非酒精性脂肪肝高脂饲养大鼠模型的标准化及评价
小鼠nafld模型诊断标准

小鼠nafld模型诊断标准
小鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一种常见的肝脏疾病,其
特征是肝脏脂肪积累,不伴有酒精摄入。
NAFLD模型的诊断标准主
要包括以下几个方面:
1. 肝脏脂肪含量:NAFLD的主要特征是肝脏内脂肪的积累。
通
常使用组织学染色或化学分析来评估肝脏脂肪含量。
组织学染色一
般使用油红O染色或Sirius红染色来观察脂肪滴的形态和分布情况。
化学分析一般使用甘油三酯测定法或游离脂肪酸测定法来定量测量
肝脏中的脂肪含量。
2. 肝脏炎症和坏死:NAFLD常伴有肝脏炎症和坏死。
组织学染
色一般使用炎症标记物如CD68、CD163和F4/80来评估肝脏炎症程度。
坏死的评估一般使用组织学染色中的坏死标记物如TUNEL来观
察肝脏细胞的凋亡情况。
3. 肝脏纤维化:NAFLD的进展会导致肝脏纤维化。
通常使用组
织学染色中的胶原染色如Sirius红染色或Masson染色来评估肝脏
纤维化程度。
此外,还可以使用免疫组织化学染色来检测纤维化标
记物如α-SMA和Collagen I。
4. 肝脏功能指标:NAFLD模型的诊断还需要评估肝脏的功能指标。
常用的指标包括血清转氨酶(ALT和AST)水平、血清总胆固醇
和三酰甘油水平等。
这些指标可以通过血液生化分析来测定。
综上所述,小鼠NAFLD模型的诊断标准主要包括肝脏脂肪含量、肝脏炎症和坏死、肝脏纤维化以及肝脏功能指标的评估。
这些标准
可以通过组织学染色、化学分析和血液生化分析等方法来进行精确
的诊断。
非酒精性脂肪肝的发病机制

【关键词】非酒精性脂肪肝非酒精性脂肪肝nafld(nonalcoholic fatty liver disease,nafld是一种无过量饮酒史的以肝实质细胞脂肪变性和脂肪贮积为特征的临床病理综合征,疾病谱随病程的进展而表现不一,包括单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎、脂肪性肝纤维化和肝硬化[1]。
在1986年schaffner 和thaler等人考虑到这类疾病的病变谱包括单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎、肝纤维化和肝硬化,建议称之为nafld后被人们广泛接受[2]。
早期研究认为,nafld预后良好,进展缓慢,或不进展。
近来研究显示,约20%的nash患者可进展为肝硬化,其中30%~40%患者死于肝相关疾病,部分发生亚急性肝衰竭和肝细胞肝癌[3]。
dixon等[4]对105例严重肥胖患者行临床生化和组织学检查,结果显示26例(25%患者有nash,其中11例(42%发生严重的肝纤维化。
这些患者的患病危险性与中等量饮酒者相似,说明nafl在严重肥胖患者中很常见,并可进展为肝硬化和肝功能衰竭。
致病因子通过以下机制诱发nafl[5]:(1游离脂肪酸(ffa输送入肝过多,进而肝细胞对ffa的摄取及用于合成甘油三酯tg相继增多,最终造成肝内脂肪蓄积。
(2肝细胞合成ffa增加或从碳水化合物转化为tg增多,当肝细胞合成tg能力超过其分泌能力时,则诱致nafl。
(3脂肪酸在肝细胞线粒体内氧化利用减少,肝细胞通过加速合成以防细胞内脂肪酸蓄积中毒,诱发nafl。
(4低密度脂蛋白(vldl合成或分泌障碍,引起tg排泄减少,从而导致肝细胞脂肪蓄积形成nafl。
1988年,nafld的“2次打击”假说被提出。
当时“第1次打击”是指脂肪储积;“第2次打击”是指氧应激和异常的细胞因子,导致肝脏的坏死性炎症和纤维化。
