通便功能评价方法(征求意见稿)及修订说明
功能性便秘的新认识——罗马Ⅳ标准更新点解读
功能性便秘的新认识——罗马Ⅳ标准更新点解读摘要：功能性胃肠病的罗马Ⅳ标准于2016年5月发布。
基于脑-肠轴、肠道微生态、药物基因组学以及社会心理学的发展，罗马Ⅳ标准对功能性便秘（FC）的定义、诊断标准、临床评估、病因及病理生理机制、治疗等方面作出如下不同程度的修改：（1）定义：FC和便秘型肠易激综合征不再认为是两个疾病，两者以病理生理特征为联系存在于一个症状谱内，而这些特征则体现于每位患者临床表现不同。
（2）诊断标准：罗马Ⅳ增加了Bristol粪便性状量表1~2型和每周自发排粪（SBM）两个指标，分别细化了粪便性状标准和排粪频率的评价。
（3）临床评估：规范了FC的临床评估步骤，旨在排除器质性疾病，了解合并的解剖结构改变，判断分型指导治疗，减少不必要的检查以提高诊断效率。
（4）病因及病理生理机制：在罗马Ⅲ基础上，罗马Ⅳ增加了大量篇幅阐述FC的病因及病理生理机制，包括危险因素及遗传学、结肠推进力不足和排粪障碍等。
（5）治疗：提出了促分泌剂、胆汁酸转运抑制剂等新药物的循证医学证据，对新老药物的安全性作了评价。
相比罗马Ⅲ标准，罗马Ⅳ对FC的诊断更加严谨、高效，治疗方案更加规范、合理。
功能性便秘（functional constipation，FC）是常见的功能性胃肠病（functional gastrointestinal disorder，FGID）。
近年来，随着脑-肠轴、肠道微生态、药物基因组学以及社会心理学的深入研究，对FGID的认识已进入崭新时代。
在此基础上，罗马委员会于2016年5月颁布了最新的FGID罗马Ⅳ标准（本文简称罗马Ⅳ）。
本文就其中FC的定义、诊断和治疗等更新点作一解读。
01定义FC属于功能性肠病的之一，罗马Ⅳ标准将FC定义为排粪困难、排粪次数减少或排粪不尽感，且不符合肠易激综合征（irritable bowel syndrome，IBS）的诊断标准，尽管患者可能存在腹痛和（或）腹胀症状，但不是主要症状。
老年人慢性便秘的评估与处理专家共识
老年人慢性便秘的评估与处理专家共识慢性便秘(chronicconstipation)是一种常见的老年综合征,表现为排便次数减少、粪便干结和(或)排便困难,目前主要根据罗马Ⅳ(RomeⅣ)标准和患者主诉(self－reported)进行诊断,即诊断前症状出现至少6个月,其中至少近3个月有症状,且至少四分之一的排便情况符合下列2项或2项以上:排便费力感、干球粪或硬粪、排便不尽感、肛门直肠梗阻感和(或)堵塞感、甚至需手法辅助排便,且每周排便少于3次。
老年人慢性便秘不仅常见,且患病率随增龄增加。
多项以社区为基础的大规模流行病学调查研究结果显示,慢性便秘的患病率在60 岁及以上老年人群中为15％~20％,84岁及以上可达20.0％~37.3％,在接受长期照护的老年人中甚至高达80％。
慢性便秘严重影响老年患者的生活质量及身心健康,耗费了大量的医疗经费,是一个重要的公共卫生问题,也是一个棘手的临床难题,因此,如何科学地评估、有效地处理老年人慢性便秘意义重大。
为此,我们组织国内部分老年病、消化病学专家制订了本共识,供广大临床医护人员参考。
一、老年人慢性便秘的类型老年人慢性便秘可由多种因素引起,包括结直肠和肛门功能性疾病、器质性疾病及药物,因此,也可将老年人慢性便秘分为原发性和继发性,原发性便秘是指结直肠和肛门功能性疾病引起的便秘,继发性便秘是指器质性疾病或药物引起的便秘。
