吸附共沉淀法
双金属mof的合成方式

双金属mof的合成方式
双金属MOF是指在一种金属有机骨架材料中同时含有两种不同
金属离子的MOF。
由于其独特的结构和性质,双金属MOF在气体吸附、催化、分离等方面具有广泛的应用前景。
本文将介绍双金属MOF的合成方法。
1. 共沉淀法
共沉淀法是制备双金属MOF的常用方法之一。
其基本原理是将不同金属离子的盐溶液和有机骨架材料的溶液混合后,在适当的条件下进行沉淀反应。
通过调节反应条件可以控制MOF中两种金属离子的比例和分布方式,从而获得所需的双金属MOF。
2. 模板法
模板法是利用某种物质的结构作为模板,在其表面上生长MOF的方法。
对于双金属MOF的合成,可以选择一种含有两种不同金属离子的模板物质。
在适当的条件下,MOF会在模板表面上生长,并形成双金属MOF。
3. 双金属前驱体法
双金属前驱体法是将两种金属的有机配合物先行合成,并在适当的条件下与有机骨架材料反应生成双金属MOF。
这种方法可以控制MOF中两种金属离子的比例和分布方式,从而获得所需的双金属MOF。
总的来说,双金属MOF的合成方法还有许多其他的途径,例如溶液法、气相法等。
各种方法的优缺点不同,需要根据实际需要进行选择。
随着合成方法的不断进步和完善,相信双金属MOF的应用领域将
会越来越广泛。
免疫共沉淀 原理

·因为你IP的时候用的抗体,为了说明是你的抗体特异性的IP下来的东西,而不是其他抗体IP 下来的,所以要用IgG作为对照。
当细胞在非变性条件下被裂解时,完整的细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间结合的保持下来。
这一事实可被用于检测和确定生理条件下相关的蛋白质-蛋白质之间的相互作用。
这种方法叫做免疫共沉淀IP是利用抗原蛋白质和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质的“prorein A"特异性地结合到免疫球蛋白的FC 片段的现象活用开发出来的方法。
目前多用精制的prorein A预先结合固化在argarose的beads上,使之与含有抗原的溶液及抗体反应后,beads上的prorein A就能吸附抗原达到精制的目的。
其优点为:(1)相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的,处于天然状态;(2)蛋白的相互作用是在自然状态下进行的,可以避免人为的影响;(3)可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。
缺点为:(1)可能检测不到低亲和力和瞬间的蛋白质-蛋白质相互作用;(2)两种蛋白质的结合可能不是直接结合,而可能有第三者在中间起桥梁作用;(3)必须在实验前预测目的蛋白是什么,以选择最后检测的抗体,所以,若预测不正确,实验就得不到结果,方法本身具有冒险性。
实验流程为:(1)转染后24-48 h 可收获细胞,加入适量细胞裂解缓冲液(含蛋白酶抑制剂),冰上裂解30min, 细胞裂解液于4°C,最大转速离心30 min后取上清;(2)取少量裂解液以备Western blot分析,剩余裂解液加1μg相应的抗体加入到细胞裂解液,4°C缓慢摇晃孵育过夜;(3)取10μl protein A 琼脂糖珠,用适量裂解缓冲液洗3 次,每次3,000 rpm 离心3 min;(4)将预处理过的10μl protein A 琼脂糖珠加入到和抗体孵育过夜的细胞裂解液中4°C缓慢摇晃孵育2-4h,使抗体与protein A琼脂糖珠偶连;(5)免疫沉淀反应后,在4°C 以3,000 rpm 速度离心3 min,将琼脂糖珠离心至管底;将上清小心吸去,琼脂糖珠用1ml裂解缓冲液洗3-4次;最后加入15μl的2×SDS 上样缓冲液,沸水煮5分钟;(6)SDS-PAGE, Western blotting或质谱仪分析。
