转基因植物的遗传 6、转基因植物的安全性评价 掌握基因工程的基本原理及基本操作 四、教学课时安排 五、课内实验 六、教材与参考资料 《植物生物技术》张献龙、唐克轩主编，科学出版社，2004 《植物生物技术》许智宏主编，上海科学出版社， 1997 《植物组织培养教程》李浚明编译，中国农业大学出版社，2002. 《植物细胞组织培养》刘庆昌等主编，中国农业大学出版社，2003 . 《观赏植物组织培养技术》谭文澄等主编，中国林业出版，1991.
植物生理实验希尔反应
植物生理学实验 希尔反应的观察和反应速率的测定
摘要： 本实验以新鲜的菠菜叶片为实验材料；以菠菜的离体叶绿体为实验对象，由离体叶绿体悬浮液在光下能还原某些氧化剂，根据2,6 -二氯酚靛酚在光下从蓝色到粉红色再到无色的变化，观察希尔反应。在本实验中观察到，加入叶绿体悬浮液的试管，在光下由蓝色变为绿色（由于叶绿体存在的原因）；暗处的试管仍为蓝色。 一、实验原理与实验目的 实验原理： 希尔发现，离体叶绿体悬浮液在光下能还原某些氧化剂（如2,6 -二氯酚靛酚、高铁氰化钾、苯醌、NADP+、草酸等）2H2O+2A →2AH2+O2 希尔反应的测定的方法是（1）放氧速率；（2）氧化剂被还原的速率。本实验中2,6 -氯酚靛酚还原后，溶液由兰色变为无色。 实验目的： 观察和测定希尔反应，了解叶绿体在光合放氧中的作用。 二、实验材料和方法 实验材料：菠菜 实验器材：离心机、分光光度计、天平、研钵、漏斗、容量瓶、量筒、烧杯、纱布、移液管、台灯等 实验试剂：（1）提取液（0.067M 磷酸缓冲液，pH 6.5 + 0.3M 蔗糖+ 0.01M KCl）；（2）0.1% 2,6 -二氯酚靛酚（溶于0.067M 磷酸缓冲液+0.01%KCl） 三、实验步骤 1.离体叶绿体悬浮液的制备 称取8克叶片,加10ml预冷提取液研磨,在研钵中捣碎30秒钟后,继续加入15ml冷提取液; 经过二层纱布过滤,去残渣,挤出滤液,置于离心管中。 以1000转/分离心3分钟;弃去沉淀。 以3000转/分离心上层液,8分钟,弃去上清液,沉淀为破碎的叶绿体。 用20ml提取液悬浮沉淀,置于冰浴备用。 2.离体叶绿体对2,6 -二氯酚靛酚的还原作用 取2支试管，分别加入5ml叶绿体悬浮液和1ml 0.1%的2,6 -二氯酚靛酚。一试管照光，另一试管置于黑暗。5-10min后观察溶液颜色的变化。 四、实验结果与讨论 实验结果： 黑暗处的试管颜色未发生变化，一直都是蓝绿色； 光照下的试管颜色明显变浅，由较深的蓝绿色变为浅绿色，证明希尔反应的存在，可见离体叶绿体悬浮液在光下能还原某些氧化剂。 实验讨论： 1、离体叶绿体对染料的还原作用实验中,比较两个处理的溶液颜色有何不同,并解释实验结
植物生理学实验指导
植物生理学实验指导 主编张立军 参编（按姓氏汉语拚音） 樊金娟郝建军 刘延吉阮燕晔 朱延姝
沈阳农业大学植物生理学教研室 2004年1 月 序 实验课是提高学生动手能力，提高分析问题和解决问题能力的重要途径。植物生理学教研室的全体教师和实验技术人员经过多年的教改探索，认为实验课教学要注意基本实验技能的训练、要有助于提高学生的动手能力，有助于使学生熟悉实验工作；实验内容要有挑战性，能够吸引学生的兴趣。为此，我们在借鉴国外高校和国内其他高校的先进教学经验的基础上，提出了一系列提高实验课教学质量的改革措施，这些措施涉及到实验内容的设置、实验的设计、实验报告的写作，以及实验指导书的编写等多个方面。本学期的实验教学是我们实验教学改革探索的一部分。所有的实验都设计成研究型的，有适当的处理，并尽可能的设置重复。同学们能够通过实验解释一个理论或实际问题。