绿色木霉发酵产木聚糖酶的培养条件研究
一株里氏木霉产纤维素酶发酵条件的研究
酶活力(U/ml)
140
Cx
C1Cx
120
C1
100
80
60
40
20
0 60
80 100 120 140 160 培养时间(h)
图 1 培养时间对产酶的影响 Effects of fermentation time on cellulase production
从图 1 可以看出，Cx 酶活力高于 C1 酶活力，培养 初期酶活力随着培养时间的延长而增强，Cx 酶在 96h 时 达到最大值，C1 酶在 120h 达到最大值，发酵后期它们 的活力逐渐降低。 2.2 麸皮含量对产酶的影响
376 2008, Vol. 29, No. 11
食品科学
※生物工程
1.2.1 酶底物反应液 1% 羧甲基纤维素钠(CMC-Na)醋酸缓冲液(pH4.8)，
0.5% 微晶纤维素(MCC)- 醋酸缓冲液(pH4.8)，1% 水杨素 醋酸缓冲溶液(pH4.8)。
1.2.2 DNS 试剂配制 溶液 A，溶解 6.9g 结晶酚于 15.2ml 10% NaOH 中，
通过测定发现[13]，每升麸皮培养基含还原糖 4.67g、 总氮 2.17g、蛋白质 0.26g、灰分 0.76g, 表明麸皮培养基 中含有微生物生长所需要的碳源、氮源、多种矿物质 等营养物质，碳氮比协调。表 1 为摇瓶中不同的麸皮 添加量对里氏木霉产酶的影响。
※生物工程
食品科学
2008, Vol. 29, No.11 377
菌株在不同的氮源下，其生存能力不同，因此产 酶能力也不同，选择适合的氮源对菌株的产酶能力有重 要的影响。通过实验改变产酶培养基氮源的种类，选 择一些有机氮源和无机氮源研究其对产酶的影响，结果 见表 2 。
绿色木霉WL 0422高产纤维素酶的研究
维素酶菌株 ，由江南大学医学系分子生物学研究室筛选
获得和保藏 。
１ ． ２原料 和 试 剂
和 Ｂ 葡萄糖苷酶（ Ｃ３ ．．１等 ３种酶组成…。它在饲 一 Ｅ ． １ ） ２ ２
料、 纺织 、 食品 、ห้องสมุดไป่ตู้酿造和造纸等工业中有广泛 的应用潜力 ，
饲料和纺织用酶是 当今国内外研究和开发的热点 。含纤
１３培 养基 及 培 养 方法 ．
理或抛光 ， 能改善织物和服饰的手感 、 外观和舒适性ｂ。 ］
国产纤维素酶的发酵酶活力低 ， 生产成本高 ， 限制 了
酶的广泛使用。作者从丝状真菌中筛选获得一株 高产酸 性纤维素酶的绿色木霉 ＷＬ０ ２ ４ ２菌株。为挖掘该菌株产
１． ．１斜面培 养基 ３
反 应 ３ ｍｉ。 以 每 ｈ水 解 滤纸 产 生 １Ｉ ｌ 原 糖 （ 葡 ０ ｎ ｍｏ 还 ￣ 以
萄糖计 ） 所需酶量定义为 １ Ｆ Ａ单位 （ ） 个 Ｐ Ｉ 。 Ｕ
２结果 与 讨 论
２１ 形瓶 固态发 酵 工 艺 条 件试 验 ．锥
２１１培 养 温度 和 时间 ．．
Ｃ Ｃ Ｉ ｇ十 曲 ） １８ ６ １９ ４ １ ８ ０ ２０ ５ １８ ５ １５ ５ Ｍ Ａ（Ｕ／ ３ ０ ９ ６ ８ ７
（ 以葡萄糖计） 所需酶量定义为 １ Ｃ Ａ单位（ 。 个 ＭＣ Ｉ Ｕ）
１４３滤 纸 酶 活 力 （ Ｐ ） 定 ．． ＦＡ 测
０１ Ｌ适 当稀释酶液 ， ．ｍ 加至含一张 １Ｘ６ｅ ｍ新华滤 纸片的 ２ ＬＮ ２Ｐ ． ｍ ａＨ Ｏ一柠檬酸缓冲液（Ｈ ４ ） ５ ℃ ４ ｐ ． 中，０ ６
