白桦脂酸对人多发性骨髓瘤细胞系RPMI_8226凋亡的诱导
三氧化二砷诱导肿瘤细胞凋亡
小 鼠 ７１ ９ ９细 胞 株 和 小 鼠 肝 癌 移 植 瘤 组 织 中 均 可 观
亡 效 应谱 ．
性 Ｄ Ａ内 切 酶 的激 活 ， 自己结 束 其 生命 的过 程 ， Ｎ
属 于 生 理 性 的 细 胞 死 亡 而 不 是 坏 死 性 改 变 ，现 已 明
确 细 胞 凋亡 不 仅 是 由特 定 的 基 因 控 制 ，还 受 周 围刺 激 因 素 的诱 导 或 抑 制 ．细 胞 凋 亡 的诱 导 主 要 有 化 疗
胞死亡过低 的疾病 ，
２ 细 胞 凋 亡 的概 述
细胞凋亡概 念 是指在 一定 的生理 病理条 件 下 ，
遵 循 自身 的 程 序 ，通 过 启 动 内 部 机 制 ，主 要 是 内源
亡 效 应 ，现 已 证实 Ａ ２ 对 胃癌 、胰 腺 癌 细 胞 有 诱 ｓ０
导 凋亡 作 用 ， 对 多 发 性 骨 髓 瘤 （ ＭＭ） 系 、食 管 癌和 神 经 母 细 胞 瘤 也 有 抵 制 生 长 和 诱 导 凋 亡 效 应 【 ．Ａ ２ 具 有 一个 相 对 较 广 的 诱 导 肿 瘤 细 胞 凋 ７ ＿ ｓ０
３ Ａ ２ ３ 导 肿 瘤 细 胞 的 凋 亡 Ｓ０ 诱 ３ １ 秦 叔 逵 … 一３等 报 告 ，在 体 内 外 用 低 、 中 剂 ． ｌ ＿
效抑制肺癌细胞株 Ａ ９ 的生 长 ，且 对 人 外 周 血 淋 巴 细 胞 影 响 较 小 ，并 证 实 这 种 作 用 主 要 是 诱 发 肺 癌 的
小白菊内酯对胃癌BGC823细胞凋亡表型的影响
小白菊内酯对胃癌BGC823细胞凋亡表型的影响
小白菊内酯是一种天然产物，具有多种生物活性，其中包括对肿瘤细胞的抑制作用。
近年来的研究表明，小白菊内酯可以诱导多种肿瘤细胞的凋亡，并有望成为治疗各种恶性肿瘤的新型药物。
胃癌是一种高发病率的恶性肿瘤，治疗难度大，预后差。
BGC823细胞是一种人胃癌细胞系，被用于研究胃癌发生机制
及治疗新药物的筛选。
近期的研究表明，小白菊内酯对BGC823细胞凋亡表型有明
显影响。
一项实验显示，小白菊内酯可以诱导BGC823细胞
发生凋亡，且剂量依赖性强。
随着小白菊内酯浓度的增加，BGC823细胞凋亡率逐渐上升。
在小白菊内酯浓度为20 µM时，BGC823细胞凋亡率可达到50%以上。
此外，小白菊内酯还可
以促进BGC823细胞凋亡相关蛋白Bax的表达，并抑制凋亡
抑制蛋白Bcl-2的表达。
这些结果表明，小白菊内酯通过调节
凋亡信号通路，诱导BGC823细胞发生凋亡。
除了诱导细胞凋亡外，小白菊内酯还会影响BGC823细胞的
细胞周期。
研究结果表明，小白菊内酯能够明显阻滞BGC823
细胞的G2/M期，抑制细胞增殖。
总之，小白菊内酯可以影响胃癌BGC823细胞的凋亡表型，
并具有明显的抑制作用。
小白菊内酯可能成为治疗胃癌的新型药物，但其抗肿瘤活性和毒副作用需要经过进一步的研究和验证。
ω-3多不饱和脂肪酸单药或联合用药逆转多发性骨髓瘤耐药性及细胞凋亡的机制研究
ω-3多不饱和脂肪酸单药或联合用药逆转多发性骨髓瘤耐药性及细胞凋亡的机制研究石微;房德芳;赵永刚【摘要】Objective:To explore the role and mechanisms ofω-3 polyunsaturated fatty acids (ω-3PUFAs) alone or in combination with dexamethasone (DEX) in inducing cell apoptosis and reversing drug resistance in multiple myeloma (MM). Methods:DEX-resistant MM cell line MM1R was treated with different concentrations of eicosapentaenoic acid (EPA) or docosahexaenoic acid (DHA) alone or in combination with DEX for 24 or 48 h. Cel proliferation was detected by MTT assay. Cel cycle and apoptosis were measured by flow cytometry. Expression levels of apoptosis-related proteins were analyzed by Western blot. Two-tailed, unpaired Student's t-test was used to compare the two treatment groups.A value of P<0.05 was considered statistically significant. Results:MM1R proliferation was inhibited by different concentrations (10, 20, 50, and 100μM) of EPA or