胃溃疡模型
第八章消化系统疾病动物模型
6. 用肉眼或放大镜观察胃粘膜面，记录每只动物 产生的溃疡数、溃疡程度、溃疡面积（或溃 疡指数）及病变的情况。
2019/10/20
32
幽门结扎法胃溃疡模型
2019/10/20
33
幽门结扎法胃溃疡模型
结果
形成的溃疡主要发生在对胃液抵抗力较弱的 前胃部（瘤胃），多为圆形或椭圆形。但病变较 表浅，属于胃粘膜急性出血性糜烂，与人类胃溃 疡的典型病变差距较大。
2019/10/20
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幽门结扎法胃溃疡模型
二、幽门结扎法胃溃疡模型
幽门结扎法胃溃疡模型
[造模机制]
通过手术结扎幽门，使胃内胃酸、胃蛋白 酶潴留，对胃粘膜造成侵蚀而形成溃疡。
[实验动物]
成年大鼠，雄雌均可。
幽门结扎法胃溃疡模型
[操作方法]
1. 给药3天。实验前大鼠禁食(24h)不禁水。 2. 自胸骨剑突下沿腹中线切开腹壁，切口约2-3cm。
2019/10/20
43
急性胃溃疡—乙醇法
模型评价及注意事项
乙醇性胃溃疡的程度与乙醇的浓度成正比，一 般乙醇浓度40％以上可引起胃黏膜明显损伤， 80％以上时出现明显破溃、坏死，因此制备胃 溃疡模型时多采用75％以上乙醇或无水乙醇。
也可用盐酸-乙醇(50%乙醇-O.15mmol/L盐酸) 给大鼠灌胃(1ml/100mg)造成溃疡，称为酸乙醇 性溃疡。
2019/10/20
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实验动物
成年小鼠，雄雌均可。
操作步骤
急性胃溃疡—利血平法
动物禁食不禁水24 h后，灌胃给予受试药后 1 h，腹腔注射利血平5 mg/kg体重，18 h后处死 动物，取胃按上述方法用10%甲醛Okabe法）
胃溃疡机能实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解胃溃疡的发病机制和生理特点；2. 观察和分析胃溃疡患者胃酸分泌、胃黏膜保护及胃动力等方面的变化；3. 掌握胃溃疡的诊断方法和治疗方法。
二、实验原理胃溃疡是一种常见的消化系统疾病，其发病机制复杂，涉及胃酸分泌、胃黏膜保护、胃动力等多个方面。
本实验通过对胃溃疡患者的胃酸分泌、胃黏膜保护及胃动力等方面的观察和分析，探讨胃溃疡的发病机制和生理特点。
三、实验材料1. 实验动物：家兔；2. 器械：胃酸测定仪、胃黏膜活检仪、胃动力测定仪；3. 药品：盐酸、胃黏膜保护剂、胃动力促进剂。
四、实验方法和步骤1. 实验动物分组：将实验动物随机分为对照组和实验组，每组10只。
2. 胃溃疡模型建立：实验组动物采用盐酸-乙醇法建立胃溃疡模型，对照组动物仅给予生理盐水灌胃。
3. 胃酸分泌测定：分别于实验前后对两组动物进行胃酸分泌测定，比较两组动物胃酸分泌量的差异。
4. 胃黏膜保护实验：分别于实验前后对两组动物进行胃黏膜活检，观察胃黏膜损伤程度，比较两组动物胃黏膜保护功能的差异。
5. 胃动力测定：分别于实验前后对两组动物进行胃动力测定，比较两组动物胃动力功能的差异。
6. 数据分析：对实验数据采用统计学方法进行分析，包括t检验、方差分析等。
五、实验结果1. 胃酸分泌：实验组动物胃酸分泌量显著高于对照组，表明胃溃疡患者的胃酸分泌功能亢进。
2. 胃黏膜保护：实验组动物胃黏膜损伤程度显著高于对照组，表明胃溃疡患者的胃黏膜保护功能受损。
3. 胃动力：实验组动物胃动力功能显著低于对照组，表明胃溃疡患者的胃动力功能减弱。
六、实验结论1. 胃溃疡患者的胃酸分泌功能亢进，胃黏膜保护功能受损，胃动力功能减弱。