TiN-TiC复合材料的制备及其吸附性能

TiN-TiC复合材料的制备及其吸附性能
TiN-TiC复合材料是一种由钛氮化物(TiN)和碳化钛(TiC)组成的复合材料。
钛氮化物和碳化钛具有良好的力学性能和化学稳定性,因此TiN-TiC复合材料在各种领域中具有广泛的应用前景,特别是在催化剂、电催化、电解池和超级电容器等领域中具有重要的应用价值。
本文将介绍TiN-TiC复合材料的制备方法及其吸附性能的研究。
1. 制备方法
目前,制备TiN-TiC复合材料的方法主要有物理混合法、共沉淀法、机械合成法等。
共沉淀法是一种常用且简便的制备方法。
一般来说,共沉淀法的步骤包括:先将适量的钛酸铵和尿素加入水溶液中,搅拌均匀后,在加入适量的二甲苯溶液中再次搅拌均匀,最后用恒温搅拌的方式将其干燥、煅烧即可。
2. 吸附性能研究
研究表明,TiN-TiC复合材料具有优异的吸附性能。
TiN-TiC复合材料的高比表面积和孔隙结构有利于其吸附分子或离子。
复合材料中TiN和TiC相互作用,形成了一种特殊的界面结构,可提高其吸附性能。
TiN-TiC复合材料还具有优异的导电性能和化学稳定性,可用于电解池和超级电容器中。
免疫共沉淀原理及步骤

免疫共沉淀原理及步骤免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)原理IP是利用抗原蛋白质和抗体的特异性结合以及细菌蛋白质的“protein A/G"特异性地结合到抗体(免疫球蛋白)的FC片段的现象开发出来的方法。
目前多用protein A/G预先结合在argarose beads上,使之与含有抗原的溶液及抗体反应后,beads上的prorein A/G就能达到吸附抗原的目的。
通过低速离心,可以从含有目的抗原的溶液中将目的抗原与其它抗原分离。
免疫沉淀实验的操作步骤比较多,同时由于在非变性条件下进行实验,所以要得到一个完美的实验结果,不仅需要高质量的抗体,同时对免疫沉淀体系也需要有严格的控制指标。
免疫沉淀实验从:蛋白样品处理;抗体-agarose beads孵育;抗体-agarose beads复合物洗涤到最后的鉴定,每步都非常关键,需要严格控制实验流程中每个关键步骤的质量,才能最终达到你的实验目的。
IP实验步骤基本实验步骤(1)收获细胞,加入适量细胞IP裂解缓冲液(含蛋白酶抑制剂),冰上或者4℃裂解30min, 12,000g 离心30 min后取上清;(2) 取少量裂解液以备Western blot分析,剩余裂解液将1μg相应的抗体和10-50 μl protein A/G-beads加入到细胞裂解液,4°C缓慢摇晃孵育过夜;(3)免疫沉淀反应后,在4°C 以3,000 g速度离心5 min,将protein A/G-beads离心至管底;将上清小心吸去,protein A/G-beads用1ml裂解缓冲液洗3-4次;最后加入15μl的2×SDS 加样缓冲液,沸水煮10分钟;(4)SDS-PAGE, Western blotting或进行质谱分析。
一、样品处理:免疫沉淀实验成功与否,第一步处理样品非常关键。
免疫沉淀实验本质上是处于天然构象状态的抗原和抗体之间的反应,而样品处理的质量决定了抗原抗体反应中的抗原的质量,浓度以及抗原是否处于天然构象状态。
去除沉淀的方法

