微生物实验的分类方法
微生物实验报告(微生物形态观察、分布、灭菌消毒)
微生物实验微生物实验细菌形态观察细菌分布消毒灭菌细菌形态观察一、实验目的1.掌握光学显微镜（油镜）的使用及日常维护2.掌握细菌的三种形态3.掌握临床常见细菌的形态及染色4.掌握细菌的特殊结构5.了解支原体、衣原体、立克次氏体、螺旋体及真菌的结构特点二、实验原理1. 普通光学显微镜（油镜）的使用1. 在标本欲检部位滴一滴香柏油，然后转换油镜头2. 从侧面观察并慢慢转动粗调节器，使油镜头浸没在油滴内，当油镜头几乎接触玻片时停止转动，以免碰撞玻片，用双眼观察目镜，同时调节细调节器，直至细菌清晰3. 根据需要调节显微镜亮度2. 普通光学显微镜的维护1.移动显微镜时，用右手持镜壁，左手托镜座，平端于胸前2.油镜用毕后，要立即用擦镜纸擦去香柏油；再用滴有二甲苯的擦镜纸擦油镜头；最后，用干净擦镜纸将镜头上的二甲苯擦去，以免损伤油镜头3.镜头擦净后，降低接物镜并将其转成八字形，罩好镜罩放入柜内4.做好使用记录3．微生物知识1．细菌按形态分类：球菌：球形（包括双球菌、四联球菌、八叠球菌、葡萄球菌、链球菌等）杆菌：杆状（包括单杆菌、双杆菌、链杆菌、分枝杆菌、双歧杆菌等）螺旋菌：螺旋状（包括螺旋菌、弧菌等）2．细菌的基本结构细胞壁、细胞膜、细胞质、核质、核蛋白体3．细菌的特殊结构荚膜：如肺炎双球菌鞭毛：又分单毛菌、双毛菌、丛毛菌、周毛菌。
如：变形杆菌为周毛菌菌毛芽胞：如破伤风梭菌、炭疽芽胞杆菌、肉毒梭菌4．微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称，包括原核类、真核类和非细胞类。
原核类：细菌、放线菌、蓝藻、衣原体、支原体、立克次氏体真核类：真菌、原生动物、显微藻类非细胞类：病毒、亚病毒5．真菌单细胞：圆形、芽生孢子。
如：酵母菌多细胞：菌丝及孢子、孢子出芽。
如：霉菌6．白假私酵母菌（白念）生物学性状：G+单细胞真菌、芽生孢子、类酵母型菌落厚膜孢子、假菌丝有助于鉴定致病性：皮肤粘膜——鹅口疮、内脏感染、CNS感染微生物学检查：直接涂片、染色后镜检——菌体、芽生孢子、假菌丝7．新型隐球菌生物学性状：圆形酵母型菌、外周有厚荚膜（比菌体大1-3倍）致病性：吸入后侵犯皮肤、粘膜等——慢性炎症和脓肿；侵袭CNS——亚急性或慢性脑膜炎微生物学检查：脑脊液离心后取沉淀、痰和脓标本直接检查；墨汁负染见出芽菌体外围有宽厚荚膜为阳性三、实验材料记号笔：1支；大镊子：1支；火柴：1盒；蜡笔：1支；试管架：1个；酒精灯：1个；接种环：1支；Olympus显微镜：1台；显微镜使用记录本：1个四、实验内容1. 观察细菌三种形态1）球菌链球菌、葡萄球菌、肺炎双球菌（子弹形）、脑膜炎双球菌（蚕豆形）、四联菌2）杆菌破伤风杆菌、白喉杆菌（异染颗粒）、绿脓杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌3）螺形菌弧菌——霍乱弧菌；螺菌；螺杆菌——幽门螺杆菌；弯曲菌2. 观察细菌的特殊结构芽胞、鞭毛、荚膜、异染颗粒、钩端螺旋体、幽门螺杆菌3. 绘图葡萄球菌(staphyloccocus)；肺炎双球菌(pneumo coccus)；脑膜炎球菌(meningococcus)；破伤风杆菌（Clostridium Tantenus）；霍乱弧菌（vibrio cholera)；芽胞(spore)；鞭毛（flagellum)；荚膜(capsule)；钩端螺旋体(leptospira)五、实验结果绘8幅细菌镜下图，已交。
微生物平板划线试验法
观察微生物的运动特征、分类鉴 定及噬菌体效价滴定
不加任何凝固剂
大规模工业生产及在实验室进行 微生物的基础理论和应用方面的 研究
牛膏蛋白胨培养基是最常用 的基础培养基
基础培养基
在基础培养基中加入某些特殊营养
按
物质制成的一类营养丰富的培养基
用
途
加富培养基
不 同 划
选择培养基
用来将某种或某类微生物从混杂的 微生物群体中分离出来的培养基
