生物化学实验报告
生物化学实验报告(实验五)
天津科技大学生物化学实验报告专业：班级：姓名学号组别第组实验项目同组人完成时间年月日【实验名称】《垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质》【实验目的】学习SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS—PAGE)测定蛋白质的分子量的原理和基本操作技术。
【实验原理】蛋白质的性质：三种物理效应：、、。
1、2、3、成绩：教师签字：批阅日期：聚丙烯酰胺凝胶电泳的四个不连续：、、、。
1、2、3、4、蛋白质的分子量与电泳迁移率之间的关系是：Mr=K(10-b·m)logMr=LogK—b·Rm式中Mr——蛋白质的分子量；logK——截距；b——斜率；Rm——相对迁移率。
实验证明，蛋白质分子量在15,000～200,000的范围内，电泳迁移率与分子量的对数之间呈线性关系。
蛋白质的相对迁移率Rm＝蛋白质样品的迁移距离／染料(溴酚蓝)迁移距离。
这样，在同一电场中进行电泳，把标准蛋白质的相对迁移率与相应的蛋白质分子量对数作图，由未知蛋白的相对迁移率可从标准曲线上求出它的分子量。
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法测定蛋白质的分子量具有简便、快速、重复性好的优点，是目前一般实验室常用的测定蛋白质分子量的方法。
【材料与设备】1.仪器设备DYCZ-24D垂直板电泳槽(北京市六一仪器厂),电泳仪,微量移液器2.材料烧杯(250mL、500mL)、量筒(500mL、250mL)、培养皿3.主要试剂（1）标准蛋白混合液：内含磷酸化酶(Mw94,000)，牛血清蛋白(Mw67,000)，肌动蛋白(Mw43,000)，磷酸酐酶(Mw30,000)和溶菌酶(Mw14,000)（2）30％凝胶贮备液：Acr30g，Bis0.8g,加蒸馏水至100mL（3）分离胶缓冲液(1.5mol／L):Tris18.15g,加水溶解,6mol/L HCl调pH8.9,定容100mL（4）浓缩胶缓冲液(0.5mol／L):Tris6g,加水溶解，6mol/L HCl调pH6.8，并定容到100mL（5）5×电极缓冲液(pH8.3)：SDS lg，Tris6g，Gly28.8g，加水溶解并定容到1000mL。
生物化学的实训报告总结
一、实训背景随着科学技术的飞速发展，生物化学作为一门研究生命现象及其本质的自然科学，在医学、农业、食品工业等领域发挥着越来越重要的作用。
为了更好地将理论知识与实际操作相结合，提高我们的动手能力和实践能力，我们参加了生物化学实训课程。
本次实训历时两周，通过一系列实验操作，使我们深入了解了生物化学的基本原理和方法。
二、实训目的1. 巩固和深化生物化学的基本理论知识；2. 掌握生物化学实验的基本操作技能；3. 培养我们的团队协作能力和创新意识；4. 提高我们的实验设计、分析问题和解决问题的能力。
三、实训内容本次实训主要包括以下内容：1. 生物化学实验基本操作：包括实验器材的使用、实验操作的规范、实验数据的记录和处理等；2. 蛋白质实验：如蛋白质的盐析、凝胶电泳、SDS-PAGE等；3. 酶实验：如酶活性测定、酶的纯化、酶的动力学等；4. 糖类与脂质实验：如糖类的显色反应、脂质的提取与鉴定等；5. 核酸实验：如DNA的提取、RNA的分离、PCR技术等。
四、实训过程1. 实验准备：在实训开始前，我们首先了解了实验原理、操作步骤和注意事项，并对实验器材进行了检查和清洁。