1. 慢性功能性便秘(chronic functionaconstipation):慢性功能性便秘是老年人最常见的便秘类型,根据患者的肠道动力和直肠肛门功能改变的特点分为4个亚型:(1)慢传输型便秘:老年人结肠动力减退,易发生慢传输型便秘,其特点是结肠传输时间延长,主要表现为排便次数减少、粪便干硬、排便费力;(2)排便障碍型便秘:即功能性排便障碍,既往称为出口梗阻型便秘,主要表现为排便费力、排便不尽感、排便时肛门直肠堵塞感、排便费时、甚至需要手法辅助排便等,此型便秘在老年人中亦多见;(3)混合型便秘:患者同时存在结肠传输延缓和肛门直肠排便障碍的证据;(4)正常传输型便秘(normaltransitconstipation,NTC):多见于便秘型肠易激综合征(IBS),腹痛、腹部不适与便秘相关,排便后症状可缓解,老年人较少见。
促进泌乳功能评价方法(征求意见稿)及修订说明
促进泌乳功能评价方法（征求意见稿）附件4：促进泌乳功能评价方法（征求意见稿）保健食品评价试验项目、试验原则及结果判定Items, Principles and Result Assessment1 试验项目1.1 动物实验1.1.1 体重1.1.2母鼠体重1.1.3仔鼠体重1.1.4泌乳量1.2 人体试食试验1.2.1乳房胀度1.2.2泌乳量1.2.3乳汁质量：乳汁蛋白含量2 试验原则2.1 动物实验和人体试食试验所列的指标均为必测项目。
2.2 动物实验按超负荷哺乳模型试验方法。
2.4 在进行人体试食试验时，应对受试样品的食用安全性作进一步的观察。
3 结果判定3.1 动物实验：实验组在任一个时间点有两个剂量组仔鼠体重增加与对照组比较差异有统计学意义，或任两个时间点仔鼠体重增加与对照组比较差异有统计学意义；同时相应剂量组任一时间点3天累计泌乳量增加与对照组比较差异有统计学意义，可判定该受试样品促进泌乳功能动物实验结果阳性。
3.2 人体试食试验：试食后，试食组乳房胀度、泌乳量两项指标自身比试食前明显增强或增加，试食组两项指标与对照组比明显增强或增加，且乳汁蛋白质含量不低于对照组，可判定该受试样品具有促进泌乳功能的作用。
促进泌乳功能检验方法Method for the Assessment of FacilitatingMilk Secretion Function1动物实验1.1试验原理实验动物超负荷哺乳造成缺乳，影响仔鼠生长发育，通过观察仔鼠体重变化，评价母鼠泌乳情况。
1.2实验动物小鼠或大鼠，选用3日内产仔的第二胎母鼠及其仔鼠，调整每窝仔鼠数目相同，每组8～10窝实验动物。
1.3剂量分组实验选超负荷哺乳模型，实验设三个剂量组和一个阴性对照组，以推荐量的10倍（小鼠）或5倍（大鼠）为其中的一个剂量组，另设两个剂量组，必要时设阳性对照组。
1.4给样方式推荐使用饮水或加入饲料的方式给予受试样品。
实验结束期限为仔鼠断乳（出生21天）。
功能性便秘诊断标准、报警征象、检查项目、饮食干预、药物治疗及要点总结
功能性便秘诊断标准、报警征象、检查项目、饮食干预、药物治疗及要点总结婴幼儿VS 儿童青少年功能性便秘诊断标准功能性便秘是除外肠道或全身性器质性病因及药物性因素引起的便秘，1 岁以上便秘儿童 95% 属于功能性便秘。
长期便秘可能导致腹痛、肛裂、忍便不排和大便失禁，9—13% 患者还存在泌尿系统症状。
不仅影响患儿生活质量，对患儿家庭也会造成困扰。
根据婴幼儿和儿童青少年功能性便秘的诊断标准对比：年龄<4岁的儿童至少符合以下 2 项条件,持续时间达 1 个月：（1）每周排便≤2 次；（2）大量粪便潴留史；（3）有排便疼痛和排便费力史；（4）排粗大粪便史；（5）直肠内存在有大量粪便团块。
（6）能控制排便后每周至少出现 1 次大便失禁；（7）粗大粪便曾堵塞抽水马桶。
年龄＞4岁儿童青少年便秘每周至少发生1次, 时间持续1个月以上, 且符合以下2项或多项条件, 但肠易激综合征诊断依据不足：①4岁以上儿童每周在厕所排便≤2次；②每周至少出现 1 次大便失禁；③有粪潴留姿势或过度克制排便病史；④有排便疼痛或困难的病史；⑤直肠内存在大粪块；⑥粗大粪块曾堵塞抽水马桶。
