微生物学中的细胞培养技术探究
微生物培养方法
微生物培养方法微生物培养是一种用于研究微生物生理生化特性、生长繁殖规律及其与环境条件的关系等的重要技术手段。
以下是一些常见的微生物培养方法：1、固体培养基培养法固体培养基是在培养液中加入凝固剂，使培养基成为凝固状态的培养基。
这种培养基具有良好的稳定性，可以防止培养液中的微生物在培养过程中流失，同时也可以使微生物在固体表面生长繁殖，方便观察和检测。
固体培养基一般用于细菌、放线菌、酵母菌等微生物的培养。
2、液体培养基培养法液体培养基是一种不添加凝固剂的培养基，使培养基呈液体状态。
液体培养基中，微生物在培养液中自由悬浮生长繁殖，可以充分接触培养液中的营养物质，有利于微生物的生长繁殖。
液体培养基一般用于工业生产中的微生物培养，如发酵工业中制备各种发酵产品。
3、半固体培养基培养法半固体培养基是在液体培养基中加入少量凝固剂，使培养基成为半凝固状态的培养基。
这种培养基可以固定培养液中的微生物，同时也可以使微生物在半固体表面生长繁殖。
半固体培养基一般用于观察微生物的运动和生长情况。
4、厌氧培养法有些微生物需要在无氧或低氧分压条件下生长繁殖，因此需要采用厌氧培养法。
厌氧培养法一般采用密闭容器或厌氧手套箱中进行，可以提供无氧或低氧环境。
在厌氧培养法中，需要使用专门的厌氧培养基和厌氧菌株，以保证微生物的生长繁殖。
5、富集培养法富集培养法是一种常用的分离高浓度微生物的方法。
该方法是通过在培养基中添加一些特殊成分，如高浓度营养物质、抑制剂等，以抑制其他微生物的生长繁殖，从而增加目标微生物的数量和浓度。
富集培养法一般用于从自然界或工业生产中分离特定种类的微生物。
微生物培养方法有很多种，每种方法都有其特定的适用范围和特点。
在实际操作中，需要根据具体情况选择合适的培养方法，以达到最佳的培养效果。
还需要注意无菌操作、环境控制等方面的技术细节，以保证微生物生长繁殖的良好环境和条件。
微生物的分离培养方法微生物的分离培养是微生物研究中常用的技术之一，它能够将目标微生物从复杂的微生物群体中分离出来，并进行纯培养。
细菌培养实验报告模板(3篇)
第1篇一、实验目的1. 熟悉细菌培养的基本原理和方法。
2. 学习观察细菌的生长特征。
3. 掌握无菌技术操作，提高实验技能。
二、实验原理细菌是单细胞微生物，具有繁殖速度快、形态多样等特点。
在适宜的培养基和条件下，细菌可以生长繁殖，形成肉眼可见的菌落。
通过细菌培养，可以观察其生长特征，为后续研究提供基础。
三、实验材料1. 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、营养肉汤培养基等。
2. 细菌：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等。
3. 实验仪器：恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、移液器、无菌操作台等。
4. 实验试剂：无菌水、无菌棉签、无菌生理盐水等。
四、实验方法1. 培养基制备：按照说明书配制牛肉膏蛋白胨培养基和营养肉汤培养基，高压蒸汽灭菌后备用。
2. 细菌接种：将金黄色葡萄球菌和大肠杆菌分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基和营养肉汤培养基中。
3. 恒温培养：将接种后的培养基放入恒温培养箱中，分别于37℃和30℃下培养24小时。
4. 观察记录：观察细菌在培养基上的生长情况，记录菌落形态、大小、颜色等特征。
5. 无菌技术操作：在无菌操作台中，进行接种、移液等操作，防止污染。
五、实验结果1. 金黄色葡萄球菌在牛肉膏蛋白胨培养基上生长良好，形成圆形、金黄色、表面光滑的菌落。
2. 大肠杆菌在营养肉汤培养基上生长良好，形成乳白色、浑浊的菌液。
六、实验分析1. 通过本次实验，掌握了细菌培养的基本原理和方法。
2. 观察到金黄色葡萄球菌和大肠杆菌在不同培养基和温度下的生长特征，为后续研究提供了基础。
3. 在实验过程中，注意无菌技术操作，防止污染。
七、实验讨论1. 细菌在不同培养基和温度下的生长情况有何差异？2. 如何提高细菌培养的效率？3. 在实验过程中，如何避免污染？八、实验总结通过本次细菌培养实验，我们了解了细菌的基本特征和生长规律，掌握了无菌技术操作，为后续研究奠定了基础。
在实验过程中，我们要注重细节，严格按照操作规程进行，确保实验结果的准确性。
1.2.2+微生物的培养技术及应用(教学设计)-高二下学期生物(2019人教版选择性必修3)
1.2.2微生物的培养技术及应用一、教学目标：学习目标：1.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。
2.概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。
核心素养：1.生命观念：各类微生物都能适应其生活环境。
2．科学思维：根据微生物的代谢类型配制选择培养基。
