生物技术综合大实验
生物技术实习报告 11篇
生物技术实习报告 11篇生物技术实习报告 1[实习目的]1、通过深入各实习岗位进行综合性的实习，将所学的基础理论、基础知识和基本技能运用于实践之中，将所学的知识转化为能力，培养实际工作能力、科研能力。
2、掌握现代生物技术手段与运用能力，训练实际操作技能。
3、了解校外科研机构的实际工作情况，尤其是与所学专业相关的学科如生物学、化学、医学、药学等学科的研究情况和前沿状况。
4、从实际出发，检验自己在态度、知识、能力、技能等四项指标方面所达到的程度。
[实习时间]—学年上学期（8月25日—9月30日）[实习地点]中国科学院__植物研究所[实习内容]1、植物组织培养技术---------组培室2、标本的采集、制作、鉴定、保藏技术---------标本馆内3、植物分类、引种、栽培、鉴定、管理---------植物园内的苗圃基地4、植物化学方面的研究-------------植物化学实验室5、专业讲座、科普训练、学术报告----------专家指导[实习人员]______化学与生物技术学院05级生物技术专业[实习方式]1、以小组为单位轮转到各个点实习，根据指导教师的安排及要求完成各项实习任务。
2、积极主动，充分发挥个人能动性和团队合作精神。
[正文]实习，是一种期待，是对自己成长的期待，是对自己角色开始转换的期待，更是对自己梦想的期待;实习，也有一份惶恐，有对自己缺乏信心的不安，有对自己无法适应新环境的担忧，更有怕自己会无所适从的焦虑。
带着一份希望和一份茫然来到了来到隶属中国科学院的昆明植物研究所，开始我的实习生涯。
为期一个月的时间我们先后在植物所的苗圃、标本管、植化室、组培室进行了实习。
这次实习让我见识了许多，也收获了许多，不仅仅感受在这的那份自豪与优越，而是感染他们的那份敬业、求实与无私精神以及实习给我带来的种种思考。
一、苗圃苗圃主要负责花卉的培育，植物园的花都是在苗圃先培养到一定程度后，再拿到园内供游客观赏，如秋海棠、千日红、石榴花、一串红等等，都是在苗圃先通过各种方法培养。
生物技术专业综合实验独立设课的实践与思考
第7期岳慧英，等:生物技术专业综合实验独立设课的实践与思考185・生物技术专业综合实验独立设课的实践与思考岳慧英，吴娜，蔡东晖，胡丽丽*（山西中医药大学基础医学院，山西晋中030619）摘要:生物学以理论研究为基础，是一门实践性很强的学科，提升学生的综合实验技能对创新型人才的培养有重要的促进作用。
对生物技术专业独立设置《生物技术综合实验》实验课，实验内容包含基因工程、细胞工程、发酵工程和蛋白质工程四个模块，实验项目设置以综合性实验为主，考核方式中加入了科技论文写作，学生参与科学研究的全过程，提高了综合素质。
通过《生物技术综合实验》独立设置实验教学实践，取得了良好的教学效果，增强了本科生的自主学习、主动思考、分析问题、解决问题的能力，为培养生物科学创新型人才奠定基础。
关键词:生物技术专业；生物技术综合实验；独立设置实验课中图分类号：G642.0文献标识码：B文章编号：'008-02'X（202'）07-0'85-02随着当今生物技术产业的蓬勃发展，对生物专业人才的专业素质要求不断提升。
生命科学领域的发展要求生物技术本科毕业生不仅具有较扎实的生物技术基础理论知识，更强调具备较强的实验技能、动手能力以及独立分析问题和解决问题等综合科研能力。
当今时代技术发展要求大学素质教育与创新创业相结合的背景下，对生物技术专业实验课程的教学模式和实验内容进行改革大有必要，以适应形势发展的要求。