便秘报警征象足月新生儿胎粪排出时间 > 48 小时、在生后第 1个月就开始出现便秘、有先天性巨结肠家族史、生长迟缓、胆汁性呕吐、严重的腹胀、甲状腺功能异常、肛门异位、无肛门、提睾反射缺如、下肢肌力肌张力、反射减弱、脊椎后背毛发、臀裂偏移、肛门瘢痕。
常规直肠指诊可发现婴儿的肛门狭窄。
如果肛管过紧、直肠壶腹空虚，直肠指诊后有气体和粪便喷射性释放，提示先天性无神经节性巨结肠。
检查项目1、没有报警症状，不建议对便秘患儿常规进行牛奶蛋白过敏试验、甲状腺功能减低症、乳糜泻和高钙血症的实验室筛查。
2、儿童存在椎管闭合不全证据或存在肛周/下肢神经功能障碍证据时行腰骶椎正侧片检查，不做为功能性便秘的常规评估。
如高度怀疑神经功能障碍考虑行 MRI 以评估是否存在脊髓栓系和脊髓肿瘤。
增强免疫力功能评价方法及修订说明
附件1:增强免疫力功能评价方法(征求意见稿)保健食品评价试验项目、试验原则及结果判定Items, Principles and Result Assessment1 试验项目1、1 动物实验1、1、1 体重1、1、2脏器/体重比值测定:胸腺/体重比值,脾脏/体重比值1、1、3细胞免疫功能测定:小鼠脾淋巴细胞转化实验,迟发型变态反应实验1、1、4体液免疫功能测定:抗体生成细胞检测,血清溶血素测定1、1、5单核—巨噬细胞功能测定:小鼠碳廓清实验,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬荧光微球实验1、1、6 NK细胞活性测定2 试验原则2、1 所列的指标均为必做项目2、2分为正常动物实验方案与免疫功能低下模型动物实验两种方案, 可任选其一进行实验、2、3采用免疫功能低下动物模型实验方案时需做外周血白细胞总数测定3 结果判定3、1采用正常动物实验,受试样品具有增强免疫力作用。
在细胞免疫功能、体液免疫功能、单核－巨噬细胞功能及NK细胞活性四个方面测定中,任两个方面试验结果为阳性,可以判定该受试样品具有增强免疫力作用。
其中细胞免疫功能测定项目中两个实验的结果均为阳性,判定细胞免疫功能试验结果阳性。
体液免疫功能测定项目中两个实验的结果均为阳性,判定体液免疫功能试验结果阳性。
单核—巨噬细胞功能测定项目中两个实验的结果均为阳性,判定单核—巨噬细胞功能试验结果阳性。
NK细胞活性测定实验的一个以上剂量结果阳性,判定NK细胞活性结果阳性。
正常动物实验需进行四个方面的测定。
3、2 采用免疫功能低下动物实验,受试样品对免疫功能低下者具有增强免疫力作用。
在免疫功能低下模型成立条件下,血液白细胞总数、细胞免疫功能、体液免疫功能、单核－巨噬细胞功能及NK细胞活性五个方面测定中,任两个方面试验结果为阳性,判定该受试样品对免疫功能低下者具有增强免疫力作用。
其中细胞免疫功能测定项目中两个实验的结果均为阳性,或任一个实验的两个剂量组结果阳性,可判定细胞免疫功能试验结果阳性。
祛黄褐斑功能评价方法(征求意见稿)及修订说明
祛黄褐斑功能评价方法附件8：祛黄褐斑功能评价方法（征求意见稿）保健食品评价试验项目、试验原则及结果判定Items, Principles and Result Assessment1 人体试食试验项目1.1 黄褐斑面积1.2 黄褐斑颜色2 试验原则2.1 所列指标均为必做项目。
2.2 试验前后应针对固定皮肤范围内的黄褐斑面积及颜色进行分析。
2.3 在进行人体试食试验时，应对受试样品的食用安全性作进一步的观察。
3 结果判定试食组黄褐斑面积和颜色积分均明显减少（面积减少≥10%，颜色积分减少≥18），自身前后比较及与对照组比较，差异均有显著性，且不产生新的黄褐斑，可判定该受试样品具有祛黄褐斑的功能。
