串联质谱法
液相色谱-串联质谱内标法测定全麦粉中呕吐毒素含量的不确定度评定
谷物生长过程中极易受到真菌毒素的污染，这不仅会对粮食产量造成极大影响，还可能给农业经济带来巨大损失[1，2]。
呕吐毒素是主要存在于小麦、玉米等粮食及其制品中的真菌毒素，人体食用了被呕吐毒素污染的食物后，会出现恶心、腹泻、呕吐等症状[3]。
因此，检测小麦中的呕吐毒素具有非常重要的意义。
液相色谱-串联质谱仪在食品安全检测中具有准确度较高、受基质干扰影响小等特点，现已成为检测呕吐毒素的主要方法之一[4]。
此外，为了更加准确地表达分析结果，需要引入测量不确定度（以下简称“不确定度”），其是表征合理地赋予被测量值的分散性，与测量结果相联系的参数[5，6]。
当检测结果接近临界值时，不确定度的引入能够更准确地反映真实结果[7，8]。
本实验提取全麦粉中呕吐毒素的过程免去了真菌毒素提取中常用的免疫亲和柱净化处理，提高了提取效率，节省了人工与成本；采用内标法对呕吐毒素进行测定并评定不确定度，建立了液相色谱-串联质谱内标法测定全麦粉中呕吐毒素的不确定度评定方法[9，10]。
1 材料与方法1.1 试验材料呕吐毒素（DON）标准储备液（103±1.2μg/mL），Sigma-alorich；稳定同位素13C 15-DON 标准溶液（2μg/mL），国家粮食和物资储备局科学研究院；乙腈（色谱纯）迪马科技；甲酸（质谱级），Sigma；乙酸（色谱级），Fisher；蒸馏水，屈臣氏。
1.2 仪器和设备QT RA P-5500型液相色谱串联质谱仪（配有电喷雾离子源），美国A B 公司；X 1R 型高速冷冻离心机，美国热电公司；PL 602-L 型分析天平，梅特勒-托利多（上海有限公司）；I K A 涡旋混合器，广州艾卡；Q B -212型摇摆式混匀器，海门市其林贝尔仪器制造有限公司；JS F M-Ⅱ型粮食水分测试粉碎磨，中储粮成都粮食储藏科学研究所。
1.3 实验方法1.3.1 标准工作曲线的配制液相色谱-串联质谱内标法测定全麦粉中呕吐毒素含量的不确定度评定□ 王静 马晓静 河北省粮油质量检测中心摘 要：采用液相色谱-串联质谱内标法对全麦粉中呕吐毒素含量的不确定度进行评定，并依据测量不确定度评定的指导文件建立数学模型，对测量重复性、标准曲线、样品前处理、仪器设备等不确定度来源进行分析和评定，得出扩展不确定度为0.19mg/kg，（k=2）。
液相色谱-串联质谱法
消毒产品中丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星测定−液相色谱-串联质谱法Determination of clobetasol propionate and levofloxacin hydrochloride indisinfection product - LC-MS-MS method1 范围本方法规定了膏霜类消毒产品中丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星残留量液相色谱-串联质谱测定方法。
本方法适用于膏霜类消毒产品中丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星残留量的测定。
取样量为0.1g时，本方法对丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星的检出限见表1。
表1 丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星的检出限、保留时间和特征离子中文名称英文名称检出限（µg/g）保留时间（min）特征离子(m/z)丙酸氯倍他索Clobetasol propionate 0.009 7.83 467.0/355.2/373.4盐酸左氧氟沙星Levofloxacinhydrochloride0.06 1.11 362.0/260.9/318.22 规范性引用文件3 原理试样中丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星用甲醇提取，提取液经0.45μm滤膜过滤，用C18柱分离后，用液相色谱-串联质谱仪测定，正离子扫描，离子对定性，峰面积定量。
4 试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为不含有机物的纯水，纯水中干扰物的浓度需低于方法中待测物的检出限。
4.1甲醇：农药残留级。
4.2乙腈：农药残留级。
4.3甲酸：分析纯。
4.4标准品：丙酸氯倍他索和盐酸左氧氟沙星均购自中国药品生物制品检定所，纯度≥99.8%。
