成骨细胞的体外培养与鉴定

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人皮下脂肪干细胞的成骨、成脂分化诱导及鉴定

中国组织工程研究第19卷第32期 2015–08–06出版Chinese Journal of Tissue Engineering Research August 6, 2015 Vol.19, No.32ISSN 2095-4344 CN 21-1581/R CODEN: ZLKHAH 5155www.CRTER .org肖建红，女，1980年生，四川省绵阳市人，羌族，2012年中山大学毕业，博士，主治医师，主要从事造血干细胞抑制、干细胞与组织工程，以及免疫性血小板减少性紫癜的临床研究和基础研究。

通讯作者：张阳春，硕士，主治医师，中山大学附属第一医院东院下肢骨科，广东省广州市 510700中图分类号:R394.2 文献标识码:A 文章编号:2095-4344 (2015)32-05155-07 稿件接受：2015-07-01 Xiao Jian-hong, M.D., Attending physician, Department of Internal Medicine, Eastern Branch of the First Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University, Guangzhou 51000, Guangdong Province, ChinaCorresponding author: Zhang Yang-chun, Master, Attending physician, Department of Lower limbs Orthopedics, Eastern Branch of the First Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University, Guangzhou 51000, Guangdong Province, ChinaAccepted: 2015-07-01人皮下脂肪干细胞的成骨、成脂分化诱导及鉴定肖建红1，张阳春2，张常然1，杨兴2(中山大学附属第一医院东院，1普通内科，2下肢骨科，广东省广州市 510700)文章亮点：1 实验通过密度梯度离心和贴壁筛选法相结合，对人脂肪干细胞进行分离、体外培养及扩增。

成骨细胞的数量对体外钙化结节形成的影响

尹美珍
（琴
４０７）３００
４５０；２武汉理工大学生物材料与工程研究中心，汉３０３武
随着成骨细胞体外培养技术的发展，其体外培养已成为骨组织工程及骨替代材料研究的一个重要手段。成骨细胞的体外钙化是体外培养成骨细胞的一个重要生物学特征，对成骨细胞的鉴定、与材料的相容性及其材料的生物学效应的研究尤为重要。成骨细胞的接种浓度对其体外钙化有一定的影响，内外国文献未见关于这方面的报道。成骨细胞体外钙化形成条件的研究可望为骨替代材料的研究提供参考。
清（ｃｌｎ，０ｙ／青霉素，０￣／Ｈｙｏｏ）１０＿ｍｌｇ１０ｇｍｌ链霉素。条件ＤＭ培养液为常规ＤＭ培养液中补加１ＭＥＭＥ０ｍｍｏ／甘油ｌＬ
磷酸钠和５￣／维生素Ｃ０ｇｍｌ。
１２兔成骨细胞体外分离与培养．
节形成越少甚至不形成。在有结节形成时，素红染色显示出茜明显的红色结节，无结节部位的细胞为浅红色。说明各组细而
取第６代成骨细胞分别接种于置有盖玻片的六孔板内，按细胞浓度１０／、２０／、５０／设为Ａ、Ｂ ×１ｍｌ ×１ｍｌ ×１ｍｌ、Ｃ３
ｄ。各组形成结节时结节的数量有多少之别：倍镜下每张盖玻低
片随机选取１Ｏ个以上视野观察，组在每个视野均可见３５Ａ～

破骨细胞鉴定标准

破骨细胞鉴定标准
破骨细胞是一种特殊的多核细胞，主要功能是吸收和分解骨组织。

它们在骨髓中产生，并通过血液循环进入骨组织。

破骨细胞的鉴定标准通常包括形态学特征、特殊的细胞标志物以及功能性实验。

以下是一些常用的破骨细胞鉴定标准：
1. 形态学特征：破骨细胞通常具有大的多核体，细胞质富含溶酶体。

它们通常呈扁平或不规则形状，并附着在骨表面，形成所谓的吸附边。

2. 细胞表面标志物：破骨细胞的表面通常表达一些特殊的标志物，如CD51/61（Integrin αV/β3）、TRAP（Tartrate-Resistant Acid Phosphatase）等。

