第七章 肠道致病菌的检验与鉴定 PPT课件
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肠道致病菌检验共71页文档
25、学习是劳动，是充满思想的劳动。——乌申斯基
谢谢！
肠道致病菌检验
11、用道德的示范来造就一个人，显然比用法律来约束他更有价值。—— 希腊
12、法律是无私的，对谁都一视同仁。在每件事上，她都不徇私情。—— 托马斯
13、公正的法律限制不了好的自由，因为好人不会去做法律不允许的事 情。——弗劳德
14、法律是为了保护无辜而制定的。——爱略特 15、像房子一样，法律和也会招来人们的反感轻蔑和嫉妒。——培根 22、业精于勤，荒于嬉；行成于思，毁于随。——韩愈
23、一切节省，归根到底都归结为时间的节省。——马克思 24、意志命运往往背道而驰，决心到最后会全部推倒。——莎士比亚
谢谢！
肠道致病菌检验
11、用道德的示范来造就一个人，显然比用法律来约束他更有价值。—— 希腊
12、法律是无私的，对谁都一视同仁。在每件事上，她都不徇私情。—— 托马斯
13、公正的法律限制不了好的自由，因为好人不会去做法律不允许的事 情。——弗劳德
14、法律是为了保护无辜而制定的。——爱略特 15、像房子一样，法律和也会招来人们的反感轻蔑和嫉妒。——培根 22、业精于勤，荒于嬉；行成于思，毁于随。——韩愈
23、一切节省，归根到底都归结为时间的节省。——马克思 24、意志命运往往背道而驰，决心到最后会全部推倒。——莎士比亚
第七章食品中常见病原菌微生物检验技术ppt
最适生长温度37℃，最适pH 为7.4，对热抵抗力较强， 80℃30min才能被杀死。
可在10%-15%氯化钠和40% 胆汁中生长
生物学特性---培养特征
▪
大多数菌株产生类胡萝卜素，使细胞团呈现出深橙色到
浅黄色，色素的产生取决于生长的条件，而且在单个菌株中
可能也有变化
▪
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲
基红反应阳性，VP反应弱阳性。
▪
许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化
明胶。
素、红霉素等高度敏感。
致病性
金黄色葡萄球菌是人 类化脓感染中最常见的病 原菌，临床表现多种多样 ，可引起局部化脓感染， 也可引起肺炎、胃肠炎、 心包炎等，甚至败血症、 脓毒症等全身感染。
我国卫生部颁布的食品微生物指标有菌 落总数、大肠菌群和致病菌三项。
致病菌：能够引起人类发病的细菌。对不同 的食品和不同的场合，应该选择一定的参考 菌群进行检验。
-
第一节 沙门氏菌检验技术
一、生物学特性 是一大群在血清学上相关的革兰氏阴性杆菌，无芽孢、 无荚膜，周身鞭毛，能运动的需氧或兼性厌氧短杆菌。
36± 1℃ 6hr
报告结果
第一法
第二法 Baird-Parker平板法检验程序
定量检测 （平板法）
适用于检测金黄色 葡萄球菌数不小于 10/g（mL）的食品
-
定量
25g样品+ 225ml 生理盐水
检测
梯度稀释
（MPN法）
选三个连续梯度，每个梯度各取3mL加入3管胰酪胨大豆肉汤
36± 1℃ 4548hr
～48 h。
▪ （4）观察菌落形态
▪
Baird-Parker 平板、血平板上挑取可疑菌落。
可在10%-15%氯化钠和40% 胆汁中生长
生物学特性---培养特征
▪
大多数菌株产生类胡萝卜素，使细胞团呈现出深橙色到
浅黄色，色素的产生取决于生长的条件，而且在单个菌株中
可能也有变化
▪
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。甲
基红反应阳性，VP反应弱阳性。
▪
许多菌株可分解精氨酸，水解尿素，还原硝酸盐，液化
明胶。
素、红霉素等高度敏感。
致病性
金黄色葡萄球菌是人 类化脓感染中最常见的病 原菌，临床表现多种多样 ，可引起局部化脓感染， 也可引起肺炎、胃肠炎、 心包炎等，甚至败血症、 脓毒症等全身感染。