4.5标准溶液：准确称取丙酸氯倍他索适量，用乙腈－水（1：1）配制成100µg/mL 的标准贮备液。
准确称取盐酸左氧氟沙星适量，用纯水配制成100µg/mL的标准贮备液。
准确量取上述标准贮备溶液适量，用乙腈稀释配制成浓度为10.0µg/mL 的混合标准中间溶液，将标准中间溶液转移到安瓿瓶中于4 C保存。
串联质谱
质谱法是在高真空状态下 将被测物质离子化，按离子的 质荷比（m/z）大小分离而实现 物质成分和结构分析的方法， 且质谱峰强度与其代表的物质 含量成正比，据此可进行定量 分析。 1
1
色谱与质谱联用技术
HPLC-MS
GC-MS
UPLC-MS
2
SFC-/MS CE-MS
2
气质联用技术
4. 在生物大分子分析中的应用 ESI是一种很温和的电离方法，特别适合分 析强极性、难挥发或热不稳定的化合物；再者， ESI能把许多电荷附着于大分子上，形成多电荷 离子，因而利用常规质荷比范围的质谱仪即可 实现大分子质量离子的测定。因此，LC-MS/MS 可实现蛋白质的快速高灵敏度鉴别和测定。 24
8
8
GC-MS仪器装置
离子阱分析器 特点：
1.单一的离子阱可实现多 级“时间上”的串联质谱 2.结构简单，价格便宜 3.灵敏度高 4.质量范围大
9
9
GC-MS仪器装置
飞行时间分析器
10 特点：1.检测离子的质荷比范围比较宽
2.灵敏度高，适合做串联质谱的二级 3.扫描速度快，适合做研究极快过程
10
14
萘普生
14
应用实例
样品处理方法：
血浆样品0.5ml在 室温解冻
2 混合溶液涡旋混 匀，上SPE柱 4 1
0.75ml水和0.1ml内标溶液(布 洛芬，1.0μg/mL)加入血浆
3
洗脱液在50℃ 氮吹蒸发
6
15
用乙腈-水(2 ml, 15/85)和3ml 正己烷洗脱
5
残留物用乙腈和MSTFA (50:50, v/v)溶解，进样
12
12
质谱定量分析
液相色谱-串联质谱法测定动物源性食激素类药物残留
-串联质谱法测定动物源性黄 婷(1.深圳市质量安全检验检测研究院，广东 深圳 518000；2.广东省市场监督管理局食用农产品监管重点糖皮质激素(glucocorticoid，GCS)又名“肾上腺皮质激素”，具有调节人体三大物质(糖、蛋白质、脂肪)代谢的生理作用，还能调节钾、钠和水的代谢，用来维持机体内外环境的平衡，是机体应激反应最主要的调节激素，也是临床上最常用和有效的抗炎、免疫抑制剂[1]。
常见的糖皮质激素类药物主要是地塞米松、倍他米松，若人长期使用可能会出现不良反应，还可能会降低机体免疫力，人类食用后可导致机体代谢紊乱和发育异常，或潜在致癌、致畸风险[2]。
目前，糖皮质激素常被用于治疗家畜的炎症反应、免疫性疾病、牛的酮病等，属于生产常用的药物。
糖皮质激素的非法用途是为了增加家畜的采食量，从而达到增重的目的。
因此，世界各国都制定了对于动物源性食品中各种激素的最大残留量，欧盟第96/22/EC 指令、美国食品与药品管理局、日本政府都禁止在食品源性动物中使用激素类药物[3]。
我国GB31650-2019 《食品安全国家标准食品中兽药最大残留限量》规定，猪肉中地塞米松的最大残留量为1.0 μg/kg，倍他米松的最大残留量为0.75 μg/kg [4]。
目前，测定动物源性食品中糖皮质激素类药物残留的方法主要有酶联免疫法、高效液相色谱法[5]和液相色谱-串联质谱法。
其中，酶联免疫法只能用于筛查，液相色谱法的检测项目比较单一，灵敏度低，耗时长，选择性和特异性差，已达不到用于痕量兽药残留分析的要求。
液相色谱-串联质谱法是一种分析动物源性食品中痕量兽药残留的重要方法，具有灵敏度高、选择性和特异性好的特点，对低浓度样本有很好的检测率，还可用于测定不同基质中的糖皮质激素类药物。
针对动物源性食品，常用标准的前处理过程耗时长[6]，经济成本高，过程繁琐，不能满足目前对动物源性食品的高效、快速检测的需求。
为加强对动物源性食品兽药的监控，有效监督我国兽药滥用质量现状，我们对糖皮质激素类药物中的地塞米松、倍他米松进行检测，前处理过程操作简单，耗时短，中图分类号：S859.84 文献标志码：A 文章编号：1001-0769(2022)06-0107-04摘 要：本文建立了一种检测动物源性食品中糖皮质激素的液相色谱-串联质谱法，对所建立的方法进行了方法学的考察与验证，采用高效液相色谱-串联质谱进行分析。
奥拉氟 液相色谱-串联质谱
奥拉氟液相色谱-串联质谱液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）技术是一种结合了液相色谱的高分离能力和质谱的高检测灵敏度的分析技术，广泛应用于药物分析、生物标志物检测、环境监测等多个领域。