各区接种线间尽量互不交接，以达到细菌逐渐稀 释的目的。
4、平板划线接种法
图2-5 四区划线
4、平板划线接种法
4、平板划线接种法
（5）划线完毕，将琼脂平板放进皿盖，将培养皿倒放， 送进37℃温箱培养。
（6）培养18~24h后将培养皿取出。观察琼脂平板表 面生长的各种菌落，注意其大小、形状、边缘、表 面结构、透明度、颜色等性状。
之用
二、细菌的接种方法
将混合的细菌分离的方法有多种，平板划线法即是 其中之一，该方法主要是借划线而将混杂的细菌在 琼脂平板表面分散开，是单个细菌能固定在某一点， 生长繁殖后形成单个的菌落以达到分离纯种的目的。
当细菌分离成纯种后，一般还可用斜面、液体和半 固体培养基来检验细菌的培养特征，因此接种方法 可相应的分为四种。
②旋转琼脂平板90度，烧灼接种环，以杀灭环上 的残留细菌，将接种环触及培养基表面以使其冷却。 灭菌接种环通过薄膜处作连续平行划线（约占平板 1/5），此视为二区。
4、平板划线接种法
③旋转琼脂平板90度，灼烧接种环灭菌并使之冷 却。将灭菌接种环接二区连续平行划线（约占平板 1/4），此为三区。
④旋转琼脂平板90度，接种环不必再灭菌，接三 区连续平行划线，划满平板其余部分，此视为四区。
微生物实验报告
酵母菌的分离,接种和培养摘要:200人类认识和利用酵母菌的历史悠久，早在史前时期，先人们就学会酿酒。
约在6000年前，就发明发面的方法。
直到十九世纪有了显微镜，人们才窥探到醉母菌的真面目。
对酵母菌做纯系培养分类研究的是与巴斯德同时代的丹麦人汉斯，他是为寻求酿造高品质啤酒的途径才去深入研究酵母菌的。
本文将在实验室酵母菌的分离，接种和培养方面做详细论述。
关键词:酵母菌；分离；接种；培养前言:酵母菌属真菌。
体呈圆形、卵形或椭圆形，内有细胞核、液泡和颗粒体物质。
通常以出芽繁殖；有的能进行二等分分裂；有的种类能产生子囊孢子。
广泛分布于自然界，尤其在葡萄及其他各种果品和蔬菜上更多。
是重要的发酵素，能分解碳水化合物产生酒精和二氧化碳等。
酵母菌在治疗消化系统疾病，作为发酵和繁殖的供体等方面有着重要的作用。
所以了解酵母菌的分离，接种和培养的方法也是很有必要的。
1.材料与方法1.1样品及玻璃器皿手提式不锈钢蒸汽消毒器DF205电热鼓风干燥箱SW-CJ-2FD双人单面净化工作台DHP-500型电热恒温培养箱(酵母菌30°左右)1.2方法1.2.1 培养基的配制及灭菌葡萄糖酵母培养基:蛋白胨10g,葡萄糖20g , 酵母膏5g琼脂15~18g ,蒸馏水1000ml1.2.1.1称量药品根据培养基配方依次准确称取各种药品，放入适当大小的烧杯中，琼脂不要加入。
蛋白胨极易吸潮，故称量时要迅速。
1.2.1.2溶解用量筒取一定量(约占总量的1/2)蒸馏水倒入烧杯中，在放有石棉网的电炉上小火加热，并用玻棒搅拌，以防液体溢出。
待各种药品完全溶解后，停止加热，补足水分。
如果配方中有淀粉，则先将淀粉用少量冷水调成糊状，并在火上加热搅拌，然后加足水分及其它原料，待完全溶化后，补足水分。
1.2.1.3调节pH根据培养基对pH的要求，用5%NaOH或5%HC1溶液调至所需pH。
测定pH可用pH 试纸或酸度计等。
1.2.1.4溶化琼脂固体或半固体培养基须加入一定量琼脂。
实验动物微生物学分类
实验动物微生物学分类
1.普通级动物（CV，Conventional Animal）：
不携带所规定的人兽共患病病原和动物烈性传染病的病原。
2.清洁动物（CL，Clean Animal）：
除普通级动物应排除的病原体外，不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原体。
饲养在屏障系统中。
空气要经过滤净化，饲养室要保持正压，进入室内的—切物品要经过消毒灭菌，工作人员进入要洗澡和穿灭菌工作服，动物饮水要经灭菌。
3.无特定病原体动物（SPF，Specific Pathogenfree Animal）：