这些标志物可以通过流式细胞术或免疫组化染色来检测。

3. 功能性实验：破骨细胞具备吸附、溶酶体分泌和骨吸收等功能。

功能性实验可以通过体外培养破骨细胞，观察它们的吸附能力、溶酶体酶活性以及对骨基质的吸收能力来鉴定。

需要注意的是，破骨细胞的鉴定标准可能会因研究目的的不同而有所差异。

因此，在具体实验中，破骨细胞的鉴定标准应根据实验目的和所使用的方法进行调整和确认。

植物源外泌体样纳米囊泡刺激成骨细胞、抑制破骨细胞并促进成骨

植物源外泌体样纳米囊泡刺激成骨细胞、抑制破骨细胞并促进成骨目录一、内容概括 (2)1. 研究背景和意义 (3)1.1 植物源外泌体样纳米囊泡研究现状 (3)1.2 成骨细胞与破骨细胞在骨骼代谢中的作用 (5)1.3 研究目的与意义 (6)2. 研究内容与方法 (7)2.1 研究内容概述 (8)2.2 研究方法 (9)二、植物源外泌体样纳米囊泡的概述及特性 (10)1. 植物源外泌体样纳米囊泡定义及结构特性 (11)1.1 纳米囊泡的结构与组成 (12)1.2 植物源外泌体样纳米囊泡的特性分析 (13)2. 植物源外泌体样纳米囊泡的提取与鉴定方法 (14)2.1 提取工艺介绍 (15)2.2 鉴定方法及技术 (16)三、植物源外泌体样纳米囊泡对成骨细胞的影响研究 (17)1. 成骨细胞的生物学特性及功能 (17)1.1 成骨细胞的增殖与分化 (18)1.2 成骨细胞在骨骼形成中的作用 (19)2. 植物源外泌体样纳米囊泡对成骨细胞的刺激作用研究 (20)2.1 纳米囊泡对成骨细胞增殖的影响 (21)2.2 纳米囊泡对成骨细胞分化的影响 (22)四、植物源外泌体样纳米囊泡对破骨细胞的影响研究 (23)1. 破骨细胞的生物学特性及功能概述 (24)1.1 破骨细胞的分化与功能特点介绍 (25)1.2 破骨细胞在骨骼代谢中的作用分析 (26)2. 植物源外泌体样纳米囊泡抑制破骨细胞的研究内容与方法介绍27一、内容概括本回答文档主要探讨了植物源外泌体样纳米囊泡在骨骼生物学中的重要作用。

