fish
FISH简介
荧光原位杂交(Fluorescence In Situ Hybridization, 简称FISH)由于其直观, 快速, 敏感性高和方便灵活越来越得到广泛应用, 尤其是在血液学领域中. 因为白血病标本比较容易取得和制备, 不同类型的白血病又往往有其特异的染色体异常, FISH在白血病诊断, 治疗监测, 预后估计和微小残留病检测等诸方面都正成为不可缺少的重要手段.FISH的基本原理很简单, 就是标记了荧光的单链DNA(探针)和与其互补的DNA(玻片上的标本)退火杂交, 通过观察荧光信号在染色体上的位置来反映相应基因的情况.FISH探针按标记方法可分为直接标记和间接标记: 用生物素(biotin)或地高辛(digoxingenin)标记称为间接标记, 杂交后需要通过免疫荧光抗体检测方能看到荧光信号, 因而步骤较多, 操作麻烦, 其优点是在信号较弱或较小时可经抗原抗体反应扩大; 直接用荧光素标记DNA的方法称为直接标记. 由于直接标记的探针杂交后可马上观察到荧光信号, 省去了烦琐的免疫荧光反应, 不再需要购买荧光抗体, 也由于近年来荧光互的亮度和抗淬灭性的不断改进和提高, 直接标记的荧光探针越来越成为首选, 采用多种不同颜色的荧光, 方便在同一标本上同时检测多钟异常. 其荧光强度和信号大小都易于在普通荧光显微镜下观察, 操作过程中也不需要严格避光, 使FISH过程变得简便而易于操作. FISH并不能取代传统的白血病MCI诊断, 但它却能使MIC分型更为准确和深入. , MIC即细胞形态学(M), 免疫学和细胞遗传学(C), 三者结合对白血病进行分型诊断, 对不同类型的白血病采用不同治疗方案手段. 随着人们对白血病的不断认识, 仅进行MIC分型不够全面, 还要加上对白血病的分子(M)诊断, 成为MICM分型. FISH就是连接细胞遗传学和分子生物学的桥梁.FISH流程仪器设备1、医用微波炉；2、水浴锅；3、OLYMPUS BX51荧光显微镜；4、OLYMPUS DP11数字显微照相机。
荧光原位杂交(fish)
荧光原位杂交技术荧光原位杂交技术（fluorescence in situ hybridization），简称FISH。
是利用荧光标记的特异核酸探针与细胞内相应的靶DNA分子或RNA分子杂交，通过在荧光显微镜或共聚焦激光扫描仪下观察荧光信号，来确定与特异探针杂交后被染色的细胞或细胞器的形态和分布，或者是结合了荧光探针的DNA区域或RNA分子在染色体或其他细胞器中的定位。
中文名fish外文名fluorescent in situ hybridization建立时间1986年发展历程1969年，Pardue和John等两个研究小组开始采用放射性标记DNA或28S RNA发明了原位杂交技术（ISH）。
尽管当时原位杂交技术已经具有较高的特异性和灵敏度，但鉴于放射性同位素自身特性的局限，如安全性、空间分辨率低、不稳定性等问题，这项技术仅限于实验室研究方面的应用。
1986年科研工作者开始利用异硫氰酸盐荧光素来标记探针，并在荧光显微镜下进行观察分析，建立了荧光原位杂交技术（FISH）。
1989年，Delong首次使用荧光标记寡核苷酸探针检测单个微生物细胞。
由于FISH技术具有敏感度高、信号强、背景低、快速等优点，该方法在环境微生物的检测中得到了广泛的应用。
随着科技的迅速发展，FISH探针标记物越来越多，不仅从单一荧光发展到多色荧光检测，而且应用范围也进一步扩大，不仅可以用于分裂相细胞而且可以用于间期细胞检测，为FISH技术的临床应用打下了坚实的基础。
操作步骤编辑播报（1）样品的固定；（2）样品的制备和预处理；（3）预杂交；（4）探针和样品变性；（5）用不同的探针杂交以检测不同的靶序列；（6）漂洗去除未结合的探针；（7）检测杂交信号，进行结果分析·荧光信号观察：将处理好的样品置于荧光显微镜下，选择分散较好的区域来观察。
三色（或者更多）荧光激发下，观察到不同颜色的荧光图像。
通常选用20X物镜来扫描样品杂交区域，40X或100X物镜下观察样品，从一定的方向进行计数，并对计数情况进行分析。
fish技术定量的方法
fish技术定量的方法一、引言随着生物科学技术的不断发展，荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization，简称FISH）技术在生物学研究领域得到了广泛应用。
作为一种非放射性杂交技术，FISH在基因表达、染色体核型分析、基因定位等方面具有显著优势。
本文旨在介绍FISH技术定量的方法，以期为相关领域的研究者提供参考。
