血液分析仪计数血小板假性减低的影响因素

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抗凝剂导致血小板假性减少原因分析处理原则

抗凝剂导致血小板假性减少原因分析及处理原则【摘要】目的：探讨抗凝血导致血小板假性减少的原因及纠正措施。

方法：通过sysmex-2100血液分析仪及kx-21 血细胞分析仪检测edta抗凝血和枸橼酸钠抗凝血,同时采指血手工计数血小板和抗凝血涂片显微镜镜检。

结果：edta-k2抗凝血检测血小板偏低，涂片血小板聚集；末梢血检测血小板接近实际数值，涂片血小板分布正常。

个别情况下血小板也对枸橼酸钠发生聚集反应引起血小板假性减低。

对于首次检测血小板数值减低的标本均应手工计数血小板或涂片镜检,以确认是否存在抗凝剂所致血小板聚集现象。

【关键词】抗凝剂;血小板假性减少;原因分析;处理原则【中图分类号】r446.1【文献标识码】b【文章编号】1008-6455（2011）08-0316-011 材料与方法1.1 仪器xe-2100血细胞分析仪（希森美康）及配套试剂;kx-21血细胞分析仪及配套试剂。

两仪器均经校正。

1.2 血小板稀释液（许汝和氏法）用于显微镜计数（手工法） ,按《全国临床检验操作规程（第二版）》1.3 edta-k2真空抗凝管,枸橼酸钠真空抗凝管。

1.4 实验方法。

仪器分析:sysmex - 2100血液分析仪用e-check 质控品（ level1, 2, 3）监控稳定性,按操作规程操作。

首先用常规方法检测edtak2 抗凝静脉血,然后以同样方式检测枸橼酸钠抗凝静脉血。

两者为液体抗凝剂,其抗凝剂与血液之比为1∶9,故细胞计数结果应再乘1.1方为准确的结果,本文中所有抗凝管结果均为校正后的数值。

kx-21血细胞分析仪使用稀释模式。

标本来自29例用xe-2100 血细胞分析仪（wbc+diff模式）进行血细胞分析时遇到plt偏低的患者,散点图上没有任何提示信息,偶尔出现“plt clumps”提示。

每例病人均采指血手工计数血小板-按文献[1]方法操作。

每例病人的edta抗凝血与枸橼酸钠抗凝血均涂片经瑞氏染色后显微镜镜检。

假性血小板减少的原因分析及对策

［王忠诚．４］王忠诚神经外科学［］２版．汉：北科学技术出版Ｍ．第武湖
社，０５４０４１２０：４ — ４．
（＜．）Ｐ０５。因此，早发现外部性脑积水，时进行对症治疗，０及及
可取得较好的疗效。
总之，外部性脑积水需要早期查明病因、早期干预、早期采
取有效的治疗，这是促进本病痊愈的关键性措施。
参考文献
【黄本长，５］薛艳荣，乔俊，．等标准大骨瓣开颅治疗重型脑挫裂伤［．Ｊ实］
用诊断与治疗杂志，０７２（）９４９５２０，１８：５－５．（收稿日：０１０～６期２１－７２）
■ 艟园
还不能叫爸爸、妈妈或发音不清等，早期进行干预治疗，需以
［张利军，２］庞宗然，白宇．外部性脑积水研究进展．医学综述，０３９２０，
（２：４ — ４．１）７７７９
保证今后生长发育正常。本组结果显示：病６发个月内治疗
ＣｌｃｅｅｏｓｂｏｄｗｉＴＡ－，ｓｄｕｃｔｔ，ｐｆｈｒ］ｂｏｄ，ｍａｕｒｄｌｔｎａｐｒｔｓｅｐｅａｏｌｔｄｖｎｕｌｏｔＥＤｅｈＫｏｉｍｉａｅｅｐｅａｌｏｒｉｎａｐｅｉｉｐａａｕ，ｐｒｈｒｌｕｏｉｌ
ｍｅｈｄｒｎｘｌｉｅｌｔｌｔｏｎｅｕｔｎｔｖｉｓｉｇｏｉｔｏｓｏｅｐａｎｄｐａｅｅｕｔｄｃｉａｏｄｍｉｄａｎｓｓｆｕｃｒｏｏ．