而近年来研究发现,随着胰岛素抵抗发病率的增高和胰岛素抵抗药物对肝脏脂肪储积的改善,表明胰岛素抵抗可能才是真正的“第1次打击”[6]。
虎藻脂肝消胶囊对非酒精性脂肪肝大鼠影响的实验研究

(.2gk) 胃, 日 1 028/g 灌 每 次。持 续 6 周后检测 大鼠血清总胆 固醇( C 、 油三酯( G 、 T )甘 T ) 高密度脂蛋 白( D — )低 密度脂 HL C、
T iu n 0 0 1 。 hn ) ay a .3 0 2 C ia
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n n lo oi at ie .Me h d :T e c o e a swe e d vd d it i g o p a d ml wh c e e n r lc n o a c h l ft l r c y v to s h h sn rt r ii e o s r u s rn o y, ih w r o ma o - n x
蛋 白( D L L—C) 、丙氨 酸氨基转移酶( L ) 标 , A T指 计算肝重指 数并观察 肝组织 学变ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ。结果 : 中剂量组 T T 、 D G、 C L L—C显著
低 于模型对照 组; 高剂量组 T 、D — G L L C显著低 于模 型对照组 , H L— 显 著增 高。低 、 高剂量组 A T与模 型对照组 比 而 D C 中、 L
一
作者 。
・
4 6・
山 西 中医
21 年 l 月第 2 卷第 1 期 01 1 7 1
黄芪多糖联合泽泻提取物对非酒精性脂肪肝大鼠的治疗作用

医药科研黄芪多糖联合泽泻提取物对非酒精性脂肪肝大鼠的治疗作用戴唯嘉,刘劲翀,王罗武,肖荐林,杜颖瑜,朱乐玫#(长沙医学院,湖南长沙 410219)摘要:目的:探讨黄芪多糖联合泽泻提取物对非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)大鼠的治疗作用。
方法:SD大鼠喂以高脂饲料(10 %猪油+2 %胆固醇+88 %标准饲料)及饮水,连续喂食8周。
随机分为5组,即空白对照组、模型组、黄芪多糖组(700 mg/ k g)、泽泻提取物组(400 mg/kg),黄芪多糖(700 mg/kg)联合泽泻提取物(400 mg/kg)混合物组,每组10只。
以灌胃方式给予药物治疗,每日2次,持续4周。
采用BS-180型全自动生化分析仪测定大鼠血清,肝组织中TC、TG含量测定。
结果:NAFLD模型组大鼠血清中TC、TG、LDL-C和MDA含量以及ALT、AST和T-SOD活性均高于空白对照组,且差异有统计学意义(P < 0.05);与NAFLD模型组相比,黄芪多糖组、泽泻提取物组和混合组大鼠血清中TC、TG、LDL-C和T-SOD活性均降低,且差异均有统计学意义(P < 0.05);与NAFLD模型组比,黄芪多糖组、泽泻提取物组和混合组大鼠肝组织中TC和TG含量均下降,且差异均有统计学意义(P < 0.05)。
结论:黄芪多糖联合泽泻提取物对NAFLD大鼠血糖、血脂的调节有一定的作用。
关键词:黄芪多糖;泽泻提取物;非酒精性脂肪肝病非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)是指无过量酗酒史而出现以肝脏细胞脂肪变性和脂肪贮积为特征的临床病理综合征,主要包括非酒精性单纯性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎和脂肪性肝硬化。
据报道,NAFLD全球发病率6 %~35 %,其中20 %将发展成为肝硬化[1]。
