纤维蛋白原检测方法
ACL-8000血凝仪两种测定纤维蛋白原方法的比较
℃、 一８ Ｏ℃ 温 度 保 存 下 具 备 较 好 的瓶 间 均 一 性 ， 能在 大于 ３ ０ ０ ｄ的时 间保 持 稳 定 ， 符 合临 床使用 要求 ， 可 作 室 内 质 控 监 测 的
质控 品， 有助于提高 临床生化 检验 质量 。一２ Ｏ ℃ 冰 箱 各 级 医
刘和录 ， 许瑞娜． ５种定 性 试 验 质 控 物 的研 制 与 应 用 ［ Ｊ ］ ． 国际 检 验
遍流程为 ： （ １ ） 查阅文献 ， 设计 配制 方法 。（ ２ ） 选 择 合 适 的 材 质 与 添 加 物 。（ ３ ） 按 设 计 方 案 配制 质控 物 。 （ ４ ） 检测质控物 效能 。 （ ５ ） 分装保存 。（ ６ ） 检 测 其 稳 定 性 及 均 一 性 。（ ７ ） 数 据 统 计 分 析 。（ ８ ） 改 良 配方 ， 重复 （ ２ ） 至（ ７ ） 步 。（ ９ ） 确 定 质 控 物 最 终 配 制 方法 、 分装 量、 保 存 方 法 及 性 能 参 数 。实 验 室 自配 质 控 物 最 大 的 难 度 在 于 在 一 定 时 间 内维 持 质 控 物 的 稳 定 与 均 一 。 而 评 价 质 控 物 质 量 的关 键 指 标 是 稳 定性 ＿ ８ ＿ ９ １ ］ 。如 何 维 持 酶 的稳 定 是 此 次 研 究 的关 键 。本 研 究 经 过 一 年 多 的试 验 ， 利 用 临床 标 本 作 为 基质 ， 通过添加酶稳定剂 、 防腐 剂 、 容器封 管、 低 温 保 存 等 多 种 手段 ， 研 制 的质 控 物 经 过 一 年 的 临 床 试 用 数 据 显 示 ， 其在 一２ Ｏ
国 际检验 医学杂志 ２ ０ １ ３ 年 ７月第 ３ ４卷第 １ ３期
Ｉ ｎ ｔ Ｊ Ｌ ａ ｂ Ｍｅ ｄ ， Ｊ ｕ ｌ ｙ ２ ０ １ ３ ， Ｖ ｏ １ ． ３ ４ ， Ｎ ｏ ． １ ３
纤维蛋白原FIB 美德太平洋凝血试剂
室温 18-25℃稳定 8 小时；
3．参比血浆（国际标准品）复溶后，-20℃密闭保存（37℃速融，
室温平衡 30 分钟），稳定 2 天
操作步骤
A． 样品的采集及试剂的重建
1. 待测血浆样品制备：静脉采血，109mM(3.2%)枸椽酸三钠与全
血按 1:9 比例混合均匀。以 2 500×g 离心 15 分钟，用塑料移液管
B． 维蛋白原标准曲线制备
1. 用 IBS 缓冲液按下图示，制备不同稀释度（浓度）的参比血浆，
以 TS4000 测定参比血浆（600mg/dl）为例，其配制方法如图：
2.按如下步骤测定：每份稀释血浆各重复测 2 次，求秒数均值
试杯中加入各稀释度参比血浆(或稀释患者血浆等) 200uL
加入测试磁珠
1粒
天津市美德太平洋精密仪器制造有限公司 地址：天津华苑产业园区海泰大厦 B 座 电话：+86-22-27837123 传真：+86-22-27837113
Clauss 方法可检测出其他 FIB 定量方法检测不出的 FIB 结构异常
的患者
试剂盒组成
1.凝血酶（冻干品）（100NIH/ml） 5×2.0ml
2.IBS 缓冲液
2×50ml
3 定标血浆
1×1.0ml
试剂有效期及稳定性
1. 原包装试剂 2-8℃密闭保存，有效期 12 个月。
2. 复溶后凝血酶 2—8℃密闭保存，稳定 5 天；
取出血浆，22-24℃保存的标本，血浆样品应在 2 小时内测试完毕。
2. FIB 试剂：按瓶签标明剂量，准确加入缓冲液，在室温下， 轻
轻涡旋 15S 左右，倒置 5 分钟后，轻轻颠倒混匀三次（溶下瓶盖