我国卫生部颁布的食品微生物指标有菌 落总数、大肠菌群和致病菌三项。
致病菌：能够引起人类发病的细菌。对不同 的食品和不同的场合，应该选择一定的参考 菌群进行检验。
-
第一节 沙门氏菌检验技术
一、生物学特性 是一大群在血清学上相关的革兰氏阴性杆菌，无芽孢、 无荚膜，周身鞭毛，能运动的需氧或兼性厌氧短杆菌。
36± 1℃ 6hr
报告结果
第一法
第二法 Baird-Parker平板法检验程序
定量检测 （平板法）
适用于检测金黄色 葡萄球菌数不小于 10/g（mL）的食品
-
定量
25g样品+ 225ml 生理盐水
检测
梯度稀释
（MPN法）
选三个连续梯度，每个梯度各取3mL加入3管胰酪胨大豆肉汤
36± 1℃ 4548hr
～48 h。
▪ （4）观察菌落形态
▪
Baird-Parker 平板、血平板上挑取可疑菌落。
第七章 肠杆菌科
外毒素（A群Ⅰ、Ⅱ型） 志贺毒素 ST(VT) 有3种毒性，与内毒素协同作用，加重局部和全身症状
全身
所致疾病
急性细菌性痢疾 •急性典型：发热、腹痛、脓血粘液便、里急后重 •急性非典型：易误诊，导致带菌和慢性 •中毒性痢疾：小儿 慢性细菌性痢疾：病程迁移两个月以上
带菌者
三、微生物学检查
标本：新鲜脓血便/肛拭
小肠上部粘膜
固有层淋巴结
肠系膜淋巴结
进入血液
再次进入血液
第一次菌血症
第二次菌血症
3、免疫性
细胞免疫：胞内寄生菌，抗体不能发挥 作用，仅能杀伤细胞外的沙门菌，故沙 门菌主要依靠细胞免疫。 肠热症后可获得牢固的免疫力
微生物学检查
1.查病原
标本 伤寒和付伤寒 第1周取静脉血 第1-3周取骨髓液 第2周起取粪、尿 食物中毒 可疑食物 呕吐物 粪 败血症 血
防治原则
加强卫生监督管理 抗生素治疗 口服减毒活疫苗（Ty21a）
带菌者检查
分离病原菌 查Vi抗体 TYPHOID MARY
其他肠道杆菌
克雷伯菌属--------医源性感染的重要细菌
变形杆菌-----条件致病菌 食物中毒 多形性 迁徙生长现象 分解尿素 外斐试验
复习思考题
1.简述肠道杆菌的共同生物学特性 2.简述引起腹泻的大肠埃希菌的种类和所 致疾病 3.简述痢疾杆菌的致病性 4.简述伤寒沙门菌引起的肠热症的主要致 病过程 5.试述肥达试验结果分析及其意义
及时送检/暂用30%甘油缓冲盐水保存
快速诊断
分离培养 SS平板（无色透明小菌落）
荧光菌球试验 协同凝集试验
生化反应
血清学反应
最后诊断
四、防治原则
预防：控制传染源，切断传播途径
全身
所致疾病
急性细菌性痢疾 •急性典型：发热、腹痛、脓血粘液便、里急后重 •急性非典型：易误诊，导致带菌和慢性 •中毒性痢疾：小儿 慢性细菌性痢疾：病程迁移两个月以上
带菌者
三、微生物学检查
标本：新鲜脓血便/肛拭
小肠上部粘膜
固有层淋巴结
肠系膜淋巴结
进入血液
再次进入血液
第一次菌血症
第二次菌血症
3、免疫性
细胞免疫：胞内寄生菌，抗体不能发挥 作用，仅能杀伤细胞外的沙门菌，故沙 门菌主要依靠细胞免疫。 肠热症后可获得牢固的免疫力
微生物学检查
1.查病原
标本 伤寒和付伤寒 第1周取静脉血 第1-3周取骨髓液 第2周起取粪、尿 食物中毒 可疑食物 呕吐物 粪 败血症 血
防治原则
加强卫生监督管理 抗生素治疗 口服减毒活疫苗（Ty21a）
带菌者检查
分离病原菌 查Vi抗体 TYPHOID MARY
其他肠道杆菌
克雷伯菌属--------医源性感染的重要细菌
变形杆菌-----条件致病菌 食物中毒 多形性 迁徙生长现象 分解尿素 外斐试验
复习思考题
1.简述肠道杆菌的共同生物学特性 2.简述引起腹泻的大肠埃希菌的种类和所 致疾病 3.简述痢疾杆菌的致病性 4.简述伤寒沙门菌引起的肠热症的主要致 病过程 5.试述肥达试验结果分析及其意义
及时送检/暂用30%甘油缓冲盐水保存
快速诊断
分离培养 SS平板（无色透明小菌落）
荧光菌球试验 协同凝集试验
生化反应
血清学反应
最后诊断
四、防治原则
预防：控制传染源，切断传播途径
致泻大肠埃希式菌的检验PPT.