目前,临床用于治疗NAFLD的药物主要是他汀类药物,但动物实验表明,其在改善NAFLD的脂代谢的同时可使血脂更集中于肝脏代谢,反而加重了对肝功能的损害。
超微脂康饮对非酒精性脂肪性肝病大鼠模型的疗效 熊焰

临床肝胆病杂志第 3 1卷第 1期 2 0 1 5年 1月㊀JC l i nH e p a t o l , V o l . 3 1N o . 1 , J a n . 2 0 1 5
ÂÃÄÅÆÇjk+ÄÈ+!"ÉÊËc#(¥
熊㊀焰1,章志娟2,刘㊀鹏1,王㊀雅1
( 1湖南中医药大学第一附属医院,长沙 4 1 0 0 0 7 ; 2南昌市第九医院,江西 南昌 3 3 0 0 0 2 )
d o i : 1 0 . 3 9 6 9 / j . i s s n . 1 0 0 1- 5 2 5 6 . 2 0 1 5 . 0 1 . 0 1 7 收稿日期: 2 0 1 4- 0 6- 1 3 ; 修回日期: 2 0 1 4- 0 9- 0 2 。 基金项目: 湖南省自然科学基金( 1 2 J J 6 0 7 5 ) 作者简介: 熊焰( 1 9 6 3- ) , 男, 教授, 主任医师, 主要从事中西医结合 肝病临床、 科研、 教学工作。
A b s t r a c t : O b j e c t i v e ㊀T oo b s e r v et h ee f f i c a c yo f C h a o w e i Z h i k a n g y i ni nt h e t r e a t m e n t o f t h e r a t m o d e l o f n o n - a l c o h o l i c f a t t y l i v e r d i s e a s e
X I O N GY a n ,Z H A N GZ h i j u a n ,L I UP e n g ,e t a l .( T h e F i r s t H o s p i t a l o f H u n a nU n i v e r s i t y o f C h i n e s e M e d i c i n e ,C h a n g s h a 4 1 0 0 0 7 ,C h i n a )
多烯磷脂酰胆碱对非酒精性脂肪肝大鼠脂肪组织相关基因表达的影响

瘦 素 R A相 对 水 平 高 于 对 照 组 ( > . 5 , 预 组 肿 瘤 坏 死 因子 c R A相 对 水 平 显 著 高 于 对 照 组 ( 0 0 ) 所 有 干 预 组 样 N P 00 ) 干  ̄ N m P< .5 ,
品 的 脂联 素 、 抗 素 和 解 偶 联 蛋 白 2的 m N 抵 R A均 未 被 检 测 到 。 结 论 多 烯 磷 脂 酰 胆 碱 有 助 于增 加 瘦 素基 因 的 表 达 并适 用 于 肥胖
e h nta o t l ru P>0 0 .T rta h tn cnr o p( i og . 5) NF一0 mRNA o tre in ru a inf a t n rae h nta f o t l ru P < 【 fi evne t o pw ss ic nl ice sdta h t nr o p( n g g i y oc og 00) . 5 .Ho vr dp n ci elt n CP we e ,a io e t n,rssi a d U 2 mRNA dd tb e ee tdi l s mpe fitre in ru .Co cu in P l— n in’ e n d tce nal a lso ev ne t o p n g n lso oy