3．科学探究：讨论土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的方法。
二、教学过程：【导入】自然界中微生物数量繁多，种类庞杂，要想从中分离出需要的特定微生物并不容易，尤其当要分离的微生物在混合菌群中不是优势种群时，更难实现。
那么我们又如何达成这一目标呢？选择性培养基一、选择培养基1、实例：寻找耐高温的DNA聚合酶1973年，科学家从美国黄石国家公园的热泉中筛选出水生栖热菌，进而从这种菌中提取出耐高温的DNA聚合酶。
聚合酶链式反应（PCR）是一种在体外扩增DNA片段的技术，此项技术要求使用耐高温的DNA聚合酶。
筛选原因：水生栖热菌能在70-80℃高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。
2、实验室中微生物的筛选：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。
在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或组织其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。
思考讨论选择培养基配方的设计尿素含氮量高，化学性质稳定，是一种重要的农业氮肥，尿素施入土壤后，被某些细菌分解成NH3，NH3再转化成NO3-、NH4+等才能被植物吸收。
土壤中尿素分解菌之所以能将尿素分解，是因为它们能合成脲酶：请同学们小组为单位思考以下问题？1.如果让你配制一种培养基，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？设计一种选择培养基,用尿素作为唯一氮源,可以将分解尿素的细菌分离出来。
2. 该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？这种培养基与普通培养基相比，只是用尿素作为唯一氮源，培养基的其他营养成分基本相同。
10-1 微生物的培养技术及应用【人教(2019)选择性必修3一轮复习课件】
(3)培养:待涂布的菌液被培养基吸收后,将_平__板__倒__置__,放入30~37 ℃的恒温培养箱中 培养1~2 d。 4.微生物的数量测定: (1)间接计数法(活菌计数法)。 ①计数原理:培养基表面生长的一个单菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。所 以统计结果一般用_菌__落__数__代表活菌数。 ②计数标准:一般选择菌落数为_3_0_~_3_0_0_的平板进行计数。 ③计数方法:每隔24 h统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这 样可以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。在同一稀释度下,至少应对3 个平板进行重复计数,然后_求__出__平__均__值__。
【思考辨析】 1.培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐,有时还需要加入一些特殊的物 质。( √ ) 2.消毒的原则是既杀死材料表面的微生物,又减少消毒剂对细胞的伤害。( √ ) 3.为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落。(× ) 分析:接种环经火焰灭菌后应先冷却,防止杀死菌种。 4.平板划线法中每一次划线后都要将接种环灼烧。( √ ) 5.需要将一个不接种的培养基放在相同的条件下培养,以检验培养基的灭菌是否 合格。( √ )
(4)两种无菌技术的比较:
比较项目 作用强度
作用程度 芽孢和孢子
适用对象
常用方法
消毒 较为温和的物理、化学、生物 因素 杀死_物__体__表__面__或__内__部__的__部__分__ _微__生__物__
一般不能杀灭
操作空间、活体生物材料、 操作者的衣着和双手
煮沸消毒法、巴氏消毒法、 _化__学__药__物__消__毒__法__、_紫__外__线__消__毒__法__
微生物的基本培养技术 课件 高二上学期生物人教版选择性必修3
课后习题答案
自养微生物
有机碳源：葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等 异养微生物
（2）氮源
无机氮源： N2、NH4＋、NO3-、NH3等 有机氮源： 牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等
培养基中的氮元素是微生物合成蛋白质、核酸等物质所必需的
注：含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源
（3）水
（4）无机盐
其他条件：PH、O2和 特殊营养物质