2. 胃溃疡的发病机制可能与胃酸分泌、胃黏膜保护及胃动力等多个方面有关。
3. 本实验为胃溃疡的诊断和治疗方法提供了理论依据。
七、实验讨论1. 胃溃疡的发病机制复杂，涉及多种因素，如胃酸分泌、胃黏膜保护、胃动力等。
2. 胃溃疡的治疗方法多样，包括药物治疗、手术治疗等。
良附丸对实验性胃溃疡模型大鼠的药效学研究
良附丸对实验性胃溃疡模型大鼠的药效学研究目的:本实验建立四种实验性胃溃疡动物模型,观察良附丸对模型动物的防治作用,并明确其防治效果;进而观察良附丸各剂量组对实验性胃溃疡的药效,并初步探讨良附丸抗实验性胃溃疡的作用机制。
方法:实验分两个阶段进行,第一阶段明确良附丸对四种实验性胃溃疡的防治效果及良附丸各剂量组对实验性胃溃疡的药效。
四种实验性胃溃疡模型分别为幽门结扎型、束缚-水浸应激型、消炎痛型及醋酸涂抹型。
第一步将每种模型分为3组:良附丸组、模型组、阳性对照组,各组大鼠分别进行实验、取材,观察胃组织病理变化,测量溃疡指数并计算溃疡愈合率;根据第一步实验所得结果,第二步探讨良附丸各剂量抗束缚-水浸应激型胃溃疡的药效,分为6组,良附丸高、中、低剂量组,模型组,空白对照组,阳性对照组,实验步骤同第一步。
根据第一阶段所得实验结果,第二阶段探讨良附丸对束缚-水浸应激型胃溃疡的作用机制,分为4组:空白组、良附丸组、模型组、阳性对照组,预防性给药4天后造模,腹主动脉取血、取下丘脑、取胃,观察胃组织损伤情况,测量溃疡指数计算溃疡愈合率,测定大鼠血清中SOD、MDA、NO和脑组织中5-HT的含量。
结果:良附丸对幽门结扎型和束缚-水浸应激型胃溃疡均有防治作用,能使胃黏膜损伤程度降低,溃疡抑制率升高,且对束缚-水浸应激型胃溃疡抑制率高于幽门结扎型胃溃疡。
良附丸高剂量组及阳性对照组可显著降低溃疡指数(p<0.01),且效果优于中、低剂量组。
良附丸高剂量组较模型组相比,能够升高大鼠血清中NO、SOD,降低血清中MDA及脑组织中5-HT含量(p<0.05,p<0.01)。
结论:1.良附丸对幽门结扎型和束缚-水浸应激型胃溃疡均有防治作用。
2.束缚-水浸应激型胃溃疡:良附丸高、中剂量组对束缚-水浸应激型胃溃疡均有防治作用,且高剂量组的防治效果优于其他剂量组。
3.良附丸促束缚-水浸应激型大鼠胃溃疡愈合的作用机制可能通过升高大鼠血清中保护因子SOD、NO的含量,降低血清MDA及脑组织5-HT含量来实现的。
木香治疗溃疡实验报告
一、实验背景胃溃疡是消化系统常见疾病之一，其发病机制复杂，与多种因素有关，如幽门螺杆菌感染、胃酸分泌过多、胃黏膜保护功能降低等。
木香，作为传统中药材，具有行气止痛、健脾消食的功效，在中医临床中常用于治疗胃痛、消化不良等症状。
本研究旨在探讨木香对胃溃疡的治疗作用，为其在临床应用提供实验依据。
二、实验材料1. 实验动物：清洁级SD大鼠，体重180-220g，雌雄各半。
2. 药物：木香提取物，由中药房提供，纯度≥95%。
3. 试剂：盐酸、氢氧化钠、胃蛋白酶、生理盐水等。
4. 仪器：电子天平、电热恒温水浴锅、显微镜等。
三、实验方法1. 分组：将SD大鼠随机分为四组，分别为正常组、模型组、低剂量组和高剂量组。
2. 模型制备：采用盐酸-乙醇法复制胃溃疡模型。
模型组大鼠给予盐酸-乙醇溶液，低剂量组和高剂量组大鼠分别给予相应剂量的木香提取物，正常组大鼠给予等体积的生理盐水。
3. 观察指标：（1）大体观察：观察大鼠胃部形态、色泽等变化。
（2）组织学观察：取大鼠胃组织，进行苏木精-伊红染色，观察胃黏膜病理变化。
（3）胃溃疡指数：计算胃溃疡面积与胃窦面积之比。