上试剂），直立静置 30 分钟。用前轻轻涡旋混匀备用。
纤维蛋白原的临床意义及测定
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• 糖尿病是血栓前状态，其血浆黏度、Fg浓 度均明显高于正常。
• 改善体内血浆黏度和Fg含量对控制和治疗 肾病糖尿病有着重要的意义。
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纤维蛋白原的测定方法
• Fg定量测定是临床上广泛应用的一项试验， 有美国国家临床检验标准委员会（NCCLS） 推荐的Fg常规测定方法Von Cluass法及我 国目前较常用的亚硫酸钠盐析法、热浊度 法、免疫浊度法和通过凝血仪测定凝血酶 原时间（PT）而推算Fg含量的PT-Der法等。
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• 近年发现白种人Fg基因多态性与血浆Fg浓 度升高及动脉粥样硬化血栓并发症具有相 关性，位于Fg- Bβ基因（β-fibrinogen gene，FGB）5`端启动子区-455bp位点处的 G/A-455是倍受关注的一个多态性位点。
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• 张烨霞等检测了国人CHD和原发性高血压 （EH）患者G/A-455（FGB）基因多态性， 发现CHD患者和EH患者均伴有Fg分子功能增 强，但Fg分子功能与G/A-455基因多态性不 具有显著相关性（P>0.05）；等位基因A455的基因频率不因性别不同以及有无高血 压、冠心病而具有显著性差异，揭示G/A455基因多态性与EH及CHD的发病危险性无
精选ppt课件
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纤维蛋白原G/A-455基因多态性与动 脉粥样硬化血栓并发症的研究
• Fg是一种糖基化蛋白，它由两条α链、两 条β链和两条γ链组成，每三条肽链（α、 β、γ肽链）绞合成索状，形成两条索状 肽链，两者的N-端通过二硫键相连，整个 分子成纤维状。
• Fg的三条多肽链分别由不同的基因编码， 其中β链的翻译和转录是Fg合成的限速性 步骤。
• 肾病综合征患者因尿中大量丢失以白蛋白为主的 小分子量蛋白质，故易出现低蛋白血症，继而刺 激肝脏代偿性合成蛋白质增多，血浆Fg和凝血因 子Ⅷ活性增高被认为是肝脏合成蛋白质增多的一 种表现，这两种高分子量的凝血前质不能由尿丢 失，它们在血浆中的高浓度、高活性是肾病综合 征血栓形成的部分危险因素。
纤维蛋白原在不同检测系统的结果比较
2020633202033临床研究尿管上段结石44例，单侧肾结石62例、双侧肾结石8例、肾铸型结石5例。
排除标准：①术前检查尿路感染明显或术中发现尿液混浊考虑感染者；②复杂结石需二期碎石者；③肾脏重度积水肾皮质菲薄者。
两组资料有可比性（P>0.05）。
1.2方法综合患者情况选用全麻，先在截石位下，患侧输尿管置入6-7Fr输尿管导管，制造人工肾积水，再转为俯卧位。
经B超引导、定位，于肩胛线、腋后线之间进行穿刺，进入目标肾盏，置入J形导丝，沿导丝方向使用筋膜扩张器从8Fr开始，递增扩张至16或18Fr肾镜鞘，经鞘内置入肾镜，达到目标段，击碎结石并冲出，顺行置入双J管，不放置肾造瘘管，留置导尿结束手术。
对照组除放置双J管，再置入固定肾造瘘管，退镜，结束手术。
1.3指标观察术后密切监测患者生命体征，比较两组病例手术时间（从置镜到皮肤缝合的时间）、住院时间、住院费用、出血情况（术后3d时血红蛋白下降程度、严重血尿持续时间）及输血情况。
