可能成为骨肉瘤的血清标志蛋白
无血清培养基分离并鉴定U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞
无血清培养基分离并鉴定U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞摘要】目的应用无血清培养基分离U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞，并鉴定相关肿瘤标志物表达。
方法体外培养人骨肉瘤U2OS细胞株和U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞，免疫荧光检测U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞球中CD105表达。
采用免疫印迹法检测人骨肉瘤U2OS细胞株和U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞Nanog和Oct4蛋白表达。
采用半定量PCR检测人骨肉瘤U2OS细胞株和U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞SOX2、Nanog和Oct4 mRNA的表达。
结果荧光显微镜下可见，U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞球中部分细胞CD105呈阳性表达。
免疫印迹检测结果显示人骨肉瘤U2OS细胞株的Nanog和Oct4蛋白相对表达量为0.853±0.404和0.603 ±0.153，均明显低于U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞0.973±0.305 和0.827±0.322（均p<0.05）。
半定量PCR检测结果显示U2OS人骨肉瘤肿瘤干细胞SOX2、 Nanog和Oct4 mRNA的相对表达量为0.190±0.027、0.178±0.025、0.170±0.021，均明显高于人骨肉瘤U2OS细胞株0.032±0.009、0.086±0.016、0.019±0.006（均p<0.05）。
结论人骨肉瘤U2OS细胞株中存在肿瘤干细胞，无血清培养可用于分离培养人骨肉瘤肿瘤干细胞。
【关键词】骨肉瘤骨肉瘤干细胞无血清培养基悬浮培养【中图分类号】R730 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2014）31-0073-02骨肉瘤是一种起源于间叶组织的恶性肿瘤，多见于青少年。
是恶性程度最高的肿瘤之一[1] 。
尽管化疗结合手术的新型治疗方法改善了患者预后，但骨肉瘤患者在联合化疗时耐药患者的比例高于30%[2, 3] ，对于已转移的骨肉瘤，生存率并没有得到显著的提高，患者长期存活率只有65%左右。
(7)骨肿瘤与肿瘤样病变概论
4、实验室检查：
良性：血、尿、骨髓检查基本正常； 恶性：常有变化，如： 骨肉瘤：硷性磷酸酶增高(其由成骨细胞 产生，骨肉瘤、成骨性转移瘤、畸形性 骨炎均可增高)。 尤文氏肉瘤：血白细胞增多。 转移瘤：继发性贫血，血钙增高。前列 腺癌骨转移时酸性磷酸酶增高。 骨髓瘤：血清蛋白增高，尿中查出BenceJones蛋白。