DHA alone or in combination with 10μM DEX in a dose-and time-dependent manner. The inhibition effect was significantly higher in combinative groups than in single EPA or DHA treatment group(P=0.014, P=0.032). The percentage of G0/G1 phase and cell apoptosis rate in MM1R treated with different concentrations of EPA or DHA alone increased in a dose-dependent manner. This percentage was also significantly higher in the combinative groups than in the single EPA or DHA treatment group (P=0.015, P=0.004). The expression levels of cleavedcaspase-3 and Bax were upregulated, whereas those of pro-caspase-3 and BCL-2 were downregulated in a dose-dependent manner. Drug resistance gradually decreased in MM1R cells at different concentrations of EPA or DHA with the increase of drug concentration. The reversal fold also increased gradual y, whereas the cel s decreased in the two drug-combination groups compared with the single-drug group. Moreover, the drug-resistance reversal index increased significantly. Conclusion:ω-3PUFAs can inhibit DEX-resistant MM cell proliferation, arrest cell cycle,and induce cell apoptosis.ω-3PUFAs also exhibit a synergistic anti-resistanteffect in combination with DEX. Furthermore,ω-3PUFAs can serve as novel effective drugs for MM treatment.%目的：探讨ω-3多不饱和脂肪酸（ω-3 polyunsaturated fatty acids，ω-3 PUFA）单药或联合糖皮质激素地塞米松（dexametha⁃sone，DEX）逆转多发性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）耐药性及诱导细胞凋亡的作用及其机制。
FLT3抑制剂的抗肿瘤研发现状
前言
近年来，蛋白激酶抑制剂一直都是抗肿瘤药物 研发的热点领域，有许多小分子激酶抑制剂如伊马 替尼、索拉非尼和舒尼替尼已经上市，此外还有大 量的小分子激酶抑制剂处于临床研究阶段。FMS 样酪氨酸激酶 3（Fms-like tyrosine kinase，FLT3） 又名胎肝激酶 -2（Fetal Liver Kinase-2，FLK2）和 干细胞激酶 -1（Stem Cell Kinase-1，STK1），是一种 第三类受体酪氨酸激酶［1］。FLT3 在造血作用和 淋巴细胞增殖中发挥关键作用，FLT3 的异常激活 与多种肿瘤特别是急性髓性白血病（Acute Myeloid Leukemia，AML）的发生发展密切相关［2］。FLT3 高
关键词 ：FLT3 ；抑制剂 ；肿瘤 中图分类号 ：R965.1，R733.3 文献标识码 ：A 文章编号 ：2095-1264（2015）01-0001-13 doi ：10.3969/j.issn.2095-1264.2015.001
Research and Development Status of FLT3 Inhibitors as Antineoplastic Drugs★
★基金项目 ：国家自然科学基金项目资助（30873137，30772645，81172927）。 作者简介 ：姚磊，男，硕士研究生，研究方向 ：小分子抗癌药物的研发，E-mail ：yaolei19901014@。 *通讯作者 ：余聂芳，男，教授、博士生导师，研究方向 ：合理药物设计、抗肿瘤靶向药物筛选与发现、小分子介导的免疫治
癌 ；肾细胞癌 美元（2013年）
2. 舒尼替尼 （SUGEN Inc）
F
细胞生物学研究中的激活剂和抑制剂.