1.4统计学方法应用SPSS16.0软件进行统计学处理，计数数据（n、%）用χ2检验，计量数据（x±s）用t检验，P<0.05为差异显著，P>0.05为无显著差异。
2结果两组患者手术时间、术后血红蛋白下降值、严重血尿持续时间、术后输血率、住院时间、住院费用比较差异皆有统计意义（P<0.05），表1、表2。
3讨论经皮肾镜取石术是治疗肾及输尿管上段结石的有效方法，但对于不具备肾动脉血管造影介入栓塞技术的基层医院，对该术式却望而却步，难以开展该项手术。
传统经皮肾钬激光碎石术需留置双J管和肾造瘘管，目前认为留置肾造瘘管的目的是：压迫肾脏穿刺通道、强化止血；引流，减少尿液外渗、减小感染几率[2]。
但同时也会因此诱发伤口疼痛、延长住院时间、增加治疗费用等。
因此，有研究提出术后不留置肾造瘘管，即“部分无管化”，本文通过回顾性分析159例部分无管化治疗患者临床资料，分析其优点：①规避了术后肾造瘘管造成的牵拉感，有利于患者尽早下床活动；②术后显著减轻患者疼痛感，保证术后恢复；③手术微创化，切口小、瘢痕小；④术后避免拔除肾造瘘管，减小出血风险[3]；⑤缩短住院时间、节省治疗费用。
纤维蛋白原测定
❖ （2）免疫学测定法：将纯纤维蛋白原作为抗原免疫动物，制成 多克隆或单克隆抗体。然后用免疫胶乳、被动血凝或反向血凝、 单向免疫扩散、火箭电泳以及ELISA等方法测定。优点是大部分 方法简便，但缺点是所测的不仅是可凝固的纤维蛋白原，可能包 括了它的降解产物（因为它们有共同抗原），也可能包括了障碍 性纤维蛋白原（dysfibrinogens即N端谷氨酸γ位未羧化的无功能 的纤维蛋白原,又称缺维生素K引起的蛋白质，PIVKA）。但免疫 法也有一个好处，就是可用来测定PIVKA。如果一个患者总纤维 蛋白原（用免疫学测定结果）不低，甚至增高，而功能性（即可 凝固性）纤维蛋白原却明显减少，即可判断为存在PIVKA。肝病、 维生素K缺乏等均可导致PIVKA升高，有临床诊断价值。总的说 来，免疫学方法用于临床常规实验室仍存在一定问题。
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❖ PT-Der法与Clauss法结果对比
第11页，共13页。
❖ 比较这两种方法，PT衍生法其结果是在检测PT过程中演 算而来的，更快速、简便，但其结果高于Clauss法的检 测结果，有时失去可靠性，特别是在疾病状态下和溶栓 治疗中。因为溶栓过程中，早、中期FDPs产物X、Y片段 可产生一定的浊度影响比浊，而晚期产生的D、E片段虽 不产生浊度变化，但影响凝血酶时间(TT)的结果。当血 浆FIB含量正常时，两方法无显著差异或略高于Clauss法， 但当FIB减低或增高时，PT -der法往往略高。相比之下， Clauss法在准确度与精密度以及检测速度方面都是很理 想的选择。
❖ 克劳斯法 （ Clauss法） 是美国国家临床检验 标准委员会 （NCCLS） 推荐的纤维蛋白原常 规测定方法。
第ห้องสมุดไป่ตู้页，共13页。
纤维蛋白原降解产物测定
纤维蛋白原降解产物测定纤维蛋白原（fibrinogen）是一种由肝脏合成的大分子蛋白质，在血液凝固过程中起着重要的作用。
当血液凝固系统被激活时，纤维蛋白原被凝血酶（thrombin）水解成纤维素（fibrin），纤维素会聚成纤维蛋白（fibrin clot），从而形成血凝块。
然而，纤维蛋白原的代谢也是一个重要的生理过程，它受多种因素的调节，包括激素、疾病和营养状态等。