去除沉淀的方法引言:在日常生活和工作中,我们经常会遇到一些沉淀物,它们不仅影响我们的生活环境和工作效率,还可能对健康造成一定的威胁。
因此,掌握一些去除沉淀的方法是非常重要的。
本文将介绍几种常见的去除沉淀的方法,希望对您有所帮助。
一、物理去除沉淀的方法1. 沉淀物的过滤:将含有沉淀物的液体通过滤纸或滤网进行过滤,使沉淀物留在滤纸或滤网上,从而实现去除沉淀的目的。
这是一种简单有效的物理方法,适用于颗粒较大的沉淀物。
2. 沉淀物的沉降:让含有沉淀物的液体静置一段时间,使沉淀物沉降到液体底部,然后将上清液慢慢倒出,从而实现去除沉淀的目的。
这种方法适用于颗粒较小的沉淀物,如细沙、泥浆等。
二、化学去除沉淀的方法1. 共沉淀法:通过添加一些化学试剂,使沉淀物与其他物质发生共沉淀反应,从而将其一同沉淀下来。
常用的共沉淀试剂有氯化铁、氯化铝等,它们能够与某些沉淀物形成不溶性的沉淀。
这种方法适用于一些难以单独沉淀的物质。
2. 氧化还原法:通过氧化或还原反应,将沉淀物转化为易于去除的形式。
例如,对于含有铁锈的水,可以通过加入适量的氧化剂(如过氧化氢)将铁锈氧化为易于沉淀的铁氢氧化物,然后再通过过滤等方法去除沉淀物。
3. pH调节法:某些沉淀物的溶解度与pH值有关,通过调节pH值可以促使沉淀物沉淀下来。
例如,对于含有钙离子的水,可以通过加入一定量的碱性物质(如氢氧化钠)将其pH值调节到碱性范围,从而使钙离子与碱性物质反应生成沉淀物,然后再通过过滤等方法去除沉淀物。
三、生物去除沉淀的方法1. 微生物降解法:一些微生物具有降解沉淀物的能力,可以通过引入这些微生物来去除沉淀。
例如,对于含有有机物沉淀的水体,可以引入一些具有腐生菌或腐殖质菌的微生物,它们能够降解有机物,并将其转化为无害的物质。
2. 植物吸收法:一些植物对某些沉淀物具有吸收能力,可以通过种植这些植物来去除沉淀。
例如,对于含有重金属离子的水体,可以种植一些具有重金属吸收能力的水生植物(如水葱、水蕹等),它们能够吸收水中的重金属离子,并将其积累在植物体内。
化学共沉淀法-注意事项

1.沉淀溶液的浓度沉淀溶液的浓度会影响沉淀的粒度、晶形、收率、纯度及表面性质。
通常情况下,相对稀的沉淀溶液,由于有较低的成核速度,容易获得粒度较大、晶形较为完整、纯度及表面性质较高的晶形沉淀,但其收率要低一些,这适于单纯追求产品的化学纯度的情况;反之,如果成核速度太低,那么生成的颗粒数就少,单个颗粒的粒度就会变大,这对于微细粉体材料的制备是不利的,因此,实际生产中应根据产品性能的不同要求,控制适宜的沉淀液浓度,在一定程度上控制成核速度和生长速度。
2.合成温度沉淀的合成温度也会影响到沉淀的粒度、晶形、收率、纯度及表面性质。
在热溶液中,沉淀的溶解度一般都比较大,过饱和度相对较低,从而使得沉淀的成核速度减慢,有利于晶核的长大,得到的沉淀比较紧密,便于沉降和洗涤;沉淀在热溶液中的吸附作用要小一些,有利于纯度的提高。
在制备不同的沉淀物质时,由于追求的理化性能不同,具体采用的温度应视试验结果而定。
例如:在合成时如果温度太高,产品会分解而只得到黑色氧化铜;在采用易地分解、易挥发的沉淀剂时,温度太高会增加原料的损失。
3.沉淀剂的加入方式及速度沉淀剂的加入方式及速度均摊会影响沉淀的各种理化性能。
沉淀剂若分散加入,而且加料的速度较慢,同时进行搅拌,可避免溶液局部过浓而形成大量晶核,有利于制备纯度较高、大颗粒的晶形沉淀。
例如:制备白色无定形粉末状沉淀氢氧化铝,使用的原料为NaAlO2及碳酸氢铵,其主要杂质为碱金属,开始时以较慢的线速度将NH4HCO3加入到NaAlO2的热溶液中,待沉淀析出大半时,再加快沉淀剂的加入速度,直至反应结束。