在本次编写的实验指导中我们给出了大量的思考题，有的涉及实验中应注意的问题，有的涉及实验技术的应用，有的涉及实验方法的应用扩展；此外，我们还要求实验报告的形式类似于正式发表的科研报告，并附有写作说明，这有利于培养学生写作科研论文的能力。为了培养良好的科研习惯，对每个实验还都给出相应的记录方式。 本学期是我们教研室首次按这项教学改革研究成果组织教学，希望广大同学配合，也希望相关专业老师、相关部门的领导及广大同学提出宝贵意见、以便使植物生理学实验教学改革更加完善。 张立军 2004 年1月30日 2014年12月29日 1
附：参加教学改革人员： 刘延吉郝建军樊金娟朱延姝阮燕晔康宗利付淑杰于洋 目录 Section 1（1h） 植物生理学实验课简介 1．教学目的 2．教学要求和考核 3．实验内容介绍 4．实验室安全要求 Section 2（6h） 一、植物的光合速率测定-----改良半叶法 二、植物叶绿素素含量测定----丙酮提取法 Section 3（6h） 三、植物组织水势测定----小液流法 四、植物根系活力测定----甲烯蓝法 Section 4（6h） 五、植物抗逆性鉴定----电导率仪法 六、植物组织丙二醛含量测定 Section 5（4h） 七、植物组织硝态氮含量的测定 Section 6（4h） 八、植物呼吸酶活性测定 2
生物技术(生物技术及应用基地班)专业
生命科学学院 生物技术（生物技术及应用基地班）专业培养方案 一、培养目标 本专业培养六年制本硕连读，德、智、体、美全面发展，既掌握生物技术专业知识又具备生物技术产品研究开发能力，了解生物技术企业运作管理规律，具有创新能力、实践能力和创业意识的生物工程与生物技术高级专门人才。 毕业生可继续攻读博士学位研究生，可在科研单位、高等院校、医药卫生、生物工程、食品化工、环境保护和相关的企业及政府部门独立从事新产品开发、教学、管理等工作。 专业发展主要方向 1. 医药生物技术 2. 农业生物技术 3. 微生物生物技术 4. 海洋生物技术 二、培养规格和要求 1．热爱祖国和人民，遵守校规校纪，认识和了解中国近代发展史和我国经济建设状况，有较系统的科学的世界观和方法论，有正确的人生观和价值观，热爱所学专业，有献身精神和强烈的事业心，具有高度的责任感，能为我国现代化建设服务。坚持德、智、体全面发展，有健康的体魄和健全的心理素质。 2．要求学生掌握扎实的生物技术基本理论知识和实验技能，在基因工程、细胞工程、分子生物学技术、发酵工程、酶工程、生化制备与分析及生化制药、微生物检测和生物资源开发等方面具有良好的基础训练，了解本专业相关的国内外研究与新产品开发进展；有较好的现代企业管理知识。 3．熟练地掌握一门外语（比较流利地进行听、说、读、写），英语通过4-6级考试，比较熟练地掌握计算机应用知识和操作技能。 —1—
4．对本专业教学计划设置的必修课及限定选修课程，必须取得规定的学分，提倡在教师指导下学好各门选修课。 5．本专业为“国家生物科学研究与教学人才培养基地”，学习成绩优秀有培养前途的学生可免试攻读硕士学位或直接攻读博士学位。 基于本专业的特点，必须基础理论知识学习与实验操作训练并重，较高质量地完成教学生产实习任务和高质量地完成毕业论文的设计、实验及撰写工作。 三、毕业认定与学位授予、本科学位修业年限 实行阶段淘汰制，三年级课程结束后，根据德、智、体三方面的综合评估，不适应六年制继续培养者转入四年制生物技术专业学习。根据生物技术与应用专业培养方案的要求，修满153学分，成绩合格者，颁发本科毕业证书，理学学士学位证书。本科学位修业年限：四年。 四、毕业总学分及课内总学时 课程类别学分数所占比例备注 公共必修课36 23.5% 本科阶段 公共选修课16 10.5% 本科阶段 专业必修课71 46.4% 本科阶段 专业选修课30 19.6% 本科阶段，限选课至少15学分 毕业总学分 153(44) 100% （实践教学学 分） 课内总学时2648 第一学期在不同专业所学的相关学分可以转入。 五、专业核心课程 有机化学、动物学、植物学、生物化学、微生物学、生物技术学、细胞生物学、遗传学、生物技术综合实验、生物工程制药、生物技术营销学。 六、专业特色课程 —2—