OK多价2 O26：K60（B6） O125：K70（B15） O126：K71（B16） O128：K67（B12） OK多价3 O44：K74（L） O114：K90（B） O119：K69（B14） O142：K86（B）
5、结果报告
❖ 根据以上生化试验和血清学试验结果作出 报告。
谢谢观看！
❖ 赖氨酸脱羧试验：细菌从赖氨酸脱去羧基（COOH），导致培养基pH变碱，指示剂溴麝香草酚 蓝就显示出蓝色，试验结果为阳性，如果细菌不能 脱酸，培养基不变则为黄色。
4、血清学试验
❖ 假定试验：挑取经生化试验证实为大肠埃希菌的 琼脂培养物，用致病性大肠埃希氏菌、 侵袭性大 肠埃希氏菌和产肠毒素大肠埃希氏菌多价O 血清 和出血性大肠埃希氏菌 O157 血清做玻片凝集试 验。
❖ 当与某一种多价 O 血清凝集时，再与该多价血清 所包含的单价O血清做试验。
❖ 致泻大肠埃希氏菌所包括的 O抗原群。如与某一 单价 O 血清呈现强凝集反应，即为假定试验阳性。
多价血清 单价血清
单价血清单价血清源自单价血清OK多价1 O55：K59（B5） O86：K61（B7） O111：K58（B4） O127a：K63（B8）
素琼脂、KCN 肉汤和赖氨酸脱羧酶试验培养基。 给他一张名片，这个时候他在紧张的过程当中有一些缓冲，你在几秒钟之内把话说完了，他感觉到自己的威胁已经消失了，这时他的
心理状态又回到了进店门之前的那种舒适的状态，这个时候他就可以在那看车了。 忌“甜”食，忌“咸”食，
以上培养物均在 36℃培养过夜。 二、骑自行车应该遵守的规定
这就是帮助客户解决疑难问题，客户的问题解决了，交易也达成了。
TSI斜面产酸或不产酸,底层产酸, （二）夏季锻炼需注意安全
微生物检验 第七章 肠杆菌
• V-P -、PAD -：埃希菌属、志贺菌属、沙门菌 属、枸橼酸菌属、爱德华菌属
• V-P +、PAD -：克雷伯属、肠杆菌属、哈夫尼 亚菌属、泛菌属、沙雷菌属、耶尔森菌属
• V-P -、PAD +：变形杆菌属、摩根菌属、普罗 维登斯属
鉴定步骤
• 属： KIA、MIU、IMViC等 • 种：血清学试验等
致病因素
肠毒素：使肠道细胞中cAMP的水平升 高，引起肠液大量分泌而导致腹泻
➢不耐热肠毒素（heat labile toxin，LT）： 加热 65℃、30分钟即被破坏
➢蛋白质，分子量大，有免疫原性
致病因素
肠毒素
➢耐热肠毒素（heat stable toxin，ST) ➢对热稳定，100℃经20分钟仍不被破坏 ➢分子量小，免疫原性弱 ➢有些菌株只产生一种肠毒素，有些则两种
• 条件致病菌：又称机会致病菌，在某种特定条件下可致 病的细菌。当人体的正常菌群其集聚部位改变、机体抵 抗力降低或菌群失调时则可致病， 在一定的条件下，能 引起机会感染或二重感染。
四、微生物学检验
• 标本采集
• 肠外标本：依据感染部位而定,如血液、体液、呼 吸道、伤口、尿液及其他各种标本
• 肠道标本疾病早期留取新鲜粪便，最好带脓血或粘 液，应在2h内进行，以利志贺菌等检出。如不能及 时培养应冷藏待检。
抗体检测
• 用已知抗原检测血清中的抗体，可用于感 染性疾病的辅助诊断