这样得到的Al(OH)3颗粒较大,只需要洗涤数次,产品中碱金属杂质即可合格。
如将沉淀剂浓度加大,加料速度加快、反应温度又低,这样得到的是Al(OH)3的胶状沉淀,即使洗涤数十次,产品中碱金属含量也不容易合格。
当然,这只是从化学纯度的角度来考虑的,或要生产专用性的Al(OH)3产品,沉淀剂的加入方式及速度则应该根据具体要求而定。
第一章 沉淀与共沉淀(3课时)

②样品浓度:低浓度样品要使用比例更大的有机溶 剂进行沉淀,且样品的损失较大,即回收率低,具 有生物活性的样品易产生稀释变性。但对于低浓度 的样品,杂蛋白与样品共沉淀的作用小,有利于提 高分离效果。
反之,对于高浓度的样品,可以节省有机溶剂,减 少变性的危险,但杂蛋白的共沉淀作用大,分离效 果下降。
常用丹宁(C76H52O46 ),辛可宁(C19H22N2O) , 动物胶等
返回
(二)以离子络合物形成共沉淀
常用阴离子有:卤离子,SCN-,
阳离子:甲基紫,罗丹明
例如,可在酸化的海水中加入甲基紫和 NH4SCN,可定量沉淀低至0.2微克的铀。 固体萃取 有些载体的共沉淀效果类似 于萃取且不与共存离子反应, 叫做惰性共沉淀剂(固体萃 取剂)。其沉淀效果好
A为主要组分:RA>99.9%
A在1%: RA>99% A为微量组分:RA>95%或更低
沉淀分离 固液分离
固相萃取
氢氧化物:NaOH、NH3 硫化物:H2S 有机沉淀剂:H2C2O4 阳离子交换树脂 阴离子交换树脂
分 离 方 法
离子交换分离 气液分离:挥发和蒸馏 萃取分离 液液分离
螯合物萃取 离子缔合物萃取 三元络合物萃取
有机溶剂沉淀法的优点
优点: 分辨能力比盐析法高,即一种蛋白质或其它溶 质只在一个比较窄的有机溶剂浓度范围内沉淀 沉淀不用脱盐,过滤比较容易 缺点: 对某些具有生物活性的大分子容易引起变性失 活,操作需在低温下进行
有机溶剂的选择和浓度的计算
用于生化制备的有机溶剂的选择首先是要能与
水互溶
沉淀蛋白质和酶常用的是乙醇、甲醇和丙酮 沉淀核酸、糖、氨基酸和核苷酸最常用的沉淀 剂是乙醇
免疫共沉淀(CO-IP)实验方法与操作步骤

免疫共沉淀(CO-IP)实验方法与操作步骤CO-IP是用于检测或探究蛋白与蛋白之间相互作用的实验,属于IP实验的扩展,在样品溶液中,捕获和纯化通过天然相互作用及靶标结合的其他大分子蛋白,基于抗原抗体的特异性免疫结合,以饵蛋白为诱饵蛋白,通过饵蛋白抗体捕获,磁珠吸附结合,进而将饵蛋白结合的互作蛋白捕获得到,纯化定量定性分析。
实验操作步骤:1.样本准备组织和细胞是最常见的样本类型。
组织用液氮研磨,研磨时少量多次加入液氮,研磨时用研磨杵按住组织旋转研碎,需戴护目镜或是头盔。
细胞直接消化或刮下离心,预冷1XPBS清洗1-2次,消化是影响细胞膜表面蛋白构象,尤其是层黏连蛋白和粘附蛋白改变,导致细胞贴壁不牢,进而脱落,对细胞内蛋白影响几乎没有,细胞刮下来也行,虽然存在物理机械损伤,但损伤相基本可忽略。
2.细胞裂解使用弱裂解液,不要直接用WB裂解蛋白的裂解液,做免疫共沉淀,要保留细胞内天然构建结合,强裂解液会使蛋白变性,弱性裂解液在于表面活性剂,比如NP-40、Triton X-100。
3. 磁珠清洗及抗体孵育磁珠用之前摇一摇,按照使用量吸取,不要用小枪头,用1ml大枪头,且是无菌无酶,加入适量抗体与buffer,混入磁珠即可。
4. 磁珠-抗体-裂解液孵育此为核心步骤,磁珠与抗体孵育完成后,buffer清洗3次,加裂解液。
清洗是为去除未结合至磁珠表面的游离抗体,防止游离未结合的抗体结合到饵蛋白,降低结合总量。