山西中医药大学（以下简称“我校”）基础医学院生物技术专业为四年制本科,为学生开设了遗传学、细胞生物学、生物化学、分子生物学、发育生物学、微生物学等专业课程，且上述理论课中均设计有紧扣理论的实验课，目的是用理论知识指导实验实践，并在实验中加深对理论知识的理解。
在第6学期，为学生开设了生物技术概论,该课程是一门实践性、综合性很强的学科，包括基因工程、细胞工程、蛋白质工程、发酵工程和酶工程中重要理论和技术的概述，重在突岀五大工程在农业、食品、工业、医学、药学等方面的综合应用，所以该课程理论课后安排有一定学时的实验课。
卵磷脂的提取
生命科学与技术系生化技术综合实验报告设计（论文）题目鸡蛋中卵磷脂的提取与鉴定姓名学号所属系专业年级电子邮箱指导教师电子邮箱年月摘要卵磷脂是甘油、胆碱、磷酸、饱和及不饱和脂肪酸组成的一种磷脂类物质，它是构成细胞膜、核膜、质体膜等生物膜的本成份、研究发现卵磷脂具延缓衰老、促进神经传导、提高大脑活动、增强记忆力，促进脂肪代谢、防止出现脂肪肝、降低血清胆固醇等方面的作用。
被英国科学家喻为“健脑的黄金、养心的极品”。
在西方国家卵磷脂被誉为与蛋白质、维生素并列的“第三营养素”。
卵磷脂在动植物体内分布广泛．其中以蛋黄中含量最为丰富。
卵磷脂按照其纯度的高低，一般分为PC50、PC 60 、PC 70、PC80、PC 90、PC95等产品形式。
最高可以提纯到98%，因为其纯度越高，氧化性能越强，故提纯到98%的卵磷脂需要做氢化处理。
然后保存。
未经过氢化处理的卵磷脂，一般要求在充氮的密封容器中。
纯净的卵磷脂常温下为一种无色无味的白色固体，由于制取或精制方法、储存条件不同而呈现淡黄色至棕色。
利用95％乙醇在蛋黄溶液里进行浸提取，再加入乙醚过滤，加入一定量的丙酮在旋转干燥仪器中把乙醇蒸发出来，取溶胶性的物质，加入丙酮冲洗除杂，冲洗多次取得粗品，让后再加入无水乙醇溶解，加入金属沉淀剂进行精提取，取出少量精品，在碱性条件下溶解，分别用钼酸铵，斐林试剂，滤纸，氢氧化钠，对卵磷脂进行定性检测关键词：蛋黄卵磷脂；提取；纯化；鉴定。
卵磷脂的提取与鉴定卵磷脂(lecithin) 是一种含磷的类脂类生理活性物质, 同时又是一种天然表面活性剂 [1～2], 化学名称为磷脂酰胆碱，它是构成细胞膜、核膜、质体膜等生物膜的基本成份，空间结构的卵磷脂分子是由一个极性的“头部”(甘油和胆碱磷酸脂部分) 和两条非极性的“尾巴”(两个依附于甘油主框架上的脂肪酸) 组成, 它是典型的两性电解质 [3]主要集中在大脑、神经系统、免疫系统及心、肝、肾、生殖腺等重要器官内) ,是人体必需的胆碱和必需脂肪酸的重要来源 [4] 纯净的卵磷脂常温下为一种无色无味的白色固体，由于制取或精制方法、储存条件不同而呈现淡黄色至棕色。
生物工程综合性实验名词解释
1.fermentation(发酵)：利用生物细胞（含动植物、微生物)，在合适条件下经特定的代谢途径转变成所需产物菌体的过程。
2.fermentation engineering(发酵工程)：是发酵原理与工程学的结合，是研究由生物细胞(包括动植物、微生物)参与的工艺过程的原理和科学，是研究利用生物材料生产有用物质，服务于人类的一门综合性科学技术。
3.bioengineering(生物工程)：以生物科学和生物技术为基础，结合化学工程，机械工程，控制工程，环境工程等工程科学，研究或发展利用生物体系或其中的一部分生产有益于社会的产品或达到一定社会目标的过程科学。
广义上说是指运用生物科学知识及工程学的原理，开发利用生物材料为人类社会提供产品和服务的工程技术。