有膨胀，骨皮质完整
血管造影：血管分化正常 无转移
无膨胀，骨皮质中断
血管湖，瘤染 可发生远处转移
无生命危险
有
肿瘤局限，与正常骨界限清楚， 肿瘤界限不清，边缘不规则， 常有硬化边缘 一般无硬化边缘
骨 巨 细 胞 瘤
良 性 骨 肿 瘤 ：
恶 性 骨 肿 瘤 ： 骨 肉 瘤
（三）病理检查：
我们在日常工作中有大量病例，单 纯依靠病理或单纯依靠X线均能造成误诊， 例如病理只诊断软骨瘤，如临床观察发 展迅速，考虑软骨肉瘤（病理局限）。
下列情况应慎重：
① 同一肿瘤不同部位组织可不相同，取 材不当可发生误诊。如骨髓炎、骨囊肿、 骨肉瘤边缘均有纤维性骨炎改变，取材 不当可误诊为局限性纤维性骨炎。
②放疗后，肿瘤组织被结缔组织代替或 掩盖；长期应用激素能改变瘤细胞的形 态。 ③由于肿瘤来源于间叶组织，可出现良 恶过渡型，取材局限易误诊。有些肿瘤 组织学为良性，而生理特性为恶性(如骨 巨细胞瘤)，故必须临床、病理、X线密 切结合。
婴儿：转移性神经母细胞瘤，神经母细胞瘤等。 童年、少年：尤文氏肉瘤、骨囊肿、血管瘤等。 青年：骨肉瘤、软骨肉瘤、骨瘤、骨软骨瘤等。 中年：骨巨细胞瘤、滑膜肉瘤、纤维肉瘤等。 老年：骨髓瘤、转移性肿瘤等。 性别在骨肿瘤发病上无显著差异，通常男 多于女，尤其是骨肉瘤、多发性骨髓瘤、脊索 瘤等。
常见血液检查的项目及临床意义
肿瘤标志甲胎蛋白(AFP)：诊断原发性肝癌的特异性，具有确立诊断、早期诊断、鉴别诊断的作用癌胚抗原(CEA)：广普的肿瘤标志，CEA升高常见于、、胃癌、、等。
但吸烟、妊娠期和心血管疾病、、非特异性等疾病，15%～53%的病人血清CEA也会升高，所以CEA[1不是恶性肿瘤的特异性标志，在诊断上只有辅助价值。
此外，血清CEA水平与大肠癌的分期有明确关系，越晚期的病变，CEA浓度越高。
糖类抗原19-9(CA199)：CA19-9是和结、的标志物。
血清CA19-9阳性的临界值为37kU/L。
糖类抗原125(CA125)：卵巢癌的特异性标志物，50岁以上女性每年测定有意义。
输卵管腺癌、、、、、和肺癌患者CA125的水平也会升高。
糖类抗原(CA)153：CA153是一种乳腺癌相关抗原，主要用于治疗中定期监测，对乳腺癌的诊断和术后随访有一定的价值。
CA242：消化道肿瘤标志，是一种粘蛋白型糖抗原，可作为胰腺癌和结肠癌较好的肿瘤标志物，其灵敏度与CA19-9相仿。
20ku/LNSE神经原特异性稀醇代酶：对肺小细胞癌，神经母细胞瘤具有临床意义。
SCC 鳞状细胞癌（消化道、生殖道、呼吸道等）CA72-4 消化道肿瘤（胃癌）标志CA50 消化道肿瘤及肺癌标志HCG人绒毛膜促性腺激素：妊娠及检测胎盘功能有意义，诊断与治疗监测（葡萄胎、恶性葡萄胎、及睾丸畸胎瘤等）Fer铁蛋白：原发性肝癌的第二血清学标志物。
增高见于肝癌和乳腺癌，对肝癌的特异性和灵敏度高。
游离前列腺特异性抗原(Free PSA)：临床常规用于前列腺良性与恶性疾病诊断与鉴别诊断及前列腺癌患者术后随访的重要指标总前列腺特异性抗原(Total PSA)：临床常规用于前列腺良性与恶性疾病诊断与鉴别诊断及前列腺癌患者术后随访的重要指标生长激素HGH：垂体肿瘤，、部分肝病、、胰腺癌有意义血脂：总胆固醇，甘油三酯，载脂蛋白，高密度脂蛋白，低密度脂蛋白，脂蛋白等。
电解质包括：钾、钠、氯、钙、镁、无机磷。