2. 实验操作：在实验过程中，我们严格按照实验步骤进行操作，注意观察实验现象，并及时记录实验数据。
3. 实验分析：实验结束后，我们对实验数据进行整理和分析，与理论值进行对比，找出误差原因，并提出改进措施。
4. 实验报告撰写：根据实验结果，我们撰写了实验报告，对实验过程、实验结果和实验结论进行了详细描述。
五、实训收获1. 理论知识与实践相结合：通过实训，我们深刻体会到理论知识的重要性，同时，也认识到实验操作技能在实际工作中的应用价值。
2. 实验技能的提高：在实训过程中，我们熟练掌握了生物化学实验的基本操作技能，为今后的学习和工作打下了坚实的基础。
3. 团队协作能力的提升：在实训过程中，我们学会了与团队成员相互配合、共同完成任务，提高了我们的团队协作能力。
生物化学实验报告
生物化学实验报告专业使用供检验护理班级姓名郑州大学护理学院实验一血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳[目的][原理][仪器组成][操作与结果][结果粘贴]实验二酶的特异性[目的][原理][操作与结果]将以上1、2、3号试管置于37℃水浴箱保温10分钟。
然后向各管中加班氏试剂20滴，沸水中煮沸10分钟，取出勿振摇试管，观察结果并记录。
[分析]三管结果及原因。
实验三温度、pH、激活剂、抑制剂对酶反应的影响[目的][原理][操作与结果]（一）温度对酶反应的影响[分析各管的颜色变化原因]（二）pH对酶反应的影响[分析各管的颜色变化原因]（三）激活剂、抑制剂对酶反应的影响[分析各管的颜色变化原因]实验四 721型分光光度计的使用[目的][原理][构造][使用]实验五血清葡萄糖的测定[目的][原理][操作]将上述各管混匀，置于37℃水浴箱中保温15分钟，取出分别倒入0.5cm的比色杯中，选择波长λ=505nm，用空白管调节“0”及“100”，分别读取标准管及测定管的吸光度A标、A测。
[计算][临床意义]实验六琥珀酸脱氢酶的作用及抑制[目的][原理][操作]取三支试管按下表操作[思考]1、液体石蜡起什么作用？2、各管颜色变化的原因？实验七肝脏中酮体的生成作用[目的][原理][操作][分析各管颜色变化的原因]实验八血浆CO2CP测定[目的][原理][操作][计算][意义]实验九血清谷丙转氨酶测定[目的][原理][操作]将空白管、测定管分别混匀，置入37℃水浴箱保温30分钟，取出加入2.4二硝基笨肼的盐酸溶液各0.5ml混匀后再置入37℃水浴保温20分钟。
取出加入0.4M的NaOH5ml，混匀。
选择波长λ=505nm，用空白管调节“0”及“100”，读取测定管的吸光度A测。
查标准曲线。
[结果][意义]实验十血清钾、钠测定[目的][原理][操作]1、钠测定计算2、钾测定计算[思考题]血清K+、N a+ 测定有何临床意义？。
实验报告生物化学实验结果与分析
实验报告生物化学实验结果与分析实验报告：生物化学实验结果与分析本次实验旨在研究蛋白质的组成和功能。
通过对不同样本进行定性和定量分析，我们探索了不同蛋白质的特性和潜在应用。
以下是实验结果和分析。
1. 实验方法我们使用了多种技术和试剂来分析蛋白质样本。
首先，我们采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）方法，将不同样本中的蛋白质分离。
接着，我们使用染色剂对蛋白质进行染色，并通过分析染色带的迁移距离和颜色密度，评估蛋白质的相对含量。
最后，我们利用质谱技术，鉴定和分析蛋白质的序列和结构。