实验研究表明，这些纳米囊泡能够有效地刺激成骨细胞活性，同时抑制破骨细胞的形成和功能，进而促进骨组织的生长和修复。

这一发现为骨骼相关疾病的治疗提供了新的思路和方法。

在具体研究中，科学家们首先从植物中提取并纯化出外泌体样纳米囊泡。

通过一系列体外实验，包括细胞培养、基因表达分析等，深入探讨了这些纳米囊泡对成骨细胞和破骨细胞的影响。

cAMP_PKA信号通路介导人脂肪干细胞成骨分化的体外试验_张磊

cAMP/PKAregulatesosteogenicdifferentiationofhumanadipose-derivedstem cellsinvitro ZHANGLei, XIAOYang, WUZhen-dong, CHENLei, YINGZhi-hao, CHENZi-gao (DeptofOrthopaedics, the118 thHospitalofPLA, Wenzhou, Zhejiang 325000 , China)
临床骨科杂志 JournalofClinicalOrthopaedics 2010 Oct;13(5)
· 557·
L-谷氨酰胺 , 1 mg/L成纤维生长因子 , 105 U/L青霉素 , 105 U/L链霉素 )终止消化。 100 目筛网过滤后 1 200 r/min离心 10 min, 去除漂浮的脂肪细胞及上清液 , 用含 10% FBSDMEM重悬 , 以 1 ×105 个有核细胞 /cm2 密度接种。置 37℃、5% CO2 培养箱中孵育 , 48 h后首次换液 , 弃去未贴壁细胞。细胞生长至 75% ～ 90%汇合时传代 , 每 2 ～ 3 d更换 1次培养液。 1.3 ADSCs成骨诱导分化以 5 ×104 个细胞 / cm2 密度在基础培养基条件下培养 10 ～ 15 h, 然后分别加入 10 nmol/LDex, 或 1 mmol/Ldb-cAMP, 或同时加入 10 nmol/LDex和 1 mmol/Ldb-cAMP培养诱导成骨分化 , 为验证 cAMP/PKA信号通路对成骨分化诱导的影响 , 在诱导培养基中加入 10 μmol/L cAMP/PKA抑制剂 H-89。细胞在 37℃、5% CO2 培养箱中培养 , 每 2 ～ 3 d更换 1次培养液。未加入激动剂或抑制剂的 ADSCs为对照组。 1.4 细胞成骨分化分析通过计算 ALP阳性细胞的比例分析细胞的成骨分化。具体方法 :细胞培养 5 d后用胰蛋白酶进行消化 , 在含 5%牛血清白蛋白的 PBS中孵育 30 min, 然后与抗 ALP一抗孵育 30 min, 洗涤缓冲液清洗 3次后与二抗孵育 30 min, 流式细胞仪分析 ALP阳性细胞率。 1.5 PKA催化活性分析细胞在更换成骨诱导培养基后 , 分别加入 cAMP/PKA信号激动剂和抑制剂 , 作用 2 h后用 Promega公司 PepTagAssay分析试剂盒进行 PKA活性检测 , 具体操作参考说明书进行。同时采用 Western blot法检测相同条件下 cAMP应答元件结合蛋白 (CREB)和磷酸化 CREB 表达情况。为了解 db-cAMP对 PKA的活化作用 , 在基础培养基中分别加入 db-cAMP和 PKA抑制剂 H89后 , 检测 PKA的催化活性和下游 CREB的磷酸化程度。 1.6 成骨分化相关基因的 RT-PCR分析细胞培养 5 d后 , 用 Tripure抽提总 RNA, 用逆转录试剂盒进行成骨分化相关基因的 RT-PCR检测 , 检测的成骨分化相关基因 Runx2、骨桥蛋白 (osteopontin)和破骨细胞相关基因细胞核因子 κB受体活化因子配基 (RANKL)、骨保护素 (OPG)的表达情况 , 以 β-actin 为内参基因 , 所用引物参照文献 [ 4] , 引物由上海生工生物工程技术服务有限公司合成 (见表 1)。细胞培养 5 d后 , 分别检测成骨细胞的标记基因 Runx2、 osteopontin和破骨细胞相关基因 RANKL、OPG的表达情况。

小鼠破骨细胞分离培养及鉴定

小鼠破骨细胞分离培养及鉴定骨疾病的发生与骨形成、骨吸收失衡有关，骨吸收大于骨形成导致骨量减少，而骨吸收又与破骨细胞的数量和功能有关[1] 。

从破骨细胞着手揭示骨吸收机制，为许多由破骨细胞引起的疾病如绝经后的骨质疏松、风湿性关节炎、牙周病、肿瘤相关性骨溶解以及矫形外科中的植入体的丢失等提供防治依据。

与此相关，分离成熟的破骨细胞对于研究破骨细胞的特征、功能和调节来说显然是一种必不可缺少的工具。

该研究以小鼠为试验对象，建立小鼠共培养试验培养破骨细胞的方法，来获得具有特征性的破骨细胞。

1 材料与方法1.1 试验材料1.1.1试验动物。

1日龄MF1小鼠，由扬州大学比较医学中心提供。

1.1.2主要试剂及仪器。

a -MEM胎牛血清，抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP染色试剂盒、1，25-(OH 2D3,甲苯胺蓝，直径5 mm的象牙片。

YJ2875B型医用净化工作台，PS29000705超纯水装置，24 孔培养板，二氧化碳培养箱，超声清洗仪，XSZ-D2 倒置显微镜，XL30-ESEM环境扫描电子显微镜[2-3]。