血液分析仪计数血小板假性异常的影响因素及处理

红细胞，也会小于３０ｌｆ，影响血小板计数的准确性。２．４试剂与其它因素的影响：试剂与ＳｙｓｍｅｘＸＳ一５００ｉ不匹配，细菌污染，或由于血液分析仪管道长时间不清洁造成管壁附着微小凝血块，导致仪器测定血小板空白值偏高。
［５］丛淑珍，冯占武．甲状腺良、恶性结节超声弹性成像特征分析［Ｊ］．中国医学影像技术，２０１０，２６（９）：１６８２—１６８４．
血液分析仪计数血小板假性异常的影响因素及处理
李晓云
一
２引起血小板计数假性增高的影响因素
２．１某些溶血性疾病，发生血管内溶血。由于血液中出现较多的红细胞碎片，这些碎片在血细胞分析仪计数时被划分到血小板里，而干扰血小板的计数Ｊ。２．２慢性粒细胞性白血病经过冶疗后，血液中出现大量的白细胞碎片，而干扰血小板的计数。２．３严重的缺铁性贫血病人，如果ＭＣＶ＜６０ｌ时，ｆ一些完整的
文９７９（２０１４）１０— ００８５— ０１
目前，由于血细胞分析仪ＳｙｓｍｅｘＸＳ一５００ｉ的广泛应用，无论静脉血模式还是末梢血模式都只需２０ｕｌ，具有微量、简便、快速、重复性好的优点，极大地方便门急诊病人的检测；由于血液分析仪原理的限制及众多的影响因素，红细胞和血小板的检测系统在一个通道内，在２—３０ｌ体积内分析血小板，ｆ在２５— ２５０ｌ体积内分析红细胞，ｆ两者分析范围有交叉重叠。血细胞的计数结果与实际值有一定的差异，可能造成错误的临床诊断，这是检验工作者长期关注的问题。我们在日常工作中探讨了些引起血小板假性异常的原因，现报告如下：

血小板假性减低的原因及其校正分析

血小板假性减低的原因及其校正分析
张智敏杨佳娄峻邱卫强
【摘要】目的
校正方法。方法
分析乙二胺四乙酸二钾（ＥＤＴＡ — Ｋ２）和枸橼酸钠导致血小板假性减低的原因及实验室常用的
按照《临床检验操作规程》规定的镜检规则选择片镜检
【Ａｂｓｔｒａｃｔ】０ｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏａｎａｌｙｚｅｔｈｅｃａｕｓｅｓｏｆｅｔｈｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅｔｅｔｒａａｃｅｔｉｃａｃｉｄｄｉｐｏｔａｓｓｉｕｍ（ＥＤＴＡ．Ｋ２）ａｎｄＳＯ．
组血小板检测结果远低于枸橼酸钠抗凝血、新鲜末梢血、手工显微镜计数检测的血小板，而后三者方法检测的血小
板值非常接近；第二组ＥＤＴＡ抗凝血和枸橼酸钠抗凝血检测结果相近且其均低于新鲜末梢血和手工显微镜计数检测的血小板，而后两者检测的血小板结果非常相近。结论ＥＤＴＡ和枸橼酸钠均可出现凝集导致血小板假性减低，必须采末梢血涂片镜检进行复查，避免血小板假性减少的发生，为临床提供可靠的数据。
ｇｒｏｕｐｉｎｇｐｌａｔｅｌｅｔｓｆｏｒＥＤＴＡ —ｒａｉｓｅｒｆｏｒａｇｒｏｕｐｏｆＫ２，ｐｌａｔｅｌｅｔｓｆｏｒＥＤＴＡ —Ｋ２ａｎｄｓｏｄｉｕｍｃｉｔｒａｔｅｒａｉｓｅｒｆｏｒｔｈｅｔｗｏｇｒｏｕｐｓ．

影响血小板计数因素分析

影响血小板计数因素分析PLT计数是临床诊断和治疗各种原因PLT减少症的重要指标，现各大医院多采用血细胞分析仪对其计数，血细胞分析仪具有快速、方便、重复性好等优点，但在某些条件影响下，计数PLT会出现较大偏差，本文在翻阅有关文献的基础上，现将有关影响PLT计数综述如下：1 导致PLT计数升高的因素1.1 标本放置时间PLT是体积较小的血细胞，易于黏附聚集和破坏，王新花等［1］认为标本放置时间越长，破坏越多；同时，红细胞也不例外，血细胞分析仪计数PLT时，误将红细胞碎片以为是PLT而计入，造成测定结果假性增高，即时测定和1 h测定有非常显著性差异；建议取标本后一定要在30 min内测定。

1.2 样品溶血不完全文献［2］报道溶血不完全不但影响白细胞计数和分类的准确性，而且影响下一例样品的PLT计数，由于红细胞碎片冲洗不彻底，造成PLT假性升高；残留于测定杯壁的溶血素可将红细胞破坏成2.0fl左右的碎屑，导致PLT计数结果偏高。