１３３麸 曲种 子培 养 基 －＿
２ ０ Ｌ三角瓶 装 ＆ ｇ ５ｍ ０ 基料 （ 麸皮 ： 草粉 ＝ ．ｇ１ ） 稻 ６ ： ４ 五ｇ，
培养条件对绿色木霉发酵生产纤维素酶的影响
Ｊ ｅ ｇ ｈ ｎ Ｌ Ｎ ａ １Ｇ ｎ ｓ ｅ ｇ， Ｉ Ｘｕ ｎ，Ｃ Ｏ Ａ
，Ｚ ＨＵ ｈ ｎ Ｃ ａ
（ｃｏｌ ｆ ｉｌ ｙａｄＥ ｖｏ ｍ ｎ ｎ ． ｉｎｓ ｎｖｒｔ ｏ ｃ ｎｅａｄＴｃ ｎｌ ， ｈ ｎａｇＪａｇｕ２２０ ，Ｃ ｉａ Ｓｈｏ ｏｏ ｎ ｎｉ ｎ ｅｔＥ ｇ ，Ｊ ｇｕＵ ｉ ｓｙ ｆＳｉ ｃ ｎ ｅｈｏｏ Ｚ ｅｊ ｎ ｉ ｓ １０３ ｈｎ ） ｏＢ ｇ ｒ ａ ｅ ｉ ｅ ｙ ｇ ｉ ｎ
中 图分类 号 ： Ｑ ２ Ｔ９５ 文献标识码 ： Ａ
Ｅｆｅ ｔ ｆ Ｃｕ ｔｖａ ｉ ｎ ｉｉ ｎ ｎ Ｃｅ ｌ ａ ｅ Ｐｒ ｄ ｔｏ ｆ ｃ ｓ ｏ ｌｉ ｔｏｎ Ｃｏ ｄ ｔｏ ｏ ｌ ｕｃ ｓ ｏ ｕｃ ｉ ｎ ｂ ｉ ｈ ｄ ｒ ｒｄｅ ｙ Ｔｒｃ ｏ ｅ ｍａ Ｖｉｉ
Ｋｅ ｒ ｙ ｗｏ ｄｓ：ｃ ｌ ｒ ｏ ｄ ｔ ｎ； Ｔ ｉｈ ｄ ｒ ｉｉ ｅ ｅｌ ｌｓ ｕｔ ｅ ｃ ｎ ｉ ｏ ｕ ｉ ｒｃ ｏ ｅ ｍａ ｖｒｄ ；ｃ ｌｕ ａ ｅ
０ 引 言
纤维素是植物细胞壁的主要成 分 ， 占植 物体 干重 的 ３．％ ～５． ％ ， ３４ ００ 是地 球上 最丰 富 的可 再生 资源 。 纤维素酶 可将这类物质分解转化成 葡 萄 糖 ， 进一 步发酵生成酒精等能源 物质 ， 福人类 。但 由于纤维 素酶 造 活低而成本高等原 因， 以仅有一小 部 分 纤 维素被纤 维素酶分解利用 ， 所 而绝 大部分纤 维 素被废弃 … 。因此 为 了更好地开发利用纤维素资源 ， 多 国 内外 学者 都致力 于纤 维素酶 的研究 。而且 ， 许 纤维 素酶 在轻工 业 ， 如造纸 、 品、 食 饲料 、 环保等领域 的应 用 正 日益 广泛 ， 巨大 。然而迄今 为止 ， 潜力 纤维素 酶活 和产 率均较 低 ，
绿色木霉H7产纤维素酶条件的研究
王 小涵 周 晶 王仁君 沙未 来 （ 曲阜 师 范大 学生命科 学 学院 ２ ３ ６ ） ７ １ ５
摘 要 ：采 用 摇 床 液 体 发 酵 试 验 ． 对 绿
பைடு நூலகம்
用 价 值 闭。纤 维 素 酶 的 生 产 有 固态 发
酵 和 液 体 发 酵 两 种 方 法 ： 固态 发 酵 劳 动 强 度 大 ，生 产 率 低 ，易 污 染 ， 而 液 体 发 酵 具 有 不 易 污 染 ，培 养 条 件 易 控 制 ，生 产 效 率 高 等 特 点 ， 因 而 适 合 大 规 模 工 业 化 生 产 。 但 目前 发 酵 液 酶
作 为 工 业 酶 解 发 酵 的 原 料 ，纤 维 素 酶 活 力 不 高 而 导 致 酶 用 量 过 大 是 限 制 其
优 良菌 种 性 能 、获 得 高 产 酶 量 ， 对 畜
牧 业 有 很 大 意 义 。 本 文 以 玉 米 秸 秆 为
主 要 原 料 ，研 究 了 产 纤 维 素 酶 菌 株 一
为 粗酶 液 。 １ － 酶 的 活性 测 定 －３ ３
的糖 化 有 酸 解 和 酶 解 法 等 。 酶 解 法 由 于 能 耗 低 ，反 应 条 件 温 和 以及 不 使 用 有 毒 和 腐 蚀 性 的 化 学 物 质 而 倍 受 青 睐 １ 然 而 至 今 未 能 应 用 木 质 纤 维 素 ３ １ 。