2. 实验结果与分析2.1 蛋白质组成分析在SDS-PAGE实验中，我们观察到每个样本中的多个蛋白质带。
根据迁移距离和颜色密度，我们可以初步判断不同样本中蛋白质的相对含量和分布情况。
通过与已知标准品进行比对，我们鉴定了几种主要蛋白质。
进一步的质谱分析结果显示，这些蛋白质具有不同的氨基酸序列和结构。
2.2 蛋白质功能分析针对不同样本中的蛋白质，我们通过文献研究和功能检测，评估了它们可能的功能和应用。
例如，在样本A中，我们发现一种具有抗氧化性质的蛋白质，可以用于制备抗氧化剂；在样本B中，我们发现一种具有抗菌活性的蛋白质，对抗多种细菌有显著抑制作用。
这些发现为进一步研究和应用这些蛋白质提供了潜在的方向。
2.3 蛋白质结构与功能关系通过蛋白质质谱分析和文献研究，我们尝试探究蛋白质结构与功能之间的关系。
通过比对不同样本中蛋白质的结构，我们发现不同结构和序列的蛋白质可能具有不同的功能和特性。
例如，在一些样本中，我们发现含有特定结构域的蛋白质对特定生物过程具有重要影响。
这一发现为进一步研究和改造蛋白质提供了理论基础。
3. 结论和展望通过本次实验，我们成功分析了不同样本中蛋白质的组成和功能。
我们发现不同样本中存在多种蛋白质，并且这些蛋白质具有不同的氨基酸序列、结构和功能。
这为进一步研究和应用蛋白质提供了基础和方向。
然而，本次实验还存在一些限制，如样本数量不足和分析深度有限等。
生物化学实训课实验报告
一、实验名称：蛋白质分子量测定——凝胶层析法二、实验目的：1. 理解凝胶层析法的原理和操作步骤。
2. 掌握蛋白质分子量测定的方法。
3. 分析实验结果，并探讨影响实验结果的因素。
三、实验原理：凝胶层析法是一种分离和纯化蛋白质的方法，其原理是利用凝胶的分子筛作用，根据蛋白质分子大小不同进行分离。
凝胶是一种多孔材料，其孔径大小与蛋白质分子大小相匹配，使得小分子蛋白质能够进入凝胶内部，而大分子蛋白质则无法进入，从而实现分离。
四、实验材料与试剂：1. 蛋白质样品：如鸡蛋清、血清等。
2. 凝胶：如聚丙烯酰胺凝胶、琼脂糖凝胶等。
3. 电泳缓冲液：如Tris-HCl缓冲液、硼酸缓冲液等。
4. 标准蛋白质分子量对照品：如已知分子量的蛋白质。
5. 电泳仪、电泳槽、紫外灯等。
五、实验步骤：1. 准备凝胶：将凝胶溶解在适当浓度的缓冲液中，倒入模具中，制成凝胶板。
2. 准备样品：将蛋白质样品与适量的电泳缓冲液混合，加入样品缓冲液，制成样品溶液。
3. 制备标准蛋白质分子量对照品：将已知分子量的蛋白质溶解在电泳缓冲液中，制成标准蛋白质溶液。
4. 加样：将样品溶液和标准蛋白质溶液分别加入凝胶板上的孔中。
5. 电泳：将凝胶板放入电泳槽中，加入电泳缓冲液，接通电源，进行电泳。
6. 显色：电泳完成后，将凝胶板取出，放入含有显色剂的溶液中，进行显色。
7. 测量：用紫外灯照射凝胶板，观察蛋白质条带的位置，并记录下蛋白质分子量。
六、实验结果与分析：1. 通过观察电泳图谱，可以清晰地看到蛋白质条带，其中标准蛋白质分子量对照品的条带位置已知，可以用来判断样品蛋白质分子量的大小。
2. 实验结果显示，样品蛋白质分子量分布较广，存在多个分子量大小不同的蛋白质。
3. 通过比较样品蛋白质条带与标准蛋白质条带的位置，可以估算出样品蛋白质的分子量。
4. 影响实验结果的因素包括凝胶的制备、电泳条件、显色剂的选择等。
七、讨论与心得：1. 凝胶层析法是一种常用的蛋白质分离和纯化方法，具有操作简单、分离效果好等优点。
生物化学综合实验报告
实验目的：1、学会和掌握核酸制备的一些基本操作和方法，并通过分光光度法和电泳等实验技术研究核酸的性质；2、学习用紫外分光光度计和水平琼脂糖凝胶电泳检测DNA的纯度、浓度的原理与方法。