研究纤维蛋白原的代谢及其降解产物对于了解血液凝固和血管疾病的发病机制具有重要意义。
纤维蛋白原降解产物（fibrinogen degradation products，FDPs）是指在纤维蛋白原被凝血酶水解的过程中，产生的一系列小分子化合物，包括D-二聚体（D-dimer）、FDP-α、FDP-β、FDP-γ等。
这些降解产物可以通过血液生化分析技术测定，用于评估血液凝固系统的活性和疾病的严重程度。
现将FDPs的测定方法作简要介绍。
一、免疫学法免疫学法是目前测定FDPs的主要方法，它利用酶联免疫吸附试验（ELISA）或荧光免疫分析（FIA）等技术，对FDPs的抗原-抗体反应进行测定。
根据测定不同的抗原或抗体，可将FDPs分为D-二聚体和FDP-α、FDP-β、FDP-γ等不同亚型。
（一）D-二聚体测定D-二聚体是一种由纤维素降解产生的小分子化合物，因为其在许多血管疾病的诊断中具有高度敏感性和特异性，所以被广泛应用。
D-二聚体的测定方法主要有ELISA和FIA两种。
其中ELISA法的测定原理是利用抗D-二聚体抗体和酶标记二抗的反应，测定样品中D-二聚体的浓度。
而FIA法则是利用荧光标记抗D-二聚体抗体与样品中D-二聚体的结合，并通过荧光检测器测定样品的荧光值。
（二）FDP-α、FDP-β、FDP-γ测定二、凝血学法凝血学法是早期用于测定FDPs的方法，其原理是利用样品中FDPs的存在，缩短的血凝时间和血小板聚集反应等现象，来进行测定。
其中比较常用的方法有血浆凝固时间法、改良的拉曼法（modified Raman method）和凝血酶原时间法等。
两种测定人纤维蛋白原中枸橼酸方法的比较
Comparison of two methods for determination of citric acid in human fibrinogen Zhang Xuecheng， Pan Ruowen， Ma L i ， Wang Chengxu， Xie Laife n g ， Zhou Zheng Research and Development Center， Hualart Biological Engineering Inc.， X iniiang 453003， China Corresponding author i Pan Ruowen , E m ail：zjcc2067@hualan. com
酸 离 子 含 量 的 测 定 ，分 别 配 制 生 产 所 使 用 的 透 析 液 溶液(1.5 g A 枸橼酸钠、15.0 g/L 氯化钠、10.0 g/L 精氨酸、3. () g/L 甘 氨 酸 、l l . U g/L 枸 橼 酸 钠 ），在 1.3. 1 项条件下进行测试。 1 . 3 . 3 耐 用 性 按 高 效 液 相 色 谱 法 ，改变检测流 速 ，含枸橼酸离子样品经磺基水杨酸沉淀蛋白后，室 温 放 置 2、4 、6 h ，测定其枸橼酸离子含量，判断测定 是否受到放置时间的影响。 1 . 4 比色法
通过显色剂利用紫外吸光度（A )值 ，由标准曲 线计算枸橼酸含量W。
1 . 5 重复性和中间精密度 取 h F g 制品(S2U191013)由同一实验人员连续
国际生物制品学杂志2 0 2 1 年 6 月 第 4 4 卷 第 3 期 Im J Biologicals， June 2021，Vol. 4 4 , No. 3
血浆纤维蛋白原测定方法
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血浆纤维蛋白原测定方法
导语：相信大家对于这几个字血浆纤维蛋白原还不太了解，我们可能很多上了年纪的人都会得各种各样的疾病，血浆纤维蛋白原是检测健康的一种指标，给