用已知伤寒菌的H和O抗原以及甲型(A)与乙型(B)副伤寒沙门氏菌的抗原与病人血 清做凝集试验
第二节 埃希菌属 (Escherichia)
一、分类
1. 大肠埃希菌（E. coli）：最常见的临床分 离菌，也是肠道中G-杆菌的主要成员，常 引起各种肠内外的感染，是腹泻和泌尿道 感染的主要病原菌。
• V-P +、PAD -：克雷伯属、肠杆菌属、哈夫尼 亚菌属、泛菌属、沙雷菌属、耶尔森菌属
• V-P -、PAD +：变形杆菌属、摩根菌属、普罗 维登斯属
鉴定步骤
• 属： KIA、MIU、IMViC等 • 种：血清学试验等
致病因素
肠毒素：使肠道细胞中cAMP的水平升 高，引起肠液大量分泌而导致腹泻
➢不耐热肠毒素（heat labile toxin，LT）： 加热 65℃、30分钟即被破坏
➢蛋白质，分子量大，有免疫原性
致病因素
肠毒素
➢耐热肠毒素（heat stable toxin，ST) ➢对热稳定，100℃经20分钟仍不被破坏 ➢分子量小，免疫原性弱 ➢有些菌株只产生一种肠毒素，有些则两种
• 条件致病菌：又称机会致病菌，在某种特定条件下可致 病的细菌。当人体的正常菌群其集聚部位改变、机体抵 抗力降低或菌群失调时则可致病， 在一定的条件下，能 引起机会感染或二重感染。
四、微生物学检验
• 标本采集
• 肠外标本：依据感染部位而定,如血液、体液、呼 吸道、伤口、尿液及其他各种标本
• 肠道标本疾病早期留取新鲜粪便，最好带脓血或粘 液，应在2h内进行，以利志贺菌等检出。如不能及 时培养应冷藏待检。
抗体检测
• 用已知抗原检测血清中的抗体，可用于感 染性疾病的辅助诊断
用已知伤寒菌的H和O抗原以及甲型(A)与乙型(B)副伤寒沙门氏菌的抗原与病人血 清做凝集试验
第二节 埃希菌属 (Escherichia)
一、分类
1. 大肠埃希菌（E. coli）：最常见的临床分 离菌，也是肠道中G-杆菌的主要成员，常 引起各种肠内外的感染，是腹泻和泌尿道 感染的主要病原菌。
肠道致病菌检验简述PPT71页
肠道致病菌检验简述
Hale Waihona Puke 46、法律有权打破平静。——马·格林 47、在一千磅法律里，没有一盎司仁 爱。— —英国
48、法律一多，公正就少。——托·富 勒 49、犯罪总是以惩罚相补偿；只有处 罚才能 使犯罪 得到偿 还。— —达雷 尔
50、弱者比强者更能得到法律的保护 。—— 威·厄尔
31、只有永远躺在泥坑里的人，才不会再掉进坑里。——黑格尔 32、希望的灯一旦熄灭，生活刹那间变成了一片黑暗。——普列姆昌德 33、希望是人生的乳母。——科策布 34、形成天才的决定因素应该是勤奋。——郭沫若 35、学到很多东西的诀窍，就是一下子不要学很多。——洛克
产气肠杆菌PPT课件
4
且往往为医院感染。鼠疫耶尔森菌可 引起烈性传染病鼠疫。 2. 人类肠道感染
埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属和耶 尔森菌属。主要引起各种急、慢性肠 道感染、食物中毒、旅行者腹泻 (1)
1. 形态结构 Ｇ-杆状或球杆状、无芽孢、多数有鞭
毛，能运动。致病性菌株有菌毛。 2. 抗原成分