植物生理学实验-3
实验报告 课程名称：植物生理学及实验实验类型：探索、综合或验证实验项目名称： 叶绿体色素的提取、分离、理化性质和叶绿素含量的测定学生姓名：专业：农业资源与环境学号： 同组学生姓名： 指导老师： 实验地点：实验日期：2019年10月9日 一、实验目的和要求 掌握植物中叶绿体色素的提取分离和性质鉴定、定量分析的原理和方法 二、实验内容和原理 以青菜为材料，提取和分离叶绿体色素并进行理化性质测定和叶绿素含量分析。原理如下： 1.叶绿素和类胡萝卜素均不溶于水而溶于有机溶剂.常用95%的乙醇或80%的丙 酮提取。 2.皂化反应。 叶绿素是二羧酸酯，与强碱反应，形成绿色的可溶性叶绿素盐，就可与有机 溶剂中的类胡萝卜素分开。 装 订 线
3.取代反应。 在酸性或加温条件下，叶绿素卟啉环中的Mg2+可依次被H+和Cu2+取代形成褐色的去镁叶绿素和绿色的铜代叶绿素。 H+取代Mg2+, Cu2+ (Zn2+)取代H+。 4.叶绿素受光激发，可发出红色荧光，反射光下可见红色荧光。 透射光下呈绿色，反射光下呈红色。 5.光谱分析。叶绿素吸收红光和兰紫光，红光区可用于定量分析，其中645和 663用于定量叶绿素a,b及总量，而652可直接用于总量分析。 三、主要仪器设备 1.天平（万分之一）、可扫描分光光度计（UV-1240）、离心机 2.研具、各种容（量）器、酒精灯等 四、操作方法与实验步骤 1.定性分析 a)称取鲜叶3-5g，并逐步加入乙醇15ml，磨成匀浆 取匀浆过滤，并倒入三角瓶中，同时观察荧光现象。 b)取三角瓶中约1ml溶液于小试管。加KOH数片剧烈摇均，加石油醚 O 1ml分层后观察。 1ml和H 2
植物生理学实验报告
首都师范大学生命科学学院实验报告 课程名称植物生理学实验成绩 姓名苗雪鹏班级 1班学号 1080800021 实验题目实验三植物体中N、P、K主要养分的速测 【实验目的】 1．了解植物体内N、P、K测定的意义和方法 2．掌握如何测定植物体中N、P、K的实验技能 【实验原理】 植物体主要由C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S、Fe等十几种元素组成，除 此以外还包括Ca、Zn、Mn、B、Mo，但需要量较少。 在通常条件下，植物利用太阳光能，从空气中获得C，从水中获得氢和氧， 而N、P、K等元素则是来源土壤肥力。在栽培过程中，能够知道植物的需要和 土壤内N、P、K变动的情况，对考虑施肥措施是有帮助的，因此测定土壤及植 物体内的N、P、K是很重要的。 硝态N测定：硝态N是硝酸的阴离子（NO 3 -），它是强氧化剂，所以鉴定N- 离子几乎都用氧化反应，用二苯胺（C 6H 5 ） 2 NH的方法，这个方法的原理是在NO 3 - 存在时二苯胺被硝酸氧化而显蓝色。 有效P和无机P测定：P与钼酸铵反应生成磷钼酸铵，然后以氧化亚锡作为还原剂时，使磷钼酸铵还原为“磷钼兰”（低价钼化合物混合物）溶液呈兰色。此法能测土壤有效P，过磷酸钙中有效P和植物体内的无机磷。 速效K的测定：四苯硼钠〔NaB(C 6H 5 ) 4 〕与钾离子生成白色沉淀为四苯硼酸 钾〔KB(C 6H 5 ) 4 〕 【实验材料和试剂】 在完全培养液、缺乏N、P、K、Fe的营养液中培养四周的玉米苗 硝态氮试剂、磷试剂Ⅰ、磷试剂Ⅱ、K试剂、标准溶液1、5、10、20、40ppm 【实验方法】 1．