马铃薯早疫病病原菌的分离鉴定及品种早疫病抗性评价
马铃薯早疫病的病害防治技术创新
马铃薯早疫病的病害防治技术创新马铃薯早疫病，是由铜绿假单胞菌（Phytophthora infestans）引起的一种严重的病害，对马铃薯种植业造成了巨大的损失。
为了有效防治马铃薯早疫病，农业科学家们一直在努力探索创新的病害防治技术。
本文将介绍几种创新的技术，旨在为马铃薯种植者提供有效的防治方法。
1. 遗传改良遗传改良是一种有效的马铃薯早疫病病害防治技术。
通过选择遗传抗性强的品种或进行基因转导，可以增强马铃薯对早疫病的抵抗力。
近年来，研究人员成功地利用基因编辑技术，使马铃薯获得了更强的抗早疫病能力。
2. 病害监测和预警病害监测和预警系统是早期发现和及时应对马铃薯早疫病的关键。
利用现代农业技术，如遥感技术、卫星图像分析等，可以对马铃薯田地进行实时监测，及早发现病害发生的迹象，从而采取相应的防治措施。
3. 精准施药技术传统的农业施药方式往往存在浪费和污染的问题。
而精准施药技术可以将药物精确地投放到病害生长的区域，减少药物的使用量和环境污染。
利用现代农业机械和无人机技术，可以实现高效的精准施药，提高防治效果。
4. 生物防治技术生物防治技术是一种环保而有效的防治马铃薯早疫病的方法。
通过引入天敌和益生菌等有益微生物，可以抑制病原菌的生长和繁殖，提高马铃薯的免疫力。
一些研究表明，使用生物防治技术可以显著减少化学农药的使用量，并降低对环境的损害。
5. 防疫措施的完善除了技术创新，完善的防疫措施也是有效防治马铃薯早疫病的重要手段。
建立完善的检疫制度，对马铃薯种薯和种植资材进行全面检查和监管，可以有效减少病害的传播。
此外，加强对种植者的培训和教育，提高他们对病害防治知识的了解和应用水平，也是预防早疫病发生的关键。
总之，随着科技的不断进步和农业技术的不断创新，马铃薯早疫病的病害防治技术也在不断发展。
遗传改良、病害监测和预警、精准施药技术、生物防治技术以及防疫措施的完善都为马铃薯种植者提供了更多有效的选择。
希望这些创新技术能够广泛应用于实际生产中，为马铃薯产业的健康发展做出贡献。
华北地区马铃薯贮藏病害种类调查及病原菌鉴定
ＴＨＥ ｌ ＮＶＥ Ｔｌ Ｔｌ ＯＴ Ｏ ＳＥ Ｓ ＧＡ ＯＮ ＯＦ Ｐ ＡＴ ＤＩ ＡＳＥ ＯＦ ＮＯＲ ＴＨ ＣＨＩ ＮＡ
ＲＥ ＯＮ ＯＦ Ｓ ＧＩ ＴＯＲＡＧＥ ＡＮＤ ｌ ＤＥＮ Ｆ ＣＡＴ ＯＮ ＯＦ Ｐ ＴＨＯＧＥＮＳ ＴＩ ｌ Ｉ Ａ
第 ３ 卷 第 ４
古
农
业
大
学
学
报
Ｖ０． Ｎｏ ４ １ ３１ ．
Ｊ ｕ ａ ｏ Ｉ ｎ ｒ ｏ ｒ ｌ ｆ ｎ ｅ Ｍｏ ｇ ｌ Ａｇ ｃ ｌ ｒ ｌ Ｕｍｖ ｍｉ ｎ ｎｏｉ ａ ｉ ｒ ｕ ｔ ａ ｕ ｅ ｔ ｙ
Ｏ ｔ２ １ ｃ． ０ ０
华北 地 区马 铃薯 贮藏 病 害种 类调 查 及 病原 菌鉴 定
石 立航 ， 胡 俊 ， 蒙 美莲 ， 刘宝玉
０ ０ １） １０ ９
（ 内蒙古农 业大学农学院 ， 呼和浩特
摘 要 ： ２ ０ 年 ５月 ～ ０９年 ５月 在 华 北地 区 的察 右 前 旗 、 北 县 、 宁 区、 同市 、 川 县 、 云 县 、 玉 县 进 行 了 ０８ ２０ 张 集 大 武 左 右 马铃薯贮藏期病害 的调查 ， 并对 病样 的病原菌进行 了分 离和鉴定。调查结果表 明， 贮藏期 马铃 薯有 ４种 真菌病害和 ３种细 菌病害 ， 分别 为： 干腐病 （ ｕａｉｍ ｓ ． 、 Ｆ ｓｒ ｐ ） 黑痣病（ ｈｚｃ ｎａｓｌｎ） 晚疫病 （ ｈ ｔ ｈｈｒ ｆｓ ｎ） 早疫病 ｕ ｐ Ｒ ｉ ｔ ｉ ｏａ ｉ、 ｏｏ Ｐ ｙｏ ｔｏａｉ ｅ ａ ｓ 、 ｐ ｎ ｔ （ ｌｒａｉ ｏａ ｉ ， 环 腐 病 （ ｌｖｂｃ ｒ ｍｉ ｉａ ｅｓ ｕｓ． ｓ ｅ ｏｉ ｓ 、 软 腐 病 （ ｒ ｉｉ ｃ ｒｔ ｏａ ｖ ｒ Ａｔ ｎ ｒ ｓｌｎ） ｅ ａ Ｃａｉａｔ ｃ ｇ ｎｎｅ ｓｂｐ ｅ ｄ ｎｃ ） ｅ ｈ ｐ ｕ Ｅ ｗｎａ ａｏ ｖｒ ａ， ｏ