外科学：骨肿瘤
骨肿瘤第一节概述凡发生在骨内或起源于骨各种组织成分的肿瘤，无论是原发性还是继发性，统称为骨肿瘤。
原发性骨肿瘤根据肿瘤组织的形态结构，特别是肿瘤细胞的分化类型及所产生的细胞间物质类型，分为良性和恶性两类。
另一些病损类似肿瘤，称瘤样病变。
继发性骨肿瘤，即转移性骨肿瘤，指发生在其他器官的瘤细胞通过血液循环或淋巴管转移到骨骼上，此类肿瘤皆属恶性。
【临床表现】1疼痛疼痛的程度与肿瘤的生长速度有关，良性骨肿瘤多无疼痛，但骨样骨瘤可因反应骨的生长而产生剧痛。
恶性骨肿瘤一般疼痛明显，夜间疼痛尤甚。
2肿块与肿胀是骨肿瘤原发症状之一，良性骨肿瘤多以肿块为首发症状，肿块坚实；恶性骨肿瘤多表现弥漫肿胀，常合并软组织水肿，浅静脉充盈或怒张等症状。
3压迫症状骨肿瘤肿块巨大时，可压迫周围的组织而产生疼痛和受压组织功能障碍。
脊柱肿瘤可压迫脊髓致瘫痪。
4功能障碍近关节的骨肿瘤限制关节活动，肢体常因疼痛制动于半屈曲位。
5病理骨折肿瘤组织破坏骨质，影响骨的坚固性易发生病理性骨折，良、恶性骨肿瘤均可发生。
6转移和复发恶性骨肿瘤可经血流或淋巴转移到其他部位，引起相应临床症状，骨肿瘤治疗（如手术切除、截肢或放疗）后，可能复发。
少数良性骨肿瘤也可能恶变成肉瘤。
【诊断】骨肿瘤的诊断必须是临床表现、影像学和病理检查三结合。
X线片显示骨肿瘤的基本病变。
溶骨性良性骨肿瘤骨皮质变薄或膨胀现象，边界清楚，有明显边缘，一般无软组织和骨膜反应阴影；恶性肿瘤骨质破坏较广泛，密度不均，边界不清，有骨膜反应，软组织内有不规则阴影。
骨膜反应在尤因肉瘤呈“葱皮样”，骨肉瘤中为Codman 三角或放射状日光阴影。
X线检查对骨肿瘤诊断有重要价值。
CT、磁共振等影像学检查可帮助确定骨与软组织病变的范围及与周围重要神经血管的关系。
病理检查是确定肿瘤性质的可靠检查。
恶性骨肿瘤测定血钙、血磷、碱性磷酸酶等生化指标有临床意义，如：骨质破坏迅速时，血钙往往升高；血清碱性磷酸酶反映成骨活动，成骨性肿瘤碱性磷酸酶可增高；骨髓瘤约有一半患者尿中Bence Jones蛋白阳性；前列腺癌骨转移者血酸性磷酸酶可增高。
医学考研之病理学试题及解析(五)肿瘤
（五）肿瘤【A型题】181.下列肿瘤中，属于良性肿瘤的是A.肾母细胞瘤B.髓母细胞瘤C.神经母细胞瘤D.软骨母细胞瘤（46/2016）181.[答案]D[考点]肿瘤命名[解析]良性肿瘤命名一般原则是在组织或细胞类型的名称后面加一个“瘤”字，恶性肿瘤则称为“癌”或“肉瘤”，但由于历史原因，少数肿瘤的命名已经约定俗成，不完全按照上述原则。
有些肿瘤的形态类似发育过程中的某些幼稚细胞或组织，称为“母细胞瘤”，良性者如骨母细胞瘤；恶性者如神经母细胞瘤、髓母细胞瘤、肾母细胞瘤、肝母细胞瘤等。
182.检查大肠癌原癌基因RAS是否被异常激活成为癌基因，有效的检测技术是A.Western-blotB.FISHC.测序D.免疫组织化学（51/2016）182.[答案]C[考点]基因检测技术[解析]基因测序技术可通过测定基因序列，从而判断基因变化。
直接测序可检查大肠癌原癌基因RAS是否被异常激活成为癌基因。
183.下列属于原位癌的病变是A.大肠黏膜下癌B.食管黏膜下癌C.乳腺导管内癌D.胃黏膜内癌（46/2015）183.[答案]C[考点]原位癌[解析]原位癌通常用于上皮的病变，指异型增生的细胞在形态和生物学特性上与癌细胞相同，常累及上皮的全层，但没有突破基底膜向下浸润，有时也称为上皮内癌。