祛黄褐斑功能检验方法Method for the Assessment of EliminantingSkin Chlorasma Function1 受试者纳入标准经体检符合下列条件的自愿受试者。
1.1 面部淡褐色至深褐色，界限清楚的斑片，通常对称性分布，无炎性表现及鳞屑。
1.2 无明显自觉症状。
1.3 主要发生在青春期后，女性多发。
1.4 病情有一定的季节性，夏重冬轻。
1.5 无明显内分泌疾病，并排除其它疾病引起的色素沉着。
2 受试者排除标准2.1 年龄在18岁以下或65岁以上者，妊娠或哺乳期妇女，过敏体质及对本保健品过敏者。
2.2 合并有心血管、脑血管、肝、肾和造血系统等严重疾病及内分泌疾病，精神病患者。
2.3 嗜酒者或吸烟者。
2.4 未按规定用受试样品，无法判定功效或资料不全影响疗效或安全性判断者。
3 试验设计及分组要求采用组间对照和自身对照两种设计。
按受试者的黄褐斑情况随机分为试食组和对照组，尽可能考虑影响结果的主要因素如户外活动情况、性别、年龄等，进行均衡性检验，以保证组间的可比性。
每组受试者不少于50例。
4 受试样品的剂量和使用方法试食组按推荐服用方法、服用量服用受试产品，对照组可不进行任何处理，也可服用安慰剂（或具有祛斑作用的对照品）。
增强免疫力功能评价方法(征求意见稿)及修订说明
附件1:增强免疫力功能评价方法（征求意见稿）保健食品评价试验项目.试验原则及结果判定Items, Principles and Result Assessment1试验项目1.1动物实验1丄1体重1.1.2脏器/体重比值测定：胸腺/体重比值，脾脏/体重比值1.1.3细胞免疫功能测定：小鼠脾淋巴细胞转化实验，迟发型变态反应实验1.1.4体液免疫功能测定：抗体生成细胞检测，血清溶血素测定1.1.5单核一巨噬细胞功能测定：小鼠碳廓清实验，小鼠腹腔巨噬细胞乔噬荧光微球实验1.1.6 NK细胞活性测定2试验原则2.1所列的指标均为必做项目2.2分为正常动物实验方案和免疫功能低下模型动物实验两种方案，可任选其—进行实验.2.3釆用免疫功能低下动物模型实验方案时需做外周血白细胞总数测定3结果判定3.1釆用正常动物实验，受试样品具有增强免疫力作用。
在细胞免疫功能、体液免疫功能、单核一巨噬细胞功能及NK细胞活性四个方面测定中，任两个方面试验结果为阳性，可以判定该受试样品具有增强免疫力作用。
其中细胞免疫功能测定项U中两个实验的结果均为阳性，判定细胞免疫功能试验结果阳性。
体液免疫功能测定项□中两个实验的结果均为阳性，判定体液免疫功能试验结果阳性。
单核一巨噬细胞功能测定项U中两个实验的结果均为阳性, 判定单核一巨噬细胞功能试验结果阳性。
NK细胞活性测定实验的一个以上剂量结果阳性，判定NK细胞活性结果阳性。
正常动物实验需进行四个方面的测定。
3.2釆用免疫功能低下动物实验，受试样品对免疫功能低下者具有增强免疫力作用。
在免疫功能低下模型成立条件下，血液白细胞总数、细胞免疫功能、体液免疫功能、单核一巨噬细胞功能及NK细胞活性五个方面测定中，任两个方面试验结果为阳性，判定该受试样品对免疫功能低下者具有增强免疫力作用。
其中细胞免疫功能测定项U中两个实验的结果均为阳性，或任一个实验的两个剂量组结果阳性，可判定细胞免疫功能试验结果阳性。
世界胃肠组织全球便秘指南全正式版
伴随症状
便秘患者常伴有腹胀、腹痛、会阴 部不适等。
便秘的分类
分类总结
便秘可以分为原发性便秘和继 发性便秘两大类。
原发性便秘
无明确病因导致的便秘，如功能 性便秘、先天性巨结肠等。
继发性便秘
由于其他疾病或药物等明确病因导 致的便秘，如糖尿病、甲状腺功能 减退、使用抗抑郁药等。
不同类型便秘的病因与特点
世界胃肠组织全球便秘指 南全正式版