在该技术中，样品首先通过液相色谱柱进行分离，然后进入串联质谱仪进行检测。
串联质谱仪通常包括两个或多个质量分析器，能够对分离后的化合物进行精确的质量分析和结构鉴定。
奥拉氟（Olaflor）作为一种药物分子，其液相色谱-串联质谱分析方法可以用于药品质量控制、生物样本中的药物浓度监测等。
下面详细介绍液相色谱-串联质谱在奥拉氟分析中的应用。
一、样品前处理在进行液相色谱-串联质谱分析之前，通常需要对样品进行适当的前处理。
对于奥拉氟而言，可能的前处理步骤包括：1.提取：利用奥拉氟在特定溶剂中的溶解度，通过加入有机溶剂如甲醇或乙腈，并加入适量的酸或碱来调整pH值，以增加奥拉氟的提取效率。
2.净化：采用固相萃取（SPE）等技术，利用奥拉氟与干扰物在不同相中的分配系数差异，去除杂质，提高分析的准确性和灵敏度。
3.浓缩：通过吹干或其他蒸发方法，将提取液中的溶剂去除，得到浓缩的样品溶液。
二、液相色谱分离液相色谱是LC-MS/MS 分析中的第一步，其核心是利用样品组分在固定相（色谱柱）和流动相（溶剂）之间的相互作用差异来实现分离。
奥拉氟在液相色谱中的分离过程涉及以下几个关键因素：1.色谱柱选择：通常选择C18色谱柱，因为这类色谱柱对非极性化合物的分离效果很好，适合奥拉氟这样的药物分子。
2.流动相组成：选择适当的流动相组成，如乙腈和水的不同比例，可能还需加入适量的酸或碱以调节pH值，优化奥拉氟的分离效果。
3.流速：控制流动相的流速，以保证样品组分能够在色谱柱中充分分离，同时又不会导致过多的样品组分进入质谱仪，影响检测灵敏度。
三、串联质谱检测串联质谱仪通常包括一个或多个质量分析器，如quadrupole（四极杆）、ion trap（离子阱）或time-of-flight（飞行时间）质谱器。
气相色谱串联质谱原理
气相色谱串联质谱原理气相色谱串联质谱（GC-MS）是一种广泛应用的分析技术，通过将气相色谱（GC）与质谱（MS）相结合，可以提供高分辨、高灵敏度和高特异性的化学分析结果。
GC-MS在环境科学、食品安全、药物分析等领域被广泛使用。
GC-MS的原理基于两个关键技术：气相色谱和质谱。
气相色谱是一种用于分离和分析化合物的技术，它利用物质在气相中的分配系数差异来分离混合物。
质谱则是一种分析化合物结构和组成的技术，它通过测量碎片离子的质量/电荷比（m/z）来鉴定和定量分析样品中的化合物。
在GC-MS中，样品首先通过气相色谱柱进行分离。
气相色谱柱通常是一种长而细的管道，表面涂有化学物质，用于增加化合物与柱材之间的相互作用和分离效果。
当样品进入气相色谱柱时，插入柱口的进样针将样品注入，然后通过加热来蒸发，使其转化为气态物质。
样品分子在柱材上的分配系数差异导致它们以不同的速率通过柱子，从而实现分离。
待分离的化合物将以一定的时间间隔进入质谱仪。
质谱仪由离子源、质谱仪和数据系统组成。
离子源将进入的化合物转化为气态离子，然后将其传输到质谱仪，质谱仪在不同的m/z比下进行检测和记录。
质谱仪的第一部分是质子化室，它使用高能电子束或化学离子化技术将进入的化合物转化为正离子或负离子。
然后，在质谱仪的分析器中，离子按照它们的质荷比被分离为不同的离子流，每个离子流都表示一种特定的化合物。
分离后，离子在检测器中被收集，产生一个离子当量和m/z比的电流。
GC-MS的输出是质谱图，其中x轴表示m/z比，y轴表示所生成离子的相对信号强度。
通过与数据库中的标准化合物的质谱进行比对，可以确定样品中存在的化合物。
GC-MS有许多应用，如食品安全领域中的残留农药和有毒物质的分析，医药领域中药物代谢产物的鉴定，环境科学中有机污染物的监测等。
其优点包括高灵敏度、高分辨率、高特异性和广泛的分析能力。
总之，GC-MS利用气相色谱和质谱技术的结合，提供了一种高效、高分辨的化学分析方法。
液相色谱-串联质谱法测定黄瓜中甲拌
液相色谱-串联质谱法测定黄瓜中甲拌磷残留量的不确定度评定张屹璇1，余 浪1*，杜丽思2，阮宝慧1，刘鹏芳1，李彦芹1（1.云南智农高新技术有限公司，云南昆明 650600；2.云南云天化现代农业发展有限公司，云南昆明 650600）摘 要：黄瓜中甲拌磷农药残留量的不确定度评定按照国标方法《食品安全国家标准植物源性食品中331种农药及其代谢物残留量的测定液相色谱-质谱联用法》（GB 23200.121—2021）执行，本文参照不确定度评测数学模型和方法学评价指标，构建相关统计分析模型，获得真值结果的离散程度，分析该方法在实际生产实践中的优劣，并分析其在应用过程中影响不确定度的主要因素，最终计算出黄瓜样品中甲拌磷含量的扩展不确定度。
结果表明，当阳性黄瓜样品中甲拌磷的残留量为0.017 56 mg·kg-1时，其扩展不确定度为0.003 5 mg·kg-1（k=2）。