3、掌握利用限制性内切酶酶切DNA的原理和方法,培养学生利用限制性内切酶位点图谱进行实验设计的能力；4、学会通过琼脂糖凝胶电泳法分析不同材料之间DNA的亲缘关系。
关键词：核酸制备，CTAB法，限制性内切酶，分光光度法，电泳Abstract：1.The extraction of plant DNA.2.Determination of plant DNA purityand concentration.3.Plant DNA restriction endonucleaseenzymatic.4.DNA agarose gel electrophoresis toseparate DNA fragments.5.Studies on the relationships of plantDNA.Key words:Nucleic acid preparation, CTAB, Restriction endonuclease, Spectrophotometry, Electrophoesis.一．黄豆芽DNA的提取1.材料：正在生长的黄豆芽2.主要仪器和用具：（1）高速冷冻离心机（16 000 r/min）;(2) 恒温水溶；（3）紫外可见光分光光度计；（4）电泳仪及微型电泳槽；（5）电冰箱；（6）凝胶成像系统或手提式紫外检测仪；（7）微波炉；（8）电子天平；（9）纯水系统；（10）1.5 mL离心管及离心架；（11）微量移液管10 uL、200uL、1 000uL各1支及各量程吸头；（12）常用玻璃仪器及滴管等；（13）一次性塑料手套。
3. 试剂（1）0.1 mol/LTris-HCl (pH8.0)缓冲液（0.607gTris碱溶于40ml灭菌双蒸水。
生物化学实验报告
实验名称：蛋白质分子量测定——凝胶层析法实验日期：2023年10月26日实验目的：1. 理解凝胶层析法的原理和操作步骤。
2. 通过凝胶层析法测定蛋白质的分子量。
3. 掌握蛋白质分离和鉴定技术。
实验原理：凝胶层析法，也称为分子筛层析法或排阻层析法，是一种基于分子大小差异进行分离的方法。
凝胶是一种多孔材料，其孔径大小不一，能够根据分子的大小将混合物中的不同组分分离。
在凝胶层析中，大分子蛋白质不能进入凝胶内部的孔洞，因此沿着凝胶颗粒间的缝隙快速移动，而小分子蛋白质则可以进入凝胶内部，移动速度较慢。
通过比较不同蛋白质在凝胶层析中的迁移距离，可以推断其分子量。
实验器材与试剂：- 凝胶层析柱- 凝胶- 蛋白质样品- 标准蛋白质分子量对照品- 缓冲液（pH 7.4）- 标记笔- 移液器- 洗脱液- 紫外线检测仪实验步骤：1. 准备凝胶层析柱，用标记笔标记起始线。
2. 将凝胶加入层析柱中，使其填充均匀，注意避免气泡。
3. 准备蛋白质样品和标准蛋白质对照品，用缓冲液稀释至适当浓度。
4. 用移液器将蛋白质样品和标准蛋白质对照品分别加入层析柱的起始线处。
5. 加入洗脱液，调节流速，保持洗脱液面始终高于凝胶表面。
6. 收集洗脱液，每隔一定时间取样，用紫外线检测仪检测蛋白质的吸收峰。
7. 根据标准蛋白质对照品的分子量和迁移距离，绘制标准曲线。
8. 根据样品的迁移距离和标准曲线，计算样品的分子量。
实验结果：- 蛋白质样品和标准蛋白质对照品在凝胶层析中的迁移距离分别为：样品A 2.5 cm，样品B 3.0 cm；标准蛋白质对照品1 2.0 cm，标准蛋白质对照品2 3.5 cm。
- 根据标准曲线，样品A的分子量为 10 kDa，样品B的分子量为 15 kDa。