（4）胃黏膜保护功能：测定胃黏膜中前列腺素E2（PGE2）和一氧化氮（NO）含量。
四、实验结果1. 大体观察：与模型组相比，低剂量组和高剂量组大鼠胃部色泽较淡，溃疡面积减小。
2. 组织学观察：与模型组相比，低剂量组和高剂量组大鼠胃黏膜损伤程度减轻，上皮细胞排列整齐，腺体结构完整。
3. 胃溃疡指数：与模型组相比，低剂量组和高剂量组大鼠胃溃疡指数明显降低（P<0.05）。
4. 胃黏膜保护功能：与模型组相比，低剂量组和高剂量组大鼠胃黏膜中PGE2和NO含量显著升高（P<0.05）。
五、讨论本研究结果表明，木香提取物对胃溃疡具有显著的疗效。
其作用机制可能如下：1. 木香提取物具有抗炎、抗氧化作用，可减轻胃黏膜炎症反应，保护胃黏膜。
2. 木香提取物可促进胃黏膜修复，改善胃黏膜屏障功能。
消化系统疾病动物模型2016ppt课件
溃疡抑制百分率＝
×100%
模型组溃疡指数
发生溃疡的动物数
溃疡发生百分率＝
×100%
实验动物数
2020/4/19
王慷慨
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结果
幽门结扎法胃溃疡模型
形成的溃疡主要发生在对胃液抵抗力较弱 的前胃部（瘤胃），多为圆形或椭圆形。
但病变较表浅，属于胃黏膜急性出血性糜 烂，与人类胃溃疡的典型病变差距较大。
2020/4/19
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一、四氯化碳急性肝损伤模型
2020/4/19
王慷慨
38
造模机制
CCl4急性肝损伤模型
CCl4在肝内经NADPH和肝微粒体细胞色素P450混合功
能氧化酶的作用，生成活泼的三氯甲基自由基（CCl3•）和氯
自由基（Cl3•） 。 这些自由基能与细胞内和细胞膜上大分子发生共价结合，
引起富含不饱和脂肪酸的生物膜发生脂质过氧化，导致膜 结构和功能完整性的破坏，肝细胞损伤坏死；
动物
(CCl4)剂量 (ml/kg体重)
用法
形成肝损伤 所需时间
0.5% 10 颈背部皮下注射1次 约24h
小鼠
0.1% 10 腹腔注射1次
约24h
0.2% 10
12~24h
于1、4、7日各灌胃1次 末次后
25% 5 皮下注射1次
1~8d
大鼠
25% 5 皮下注射2次,间隔4日
1~8d
15% 1 每隔3日灌胃1次，共3次 末次后16h
三氯甲基自由基还能抑制细胞膜和微粒体膜上钙泵的活性， 使Ca2+内流增加，从而引起细胞中毒死亡；
三氯甲基自由基能与蛋白质形成共价键，损害线粒体使 NADH及ATP在肝内生成减少，脂肪酸氧化受抑制，影响肝 脏能量生成障碍，并使三酰甘油和脂肪酸在肝细胞内蓄积。
浅析胃溃疡动物模型及机理
浅析胃溃疡动物模型及机理廖承谱【摘要】胃溃疡是一种慢性的胃部消化性疾病,最主要的临床症状是胃脘部的周期性的疼痛,恶心,呕吐,严重有胃出血表现,另外发病率高,病程长,且容易反复发作,为临床常见病症.据统计,人群中约有10%的人在一生中可能罹患此病,因此建立更加理想的胃溃疡模型,对于胃溃疡的深入研究具有一定的积极意义.根据近几年来国内外对胃溃疡的研究显示,对胃溃疡发病机理的研究已经成为热点话题,其中建立了许多胃溃疡模型,文章就近几年对胃溃疡模型的建立以及发病机理进行综述,为以后胃溃疡进一步研究提供参考依据.【期刊名称】《大众科技》【年(卷),期】2017(019)010【总页数】3页(P76-78)【关键词】胃溃疡;动物模型;发病机理【作者】廖承谱【作者单位】广西中医药大学,广西南宁 530001【正文语种】中文【中图分类】R573胃溃疡是由多种因素引起的慢性消化性疾病，发病率高，病程较长，是临床的常见病症，其发病机理比较复杂，侵袭因素（胃蛋白酶、盐酸、幽门螺杆菌等）与保护性因素（前列腺素、黏液-碳酸氢盐屏障、胃黏膜血流、细胞膜的完整性和细胞再生等）之间对抗失衡所致，任何一种可导致侵袭因素加强或保护性因素减弱的作用力都可导致胃溃疡，Synnerstad I等报道，当体内攻击因子与保护因子之间相互作用不平衡时将会导致胃溃疡的发生。
