国标 花青素检测方式
ph示差法花青素 计算问题
ph示差法花青素计算问题
Ph示差法是一种测定花青素含量的方法，这种方法利用花青素在不同pH
值下的颜色变化来计算花青素的浓度。
首先，你需要准备一些实验材料，包括含有花青素的样品、缓冲液（通常为pH 和pH 的磷酸盐缓冲液）、以及标准的花青素溶液。
实验步骤如下：
1. 将样品与pH 的缓冲液混合，用分光光度计在595nm处测定吸光度A1。
2. 将样品与pH 的缓冲液混合，再次测定吸光度A2。
3. 将标准花青素溶液与pH 的缓冲液混合，测定吸光度A3。
4. 将标准花青素溶液与pH 的缓冲液混合，测定吸光度A4。
通过以下公式计算花青素的浓度：
花青素浓度（mg/L）= [(A3×V3) - (A4×V3)] / [(A1×V1) - (A2×V1)] × [(V2/V1) - 1] / V3
其中，A1、A2、A3和A4分别是样品在pH 和pH 缓冲液中以及标准花青素溶液在pH 和pH 缓冲液中的吸光度。
V1和V2分别是样品和标准花青素溶液的体积，V3是缓冲液的体积。
请注意，这只是一个基本的计算方法，实际操作中可能需要根据具体情况进行适当的调整。
另外，为了保证实验结果的准确性，建议进行多次测量并取平均值。
pH示差法测总花青素含量
pH示差法测总花青素含量
实验试剂氯化钾、醋酸钠、浓盐酸、蒸馏水
实验器材容量瓶、烧杯、离心机、电子天平、pH计、紫外可见分光光度计
实验操作
取两个100 mL 容量瓶，各加入一定量离心待测液，分别用pH1.0 缓冲液和pH4.5 缓冲液定容后混匀，4℃静置2 h，然后将两种样品各在510 nm和700 nm波长下测定吸光度。
总花青素含量按公式 2.3 计算，结果以矢车菊-3-葡萄糖苷（C3G）表示
公式2.3 中：A 由公式2.4 计算所得，Mw 为分子量（以C3G 计算，449.2g/mol），
Df 为稀释倍数（参考文献依据A取值在0.2-0.7），ε 为C3G 的消光系数（26900 L/mol·cm），l 为光程（1.0 cm）。
缓冲液的配制
①pH1.0 缓冲液配置
准确称取1.86 g KCl，与980 mL 蒸馏水混合，用浓HCl 校正pH 至1.0，移至1 L 的容量瓶中，用蒸馏水定容
②pH4.5 缓冲液配置
准确称取32.82 g 醋酸钠，与960 mL 蒸馏水混合，用浓HCl 校正pH 至4.5，移至1 L 的容量瓶中，用蒸馏水定容。
蓝靛果或果渣中花青素的含量测定
蓝腚果或果渣中花青素含量检测方法
1. 仪器及用具：
1.1 电子天平（1/10000）
1.2 玻璃仪器：50ml容量瓶、5ml刻度吸管
1.3 超声波清洗器
1.4 TU－1901紫外分光光度计
1.5 比色皿（1cm）
2. 操作方法：
精密称取用打浆机打碎的果浆10g或果渣6g，置于250ml 三角瓶中加入70ml用2%盐酸甲醇溶液摇匀，超声20分钟过滤到250ml容量瓶中，第二次加入60ml2%盐酸甲醇溶液摇匀超声20分钟过滤到原250ml容量瓶中，第三次加入60ml2%盐酸甲醇溶液摇匀，超声10分钟过滤到原250ml容量瓶中冷却至室温定容刻度，摇匀，备用。
吸取上述液5ml 于50ml容量瓶中，加2%的盐酸甲醇溶液定容，配制成样品溶液。
3. 测定：用1cm玻璃比色皿，在540nm波长下，测定吸光
度A,用2%的盐酸甲醇作空白对照。
4.计算公式：
A×50ml
花青素含量%＝×100%
M(1－m)×5ml×1020
1020：换算系数
M: 样品质量
m: 样品中的水分 A: 吸光度。
花青素保健食品标准
保健（功能）食品通用标准（GB 16740－1997）General Standard for Health (Functional) Foods1 范围本标准规定了保健（功能）食品的定义、产品分类、基本原则、技术要求、试验方法和标签要求。
本标准适用于在中华人民共和国境内生产和销售的保健（功能）食品。
2 引用标准下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成本标准的条文。
在标准出版时，所示版本均为有效。
所有标准都会被修订。
使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。
GB 2760－1996 食品添加剂使用卫生标准GB 4789.2－94 食品卫生微生物学检验菌落总数测定GB 4789.3－94 食品卫生微生物学检验大肠菌群测定GB 4789.4－94 食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验GB 4789.5－94 食品卫生微生物学检验志贺氏菌检验GB 4789.10－94 食品卫生微生物学检验金黄色葡萄球菌检验GB 4789.11－94 食品卫生微生物学检验溶血性链球菌检验GB 4789.15－94 食品卫生微生物学检验霉菌和酵母计数GB／T 5009.11－1996 食品中总砷的测定方法GB／T 5009.12－1996 食品中铅的测定方法GB／T 5009.17─1996 食品中总汞的测定方法GB 7718－94 食品标签通用标准GB 13432－92 特殊营养食品标签GB 14880－94 食品营养强化剂使用卫生标准GB 14881－94 食品企业通用卫生规范GB 14882－94 食品中放射物质限制浓度标准GB 15266－94 运动饮料3 定义本标准采用下列定义3.1 保健（功能）食品 Health (Functional) Foods 保健（功能）食品是食品的一个种类，具有一般食品的共性，能调节人体的机能，适于特定人群食用，但不以治疗疾病为目的。
3.2 功效成分 Functional Composition 能通过激活酶的活性或其他途径，调节人体机能的物质。
花青素的分离提纯测定实验具体方案.