除清洁动物应排除的病原外，不携带主要潜在感染或条件致病菌和对科研干扰大的病原。
饲育在屏障系统中，是通过无菌动物、悉生动物、SPF动物而获得的。
笼具、饲料饮水都要经过特殊处理，并有严格的检疫、消毒、隔离制度。
科研实验主要使用 SPF 动物。
4.无菌动物（GF，Germfree Animal）
无可检出的一切生命体。
此种动物自然界中并不存在，它是经人工剖腹产净化培育出来的。
在隔离器中剖腹产取出其仔体，用无菌母鼠代乳或人工哺乳。
5.悉生动物(GnorobioticAnimal)
动物体内所携带生命体(病毒、细菌、真菌、原虫和寄生虫)是已知的，也叫已知菌动物。
微生物学实验知识点总结与实践应用
微生物学实验知识点总结与实践应用微生物学实验知识点总结与实践应用微生物实验知识总结与实践应用经过这学期学习和实验操作，我对《微生物实验》有了一些初步的认识，也从中学习到了有用的知识。
《微生物学实验》是要求我们掌握实验知识的基本操作和技能训练，初步了解和掌握先进的技术和方法，与迅速发展的科学前沿接轨。
微生物：包括细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生动物、显微藻类等在内的一大类生物群体，它个体微小，却与人类生活关系密切。
涵盖了有益有害的众多种类，广泛涉及健康、食品、医药、工农业、环保等诸多领域。
我将我这学期学到的微生物学知识，结合生活和工业当中的一些应用，归纳如下：在吾尔恩老师的带领下，我们先从最基本的知识学起。
（1）无菌操作技术：高温对微生物具有致死效应，因此微生物在转接过程中，一般再火焰旁进行，并用火焰直接灼烧接种环，已达到灭菌的目的。
在做实验时要保持严谨的态度，以后的实验中多数操作都必须再火焰旁进行。
（2）培养基的制备：培养基是人工配置的生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质，用以培养、分离、鉴别微生物或积累代谢产物。
自然界中培养基的种类很多，但是不同的培养基中，一般含有水分、碳源、氮源、无机盐和生长因子等，不同类别的微生物对PH值的要求一般不同。
（3）消毒与灭菌：灭菌是用理化方法杀死一定物质中的微生物的微生物学基本技术。
灭菌的彻底程度受灭菌时间与灭菌剂强度的制约。
微生物对灭菌剂的抵抗力取决于原始存在的群体密度、菌种或环境赋予菌种的抵抗力。
灭菌是获得纯培养的必要条件，也是食品工业和医药领域中必需的技术。
是指用物理或化学的方法杀灭全部微生物，包括致病和非致病微生物以及芽孢，使之达到无菌保障水平。
经过灭菌处理后，未被污染的物品，称无菌物品。
经过灭菌处理后，未被污染的区域，称为无菌区域。
（4）平板分离与活菌计数：平板分离计数法是将待测菌液经适当稀释，涂布在平板上。
经培养后在平板上形成肉眼可见的菌落。
根据稀释倍数和取样量计算出样品中细胞密度。
微生物实验指导
二零零六年十月目录实验一显微镜油浸系物镜的使用 ------------------------------------------3实验二细菌形态的观察-------------------------------------------------------------4实验三细菌简单染色法及口腔微生物的观察 ------------------------5实验四细菌的革兰氏染色---------------------------------------------------------7实验五细菌的芽胞染色 ------------------------------------------------------------8实验六酵母菌的形态观察实验 ---------------------------------------------- 10实验七霉菌的形态观察----------------------------------------------------------- 