植物组织浸提液制备 将植物剪成小块，称取1g，迅速倒入已沸腾的蒸馏水（约10ml）烧杯中，用毛细玻璃棒经常搅动，小火煮十分钟，煮液倒入10ml容量瓶中，另加少量蒸馏水，继续小火煮植物材料5分钟，浸提液倒入上述容量瓶内，再以少量蒸馏水洗植物材料，使最后容量为10ml。 植物组织在计算含量时要乘以10，因每克鲜组织稀释了10倍。 2．硝态N测定 在白瓷板的凹内分别滴入1、5、10、20、40ppm的混合标准液1滴，然后将待测液（植物浸提液）分别滴入其他凹内，最后每个凹内各加5滴二苯胺硫酸溶
植物学实验教学大纲
植物学实验教学大纲 植物学实验室 课程名称：植物学实验总学时：90 实验学时：26 实验教材：植物学实验指导 适用专业：生物教育、生物 实验技术 课程性质：独立开设应开实验学期：第1学期 编写黎桂芳编写时间：2005、4 （1）、植物学实验课目的与要求： 目的： 植物学课程是生物科学的一门基础课，由形态解剖、系统分类两部分组成。课程的基本要求是基本掌握植物细胞、组织、器官的形态、结构特征以及功能特点；基本掌握植物界的各大类群，以及系统分类学原理，基本掌握植物界个体发育、系统发育的规律，以及认识各大类群之间的亲缘关系、演化系统。从而为后续课程如植物生理学、植物形态学、分子系统学等打下基础。 实验课基本要求： 1)使学生能熟练地使用显微镜，并掌握植物细胞、组织、器官的观察方法及特征； 2)训练基本技能，如徒手切片、水藏玻片制作、生物绘图等； 3)基本掌握植物界从低级到高级各大类群的区别和适应性特征； 4)基本掌握植物标本鉴定、植物方法，会使用工具书；认识一定数量的植物种类。 （2）主要仪器设备： 生物显微镜、体视显微镜、电脑投影仪、幻灯机、电脑多媒体（VCD等） （3）实验方式与基本要求： 实验方式：教师简单讲授原理和注意事项后由学生独立操作完成 基本要求： 1、观察、动手、描绘、绘图。熟练利用显微镜，掌握徒手切片、制片、揭破、观察等方法，学习植物体的形态、结构特征；并进行简单描述、制图。 2、印证、分析、综合、检索、推理。通过观察，印证课程知识，能根据实验指导书完成实验过程，并通过分析、综合、回答实验指导书的有关问题。 3、认识一定数量的植物种类；掌握常见植物学概念；能开展一般植物学实
植物生理学实验
实验名称：植物含水量的测定 实验目的：掌握测定植物组织的含水量的方法 实验原理：利用水遇热蒸发为水蒸汽的原理，可用加热烘干法来测定植物组织中的含水量。植物组织含水量的表示方法，常以鲜重或干重 % 表示，有时也以相对含水量 % （或称饱和含水量 % ）表示。后者更能表明它的生理意义。 实验材料与设备： （一）材料：植物鲜组织。 （二）仪器设备：天平（感量1/1000g）；烘箱；干燥器；剪刀；搪瓷盘；塑料袋；纸袋；吸水纸等。 实验步骤： ⒈鲜重测定迅速剪取植物材料，装入已知重量的容器（或塑料袋）中，带入室内，用分析天平称取鲜重（FW）。 ⒉干重测定提前把烘箱打开，温度升至100~105℃。把称过鲜重的植物材料装入纸袋中，放入烘箱内，100~105℃杀青10min，然后把烘箱的温度降到70~80℃左右，烘至恒重。取出纸袋和材料，放入干燥器中冷却至室温，称干重（DW）。 ⒊饱和鲜重测定将称过鲜重的植物材料浸入水中，数小时后取出，用吸水纸吸干表面水分，立即称重；再次将材料放入水中浸泡一段时间后，再次取出，吸干表面水分，称鲜重，直到两次称重的结果基本相等，最后的结果即为饱和鲜重（SFW）。若事先已知达到水分饱和所用的时间，则可一次取得饱和鲜重的测量定值。 ⒋取得以上数据后，按公式计算组织含水量、相对含水量。 思考题： 测定饱和含水量时，植物材料在水中浸泡时间过短或过长会出现什么问题？ 实验名称：植物组织水势的测定（小液流法）