花青素的提取、测定仪器材料试剂：仪器：旋转蒸发仪，真空泵，分光光度计，真空干燥箱，水浴锅，天平材料：新鲜的紫葡萄和青葡萄试剂：无水乙醇，盐酸，铁氰化钾，三氯乙酸，硫酸亚铁实验步骤一、花青素的提取：1、挑选新鲜的紫葡萄薄洗净晾干，分离出果肉、果皮、籽粒2、将分离晾干的紫色葡萄果皮，80℃下干燥1h。
3、称取2g磨成粉末4、用含有1%盐酸的乙醇溶液浸提2次，合并提取液5、讲合并提取液进行抽滤6、60℃减压浓缩7、真空干燥8、得粗提取液2、提取条件的优化：p 水平A提取温度 /℃B乙醇浓度/%C提取时间/minD料液比/（g/ml）p 1 50 50 60 1:10 p 2 60 60 90 1:20 p 3 70 70 120 1:30A B C D 结果实验序号1 1 1 1 12 1 2 2 23 1 3 3 34 2 1 2 35 2 2 3 16 2 3 1 27 3 1 3 28 3 2 1 39 3 3 2 1K1K2K3Q确定最佳提取方案然后对果皮、果肉、籽粒进行提取，测定最佳提取部位。
3、纯化纸层析法提纯1.取准备好的滤纸条（2×20cm），将其一端剪去两侧，中间留一长约1.5cm，宽约0.5cm的窄条，并在滤纸剪口上方折叠出一条直线，作为画滤液细线的基准线。
2．用毛细吸管沾少许滤液在折线上描绘4~5次，注意要画得匀、直、细，每次画完细线要等其自然变干后再画第二根线。
3．在大试管中加入常用的展开剂有V(丁醇∶V(乙酸∶V(水=4∶1∶5,V(正丁醇∶V(2mol/LHCl=1∶1,V(乙酸∶V(浓HCl∶V(水=15∶3∶82,1%盐酸,V(浓HCl∶V(水=3∶97等（即层析液）。
然后将滤纸条固定于软木塞上，插入试管内，使窄端浸入溶剂中（色素点要略高于液面，滤纸条边缘不可碰到试管壁），盖紧软木塞，直立于阴暗处进行层析。
4.展开后剪下色斑,以酸化甲(乙醇洗涤、浓缩,即可得到样品。
测定原花青素含量(硫酸香草醛法)1
香草醛法测定原花青素的含量说明：原花青素的抗氧化性受到聚合物的影响，以乙酸为溶剂，香草只与原花青素中的末端的黄烷-3-醇发生缩合生成红色产物，由红色产物吸光度测定原花青素含量。
通过正交实验和单因素实验考查了硫酸香草醛法测定原花青素含量的合适条件，比色条件为硫酸浓度30%，香草醛浓度1%，反应T为30℃，反应时间为30分钟。
以儿茶素为标准品绘制标准曲线测定原花青素含量。
一、器材/试剂紫外分光光度计恒温水浴锅电子天平儿茶素标准品（浓度＞＝98%）；香草醛 ( 分析纯) ；硫酸 ( 分析纯) ；冰乙酸 ( 分析纯) ；实验用水为二级反渗透去离子水。
二、实验步骤1.配制试剂( 1 )配制儿茶素标准品溶液：称取一定量的儿茶素标准品，分别用去离子水定容至一定体积，配制成物质的量浓度为0.025~0.25 mm o l · mL 的儿茶素标准品溶液；( 2 )配制香草醛乙酸溶液：称取一定量的香草醛，分别用乙酸定容至一定体积，配制成浓度为1 ％；( 3 )配制硫酸乙酸溶液：量取一定体积的浓硫酸，分别用乙酸定容至一定体积，配制成浓度为3 0 ％的硫酸乙酸溶液。
（4）样品溶液：原花青素溶液以火棘果为原料，按液固比 6：1加入 4 0 ％乙醇溶液，4 5 ℃下浸提 1.5 h，问歇搅拌，连提3次，过滤，滤液旋蒸，回收溶剂。
浓缩液经过预处理好的AB一8树脂吸附，用去离子水洗涤、6 0％乙醇溶液洗脱，收集洗脱液，6 0％乙醇洗脱液即为样品溶液。