xx年xx月xx日
目 录
• 指南介绍 • 便秘定义与分类 • 便秘的危害与评估 • 治疗与预防 • 指南的解读与临床应用 • 展望未来
01
指南介绍
指南的目的和背景
1
全球便秘问题日益严重，对患者生活质量和社 会造成巨大负担。
2
世界胃肠组织旨在制定全球范围内可采纳的便 秘指南，提供最佳的医学建议。
指南在临床中的应用
01
便秘诊断
根据指南，医生应首先详细询问患者的病史，并进行全面的体格检查
。根据患者的症状和体征，判断是否有器质性病变或其他潜在疾病。
02 03
便秘治疗
根据指南，治疗便秘应采取综合方法。在饮食和生活习惯调整的基础 上，针对不同类型的便秘采取相应的药物治疗，如渗透性泻药、刺激 性泻药、促进胃肠动力药物等。
先天性巨结肠
功能性便秘
一种罕见的肠道发育畸形，患者通常在出生 后即出现胎粪排出延迟、腹胀、腹泻和便秘 等症状。
最常见的便秘类型，与患者的生活习惯、饮 食结构、精神状态等因素有关。
糖尿病性便秘
甲状腺功能减退性便秘
糖尿病患者因自主神经病变、肠蠕动减慢而 导致便秘。
甲状腺功能减退导致肠壁肌肉张力减弱，肠 蠕动减慢，大便通过肠道时间延长而引起便 秘。
增加骨密度功能评价方法(征求意见稿)及修订说明
附件6：增加骨密度功能评价方法（征求意见稿）保健食品评价试验项目、试验原则及结果判定Items, Principles and Result Assessment1试验项目：动物试验：分为方案一（补钙为主的受试物）和方案二（骨代谢有关的其它功效成份，如以内分泌调节等作用为主的不含钙或不以补钙为主的受试物）两种。
方案二仅适用于每日钙摄入量在100mg以下的受试物，其它受试物均采用方案一。
1.1 体重1.2 骨干重1.3 骨钙含量1.4 骨密度1.5 骨组织病理形态2 试验原则：2.3 根据受试样品作用原理的不同，方案一和方案二任选其一进行动物试验。
2.2 所列指标均为必做项目。
2.3 样品使用未批准用于食品的含钙化合物，必须进行钙吸收代谢试验；样品使用属营养强化剂范围内的钙源及来自普通食品的钙源（如可食动物的骨、奶等），可以不进行钙吸收代谢试验。
3 结果判定3.1 方案一：a) 生长发育指标（体重、身长、股骨干重）中至少一项显著高于低钙对照组；b) 股骨骨钙含量或骨密度显著高于低钙对照组，且病理学上（骨组织学结构或钙沉积）两方面结果中的任一方面优于低钙对照组；c) 进行钙吸收试验时，钙吸收率显著高于低钙对照组，且高剂量组不低于相应钙含量的碳酸钙对照组。
符合以上三项要求，可判定受试物具有“有助于增加骨密度功能”的作用。
3.2 方案二：受试物试验组的股骨骨钙含量或骨密度显著高于模型对照组，且骨组织形态学指标较去势模型对照组有显著性改善，方可判定受试物具有“有助于增加骨密度功能”的作用。
增加骨密度功能检验方法Method for the Assessment of IncreasingBone Density Function有助于增加骨密度功能作用的检验方法根据受试样品作用原理的不同，分为方案一（补钙为主的受试物）和方案二（骨代谢有关的其它功效成份，如以内分泌调节等作用为主的不含钙或不以补钙为主的受试物）两种。
祛痤疮功能评价方法(征求意见稿)及修订说明
*附件7：祛痤疮功能评价方法（征求意见稿）保健食品评价试验项目、试验原则及结果判定Items, Principles and Result Assessment1 试验项目动物实验·1.1.1表皮厚度1.1.2毛囊腔面积人体试食试验1.2.1 痤疮数目1.2.2 皮损分级1.2.3 病变积分2 试验原则动物实验和人体试食试验所列指标均为必做项目。
…应对临床症状、体征进行观察。
在进行人体试食试验时，应对受试样品的食用安全性作进一步的观察。