ns tt e e fg n x r s in. M e ho Th itrrt r e t i h fty c o t n uc ims a he lv lo e e e p e so t ds e W sa aswee fd wih h g a t h w oi d e NAFLD nd i e v n d wih po- a ntr e e t l y neph s hai y o i . Th ea iel v lo e i e 0 p td kh lne e r ltv e e flpt n,a i o e tn,TNF — d,r ssi n dp n ci e itn a d UCP2 m RNA n te a i o e ts u sdee t d i h d p s is e wa t ce i n RT — q PCR.Thedaadifr n e r n lz d i t fe e c swe ea a y e n t—ts . Re uls Th ea ie lv lo e i et s t e r ltv e e flpt mRNA n it r e e tgo sh g — n i n e v nin r upwa i h
依折麦布对非酒精性脂肪肝模型金黄地鼠血清生化指标的影响

依折麦布对非酒精性脂肪肝模型金黄地鼠血清生化指标的影响∗史会杰;朱海波【摘要】目的:采用氢质子磁共振波谱(1 H-MRS)和磁共振成像( MRI)技术构建金黄地鼠非酒精性脂肪肝的药效学评价体系,并初步评价依折麦布对高脂膳食诱导的金黄地鼠非酒精性脂肪肝病模型的影响。
方法将30只雄性金黄地鼠随机分为正常对照组、模型对照组和依折麦布组,每组10只。
正常对照组给予正常饲料,模型对照组和依折麦布组给予高脂饲料,2周后依折麦布组开始灌胃依折麦布2.7mg.kg-1.d-1。
给药第12周时,采用德国布鲁克7.0T小动物MRI检查肝脏和内脏脂肪含量,并对肝组织进行病理学分析。
处死前收集金黄地鼠血清,检测血清中血脂和转氨酶水平。
结果与正常对照组比较,模型对照组金黄地鼠肾周及腹股沟脂肪显著增加;依折麦布组动物肝脏组织中未出现脂滴空泡,肾周及腹股沟脂肪减少。
正常对照组肝脏脂质子峰强度与水质子峰强度比值(MWR)为17.64±8.97,模型对照组为270.28±110.44,依折麦布组为57.19±27.49,差异有统计学意义(P<0.01)。
正常对照组多不饱和指数(PUI)为0.035±0.023,模型对照组为0.0072±0.0053,依折麦布组为0.024±0.019,差异有统计学意义( P<0.01);与正常对照组比较,模型对照组血清三酰甘油( TG)、总胆固醇( TC)、游离脂肪酸( FFA)、低密度脂蛋白胆固醇( LDL-C)、丙氨酸氨基转移酶( ALT)和天冬氨酸氨基转移酶( AST)水平显著升高( P<0.01);与模型对照组比较,依折麦布组血清TG、TC、FFA、LDL-C、ALT和AST含量显著降低( P<0.01)。
结论1 H-MRS和MRI技术可应用于构建金黄地鼠非酒精性脂防肝的药效学评价体系,依折麦布对高脂膳食诱导的金黄地鼠非酒精性脂肪肝有显著的改善作用。
消脂护肝胶囊对非酒精性脂肪肝大鼠瘦素、胰岛素抵抗的影响的开题报告

消脂护肝胶囊对非酒精性脂肪肝大鼠瘦素、胰岛素抵抗的影响的开题报告一、研究背景及意义非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)是指肝脏脂肪含量增加,但不伴随酒精滥用的一类肝脏病变,已成为全球公共卫生问题。
NAFLD是一种慢性代谢性疾病,与肥胖、高血压、糖尿病等慢性疾病密切相关。
研究表明,肥胖与脂肪肝的发病机理密切相关,可导致胰岛素抵抗、脂代谢紊乱等。
消脂护肝胶囊是一种中药复方制剂,具有降脂、抗氧化和肝保护作用。
消脂护肝胶囊中的药物成分包括苦瓜、茯苓、川楝子等,已被广泛应用于治疗各种肝病和代谢性疾病。