狭义上是指以基因工程技术为核心的现代生物技术的总称4.biocatalyst(生物催化剂)：指传统发酵所利用的微生物外，还包括现在生物技术所利用的动植物细胞或细胞中的酶5.isolation of strain(菌种分离)：根据生产要求和菌种特征性采用各种不同的筛选方法从众多的杂菌种分离出所需的性能良好的纯种6.Strain breeding (菌种选育)：从分离筛选获得的有价值菌种中经过人工选育出各种突变体以大幅提高了菌种产生有价值的代谢产物的水平，改进产品质量，去除不需要的代谢产物或产生新代谢产物7.Nature breeding(自然选育)：不经人工处理，利用微生物的自然突变进行菌种选育的过程8.Mutation breeding (诱变育种)：利用各种被称为诱变剂的物理因素和化学因素试剂处理微生物细胞提高基因突变率，再通过适当的筛选方法获得所需的高产优质植株9.Cross breeding(杂交育种)：通过杂交方法，将不同植株的遗传物质进行交换、重组，使不同菌株的优良性状集中在重组体中，克服长期诱变引起的生活力下降等缺陷10.Culture preservation/maintenance of culture(菌种保取)：根据菌种的生理生化特点，人为创造条件使孢子或菌体的生长代谢活动尽量降低，以减少其变异11.Growth factor(生长因子)：具有刺激细胞生长活性的因子。
生物技术综合实验教学改革的初步探索
生物技术综合实验 是为生物技术专业学生开设 的重要的实验课 步实验的原理作 用优化实验方案 ．并研究 自己实验遇到 的问题 ．设计
程 ，是一 门具有较强实践性 的专业实验课程。通过本实验 ．学生不但可 提 出更好 的实验方案 每组学 生将改动后的新的实验方 案 ．经指 导老
Байду номын сангаас
侧重于基 因工程和蛋白质工程 的实验 内容 为了更好的提高学生学 习
平 时注重采用 以操作技能的考核方式对学生进行评 测 ．最后以学
兴趣和培养学生的科研 能力 、自主创新能力和实验操作技 能。改革措 生 白行设计实验课 的教学方法 进行试探性改革 实验考核不把学生的
施 如 下 ：
最 后实验结果作为实验成功与否的唯一标准 ，而是更注意学生实验思
理 与生物工程学 院生物 技术 系的生物技术综合 实验教学改革 的一些
本实验 根据 实验方案要求学生有 充足的 、可 自行支配 的实验 时
基 本 措 施
间 ．因此将实验课程设置在大四上学期开学阶段。每一个实验开始后 ，
１ 实 验 教 学 内容 体 系改 革
根据实验 内容和要求 ．每组学生可提前预约实验室场地和仪器 ．这样 ． 学生 既可在实验课 内完成实验任务 ．也可在实验课外 利用 实验室开放
［１］刘福霞，刘乃森．关于遗传学实验教学改革 的探讨『Ｊ１ｌ淮 阴师范学院教育科学 论 坛 ．２０１０．３：１００—１０１
２．１ 教学手段 的改革
Ｓｃｉｅｎｃｅ ＆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｖｉｓｉｏｎ
科 技 视 界
科技·探索·争鸣
生物技术综合实验教学改革的初步探索
植物生物技术实验指导