3 结果判定动物实验：受试样品至少两个剂量组与模型对照组比较，表皮厚度与毛囊腔面积均显著减少，可判定该受试样品动物实验结果为阳性。
人体试食试验：试食组大多数受试者无新发痤疮且原痤疮皮损程度不加重（有效率≥80%），同时痤疮总数明显减少（≥20%并具有统计学差异）或病变总积分明显减少（≥20%并具有统计学差异），可判定该受试样品具有祛痤疮的功能。
祛痤疮功能检验方法Method for the Assessment of Eliminanting Acne Function`1 动物实验实验原理实验动物经煤焦油涂抹，堵塞毛孔，可引起炎性病变，出现类似人体的痤疮样病损。
比较给予实验动物受试样品后，皮损程度（数目、面积、损伤类型）的变化，可判定该受试样品是否具有祛痤疮的作用。
实验动物推荐使用单一性别健康成年雄性兔（新西兰兔或日本大耳兔），体重2.5kg±0.2kg。
每组6-8只。
剂量分组及受试样品给予时间实验设三个剂量组、一个空白对照组和一个模型对照组，三个剂量组中应包括一个人体推荐量的5倍。
受试样品给予时间30天，必要时可延长至45天。
（实验步骤本实验采用煤焦油致皮损动物模型和造模成功后给予受试物的方法。
空白对照组不做任何处理。
实验组在左耳内侧耳管开口处×范围内，使用50%的煤焦油液（液体石蜡稀释）涂抹，每日一次。
右耳作为自身对照。
给药2周后，如涂抹处出现皮肤干燥和角化过度、粗糙和增厚，粉刺样皮损，毛囊口隆起、扩张及黑色角栓等，说明模型成功。
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1 通便功能评价方法 附件10： 通便功能评价方法（征求意见稿） 保健食品评价试验项目、试验原则及结果判定 Items, Principles and Result Assessment 1 试验项目 1.1 动物实验 1.1.1 体重 1.1.2 小肠运动实验 1.1.3 排便时间 1.1.4 粪便重量 1.1.5 粪便粒数 1.1.6 粪便性状 1.2 人体试食试验 1.2.1 症状体征 1.2.2 粪便性状 1.2.3 排便次数 1.2.4 排便状况
2 试验原则 2.1 动物实验和人体试食试验所列指标均为必做项目。 2.2 实验中复方地芬诺酯或洛哌丁胺的造模剂量应通过预实验确定。 2.3 除对便秘模型动物各项必测指标进行观察外，还应对正常动物进行观察，不得引起动物明显腹泻。 2.4 排便实验中模型成立的条件为排首粒黑便时间、5或6小时内排粪便重量和粪便粒数与阴性对照组差异均有显著性。 2
2.5排便次数的观察时间试验前后应保持一致。 2.6 在进行人体试食试验时，应对受试样品的食用安全性作进一步的观察。
3 结果判定 3.1 动物实验：5或6小时内排粪便重量和粪便粒数任一项结果阳性，同时小肠运动实验和排便时间任一项结果阳性，可判定该受试样品通便功能动物实验结果阳性。 3.2 人体试食试验：排便次数明显增加，同时粪便性状和排便状况任一项结果明显改善，可判定该受试样品具有通便功能的作用。 3
通便功能检验方法 Method for the Assessment of Facitating Feces Excretion Function 1 动物实验 1.1小肠运动实验 1.1.1原理