1.3 试剂质量根据有关会议精神，强调使用与仪器相匹配的原装或高质量的试剂，尤其是PLT的结果，直接反映试剂的质量，进口试剂价格过于昂贵，目前，国产试剂存在一定的质量问题，如过滤不彻底、细菌污染等因素而使基础值偏高，与仪器不匹配；试剂厂家应继续努力，争取生产出高质量的国产化试剂。

1.4 地线和电源血细胞分析仪要求良好的接地效果，如地线未接或接地不良，均可形成静电脉冲信号而影响PLT计数；其主要表现在PLT直方图的起点偏左，并形成许多小峰，这种情况一定要先排除地线和电源的因素，再寻找其他原因。

1.5 药物影响有些药物可以影响PLT的计数，患者输用脂肪乳后影响PLT 计数，认为脂肪乳剂中的脂肪乳颗粒直径和患者PLT相近，导致输入脂肪乳的患者PLT会假性增高，并建议患者输用脂肪乳后如需检测PLT最好在5~6 h以后，如出现PLT过高时应随时和临床联系，最后经血片观察方可报出结果。

2 导致PLT减少的因素2.1 采血是否规范和顺利采血是否顺利是造成PLT偏低的一个重要因素，静脉经多次穿刺而引起的水肿及皮下出血时，因组织损伤后，组织凝血因子易于混入血液标本，从而产生肉眼看不见的小凝块，是造成血细胞分析仪测定结果偏低的常见原因，建议这种标本必须重新采血测定；吸取标本量不足也是造成PLT 减少的一个原因，同时会造成白细胞和红细胞的计数减少；另外，标本未经混匀即上机测定是造成PLT结果偏低的又一个容易忽视的因素，所以操作时一定要规范，充分混匀后再上机测定。

ABX60血液细胞分析仪血小板低值原因分析

意在出汗时要先用干棉球擦干取血部位。采血时，避免挤压取血
（血小板稀释液冰箱保存（１）配制按《国临床检验操作规损害，其血细胞数值与常态下的数值发生了很大的偏差，故在采全程・２版》标准执行）（ＥＴ — 第；２ＤＡＫ抗凝剂。仪器：Ｂ６）ＡＸ０全
３讨论３１血细胞计数．
６／Ｘ０Ｌ，重新进行抽血，再用分析仪测定，器检测还是受到了多种因素的影响，在血小板计数方面常常产生果显示的平均值为４１９
一
验室的关注，为此笔者进行了长时间的观察研究。
１资料与方法
１一般资料．１选取２００９年８一０１３月２１年月笔者所在医院门诊、病房标
《外学究第１卷第１总６期）０年月医技与临床Ｙｊｕｎｈａｇ中医研》ｏ７第１２２６期（９１ｉｌｃｕｎｉｉｙ
ＡＢ６血液细胞分析仪血小板低值原因分析Ｘ０
段素华① 宫克鸿①
【关键词】血细胞分析；静脉采血
分混合均匀后，１ｈ内在ＡＸ０型分析仪上分析结束。对血小板过２ｍｉ，比较大的静脉中的血流由于受阻而使其上端的毛细血Ｂ６ｎ计数低于９１９０／ｘ０Ｌ的２８例血标本用显微镜法计数血小板，每管内的血压比常态下的血压高，这时毛细血管内的血浆与组织液６
异性ｑ４１ＰＯｏ）＝．，＜．１４。
一
，
也是常见的一种原因。另外，在输液时，由于稀释了血浆浓度，

EDTA依赖性假性血小板减少原因分析及纠正方法

EDTA依赖性假性血小板减少原因分析及纠正方法曹锦梅;王兵【摘要】目的：分析偶尔发生在血常规检测过程中出现乙二胺四乙酸盐(EDTA)依赖性假性血小板减少症(EDTA-PTCP)的现象和纠正措施。

方法分别使用末梢血稀释法、抗凝剂替换法、网织红细胞通道计数法、外周血涂片染色法等检测方法，对淮安市一院2例EDTA-PTCP患者的标本进行测定。

结果 EDTA抗凝常规通道检测血小板数减少，分别为14×109/L和7×109/L、枸橼酸钠抗凝法分别为122×109/L，99×109/L、末梢血稀释法分别为116×109/L，95×109/L、网织红细胞通道计数法分别为127×109/L，105×109/L，血小板计数基本正常，直接外周血涂片染色血小板分布正常。