目录实验一培养基母液的配制 (1)实验二培养基的配制 (4)实验三愈伤组织诱导及培养 (6)实验四愈伤组织继代培养 (7)实验五植物生长调节剂对愈伤组织形态发生的作用 (8)实验六植物人工种子的制备 (9)实验七茎尖培养 (11)实验八细胞液体悬浮培养 (12)实验九低温和饥饿处理诱导悬浮培养细胞同步化 (14)实验十花药培养 (16)实验十一成熟胚的培养 (17)实验十二叶肉原生质体的分离与培养 (18)实验十三悬浮培养细胞原生质体的分离与培养 (20)实验十四PEG诱导原生质体融合 (22)实验十五三亲本杂交法转化农杆菌 (24)实验十六冻融法转化农杆菌 (26)实验十七基因枪法转化愈伤组织 (27)实验十八农杆菌介导法转化水稻愈伤组织 (30)实验十九转化愈伤的除菌、筛选及再生 (32)实验二十植物总DNA的提取 (35)实验二十一植物总RNA的提取 (37)实验二十二转化植株的PCR检测 (38)实验二十三组织化学染色法检测Gus活性 (41)实验二十四转化植株的Southern检测 (43)实验二十五转化植株的Northern检测 (47)实验一培养基母液的配制一、实验特点实验类型：验证实验类别：专业计划学时：3 每组人数：2二、实验目的要求掌握配制培养基母液的原理；学习培养基母液的配制方法和母液的使用方法。
三、实验原理在植物组织培养所用的培养基中，一般都含有无机盐、有机物和植物生长调节剂等十几种成分。
如果每次配制培养基时都按着成分表逐个地称量，不但费时，而且有些成分的用量极小，配制时容易产生误差。
因此，为了提高工作效率和减少误差，一般将常用的基本培养基中的各种成分配成一定倍数的贮存液，这种溶液叫培养基母液。
用时，根据培养基配方、母液浓度和要配制的培养基的体积计算出所需溶液的体积，用量筒、移液管或微量移液器量取即可。
母液的配制有2种方法：单配法和混配法。
前者便于配制不同种类的培养基，后者便于大量配制同种培养基。
生物技术实践教学计划(3篇)
第1篇一、前言随着生物技术的飞速发展，其在医学、农业、环境保护等领域的应用日益广泛。
为了培养具有创新精神和实践能力的生物技术专业人才，我们制定了一套系统的生物技术实践教学计划。
本计划旨在通过理论与实践相结合的方式，使学生深入了解生物技术的原理、方法和应用，提高学生的动手能力和解决问题的能力。
二、实践教学目标1. 知识目标：使学生掌握生物技术的基本理论、基本知识和基本技能，了解生物技术的最新发展动态。
2. 能力目标：培养学生实验操作技能、数据分析和处理能力、实验设计和创新能力。
3. 素质目标：培养学生的团队协作精神、严谨的科学态度和良好的职业道德。
三、实践教学内容1. 基础实验课程- 遗传学实验：基因分离、基因重组、基因表达等。
- 细胞生物学实验：细胞培养、细胞分裂、细胞信号传导等。
- 生物化学实验：蛋白质提取、酶活性测定、核酸提取等。
2. 专业实验课程- 分子生物学实验：PCR技术、基因克隆、蛋白质纯化等。
- 生物工程实验：发酵工程、酶工程、细胞工程等。
- 生物信息学实验：生物序列分析、基因注释、生物信息数据库检索等。
3. 综合实验课程- 生物技术综合实验：以某一实际问题为背景，综合运用所学知识进行实验设计和实施。
- 创新实验：鼓励学生自主选题，开展创新性实验研究。
4. 社会实践- 参观生物技术企业、科研机构，了解生物技术的实际应用。
- 参与科研项目，提高学生的科研能力和创新能力。
四、实践教学安排1. 实验课程- 基础实验课程：每学期安排4-6周，每周2-3次实验课。
- 专业实验课程：每学期安排4-6周，每周2-3次实验课。
- 综合实验课程：每学期安排2-4周，每两周1次实验课。
2. 社会实践- 每学期安排1-2次企业参观、科研机构参观活动。
- 每学期安排1-2次科研项目参与机会。
五、实践教学考核1. 实验操作考核：考察学生实验操作的规范性和熟练程度。
2. 实验报告考核：考察学生实验数据的分析、处理和总结能力。