马铃薯常见病害防治技术
马 铃薯 黑胫 病 主要 依 靠 带 菌 种 薯 传 播 ，通 过 伤 口侵 人 。 其 发病 与温 度 和 湿 度 有 密 切 关 系 ， 高 温 利 于 发病 ， 土 壤 过 湿 时 也 易 引 起薯 块 大 批 腐 烂 ， 造成严重的侵染。
２ ． 防治 措 施 （ １ １ 选 用 无 病 种 薯 或幼 壮薯 整薯 播 种 。
、
马 铃 薯 早 疫 病
１ ． 症 状 及 发 生 规 律
马铃 薯 早 疫 病 病 原 菌 属 半 知茵 类 。 早 疫 病 菌 源 可 以在 植
现 出不 正 常 的 、 凹陷的 、 大小不一的 、 紫 褐色 的 区域 。
２ ． 防 治措 施
株 残体 或 其 他 寄 主植 物 上 生 存 。病 菌在 潮 湿 的 情 况 下（ 降雨 、 灌溉 、 长 时 问 露 水１ ， 在 受 感染 的 植物 表 面产 生孢 子 ， 其 存 活 温 度范围广， 并 南风 力 传 播 。早 疫 病 产 生 的孢 子 比 晚疫 病 少， 通 常 比晚 疫 病 发生 早 ， 但 其 生 长传 播 却 更 少 地 依 赖 于 叶片 表 面 的 长时 间 潮 湿 而且 发展 速度 较 慢 。 早 疫病 的受 害 部 位 最 初症
长， 保 证植株 需要的水肥 条件， 促 进 植 株 生 长健 壮 ， 提 高 其 抗
病能力。
小， 心 叶黄 化 、 变小、 卷曲， 茎基部及根部变黑 、 腐烂 。 腐烂 处 有 臭味。 病 株 极 易 从 土 中 拔 出， 多半死亡。 病 薯 从 脐部 开 始 变 黑 ，
向髓 部 呈 放 射 状 扩 展 ， 并产生黏液， 有臭味。
马 铃 薯 晚 疫 病 的症 状 在 不 同 地 区 及气 候 条 件 下 各 不 相
马铃薯常见病虫害防治对策
B i n g h a i f a n g z h i马铃薯作为较多民众都喜欢的一种食物，其具备较高的营养物质，同时自身适应土壤与环境的能力相对强一些，因此成为了我国重要农作物之一。
但是在种植过程中难免会遭受到病虫害的侵扰，造成马铃薯产量与质量的不断下降，所以应加强防治技术的水平，提升种植农民的经济收入。
一、马铃薯的常见病虫害1、病害①早疫病马铃薯早疫病爆发原因，是真菌侵入而造成的。
主要感染位置是：一，植株的叶片位置，在感染了茄链格孢病菌之后，会在其表面呈现出多个黑褐色的斑点，在圆形的中间存在着同心轮纹。
二，块茎位置在感染的时候同样会出现与叶子同样颜色的圆状病斑，并且得病与健康部分之间的分界线清晰明了。
不仅如此，在叶片表面留有水珠，并且温度在26摄氏度左右时，会让病菌极易进入到健康植株内部，对其产生威胁。
②晚疫病晚疫病的产生是因真菌入侵感染造成的，疫病霉菌进入健康植株体内，来让其产生疾病，该病情是一种破坏力较为强劲的疾病。
主要危害位置有：一，地面上的茎干与叶柄，在爆发疾病时会呈现出条形状的褐色斑点。
二、叶片，会显示出圆形的绿褐色病斑，并且周围还具有绿色的晕圈。
三。
块茎在感染疫霉病菌时，会出现向内凹进去的斑。
感染速度较快的是叶子位置，能够在短时间内快速传播，半个月左右的时间，便可将全部植株感染上。
2、虫害①蚜虫在马铃薯种植区域内出现的蚜虫，主要是桃蚜，通过吸取并食用叶片中的汁液，从而对植株造成危害。
害虫体型呈现细小、椭圆、绿色的状态，在田间温度能够达到20摄氏度时，对该虫子的繁殖能力有一定帮助，使其能够大面积的在田间爆发。
②块茎蛾马铃薯块茎蛾是种植区域内爆发次数多的害虫之一，在其幼虫期间会对块茎进行吸食，造成多个弯曲的孔洞，从而对其重要的根茎部位造成严重伤害。