实验目的：学会用小液流法测定植物组织的水势 实验原理：将植物组织分别放在一系列浓度递增的溶液中，当找到某一浓度的溶液与植物组织之间水分保持动态平衡时，则可认为此植物组织的水势等于该溶液的水势。因溶液的浓度是已知的，可以根据公式算出其渗透压，取其负值，为溶液的渗透势（ψπ），即代表植物的水势（ψw）。 ψw＝ψπ＝－P＝－iCRT 实验材料与设备： （一）材料：小白菜或其它作物叶片 （二）仪器设备：1.带塞青霉素小瓶12个；2.带有橡皮管的注射针头；3.镊子；4.打孔器5.培养皿。 （三）试剂：1. 0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30mol/L蔗糖溶液；2.甲烯蓝粉末。 实验步骤： （一）取干燥洁净的青霉素瓶6个为甲组，各瓶中分别加入0.05～0.30mol/L蔗糖溶液约4ml（约为青霉素瓶的2／3处），另取6个干燥洁净的青霉素瓶为乙组，各瓶中分别加入0.05～0.30mol/L蔗糖溶液1ml 和微量甲烯蓝粉末着色，上述各瓶加标签注明浓度。 （二）取待测样品的功能叶数片，用打孔器打取小圆片约50片，放至培养皿中，混合均匀。用镊子分别夹入5～8个小圆片到盛有不同浓度的甲烯蓝蔗糖溶液的青霉素瓶中（乙组）。盖上瓶塞，并使叶圆片全部浸没于溶液中。放置约30～60min，为加速水分平衡，应经常摇动小瓶。 （三）经一定时间后，用注射针头吸取乙组各瓶蓝色糖液少许，将针头插入对应浓度甲组青霉素瓶溶液中部，小心地放出少量液流，观察蓝色液流的升降动向。（每次测定均要用待测浓度的甲烯蓝蔗糖溶液清洗几次注射针头）。如此方法检查各瓶中液流的升降动向。若液流上升，说明浸过小圆片的蔗糖溶液浓度变小（即植物组织失水）；表明叶片组织的水势高于该浓度糖溶液的渗透势；如果蓝色液流下降则说明叶片组织的水势低于该糖溶液的渗透势，若蓝色液流静止不动，则说明叶片组织的水势等于该糖溶液的渗透势，此糖溶液的浓度即为叶片组织的等渗浓度。 将求得的等渗浓度值代入如下公式： ψw＝ψπ＝－iCRT。 式中：ψw＝植物组织的水势（单位：Mpa）；ψπ＝溶液的渗透势； C＝等渗浓度（mol/L）；R＝气体常数（0.008314 MPa·L /mol/K）；T＝绝对温度；i＝解离系数（蔗糖＝1，CaCl2＝2.60）。 思考题：在干旱地方生长的植物其水势较高还是较低？为什么？ 实验名称：植物组织渗透势的测定
植物生理学实验指导
植物生理学实验指导主编胡君艳陈国娟张汝民 浙江农林大学植物学科 2013年8月
实验一植物组织水势的测定 水势与渗透势的测定方法可分为3大类：⑴液相平衡法，包括小液流法、重量法测水势，质壁分离法测渗透势；⑵压力平衡法（压力室法测水势）；⑶气相平衡法，包括热电偶湿度计法、露点法等。 Ⅰ小液流法 【实验目的】 了解采用小液流法测定植物组织水势的方法。 【实验原理】 水势表示水分的化学势，像电流由高电位处流向低电位处一样，水从水势高处流向低处。植物体细胞之间，组织之间以及植物体和环境间的水分移动方向都由水势差决定。 当植物细胞或组织放在外界溶液中时，如果植物的水势小于溶液的渗透势（溶质势），则组织吸水而使溶液浓度变大；反之，则植物细胞内水分外流而使溶液浓度变小；若植物组织的水势与溶液的渗透势相等，则二者水分保持动态平衡，所以外部溶液浓度不变，而溶液的渗透势即等于所测植物的水势。可以利用溶液的浓度不同其比重也不同的原理来测定试验前后溶液的浓度变化，然后根据公式计算渗透势。 【实验器材与试剂】 1.