二、FISH技术简介1.原理FISH技术利用荧光标记的核酸探针与目标DNA序列特异性结合，通过荧光显微镜观察杂交信号，实现对特定基因或染色体区域的定位与分析。
2.操作步骤FISH技术的操作步骤主要包括：探针设计、样本处理、染色、图像获取与分析、数据处理与定量分析。
3.优点与局限性FISH技术具有非放射性、高灵敏度、特异性强、操作简便等优点。
但同时也存在一定的局限性，如对探针设计的要求较高、样本制备过程较为繁琐等。
三、FISH技术定量方法1.荧光染料选择选择具有良好光谱分辨率和量子产率的荧光染料，如FITC、Cy3、Cy5等，用于标记核酸探针。
2.样本处理与染色针对不同类型的样本（如细胞、组织切片、染色体悬液等），采用适当的处理方法进行制备。
染色过程中，需注意控制探针浓度、杂交温度、杂交时间等条件，以获得最佳实验效果。
3.图像获取与分析利用荧光显微镜对染色后的样本进行观察，捕获杂交信号。
通过专业图像分析软件，对图像进行处理和定量分析。
4.数据处理与定量分析对处理后的图像进行阈值设定、背景扣除等操作，计算目标区域的荧光信号强度。
根据信号强度，对基因表达水平、染色体拷贝数等进行定量分析。
四、实验应用与案例分析1.基因表达分析FISH技术可用于检测特定基因在细胞或组织中的表达水平，有助于研究基因在生物过程中的功能。
2.染色体核型分析FISH技术可实现对染色体核型的快速准确分析，对遗传病的诊断和染色体异常研究具有重要意义。
3.细胞定位分析通过FISH技术，可定位特定基因在细胞内的表达位置，有助于研究细胞结构和功能。
fish概念 -回复
fish概念-回复Fish是一类广泛存在于水中的脊椎动物，属于脊椎动物门脊椎动物亚门鱼纲，是生活在水中最为普遍和多样化的动物群体之一。
它们通常具有流线型的身体和鳞片覆盖的皮肤，可以通过鳃呼吸水中的氧气来维持生命活动。
以其多样的形态和生态特征，在全球各个水域中发挥着重要的生物学和生态学作用。
首先，鱼类的起源可以追溯到约5.2亿年前的古生代，当时的鱼类仅为无颌鱼和有颌鱼两类，而现代鱼类则是有颌鱼的后代。
有颌鱼在进化过程中发展出了具有颚骨和牙齿的下颌骨，这使得它们能够更有效地捕食和咀嚼食物。
鱼类的形态多样，可以根据骨骼结构和体形分为硬骨鱼和软骨鱼两大类。
硬骨鱼包括辐鳍鱼类和鳍脚类，拥有坚硬的鳞片和硬骨骼。
软骨鱼则由软骨组成，包括鲨鱼、鳐鱼和鼠鲨等物种。
在形态上，鱼类的身体通常呈流线型，有助于减少水中的阻力并增加游泳速度。
它们的鳍和尾巴功能各异，有助于保持平衡、控制方向和加速移动。
鱼类的生活方式和生态适应能力非常多样化。
它们可以生活在淡水中，如河流、湖泊和沼泽地带，也可以生活在咸水中，包括海洋和海湾。
某些鱼类还可以适应生活在沿海和深海的环境中。
在这些不同的栖息地中，鱼类经历了各种各样的进化适应，以适应各自的生活环境。
鱼类的呼吸方式主要通过鳃进行，鳃是位于鱼类侧面的一对器官。
鳃的作用是将水中的氧气与二氧化碳进行交换。
鱼类通过张开咽喉部的鳃裂，将含有氧气的水流经过鳃片，然后通过气管将二氧化碳排出体外。
这种呼吸方式使得鱼类可以在水中长时间生存，并能够忍受水中较低的氧气浓度。
鱼类的食物来源广泛，可以是植物、浮游生物、甲壳动物、小鱼和其他水生动物等。
不同种类的鱼类在食性上有所差异，有些鱼类是肉食性，有些是草食性，还有些是杂食性。
通过不同的食性和口腔结构，鱼类能够在水中灵活地捕食和摄取食物。
许多鱼类通过繁殖来保持自己的种群数量。
鱼类的生殖方式多种多样，有些是外生孵化，即卵在水中受精然后孵化；有些是内生孵化，卵在母体内受精并孵化后再产下活鱼。
fish的用法
fish的用法
Fish 是在 Linux/Unix 环境中最常用的命令行程序，它是基于 C 语言编写的一款Unix-like 操作系统的实用程序。
Fish 可以用来执行常见的 Linux 命令，比如 cat、rm、mv 和 cp 等。
它也支持常用的功能，比如重定向（>），管道（|）和 Shell 内建（if、for、while 等）等。
它的语法更加简洁，更类似于其他诸如 Bash 和 Zsh 的 Shell。
Fish 有一些独特的功能，它可以支持的自动补全和自动拼写检查，自动添加颜色和智能提示，它还支持一些常用的 shell 指令，以及更加语义化的别名（alias）系统。
Fish 能够实现一些更独特的功能，比如循环结构，变量可以使用函数调用，变量也可以被递归调用，还能通过函数自定义命令。
它可以扩展更多功能，比如可以拦截执行命令，扩展命令功能，实现自定义语法生成等功能。
Fish 使用非常简单，只要输入常规的 Unix 命令，便可以自动完成命令，Fish 也支持把命令分发到多个服务器上，一键执行，使得系统管理任务更加高效可靠。