ｌ ０ ｍ ，ｐ ５ — ． ，碱 处 理 过 的 玉 米 Ｏ０ ｌ Ｈ ． ６ ５ ０ 秸 秆粉 １ ｇ ０。
活 性 偏 低 ，导 致 液 体 发 酵 生 产 的 纤 维
素 酶 产 品 价 格 偏 高 ． 限 制 了 其 在 工 业 中 的 应 用 。 因 此 ，选 育 一 株 适 合 液 体
木聚糖酶合成菌株的筛选及其产酶条件的研究
糖酶 的影响分析 ， 出产木聚糖酶的最优条件 ， 得 即在加入 ５ ａｄｌ液体培养基 ， ￣条件下， 物含 量为 ０ ５ ， ０ ｎｅ Ｍ ｓ ２Ｃ ８ 底 ． ｇ ４ ０
接种量为 ２ ｒｌ培养 ３ ｈ Ｏｎ。 ６。
关键词 ： 黑曲霉 ； 木聚糖酶 ； 变； 诱 液体发 酵
中图分类号 ： Ｓ ５ ． Ｔ ２ ５３ 文献标识码： Ａ 文章编号 ：６ １ ６ ９ （ ０ ７ ０ － ０ ４ ０ Ｏ １７ — ８２ ２ ０ ）４ ０ ２ — Ｏ４
维普资讯
第 ４ 卷（ ３ 总第 １８ ） ３期
陈凤莲 等： 糖酶合成菌株的筛选及其产酶条 木聚 件的 研究
２ ５
组 ：１水解 酶， （） 主要 包 括 内切 Ｂ １４ 木 聚糖 酶 ， 一 ，一 它
能将木聚糖主链在随机地 降解短链 的低聚木糖 ； 外
梭 状 芽孢 杆 菌陶 细 菌和 链 霉 菌【 等 明 的培 养 液 中 纯化
得到木聚糖酶。木聚糖酶是降解木聚糖半纤维素的
一
组 酶的总称 ， 它不是单一作用 可将 它们分为两
收稿 日期 ：０ ７ ０ — ５ ２ ０ － ５ ２ 作者简介 ： 陈凤莲 ， ，９ ５ 女 １ ７ 出生 ， 哈尔滨商业大学食品科学与工程学院教师， 博士研究生 ， 。 讲师 研究方向 ： 谷物副产品精 深加 工及 保健与功能 性食品方面的研究
Ｓ ｌｃ ｉ ｎ ｏ ｔ ａ ｎ ｆ ｒ Ｘｙ ａ ａ ｅ Ｓ ｎ ｈ ｓｓａ ｄ Ｓ ｕ ｙ ｏ ｔ ｅｅ ｔｏ ｆＳ ｒ ｉ ｏ ｌ ｎ ｓ ｙ ｔ ｅ ｉ ｎ ｔ ｄ ｎ Ｉｓ Ｐｒ ｄ ｃｎ ｎ ｉｉ ｎ ｏ ｕ ｉ ｇ Ｃｏ ｄ ｔｏ ｓ
ＣＨＥ Ｆ ｎ — ｉ ｎ Ｆ Ｎ ｅ ｇ ｌ 。 ＡＮＧ Ｇ ｉ ｚ ｅ 。 ａ ｕ — ｈ ｎ ＸＵ ｈ － ｕ Ｓ ｉｙ
绿色木霉固态发酵纤维素酶生物量的测定及发酵培养基的初步优化
万方数据 万方数据 万方数据 万方数据 万方数据绿色木霉固态发酵纤维素酶生物量的测定及发酵培养基的初步优化作者：姜绪林， 孙瑶， 杨毅， 杜大庆， 张星元， JIANG Xu-Lin， SUN Yao， YANG Yi， DU Da-qing， ZHANG Xing-yuan作者单位：江南大学,工业生物技术教育部重点实验室,江苏,无锡,214036刊名：食品与生物技术学报英文刊名：JOURNAL OF FOOD SCIENCE AND BIOTECHNOLOGY年，卷(期)：2005,24(3)被引用次数：9次参考文献(8条)1.肖春玲;徐常新微生物纤维素酶的应用研究[期刊论文]-微生物学杂志 2002(02)2.Desgranges C;Georges M;Vergoignan C Biomass estimation in solid state fermentation 19913.