1.2 试验方法1.2.1 成骨细胞分离培养。

将1 日龄的小鼠浸入75%酒精浸泡3〜5 min。

无菌剪取其头盖骨，去除表面结缔组织和毛细血管，放入50 mL离心管，加入3 mL 0.25%胰蛋白酶，37 C气浴摇床消化20 min , 80 r/min，弃胰酶。

用PBS冲洗并尽量吹打以除去成纤维细胞。

将骨片剪成糊状，加入0.1%H型胶原酶3 mL 置气浴恒温振荡器内80 r/min、37 C振荡消化1 h[2-3]。

将头盖骨转入1.5 mL 指形管中，用剪刀剪碎，直至剪成糊状（需时30 min ），混匀转入50 mL离心管，封口，37 C 气浴摇床消化60 min , 80 r/min ;转入离心管用PBS洗涤然后转入15 mL离心管，离心10 min , 1 500 r/min 。

弃去上清，再反复用PBS吹打洗涤离心2次，1 000 r/min , 5 min。

人骨髓间充质干细胞体外成骨分化过程中成骨相关基因的动态表达

人骨髓间充质干细胞体外成骨分化过程中成骨相关基因的动态表达目的：系统研究人骨髓间充质干细胞（hBMSCs）体外成骨诱导分化过程中成骨相关基因的表达变化。

方法：应用密度梯度离心法分离hBMSCs，取第2代细胞通过流式检测及多向诱导分化方法进行干细胞鉴定；应用RT-PCR法对hBMSCs在体外成骨诱导不同时间点的成骨相关基因表达进行检测。

结果：第2代hBMSCs表达间充质干细胞表面标志CD44、CD90，具有成脂和成骨分化潜能。

成骨相关基因在诱导早期部分表达，中期均有表达，基因表达大部分在14天达高峰，与矿化相关的基因表达在21天达高峰。

结论：hBMSCs体外成骨诱导过程中成骨相关基因呈动态表达，其表达时序与成骨细胞生理发育基本相似。

Abstracts:ObjectiveTo investigate the osteogenic related genes expression during in vitro osteogenic differentiation of human bone mesenchymal stem cells (hBMSCs).MethodshBMSCs were isolated by density gradient centrifugation. Surface markers and cell cycle were analyzed by flow cytometry. The multiple differentiation potential of hBMSCs were identified using in vitro osteogenic and adipogenic induction. The osteogenic related genes expression of hBMSCs at different induction time point were evaluated by semiquantitative RT-PCR analysis.ResultsThe hBMSCs were derived from bone marrow and expressed CD44 and CD90, markers of mesenchymal stem cell. The second passage of hBMSCs showed adipogenic and osteogenic differentiation potential. During the osteogenic induction process,hBMSCs expressed part of osteogenic related genes in early stage, and all of them in middle stage.The peak expression of most of genes were on the 14th day, and the mineralization associated genes on the 21st day. ConclusionsThe osteogenic related gene expression of hBMSCs shows a dynamic progress during in vitro osteogenic induction, which is consistent with in vivo development of osteoblast.Key words:hBMSCs;in vitro differentiation;osteogenic genes;expression pattern骨缺损的修补和重建是修复重建外科临床面临的常见问题。

大鼠骨髓间充质干细胞体外培养以及成骨诱导

观
１２ＭＳｓ外分离、养．Ｃ体培
颈椎脱臼法处死大鼠，骨髓中分离出细胞，于３ ℃ 、于置７
５Ｃ饱和湿度的培养箱中培养，～４天首次换液，后每Ｏｚ３以３天换液１。每天观察细胞生长情况，～１次８２天细胞生长融合达８以上，含有００ＥＴ的０２胰蛋白酶消Ｏ用．１ＤＡ．５
１材料与方法１１主要试剂及仪器．
１４ＭＳｓ鉴定及成骨诱导．Ｃ的
收集培养的第３代ＭＳｓＢＣ，ＰＳ洗涤３次制备成单细胞
悬液，个样品约需２１个细胞。将重悬后的Ｓ大鼠骨每 × ０Ｄ髓间质干细胞悬液转移至流式检测管中，别加入Ｃ２、分Ｄ９
细胞培养箱（ｏｍａ，Ｄ９Ｃ３Ｆｒ）Ｃ２、Ｄ４兔抗鼠单克隆抗体均购自
ＤＡＫｏ公司。
ｌ酸甘油钠）对照组仅加入完全培养基，养３周，Ｂ磷，培ＰＳ冲洗后４多聚甲醛固定细胞，行茜素红染色５ｎ显微镜下％进ｍｉ，
目前，外分离培养ＢＭＳ的方法主要有两种：骨体ＭＣｓ全
细胞的特异性标志物ｌ，５向神经细胞转化的Ｂ — ＭＳｓ表］ＭＣ不达造血谱系标志物Ｃ１Ｃ５Ｃ３，Ｄ４而表达Ｃ４，Ｄｌ，Ｄ４，Ｄ４Ｃ１，Ｄ４