相信大家对于这几个字血浆纤维蛋白原还不太了解，我们可能很多上了年纪的人都会得各种各样的疾病，血浆纤维蛋白原是检测健康的一种指标，给我们的生活带来了巨大的苦痛和折磨，让很多的人饱受着苦难，为此很多人也四处求医问诊，但是都没有得到很好的治疗效果，那么这种疾病就没有办法治了吗？答案显然不是的，下面就让我们一起来了解一下血浆纤维蛋白原测定方法吧！
方法：
1．纤维蛋白原与肝脏疾病纤维蛋白原系肝脏合成，主要分布在血浆，亦存在于血小板和巨核细胞。
正常血浆浓度为 1.5～3.5g/L，因此当肝脏严重受损，使肝脏合成纤维蛋白原功能发生障碍，则血浆中纤维蛋白原浓度降低。
纤维蛋白原是肝脏合成的一种血浆糖蛋白.可参与血栓及冠状动脉的形成和发展，是反映血栓状态一个指标，也是急性冠状动脉事件的独立预报因子之一。
纤维蛋白原升高提示机体纤溶活性降低，促血栓形成。
2．纤维蛋白原与肾病综合征 ( NS) NS患者的凝血因子改变，以纤维蛋白原水平增高最为明显。
纤维蛋白原水平增高可达10g/L，这是由于合成增加的结果，这种增高与其从尿中丢失的量成比例，但纤维蛋白原的分解代谢率则正常。
NS患者的纤维蛋白原和胆固醇水平有显著相关性，而且两者与血清白蛋白水平呈负相关
3．纤维蛋白原与粥样硬化纤维蛋白原和纤维素与粥样斑块形成的关系极为密切。
已知纤维蛋白溶解机制受到多种因素影响，例如吸烟、
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两种方法检测纤维蛋白原结果差异的原因分析
对 于异 常 血 浆 测 得 的结 果 可用 两种 方 法 的 定 标
（ 转 第 ２３页 ） 下 ３
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血栓 与 止血 学 ２ ０ 第 １ 第 ５期 ０ ６年 ２卷
ＭＯＲＳ ＥＲ Ｊ．ＢＡＪ ＡＲ Ｌ，ｅ １ Ｉ ｅ ｔ ｃ ｔ ｎａ ｄｃ ａａ ｔｒ Ｚ ｔ ． ｄ ｎｉ ａｉ ｎ ｈ ｒｃｅ－ ａ ｉ ｆ ｏ ［ ］ ＺＨＡＯ Ｌ， ３
惠（ Ｉ ｉ Ｌ ｝ Ｈｕ
（． １ 大庆油 田总医院检验科
２ 大庆市第 二医院检验科 ， ． 大庆
１３ ０ ｝ ６０ ０
摘 著 。结论
要 ： 目的 探 讨纤维 蛋 白原检测的方法 ， 以确定其临床诊断价值 。方 法 采用凝血酶法测定纤维蛋 白原更适 于临床诊 断。
比较计算法与凝 血酶法 （ 采用 Ｓ — ｔ ａ
时 间很短 ， 因此 在 正 常对 照组 中两 种 方 法测 量 结 果相
略高于 Ｐ１ ｒ一演算法。而异常组则相反 ， 一演算法 Ｉ 检测 结果 明 显 高 于凝 血 酶 法 。对 于 正 常 对 照组 可 用
检测 原理 解 释 。凝 血 酶 法 是 根 据 血 浆 Ｆ ｇ含 量 与 血 ｂ
凝血酶法 （ Ａ６ ０ ）与凝血酶法 （ ｔｇ） Ｃ －０ ０ Ｓａｏ 比较 Ｐ＞ 。５ ０ ０
注 ： 常 对 照 组 两 种 方 法 比较 ； 常 血 浆 组 两 种方 法 比较 正 异
３ 讨
论
低， 反之 ， 活性 越 高 。在 Ｐ１ 其 ｒ一演算 法 中 ， Ｉ 由于凝血 酶
的产 生是 个 变加 速 的过程 ； Ｆ ｇ 变 为纤 维 蛋 白也 则 ｂ转
・
２ ３・ ３
ｃ ｒ ｏ ｙ ｅ ｔｄ ｓ ｉ ｎ ｗｉ ｙ ｔ ｍａｉ ｏｏ ａ ｙ ｅ ｉｅ ｓ ａ ｂ ｘ ｐ ｐ ｉ ａ ｅ Ｕ ｎ ｍｅ ｔ ｓ ｍｐ ｏ ｔ ｃ ｒ ｎ ｒ ａ ｔ ｒ ｄｓ ａ ｅ ｈ ｃ ｙ ｙ
纤维蛋白原缺乏症诊断标准(一)