临床多以上腹部疼痛或不适、腹胀、反酸、恶心、呕吐等为特征。
据统计，胃溃疡的发病率高达10%左右，严重者可并发出血、胃穿孔等。
目前对胃溃疡的研究已经有了较深入的认识，不过在病因、病机、病理、防治等各方面都还有进一步探讨的空间。
通过建立胃溃疡动物模型实验是研究和寻找治疗该疾病药物的重要渠道，因此，建立理想的胃溃疡动物模型，对探索该病的病因、病机、病变发展规律及明确治疗方法及研发新药有积极意义。
在中医实验胃溃疡模型中，有多种模拟胃溃疡的动物模型，主要有药物诱发胃溃疡模型、乙醇引起胃溃疡动物模型、水浸应激性动物模型、幽门结扎型、乙酸法等。
《大黄黄连泻心汤、理中丸(汤)对水浸应激型胃溃疡寒热证模型大鼠影响的研究》
《大黄黄连泻心汤、理中丸（汤）对水浸应激型胃溃疡寒热证模型大鼠影响的研究》摘要：本研究旨在探讨大黄黄连泻心汤与理中丸（汤）对水浸应激型胃溃疡寒热证模型大鼠的影响。
通过建立寒热证模型大鼠，观察两组中药方剂对胃溃疡的治疗效果及可能的作用机制。
实验结果表明，大黄黄连泻心汤与理中丸（汤）均能显著改善模型大鼠的胃溃疡症状，并可能通过不同的药理作用途径，达到调整机体平衡和保护胃黏膜的效果。
一、引言水浸应激型胃溃疡是临床上常见的消化系统疾病之一，其发病与机体内部的寒热失衡密切相关。
传统中医理论认为，通过调节机体内部环境的阴阳平衡，可以达到治疗胃溃疡的目的。
大黄黄连泻心汤和理中丸（汤）作为两种经典的中药方剂，在临床上广泛应用于胃病的治疗。
本研究通过建立水浸应激型胃溃疡寒热证模型大鼠，观察两种中药方剂对其治疗效果及作用机制的影响。
二、材料与方法1. 实验动物与分组：选用健康成年SD大鼠，随机分为正常对照组、模型组、大黄黄连泻心汤治疗组和理中丸（汤）治疗组。
2. 模型制备：采用水浸应激法建立寒热证模型大鼠。
3. 药物干预：分别给予各组大鼠相应药物灌胃，连续7天。
4. 观察指标：观察各组大鼠的胃溃疡症状、胃黏膜损伤程度、炎症反应等指标。
三、实验结果1. 胃溃疡症状改善情况：经过药物干预后，大黄黄连泻心汤治疗组和理中丸（汤）治疗组的胃溃疡症状均有明显改善，与模型组相比差异显著（P<0.05）。
2. 胃黏膜损伤程度：两组治疗组的胃黏膜损伤程度均有所减轻，其中理中丸（汤）治疗组的胃黏膜修复效果更为明显。
3. 炎症反应：经过药物干预后，两组治疗组的炎症反应均有所减轻，且理中丸（汤）治疗组的炎症因子水平降低更为显著。
4. 作用机制探讨：大黄黄连泻心汤主要通过清热泻火、解毒消肿的作用，减轻胃黏膜炎症反应；而理中丸（汤）则主要通过温中散寒、健脾和胃的作用，促进胃黏膜修复。
四、讨论本研究结果表明，大黄黄连泻心汤和理中丸（汤）对水浸应激型胃溃疡寒热证模型大鼠均有治疗效果。
《大黄黄连泻心汤、理中丸对消炎痛型胃溃疡寒热证模型大鼠的影响及其方证相应性研究》
《大黄黄连泻心汤、理中丸对消炎痛型胃溃疡寒热证模型大鼠的影响及其方证相应性研究》一、引言胃溃疡是一种常见的消化系统疾病，其发病机制复杂多样，临床治疗中常需针对不同的证候采取相应的治疗方法。
大黄黄连泻心汤和理中丸是中医临床常用的治疗胃病的方剂，对于消炎痛型胃溃疡寒热证的治疗具有一定的疗效。