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成骨细胞的体外培养与鉴定☆
王勇平，廖皴，蒋矗
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王勇平，廖皴，蒋壶．骨细胞的体外培养与鉴定［．国组织工程研究与临床康复，２１，１（３：３ —２４成Ｊ中】０１５３）２１３６６
ＡｂｓｒｃｔｔａＢＡＣＫＧＲＯＵＮＤ：ｅｍｅｈｓｏｓｅｂａｔｕｔｒ『ｖｔａｅｃｒｎｌｉｔｓＴｈｔｏｄｆｏｔｏｌｓｌｅ门ｉｏｈｖｅｔｉｔｉｃｕｒａｉｍａｏｎ．０ＢＪＥＣＴＩＶＥ：ｕＴＯｓｍｍａｒｅｏｓｅｂａｔｓｕｃｉｉｏｃｔｅｍｅｈｄ，ｕｌｒｏｎｉｏｎａｄｉｅｎｉｃｔｎｓｇｓｉｔｏｌｓｏｒｅ，ｎｖｔｕｌｔｏｃｔｅｃｄｔ，ｎｚｒｕｒｕｉｄｔａｉｉｎｉｆｏＭＥＴＨＯＤＳ：ｃＡｏｍｐｔｒｂｅｅｒｖｓｐｒｍｅｄｉｂＭｅｎａｆｎｄａａａｅｅｃｕｅ－ａｓｄｒｔｉａｌｅｗａｅｆｏｒｎＰｕｄａｄＷｎａｇｔｂｓｓｔｓａｒｈｍａｎｓｒｐｓｐｂｉｈｄｏｕｃｉｔｕｌｅｓｂｔｅ００ａｎ０１ｔｈｅｙｗｏｄｓｓｅｂｌｓ．ｅｌｕｌｅｉｅｔｃｔｎ”ｉＥｎｉｈａｄＣｈｎｓｎｕａｅ．ｅｐｐｓｅｗｅｎ２０ｄ２ｗｉｔｅｋｒ ”ｏｔｏａｔｃｌｃｔ，ｄｎｉａｉ０ｈｕｒｉｆｏｎｇｌｎｉｅｅｌｇｇｓＴｈａｅｒｓａｄｓｒｉｇｉｉｏｃｌｅａｎｎｉｃｔｎｏｓｅｂａｔｒｎｌｄｅ．ｅｃｉｎｖｔｕｔｄｉｔｉａｉｆｏｔｏｌｓｓｗｅｅｉｃｕｄＲｅｐｔｉｅｒｓａｃｎｂｎｒｕｒｄｅｆｏｅｉｖｅｅｒｈａｄＭｅｔｎｙｉｒｃｕｅｔａａａｌｓｓｗｅｅｅｘｌｄｄ．ＲＥＳＵＬＴＡＮＤＳＣＯＮＣＬＵＳｌＯＮ：ｉｈｅｅｏｍｅｔｆｅｌｕｔｒｈｎｑｕｓ／ｉｏ．ｓｅｂａｔｒＷｔｔｅｄｖｌｐｈｎｌｃｌｅｔｏｃｕｅｃｉｅｎｖｔｏｔｏｌｓｓｆｒ０ｍｎｍａｏｎａｉＩｂｅ．ｐｉｔｕ．ｏｎｅｒｅｍｂｅｍａｒｗｎｄｎｎｂｎｉｓｅｈｖｅｕｃｓｆｌｕｔｒｄ．ｕｉａｅｓｏｈｔｈｓｔｏｌｓｓｈｖｏｓｒａｏ．ｏｅｌｕａｅｂｅｎｓｃｅｓｕｌｃｌｅＳｔｄｅｓｈｖｈｗｎｔａｅｅｏｓｅｂａｔａｅｏｓｙｕｔｔｐｃｌｈａｔｉｔｓａｄｇｏｄｂｏｏｉａｒｐｔｅ．ｒｅｎｌ，ｈｕｔｒｄｏｓｅｌｔｅｃｍｍｏｘｅｉｎａｄｅｔｙｉａａｒｃｅｒｉｎｏｉｌｇｃｌｏｅｒｓＣｕｒｔｔｅｃｌｅｔｏｂａｓｓａｒｏｃｓｃｐｉｙｕｎｅｐｒｍｅｔｌｍｏｌｎｖｒｉｉｏ