避免杂菌污染 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这 个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 最好不要用这个平板培养微生物。防止空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间 的培养基上滋生。
探究 实践
酵母菌的纯培养
（2）接种和分离酵母菌
通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分 散到培养基表面。经过数次划线后培养可以分离得到单菌落。
(3)湿热灭菌（高压蒸气灭菌---效果最好）： 100kPa、121℃下维持15-30min.常用于培养基、无
菌水等的灭菌。
三、微生物的纯培养
1.相关概念
培养物： 在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成 的含特定种类微生物的群体称为培养物。
纯培养物： 由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。 纯培养： 获得纯培养物的过程就是纯培养。 2.微生物纯培养的步骤
细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖作用的无性 生殖细胞。能直接发育成新个体。
3.常用的灭菌、消法
消毒
煮沸消毒法 紫外线消毒
化学药物消毒
主要方法
62～65 ℃消毒30 min 或80～90 ℃处理30 s～1 min
应用范围
牛奶 、啤酒、果酒和酱油 等不耐高温的液体
【精品学案】1.2微生物的培养技术及应用
(1)培养基的营养构成是怎样的? 提示:培养基一般都含有水、碳源(提供碳元素的物质)、氮 源(提供氮元素的物质)和无机盐等营养物质。 (2)培养基灭菌后,为什么需要冷却至50 ℃左右时才能用来 倒平板? 提示:倒平板时,若高于50 ℃会烫手;低于50 ℃,若不及时操 作,琼脂就会凝固。
典例剖析 下列有关微生物培养所需营养物质的叙述,正确的是( ) A.碳源不可能同时是氮源 B.所有的碳源都能提供能量 C.除水以外的无机物只提供无机盐 D.有些无机氮源也能提供能量 答案:D
二 无菌技术
重难归纳
1.几种消毒和灭菌方法的比较
比较项目 适用范围
操作方法
消 煮沸 日常食品,罐装食 毒 消毒法 品等
在 100 ℃煮沸 5~6 min
方 巴氏消 牛奶等不耐高温 在 62~65 ℃消毒 30 min 或
法 毒法 的液体
80~90 ℃处理 30 s~1 min
比较项目 适用范围
操作方法
提示:获得图A效果的接种方法为稀释涂布平板法,获得图B 效果的接种方法为平板划线法。
微判断2统计菌落数目时为保证结果准确,一般选择菌落数 目最多的平板进行统计。( × )
三、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 1.土壤取样 (1)土壤要求:酸碱度接近中性的潮湿土壤。 (2)取样环境:在城市,从公园里、街道旁、花盆中的土壤中 取样;在农村,从农田或菜园里的土壤中取样。 (3)取样部位:距地表3~8 cm的土壤层。
解析:有些物质可以既作碳源又作氮源,如牛肉膏,A项错误。
无机碳源(如CO2、NaHCO3等)不能提供能量,B项错误。有 些无机物可作为碳源或氮源,如碳酸盐、硝酸盐,C项错误。
有些无机氮源也可以提供能量,如NH3可为硝化细菌提供能 量和氮源,D项正确。
第二章 微生物的纯培养和显微技术
常用的菌种保藏法
3、干燥包藏法 沙土管保存：适用于产孢子的微生物，如 沙土管保存：适用于产孢子的微生物，如 芽孢杆菌，放线菌等。菌种至 斜面长出大量孢子后，洗下孢子，制悬液， 加入无菌的沙土试管中，减压干燥，至水 分抽干，最后用石蜡、胶塞等 封闭试管口，于冰箱中保存。 冷冻真空干燥：加保护剂、冷冻、低温干 冷冻真空干燥：加保护剂、冷冻、低温干 燥
常用固体培养基纯培养获得方法
1、稀释倒平板法（pour plate method） 稀释倒平板法（ method） 将分离物稀释→取少量与50℃ 将分离物稀释→取少量与50℃熔化态琼脂 培养基混合，摇匀→倒平板→培养→ 培养基混合，摇匀→倒平板→培养→稀释 得当会有单个菌落→ 得当会有单个菌落→挑单个菌落，重复以 上操作得纯培养 缺点：热效菌不适用，严格好氧菌生长受 影响
1、微生物培养的常用器皿及其灭菌
（2）湿热灭菌： ①间歇灭菌：100℃ 15-30min①间歇灭菌：100℃，15-30min-冷却 282837℃培养24h（重复此过程3次） 37℃培养24h（重复此过程3 ②高压蒸汽灭菌：121℃ 15-30min，通常 ②高压蒸汽灭菌：121℃，15-30min，通常 20min，装于三角瓶、试管中的培养基的灭 20min，装于三角瓶、试管中的培养基的灭 菌，采用适宜塞子塞好，防止染菌。
常用的菌种保藏法