2、扫描最大吸收波长取0．5mL儿茶素标准品溶液，加入2．5mL30％的硫酸乙酸溶液，2.5mL 1％的香草醛乙酸溶液，混合均匀，30℃水浴中避光反应15min。
以无水乙酸做参比，在可见光区(400～800nm)进行光谱扫描。
确定最大吸收波长，以后在此波长下测定样品的含量。
3、绘制标准曲线（在最大波长吸收处测得吸光度）浓度0.025 0.035 0.045 0.055 0.065 0.075 0.085 0.095A（儿茶素）0.105 0.115 0.125 0.135 0.145 0.155 0.165 0.175A（儿茶素）0.185 0.195 0.205 0.215 0.225 0.235 0.245A（儿茶素）测原花青素样品的吸光度，通过以上标准曲线所得的标准曲线回归线方程计算得样品浓度。
葡萄籽提取物原花青素95%执行标准
葡萄籽提取物原花青素95%执行标准
葡萄籽提取物原花青素95%的执行标准主要包括以下内容：
1. 提取方法：采用超声波辅助萃取、回流萃取等方法，从葡萄籽中提取目标成分。
2. 成分含量：葡萄籽提取物原花青素的含量应达到95%以上。
3. 鉴定方法：应运用高效液相色谱（HPLC）或者紫外分光光度法等可靠的分析方法对葡萄籽提取物原花青素进行鉴定和分析。
4. 检测限值：确定葡萄籽提取物原花青素的检测限值，保证提取物的质量符合要求。
5. 外观特征：葡萄籽提取物原花青素应为深紫色至红棕色粉末，无异味。
6. 残留溶剂：葡萄籽提取物原花青素中不得含有明显的溶剂残留。
7. 重金属限量：葡萄籽提取物原花青素应符合国家或地区规定的重金属限量标准，确保产品安全。
需要注意的是，具体的执行标准可能会因国家、地区以及生产厂家的要求而有所不同，以上内容仅为常见的执行标准举例，具体要求还需参考相关标准文件。
pH示差法测总花青素含量
pH示差法测总花青素含量
pH示差法测总花青素含量
实验试剂氯化钾、醋酸钠、浓盐酸、蒸馏水
实验器材容量瓶、烧杯、离心机、电子天平、pH计、紫外可见分光光度计
实验操作
取两个100 mL 容量瓶，各加入一定量离心待测液，分别用pH1.0 缓冲液和pH4.5 缓冲液定容后混匀，4℃静置2 h，然后将两种样品各在510 nm和700 nm波长下测定吸光度。
总花青素含量按公式2.3 计算，结果以矢车菊-3-葡萄糖苷（C3G）表示
公式2.3 中：A 由公式2.4 计算所得，Mw 为分子量（以C3G 计算，449.2g/mol），
Df 为稀释倍数（参考文献依据A取值在0.2-0.7），ε 为C3G 的消光系数（26900 L/mol·cm），l 为光程（1.0 cm）。
缓冲液的配制
①pH1.0 缓冲液配置
准确称取1.86 g KCl，与980 mL 蒸馏水混合，用浓HCl 校正pH 至1.0，移至1 L 的容量瓶中，用蒸馏水定容
②pH4.5 缓冲液配置
准确称取32.82 g 醋酸钠，与960 mL 蒸馏水混合，用浓HCl 校正pH 至4.5，移至1 L 的容量瓶中，用蒸馏水定容。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
国标 花青素检测方式
国标中的花青素检测方式包括高效液相色谱法、差示扫描量热法
和比色法等。其中，高效液相色谱法是目前应用较为广泛的一种方法，
其通过分离、提纯和测定样品中的花青素成分。差示扫描量热法是一
种灵敏度较高的检测方法，通过测定样品在不同温度下吸收光谱差异
实现对花青素的检测。比色法则是将样品中的花青素与染色体系相结
合，通过对比色度计测量来确定花青素的含量。