先报道用组织块培养法在体外成功培养了人成
骨细胞，此后陆续有成功培养成骨细胞的报道。
随着细胞培养技术的发展，目前已可从许多动物的骨、骨膜、骨髓基质及骨外组织中成功培养出典型的成骨细胞，就成骨细胞体外培养及鉴定现
技术的研究进展作一综述。
Ｗａｇｏｇｐｎ ☆ ，ｎｎ，ｉＹｇ
Ｓｕｉｇｆｒｔｄｙｎｏ
ｄｏｔｒｔＡｔｅｉｃｏａｅ，ｔｎｄｎｇｐｙｉｉｎ，ｈｓｃａＤｅｐｒｍｅｔｏａｔｎｆＯｒｈｅｃ，ｘｈｔｏｐｄｉｓＳｉｔ
ｔｔｄｈｓｏｌｇｐｈｌｇ，ｎｅａｉａｄｈｖｅｏａｉｔｄｎｇｏｔｏａｔｏｈａｄｍｅａｏｌｍｎｏｅｏｓｕｙｐｙｉｏｙ，ａｔｏｏｙａｄｒｐｒｎａｅｂｃｍｅｔｂｓｓｆｓｕｙｉｓｅｂｌｓｗｔｎｔｂｉａｄｂｎｈｅｏｒｇｒｓ
中国组织工程研究与临床康复
第７５眷第３３
２１０１一Ｏ８—１３出版
ＪｕｎｌｆＣｌｉａｈｂｌａｔｅＴｓｕｇｎｒｇＲｅｅｒｈＡｕｕｔ１，２１Ｖ１１，．３ｏｒａｉｃｌｏｎＲｅａｉｔｉｉｓｅＥｎｉｅｅｉｓａｃｉｖｎｇｓ３０１ｏ．５Ｎｏ３
１６９４年，Ｐｃ１ｅｋ等［就开始从事动物胚胎骨１骨代谢过程中成骨细胞和破骨细胞相互协
调，使骨质的形成与吸收处于一种动态平衡，维持骨骼的不断更新。其中，成骨细胞是骨形
成骨细胞培养的研究工作，１７９９年Ｍｉ等【ｌ２ｌｓ首
ｔｓｅｅｇｉｅｉｇｉｕｎｎｅｒ．ｓｎ
ＰｅｌｓＨｏｐｉｆｏｐｅ’ ｓｔｏａｌＳｈｎｇｉｉｏＴｇａｈａａｏｎＪＵｎｖｒｉ，ａｎｈａｉｅｓｔＳｈｇｉｙ
２０３，０２３Ｃｈｉａｎ
ｗａｇｐ１＠１３ｎｙ３２６
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摘要
背景：成骨细胞的体外培养方法均存在一定的局限性。目的：对体外培养成骨细胞的来源，成骨细胞的培养方法及培养条件，鉴定成骨细胞的标志进行总结。
Ｃｏｒｐｄｃｏｒｏｎｅｎｅｔ：ｅｓ
［ｔ：ｗｗｃｔｒｒｈｔ：ｃ．ｇｃｆｏｈｔ／ｗ．ｒ．ｇｔ／ｎｚｌｋｍ１ｐ／ｅｏｐ／ｃ
上海交通大学附属上海市第六人民医院骨科，海上
市２０３０２３
的重要手段，也成为研究成骨细胞生长代谢及骨