12实验八细菌大小的测定----------------------------------------------------------- 14实验九细菌数量的测定（血球板计数） ------------------------------ 16实验十培养基的配制--------------------------------------------------------------- 19实验十一消毒与灭菌--------------------------------------------------------------- 21实验十二稀释平板计数及微生物菌落形态的观察 -------------- 27实验十三紫外线对微生物生长的影响 ---------------------------------- 30实验十四抗生素对微生物的作用 ------------------------------------------ 30实验十五比浊法测定大肠杆菌的生长曲线 ------------------------ 31实验十六土壤中好气性细菌的分离与计数(附划线分离法)33实验十七土壤中放线菌的分离与计数 -------------------------------- 35实验十八土壤中真菌的分离与计数 ------------------------------------ 36实验十九纤维素分解试验----------------------------------------------------------- 37实验一显微镜油浸系物镜的使用一、实验目的和实验内容目的：复习显微镜低倍镜和高倍镜的使用技术，了解油浸系物镜的基本原理，掌握油浸系物镜的使用方法内容：1、学习油浸系物镜的使用方法2、用油镜观察细菌三型和放线菌染色装片二、实验材料和用具细菌三型、放线菌的染色装片，香柏油、二甲苯，显微镜、擦镜纸。
2.1微生物的实验室培养
有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个 椭圆形的休眠体，叫做芽孢。 特点：对恶劣的环境，如干旱、高温等，有很强 的抵抗力。 在生物体的一定部位产 生一种特殊的生殖细胞叫孢 子。孢子的特点是能直接长 成新个体。
无菌技术： 分类 定义 方法
灭菌法
物理法：热力、辐射、微波、 杀灭一切微生物 等离子体 化学法：醛类、烷化剂
无机盐功能 构成微生物细胞的组成成分 调解微生物细胞的渗透压， PH值和氧化还原电 位 有些无机盐如S、Fe还可做为自养微生物的能源 构成酶活性基的组成成分，维持酶活性。Mg、 Ca、K是多种酶的激活剂
（4）特殊营养：
微生物生长不可缺少的微量有机物质，维生素、碱基等 （生长因子）。（牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有）
病毒: 微生物
一般指肉眼看 不见的生物
无细胞结构 原核细胞
原核生物: 细菌、蓝藻 原生生物：单细胞的动植物
如草履虫、单细胞藻类等
真菌: 如酵母菌
真核细胞
一、培养基
微生物生存的环境和营养物质 在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要 1、培养基的种类 的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长。 液体培养基 根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种 例如，在培养基中加入青霉素，以抑制细菌、 指示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同种 半固体培养基 据物理性质分 放线菌的生长，从而分离到酵母菌和霉菌。又 类的微生物。例如，在培养基中加入伊红和美 如，在培养基中加入高浓度的食盐可以抑制多 固体培养基 常用于工业生产 蓝，可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在 种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生 大肠杆菌等细菌：如果有大肠杆菌，其代谢产 长。 常用于观察微生物的 天然培养基 物就与伊红和美蓝结合，使菌落呈深紫色，并 运动、鉴定菌种 据化学成分分 用于微生物的分离、计数 带有金属光泽。 合成培养基 常用于工业生产 选择培养基 据用途分 鉴别培养基常用于分类、鉴定