本研究旨在探讨大黄黄连泻心汤、理中丸对消炎痛型胃溃疡寒热证模型大鼠的影响及其方证相应性。
二、材料与方法1. 实验动物与分组本实验选用SD大鼠，分为正常对照组、模型组、大黄黄连泻心汤治疗组、理中丸治疗组。
2. 模型制备通过给予大鼠消炎痛药物，诱导胃溃疡寒热证模型。
3. 药物制备与给药方式大黄黄连泻心汤和理中丸按中医传统方法制备，以灌胃方式给予大鼠。
4. 实验指标与方法观察各组大鼠的胃溃疡面积、炎症程度、胃肠蠕动等指标，同时检测相关生化指标。
三、实验结果1. 对胃溃疡面积的影响经过治疗，大黄黄连泻心汤组和理中丸组的大鼠胃溃疡面积明显小于模型组，且理中丸组的效果更为显著。
2. 对炎症程度的影响两治疗组大鼠的炎症程度均有所减轻，其中理中丸组在减轻炎症方面的效果更为明显。
3. 对胃肠蠕动的影响两治疗组大鼠的胃肠蠕动较模型组有所改善，且理中丸组的改善程度更为显著。
4. 生化指标检测结果经过治疗，两治疗组的生化指标均有不同程度的改善，其中理中丸组的改善程度更为明显。
四、讨论1. 大黄黄连泻心汤与理中丸的疗效比较本研究发现，理中丸在治疗消炎痛型胃溃疡寒热证模型大鼠方面效果更为显著，这可能与理中丸具有温中散寒、健脾和胃的功效有关。
而大黄黄连泻心汤则具有清热燥湿、泻火解毒的作用，对于热证型胃溃疡的治疗效果更为明显。
2. 方证相应性研究本研究结果表明，大黄黄连泻心汤和理中丸的疗效与中医证候的寒热属性相吻合。
这表明中医在临床治疗中，针对不同的证候采取相应的治疗方法是有效的。
同时，这也为中医的方证相应性理论提供了实验依据。
五、结论本研究表明，大黄黄连泻心汤和理中丸对消炎痛型胃溃疡寒热证模型大鼠具有明显的治疗效果。
黄连、吴茱萸药对中盐酸小檗碱在急性胃溃疡模型大鼠体内的药代动力学研究
【 文献标识码 】 Ａ
【 文章编号】 １ ０ ０ ４ － ０ ５ ０ １ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ５ — ０ ５ ８ ９ — ０ ３
Ｐｈａ ｒ ｍａ ｃ ｏ ｋｉ ｎｅ ｔ ｉ ｃ ｓ ｓ ｔ ｕｄ ｉ ｅ ｄ ｏ Ｈ ｂｅ ｒ ｂｅ ｒ ｉ ｎｅ ｈ ｙｄｒ ｏ ｃ ｈｉ ｏｒ ｉ ｄｅ ａ ｃ ｔ ｅ ｄ ｂｙ ｒ ｈｉ ｚ ｏ ｍａ ｃ ｏ ｐｔ ｉ ｄｉ ｓ － ｆ ｒ ｕｃ ｔ ｕｓ ｅ ｖ ｏｄｉ ａｅ ｈｅ ｒ ｂａ ｌ ｃ ｏｕ ｐｌ ｅ ｉ ｎ ａ －
【 Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ 】 Ｏｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔ ｏ ｅ ｘ ｐ ｌ ｏ ｒ ｅ ｔ ｈ ｅ ｐ ａ ｔ ｈ ｏ ｌ ｏ ｇ ｉ ｃ ａ ｌ ｅ ｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｏ ｎ ｂ ｅ ｒ ｂ ｅ ｒ ｉ ｎ ｅ ｈ ｙ ｄ ｒ ｏ ｃ ｈ ｌ ｏ ｒ ｉ ｄ ｅ ｂ ａ ｓ ｅ ｄ Ｏ ｉ ｌ ｔ ｉ ｌ ｅ ｐ ｈ ａ ｒ ｍａ ｃ ｏ ｋ ｉ ｎ ｅ ｔ ｉ ｃ
异． 探 讨 病 理 状 态 对 盐 酸 小 檗 碱 体 内过 程 的 影 响 。方 法 分 别 灌 胃给 予 正 常 大鼠 和 急 性 胃溃 疡 模 型 大 鼠黄 连一 吴茱 萸（ ６ ：
１ ） 药 时提 取 液 ， 采 用 高 效 液 相 色谱 方 法 测 定 大 鼠体 内 盐 酸 小 檗 碱 的 血 浆 浓 度 ， 色谱柱 ： Ｄ ｉ ａ ｍｏ ｎ ｓ ｉ ｌ ｃ 。 ８ （ １ ５ ０ ａ ｒ ｍ ｘ４ ． ６ ａｍ， ｒ