吴克;杨宏本;张洁Trichoderma viride菌生物量测定及其纤维素酶合成特征[期刊论文]-食品与发酵工业2002(08)4.许旭萍;李惠珍;佘晨兴麦角固醇产生菌Torullopsis famata优化发酵条件的研究[期刊论文]-生物学杂志2002(02)5.张树政酶制剂工业 19846.韩峰;孙彩云;宋小焱拟康氏木霉UVⅢ纤维素酶合成的诱导与阻遏[期刊论文]-工业微生物 2003(01)7.王冬;曲音波;高培基丝状真菌纤维素酶合成机制的研究 1993(02)8.Manabu Suto Fusao Tomita Induciton and catabolite repression mechanisims of cellulase in fungi 2001(04)本文读者也读过(10条)1.余多慰.袁生绿色木霉纤维素酶分子侧链构象与侧链环境特征的研究[期刊论文]-分析测试学报2004,23(5)2.季更生.林弦.曹阳.朱婵pH值对绿色木霉合成纤维素酶的影响[期刊论文]-安徽农业科学2007,35(27)3.张磊.吴兴泉.陈士华.ZHANG Lei.WU Xing-quan.CHEN Shi-hua绿色木霉3.3744产纤维素酶固态发酵条件研究[期刊论文]-河南工业大学学报（自然科学版）2007,28(1)4.孙冬梅.张明.林志伟.SUN Dong-mei.ZHANG Ming.LIN Zhi-wei黄绿木霉菌(Trichoderma aureoviride)产纤维素酶研究[期刊论文]-黑龙江八一农垦大学学报2007,19(3)5.金加明.吴宝霞.Jin Jiaming.Wu Baoxia绿色木霉液体发酵产纤维素酶条件及部分酶性质的研究[期刊论文]-中国饲料2007(15)6.汪世华.杨燕凌.余文英.黄碧芳.沙莉.WANG Shi-hua.YANG Yan-ling.YU Wen-ying.HUANG Bi-fang.SHA Li黑曲霉LH2446纤维素酶的纯化及酶学性质的研究[期刊论文]-武汉工业学院学报2005,24(3)7.舒国伟.陈合.杨博.黄艳.SHU Guo-wei.Chen He.Yang Bo.Huang Yan绿色木霉HY-07产纤维素酶发酵工艺的优化[期刊论文]-酿酒科技2007(10)8.靖德兵.李培军.熊先哲.许华夏基于纤维素酶和果胶酶活力的康氏木霉固体发酵培养基配方研究[会议论文]-20049.段金柱.曹淡君纤维素酶粗酶制剂生产的一种新工艺——固态分离提取酶的研究[期刊论文]-饲料工业2000,21(1)10.莫俏兰.常桂英木耳菌糠中纤维素酶的提取与活性研究[期刊论文]-广西轻工业2009,25(3)引证文献(9条)1.祝英.王治业.孙智敏.周剑平.蒲训多菌发酵马铃薯渣生产蛋白质饲料的研究[期刊论文]-中国饲料 2009(9)2.郝俊斌.周玉杰.张建安.王欣昌.戴玲妹.刘德华纤维素酶固态发酵动力学的研究[期刊论文]-可再生能源2009(1)3.成娟丽.张福元霉菌固态发酵产酶的研究进展[期刊论文]-饲料博览 2006(8)4.黄雪莲.于新响应面优化绿色木霉菌培养基[期刊论文]-食品与生物技术学报 2011(5)5.张鹏荣.郭育涛.杨琴产黄青霉固体发酵提取麦角固醇及其生物量测定的研究[期刊论文]-安徽农学通报 2009(8)6.王靖.刘洁丽木质纤维素降解菌及其降解途径研究进展[期刊论文]-生物产业技术 2008(3)7.梅炼.张爱萍.徐晓立.谢君绿色木霉的选育及固态发酵产纤维素酶的研究[期刊论文]-可再生能源 2013(11)8.顾平.张倩茹.周启星.张颖.杨肖娥一株苯并[a]芘高效降解真菌的筛选与降解特性[期刊论文]-环境科学学报2010(2)9.陆合.张碧波.罗雪莲利用总状毛霉生产含γ-亚麻酸豆豉的初步研究[期刊论文]-食品工业科技 2011(4)本文链接：/Periodical_wxqgdxxb200503024.aspx。