原位癌常见于鳞状上皮或尿路上皮被覆的部位，如子宫颈、食管、皮肤、膀胱等处；也可发生于鳞状化生的黏膜表面，如鳞化的支气管黏膜。
乳腺导管上皮发生癌变而未侵破基底膜向间质浸润者，称为导管原位癌或导管内癌。
故本题应选C。
184.下列选项中，不属于遗传性肿瘤的是A.Li-Fraumeni综合征B.纤维瘤病C.结肠腺瘤性息肉病D.神经纤维瘤病（46/2014）[考点]遗传性肿瘤[解析]遗传因素在一些肿瘤的发生中起重要作用，如遗传性肿瘤综合征患者比其他人患肿瘤的机会大大增加。
下表是一些遗传性肿瘤综合征及其受累基因和相关肿瘤。
综合征受累基因相关肿瘤家族性视网膜母细胞瘤RB视网膜母细胞瘤，骨肉瘤家族性腺瘤性息肉病APC结直肠癌神经纤维瘤病I型NF1神经纤维瘤，恶性神经鞘瘤Li-Fraumeni综合征P53肉瘤，乳腺癌，脑肿瘤，白血病着色性干皮病XPA，XPB等皮肤癌症ATM淋巴瘤，白血病毛细血管扩张性共济失调症Bloom综合征BLM白血病，实体肿瘤Fanconi贫血FACC，FACA白血病Wilms瘤WT1Wilms瘤von Hippel-Lindau综合征VHL肾细胞癌，小脑血管母细胞瘤MSH2等结直肠癌遗传性非息肉病性结直肠癌家族性乳腺癌BRCA1乳腺癌.卵巢癌BRCA2乳腺癌185.下列选项中，符合肿瘤间变概念的是A.良恶性肿瘤之间的形态改变B.肿瘤细胞的去分化C.肿瘤发生过程中的一种癌前病变D.肿瘤亲子代之间的遗传特性继承（47/2013）185.[答案]B[考点]肿瘤间变[解析]肿瘤间变（anaplasia）是指恶性肿瘤细胞不分化不成熟的状态，亦即肿瘤细胞的去分化。
第4节 骨肿瘤ppt课件
3.生化测定
• 凡患有恶性肿瘤的病人，除全面化验检查，包括 血、尿、便常规及肝、肾功能等外，还必须对血 钙、血磷、碱性磷酸酶和酸性磷酸酶进行测定。
Codman 三角
日光射 线
“葱皮”现象：
若骨膜的掀起呈阶段性，可形成同心圆或 板层排列的骨沉积，X线平片表现为“葱 皮”现象，多见于尤因肉瘤。
葱皮样 改变
“日光射线” ：
若恶性肿瘤生长迅速，超出骨皮质范围，同 时血管随之长入，肿瘤骨与反应骨沿放射状 血管方向沉积，表现为“日光射线”形态。
日光射 线
骨溶解， 溶骨改 变
软组织包 块
治疗
• 综合治疗 术前大剂量化疗，然后根据肿瘤浸润范围作
根治性切除瘤段、灭活再植或、置入假体的保肢 手术，或截肢术，术后继续大剂量化疗
• 预后：5年存活率提高至50％以上，骨肉瘤肺转移 的发生率极高
而使关节功能障碍 若肿瘤有丰富的血管，局部皮肤可
发热，浅静脉怒张
4．病理性骨折 轻微外伤引起病理性骨折。 某些骨肿瘤的首发症状 恶性骨肿瘤和骨转移癌的并发症
5.全身症状 晚期恶性骨肿瘤：贫血、消瘦、食
欲差、体重下降、低热。 远处转移： 血行转移多见，淋巴转移偶见（骨
组织淋巴系统相对不发达）
骨肿瘤晚期，恶病质病人
39良性与恶性骨肿瘤的鉴别良性骨肿瘤恶性骨肿瘤病史成年生长慢无症青少年肿块生长极快疼痛严重发热消瘦局部症状肿块无压痛皮肤正常无转移肿块有压痛皮肤发热静脉怒张晚期有转移x线所见边缘清楚无骨膜反应边缘不清楚骨质有破坏骨膜反应明显化验正常贫血碱性磷酸酶可增高等细胞形态近乎正常异型的多大小不等核大深染有核分裂40外科分期外科分级gradeg