该检测方法测量结果的误差较小，最终的测量结果可信赖程度高，为本实验室内部质量控制提供了依据。
关键词：液相色谱-三重四极杆串联质谱；黄瓜；甲拌磷；不确定度Determination of Phorate in Cucumber by Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry Evaluation ofUncertainty of ResidueZHANG Yixuan1, YU Lang1*, DU Lisi2, RUAN Baohui1, LIU Pengfang1, LI Yanqin1(1.Yunnan Zhinong High Tech Co., Ltd., Kunming 650600, China; 2.Yunnan Yuntianhua Modern AgricultureDevelopment Co., Ltd., Kunming 650600, China)Abstract:The uncertainty of phorate pesticide residues in cucumber was evaluated according to GB 23200.121—2021. This paper refers to the uncertainty evaluation mathematical model and methodological evaluation indicators, the relevant statistical analysis model was constructed to obtain the dispersion of the true value results, analyzes the advantages and disadvantages of this method in actual production practice, and analyzes the main factors affecting the uncertainty value in the application process, and finally calculates the expanded uncertainty of phorate content in cucumber samples. The results showed that when the residue of phorate in the positive cucumber sample was 0.017 56 mg · kg-1, the expanded uncertainty was 0.003 5 mg · kg-1 (k=2). The error of the measurement results of this testing method is small, and the final measurement results are highly reliable, which provides a basis for the internal quality control of our laboratory.Keywords: liquid chromatography tandem mass spectrometry with triple quadrupole; cucumber; phorate; uncertainty甲拌磷是一种在本实验室内常规检测的农药。
液相色谱串联质谱法
液相色谱串联质谱法
液相色谱串联质谱（Liquid chromatography tandem mass spectrometry，
LC-MS/MS）是一种分离检测技术，被广泛应用于药物化学及药物代谢，生物医药，农药分析等领域，作为一种灵敏的高通量的鉴定和定量分析的手段。
LC-MS/MS的操作困难度略高，但技术表现却非常出色。
它的原理是将待测样
品分解成各组分，然后在液相色谱的的发射机构中排列和分离，得到分离峰后，将每个峰送入质谱计仪器中进行分子结构鉴定。
液相色谱与质谱结合起来，使得被测物质的定量和定性分析变得更加精准，得到了更高的灵敏度与精确度。
LC-MS/MS给人们的生活也带来了不少便利。
它能更有效的检测潜藏在食品中
的有害物质，甚至可以嗅出空气中的重金属物质，以确保食品和空气的安全。
此外，在医学上，LC-MS/MS也可以鉴定出血液中的分子标志物，从而帮助医生诊断乳腺癌、肝癌等，为患者提供更有效的治疗措施。
LC-MS/MS是当今药物及生物医药学研究领域最火热的概念，结合先进的检测