该害虫成年期时，体长能够达到5-6毫米左右，整体呈现出的颜色为灰褐色，具有较强的趋光性，大多数生存的位置是山区或丘陵地带等位置，幼虫每年集中在5月至10月之间进行大面积损坏，严重时会造成整片区域内减产四分之一。
马铃薯几种主要病虫害及防治
B i n g h a i f a n g z h i马铃薯是全球第四大重要的粮食作物，在粮食作物中仅次于小麦、稻谷和玉米。
中国最大的马铃薯种植基地在黑龙江省，独特的地理位置、气候条件和自然环境使产出的马铃薯备受市场欢迎和好评。
生产中及时有效的防治马铃薯病虫害，是增收增效的基础措施之一。
一、马铃薯主要病虫害1、早疫病。
马铃薯早疫病是生产中常见的一种病害，主要危害叶片，叶柄、块茎也可受害。
①发病症状。
叶片发病初期，病叶上生出圆形褐色斑点。
发展后形成边缘不明显的褐色至暗褐色圆形或近圆形病斑，有的病斑外缘有黄色晕圈。
湿度大时病斑上生有黑色霉状物。
后期多个病斑连片形成不规则状的大枯斑，病叶局部枯死，严重时全叶枯死。
叶柄、茎部染病，初期生出稍凹陷状的褐色线条斑。
发展后呈椭圆形的灰褐色病斑。
后期茎、叶枯死。
薯块染病，初期出现不规则稍凹陷的暗褐色病斑，病部皮下薯肉呈褐色干腐状。
②发病规律及发病条件。
早疫病多从植株下部叶片开始发病，并逐渐向上部蔓延。
病菌在病残株、土壤、病薯上越冬，是翌年的主要侵染源。
在-35～-45℃下病残株上的病菌也可存活。
病菌通过风雨进行传播，从气孔、伤口或直接侵入寄主内部组织，引起发病。
早疫病多在7～8月雨季发生，雨水多，湿度大，多雾多露，地势低洼，排水不良，密度大，通透性不佳，管理粗放等都会引起病害的高发。
适宜发病的温度24～30℃，相对湿度为80％以上。
2、晚疫病。
晚疫病是一种危害马铃薯的重要病害，主要危害叶、茎、薯块，一般年份可造成20～40%的减产，严重年份减产高达50%以上。
马铃薯晚疫病在我国西南地区、东北、华北与西北地区均有发生，尤其是在多雨潮湿的年份。
2020年9月15日，马铃薯晚疫病被农业农村部列入一类农作物病虫害名录。
①发病症状。
晚疫病主要危害叶、茎、薯块。
叶片发病初期，病叶上出现不规则状的黄褐色斑点。
潮湿条件下病斑迅速扩大，边缘为水浸状的并生有一圈白霉的大病斑。
病叶背部密布白霉。
马铃薯主要病害及防治措施
马铃薯主要病害及防治措施作者：卜东一杨海东来源：《农民致富之友》2014年第09期一、马铃薯病毒病1、症状及发生规律病毒病在田间靠昆虫(主要是蚜虫)或叶片接触而传播，马铃薯感病后植株畸形、矮小，产量降低，病毒病危害可引起马铃薯种薯退化。
病毒病主要表现为皱缩花叶病和卷叶病两种。
（一）皱缩花叶病。
叶片上出现深绿和浅绿相间的斑驳，叶片缩小，叶尖向下弯曲，全株矮化。
（二）卷叶病。
叶片的叶缘向上卷曲，严重时呈圆筒状，病叶较健叶小，叫色较淡，有时叶背呈红色或紫红色。
2、防治措施（1）选用脱毒种薯。
（2）用种子处理剂—高巧或锐劲特作包衣处理，从而减少病毒病的传播。
（3）出苗前后及时防治蚜虫主要利用艾美乐、康福多等化学药剂杀灭传毒昆虫。
（4）改进栽培措施。
包括留种田远离茄科菜地；及早拔除病株；实行精耕细作，高垄栽培，及时培土；避免偏施过施氮肥，增施磷钾肥；注意中耕除草；控制秋水，严防大水漫灌。
（5）发病初期喷洒20％病毒A可湿性粉剂500倍液、5％菌毒清水剂500倍液、15％病毒必克可湿性粉剂500一700倍液。
二、马铃薯早疫病1、症状及发生规律马铃薯早疫病病原菌属半知菌类。
早疫病菌源可以在植株残体或其他寄主植物上生存。
病菌在潮湿的情况下(降雨、灌溉、长时间露水),在受感染的植物表面产生孢子,其存活温度范围广,并由风力传播。
早疫病产生的孢子比晚疫病少,通常比晚疫病发生早,但其生长传播却更少地依赖于叶片表面的长时间潮湿而且发展速度较慢。
早疫病的受害部位最初症状是有角的黑色小斑点,随着受害部位的扩大成熟,病斑逐渐变成一系列凸凹不平的同心圆,在叶缘处有褪色的枯黄组织。