讨论与分析：本实验成功地将蛋白质样品与标准蛋白质对照品分离，并测定了样品的分子量。
凝胶层析法是一种简单、有效的蛋白质分离和鉴定技术，广泛应用于生物化学和分子生物学研究中。
第五届 生物化学实验技能大赛实验报告
第五届生物化学实验技能大赛实验报告制备蝇蛹壳聚糖工艺改良及其理化性质研究Improved Technology of Extract Chitosan from the Pupa and Study the Physical Chemistry Character制备蝇蛹壳聚糖工艺改良及其理化性质研究郭诗静，金昂丹，梁剑云华南农业大学 生命科学学院（注：按姓名字母排序，不分先后）摘要：利用蝇蛹作为实验原料,通过改良后的酸法脱灰分,碱法脱蛋白质和脂肪制成甲壳素后,通过热浓碱法脱乙酰基处理提取壳聚糖。
改良的工艺缩短了加工的时间，但是也保证了质量。
提取过程中分别使用室温、加热、超声波三种不同的方法脱蛋白,脱色方法也一改以往用有机溶剂的方法，改用双氧水；干燥恒重法测定其水分,旋转黏度计测定其黏度,通过对成品进行这些理化性质的检测。
实验得沸水的处理效果最好,超声细胞粉碎机对提取有一定点作用,双氧水的脱色效果不错,可以进行进一步研究和推广。
关键词：蝇蛹 甲壳素 壳聚糖 水分 黏度 脱乙酰度目录1 前言 (04)1.1 甲壳素与壳聚糖及其研究状况 (04)1.2 家蝇与提取工艺 (05)1.3 超声波 (05)2 可行性分析 (06)3 实验目的 (06)4 实验原理 (06)5 实验设备 (07)5.1 仪器 (07)5.2 玻璃器具 (07)6 实验材料及试剂 (07)6.1 原材料 (07)6.2 试剂 (08)6.3 试剂的配制 (08)6.4 材料的处理 (08)7 本实验的制作流程 (11)8 制作工艺比较 (15)9 各种理化性质方法比较 (15)9.1 用干燥恒重法测定其水分 (15)9.2 用旋转黏度计测定其黏度 (16)9.3 用酸碱滴定法测定游离氨基和脱乙酰度 (17)10 结论 (18)11 注意事项 (18)12 优点 (18)参考文献 (19)英文摘要 (20)附录 (21)感想 (22)1前言1.1 甲壳素(chitin)与壳聚糖(chitosan) 及其研究状况壳聚糖(chitosan)在自然界中通常以甲壳素(chitin)的形式存在。
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生物化学实验报告
供检验护理专业使用
班级
姓名
郑 州 大 学 护 理 学 院
实验一 血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳
[目的]
[原理]
[仪器组成]
[操作与结果]
[结果粘贴]
实验二 酶的特异性
[目的]
[原理]
[操作与结果]
加入物 1号试管 2号试管 3号试管
pH6.8缓冲液
20 20 20
1%淀粉
10 10 -
1%蔗糖
- - 10
稀释唾液
10 - 10
煮沸唾液
- 10 -
结果(颜色)
将以上1、2、3号试管置于37℃水浴箱保温10分钟。
然后向各管中加班氏试剂20滴，沸水中煮沸10分钟，
取出勿振摇试管，观察结果并记录。
[分析]三管结果及原因。
实验三 温度、pH、激活剂、抑制剂
对酶反应的影响
[目的]
[原理]
[操作与结果]
（一）温度对酶反应的影响
加入物
1 2 3
1%淀粉 10滴 10滴 10滴
pH6.8缓冲溶液 20滴 20滴 20滴
稀释唾液 10滴 10滴 10滴
温度 0℃ 37℃ 100℃