5.肿瘤标志
注：Ig表示免疫球蛋白；TCR表示T细胞受体；LAP表示白细胞性磷酸酶；NCAM表示 神经细胞黏附分子；CK-BB表示肌酸激酶BB同工酶；GRP表示促胃液素释放肽；ER表示 雌激素受体；PR表示孕酮受体；ECG表示羟甲基纤维素钙；HMFG表示人乳脂肪球。
五、血清学肿瘤标志
肿瘤的血清学标志是指肿瘤细胞 产生的、分泌到血清或体液中, 产生的 、 分泌到血清或体液中 可用 生化或免疫化学方法定量测定的物质， 生化或免疫化学方法定量测定的物质， 它们的存在与恶性肿瘤的出现或进展 有关。 有关。
细胞表面肿瘤标志
肿瘤类型
B细胞性淋巴瘤 外周T 外周T细胞淋巴瘤 成年T细胞白血病／ 成年T细胞白血病／淋巴瘤 淋巴母细胞性淋巴瘤 霍奇金病 普通型(80％ 急性淋巴细胞性白血病 普通型(80％) (80 细胞性(15 (15％ T细胞性(15％) 细胞性(5 (5％ B细胞性(5％) 急性非淋巴细胞性白血病 细胞性(98 (98％ 慢性淋巴细胞性白血病 B细胞性(98％) 细胞性(2 (2％ T细胞性(2％) 慢性粒细胞性白血病
肿 瘤 标 志 Tumor marker
一、测定肿瘤标志的意义 二、临床常用肿瘤标志物测定技术 临床常用肿瘤标志物测定 三、肿瘤标志测定的评估标准 四、细胞表面肿瘤标志 五、血清学肿瘤标志 血清学肿瘤标志 肿瘤 六、癌基因标志
一、测定肿瘤标志的意义
肿瘤标志是一种特定类型的肿瘤所特有的 一种异常， 是存在于血清或其它体液中的， 一种异常 ， 是存在于血清或其它体液中的 ， 或 存在于细胞内和细胞表面的物质， 存在于细胞内和细胞表面的物质 ， 这些物质可 以用生化或免疫化学方法定量测定， 用于癌症 以用生化或免疫化学方法定量测定 ， 的检测或癌的器官定位， 的检测或癌的器官定位 ， 用于确定肿瘤负荷和 监察对治疗的反应。 监察对治疗的反应 。 本定义的肿瘤标志包括肿 瘤相关抗原、 酶 、 特异性蛋白、 代谢产物和癌 瘤相关抗原 、 特异性蛋白 、 基因及其产物等。 基因及其产物等。
常见肿瘤标志物的含义
常见肿瘤标志物的含义【专题讨论】常见肿瘤标志物的含义常见肿瘤标志物的含义一、癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen,CEA)最初认为CEA是结、直肠癌的特异性标志物，其后发现在内胚层细胞分化而来的其它恶性肿瘤也可呈阳性。
进一步研究发现，在一些良性肿瘤和一些非肿瘤性疾病，血液中CEA浓度也会增高。
因此，CEA是一种广谱肿瘤标志物。
临床意义：(1) 血清CEA升高主要见于结肠癌、直肠癌、胰腺癌、胃癌、肝癌、肺癌、乳腺癌、其它恶性肿瘤也有不同程度的阳性率。
(2) CEA连续随访检测，可用于恶性肿瘤手术后的疗效观察及预后判断，也可用于对化疗患者的疗效观察。
一般情况下，病情好转时血清CEA浓度下降，病情恶化时升高。
手术完全切除者，可见下降，但不复正常；无法切除而作姑息手术者，一般呈持续上升。
(3) 肠道憩室、直肠息肉、结肠炎、肝硬化、肝炎和肺部疾病CEA 也有不同程度的升高，但阳性率较低。
(4) 98%的非吸烟者CEA<5ug/L，吸烟者中约有3.9%的有CEA>5ug/L。
(5) 肾功能异常时也可轻度上升。