实验材料：八角金盘、大叶黄杨等。 2.实验试剂：0.05、0.10、0.15、0.20、0.30mol·L-1蔗糖溶液、甲烯蓝溶液。 3.实验仪器：试管10支、微量注射器、镊子、打孔器、垫板。 【实验步骤】 1.取干燥洁净的试管5支为甲组，标记1~5，各支中分别加入0.05~0.30mol·L-1蔗糖溶液5mL。另取5支干燥洁净的试管为乙组，标记1'~5'，各试管中分别加入0.05~0.30mol·L-1蔗糖溶液2ml。 2.取待测样品的功能叶数片，用打孔器打取小圆片约50片（避开叶脉），混合均匀。用镊子分别夹入10个小圆片到乙组试管中。并使叶圆片全部浸没于溶液中。放置约30~60min，为加速水分平衡，应经常摇动试管。 3.到时间后，在乙组试管中加入甲烯蓝溶液1~2滴，并用微量注射器取各试管糖液少许，将注射器插入对应浓度甲组试管溶液中部，小心地放出一滴蓝色溶液，并观察蓝色小液流的
植物生理学实验指导
植物生理学实验指导 Prepared on 24 November 2020
植物生理学实验指导
目录
植物材料的采集、处理与保存 植物生理实验使用的材料非常广泛，根据来源可划分为天然的植物材料（如植物幼苗、根、茎、叶、花等器官或组织等）和人工培养、选育的植物材料（如杂交种、诱导突变种、植物组织培养突变型细胞、愈伤组织、酵母等）两大类；按其水分状况、生理状态可划分为新鲜植物材料（如苹果、梨、桃果肉，蔬菜叶片，绿豆、豌豆芽下胚轴，麦芽、谷芽，鳞茎、花椰菜等）和干材料（小麦面粉，玉米粉，大豆粉，根、茎、叶干粉，干酵母等）两大类，因实验目的和条件不同，而加以选择。 植物材料的采集和处理，是植物生理研究测定中的重要环节。在实际工作中，往往容易把注意力集中在具体的仪器测定上，而对于如何正确地采集和处理样品却不够注意，结果导致了较大的实验误差，甚至造成整个测定结果的失败。因此，必须对样品的采集、处理与保存给予足够的重视。 一、原始样品及平均样品的采取、处理 植物生理研究测定结果的可靠性（或准确性），首先取决于试材对总体的代表性，如果采样缺乏代表性，那么测定所得数据再精确也没有意义。所以，样品的采集除必须遵循田间试验抽样技术的一般原则外，还要根据不同测定项目的具体要求，正确采集所需试材。目前，随着研究技术的不断发展，应该不断提高采样技术的水平。 在作物苗期的许多生理测定项目中都需要采集整株的试材样品，在作物中后期的一些生理测定项目中，如作物群体物质生产的研究，也需要采集整株的试材样品，有时虽然是测定植株的部分器官，但为了维持器官的正常生理状态，也需要进行整株采样。 除研究作物群体物质生产外，对于作物生理过程的研究来说，许多生理指标测定中的整株采样，也只是对地上部分的采样，没有必要连根采样，当然对根系的研究测定例外。采样时间因研究目的而不同，如按生育时期或某一特殊需要的时间进行。除逆境生理研究等特殊需要外，所取植株应是能代表试验小区正常生育无损伤的健康植株。
植物生理学实验指导
实验一小液流法测植物组织水势 一、目的 学会用小液流法和质壁分离法测植物组织水势和渗透势。 二、材料用具及仪器药品 马铃薯、刀片、移液管、培养皿、蔗糖溶液（1mol/L），显微镜 三、原理 1、小液流法测植物组织水势 植物细胞是一个渗透系统，若将植物细胞放在各种不同浓度的蔗糖溶液中时，由于细胞液的浓度与外界溶液的浓度（或水势）的差异。两者便会发生水分的交换。 当ψ cell外＞ψw cell时，细胞则吸水，细胞外溶液的浓度↑，细胞外溶液的比重↑。 当ψ cell外＝ψw cell时，细胞液与细胞外溶液水分平衡，细胞外溶液的浓度不变，细胞外溶液的比重不变。 当ψ cell外＜ψw cell时，细胞则失水，细胞外溶液的浓度↓，细胞外溶液的比重↓。 