经口灌胃给予造模药物复方地芬诺酯或洛哌丁胺，建立小鼠小肠蠕动抑制模型，计算一定时间内小肠的墨汁推进率，来判断模型小鼠胃肠蠕动功能。 1.1.2仪器和材料 1.1.2.1仪器和试剂 手术剪、眼科镊、直尺、注射器、天平、活性碳粉、阿拉伯树胶、复方地芬诺酯或洛哌丁胺。 1.2.2.2试剂配制 1.1.2.2.1墨汁的配制：精确称取阿拉伯树胶100g，加水800ml，煮沸至溶液透明，称取活性碳粉100g加至上述溶液中煮沸三次，待溶液凉后定容到1000ml，于冰箱中4℃保存，用前摇匀。 1.1.2.2.2复方地芬诺酯或洛哌丁胺混悬液的配制：复方地芬诺酯剂量为5-6mg/kgBW,洛哌丁胺剂量为5-6mg/kgBW。依据复方地芬诺酯或洛哌丁胺的实用剂量取用，用研钵研碎呈粉末后按实验所需浓度配制，注意要待溶质完全溶解、充分摇匀后使用。 1.1.3实验方法 1.1.3.1实验动物 选用成年健康雄性小鼠，体重在18-22g，每组10-15只。 1.1.3.2剂量分组及受试样品给予时间 实验设三个剂量组，一个阴性对照组，一个模型对照组。以人体推荐量的10倍为其中一个剂量组，另设二个剂量组，必要时设阳性对照组。阴性对照组和模型对照组同样途径给溶剂。受试样品连续给予时间7天，必要时可延长至15天。 4
1.1.3.3实验步骤 1.1.3.3.1模型的建立 给受试样品7天后，各组小鼠禁食不禁水 20小时。 模型对照组和三个剂量组灌胃给予复方地芬诺酯5-6mg/kgBW,或洛哌丁胺5-6mg/kgBW，阴性对照组给蒸馏水。 1.1.3.3.2指标测定的方法 给复方地芬诺酯或洛哌丁胺0.5小时后，剂量组灌胃给予含相应浓度受试样品的墨汁（含10%活性碳粉、10%阿拉伯树胶），阴性和模型对照组给墨汁灌胃。 25分钟后立即脱颈椎处死动物，打开肠腔分离肠系膜，剪取上端自幽门、下端至回盲部的肠管，置于托盘上，轻轻将小肠拉成直线，测量肠管长度为“小肠总长度”，从幽门至墨汁前沿为“墨汁推进长度”。按下式计算墨汁推进率： 墨汁推进率（%）=墨汁推进长度（cm）/小肠总长度（cm）×100%。 1.1.4数据处理及结果判定 墨汁推进率需进行数据转换，X=Sin-1√p(p为墨汁推进率，需用小数表示)。
进行方差分析时，需按方差齐性的程序进行方差齐性检验，方差齐，计算F值，F值＜F0.05，结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F0.05，P≤0.05，用多个实验组和一个对照组均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。 在模型成立的前提下，受试样品剂量组小鼠的墨汁推进率显著高于模型对照组的墨汁推进率时，可判定该项实验为阳性。 1.2排便时间、粪便粒数和粪便重量的测定 1.2.1原理
经口灌胃给予造模药物复方地芬诺酯或洛哌丁胺，建立小鼠便秘模型，测定小鼠首粒排黑便排便时间、5或6小时内排便粒数和排便重量（干重，下同），来反映模型小鼠的排便情况。 1.2.2仪器和材料 1.2.2.1仪器和试剂 眼科镊、注射器、分析天平、活性碳粉、阿拉伯树胶、复方地芬诺酯或洛 5
哌丁胺。 1.2.2.2试剂配制 1.2.2.2.1墨汁的配制：同小肠推进实验。 1.2.2.2.2复方地芬诺酯或洛哌丁胺混悬液的配制：复方地芬诺酯剂量为10-12mg/kgBW,洛哌丁胺剂量为10-12mg/kgBW。依据复方地芬诺酯或洛哌丁胺的实用剂量取用，用研钵研碎呈粉末后按实验所需浓度配制，注意要待溶质完全溶解、充分摇匀后使用。 1.2.3实验方法 1.2.3.1实验动物 选用成年健康雄性小鼠，体重在18-22g，每组10-15只。 1.2.3.2剂量分组及受试样品给予时间 实验设三个剂量组，一个阴性对照组和一个模型对照组。以人体推荐量的10倍为其中一个剂量组，另设二个剂量组，必要时设阳性对照组。空白对照组和模型对照组同样途径给溶剂。受试样品连续给予时间7天，必要时可延长至15天。 1.2.3.3实验步骤 1.2.3.3.1模型的建立 给受试样品7天后，各组小鼠禁食不禁水 20小时。 阴性对照组给蒸馏水，模型对照组和三个剂量组灌胃给予复方地芬诺酯10-12mg/kgBW,或洛哌丁胺10-12mg/kgBW。 