细菌产木聚糖酶发酵条件的研究
细菌产木聚糖酶发酵条件的研究
白云玲;许正宏;孙微;陶文沂
【期刊名称】《微生物学通报》
【年(卷),期】2000(027)004
【摘要】研究了碳源、氮源以及其他因子对木聚糖酶高产菌
WLUN024(Pseudomonassp.)产酶的影响,结果表明在麸皮6g/L、
(NH4)2SO40.8g/L、K2HPO40.4g/L、接种量5%～10%的条件下,37℃培养36h,其木聚糖酶活力可达600IU/mL.同时研究了在较优条件下该菌的摇瓶产酶曲线.【总页数】3页(P278-280)
【作者】白云玲;许正宏;孙微;陶文沂
【作者单位】无锡轻工大学生物工程学院,无锡,214036;无锡轻工大学生物工程学院,无锡,214036;无锡轻工大学生物工程学院,无锡,214036;无锡轻工大学生物工程学院,无锡,214036
【正文语种】中文
【中图分类】Q939.97
【相关文献】
1.产高分子量木聚糖酶细菌的筛选及产酶条件优化 [J], 王中月;滕超;汤回花;李秀婷
2.大肠杆菌高密度发酵产木聚糖酶发酵条件优化 [J], 刘国锋
3.固态发酵啤酒糟产木聚糖酶的菌种筛选及其产酶条件研究 [J], 曾莹;熊志刚;李彦
4.一株产木聚糖酶菌株的筛选及发酵产酶条件优化 [J], 张庆芳;许晶;杨旭立;郭赛
赛
5.产碱性木聚糖酶细菌的筛选及产酶条件的优化 [J], 税欣;郑连爽
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绿色木霉固态发酵产纤维素酶活力的研究_王仪明
草地畜牧业绿色木霉固态发酵产纤维素酶 活力的研究 王仪明1,张宗舟1,2,蔺海明1,孙小弟3,雷艳芳1,王东明4(1.甘肃农业大学农学院,甘肃兰州730070;2.天水师范学院生命科学与化学学院,甘肃天水741001;3.天水师范学院工学院,甘肃天水741000;4.甘肃省科学院自动化研究所,甘肃兰州730000)摘要:以麦秆和麸皮为主要原料,通过正交试验和单因素试验优化绿色木霉T richderma v iride固态发酵产纤维素酶的最佳工艺条件,并研究绿色木霉对小麦秸秆纤维素降解的影响,为绿色木霉降解小麦秸秆纤维素提供最佳条件,进而提高小麦秸秆的利用率。
结果表明,不同条件下绿色木霉产纤维素酶活力存在显著差异(P<0.05),最佳培养基为:氮源为(N H4)2SO4,pH值5.5,含水量为200%,麦秆∶麸皮质量比为4∶1;最佳发酵条件为:培养时间为96h、温度35℃、初始pH值6.0、含氮量0.4%、接种量15%,培养方式为半密闭;发酵后小麦秸秆中中性洗涤纤维(N DF)、酸性洗涤纤维(AD F)、纤维素含量和半纤维素含量比发酵前分别下降5.22%、6.88%、4.73%和4.16%,木质素含量无明显变化。