1、传代培养保藏 保存时间因菌种不同，可数周至数年（一般3个月） 保存时间因菌种不同，可数周至数年（一般3 缺点：繁琐，易染菌，菌种衰退快 2、冷冻保藏 将微生物处于冷冻状态，使其代谢作用停止以达 保藏目的，一般-70℃ 保藏目的，一般-70℃冰箱保藏。 操作注意点：低温使细胞内水分形成冰晶，从而 引起细胞，尤其是细胞膜的损伤。采取速冻法 （冰晶小而减少损伤）升温时，冰晶会长大，要 快速升温。
微生物的培养技术及应用高中生物人教版2019选修三公开课教案
第一章第2节二微生物的选择培养和计数教学设计
2．下图为“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”
实验中样品稀释示意图。
据图分析，下列叙述正确
的是()
A．3号试管的稀释倍数为103倍
B．4号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均
数恰好为5号试管的10倍
C．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7
×109个
D．该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌
数目要多
C[3号试管的稀释倍数为104倍，A项错误；4号
试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数不
一定恰好为5号试管的10倍，B项错误；5号试管
的结果表明每克土壤中的菌株数为(168＋175＋
167) ÷3÷0.1×106＝1.7×109（个），C项正确；在
固体培养基上可能存在两个或多个菌体形成一个
菌落的情况，得到的结果往往会比实际活菌数目
少，D项错误。
]
课堂小结。
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微生物学中的细胞培养技术探究
一、引言
微生物学是研究微小的生物体，如细菌、真菌和病毒等的学科
领域。
细菌是微生物学中重要的对象之一，因其广泛分布于自然
界中，对生态系统的影响巨大。
了解和研究细菌的生长和繁殖方式，需要有效的细胞培养技术。
二、微生物培养基
细胞培养技术的首要条件是培养基的选取。
微生物培养基分为
固体培养基和液体培养基两种形式。
固体培养基主要用于分离纯
种菌株，其中最为常用的是琼脂培养基。
琼脂是一种来源于海藻
的胶质，富含多糖和无机盐等营养物质，它能使培养基凝固，提
供支撑物质和营养物质，方便菌落的形成。
液体培养基则适用于
大规模培养菌液，提供的营养物质更加丰富，同时也使得微生物
的生长速度更快。
三、微生物的分离与纯化
微生物中存在不同种类的细菌，为了对其进行研究，需要进行
分离和纯化。
首先，需要从样本中获得微生物。
可以将样本分散
在稀释液中，再用涂布法或平板法将稀释液均匀涂敷于固体培养
基上。
经过一段时间的培养，可以观察到不同形态和颜色的菌落，
将单个菌落划分到不同的培养基上进行二次培养，即可得到纯种
菌株。
四、微生物的生长条件
微生物的生长条件与其不同的种类以及环境需求密切相关。
通
常微生物生长的基本要素是温度、pH值、营养物质和氧气。
微生
物的温度适应性相对较大，但不同类型的细菌有不同的温度适宜
范围。
一些需要高温生长的极端嗜热菌，可以在50°C以上的高温
下生长；而一些需要低温环境的嗜冷菌则能在低温下繁殖。
pH值
对微生物的生长也非常重要，不同细菌对酸碱度的适应性也有所
不同。
营养物质包括碳源、氮源、矿物质等，在培养基的选择和
调配上需要根据细菌的需求进行相应的配比。
另外，一些微生物
在氧气的需求上也存在差异，可以分为需氧菌、厌氧菌和微需氧
菌等。
五、细胞培养过程的控制与监测
细菌培养过程的控制和监测对于提高培养效果和提取物质的稳
定性至关重要。
首先，需要对培养过程中的温度、湿度、氧气和
培养时间等进行系统地控制。
同时，还需要定期检测培养物质的
生长状况，例如菌液的浓度、生长曲线的变化和物质产量的积累等。
常用的监测方法包括菌数计数、浑浊度测定和生物量测定等。
此外，在细胞培养过程中还需要考虑到细菌的稳定性问题，包括
保持菌种纯度和减少细菌突变的风险等。
六、细胞培养技术在微生物学中的应用
细胞培养技术在微生物学中有广泛的应用。
首先，细胞培养技
术可以帮助纯化和获取纯种菌株，为微生物的进一步研究提供基础。
其次，细胞培养技术可以用于生产微生物发酵产物，例如酶、抗生素和蛋白质等。
细胞培养技术还可以应用于微生物学实验，
研究细菌对不同环境和压力的响应机制，以及微生物与宿主之间
的相互作用等。
七、结论
微生物学中的细胞培养技术是研究微生物的重要方法之一。
通
过合适的培养基和培养条件，可以实现微生物的分离、纯化和大
规模培养。
细胞培养技术的控制和监测能够保证培养过程的稳定
性和可重复性。
该技术在微生物学研究和应用领域具有广泛的潜
力和应用前景。
通过不断的深入研究和技术改进，细胞培养技术
将为微生物学的发展和应用做出重要贡献。