生物技术制药综合性实验的设计与实施
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生物技术综合大实验work Information Technology Company.2020YEAR2013-2014学年生命科学综合大实验GFP分离与纯化1.文献综述绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）是由238个氨基酸组成，分子量是26.9kDa，最初是从维多利亚多管发光水母(Aequorea victoria )中分离出来的，在蓝光照射下会发出绿色荧光。
来源于水母的野生型GFP在395nm和475nm分别有主要和次要的激发峰，它的发射峰在509nm，处于可见光谱的绿色区域，来源于海肾的GFP只在498nm有单个激发峰。
GFP是典型的β桶形结构，包含β折叠α和螺旋，将荧光基团包含在其中。
严密的桶形结构保护着荧光基团，防止它被周围环境淬灭，内部面向桶形的侧链诱Ser65-Tyr66-Gly67三肽环化，导致荧光基团形成。
北京时间10月8日下午5点45分，2008年诺贝尔化学奖揭晓，三位美国科学家，美国Woods Hole海洋生物学实验室的Osamu Shimomura(下村修)、哥伦比亚大学的Martin Chalfie和加州大学圣地亚哥分校的Roger Y.Tsien（钱永健）因发现并发展了绿色荧光蛋白（GFP）而获得该奖项。
下修村首次从Aequorea victoria中分离出GFP。
他发现该蛋白在紫外线下会发出明亮的绿光。
Martin Chalfie证明了GFP作为多种生物学现象的发光遗传标记的价值。
在最初的一项实验中，他用GFP使秀丽隐杆线虫的6个单独细胞有了颜色。
钱永健的主要成就在于让人们理解了GFP发出荧光的机制。
同时，他拓展出绿色之外的可用于标记的其他颜色，从而使科学家能够对各种蛋白质和细胞施以不同的色彩。
这一切，令在同一时间跟踪多个不同的生物学过程成为了现实。
2.实验器材2.1实验材料：含GFP融合质粒，Top10菌株2.2实验试剂：质粒提取：溶液Ⅰ：50mM葡萄糖/10mM EDTA /25mM Tris-HCl，pH=8.0；溶液Ⅱ：0.2M NaOH/1% SDS；溶液Ⅲ：3M醋酸钾/2M醋酸；无水乙醇，75%乙醇，TE Buffer；转化：0.1M预冷 CaCl2，LB培养基，氨苄青霉素，阿拉伯糖；GFP提取：液氮，Lysis Buffer，饱和(NH4)2SO4溶液，溶菌酶；疏水作用层析柱材：苯基琼脂糖凝胶CL-4B；离子交换柱层析柱材：DEAE+纤维素，Start Buffer(A液20mM Tris-HCl，pH7.0（透析液）)Elution buffer(B液20mM Tris-HCl，1M NaCl，pH7.0) SDS-PAGE电泳：PEG10000，Loading Buffer，溴酚蓝，丙烯酰胺，Tris，SDS，过硫酸铵，TEMED，Gly，SDS，甘油，β-巯基乙醇，溴酚蓝，甲醇，考马斯亮蓝，乙酸等2.3实验仪器高速冷冻离心机,移液枪，超声波破碎仪，梯度混合器，恒流泵,层析柱,色谱仪,自动记录仪,SDS-PAGE电泳装置。