０引言
组织工程的基础。
ＤｅａｒｍｅｎｆｐｔｔｏＯｒｈｅｃ，ｘｈｔｏｐｄｉｓＳｉｔＰｐｌ’ ｅｏｅｓＨｏｓｉｐｔｏｆａｌＳｈｎｇｉｉｏｅｓｔ，ａｎｈａｖｒｉＳｈｇｉｙ
２０３．０２３Ｃｈｉａｎ
方法：以 “ ｓｏｌｔｅｌｕｕｅｉｎｉａｏ ”为检索词，检索ＰｂｅＯｔｂａ，ｌｌｒ，ｅｔｉｔｎｅｓｃｔｃｄｆｉｃｕＭｄ数据库（００２１１２０／Ｏ，以 “ ０成骨细胞、细胞培养、鉴定”为检索词，检索万方数据库（００２１）２０／０Ｏ，文献检索语种限制为英文和中文。纳入与成骨细胞的体外培养及鉴定密切相关的研究，排除重复性研究和Ｍｅｔａ分析后对文献进行综述。
１３ｃｍ６．ｏ
通讯作者：蒋壶，
主任医师，教授，
起源于间充质的骨祖细胞或称前成骨细胞，骨
祖细胞大致可分为两类：定向骨祖细胞和可诱
导骨祖细胞。一般在生理状态下定向骨祖细胞
为成骨细胞的主要来源，而在骨折及骨修复等
博士生导师，上海交通大学附属第六人民医院骨科，
ＷａｇＹ，ｉｏＹ，ｉｇＹ．ｎｖｒｕｔｒｎｅｔｉａｉｎｏｓｅｂｓ．ｈｎｇｏＺｚｉｏｇｈｎａｊｕＬｃｕｎｎＰＬａＪａＩｉｏｃｌｅａｄｉｎｉｔｆｔｏｌｔＺｏｇｕｕｈＧｎｃｅｇＹｎｉｙｉｈａｇｎｔｕｄｆｏｃｏａｓｕｎＫｎｆ．０１１（３：２１６３．ａｇｕ２１；５３）３ —２４６【ｔ：ｃｗ．ｒｒｎｈｔ：ｅ．ｌｆｏｎｈｔ／ｗｃｔ．ｔ／ｎｚｃ．ｒ】ｐ／ｖｅｃｐ／ｇｋｃ
Ｊａｎ，ｉｆｉｇＹａｏＣｈｅ
ｐｙｃａＰｒ伯ｓｏｒｈｓｉｉｎｏｓＤｏｔｒｕｅｒｉｏｒｃｏａＩｐｖｓ．ｓＤｅｐｒｍｅｔｏａｔｎｆＯｒｈｅｃ，ｘｈｔｏｐｄｉｓＳＩｔＰｐｌ’ ｅｏｅｓＨｏｓｉｐｔｏｆａｌＳｈｎｇｉｉｏｏｎａｈａａＴｇＪＵｎｖｒｉ，ａｎｈａｉｅｓｔＳｈｇｉｙ２０２３０３Ｃｈｎｉａ
结果与结论：随着体外细胞培养技术的发展，人们已经从许多动物的骨、骨膜、骨髓及骨外组织中成功培养了成骨细胞，经鉴定具有典型成骨细胞的特征及良的生物学特性，目好前体外培养成骨细胞为常用的体外实验模型，成为研究骨生理、病理及修复的重要手段，也成为研究成骨细胞生长代谢及骨组织工程的基础。关键词：成骨细胞；细胞培养；鉴定；生物学特性；骨组织工程ｄｉ３６￣ｓｎ１７－２５２１．３３ｏ１９９．ｓ．３８２．３．７：０ｉ６０１０