19
二、临床意义 ⑵ 2. 所致疾病 ⑴ 肠道外感染 是临床分离的G-杆菌中最常见的 菌种，可引起泌尿系等各种类型的感染。 引起泌尿系感染的菌株以血清型01、 2、6为多见，本菌还可引起菌血症、 胆囊炎、肺炎及新生儿脑膜炎等。 常 见于腹腔内脓肿、肠穿孔继发腹膜炎、 肠道手术后继发感染或大面积灼伤创面 感染。
20
有时与类杆菌、粪肠球菌混合感染。产 生的脓液粘稠，有粪臭味。该菌对一般 抗生素敏感，易产生超广谱β-内酰胺酶， 而导致对第三代头孢菌素耐药。 ⑵ 肠道内感染
其中有些菌株能引起轻微腹泻至霍乱 样严重腹泻，并能引起致死性并发症如 溶血性尿毒综合征。
21
引起肠道感染的大肠埃希菌
(1) 肠毒素型大肠埃希菌(ETEC)： 引起儿童腹泻和旅行者腹泻，类似轻型 霍乱样腹泻。该菌产生耐热肠毒素(ST) 和不耐热肠毒素(LT)。
24
2. 抗原成分 ⑴ O抗原是多糖磷脂复合物(LPS)，耐 热加热100℃不能灭活，已有171种 是血清学分型的基础。 ⑵ H抗原是不耐热的蛋白质，已知有56 种，均为单相菌株。 ⑶ K抗原是多糖荚膜抗原，对热稳定， 能阻止O凝集。血清型别按O：K：H 的顺序以数字表示。
25
3. 培养特性 兼性厌氧，营养要求不高，在普通
34
二、临床意义
(一) 致病因素 1. 侵袭力 有Vi抗原的具有侵袭力，穿过小肠
且往往为医院感染。鼠疫耶尔森菌可 引起烈性传染病鼠疫。 2. 人类肠道感染
埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属和耶 尔森菌属。主要引起各种急、慢性肠 道感染、食物中毒、旅行者腹泻 (1)
1. 形态结构 Ｇ-杆状或球杆状、无芽孢、多数有鞭
毛，能运动。致病性菌株有菌毛。 2. 抗原成分
19
二、临床意义 ⑵ 2. 所致疾病 ⑴ 肠道外感染 是临床分离的G-杆菌中最常见的 菌种，可引起泌尿系等各种类型的感染。 引起泌尿系感染的菌株以血清型01、 2、6为多见，本菌还可引起菌血症、 胆囊炎、肺炎及新生儿脑膜炎等。 常 见于腹腔内脓肿、肠穿孔继发腹膜炎、 肠道手术后继发感染或大面积灼伤创面 感染。
20
有时与类杆菌、粪肠球菌混合感染。产 生的脓液粘稠，有粪臭味。该菌对一般 抗生素敏感，易产生超广谱β-内酰胺酶， 而导致对第三代头孢菌素耐药。 ⑵ 肠道内感染
其中有些菌株能引起轻微腹泻至霍乱 样严重腹泻，并能引起致死性并发症如 溶血性尿毒综合征。
21
引起肠道感染的大肠埃希菌
(1) 肠毒素型大肠埃希菌(ETEC)： 引起儿童腹泻和旅行者腹泻，类似轻型 霍乱样腹泻。该菌产生耐热肠毒素(ST) 和不耐热肠毒素(LT)。
24
2. 抗原成分 ⑴ O抗原是多糖磷脂复合物(LPS)，耐 热加热100℃不能灭活，已有171种 是血清学分型的基础。 ⑵ H抗原是不耐热的蛋白质，已知有56 种，均为单相菌株。 ⑶ K抗原是多糖荚膜抗原，对热稳定， 能阻止O凝集。血清型别按O：K：H 的顺序以数字表示。
25
3. 培养特性 兼性厌氧，营养要求不高，在普通
34
二、临床意义
(一) 致病因素 1. 侵袭力 有Vi抗原的具有侵袭力，穿过小肠