本实验是以有色液滴的比重变化确定等渗浓度。根据公式，即可计算出外溶液的ψs，即ψs= - CiRT[i:离解系数，蔗糖等于1;c:等渗浓度；R：气体常数，0.0083 MPa·L/mol·K；T表示绝对温度，即273+t（实验时溶液的温度）]。 2、质壁分离法测渗透势 ψw＝ψp＋ψs。 当ψ cell外＞ψw cell时，细胞则吸水。 当ψ cell外＜ψw cell时，细胞则失水，发生质壁分离。 当发生初始质壁分离时，ψp＝0 ，ψw＝ψs＝ψ cell外= - CiRT 四、方法步骤 小液流法测植物组织水势 1．按十字交叉法把1mol/L蔗糖溶液（母液）分别配成0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mol/L蔗糖溶液各10ml。分别置于5支大试管中，编号作为实验组。 2．另取5支小试管对应于实验组编号，从实验组取2ml蔗糖溶液作为观察组。 3．切约2mm左右见方的马铃薯片。 4．把马铃薯片放入实验组，每组20片，20分钟后，加一点点亚甲基蓝粉末，摇匀。 5．用吸管吸蓝色液，伸入对应观察组中部，轻轻挤出一滴液滴，轻轻取出吸量管，观察液滴移动方向。 6.根据公式ψs=-CiRT,计算出所测材料的ψ cell 质壁分离法测渗透势 1、按十字交叉法把1mol/L蔗糖溶液（母液）分别配成0.1、0. 2、0. 3、0.5、0.6 mol/L 蔗糖溶液各2ml。 2、材料处理：用刀片在蚕豆叶表皮划一方格，用镊子撕下表皮，迅速投入每梯度溶液。 3、镜检确定等渗溶液：视野中1/2细胞在角隅处发生轻度质壁分离的溶液为等渗溶液。 4、计算渗透势。
植物生物技术复习题
园艺植物生物技术复习题类型 一、名词解释（每小题2分，10小题，共20分） 1．转基因技术：通过基因工程技术对生物进行基因转移，使生物体获得新的优良品性，称之为转基因技术。 2．愈伤组织：愈伤组织是一团不定形的疏松排列的薄壁组织。 3．细胞悬浮培养：对于要保持良好的分散状态的植物细胞或小的细胞聚集体，可按照一定的细胞密度，悬浮在液体中进行培养，这种方法称为细胞悬浮培养。 4．双极分化：愈伤组织中随着细胞分裂出现两个或两个以上分生中心，其中有的分化芽，有的分化根，根芽之间并无输导等组织沟通，在培养瓶内靠愈伤组织提供养料，这种以愈伤组织隔离着的芽和根的苗，常常不能移栽成活。 5．分批培养：是指细胞在一定容积的培养基中进行培养，目的是建立单细胞培养物。在培养过程中，除了气体和挥发性代谢产物可以同外界空气交换外，一切都是密闭的。当培养基中的主要营养物质耗尽时，细胞的分裂和生长即行停止。 6．细胞的全能性：植物体细胞或性细胞，在人为控制的培养条件下都具有再生成新个体的潜能，因而在适宜的条件下可以被诱导生长分化形成完整植株。 7．胚性愈伤组织：愈伤组织在长期的培养中能够形成分生组织区、管胞和色素细胞，或者形成体细胞胚。这种能够形成体细胞胚的愈伤组织叫做胚性愈伤组织。 8．条件培养基：是把单个细胞置于一块活跃生长的愈伤组织(也称看护愈伤组织)上培养，在愈伤组织和培养的细胞之间，用一片滤纸相隔。 9．植板效率=（每个平板上形成的细胞团数/每个平板上接种的细胞总数）×100％。 10.花粉培养：是指把花粉从花药中分离出来，以单个花粉粒作为外植体进行离体培养的技术。 11.基因工程：通过体外DNA重组创造新生物并给予特殊功能的技术称为基因工程，也称DNA重组 技术。 12.脱分化：使已分化的体细胞回复到未分化的原始状态并具有细胞全能性表达潜力的过程，叫做 脱分化。 13.胚性愈伤组织：愈伤组织在长期的培养中能够形成分生组织区、管胞和色素细胞，或者形成体 细胞胚。