马铃薯早疫病的症状通常在植株处于逆境时期易发生,而这些逆境经常来自于缺肥(如缺氮及其他营养)、气温偏高、植株缺水、生长衰弱。
2、防治措施（1）加强栽培管理。
要尽可能减少马铃薯在逆境状况下生长,保证植株需要的水肥条件,促进植株生长健壮,提高其抗病能力。
（2）收获后深耕灭茬,减少翌年初侵染源。
马铃薯病害的发生及防治
马铃薯病害的发生及防治摘要介绍了七台河市马铃薯主要病害晚疫病、病毒病和早疫病的危害特点和发生条件，提出防治方法，以供马铃薯种植户参考。
关键词马铃薯病害；发生；防治中图分类号 s435.32 文献标识码b文章编号 1007-5739（2009）03-0129-011马玲薯晚疫病1.1症状马铃薯的叶、茎、块茎均能受害。
病害首先发生在植株的下部或中部叶片，然后逐渐向上发展。
叶片发病时，开始在叶尖或叶缘出现暗绿色水渍状斑点，病斑边缘不明显。
气候潮湿时，病斑迅速扩大，叶背病斑边缘生出一圈白色霉状物，严重时病斑扩展到主脉和叶柄，叶片萎蔫下垂。
天气干燥时，病斑干枯变褐，边缘不产生白霉。
茎部受害，初呈稍凹陷的条斑，气候潮湿时，表面也生白霉，薯块感病，表面稍凹陷，病部形成淡褐色或灰褐色不规则形病斑，切开可见薯肉变成褐色，潮湿时亦可长出白霉。
1.2侵染循环此菌主要以菌丝体在薯块中越冬，带病种薯播种后，因已受菌丝侵染，除一部分薯芽失去发芽能力或未出土即死亡外，个别受侵的薯芽出土后，在茎上形成条斑，成为田间中心病株。
一般在7月中旬以后在田间出现中心病株。
当环境潮湿多雨时，中心病株的病斑上所产生的孢子囊，通过气流、雨溅传播，病菌喜高湿条件，相对湿度95%以上，气温12~18℃条件下产生孢子囊。
当低温多雨、空气潮湿时，或温暖多雾及结露条件下，气温在10~15℃，发病严重；天气晴燥，空气湿度在75%以下，病害发生轻或不发生。
马铃薯以芽期最易感病，以后抗病力逐渐加强，直到现蕾期抗病力开始下降，开花期最易感病，田间病害流行多从开花期开始。
1.3防治方法改进栽培技术措施，加强田间管理。
选高燥沙性强的地块种植，结合中耕，在植株周围高培土，防止病菌渗入土内侵染薯块。
灌水要采用起垄沟灌，低洼田注意排水，降低土壤湿度。
在大田马铃薯植株开始现蕾封垄时，定点检查，当发现中心病株时，立即拔除深埋，并喷药防治。
可使用的药剂有1∶1∶200倍波尔多液、40%乙磷铝可湿性粉剂300倍液、65%代森锌可湿性粉剂600倍液、25%瑞毒霉可湿性粉剂1 000倍液、50%多菌灵可湿性粉剂1 500倍液、70%代森锰锌可湿性粉剂400~600倍液，交替轮换使用。
马铃薯早疫病和晚疫病的区别
马铃薯早疫病和晚疫病的区别马铃薯又名土豆，是高产高效经济作物之一。
它适应性强，分布广，用途多，是一种粮菜兼用型的蔬菜，与稻、麦、玉米一起被称为全球四大农作物。
马铃薯早疫病和晚疫病是马铃薯生产中的两种重要病害。
在马铃薯生产中，常因早疫病和晚疫病的严重为害，给生产上造成很大的损失。
这两种病害都是真菌病害，其病菌都可以危害叶、叶柄、茎和薯块，但症状不同，发病规律也有一定差异，防治方法不尽相同。
因病而异，准确诊断是做好防治工作的基础。
一、症状上的区别1.马铃薯早疫病症状表现马铃薯早疫病主要发生在叶片上，也可侵染块茎。
发病初期叶片上出现褐黑色水浸状小斑点，然后病斑逐渐扩大，形成同心轮纹并干枯。
病斑多为圆形或近圆形，由于叶脉的限制，有时呈多角形。
严重时病斑相连，整个叶片干枯，通常不落叶，在叶片上产生黑色绒霉。
茎部病斑同叶部病斑基本相似，但呈长圆形或梭形。
块茎感病呈褐黑色，凹陷的圆形或不规则的病斑，病斑下面的薯肉呈褐色干腐。
2.马铃薯晚疫病症状表现此病可侵染叶片、茎蔓和薯块。