关键词:绿色木霉;发酶条件;纤维素酶活;小麦秸秆;纤维素中图分类号:T Q925.9 文献标识码:A 文章编号:1001-0629(2009)05-0123-05 纤维素类物质是世界上最丰富的可再生资源[1]。
纤维素材料可转化为具有商业价值的乙醇、乙酸、单细胞蛋白等纤维素的产品[2-3]。
纤维素的生物转化近些年受到了极大的重视,大规模纤维素生物转化工艺的发展,将有效解决食品和动物饲料不足的问题[4-6]。
利用微生物所产生的纤维素酶将秸秆转化为营养价值较高的单细胞蛋白饲料倍受人们的青睐[7]。
纤维素酶作为一种高活性生物催化剂使其成为研究新型蛋白饲料开发与利用的重要内容[7-8]。
纤维素酶不是一个单种酶,而是参与纤维素降解的多组分酶的总称,一个完整的纤维素酶系,通常由作用方式不同而能相互协同催化水解纤维素的3类酶组成:内切葡聚糖酶(EG)、外切葡聚糖酶(EX)和β-葡萄糖苷酶(BG),在分解纤维素时,任何一种酶都不能单独裂解纤维素,只有3种酶共同存在并协同作用才能完成水解过程[9]。
绿色木霉液体发酵生产纤维素酶条件的优化
例治疗试验 ，治愈率达９ ８ ． ９ ％，研究 者 们一 致认 为 纤维 素 酶制 剂 具疗 效 高 、
别 （ 乞永立 ，２ ０ ０ ０ ） 。二是标 准上 的原
提高５ ％ ～１ ０ ％的 日增重和３ ％一７ ％的饲 料效 率 （ Ｔ Ｔ Ｔ ｅ ｅ ｒ ｉ ，１ ９ ９ ７ ） 。在 肉鸡 方 面 ，秦江 帆等也进行 了相 关研 究 。王 怀 凡等在 蛋鸡 日粮 中添 加０ ． １ ％纤 维素 酶 ，结果使产蛋率 提高１ ０ ． ８ ％，蛋重提 高１ ． ７ ％，料蛋 比下降１ ４ ． ６ ％。裴相元等
类 碳水化 合物 ，同时也是 地球 上数
量 最多 的再生 资源 。 目前 ， 自然 界 中
是技 术上 的原 因。 由于 纤维素 酶是
种 微 生物 制剂 ，它对 温 度 、湿 度 、
的纤维 素 只 有一 小部 分 得 到 了利 用 ， 绝 大多 数纤 维素不仅 被 白 白浪 费 ，并 且 还会 对环境 造成污 染 。利用纤 维素 酶将 纤 维素 转 化为 人类 急 需 的 能源 、 食 物和 化工原 料 ，对 于人类 社会 解决
２ ０ ０ ０ ） 。 目前 ，纤维素酶生产 中存 在的
于多年 的研究 ，陈侠 甫等认 为 ，纤维 素酶对 马急慢性 消化 不 良、便秘 、牛 前 胃迟 缓 、瘤 胃膨胀 、瘤 胃积食 等疾
病具 有明显疗效 。经过十个兽 医院３ ７ ９
维 素酶 的酶活进 行优化 ，以期对 纤维 素酶 的生产技术有一定 的帮助。
绿色木霉液体发酵生产纤维素酶条件的优化
鹤壁职业技术学院
摘
张
帆
要 ： 目的 ：研究表 明，纤维素酶对于纤维素的分解可应用于环保、畜牧 、食品加工等 多个领 域 ，对于改善Ａ ． ４ １ ＇ １ 的生活有 重大意义。
木聚糖酶测定的有关问题
饲料用木聚糖酶活力测定的研究文章来源：农业部饲料工业中心作者：陆文清等更新时间：2011-03-30饲料用木聚糖酶的分析测定是长期以来困扰木聚糖酶生产和应用的一个主要难题,特别是固态发酵生产的木聚糖酶,发酵成品中往往含有其它非淀粉多糖酶(纤维素酶、葡聚糖酶、果胶酶和甘露聚糖酶等)[1-3]。
文献报道的关于影响酶活测定的因素很多,测定的重复性较差 [4-5，7]，除了温度和pH值以外,还存在着其它很多不确定的因素。