在上述温度下放置10分钟后，每管各加入稀碘液1滴
结果
[分析各管的颜色变化原因]
（二）pH对酶反应的影响
加入物
1 2 3
pH5.0缓冲溶液 20滴
- -
pH6.8缓冲溶液 - 20滴
-
pH8.0缓冲溶液 - - 20滴
1%淀粉 10滴 10滴 10滴
稀释唾液 10滴 10滴 10滴
上述各试管混匀置于37℃水浴箱中保温10分钟
稀碘液 1滴 1滴 1滴
结果（颜色）
[分析各管的颜色变化原因]
（三）激活剂、抑制剂对酶反应的影响
加入物
1 2 3 4
pH6.8缓冲溶液 20滴 20滴 20滴 20滴
1%淀粉 10滴 20滴 20滴 20滴
蒸馏水 10滴
- - -
1%NaCl - 10滴 - -
1%CuSO4 - - 10滴 -
1%Na2SO4 - - -
10滴
稀释唾液 10滴 10滴 10滴 10滴
上述各试管混匀置于37℃水浴箱中保温10分钟
稀碘液 1滴 1滴 1滴 1滴
结果（颜色）
[分析各管的颜色变化原因]
实验四 721型分光光度计的使用
[目的]
[原理]
[构造]
[使用]
实验五 血清葡萄糖的测定
[目的]
[原理]
[操作]
加入物 空白管 标准管 测定管
蒸馏水
10μl - -
葡萄糖标准液5.55mmol/L
- 10μl -
血清
- - 10μl
酶酚试剂
1.5ml 1.5ml 1.5ml
将上述各管混匀，置于37℃水浴箱中保温15分钟，取
出分别倒入0.5cm的比色杯中，选择波长λ=505nm，用空白
管调节“0”及“100”，分别读取标准管及测定管的吸光度
A标、A测。
[计算]
[临床意义]
实验六 琥珀酸脱氢酶的作用及抑制
[目的]
[原理]
[操作]取三支试管按下表操作
加入物
1 2 3 4
匀浆液 10滴 10滴 - 10滴
1.5%琥珀酸钠 10滴 10滴 10滴 10滴
1%丙二酸钠 - 10滴 10滴 10滴
蒸馏水 20滴 10滴 20滴
-
0.02%甲稀兰 1滴 1滴 1滴 1滴
各管混匀,加入少量液体石蜡覆盖表面,置37℃水浴保温
15-20分钟,取出勿振摇,观察。
结果（颜色）
[思考]
1、液体石蜡起什么作用？
2、各管颜色变化的原因？
实验七 肝脏中酮体的生成作用
[目的]
[原理]
[操作]
加入物
1 2 3 4
肝匀浆
20 - - -
肌匀浆
- 20 - 20
蒸馏水
- - 20 30
pH7.6 磷酸盐缓冲液
15 15 15 15
洛克液
15 15 15 15
丁酸
30 30 30
37℃保温30分钟后取出各加15%三氯醋酸10滴，静止数分
钟，各取出清液数滴于显色板上，加入显色粉显色。
结果（颜色）
[分析各管颜色变化的原因]
实验八 血浆CO2CP测定
[目的]
[原理]
[操作]
[计算]
[意义]
实验九 血清谷丙转氨酶测定
[目的]
[原理]
[操作]
加入物 空白管 测定管
蒸馏水
0.1ml -
血清
- 0.1ml
基质液
0.5ml 0.5ml
将空白管、测定管分别混匀，置入37℃水浴箱保温30分钟，
取出加入2.4二硝基笨肼的盐酸溶液各0.5ml混匀后再置入
37℃水浴保温20分钟。取出加入0.4M的NaOH5ml，混匀。
选择波长λ=505nm，用空白管调节“0”及“100”，读取
测定管的吸光度A测。查标准曲线。
[结果]
[意义]
实验十 血清钾、钠测定
[目的]
[原理]
[操作]
1、钠测定
计算
2、钾测定
计算
[思考题]血清K+、Na+ 测定有何临床意义？
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