3.实验方法3.1质粒提取1.取1.5mL菌液，12000rpm离心1min，弃上清液；2.加100μL溶液Ⅰ，充分悬浮；3.加200μL溶液Ⅱ，温和混匀，室温5min；4.加150μL溶液Ⅲ，混匀，冰浴5min；5.12000rpm离心8min，将上清加入一新的1.5ml EP管中；6.加800μL无水乙醇至上清液中，混匀，-20℃放置10min，12000rpm离心8min，弃上清；7.70%乙醇洗DNA一次，离心弃上清；8.在超净台中吹干DNA（一般吹5-10min即可）；9.加40μL TE Buffer溶解DNA，4℃备用。
3.2感受态细胞的制备以及转化1.取1.5mL Top10菌液，在4℃ 4000rpm离心10min，弃上清；2.加200μL预冷的0.1M CaCl2悬浮沉淀（无菌操作），冰浴15min 后4℃ 4000rpm离心10min，弃上清；3.加200μL预冷的0.1M CaCl2悬浮沉淀（无菌操作），4℃备用；4.将1μL质粒和感受态细胞混合，冰浴30min；5.42℃热激90s；6.立即放在冰上3-5min；7.加入800μL LB液体培养基，37℃ 150rpm培养60min（使Top10恢复正常生长）；8.取200μL菌液涂布在LB（Amp 100ng/ml，阿拉伯糖4mg/ml）培养基上，37℃培养过夜。
3.3扩大培养1.取含GFP质粒的Top10平板并挑取单克隆（在紫外灯照射下有绿色荧光的菌落）；2.将挑取的单菌落接种于试管中（含4mL的LB液体培养基，100ng/ml的Amp和4mg/ml的阿拉伯糖）37℃，200rpm振荡培养至对数生长期（约3-4h）；3.将上述摇好的菌液，按1:100转接至250mL LB液中（Amp工作浓度 100ng/ml，阿拉伯糖工作浓度2mg/ml），37℃，200rpm培养过夜。
3.4细胞破碎1.将培养好的细菌3000g离心10min，紫外灯观察弃上清，沉淀用液氮冻融；2.用30mL Lysis Buffer(50mM Tris-HCl pH8.0，1mM EDTA)悬浮沉淀；3.向悬浮液中加15mg溶菌酶，混匀后室温溶解10min；4.400W功率下，超声处理10min；5.将破碎液9000g离心15min，紫外灯观察，留上清备用；6.选取合适的浓度破碎(NH4)2SO4沉淀GFP；一般(NH4)2SO4饱和度为30%时，杂蛋白的沉淀量最大，饱和度达到70%时GFP沉淀量达最大附：(NH4)2SO4浓度与含量表，体积为10ml；7.向上清中加5.28g(NH4)2SO4，充分溶解，室温放置20min，9000rpm离心15min，转移上清至另一试管中，再加入6.88g(NH4)2SO4，充分混匀，室温放置至少20min，9000rpm离心15min，弃上清，留沉淀备用；3.5疏水作用层析1.将沉淀的GFP，用10mL 2M (NH4)2SO4/Lysis Buffer，pH8.0溶解，9000rpm，离心10min，留上清；（2号样品）2.用3倍体积平衡Buffer（2M(NH4)2SO4，pH8.0）平衡柱子；3.将步骤1中的上清液上柱，用3倍柱体积的Washing Buffer （1.3M(NH4)2SO4，pH8.0）洗柱子；4.用恒流泵泵TE Buffer（Elution Buffer：10mM Tris, 1mM EDTA，pH8.0）洗柱，紫外灯检查，GFP快流出时，准备收集；5.将收集液透析过夜。
（3号样品）3.6离子交换层析1.将透析后所得的透析液9000rpm离心10min，弃去沉淀（4）；2.用3倍体积的Start Buffer(A液)平衡柱子；3.将步骤1中所得的上清液上柱，再用3倍柱体积的Start Buffer洗柱子；4.梯度洗脱GFP，梯度液：Start Buffer(A液)、Elution Buffer(B 液)，紫外灯观察，GFP快流出来时，准备收集5.将收集液透析过夜(透析液为A 液)。