黄连－ 吴 菜 萸 药 对 在 乙醇 致 急 性 胃 溃疡 模 型 大 鼠 中吸 收 减 慢 ， 但 是 吸 收 量
【 关键词 】 黄连 ； 吴茱萸 ； Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ ； 盐酸 小檗碱 ； 药代动力学 【 中图分类号 】 Ｒ ５ ７ ３ ． １ ； Ｒ ９ １ ７
醋酸涂抹型胃溃疡热证模型的建立及大黄黄连泻心汤对其影响的实验研究
第９卷第１０期・总第ｌｌ４期 ２０ｌ１年０５月・下半月刊
◎健 意
组为７６．６７％；两组比较，治疗组优于对照组（Ｐ＜０．０５）。 秦立伟［２ ８］应用枳实厚朴汤（枳实１２ｇ，厚朴１２ｇ，槟榔１２ｇ， 莪术１０ｇ，延胡索１５ｇ，蒲公英１２ｇ，苍白术各１５ｇ，青皮 １２ｇ，陈皮１２ｇ，砂仁６ｇ，生黄芪２０ｇ，焦三仙各１５ｇ，炙 甘草６ｇ）治疗功能性消化不良６５例，总有效率９７％。 ３其他疗法 韦艳碧［２９］应用穴位埋线法治疗本病，疗效显著。王 吴［３０］应用枳术汤（枳实、白术、麦芽、砂仁、甘草、佛 手等）联合针刺（上脘透下脘，足三里，阳陵泉，内关 等）冶疗功能性消化不良疗效显著。 结语：综上所述，中医药在治疗功能性消化不良有 较好的疗效，广大医药工作者在病因、病机、辨证治疗 机制方面己做了大量的工作，取得了较大的突破。然而 对于功能性消化不良的中医辨证分型及疗效判定的标准 仍不统一，尚缺乏大样本的研究及统一的诊断。因此， 对于国内中医药学者而言，仍需进一步的努力研究，以 拓宽中医药治疗功能性消化不良的临床开发应用前景。 参考文献 ［１】陆江，陈秀庆．中西医结合治疗功能性消化不良７８例【Ｊ］．光明中医，２０１０， ２５（０３）：４９８－４９９． ［２］杜玉萍．功能性消化不良患者心理辨证护理［Ｊ］．光明中医，２００８，２３（０５）：６８５． ［３】赵振霞，石光灿．浅析功能性消化不良的诊疗［Ｊ】．光明中医，２０１０，２５ （１２）：２３６１－２３６２． ［４］朱晓．功能性胃肠疾病的分型论治阴．光明中医，２００８，２３（１１）：１７８１—１７８２． 【５］梁利鹏，林平．功能性消化不良中医治疗新进展［Ｊ］．光明中医，２００９，２４（０８）： １６２３．１６２５． ［６】闫清海，叶蜀晖．功能性消化不良的中医研究进展【Ｊ】．光明中医，２００８，
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胃溃疡实验模型探索 1 病因病机 消化性溃疡是一种常见的消化系统慢性病。中医学属“胃脘痛”范畴。胃脘痛又称胃痛，临床表现以胃脘部经常疼痛为主症，痛时连及胁背，或兼见恶心、呕吐、吞酸、嘈杂，大便溏薄或秘结，甚至吐血、便血等症【1】。
胃、十二指肠溃疡的病因和发病机理较为复杂，迄今尚未完全阐明。目前认为胃、十二指肠是一种多病因疾病，各种与发病有关的因素如胃酸、胃蛋白酶、感染、遗传、环境、饮食、生活习惯、神经精神因素等均可诱发溃疡产生。而胃酸-胃蛋白酶的侵袭作用增强和胃粘膜防护机制的削弱是本病发生的基本原理，任何影响这两者平衡关系的因素，都可能是本病发病及复发的原因。其次幽门螺杆菌的感染可引发胃内多种炎性介质的释放，这些炎性介质可致胃黏膜的损伤。
胃、十二指肠溃疡在中医学属于胃痛、胃脘痛、心痛等范畴。中医认为该病的发生主要由于情志失调，伤肝犯胃；饮食不节或劳倦过度，脾胃虚寒；外感寒邪，内客于胃等导致胃失和降、气机不利、胃失濡养而发生胃脘痛。胃脘痛的发生，其病变脏腑主要在胃，但与肝脾关系密切，胆肾也与之相关。若久病人络，瘀血阻滞胃络，络脉损伤，则会出现吐血、便血等症。