微生物学检验实验指导
微生物学检验实验指导2009．7一、《微生物学检验》实验目的要求1．通过实验验证理论知识，并掌握比较全面的微生物学基本操作技术。
2．在微生物学实验过程中建立无菌观念，掌握无菌操作技术。
3．通过实验进一步掌握临床常见病原微生物的生物学性状、分离培养和鉴定的方法、各种临床标本的微生物学检验程序和方法。
4．在实验过程中逐渐培养独立思考问题、分析问题和解决问题的能力。
二、微生物学实验室规则及实验室意外处理方法1．微生物学实验室规则由于微生物学实验是以病原微生物为研究对象，在实验过程中任何疏忽大意都有可能引起实验人员的自身感染或实验室和周围环境的污染。
因此，实验中应严格遵守实验规则，建立无菌观念，严格无菌操作，防止实验过程中出现意外情况，并确保实验结果的准确。
（1）试验前须预习实验内容，了解实验目的、方法和注意事项，做到心中有数，避免发生错误，提高实验效率。
（2）进入实验室必须穿工作服，必要时还须戴口罩、帽子和手套，并做好实验前的各项准备工作。
（3）非必需物品禁止带入实验室，带入实验室的物品应远离操作区，放在指定的区域。
（4）实验室内不准大声喧哗、嬉戏，应保持实验室的安静、整洁和有序。
不准在实验室内吸烟、饮水和进食，尽量避免用手触摸头、面部，防止感染，尽量减少室内活动，以免引起风动。
（5）实验中注意节约试剂，爱护仪器，避免有菌材料的污染，如有传染性材料污染桌面、地面、手、衣服或发生其他意外情况，应立即报告老师及时作适当处理。
（6）用过的污染物品应放到指定的地点，经专人消毒灭菌之后再进行清洗，切勿乱丢或冲入水池中。
禁止将本实验室的物品带出实验室外。
需送温箱培养的物品，应标记清楚后送到指定地点。
（7）实验完毕后应将桌面整理清洁，试剂、仪器放回原处，并用浸有消毒液的抹布将操作台擦拭干净，打扫卫生，关好水、电、门窗。
（8）离室前脱下工作服，反折放在指定的地方；双手在2％来苏液中浸泡5min左右，再用肥皂、清水洗净，方可离开实验室。
微生物实验实验报告
实验名称：微生物分离与纯化实验日期：2023年3月15日实验地点：微生物实验室实验目的：1. 学习微生物分离与纯化的基本原理和方法。
2. 培养学生的实验操作技能和观察能力。
3. 了解微生物在不同培养基上的生长特性。
实验原理：微生物分离与纯化是微生物学实验的基本操作之一，其目的是从混杂的微生物群体中分离出单一的微生物种类。
常用的分离方法包括平板划线法、稀释涂布平板法等。
本实验采用平板划线法分离纯化微生物。
实验材料：1. 样品：土壤样品2. 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基3. 工具：无菌接种环、无菌棉签、酒精灯、培养皿、显微镜等实验步骤：1. 准备工作：将牛肉膏蛋白胨培养基在50℃水浴中加热融化，待冷却至约45℃时，倒入培养皿中，制成平板。
2. 接种：取适量土壤样品，用无菌棉签均匀涂抹在平板上。
3. 划线：用无菌接种环在平板上划线，划线方向要均匀，线与线之间保持一定的距离。
4. 灭菌：将接种后的平板倒置放入培养箱中，在37℃恒温培养24小时。
5. 观察结果：观察平板上的菌落生长情况，记录菌落特征。
6. 纯化：选取单个菌落，用无菌接种环接种到新的平板上，重复步骤4和5，直至获得纯化的微生物。
实验结果：1. 在平板上观察到多个菌落，菌落大小、形状、颜色等特征各异。
2. 通过划线分离，得到单个菌落，菌落特征与原菌落相同。