Fish 的灵活性使得它能够灵活应用于不同环境，使用它可以更高效地执行操作，并且可以非常轻松地打造有个性化的操作系统来满足自己的需求。
FISH技术的基本原理
FISH技术的基本原理FISH（Fluorescence In Situ Hybridization）技术是一种在细胞和组织水平上直接可视化和定位特定DNA序列的方法。
它是一种专门用于检测染色体异常、基因缺失或复制数变异、基因重排等的分子生物学技术。
FISH技术的基本原理是利用专门设计的探针与目标DNA序列的互补配对。
这些探针通常是由碱基对序列特异性的荧光分子标记的缩合物组成。
探针的选择性地结合到DNA的目标序列上，并发射出特定颜色的荧光信号，从而实现对该DNA序列的定位和可视化。
首先，需要将探针与荧光标记结合。
这通常通过在探针序列的5'或3'端引入荧光染料或其他标记物实现。
荧光标记的探针可以根据荧光的颜色和光谱特性选择合适的标记染料。
其次，细胞或组织样品需要进行固定，以保持细胞的形态和结构完整。
当然，固定方法的选择会根据具体需求而有所不同。
然后，需要对DNA进行解旋处理。
解旋可以通过加热或化学处理等方式来破坏DNA的双链结构，使探针能够与目标DNA序列发生有效的杂交反应。
随后，探针与DNA目标序列进行杂交。
杂交可以在温度和离子浓度适当的缓冲液中进行，以提高探针与目标DNA序列的互补结合能力。
存在足够长的杂交时间，使得探针能够与目标DNA序列稳定结合，并且特异性高。
最后，样品在显微镜下观察和分析。
荧光显微镜可以通过激发荧光染料，观察到荧光信号的发射和位置。
可以使用多色探针同时进行多个DNA序列的检测和定位。
FISH技术的原理允许在细胞和组织水平上可视化和定位目标DNA序列。
它已广泛应用于医学诊断、研究和遗传学等领域。
例如，在癌症研究中，FISH技术可用于检测癌基因或抑癌基因的缺失、重排或增多，帮助确定肿瘤的类型和分级；在遗传学中，FISH技术可用于检测染色体异常、基因剪接和拷贝数变异；在生殖医学中，FISH技术可用于评估胚胎植入前的染色体异常和遗传病风险。
总之，FISH技术是一种基于探针与目标DNA序列的互补配对，并通过荧光信号标记和显微镜观察，实现对DNA序列的可视化和定位。
FISH技术的探针要求必须具有较好的特异性
FISH技术的探针要求必须具有较好的特异性引言：FISH（荧光原位杂交）技术是一种用于检测和定位特定DNA序列或基因的分子生物学技术。
它通过将荧光标记的DNA探针与样品中的DNA序列杂交，然后使用荧光显微镜观察杂交结果。
在FISH技术中，探针的特异性是十分关键的，它要求探针能够与目标DNA序列高度特异性地结合，以获得准确的分析结果。
本文将详细探讨FISH技术中探针特异性的要求及其重要性。
一、探针特异性的要求1.DNA序列特异性：FISH探针的首要要求是具有高度的DNA序列特异性。
探针的设计应基于目标DNA序列的独特性，以确保它只与目标DNA序列的特定片段杂交。
这意味着探针的序列不能与非目标DNA序列相匹配，以避免误报或假阳性结果。
2.杂交条件的适当性：除了探针的序列特异性，FISH技术中杂交条件也非常重要。
适当的杂交条件包括温度、盐浓度、杂交缓冲液的组成等，这些条件可以影响探针与样品中目标DNA的结合能力。
因此，良好的特异性要求探针在特定的杂交条件下才能与目标DNA结合，而不会与非目标DNA发生结合。
3.标记的特异性：荧光标记是FISH技术中常用的标记方式，它可用于观察杂交结果。
探针的荧光标记要求具有较好的特异性，只与目标DNA结合，并显示强烈的荧光信号。
这意味着探针的标记部分应避免非特异性结合和自身的标记。
二、探针特异性的重要性1.结果的准确性：FISH技术的应用涉及到疾病诊断、基因定位和染色体分析等领域，因此对结果的准确性要求非常高。
探针的特异性决定了结果的准确性和可靠性，因为非特异性的探针可能会导致错误的杂交信号，从而产生虚假的结果。
2.高灵敏度：特异性是FISH技术灵敏度的关键因素之一、只有当探针与目标DNA的特定片段特异地结合后，才能产生明亮的荧光信号。
如果探针缺乏特异性，那么杂交结果可能会产生较弱的信号或者和背景噪音混合，从而降低检测的灵敏度。
3.缩短分析时间：探针的特异性还可以帮助缩短FISH技术的分析时间。
FISH技术临床应用
基于FISH技术的精准诊断，医生可以为患者制定个性化的 治疗方案，提高治疗效果，减少副作用。
遗传咨询
FISH技术可用于检测染色体异常和基因突变，为遗传咨询 提供科学依据，帮助家庭了解生育风险和遗传病预防。
未来发展趋势预测
技术创新
多学科融合