3.7凝胶过滤纯化GFP1.将透析袋置入含PEG 10000的培养皿中，浓缩至体积约2mL ；2.用3倍柱体积的20mM Tris-HCl ，pH 7.0平衡柱子；3.将步骤1中所得的GFP 上柱，用20mM Tris-HCl ，pH 7.0洗柱子，紫外灯检测，GFP 快流出时收集备用。
3.8 SDS —PAGE将收集的各样品加入等体积的2×SDS-PAGE Loading Buffer ，煮沸裂解5min ，冰浴2min ，12,000rpm 离心10min ，取上清-20℃保存备用。
1.按照电泳装置的使用说明，装好洁净干燥的玻璃板。
2.分离胶的制备 按下列成分配制分离胶：各成分加入后迅速旋涡混匀，用微量移液器将其小心地注入准备好的玻璃板间隙中，并为浓缩胶留出足够空间。
轻轻在顶层加入一薄层20%乙醇封顶，以防止空气中的氧对凝胶聚合的抑制作用。
凝胶聚合完成后，倒掉覆盖的乙醇，用滤纸吸干凝胶顶端的乙醇。
3.浓缩胶的制备ddH2O30%丙烯酰胺混合液 1.5M Tris(pH8.8) 10%SDS10%过硫酸铵 TEMED8.2 mL 6.68mL 5.0mL 0.1 mL 0.1 mL 0.04 mL按下列成分配制2mL 5%的积层胶：ddH2O30%丙烯酰胺混合液1.0M Tris(pH6.8) 10%SDS10%过硫酸铵TEMED 7.35mL 1.3mL 1.25mL 0.1mL 0.1mL 0.1mL各成分加入后迅速旋涡混匀，用微量移液器将其灌注到分离胶上，灌满后小心插入加样梳，尽可能避免产生气泡。
4.待浓缩胶凝固后，小心拔出梳子。
5.将凝胶固定于电泳装置上，加入足量的1×Tris-甘氨酸电泳缓冲液，在加样孔中分别加入20μL各样品。
6.样品在浓缩胶中电泳时，使用80V电压，待溴酚蓝带进入分离胶后，将电压升至120V，继续电泳直至溴酚蓝带到达分离胶的底部且开始泳出胶底面，关闭电源。
7.卸下凝胶，将其浸泡在至少5倍体积的考马斯亮蓝R-250染色液（50%甲醇，0.05%考马斯亮蓝，10%乙酸，40%ddH2O）中，置水平摇床上室温染色45min，之后取出凝胶并回收染色液，将凝胶浸泡于考马斯亮蓝脱色液（与染色液同，只是无考马斯亮蓝）中，在水平摇床上脱色1h，其间更换脱色液3-4次，直至凝胶脱色到条带清晰为止，观察结果并拍照。
（注：由于浓缩胶制备过程中凝固太快，所以最后未使用浓缩胶而只用分离胶进行SDS-PAGE。
）思考题1.实验纯化效果如何？如果要得到较纯的GFP，你会采用哪些方法进一步纯化？答：实验纯化效果请见实验结果分析。
2.SDS-PAGE的样品缓冲液中有哪些成分它们有什么作用为什么要将样品和缓冲液混合后煮沸答：SDS-PAGE的样品缓冲液的主要成分有SDS，甘油，溴酚蓝和β-巯基乙醇，其中SDS的作用主要是使蛋白质变形，断裂蛋白质分子间和分子内的氢键，使蛋白质分子去折叠，破坏蛋白质的二级和三级结构；甘油是增加密度，使蛋白质能很好的沉淀在下面；溴酚蓝作为指示前沿，防止电泳时间过长；β-巯基乙醇作为保护剂，防止空气中的氧对蛋白质的氧化作用，同时还能断裂蛋白质分子中半胱氨酸残基中的二硫键。
3.常用的交联葡聚糖有G-25、G-50、G-70其中的25、50、75指的是什么？答：交联葡聚糖G-25、G-50、G-70中的25、50、75指的是1g交联葡聚糖干胶膨胀时所吸收水克数的10倍，如G-25中的25指1g这种交联葡聚糖干胶膨胀时要吸水2.5g。