叶片染病，多从中下部叶开始，先在叶尖或顺缘出现水渍状绿褐色小斑点，周围具有较宽的灰绿色晕环，湿度大时病斑迅速扩展成黄褐至暗褐色大斑，边缘灰绿色，界限不明显，常在病健交界处产生1圈稀疏白霉。
茎杆和叶柄染病，多形成不规则褐色条斑。
发病严重的叶片萎垂、卷缩，终致全株黑腐，全田一片枯焦，散发出腐败气味。
薯块染病，初生浅褐色斑，以后变成不规则褐色至紫褐色病斑，稍凹陷，边缘不明显，组织变硬，干腐，将病薯从病斑处切开，可见到皮下有一层较深的薯肉变为红褐色，潮湿时软腐、发臭。
薯块可以在田间发病烂掉，也会在田间受侵染而储藏后大量腐烂。
马铃薯早疫病和晚疫病识别要点如表1所示：二、发病规律不同1.马铃薯早疫病发病规律1.1病原：茄链格孢(alternaria solani sorauer)，属半知菌亚门真菌。
1.2危害：早疫病一般多发生在块茎开始膨大时。
为害严重时，叶片病斑相互连结成片，引起局部或整个叶片枯死。
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马铃薯早疫病病原菌的分离鉴定及品种早疫病抗性评价作者：李秀华梁瑞萍张仙保李文霞王亮明来源：《安徽农业科学》2022年第22期摘要为明确包头地区马铃薯早疫病的病原菌，采用常规组织分离法进行分离纯化，依据病原菌的形态特征和致病性，将分离病原菌初步确定为链格孢属Alternaria。
rDNA-ITS序列分析表明，病原菌rDNA-ITS区大小为542 bp，经Blast比对，该菌ITS序列与链格孢属Alternaria同源性100%。
同时，对部分马铃薯品种的早疫病抗性进行室内接种鉴定，结果表明，供试12个马铃薯品种中，仅“中薯3号”病情指数为23.44，属中抗品种，其余品种均是早疫病抗性品种。
关键词马铃薯早疫病；rDNA-ITS序列分析；接种鉴定；抗性品种中图分类号 S 435.32文献标识码 A文章编号 0517-6611（2022）22-0086-03doi： 10.3969/j.issn.0517-6611.2022.22.021开放科学（资源服务）标识码（OSID）：Identification of the Pathogens of Potato Early Blight and Evaluation of Potato Varieties Resistance to Early BlightLI Xiu-hua，LIANG Rui-ping， ZHANG Xian-bao et al（Academy of Agriculture and Animal Husbandry Sciences in Baotou， Baotou，Inner Mongolia 014013）Abstract In order to identify the pathogen of potato early blight in Baotou area， routine tissue separation method was used，according to the morphological characteristics and pathogenicity of the pathogen， the isolated pathogen was preliminarily identified as Alternaria.Sequence analysis showed that the rDNA-ITS region of the pathogen was 542 bp. Blast comparison showed that ITS sequence of the pathogen had 100% homology with Alternaria.Meanwhile， the resistance of some potato varieties to early blight was