随着科技的不断发展，FISH技术将继续创 新和完善，提高检测精度和效率，降低成 本，使其更加普及和可及。
FISH技术操作流程及注意事项
样本制备与处理
样本类型
FISH技术可用于分析各种样本，包括组织切片、细胞涂片、染色体 悬液等。
样本固定
为确保FISH实验的成功，需要对样本进行适当固定，通常使用甲醇 /乙酸或甲醛等固定剂。
样本处理
根据实验需求，对样本进行脱水、酶消化、变性等处理，以便于探针 的渗透和杂交。
多重FISH技术研究进展
多色FISH技术
利用不同荧光颜色的探针同时检测多个目标序列，实现高通量的基因或染色体变异分析 。
多靶点FISH技术
针对同一基因或染色体的不同区域设计多个探针，提高检测的覆盖度和准确性。
多重连接依赖的探针扩增（MLPA）结合FISH技术
MLPA技术能够扩增特定序列并产生可检测的信号，与FISH技术结合可实现低丰度变异 的灵敏检测。
FISH技术与其他分子诊断方法联合应用前景
FISH技术与下一代测序（NGS）联合应用
NGS技术能够高通量、高灵敏度地检测基因组变异，与FISH技术结合可实现变异位点 的精确定位和验证。
FISH技术与数字PCR（dPCR）联合应用
dPCR技术能够实现DNA分子的绝对定量，与FISH技术结合可实现特定基因或染色体变 异的精确定量和分析。
定的DNA序列。
英语fish的知识全部总结
英语fish的知识全部总结Fish is a diverse group of aquatic animals that belong to the class Pisces or Actinopterygii. They are known for their streamlined body, gills, and fins that allow them to swim in water. Here are some key points about fish:1. Classification: Fish are classified into three main groups: jawless fish (lampreys and hagfish), cartilaginous fish (sharks and rays), and bony fish (most common fish species).2. Anatomy: Fish have a streamlined body covered with scales to reduce friction in water. They have fins for propulsion, stability, and maneuvering. They breathe through gills, extracting oxygen from water, and their heart pumps blood throughout their body.3. Habitat: Fish inhabit various aquatic environments, including oceans, freshwater rivers and lakes, and some can even survive in highly saline or brackish waters.4. Reproduction: Fish reproduce either by laying eggs or by giving birth to live young. Some species display intricate courtship behaviors, such as vibrant color displays or complex mating rituals.5. Feeding Habits: Fish exhibit a wide range of feeding habits. Some are herbivores, feeding on plants and algae, while others are carnivores, preying on other fish, invertebrates, or small organisms. Some fish are omnivorous and eat both plants and animals.6. Sensory Perception: Fish have a well-developed sensory system. They can detect vibrations, pressure