1.2.3.3.2指标测定的方法 给复方地芬诺酯或洛哌丁胺0.5小时后，阴性对照组和模型对照组小鼠用墨汁灌胃，剂量组灌胃给予含相应浓度受试样品的墨汁，动物均单笼饲养，正常饮水进食。 从灌墨汁开始，记录每只动物首粒排黑便时间、5或6小时内排便粒数及重量。 1.2.4数据处理及结果判定 资料可用方差分析，需按方差分析的程序先进行方差齐性检验，方差齐， 计算F值，F值＜F0.05，结论：各组均数间差异无显著性；F值≥F0.05，P≤0.05，用多个实验组和一个对照组均数的两两比较方法进行统计；对非正态或方差不 6
齐的数据进行适当的变量转换，待满足正态或方差齐要求后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到正态或方差齐的目的，改用秩和检验进行统计。 在小肠便秘模型成立的前提下，受试样品组小鼠的首粒排黑便时间明显短于模型对照组，可判定该项指标为阳性。 5或6小时内排便粒数明显高于模型对照组，可判定该项指标为阳性。 5或6小时内排便重量明显高于模型对照组，可判定该项指标为阳性。 1.3. 结果判定： 5或6小时内排黑便重量和排便粒数任一项结果阳性，同时小肠推进实验和排便时间任一项结果阳性，可判定受试物具有润肠通便作用。 1.4. 注意事项 1.4.1实验中应将复方地芬诺酯或洛哌丁胺悬液不断振荡，以保持其浓度均一。 1.4.2 墨汁配制时待阿拉伯胶加热透明后再加入碳末。 1.4.3 应除去小鼠排出第一粒黑便前的粪便。 1.4.4实验中复方地芬诺酯或洛哌丁胺的造模剂量应通过预实验确定。 1.4.5排便实验中模型成立的条件为排首粒黑便时间、5或6小时内排粪便重量和 粪便粒数与阴性对照组差异均有显著性。
2 人体试食试验 2.1.纳入受试者标准： 2.1.1排便次数减少和粪便硬度增加者。 2.1.2 大便一周少于3次者。 2.1.3 无器质性便秘者。 2.1.4 习惯性便秘者。
2.2.受试者排除标准 2.2.1 不能经口进食者或不能按规定服用受试样品者。 2.2.2 主诉不清者。 2.2.3 体质虚弱无法进行试验者。 2.2.4 30天内进行过外科手术引起便秘症状发生者。 7
2.2.5 因严重器质病变引起的近期排便困难者（结肠癌，严重的肠炎、肠梗阻，炎症性肠病等） 2.2.6 便秘困难并拌有疼痛者。 2.2.7 30天内发生过急性胃肠道疾病者。 2.2.8 孕期及经期妇女。 2.2.9 合并有心血管、肝、肾和造血系统等严重全身疾病患者。 2.2.10 有其它伴随疾病正在治疗者。 2.2.11 短期内服用与受试功能有关的物品，影响到对结果的判断者。
2.3 试验设计及分组要求 采用自身和组间对照两种试验设计。按受试者的便秘症状（排便次数、粪便性状、症状持续时间等）随机分为试食组和对照组，尽可能考虑到影响结果的主要因素如年龄、性别、日常饮食、便秘原因等，进行均衡性检验，以保证组间的可比性。每组受试者不少于50例。
2.4 受试样品的剂量和使用方法 试食组按推荐服用方法、服用量服用受试产品，对照组可服用安慰剂或采用空白对照，也可服用具有同样作用的阳性物。按双盲法进行试食试验。受试样品给予时间7天，必要时可以延长至15天。试验期间不改变原来的饮食习惯，正常饮食。
2.5 观察指标： 2.5.1 安全性指标： 2.5.1.1 一般状况 包括精神、睡眠、饮食、大小便、血压等 2.5.1.2 血、尿、便常规检查 2.5.1.3 肝、肾功能检查 2.5.1.4 胸透、心电图、腹部B超（在试验开始前检查一次）。 2.5.2 功效性指标： 每日对受试者进行询问并记录，同时记录受试者服用受试样品前6天及试验结束前3天的情况。 2.5.2.1 每日排便次数