实验讨论：1. 本实验中，平板划线法是常用的微生物分离方法之一，其原理是利用微生物在培养基上的生长特性，通过划线将混杂的微生物群体分离成单个菌落。
2. 在实验过程中，无菌操作非常重要，以防止污染。
3. 菌落特征是微生物分类和鉴定的重要依据，通过观察菌落的大小、形状、颜色等特征，可以初步判断微生物的种类。
实验结论：通过本次实验，我们掌握了微生物分离与纯化的基本原理和方法，学会了平板划线法的操作技巧，并了解了微生物在不同培养基上的生长特性。
实验结果表明，平板划线法是一种有效的微生物分离方法，可以用于分离纯化微生物。
微生物学实验1
三、流程 涂片→干燥 固定→染色 初染→媒染 脱色→复染 干燥→固定 染色（ 媒染→脱色 复染） 镜检 镜检。 涂片 干燥 固定 染色（初染 媒染 脱色 复染）→镜检 四、步骤 1. 涂片：取一洁净的载玻片，在载玻片的中心滴一小滴蒸馏水，以无菌 接种环分别挑取少量菌体涂片，干燥、固定。玻片要洁净无油，否则 菌液涂不开。 2. 初染：滴加结晶紫(以刚好将菌膜覆盖为宜)于两个玻片的涂面上，染色 1～2min ，倾去染色液，细水冲洗至洗出液为无色，将载玻片上水甩 净。 3. 媒染：用卢戈氏碘液媒染约l min ，水洗。 l 4. 脱色：用滤纸吸去玻片上的残水，将玻片倾斜，在白色背景下，用滴 管流加95%的乙醇脱色，直至流出的乙醇无紫色时，立即水洗，终止 脱色，将载玻片上水甩净。 脱色时间一般约20～30s。 5. 复染：在涂片上滴加番红液复染约2～3min ，水洗，然后用吸水纸吸 干。 6. 镜检：用高倍镜观察 7. 实验结束后处理：清洁显微镜。
实验一 微生物的染色及观察
一、 实验目的 1.学习并掌握显微镜的原理及使用方法 2.了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类 鉴定中的重要性。 3.学习掌握革兰氏染色技术。
二、实验原理 1. 复式显微镜的结构：机械装置、光学系统 显微镜成像原理：成倒立放大的虚像 显微镜的使用步骤： 观察前准备→ 显微观察→用毕后的处理
三、实验步骤 • 称药品→溶解→调pH值→融化琼脂→过滤分 装→包扎标记→灭菌→倒平板 • 配方： 配方：
牛肉膏蛋白胨培养基： 牛肉膏蛋白胨培养基： NaCl 5.0g 蛋白胨 10.0g 牛肉膏 5.0g 琼脂 20.0g 蒸馏水 1000ml pH 7.0 淀粉培养基： 淀粉培养基： 牛肉膏 5.0g 蛋白胨 10.0 g NaCl 5.0 g 可溶性淀粉 2.0 g 琼脂 20.0 g 蒸馏水 1000 ml pH 7.2 明胶培养基： 明胶培养基： 蛋白胨 5g 牛肉膏 3g 明胶 120g 蒸馏水 1000mL pH 7.2
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微生物实验的分类方法
微生物实验的分类方法可以根据实验目的、实验对象和实验条件等不同因素进行分类。
以下是常见的微生物实验分类方法：
1. 根据实验目的分类：
- 鉴定和鉴别实验：用于确定微生物的种类或进行微生物的鉴定鉴别。
- 生长和培养实验：用于观察微生物的生长和繁殖情况，包括培养基的制备、无菌技术等。
- 生物合成和代谢实验：用于研究微生物的代谢途径、合成产物等。
2. 根据实验对象分类：
- 细菌实验：主要研究细菌的特性、生物学行为等。
- 真菌实验：主要研究真菌的生长、培养条件等。
- 病毒实验：主要研究病毒的感染机制、复制过程等。
3. 根据实验条件分类：
- 水质检测实验：主要用于分析水体中的微生物数量和种类，以评估水体的卫生状况。
- 食品微生物学实验：用于检测食品中的微生物污染情况，以保障食品安全。
- 土壤微生物学实验：用于研究土壤中的微生物种类、数量以及对土壤环境的影响。
总之，微生物实验的分类方法主要是根据实验的目的、对象和条件来进行划分，不同的分类方法可以根据实验需要进行选择和综合应用。