纤维蛋白原缺乏症诊断标准(一)概述纤维蛋白原缺乏症是一种罕见的遗传性疾病，患者血液中缺少纤维蛋白原，容易出现出血等症状。
本文将介绍纤维蛋白原缺乏症的诊断标准。
诊断标准纤维蛋白原缺乏症的诊断标准主要根据临床症状和实验室检查结果进行评估，具体包括以下方面：•出血倾向：易出现皮下瘀斑、鼻出血、牙龈出血、月经过多等症状；•家族遗传史：有家族成员患有纤维蛋白原缺乏症；•血浆纤维蛋白原活性：成人血浆纤维蛋白原活性小于50%可诊断为纤维蛋白原缺乏症；•考虑其他出血性疾病的可能性：排除其他因素导致的出血症状（如血小板减少症、血友病等）。
实验室检查方法纤维蛋白原缺乏症的实验室检查主要包括以下方面：•血浆纤维蛋白原活性检测：通常采用凝血酶原时间（PT）检测方法，检测血浆中纤维蛋白原的活性；•血浆纤维蛋白原抗原检测：检测血浆中纤维蛋白原的抗原水平；•基因检测：通过对患者的DNA进行基因测序，检测是否存在纤维蛋白原基因变异。
结论纤维蛋白原缺乏症的诊断需要综合考虑临床症状和实验室检查结果，同时排除其他出血性疾病的可能性。
实验室检查中血浆纤维蛋白原活性检测是诊断纤维蛋白原缺乏症的关键指标之一。
如有疑虑，应及早就医并接受专业医生的诊断和治疗。
注意事项纤维蛋白原缺乏症是一种罕见的疾病，因此在诊断和治疗过程中需要注意以下事项：•定期检查血浆纤维蛋白原活性，以监测病情变化；•出现出血症状时，及时就医并告知医生诊断情况；•避免不必要的手术或创伤，以减少出血风险；•就医前应提前询问医院是否有相关专业科室或专家，以便更好的诊疗与治疗。
结语纤维蛋白原缺乏症的诊断需要综合考虑临床症状和实验室检查结果，及时发现和治疗病情，可以减轻患者的痛苦和提高生活质量。
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纤维蛋白原检测方法
纤维蛋白原（Fibrinogen）是血浆中一种重要的血凝蛋白，它在血凝过程中起到至关重要的作用。
通过检测纤维蛋白原的含量可以了解机体的凝血功能状态，从而帮助诊断和治疗血液系统疾病以及其他与凝血功能异常相关的疾病。
目前常用的纤维蛋白原检测方法包括凝血时间法、凝血酶原时间法、免疫测定法等。
凝血时间法是最早被使用的检测方法之一、它通过将患者的血浆与钙离子一起与一定浓度的凝血酶混合，在一定时间内观察血浆的凝固情况，以判断纤维蛋白原的含量。
这种方法的优点是操作简单，成本低，可以用于快速筛查，但它的缺点是不够精确，受到外界因素的影响较大。
凝血酶原时间法是一种较为常用的纤维蛋白原检测方法。
该方法通过将患者的血浆与已知浓度的凝血酶混合，观察凝血时间的延长程度，从而测定纤维蛋白原的含量。
凝血酶原时间法具有较好的准确性和精确度，能够对纤维蛋白原进行定量分析。
免疫测定法是目前应用较广泛的纤维蛋白原检测方法。
该方法利用特异性抗体与纤维蛋白原结合，再加入标记物（如酶标记、荧光标记等），从而通过检测标记物的含量来测定纤维蛋白原的含量。
免疫测定法具有高灵敏度和高专一性的特点，能够较准确地测定纤维蛋白原的含量，而且操作方便，结果可靠。
此外，纤维蛋白原的检测还可以通过一些快速检测方法进行，如光学密度法、免疫电泳法等。
光学密度法通过测定光学密度的变化来反映纤维
蛋白原的含量，是一种简单快速的定量方法。
免疫电泳法则是利用免疫电泳技术，通过电泳分离和检测纤维蛋白原的含量。
总之，纤维蛋白原的检测方法有多种选择，包括凝血时间法、凝血酶原时间法、免疫测定法、光学密度法、免疫电泳法等。
不同的方法有其优缺点，医生可以根据具体情况选择适合的检测方法，以提供准确可靠的纤维蛋白原含量信息，为疾病的诊断和治疗提供帮助。