技术，它也为特定领域的研究提供了更大的帮助，尤其是生物和分子诊断研究实验中。
其仅占用少量的样品的前提下，在短时间内，就能最大限度提高检测效率，具有准确率高、重复性好、价格低的明显优势，这也使得它深受生命科学的欢迎。
高效液相串联质谱科普
临检主要应用领域
新生儿筛查：氨基酸、肉毒碱、脂肪酸、有机酸 药物中毒、滥用药物分析、止痛药物分析 治疗药物监测：免疫抑制剂、抗癫痫药物、抗心律失常药 内分泌分析：肾上腺激素、性激素 蛋白鉴定和定量：C肽、PTH、血管紧张素 功能医学检测 以美国Mayo Clinic为例，1998年没有LC-MS/MS。2010年，60台LC-
MS/MS，200万个测试。
临床生物化学检验的应用
application of clinical biochemical test
1． 在体内激素检测方面的应用 2． 在血药浓度监测和药物代谢研究中的应用 3． 在遗传性疾病检测中的应用 4． 痕量元素/微量营养素检测中的应用 5． 糖化血红蛋白的检测应用
发展史
1919年，英国科学家弗朗西斯·阿斯顿制成第一台质谱仪，早期的质 谱仪主要是用来进行同位素测定和无机元素分析；
20世纪40年代以后开始用于有机物分析； 60年代出现了气相色谱-质谱联用仪，成为了有机物分析的重要仪器
； 80年代末又出现了一些新的质谱技术，如比较成熟的液相色谱-质谱
联用仪，感应耦合等离子体质谱仪等； 目前质谱分析法已广泛应用于医学、材料、环境、地质、能源、药物
治疗浓度与中毒浓度之间差距很小，不同个体对药物的吸收和代谢差异很大； 因此，需要定期检测血药浓度，既要达到治疗效果，又要防止药物中毒，这就是治疗药物监测
的概念； 质谱技术用于血药浓度监测，具有专属性强、准确度高、重现性好、灵敏度高、成本低等优点
。
内分泌系列
类固醇激素在体内代谢过程非常复杂，因此大部分需通过其代谢产物进行测 定；
地质学: 2% •金属材料，合金等 •土壤、矿石、沉积物
•同位素比的研究 •激光熔蚀直接分析固
高效液相色谱-串联质谱法测定水产品中的磺胺类药物残留
工作研究畜牧业环境 2021.0432摘 要：高效液相色谱-串联质谱法是检测领域中一种非常重要的检测方法，本文针对水产品中的磺胺类药物残留建立了相关的LC-MS法，旨在帮助实验室提高检测效率和检测质量。
本实验建立的方法在1～20ng/mL范围内具有良好线性关系，且7种磺胺药物的相关系数均大于0.998；同时该方法检出限较低，为1ug/kg。
另外测定了5ug/kg添加水平时的回收率，结果显示各类药物的回收率在83%～95%之间。
可见该方法高效准确，可以满足实验需求。
关键词：高效液相色谱-串联质谱法；水产品；磺胺类药物；检测方法1 前言磺胺类药物自发现至今，已有80余年历史。
由于其具有广谱抗菌性、性质稳定、吸收快、使用方便等诸多优点，使其在医疗卫生、食品生产、动物养殖等领域应用广泛。
但在使用过程中也存在着一些缺陷，例如抑菌效果弱、易产生耐药性、用量大、疗程长和发生不良反应等，这些缺陷的存在会造成磺胺类药物的过量使用，由此导致水产、畜禽肉等农产品中药物残留超标，对人体健康产生威胁。
随着检验检测技术的发展，关于磺胺类药物的检测方法已从最初的一种变为现在的多种，主要包括LC-MS（高效液相-串联质谱法）、LC（高效液相色谱法）、快速检测法（ELISA酶联免疫吸附法）、安培检测法等。
其中LC-MS和LC最为常用，在定性定量方面占有很大优势。
本研究以水产品为检测对象，经过一系列条件的优化，建立了关于磺胺类药物的高效液相-串联质谱法的检测方法。
2 材料与方法2.1 实验材料与仪器甲酸（色谱纯，赛默飞世尔），甲醇、乙腈（色谱纯，默克），Captive EMR柱（5982-1003，安捷伦），7种磺胺类药物的混合标准品（100μg/ml，Dr.Ehrenstorfer GmbH）。
0.1%甲酸-水溶液：甲酸：水=1：1000。
超高效液相色谱（1290）-串联四极杆质谱联用仪（6495）（美国，安捷伦）；CF16RN高速冷冻离心机（日本，日立）；涡旋混合器（德国，IKA）；MS2204TS电子天平（瑞士，梅特勒）。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
- 1 -
串联质谱法
串联质谱法是一种分析化学技术，常用于分析蛋白质、药物、代
谢产物、环境污染物等样品的组分及结构。该方法将两种或多种质谱
仪联用，先将物质进行分离，再进行碎片化，最后将碎片质谱进行分
析。串联质谱法具有高灵敏度、高分辨率、高特异性等优点，广泛应
用于生命科学、环境检测、医药研发等领域。目前，串联质谱法已成
为分析化学领域的重要分析手段之一。