结论 EDTA依赖性假性血小板减少现象，可通过末梢血稀释法、抗凝剂替代法、网织红细胞通道计数法、外周血涂片染色法等方法加以纠正。

【期刊名称】《海南医学》【年(卷),期】2016(027)011【总页数】2页(P1881-1882)【关键词】乙二胺四乙酸盐;枸橼酸钠;血小板计数;血小板假性减少症【作者】曹锦梅;王兵【作者单位】南京医科大学附属淮安第一人民医院检验科，江苏淮安 223300;南京医科大学附属淮安第一人民医院检验科，江苏淮安 223300【正文语种】中文【中图分类】R558+.2血小板是血液的重要形态之一，在止血和凝血过程中发挥重要作用。

因此，血小板的数量及功能在疾病诊断中显得相当重要。

目前血小板计数临床各实验室普遍使用的是全自动血细胞分析仪，其具有操作简便、重复性好、准确度高、结果稳定等优点，被广泛普及。

EDTA在实验室血常规检查中被定为首选的抗凝剂，其对血细胞的形态和血小板的计数影响都很小，因此，被广泛使用。

但近年来，由此抗凝剂引起的假性血小板减少的现象时有报道，淮安市一院从2015年7月至12月就发现2例，本文分析其原因并探讨其纠正方法。

警惕“EDTA依赖性假性血小板减少症”

警惕“EDTA依赖性假性血小板减少症”EDTA即乙二胺四乙酸，是常用血常规检测的抗凝剂已被ICSH 认定,并得到了广泛应用。

我们平时在病房进行全血细胞分析（血常规）检验时，使用的是紫帽真空管。

这种真空管中就装有EDTA盐抗凝剂。

在因不同理由需要检测血常规的人群中，有极少数人，当其抽出的血液放入紫帽真空管中与EDTA接触，大约十几秒后他的血小板就会发生聚集。

当把这管标本放在全自动血液分析仪上检测，就可能出现假性血小板减少，随着这一标本存放时间的延长，所检测出的血小板计数可能会更低。

另外，由于聚集的血小板在体积上与白细胞相近，还可能会被血液分析仪，误当成白细胞计数，造成白细胞计数的假性增高。

这种现象我们称之为EDTA依赖性假性血小板减少症（EDTA- dependent pseudo thrombocytopenia，PTCP）。

如果这种现象没有被及早识别，可能会给临床工作带来很大的困扰，如延误手术，增加不必要的辅助检查，增加患者的身心痛苦与经济负担等等。

令人欣慰的是，近年来，检验科已经“破获”多起EDTA依赖性假性血小板减少症。

那么，如何识别呢？在临床工作中，凡遇到没有出血表现、但血小板计数却明显减少的患者，均可列入可疑对象进行鉴别。

可使用如下方法：1、同时用紫帽真空管与蓝帽真空管（内含有枸橼酸钠抗凝剂，平时用于检测凝血功能）采血复查，可以发现两根采血管的血小板计数的差别，蓝帽真空管中的血标本检测结果，血小板计数在正常范围内，而紫帽真空管中的血标本检测结果，血小板计数低于正常。

2、用手工法重新进行血小板计数或把血涂片进行瑞氏染色后，直接在显微镜下观察血小板分布情况及其是否有血小板凝集现象进行鉴别。

EDTA-K2造成假性血小板减少，分析其原因有以下两点：1、EDTA-K2可使血液发生免疫介导，产生冷抗血小板抗体，使血小板互相发生凝集现象，这种EDTA依赖的冷抗血小板自身抗体还能直接作用于血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa上，同时这种与血小板结合后的自身抗Fc端又可与淋巴细胞或单核细胞膜上Fc 受体结合，出现卫星现象。