本文将从底物的性质和浓度、酶样的稀释度、离子强度和反应时间等方面讨论对酶活测定的影响,提出比较可行的饲料用木聚糖酶的分析方法。
酶活定义为在37 ℃和设定pH值条件下，每分钟内从底物溶液中降解释放1 μmol/l还原糖所需要的酶量为一个酶活单位(U)。
测定木聚糖酶活力的方法主要有3种：粘度法、底物染色法和还原糖法。
粘度法是通过测定木聚糖酶对底物粘度的降解速度来计算酶活力，这种测定分析方法有较好的实用价值，但是测定过程比较繁琐，而且重复性较差，目前很少采用。
底物染色法是一种比较简便快速的测定方法,其基本原理是以木聚糖为基质,用胶联方式连接和包裹特定的染料，制成染料含量均衡,质量稳定的片剂。
这种片剂容易溶于水溶液中,与木聚糖酶反应后,长链的木聚糖被降解,结合的染料分子被释放到溶液中。
通过测定溶液中染料的浓度,就可以就算出酶活力。
这种测定方法经常被一些专业生产生物酶的大型企业采用。
但是它只能测定特定的木聚糖酶活力,不具有代表性。
还原糖法是通过测定还原糖的产量来计算酶活力。
这种分析方法也比较简便，而且重复性也比较好。
国内外关于木聚糖酶的研究报告多数采用这种方法。
这种方法的主要不足是不能很好地分析内切酶的活力，而内切酶的活力对于饲料酶的实际使用效果来说是很重要的。
如果希望通过测定木聚糖酶在某一标准状态下的活力来判断木聚糖酶质量的优劣或者预测其动物饲喂效果是远远不够的。
木聚糖酶的实际作用底物是不溶于水的高聚物，它们主要存在于植物种子的表皮层内，与葡聚糖、果胶、甘露聚糖、木质素和蛋白质等生物大分子结合在一起。
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（． Ｘ１７ｐｒｓｍＥ ， ｅｎｔｌ Ｈｖ ｕ ， ｅ ｒｐｒｏ ｆ ｅｓｌ ｄｌ ｕｄｗ ｉ １： ， ｅｅ ｅａ ｒ ａ １ ０ ｏｅ ／ ）ｔ ｉａｐ ａ ｅｓ ｔ ｏｏ ｉ ｏ ｉ ａ ｑｉ ａ ２ ｔ ｍｐｒｔ ｅｗｓ ３ ｓ ｈ ｉ ｉ ｌ ｉ６ ｈ ｐ ｔ ｎ ｔ ｏｄ ｎ ｉ ｈ ｓ ｈｔ ｕ
１ 材料 与方法
１１ 试 验材 料 ．
加蒸馏水定容至 １０ｍ ；Ｏ ｏ， ｒ 溶液的配 ０ Ｌ ． ｔ ｌ Ｌ Ｔｉ １ ｏ ｓ 制 ：称取 １． ４ ｓ ２ １ １ ｇ ，加蒸馏水定容至 １ ０ ｍ ； ０ Ｌ ０ Ｔｉ Ｈ １ 冲液 的配制 ：５ Ｌ ０１ ｏ／ ｒ 溶 ｒ— Ｃ 缓 ｓ ０ ． ｔ ｌ Ｌ Ｔｉ ｍ ｏ ｓ 液 ，加入 ４ ．ｍＬ ０１ｍ ｌ Ｌ Ｈ １ 液 ，加 蒸馏 水 ０３ ． ｏ／ Ｃ 溶
Ａｂ ｔ ａ ｔ Ｔ ｅｃ ｌ ｖ ｔ ｎｃ ｎ ｉｏ ｓｗ ｒ ｉｃ ｓｅ ． ｈ ｓ ｕｔｂｅｃ ｒ ｏ ｕｃ ｅｃ ｌ ｒ ｄａｓ ｏ ｌ ｅ ｓｒ ｃ ｈ ｕｔ ａｉ ｏ ｄｔ ｎ ｅｅｄｓｕ ｓｄ Ｔ ｅｍｏ ｔ ｉ ｌ ａｂ ｎｓ ｒｅｉ ｔ ｕｔ ｅｍｅ ｈ ｕｄ ｂ ｉ ｏ ｉ ｓ ａ ｏ ｎｈ ｕ ｉ
糖 ，疏松适度利于通气 ，表面积大 ，特别适合于好 液 中；Ｄ Ｓ Ｎ 试剂 ：将 Ｃ液与 Ａ液混合 ，加入 ５ 苯 ｇ 气性微生物生长。本文以玉米芯为原料 ，摸索 了绿 酚，溶解后用蒸馏水定容至 １ ０ Ｌ 用棕色瓶放 ０ ， ０ ｍ
糖 酶 的酶活 。
色木霉最适产酶条件 ，可大大提高绿色木霉产木聚 置 ７ ，用细纱布过滤 ，避光保存 。 ｄ １ ． ｒ — Ｃ 缓冲液的配制 ．２ ｉ Ｈ １ ２ Ｔ ｓ ０１ ｏ， 盐酸溶液的配制 ：量取 １ Ｌ ．ｔ ｌ Ｌ ｏ 浓盐酸 ， ｍ