然而,消脂护肝胶囊对NAFLD大鼠的影响及其作用机制尚不清楚,本研究旨在探讨其对NAFLD大鼠瘦素、胰岛素抵抗的影响及其作用机制。
二、研究内容和方法1.实验动物:选取健康8周龄的雄性SD大鼠,体重180-200g2.建立NAFLD大鼠模型:采用高脂饮食喂养大鼠4周,建立NAFLD大鼠模型。
3.实验组设计:将NAFLD大鼠随机分为4组,每组8只。
分别是:高脂饮食组、正常饮食组、低剂量消脂护肝胶囊组(10mg/kg/d),高剂量消脂护肝胶囊组(20mg/kg/d)。
4.实验处理:对实验组大鼠进行不同的饮食和药物干预,连续给药4周,观察肝功能指标、血糖、胰岛素水平和瘦素受体表达情况,并比较各组之间的差异,探讨其作用机制。
5.数据分析:使用SPSS 22.0统计软件进行数据分析和统计检验,结果以均值±标准差表示,采用单因素方差分析和t检验进行组间比较。
三、预期结果和意义本研究预计结果为,消脂护肝胶囊可显著改善NAFLD大鼠的代谢水平,降低血糖、胰岛素水平,减轻肝损伤,并提高瘦素受体表达水平,从而改善瘦素、胰岛素抵抗情况。
消脂护肝胶囊对NAFLD的治疗具有重要的临床意义,可为防治NAFLD提供一种有效的中药治疗方案。
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非酒精性脂肪肝高脂饲养大鼠模型的标准化及评价
随着人民生活水平的提高、生活方式的改变,非酒精性肪性肝病(nonalcoholicfattyliverdisease,NAFLD)在我国发病率正呈现逐年增高趋势,但迄今为止非酒精性脂肪肝的发病机制仍不明确。
目前非酒精性脂肪肝大鼠模型运用广泛,尤其是最常用的高脂饲养(highfattydiet,HFD)大鼠模型。
为了对该模型有更进一步地了解以及更深层次把握其运用。
本文主要通过查阅近10年运用此模型造模的文献,从中收集相关造模数据等资料,得出该模型合理、常用的造模方法。
标签:非酒精性脂肪肝;高脂饲养;大鼠模型
1 非酒精性脂肪性肝高脂饲养大鼠模型的研究背景
非酒精性脂肪性肝是指除外酒精和其他明确的肝损害因素所致的,其发病与遗传-环境-代谢等因素相关,但其发病机理至今尚未明确。
中医学认为该病病因与嗜食肥甘厚味,多逸少劳有关,其病位在肝,与脾、肾等脏腑密切相关。
而现代医学角度看,脂肪肝的发病机制主要为肝细胞中的甘油三酯、极低密度脂蛋白合成和排出不平衡形成。
为了对该病进行进一步研究,研究者们针对该病设计出了多种动物模型[1]。
目前,国内外用于科学研究的非酒精性脂肪肝动物模型主要分为两类。
而本文主要通过查阅近10年运用此模型造模的文献,从中收集相关造模数据等资料,通过分析探讨,得出该模型合理、常用的造模方法,现综述如下。
2 非酒精性脂肪性肝高脂饲养大鼠模型的应用
高脂饲养大鼠模型诱发脂肪肝是国内最常用的非酒精性脂肪肝模型。
由于大鼠对胆固醇饲料较易耐受,因而不易形成动脉粥样硬化病变,但其对营养成分改变敏感,特别是在氨基酸、胆碱等供应不足时,可出现肝细胞脂肪变性、坏死等营养缺乏表现,因而是实验研究的好对象。
樊丽琳,陈东风等用健康成年雄性8w龄Wistar大鼠,高脂饲料为基础饲料88%,猪油10%,胆固醇2%造模,分别于第4、8w取肝组织观察。
发现第4w时,大鼠肝组织显示散在肝细胞脂肪变,细胞内见大泡形脂肪滴,但肝小叶形态完整,汇管区界限清楚,无明显炎性细胞浸润。
第8w时,大鼠肝细胞脂肪变明显,多为大泡性脂肪变,见部分肝细胞气球样变,肝小叶结构紊乱,同时小叶内见局灶性肝细胞坏死,有明显淋巴细胞浸润[2]。
因此,找到该模型的造模主线,在此基础上根据需要再进一步改善,对我们更全面地掌握该模型的运用以及推广于临床研究具有重要意义。
3 非酒精性脂肪性肝高脂饲养大鼠模型文献发现