changes, and electrical signalsin the water. Their lateral line system helps them perceive movement and pressure changes in the surrounding environment.7. Adaptations: Different fish species have adapted to various environments and niches. Some possess camouflage colors to blend with their surroundings, while others have specialized mouth structures for feeding on specific prey.8. Importance: Fish are important for various reasons. They serve as a food source for humans and other animals, play a role in maintaining ecosystem balance, and have cultural and economic significance in many societies.9. Threats and Conservation: Fish populations face threats such as overfishing, habitat loss, pollution, and climate change. Conservation efforts aim to protect fish populations and their habitats through measures such as fishing regulations, protected areas, and sustainable aquaculture practices.These are just a few key points about fish. Fish species exhibit incredible diversity in terms of size, shape, coloration, feeding habits, and behavior, making them a fascinating group of animals to study.。
简述fish的基本原理及应用
简述fish的基本原理及应用Fish是一种基于命令行的Shell，它在功能和使用方式上与Bash和Zsh等传统Shell有所不同。
本文将简要介绍Fish的基本原理及应用。
Fish的基本原理是通过解析用户输入的命令并执行相应的操作。
与传统Shell不同的是，Fish对命令行的解析更加智能和友好，它具有以下特点：1. 自动补全：Fish能够根据用户的输入自动补全命令、路径和参数，提高了输入效率和准确性。
当用户输入部分命令或路径时，Fish会根据已有的命令或路径进行匹配，并给出可能的补全选项。
此外，Fish还支持根据历史命令进行补全，以便用户快速找到并调用之前执行过的命令。
2. 语法高亮：Fish能够根据命令的语法规则，对命令行进行高亮显示，帮助用户更好地理解和编辑命令。
当用户输入命令时，Fish 会根据命令的结构和规则，对命令行的不同部分进行不同的颜色标记，使命令更加清晰易读。
3. 智能提示：Fish能够根据用户的输入和上下文，给出相关的命令和参数建议。
当用户输入一部分命令或路径时，Fish会根据已有的命令和路径，给出可能的继续输入的选项。
此外，Fish还支持根据命令的选项和参数，给出相应的提示信息，帮助用户正确使用命令。
4. 脚本编写：Fish支持用户编写脚本来批量执行一系列的命令。
用户可以使用Fish的语法和功能，编写脚本文件并执行。
脚本文件可以包含多个命令和逻辑控制语句，实现复杂的自动化操作。
同时，Fish还提供了丰富的内置函数和变量，方便用户在脚本中进行各种操作和计算。
Fish的应用场景广泛，特别适合那些需要频繁操作命令行的用户，例如系统管理员、开发人员和运维人员等。
以下是一些Fish的常见应用：1. 命令行操作：Fish可以作为替代Bash或Zsh的Shell，用于执行各种命令行操作。
通过自动补全和智能提示，Fish能够提高命令行操作的效率和准确性。
此外，Fish还支持命令行历史记录的保存和搜索，方便用户查找和重新执行之前执行过的命令。