食 品 工 程
Ｆ ＯＯＤ ＥＮＧ ＮＥ Ｉ ＥＲＩ ＮＧ
２ １ 年第 ４期 ０１
１ ２月出版
绿色木霉发酵产 木聚糖酶的培 养条件研 究
Ｅ ｅ ｔ ｆ ｕｔ ｒ ｏ ｄｔ ｎ ｎｘ ｌ ａ ｅ ａ ｔ ｉ ｒ ｄ ｃ ｄ ｆＯ ｔｉｈ ｄ ｒ ａ ｆ ｃ ｌ ｅ ｃ ｎ ｉｏ ｓ ｏ ｙａｎ ｓ ｃ ｉ ｔ ｐ ｏ ｕ ｅ ｒ ｍ ｒ ｏ ｅ ｍ ｏ ｃ ｕ ｉ ｖｙ ｃ
３ ℃ 。 ｈ ｍｅｗａ ６ｈ Ｉ ｅｅｃ ｎ ｉｏ ｓｃ ｕｄｔｅｅ ｚｍａ ｃａ ｔ ｉ ａ ｈｔ ５ ７５ ， ３ ｔｅｔ ｓ９ ．ｎｔ ｓ ｏ ｄｔ ｎ ｏ ｌ ｎｙ ｔ ｃｉ ｔ ｒ ｃ １ ３ ．２Ｕ ｍＬ ｉ ｈ ｉ ｈ ｉ ｖｙｅ ｏ ．
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摘
要
以玉 米芯 为主要 原料 ，探 索绿 色木 霉发 酵玉 米芯 产木 聚糖 酶 的培 养条件 ，进 一步提 高木 聚糖 酶 的
杜 密英
（ 桂林旅游高等专科学校 ， 桂林
苏
琦 ｚ 杜进 民 ３
０ ５０ ） ，河北科技大学， ６００ （ 石家庄 ０ ０ １ ） ５ ０ ８
５ １０ ） （ ４ ０ ６ 河北廊坊工商局 ， 廊坊
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（ ｕｌ ｓｔｔ ｏｔ ｒｍ， ｕｌ １０ ， ｈ ａ （ａ ｇ ｎ ｕｅｕｏｉｄ ｓｙ ｎ ｍｍ ｒｅＩ ｎｆ ｇ ０ ５０ ，ｈｎ ） Ｇ ｉｎｉ ｔｕ ｏ ｉ Ｇ ｉｎ５ ０ ６ Ｃ ｉ ） Ｌｎ ｆ ｇ ｒａ ｎ ｕｔ ｄ ｏ ｅｃ ，ａ ｇ ６ ０ ０ Ｃ ｉ ｉ ｎｉ ｅｆ ｕｓ ｉ ４ ｎ ａ ｂ ｆ ｒａ ｃ ． ａ ｎ ａ
１ ． Ｄ Ｓ 剂 的配制 ．１ Ｎ 试 ２
Ａ液 ：１２ 酒石酸钾钠完全溶于 ５０ Ｌ ８ ｇ ０ 蒸馏 ｍ 源从而有选择性地生产木聚糖酶在木霉属和曲霉属 水 中；Ｂ液 ：１ 氢氧化钠完全溶于 ２０ Ｌ蒸馏水 ６ ｇ ５ｍ 微 生 物 已经 获 得 了成 功 。玉 米 芯 含 有 丰 富 的 木 聚 中；Ｃ液 ：１ ３ 一 ０ ，５ 二硝基水杨酸完全溶 于 Ｂ溶 ｇ
酶活。结果表 明其产酶最佳培养条件为：接种量为 ５ Ｌ （ ｍ 孢子 １ １ ， Ｅ ，初始 ｐ ．Ｘ ０ 个 ｍ ） ３ Ｈ值为 ６ ，玉米芯 与水质量比为 １： ，温度为 ３ ℃，在培养到第 ４ ２ ３ ｄ时，其酶活力最高达 １ ３． Ｕ／ Ｌ ７２ ｍ 。 ５ ５ 关键词 绿色木霉 ；木聚糖酶 ；培养条件
中图分类 号 ：ｓ６ ．＋ Ｔ２ １ 章 编 号 ：６ ３ ６０ （０ １０－ ０６ ０ １７ — ０４ ２ １ ）４ ０５ —４
木聚糖酶是一类重要 的木糖苷键水解酶 ，对水 菌种由河北科技大学生物安全实验室提供。 １２ 化 学试 剂和 仪器 ． 解植物中的半纤维素有着重要 的作用 ，特别是利用 木 聚糖酶酶解可制得双歧杆菌增殖 因子低聚木糖 ， 国际 上对 木 聚糖 酶 的研 究 十 分重 视 。 以木 聚糖 为碳
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