２ 溃疡模型的种类与方法 幽门结扎型溃疡、应激性溃疡（水浸法）、胃粘膜损伤性溃疡（醋酸法）、药物诱发型溃疡。四种溃疡动物模型总的特点是：结扎法溃疡为圆形、椭圆形、线性，结扎后随时间延长，溃疡数目增加，溃疡恒定发生在前胃部，深达肌层。应激法溃疡数量多，水温超过24℃溃疡出现少而轻，水浸8h以上开始出现溃疡，随时间延长溃疡数量增加，溃疡均发生在腺胃部，溃疡浅表，均不累及粘膜肌层。醋酸法溃疡发生在注射部位，溃疡部位胃壁增厚，溃疡数与注射醋酸部位准确与否有关，病理组织学改变与人类慢性溃疡近似。药物诱发性溃疡发生在腺胃部，溃疡数量少，体积小而浅表，仅累积粘膜上皮表层，部分深达粘膜腺体，但不超过粘膜肌层。 2.1 应激性溃疡模型 2.1.1 应激性溃疡原理 应激性溃疡发生机制有复杂的神经一体液因素参与，应激性胃溃疡是先使皮层中枢的兴奋和抑制过程失调，进而引起植物神经调节功能紊乱，导致迷走神经张力过高，致使胃肌强力收缩，压迫肌肉血管，引起继发性黏膜血管运动障碍，导致溃疡形成。人类由于严重创伤、烧伤等可产生急性应激性溃疡，精神过度紧张，强烈的情绪激动导致溃疡的发生或复发。与中医肝郁型自主神经系统功能紊乱有一定的联系。
2.1.2 应激性溃疡方法 选取体重在160~180g健康大鼠，禁食自由饮水48h后，将大鼠头向上束缚于老鼠固定器，以不能自由活动为度。随即将动物头部向上垂直浸泡在温度相对恒定(水温一般20℃左右)的冷水中，水平面在大鼠剑突部位，20h后取出，用颈椎脱位法处死动物，剖腹将胃取出，结扎贲门、幽门，从腺胃部注入1％ 甲醛10mL于胃中，并将全胃放入1％ 甲醛溶液浸泡10 min，沿胃大弯将胃剪开，用自来水轻轻冲洗胃黏膜面，用棉签拭去腺胃部血丝，然后展开腺胃部，肉眼或放大镜观察腺胃部黏膜损伤程度。溃疡位于腺胃部，表现为点状出血，并出现线状或直径为l-2mm圆形表浅性溃疡，溃疡的程度以溃疡指数表示，并计算溃疡的发生率。溃疡发生率：溃疡发生的动物数占试验动物数的百分比。
2.1.3 应激溃疡模型评价指标（以下指标对胃溃疡模型均适用） 图像积分法量化溃疡面积【5-6】：造模成功取胃后，沿胃大弯剪开，将胃壁展平，用数码相机将胃壁拍下，拍摄距离为10 cm．用 photoshop6．0软件处理图片，分辨率为72像素／英寸，每张图片设置为20 cm×15 cm(实物等比图片为4 cm×3 cm)，RGB格式，加网格线(视图显示网格)，然后对溃疡所占的格数进行积分。占一格者或大于等于1／2格记为1分，小于1／2格者记为0．5分，总计后作为积分．同样对胃总面积进行积分，将溃疡面积的积分与胃总面积的积分的比值代表溃疡面积比。全胃的溃疡面积比为该鼠的溃疡指数,根据溃疡指数进一步计算溃疡抑制百分率：溃疡抑制率百分率=(对照组溃疡指数-给药组溃疡指数)/对照组溃疡指数×100%。 图像积分法是统计溃疡面积／胃总面积的比值，可以消除胃面积大小不均造成的误差，使统计结果更精确，量化 并且，这种方法简单方便， 图像积分法是利用大众性的photoshop软件处理图像，实验室能达到此方法所需的条件及技术要求。