二、甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein,AFP)胎儿血浆中的AFP值可达到3000ug/L,随后即逐渐降低，出生后，AFP合成很快受抑制，其含量降至50ug/L，周岁婴儿的浓度接近成人水平，一般健康成人血浆AFP浓度低于20ug/L。
临床意义：(1) 原发性肝癌患者血清中AFP浓度明显升高，约77.1%的患者AFP>500ug/L，但也有18%的病人AFP并不升高。
(2) 病毒性肝炎，肝硬化患者AFP浓度有不同程度的升高，但其水平通常低于100ug/L。
其升高原因主要是由于受损伤的肝细胞再生而幼稚化时，肝细胞便重新具有产生AFP的能力，随着受损肝细胞的修复，AFP逐渐恢复正常。
(3) 生殖腺胚胎性肿瘤患者血清中AFP浓度可见升高，如睾丸癌、畸胎瘤等。
(4) 妇女妊娠3个月后，血清AFP浓度开始升高，7-8个月时达到高峰，一般在400 ug/L以下，分娩后3周恢复正常。
驱动蛋白Kif4的功能以及与疾病的关系
驱动蛋白Kif4的功能以及与疾病的关系2 山东大学齐鲁医学院口腔医学院山东省口腔组织再生重点实验室山东省口腔生物材料与组织再生工程实验室 250012；3山东大学齐鲁医院口腔科 250012摘要：驱动蛋白Kif4（kinesin superfamily protein 4，Kif4）是驱动蛋白超家族成员之一，在真核细胞DNA的修复、有丝分裂的调节以及神经元细胞的发育等生命活动中扮演重要角色。
近年来，因其功能和表达的异常与包括肿瘤在内的多种疾病的关系密切而引起了人们的关注。
更好的了解Kif4的致病机制，将有助于我们加深对相关疾病的认识，为疾病的早期诊断、治疗和预后评估提供帮助。
关键词：Kif4；驱动蛋白超家族；有丝分裂；肿瘤生物体细胞在自身发展过程中，形成了独特的细胞内运输系统，以维持细胞自身的功能和形态。
这些细胞内运输系统受到微管依赖性的驱动蛋白的空间和时间的调控[1]。
驱动蛋白超家族（kinesin superfamily proteins，KIFs）是一个巨大的马达蛋白家族，它们主要位于真核细胞内，使用微管作为“轨道”来运输“货物”。
驱动蛋白可以转运多种膜性细胞器、mRNA、蛋白质复合体等来保证细胞本身基本功能的发挥[2]。
驱动蛋白Kif4（kinesin superfamily protein 4，Kif4）就是驱动蛋白超家族成员之一[3]，在多种细胞生理活动进程中发挥关键作用，如DNA修复和DNA复制、有丝分裂的调节、染色体凝聚和胞质分裂以及神经元细胞的生长发育等。
随着研究的深入，不断有证据证实因其功能和表达的异常，Kif4在包括肿瘤在内的多种疾病的发生及进展中起到重要作用。
因此，本文就近些年来Kif4的基本功能和相关疾病的关系研究进展做一综述，以期为临床提供参考。
1 驱动蛋白Kif4的基本功能人类Kif4的cDNA是由60bp的5’非翻译区（UTR），一个3696bp的开放阅读框架（ORF）和740bp完整的3’非翻译区（UTR）三部分组成，形成一个可编码140KDa蛋白的1232个氨基酸序列[4]。
骨肉瘤肺转移相关基因的最新研究进展
doi:10.3969/j.issn.1671-1971.2010.04.023骨肉瘤是源于间叶组织以能产生骨样组织的梭形基质细胞为特征的恶性肿瘤，占原发性骨的恶性肿瘤的首位。