细胞生物学研究中的激活剂和抑制剂Anandika Dhaliwal (anandika dot dhaliwal at gmail dot com)Rutgers University, New Jersey, United States译者王秀英(mary at labome dot com)美国新泽西州普林斯顿合原研究有限责任公司(Synatom Research)DOI/10.13070/.3.185日期更新: 2014-09-18; 原始版: 2013-04-27引用实验材料和方法2013;3:185摘要在细胞生物学研究中使用的化学激活剂和抑制剂的综述。
英文摘要A comprehensive review of chemical activators and inhibitors used in cell biology research.介绍细胞生物学研究细胞结构、生理特性及细胞功能。
它涉及到对细胞器、细胞与周围环境间相互作用、生命周期、分化及死亡的研究。
细胞生物学与遗传学、分子生物学、发育生物学和生物化学等其它生物学领域是密切相关的。
[放大]图 1.真核细胞骨架。
肌动蛋白纤维显示为红色，微管为绿色，核为蓝色。
肌动蛋白染色使用的是罗丹明-鬼笔环肽，微管使用的是连接有Alexa488的抗α微管蛋白着色剂，DNA则使用的是Hoechst染料。
对于细胞生物学领域的研究者而言，为了更加全面地理解细胞的功能、细胞的信号传递以及控制细胞命运、功能及表型的胞内机制，抑制剂与激活剂是至关重要的研究工具。
许多抑制剂和激活剂都被广泛用于研究细胞动力学及功能。
这里我们对真核细胞中各种细胞生物学研究如细胞内吞、分泌、粘附、细胞骨架动力学、内质网和高尔基体研究中常用的抑制剂和激活剂进行了综述。
细胞骨架细胞骨架为细胞提供了特定的结构与形状。
真核细胞主要有三种细胞骨架纤维：1）微丝，2）中间丝和3）微管。
∙微丝（肌动蛋白丝）：这是细胞骨架中最细的纤维。
白藜芦醇对脂多糖诱导的BV2细胞炎症与凋亡反应的保护机制
白藜芦醇对脂多糖诱导的BV2细胞炎症与凋亡反应的保护机制陈二华;朱慧芳;谭东明;张建华;丁旭;殷紫【期刊名称】《中成药》【年(卷),期】2022(44)11【摘要】目的研究白藜芦醇对脂多糖诱导的BV2细胞炎症与凋亡反应的保护机制。
方法脂多糖刺激BV2细胞建立炎症模型,随机分为对照组、脂多糖组、脂多糖+白藜芦醇组、白藜芦醇组。
采用Western blot、RT-qPCR、荧光染色与细胞流式分析,检测白藜芦醇对BV2细胞的保护作用及分子机制。
结果白藜芦醇可抑制脂多糖引起的细胞凋亡及IL-6、IL-1、TNF-αmRNA表达升高,增加LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,降低SQSTM1蛋白表达,减少脂多糖引起的溶酶体细胞器损伤,提高BV2细胞中溶酶体的荧光强度。
结论白藜芦醇对脂多糖引起BV2细胞的炎症与凋亡反应有保护作用,其分子机制可能是通过调控TLR4-FOXO3信号通路影响细胞的自噬水平,从而减轻炎症因子的释放与细胞的凋亡反应。
【总页数】5页(P3663-3667)【作者】陈二华;朱慧芳;谭东明;张建华;丁旭;殷紫【作者单位】江苏护理职业学院药学与中药学院;江苏护理职业学院护理与助产学院【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.白藜芦醇对脂多糖诱导的人肺泡上皮细胞A549凋亡的保护作用机制2.鹅去氧胆酸抗脂多糖诱导的BV2小胶质细胞炎症反应作用及机制3.白藜芦醇通过调节BDNF/Akt/CREB及TREM1/2表达失衡抑制脂多糖诱导的BV2小胶质细胞炎症反应14.肉苁蓉对脂多糖诱导的BV2细胞炎症反应的保护作用5.过表达NLRC3抑制脂多糖诱导的小胶质 BV2细胞炎症反应实验研究因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
小分子抑制剂、激动剂、拮抗剂--DNA损伤DNA修复信号通路
DNA损伤/DNA修复人类细胞中的DNA每天会受到数以万计的外源性损伤（化学污染、紫外线、电离辐射、烷基化/甲基化等引起）和内源性损伤（碱的氧化、烷基化、水解等引起）。
损伤后DNA会发生单链和双链断裂，未修复的DNA损伤会导致细胞衰老、凋亡和恶性肿瘤等等。
为了避免此类情况，激发了细胞的DNA损伤反应（DDR）。
DNA损伤反应（DDR）能够检测DNA的损伤并介导其修复，包含DNA损伤、细胞周期停滞、DNA复制调控、DNA损伤修复旁路等一系列通路的调控，以维持基因组的稳定性和细胞活力。