identified by indoor inoculation. The results showed that only the disease index of “Zhongshu 3” was 23.44， which was a moderately resistant variety among the 12 potato varieties， and the other varieties were early blight resistant varieties.Key words Potato early blight;rDNA-ITS sequence analysis;Inoculation identification;Resistant varieties马铃薯早疫病（potato early blight）俗称夏疫病、轮纹病或干斑病，在我国和世界各马铃薯产区分布较为普遍，严重地块发病率大于80%，减产达30%以上［1-4］。
该病主要为害叶片，也能侵害叶柄、茎和薯块。
叶上病斑最初为褐色圆形斑点，以后逐渐扩大成圆至近圆形，褐色至暗褐色，病斑边缘明显，有清晰的同心轮纹，有时病斑外缘有较窄的黄色晕圈。
据报道，马铃薯早疫病主要由茄链格孢菌（Alternaria solani）引起［5］，另有研究表明马铃薯早疫病的病原菌分别为Alternaria solani 和Alternaria alternata［6］。
包头地区是内蒙古自治区种薯和商品薯的主产区之一，早疫病是常发病害，危害较为严重。
为确定当地早疫病病原菌的归属，笔者采用常规组织分离法对包头地区的马铃薯早疫病病原菌进行分离鉴定，并利用苗期喷雾接种对部分马铃薯品种早疫病抗性进行鉴定，以期为包头地区马铃薯早疫病的综合防控提供科学依据。
1 材料与方法1.1 病原菌的分离和纯化2019年6月陆续在包头市农牧业科学研究院院内和固阳县马铃薯试验区采集具典型同心轮纹的马铃薯早疫病病叶，依据常规组织分离法进行病原菌的分离、纯化，得到供试菌株，命名为“mls1”。
将病原菌保存于PDA斜面上，置于4 ℃冰箱保存。
1.2 病原菌的形态学观察用直径5 mm的打孔器在菌落边缘打取一圈菌餅，挑针挑取菌饼接种于新的PDA平皿上，28 ℃恒温黑暗培养3～7 d。
肉眼观察菌落颜色、形态、气生菌丝特点，OLYMPUS CX31显微镜下观察病原菌的形态结构。
4～10 d后显微镜下观察分生孢子形态，测量分生孢子的大小，包括长、宽、横纵隔膜数、孢子颜色等。
参考张天宇等［7-8］对链格孢属的特征描述进行鉴定。
1.3 病原菌的致病性测定病原菌置于PDA固体培养基上28 ℃恒温黑暗培养，7 d后用无菌水洗脱分生孢子，利用血球计数板制备成1×107个/mL孢子悬浮液。
采用离体叶片法［9］，取新鲜无病虫害的马铃薯叶片，无菌水冲洗后置于75%乙醇中振荡消毒2 min，无菌水漂洗3次，置于铺有无菌湿滤纸的平皿内。
采用涂抹法将孢子悬浮液接种于消毒后的马铃薯叶背面，空白对照以无菌水处理，置于25 ℃光照培养箱内培养，接种后每24 h观察1次。
依据柯赫氏法则，发病后从病斑处再次分离病原菌，并与原接种菌进行比较。
1.4 病原菌rDNA-ITS 序列鉴定收集在PDA平板上培养8～10 d 的早疫病菌菌丝体，采用CTAB法提取病原菌基因组DNA［10］。
利用真菌核糖体rDNA 转录间隔区（ITS） PCR 扩增的通用引物ITS1（5′-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3′）和ITS4（5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′）对提取的真菌总DNA进行PCR扩增。