这种能够形成体细胞胚的愈伤组织叫做胚性愈伤组织。 14.植物生物技术：是指对植物品质和性状进行改造的生物技术，包括植物组织培养技术、人工种 子、细胞工程、基因工程等多种生物技术，主要是指植物基因工程和与之相关的植物组织细胞培养技术、分子标记育种技术等。 15.单极分化：愈伤组织中的分生中心在刺激物质的影响下向着一极分化，形成有根无芽或者有芽 无根的现象。 16.无性系变异：愈伤组织长期继代培养会引起其细胞内的染色体发生变化，也可发生基因突变。 这种体外培养的组织或细胞发生的遗传改变称为无性系变异。 17.分子杂交：当复性的DNA分子由不同的两单链分子形成时，称为分子杂交。 18.连接酶：用于将两段乃至数段DNA片段拼接起来的酶称为连接酶。 19.穿梭质粒：含有两个不同的复制子，能在两种不同的受体细胞中复制。 20.连续培养：是利用特别的培养容器进行大规模细胞培养的一种培养方式。连续培养过程中，不 断注入新鲜培养液，排掉等体积的用过的培养液，培养液中的营养物质得到不断补充，由于注
植物生理学实验
实验1 叶绿素a 、b 含量的测定（乙醇）（分光光度法） 一、目的 学会Chla 、b 含量的测定方法，了解叶片中Chla 、b 的含量。 二、材料用具及仪器药品 菠菜叶片、721分光光度计、天平、研钵、剪刀、容量瓶（25ml ）、漏斗、滤纸、乙醇（95%） 三、原理 叶绿素a 、b 在波长方面的最大吸收峰位于665nm 和649nm ，同时在该波长时叶绿素a 、b 的比吸收系数K 为已知，我们即可以根据Lambert Beer 定律，列出浓度C 与光密度D 之间的关系式： D 665=83.31Ca+18.60C b ..................................(1) D 649=24.54Ca+44.24 C b . (2) (1)(2)式中的D 665、D 649为叶绿素溶液在波长665nm 和649nm 时的光密度。 为叶绿素a 、b 的浓度、单位为每升克数。 82.04、9.27为叶绿素a 、b 在、在波长665nm 时的比吸收系数。 16.75、45.6为叶绿素a 、b 在、在波长649nm 时的比吸收系数。 解方程式(1)(2)，则得 ： C A =13.7 D 665—5.76 D 649...........................(3) C B =25.8 D 649—7.6 D 665........................... (4) G=C A +C B =6.10 D 665+20.04 D 649 (5) 此时，G 为总叶绿素浓度，C A 、C B 为叶绿素a 、b 浓度，单位为每升毫克，利用上面（3）（4）（5）式，即可以计算叶绿素a 、b 及总叶绿素的总含量。 四、方法步骤 1．称取0.05克新鲜叶片，剪碎，放在研钵中，加入乙醇1ml 共研磨成匀浆，再加5ml 乙醇，过滤，最后将滤液用乙醇定容到10ml 。 2．取一光径为1cm 的比色杯，注入上述的叶绿素乙醇溶液，另加乙醇注入另一同样规格的比色杯中，作为对照，在721分光光度计下分别以665nm 和649nm 波长测出该色素液的光密度。 计算结果： 叶绿素a 含量（mg/g. FW ）=05 .011000 10??A C 叶绿素b 含量（mg/g.FW ）=05 .01 100010? ?B C 叶绿素总量（mg/g.FW ）=05 .01 100010? ? G 五、实验报告 计算所测植物材料的叶绿素含量。 六、思考题 1、分光光度法与一般比色法有何异同？ 2、叶绿素a 、b 在红光和蓝光区都有一最大吸收峰值，能否用蓝光区的最大吸收波长进行叶绿素a 、b 的定量分析，为什么？