异常的DNA损伤反应与衰老、癌症和免疫疾病有关。
DNA损伤/DNA修复通路转导过程当DNA受到外源性或内源性损伤后，会发生单链和双链断裂，DNA损伤反应会被激活。
DNA双链断裂激活DNA-PK与ATM/ATR激酶。
DNA-PK诱导DNA修复，涉及错配、碱基切除、核苷酸切除修复等多种机制。
RPA、Rad51和fanconi贫血蛋白等也可直接用于DNA修复。
ATM/ATR激酶经过两个并行级联最终将CyclinB-cdc2复合体失活：1）ATM/ATR激酶激活Chk2激酶，Chk2激酶磷酸化并使失活Cdc25，同时也通过Chk1抑制Cdc25，从而阻止cdc2的激活，快速抑制细胞有丝分裂从G2期进入M期。
此外，ATR通过刺激Cdk1抑制激酶Wee1来抑制Cyclinb/Cdk1的激活，防止DNA损伤的细胞进入有丝分裂。
2）另一级联反应稍慢，Chk2激酶磷酸化p53，使其从MDM2和MDM4(MdmX)上分离，激活p53下游调节基因，从而抑制CyclinB-cdc2复合体活性或将其从细胞核中排出。
p300/PCAF对p53乙酰化可进一步增强其转录能力。
同时，p53也可诱导细胞凋亡。
DNA单链断裂后，激活ATR激酶，ATR通过Chk1进一步激活Cdc25A。
Cdc25A是一种CDK2激活所需的磷酸酶。
CDK2抑制周期素E/A，使有丝分裂无法从G1期进入S期。
二膦酸盐类药物治疗肿瘤及骨转移机制的新观点
作者单位:解放军总医院骨科,北京 100853作者简介:黄鹏(19742),男,哈尔滨市人,主治医师。
研究方向:骨与关节疾病。
电话:(010)66937746 E -mail:harryhp@vi p.sina .com・综 述・二膦酸盐类药物治疗肿瘤及骨转移机制的新观点黄 鹏综述 王 岩审校中图分类号 R681 文献标识码 A 文章编号 1005-8478(2005)11-0868-03 二膦酸盐(BPs )在医疗方面,最初应用于骨扫描,后来用来治疗Paget s 病、恶性高血钙和骨转移瘤等疾病。
目前BPs 已成为重要的抗骨质疏松症药物。
除了强大的抗骨吸收功能外,BPs 抗肿瘤作用受到越来越多的重视。
本文着重介绍其抗肿瘤及骨转移瘤方面的新观点。
1 二膦酸盐结构和抗骨吸收的机理BPs 与骨结合和抗骨吸收能力取决于两个不同侧链(R1和R2)的组合。
BPs 的P 2C 2P 结构和R1侧链形成一个骨矿物质“钩子”,使它强有力地亲和在骨表面。
当R1侧链为-OH 时,BPs 与钙离子可通过三条键与钙离子结合,使它与骨的结合能力增强。
R2侧链结构决定其分子活性。
当R2为烷基时,BPs 效能增强。
当R2侧链结构为伯胺(NH 2)时,形成氨基二膦酸盐(如A lendr onate 和Pa m idr onate ),其功效为Etidr 2onate 的1000倍。
带有仲胺(如incadr onate )或者叔胺(如ol 2padr onate )结构的氨基二膦酸盐药效会进一步加强。
而R2侧链中N 原子包含在环状结构中时(如R isedr onate 和Zoledr onic acid ),其药效达到最强,为Etidr onate 的10000倍。
在组织水平,BPs 降低骨转换,形成钙正平衡,使骨量增加。
对此,一种解释是BPs 抑制破骨细胞,而成骨细胞并没有立即被抑制,所以继续生成新骨,导致骨量增加。
另一种解释是:由于骨转换降低,新骨必须经过更长时间才能完成矿化,所以形成的骨含有更高的矿物质。
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・论著・
白桦脂酸对人多发性骨髓瘤细胞系RPMI28226凋亡的诱导
程亦荃,陈燕,吴秋玲,方峻,杨立靖华中科技大学同济医学院协和医院血液科,湖北武汉430022
摘要 为了探讨白桦脂酸对多发性骨髓瘤细胞系RPMI28226的诱导凋亡作用,用MTT、Annexin2V/PI双标记流式细胞术、PI单标记流式细胞术和Hoechst33258染色分别检测白桦脂酸对RPMI28226增殖抑制、凋亡诱导、细胞周期的作用和形态学变化。用RT2PCR技术检测加药后RPMI28226凋亡相关基因bcl2xl和caspase3的表达的变化。结果表明:白桦脂酸对RPMI28226作用24和48小时的IC50值分别为10.156±0.659和5.434±0.212μg/ml,在一定浓度范围内,白桦脂酸对其增殖的抑制作用呈时间和剂量依赖性。RPMI28226细胞的凋亡率随药物浓度的增加而增加。细胞周期测定显示,随药物浓度的增加G0/G1期的细胞比例增高,处于S期的细胞比例减低,药物对G