PCR 反应体系（25 μL）：2.0 μL dNTPs（10 mmol/L），5.0 μL10×Reaction buffer（with MgCl 2），0.5 μL Taq 聚合酶（5 U/μL），ITS1（10 μmol/L）和ITS4（10 μmol/L）各2.0 μL，2.0 μL模板DNA（30 ng/μL），11.5 μL ddH 2O。
反应条件：94 ℃预变性2 min；94 ℃变性 45 s，50 ℃退火 45 s，72 ℃延伸 1 min，30 个循环；最后72 ℃延伸10 min，4 ℃保存。
1%琼脂糖凝胶电泳检测，凝胶成像仪GelDoc-it2 imager下观察照相，观察到预期条带后，PCR产物委托上海生工生物工程有限公司进行测序。
1.5 抗病性接种鉴定试验于2020年5月10日在包头市农牧业科学研究院育苗温室进行，供试品种购自内蒙古自治区固阳县精诚脱毒马铃薯繁育中心，种薯级别为原原种，经催芽后种植于花盆内，花盆内为育苗基质。
每个品种播种25盆，每盆1粒，共计12个品种，3次重复。
6月2日参试品种全部出苗。
于4叶期喷雾接种鉴定菌株分生孢子悬浮液，分生孢子浓度为1×104个/mL，保湿（RH=100%）48 h后常规管理。
温室温度为20～32 ℃。
接种3 d后开始观察，第7天对供试品种逐叶按照9级标准调查发病率和病情指数。
马铃薯早疫病病害分级标准［11］，0级：叶片无病斑；1级：病斑面积占整个叶面积5%及以下；3级：病斑面积占整个叶面积6%～10%；5级：病斑面积占整个叶面积11%～20%；7级：病斑面积占整个叶面积21%～50%；9级：病斑面积占整个叶面积50%以上。
抗病性评价标准［12］：免疫（I），病情指数0；高抗（HR），病情指数0～0.10；抗病（R），病情指数0.11～20.00；中抗（MR），病情指数20.01～40.00；中感（MS），病情指数40.01～60.00；感病（S），病情指数在60.01以上。
发病率（%）=发病叶片数/调查叶片数×100病情指数（%）= （各级病叶数×各级代表值）调查总叶数×最高级别代表值 ×1002 结果与分析2.1 病原菌形态特征将马铃薯早疫病病原菌“mls1”接种在PDA培养基上，于28 ℃恒温黑暗培养，如图1所示，其气生菌丝体生长快，较发达，初期气生菌丝灰白色，约4 d后转为灰绿色。
PDA平皿上培养菌落形成以接种菌饼为中心的同心圆，约8 d长满直径9 cm的培养皿。
如图2所示，显微镜下观察到气生菌丝有隔膜和分支，分生孢子梗颜色黄褐色，单生或呈分支状，较菌丝短且宽，宽5～10 μm。
28 ℃恒温黑暗培养至4 d后，显微镜下可观察到分生孢子，由孢子梗顶端产生，单生或簇生，淡黄色至黄褐色，形态多样，为短棍形、梨形、长椭圆形等。
1～4个横膈膜，0～3个纵、斜膈膜，大小多在（30～70）μｍ×（15～25）μｍ，多数顶端具喙，喙宽约5 μｍ。
2.2 病原菌致病性将分离纯化后得到的马铃薯病原菌“mls1”菌株的分生孢子悬浮液接种于马铃薯健康离体叶片上，25 ℃恒温保湿光照培养，约4 d，接种“mls1”菌株的叶片出现典型的同心轮纹症状，空白对照无症状。
对接种后表现典型早疫病症状的马铃薯病斑进行再分离、纯化，得到与原菌株一致的病原菌。
依据柯赫氏法则，证实标记为“mls1”的原接种菌株为马铃薯早疫病的病原菌。
2.3 病原菌rDNA-ITS 序列鉴定利用CTAB法提取病原菌“mls1”基因组DNA，如图3所示，马铃薯早疫病菌基因组DNA 大小约在5 000 bp，无降解，无污染。
所提DNA经超微量分光光度计Thermo NanoDrop 2000定量到30 ng/μL，备用。
利用真菌核糖体rDNA转录间隔区（ ITS） PCR 扩增的通用引物ITS1和ITS4对提取的真菌总DNA进行PCR扩增，在早疫病病原菌基因组DNA中擴增出1条540 bp左右的片段。