胃黏膜NOS测定【8-9】：内源性一氧化氮(nitric oxide，NO)是一种重要的气体信使分子，在胃肠道各种生理及病理活动过程中起重要作用。NO血管内皮舒张因子能改善胃黏膜的微循环血流量，维持和加强胃黏膜屏障，抑制胃肠运动及调节胃酸分泌，从而有效地保护胃黏膜。NOS是NO合成过程中的关键酶，在应激状态下，大鼠胃黏膜氧自由基不断蓄积，并发生微循环障碍导致胃黏膜损伤，而NO的产生即可减轻胃黏膜的损伤以阻碍胃溃疡的发生与发展。抗溃疡药物对胃黏膜NOS的产生皆具有一定的调节作用，使其增加并维持在一个较高的水平，起到保护胃黏膜的效果，因此NOS的测定在抗溃疡药物研究中有一定指导意义。 按南京建成生物工程研究所提供的说明书进行操作。即：取大鼠胃黏膜组织0．1 g加9倍的生理盐水0．9 mL制备成10％的组织匀浆，3000 r／min，离心10 min，取上清50 μL测NOS活力，另取50 μL测蛋白含量。将测量值代人下述公式得出总NOS活力值。
总NOS活力=×＋蛋白含量 脾指数的测定【8】：麻醉处死后取脾称重， 脾指数(％)=脾脏质量／体质量X 100％ 。
2.1.4 注意事项 （1）动物体重大小应基本一致，笼底不能积留粪便，一面动物自食。 （2）溃疡程度与应激强度密切相关，包括应激时间、水温、水浸部位的高度因素，应严格控制，以免影响实验结果。
（3）注意应激时捆绑动物的松紧度，避免动物溺水死亡或来回移动影响水浸部位高度。
（4）雌性大鼠性烈，较易形成溃疡，实验时注意选用雌鼠。 （5）实验过程中动物需单笼饲养。 2.1.5 预实验结论 在应激实验摸索中，结合实验室条件，做应激胃溃疡模型应选用雌性体重160~180g健康大鼠为宜，应激过程中控制水温在23±0.5℃，大鼠浸泡20h后取出，在该条件下做应急胃溃疡实验，较易成功造模，重复性好，且模型肉眼可见溃疡较明显。
2.2 幽门结扎型溃疡 2.2 .1 幽门结扎型溃疡原理 结扎大鼠幽门造成胃液在胃中滞留，致溃疡因素增强，胃壁防御能力减弱，导致溃疡形成。
2.2 .2 幽门结扎型溃疡方法 选取体重在180~200g健康大鼠，禁食自由饮水72h后，用水合氯醛麻醉,打开腹腔,用缝合线结扎幽门十二指肠结合部。结扎时小心避开血管，缝合腹壁。术后18 h结扎贲门取出全胃，将胃浸入1%甲醛溶液中, 10 min后,在胃大弯处剪一小口收集胃液。然后沿胃大弯将胃剪开，用自来水轻轻冲洗胃黏膜面，将胃平铺于白纸上，观察溃疡发生情况。 2.2.3 幽门结扎型溃疡评价 pH值的测定:把取出的胃体沿胃大弯剪一小口,将胃液倾倒于刻度离心管中,用精密pH试纸测胃液的pH值,记录。 胃液量的测定:将上述胃液以3000r/min的速度离心10min后,用10ml注射器抽取离心管中的上清液,记录胃液总量,将胃液注入试管中。 胃酸的测定：将清晰胃液各取1ml分别置于小烧杯中，加入酚红指示剂2滴，用滴定管用0.01mol/LNaOH滴定直至溶液变红不退为止，即为胃酸的总酸度（mmol/L）。 胃蛋白酶的测定：采用麦特氏毛细玻管测定法。将内径1~2mm粗细均匀的毛细玻管裁成10cm长，洗净烤干待用。用鸡蛋一个，取其蛋清充分打匀后用滤布过滤，将备用毛细玻管利用虹吸作用，灌满蛋清（注意管内无气泡）。然后放在85℃热水中使蛋白凝固，贮冰箱中备用。试验时取胃液1ml放入50ml的三角烧瓶中，加0.05mol/L盐酸溶液15ml摇匀，放进蛋白管二根。塞好瓶口，在37℃恒温孵育24h，取出蛋白管，用尺测量蛋白管两端透明部分的长度(mm),以四端之值求其平均值。胃蛋白酶活性单位=平均值2×16；胃蛋白酶排出量（活性单位/h）=胃蛋白酶活性单位×每小时胃液量。 2.2.4 注意事项 （1）动物要严格禁食72h,以使胃内完全排空，否则食物残渣会影响胃分泌。 （2）手术幽门结扎时，须小心避开血管，否则因胃肠血液循环受阻而影响胃分泌。勿用器械钳夹胃壁，因器械对胃的刺激处，易形成溃疡，干扰试验。
（3）实验过程中动物需单笼饲养。
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