2/
M期细胞影响不明显。Hoechst33258染色在荧光显微镜下可见药物处理组和对照组之间细胞形态的显著变化。RT2PCR测定示,随加药浓度的增加,bcl2xl基因的表达呈降低趋势,而caspase3基因的表达呈增高趋势。结论:在一定的浓度范围内,白桦脂酸可诱导RPMI28226发生凋亡且呈时间剂量依赖性,该过程可能与其上调caspase3和下调bcl2xl基因的表达有关。白桦脂酸还可以影响RPMI28226细胞系的G1/S期,使细胞阻滞在G0/G1期。关键词 白桦脂酸;多发性骨髓瘤;细胞凋亡;细胞周期中图分类号 R733.3;R979.1文献标识码 A
EffectofBetulinicAcidonInducingApoptosisofHumanMultipleMyelomaCellLineRPMI28226CHENGYi2Quan,CHENYan,WUQiu2Ling,FANGJun,YANGLi2JingDepartmentofHematology,UnionHospital,TongjiMedicalCollege,HuazhongUniversityofScienceandTechnology,Wuhan,430022,HubeiProvince,China
CorrespondingAuthor:WUQiu2Ling,PhysicianinCharge.Tel:(027)85726008.E2mail:wuqiuling927@hotmail.comAbstract TheaimofthisstudywastoinvestigatetheeffectofbetulinicacidoninducingapoptosisofhumanmultiplemyelomaRPMI28226cellline.Theinhibitoryeffectofbetulinicacidonproliferationanditsinducingapoptosiseffect,influenceoncellcycleandinducedmorphologicalchangesofRPMI28226wereevaluatedbyMTT,flowcytometryAnnexin2V/PIdoublestaining,flowcytometrywithPIstainingandfluorescencemicroscopywithHoechst33258staining,respectively.Thetranscriptionlevelchangesofbcl2xlgeneandcaspase3whicharetwokindsofapoptosisrelatedproteingeneweredeterminedbyRT2PCR.Theresultsshowedthatwithinacertainrangeofconcentration(0,5,10,15,20μg/ml),IC50ofbetulinicacidtoRPMI28226at24hourswas10.156±0.659μg/ml,whiletheIC50at48hourswas5.434±0.212μg/ml,anditsinhibitingeffectonproliferationofRPMI28226showedbothtime2anddose2dependentmanners.FlowcytometrywithAnnexin2V/PIdoublestainingrevealedthatapoptoticrateofRPMI28226cellsincreasedasbetulinicacidconcentrationincreased.FlowcytometrywithPIstainingshowedthattheratioofcellsinG0/G1phaseincreased,whileitinSphasedecreased,andratioofcellsatG2/Mphasedidnotpresentasignificantchange.MorphologicaldifferencesweretypicalandobviousbetweencellsintreatedandcontrolgroupsunderfluorescencemicroscopeusingHoechst33258staining.RT2PCRdetectionofcaspase3geneindicatedthatitstranscriptionlevelshowedanincreasingtrendastheconcentrationofbetulinicacidincreased,whilethebcl2xlshowedtheoppositetrend.ItisconcludedthatthebetulinicacidcaninduceapoptosisofRPMI28226withinacertainrangeofconcentrationinatime2anddose2dependentmanners.Thisphenomenonmaybereletedtothetranscriptionallevelincreaseofcaspase3geneanddecreaseofbcl2xl.BetulinicacidalsoaffectsG1/SincellcyclewhicharrestscellsatphaseG0/G1.Keywords betulinicacid;multiplemyeloma;apoptosis;cellcycleJExpHematol2009;17(5):1224-1229
基金项目:本课题受国家自然科学基金资助(30500686)
通讯作者:吴秋玲,主治医师.电话:(027)85726008.E2mail:wupiuling927@hotmail.com
2009-03-04收稿;2009-04-01接受
・4221・中国实验血液学杂志 JournalofExperimentalHematology2009;17(5):1224-1229© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net 多发性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)是一种B淋巴细胞来源的恶性浆细胞疾病,传统的化疗[1]及造血干细胞移植等对其疗效尚不理想,且其发病机制尚未完全阐明,加之临床多药耐药的出现,使其治疗更为困难。因此,在中药里寻找新的治疗药物是十分必要[1]。白桦脂酸(betulinicacid)是从桦树皮中提取的三萜类物质,具有显著的抗肿瘤效应,可诱导黑色素瘤、胃癌、肝癌的凋亡,抑制Lewis肺癌、肉瘤、艾氏腹水癌的细胞增殖。近年研究发现,白桦酯酸对细胞系K562,Raji,Jurkat等也有明显的诱导凋亡的作用,但未见用于浆细胞肿瘤治疗的研究报道。为此,我们通过体外试验研究白桦脂酸对多发性骨髓瘤细胞系RPMI28226的诱导凋亡的作用,并探讨凋亡相关蛋白BCL2XL和caspase3在转录水平的变化,为MM的治疗提供新的思路。材料和方法试剂白桦脂酸(betulinicacid,分子式C30H48O3,分子量456.7,质量分数>99%,Alexis),用DMSO(Amresco公司产品)稀释成5mg/ml药物原液,经0.22μm微孔滤膜(minipore)除菌后分装并置于-20℃保存,使用前解冻),RPMI1640培养液(Gibco公司产品),胎牛血清(杭州四季青公司产品),MTT(Sigma公司产品),AnnexinV/PI细胞凋亡试剂盒(南京凯基公司产品),PI(美国Sigma公司产品),Hoechst33258(美国Sigma公司产品),RNase(美国Sigma公司产品)TRIzoLReagent(Invitrogen公司产品),逆转录试剂盒(Toyobo公司产品),MasterMix(Tiangen公司产品)各常规试剂选用国产分析纯。仪器酶标仪(Sunrise,Tecan公司产品),流式细胞仪(FACscalibur,BectonDickinson公司产品),荧光显微镜(BH22,日本Olympus公司产品),PCR仪(PTC2100,Bio2Rad公司产品)细胞培养人类多发性骨髓瘤细胞系RPMI28226,在含10%胎牛血清、青霉素100U/ml、链霉素100U/ml的RPMI1640中,于37℃、5%CO2、饱和湿度培养箱常规培养,1天换液1次。取对数生长期细胞进行试验,试验对象为白桦脂酸不同浓度处理的细胞,其中浓度为零者作为对照组。白桦脂酸对RPMI28226增殖影响的MTT法检测取对数生长期的细胞接种于96孔板中,每孔200
μl,细胞密度为5×10
5
/ml,每个浓度组设6个平行
复孔,在空白组加入同样体积的RPMI1640培养液用以调零,将经不同浓度的白桦脂酸(0、2.5、5、10、15、20、30、40μg/ml)处理的细胞在培养箱中分别