磁珠-抗体复合物清洗完,加裂解液孵育,注意要颠转孵育,不能静置,磁珠是固体,溶液沉降,颠转孵育,不但能使磁珠不沉降,而且使磁珠-抗体与蛋白结合更充分全面。
放置4℃,颠转过夜。
5.清洗纯化磁珠-抗体-蛋白复合物关键步骤,需清洗6次,清洗少了会导致假阳性,清洗次数过多结合蛋白损失大,清洗时要用两种buffer,一种低盐,一种高盐,尽量去除未结合的蛋白,防止假阳性出现。
6.检测检测分为三种,根据实验目的区分。
一是银染:按照input组、目的组、IgG 组、beads组跑胶银染,查看蛋白差异性;二是WB检测:根据预测结合的靶蛋白,进行WB检测,看有无条带,确认是否结合(要做内参);三是MS(质谱)检测:质谱检测是根据产物蛋白,进行酶解消化成多肽,再测定多肽,获取序列,比对蛋白数据库,查看潜在结合蛋白有哪些,探讨结合蛋白。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
吸附共沉淀法
吸附共沉淀法是一种常用的分离和富集技术,它在环境监测、水处理、食品安全等领域具有广泛的应用。
本文将从原理、步骤、应用等方面对吸附共沉淀法进行介绍。
一、原理
吸附共沉淀法是利用溶液中物质与固体表面的相互作用力,使溶液中的目标物质吸附在固体表面,并通过共沉淀的方式将其分离出来。
吸附共沉淀的原理主要包括两部分:吸附和共沉淀。
1. 吸附:当溶液中的目标物质与固体表面接触时,由于表面的化学性质和孔隙结构,目标物质会与固体表面相互作用,形成吸附层。
吸附是一个可逆的过程,吸附剂与目标物质之间会发生吸附与解吸的平衡。
2. 共沉淀:通过调节溶液的pH值、温度等条件,使目标物质与沉淀剂发生反应,形成沉淀物。
共沉淀是将目标物质从溶液中转移到固体相的过程,通过沉淀物的形成,达到分离和富集的目的。
二、步骤
吸附共沉淀法的步骤主要包括:前处理、吸附、洗涤和沉淀。
1. 前处理:将待分离的样品进行必要的前处理,如调整pH值、去除杂质等。
这一步骤的目的是为了提高吸附和共沉淀的效果,减少干扰物对目标物质的影响。
2. 吸附:将前处理后的样品与吸附剂充分接触,使目标物质在固体表面发生吸附。
吸附剂的选择应根据目标物质的性质和溶液条件来确定,常用的吸附剂有活性炭、硅胶等。
3. 洗涤:将吸附剂上的非目标物质通过洗涤剂或溶剂洗掉,以减少干扰物对后续分析的影响。
洗涤的次数和洗涤剂的选择应根据实际情况进行调整。
4. 沉淀:通过调节溶液的pH值、温度等条件,使目标物质与沉淀剂发生反应,形成沉淀物。
沉淀物的形成可以通过离心、过滤等方式进行分离。
三、应用
吸附共沉淀法在环境监测、水处理、食品安全等领域具有广泛的应用。
1. 环境监测:吸附共沉淀法可以用于环境样品中有机污染物的富集和分离,如土壤中的农药残留、水体中的有机物等。
通过吸附共沉淀法的处理,可以提高目标物质的测定灵敏度和准确性。
2. 水处理:吸附共沉淀法可以用于水处理过程中的混合废水的处理和重金属离子的去除。
通过选择适当的吸附剂和沉淀剂,可以将废水中的有害物质有效地分离和去除,提高水质的净化效果。
3. 食品安全:吸附共沉淀法可以用于食品中有害物质的富集和分离,
如农药残留、重金属离子等。
通过对食品样品的前处理和吸附共沉淀的处理,可以提高对有害物质的检测和分析能力。
吸附共沉淀法是一种常用的分离和富集技术,它在环境监测、水处理、食品安全等领域具有广泛的应用。
通过合理选择吸附剂和沉淀剂,并根据实际情况进行前处理和后处理,可以实现目标物质的有效分离和富集。
吸附共沉淀法的优点是操作简便、效果明显,但也存在一些局限性,如吸附容量有限、对样品中的干扰物敏感等。
因此,在实际应用中需要根据具体情况进行选择和优化,以提高分离和富集的效果。