经过查阅近10年的文献,收集运用高脂饲养大鼠造模非酒精脂肪肝模型相关资料发现:①非酒精性脂肪肝高脂饲养大鼠模型的造模大鼠的类型有两种:SD 大鼠和wistar大鼠。
这也是目前大鼠运用于其他实验比较多的大鼠类型;②对于
饲料的的选择,对照组的饲料均为基础饲料,虽然不同研究者所用的基础饲料出自不同场地,但其与模型中所用的高脂饲料配料中的基础饲料配料是统一的,所有对于基础对照组中的基础饲料,也是不存在差异的;③对于饲养时间,从文献中发现有饲养3、4、5w甚至12w。
这主要取决于模型所要用于的实验所需以及高脂饲料的配方;④观察指标和测定方法,文献中者们观察的主要有:①一般情况观察如毛色、食欲动、粪便、对外界刺激的反应情况等。
②病理组织学检查肉眼观察大鼠肝脏大体变化,并作病理切片HE染色,光镜下观察大鼠肝脏脂肪变性情况,其判断标准详见《非酒精性脂肪肝诊断标准》(2002-10中华肝病学会脂肪肝和酒精性肝病学组制定)或做苏丹W染色和电镜检查了解肝细胞内脂滴的存在情况。
③血清生化指标。
④肝组织甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)含量的测定等等一些列观测方法。
其中所有模型观测指标中都存在肝脏病理组织学检查[3]。
4 非酒精性脂肪性肝高脂饲养大鼠模型的主线
通过资料分析,我们对大鼠高脂饲养模型主线有了较为明确的认识。
下面就是得出的大鼠高脂饲养模型造模方法的主线:选取适当周龄体重的SD大鼠或wistar雄性大鼠若干,分为正常组和模型组。
给予基础饲料喂养一周后,模型组给予高脂饲料饲养,高脂饲料配方为:胆固醇2%,猪油10%,基础饲料88%;对照组给予基础饲料喂养。
喂养8~12w,根据实验所需可与2、4、8、12w对若干大鼠进行处理,进行大鼠肝脏病理组织学检查和血清生化指标观测[4-5]。
以及运用相关统计学方法对所得数据进行分析如肝组织匀浆指标以及血清生化结果采用的单因素方差分析。
有了标准化的造模方法,就能造出想要的模型。
5 结语
高脂饲养大鼠模型是目前为国内外最常用的非酒精性脂肪肝动物模型,模型模拟了人类NAFLD的形成过程及病变特征,还能出现胰岛素抵抗、代谢综合征等全身代谢紊乱表现,病变有渐进性发展过程符合肝脏病变多具有渐进性发展的特点,造模停止后病变逆转缓慢便于药物干预研究,且该模型制作方法简便、重复性好、价格低廉、模型复制率和造模动物成活率均高。
是目前研究非酒精性脂肪肝的发病机理和筛选新药的一种较好的动物模型。
但目前让研究者们不满意的是该模型造模时间较长,为此研究者们也进行了各种改造,可仍然没有没有得出一个合理的造模方法。
同时,高脂饲料配方胆固醇、猪油等物质,致使饲料性质发生改变,动物易出现厌食、腹泻,造模所需时间长、病变轻等不足。
另外,该模型还存在不能完全涵盖人类非酒精性脂肪肝的疾病谱及发病机制的不足。
因此,希望在今后的研究中研究者们更多地致力于高脂饲料配方的改良,以及探索新的造模方法,使该模型更符合人类疾病的特点及研究的需要。
同时建立统更为统一稳定的模型标准评价体系,更客观地反映该模型的复制率、稳定性及科研应用价值。
总之,建立更理想的非酒精性脂肪肝动物模型,为科研提供更高质量的研究材料,有助于广大学者对非酒精性脂肪肝进行更深入的研究,从而尽快阐明其发病机制,更好的用于对临床该类患者进行诊断治疗以及防止其转变恶化,减轻患
者的痛苦,提高患者的生活质量。
同时,也有助于人们在日常生过中合理的预防非酒精性脂肪肝的发生,做到如《素问.四气调神大论》中说:“不治已病治未病;不治已乱治未乱”。
从而对该病的预防诊断治疗有更全面的把握,使人类不在受此病困扰,生活更加幸福。
参考文献:
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