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选，而有极少数患者体外的ＥＤＴＡ抗凝血，在室温条件下可发生血小板ＥＤＴＡ依赖性凝集，或某些患者存在药物性抗血小板抗体，遇到某些致敏药物引起血小板凝集。肝素和双草盐作为抗凝剂时，会导致血小板计数假性降低。③ 大体积血小板的影响：由于分析仪通过测定血液中细胞的直径大小以区
子弹头中的抗凝剂虽然量很少，但对血液也有一定的稀释作用，使样本浓度降低，白细胞计数相对减少。显微镜计数法是将全血稀释一定倍数，在低倍镜下计数度一定体积内的白细胞数量，经换算求出每升血液的白细胞数，所以检测结
果的误差会被放大很多倍。因此，镜下子弹头抗凝检测末梢
１．１研究对象：２０１１年住院患者血液分析仪计数血小板减
少１２０例，男性４２例，女性７８例。
１．２仪器：迈５８００血液分析仪进行血小板计数。②取
２０ｍＬ血液加入０．３８ｍＬ复方尿素稀释液中，混用，将混悬液
弹头抗凝两种血样，结果抗凝子弹头接取的末梢血的白细胞计数（９￣４）ｘｌＯｇ／Ｌ明显低于直接采取的末梢血（１Ｏ￣４）ｘｌＯｇ／Ｌ，
２种方法的检测数据差异有统计学意义（ｆ＝６．９７０，Ｐ＜０．０１）。所
・
７６０・
实用医技杂志２０１３年７月第２０卷第７期Ｊ０ｌＩｍａｌ０ｆＰｒａｃｔｉｃａｌＭｅｄｉｃａｌＴｅｃｈｎｉ口１１ｅｓ，Ｊｕｌｖ２０１３，Ｖｏ１２０
．
。Ｎｏ．７
迈瑞５８００血液分析仪与显微镜检查血小板计数结果符合率的比较：符合率９３．７％（１１２／１２０），假阳性率６．３％。
方格内的血小板数，然后按照公式：血小板数几＝（５个中方格
内血小板数）ｘ５ｘｌＯｘ２ＯｘｌＯ６算出血小板数。
２结果
抗原一抗体复合物有关。
综上所述，在日常工作中应严格按照规程操作，对仪器
定期进行维护和保养，在保证仪器正常运行的同时，如检测过程中出现血小板计数偏低或偏高的现象，在仪器提示有聚集
分血小板、红细胞及白细胞，不能对大血小板进行识别，误把
血小板计数成红细胞，而使血小板假性降低。④标本放置时间的影响：原则上标本采集ｌ５３０ａｉｒｎ后检测结果，３０ａｉｒｎ至２ｈ内可以得到最佳的检测结果。标本放置时间越长，对血小板的影响越大。随着时间的延长，血小板发生肿胀或产生结
血小板检测是临床诊断和治疗各种血小板减少症的重要指标。随着检验技术的发展，血细胞分析仪具有快速、方便、重复性好、工作效率高等优点，已被广泛使用。但诸多的因素对检测结果的影响必须引起高度重视。在工作中我们发现，有极少数的患者使用仪器法检测血小板时血小板低于正常值，后经涂片染色镜检并进行显微镜下计数，发现ｍ小板计数并没减少，只是血小板呈现程度不一的聚集，患者也未见血小板减少导致的临床症状，出现血小板假性减少或不明原
随着放置时间的延长，细胞改变越多。ＥＤＴＡ作为抗凝剂的浓
度达到２．５ｇ／ｍＥ时，中性粒细胞肿胀，分叶消失。门诊工作中，不同的人刮取的血液量不可能完全一致，因此抗凝子弹
ｆ２】吴小蔓．临床检验基础室验指导．３版．北京：人民卫生出版
构型改变，导致仪器不能正常识别，使血小板计数假性降低。 ⑤大量输血时会引起血小板减少，暂时『生血小板减少一般在
３～５ｄ即可恢复正常。另外也有患者输血１周左右，发生全身性紫癜，血小板计数明显减少，可能患者与外源血小板特异性
充人计数池，在高倍显微镜下精确计数中央大方格中５个中
以，用抗凝子弹头中剩余的血做血常规中的白细胞计数复查的结果是不准确的。
３讨论
血的白细胞计数既使漏数较少，对结果也会产生影响。白细胞计数用显微镜复查不可以用抗凝子弹头中剩余的
血，必须重新采取末梢血。参考文献
【１１］熊立凡．临床检验基础．４版．北京：人民卫生出版社，２０１１：
４３ — ４４．
子弹头中的抗凝剂ＥＤＴＡ．Ｋ：对白细胞细胞膜的稳定性可能会有一定的负作用。经过抗凝后的血液样本再加入到２％
冰醋酸稀释液中，有少部分白细胞被破坏，白细胞计数减少。
血液经ＥＤＴＡ．Ｋ抗凝后，白细胞的形态也会发生改变。
因的血小板减少。１对象与方法
到１．５ｍＬ，不能超过２ｍＬ，否则可因抗凝剂相对不足使血小板发生聚集，导致血小板计数假性降低。②抗凝剂的影响：用
于血液分析仪的抗凝剂乙二胺四乙酸二钾（ＥＤＴＡ．）为首
社，２０１１：３３．
头中的抗凝剂浓度会不一样。显微镜计数时，这些情况下可能会漏数，从而使白细胞计数结果偏低。
（收稿日期：２０１３．０３．１４）
血液分析仪计数血小板假性减低的影响因素
青海红十字医ｒ￣（８１ｏｏｏｏ）孔英兰包文芳