随着手术、放疗以及化疗水平的提高，骨肉瘤患者的５年生存率已明显提高，但仍有大部分患者死于肺转移。
骨肉瘤的肺转移涉及一系列过程，包括肿瘤细胞从原发瘤成功地进入循环系统、在循环系统的存活、定居转移灶、浸润周围的组织、转移灶肿瘤血管的生成、肿瘤的生长等[1]。
因此，成功转移的肿瘤细胞必然有别于非转移的肿瘤细胞。
近年来随着肿瘤转移基因调控下的多阶段、多因素、多步骤理论的不断完善，人们对于肿瘤转移这一极为复杂的病理过程有了更进一步的认识。
发现并证实与肿瘤转移过程高度相关的基因已成为肿瘤转移机制研究领域的热点，因为基因研究不但使我们可以更深入了解肿瘤转移机制，更重要的是，这些基因及其产物有可能成为抗肿瘤转移的靶点或观察肿瘤患者预后、转移的指标。
治疗现状和面临难题骨肉瘤是儿童和青少年最常见的原发恶性骨肿瘤。
按照加拿大每年50～75例和美国1000例新发病例计算，中国每年有6000～7000例新病例。
骨肉瘤好发于骨增长时期，起病时无典型临床症状，极易与外伤或生长痛混淆，恶性程度高，早期极有可能发生肺转移，死亡率高，是家庭的灾难，同时也给社会带来极大的负担。
在20世纪70年代化疗出现之前，肢体骨肉瘤虽然以截肢为主，但80%的患者仍不可避免的死于肺转移。
1979年美国纽约纪念医院癌症中心的Rosen提出了新辅助化疗概念，成为骨肉瘤治疗史上的重要里程碑。
新辅助化疗强调大剂量术前化疗消灭潜在的全身微小转移灶，根据术后病理化疗后组织坏死率指导术后化疗，因此保肢代替了大部分截肢，就诊时无肺转移患者五年生存率也由20%升高到50%～60%。
但近30年来，骨肉瘤的治疗没有大的突破，就诊早期出现肺转移的患者，５年生存率仍低于20%；就诊早期无肺转移的患者，５年生存率没有明显提高，且25%～50%的患者在化疗过程中出现了肺转移。
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可能成为骨肉瘤的血清标志蛋白 POLR3F
据同济大学附属第十人民医院骨科的李国东、蔡郑东等研究人员的一项研究显示，RNA
聚合酶Ⅲ多肽F(POLR3F)有可能成为骨肉瘤早期诊断的标志蛋白和骨肉瘤治疗的新靶点。
相关研究成果发表于《中华肿瘤杂志》上。
该研究旨在筛选潜在的骨肉瘤血清蛋白标志物，对候选标志基因POLR3F进行初步生
物信息学分析。
李国东等研究人员分别利用人类基因组芯片和表面增强激光解析电离飞行时间质谱技
术(SELDI-TOF MS)筛选骨肉瘤细胞株以及骨肉瘤患者血清中差异表达的基因和标志蛋白。
运用Link-test统计学方法对比基因芯片和SELDI-TOF MS数据，寻找骨肉瘤的血清诊断标
志蛋白。用MATLAB软件对POLR3F的启动子和3′-UTR区域进行生物信息学分析，寻找
转录因子和微小RNA(miRNA)靶位点。
结果显示，与对照组相比，有653个基因在骨肉瘤细胞中的表达差异倍数在2倍以上。
SELDI-TOF MS显示，在骨肉瘤患者血清中有6个差异表达的质谱峰。通过Link-test分析，
共鉴定出13个差异表达的骨肉瘤血清标志蛋白。POLR3F的启动子区存在保守的信号转导
和转录激活因子3(STAT3)结合位点，在3′-UTR保守区域含有1个miRNA靶位点。
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