医学免疫学:第十九章(2) 补体参与的反应及补体测定

第十九章(2)补体参与的反应及补体测定Chapter 17 Complement Mediated Reactions and Assays of Complement

第一部分教学内容和要求

一、目的要求

·掌握:免疫溶血试验及CH50测定的原理及意义;熟悉:补体参与的反应试验类型、补体依赖的细胞毒试验的原理、旁路途径溶血活性测定;了解:补体结合试验和免疫粘附试验的原理、C4和B因子活性测定的原理。

二、教学内容

1。补体参与的反应:免疫溶血试验,补体结合试验,补体依赖的细胞毒试验,免疫粘附试验。

2。补体的测定:补体活性的测定,补体含量的测定,补体测定的临床意义。

第二部分测试题

一、选择题

(一)单项选择题(A型题)

1.溶血素效价滴定判定的温度和时间

A.37℃、30min B.4℃、30min C.37℃、15min D.40℃、30min E.56℃、

30min

2.在补体连锁反应中最终形成的攻膜复合体是

A.C5b6789 B.C4b2a3b C.C4b2b D.C3bBb E.C3b4b

3.下列哪项试验没有补体参加

A. CH50试验

B. CDC试验

C.溶血空斑试验

D. ADCC试验

E.Raji细胞试验

4.补体结合试验中所用补体是哪种动物血清

A.马血清 B.绵羊新鲜血清 C.豚鼠新鲜血清

D.大白鼠新鲜血清 E.山羊新鲜血清

5.下列哪项试验不能用于补体缺陷的过筛诊断

A.CDC试验 B.CH50试验 C.血清C3含量测定

D.血清C1含量测定

E.C4溶血活性试验

6.B因子溶血活性测定中,在缓冲液中加入EGTA是为了螯合反应体系中的

A.Mg2+离子

B.Ca2+离子

C.Zn2+离子

D.Fe3+离子

E. P3+离子

7.在单个补体成分溶血活性测定中,用氨水处理是为了去除哪个补体成分

A.C1

B.C2

C.C4

D.C5

E.C3

8.检测免疫小鼠脾细胞分泌到细胞外的抗SRBC抗体的试验是

A.CH50试验

B.CFT

C.APH50测定

D.B因子活性测定

E.溶血空斑试验

9.利用溶血反应作为指示系统,判断抗原抗体是否相对应的试验是

A.CH50试验

B.CFT

C.APH50测定

D.B因子活性测定

E.抗补体试验

10.补体经典途径的最重要的激活物是

A.特异性抗原

B.特异性抗体

C.抗原抗体复合物

D.细菌脂多糖

E.酵母多

(二)多项选择题(X型题)

1.补体参与的反应试验包括

A.免疫溶血试验

B.补体结合试验

C.补体依赖的细胞毒试验

D.免疫黏附试

E.白细胞趋化试验

2.补体含量的检测方法有

A.单向免疫扩散法 B.火箭免疫电泳 C.免疫比浊法

D.酶联免疫吸附试验 E.放射免疫分析法

3.检测补体经典激活途径常用的指标有

A.CH50试验

B.C4活性测定

C.APH50测定

D.B因子活性测定

E.溶血空斑试验

4.检测补体旁路激活途径常用的指标有

A.CH50试验

B.CFT

C.APH50测定

D.B因子活性测定

E.溶血空斑试验

5.通过补体受体进行的试验有

A.免疫黏附试验

B.CH50试验

C.ADCC效应

D.凝集试验

E.Raji细胞试验

6.下列那些试验和补体系统无关

A.免疫黏附试验

B.CH50试验

C.ADCC效应

D.凝集试验

E.CDC试验

7. 参与免疫溶血试验的成分有

A.溶血素

B.绵羊红细胞

C.补体

D.人红细胞

E.抗人红细胞抗体

二、填空题

1.补体参与的反应试验类型包括、、和。

2.参与补体结合试验的试剂可分为和两个系统。

3.Ⅲ型变态反应疾病患者的血清中补体水平。

4.补体的最佳保存温度是。

5.补体结合试验中有、和三个系统参与反应。

三、名词解释

1.免疫溶血试验(immunohemolysis test)

2.补体结合试验(complement fixation test,CFT)

3.血清总补体溶血活性测定(complement hemolysis 50% assay,CH50 assay,CH50试验)

4.旁路途径溶血活性测定(alternative pathway hemolysis 50% assay,APH50 assay,APH50试验)

5.致敏红细胞(sensitized red cell)

四、问答题

1.免疫溶血试验的原理和用途。

2.补体结合试验的影响因素。

3.如何进行补体单个成分的测定?

4.补体结合试验和抗补体试验有何不同?

5.补体依赖细胞毒试验的原理

6.免疫黏附试验的原理

7.补体测定有何临床意义?

第三部分参考答案与题解

一、选择题

(一)单项选择题(A型题)

1.A

2.A

3.D 4。C 5.A 6.B 7.C 8.E 9.B 10.C

(二)多项选择题(X型题)

1.ABCD

2.ABCDE

3.AB

4.CD

5.AE

6.CD

7.ABC

二、填空题

1。免疫溶血试验、补体结合试验、补体依赖的细胞毒试验的原理、免疫黏附试验的原理。

2.指示系统、反应系统。

3.降低。

4.-20℃以下。 5。指示系统、补体、反应系统。

三、名词解释

1. 免疫溶血试验:是补体能使已被抗体致敏了的红细胞发生溶血的一种实验方法,实验时将三者混合,置37℃ 30min,如条件适合溶血即可发生。

2. 补体结合试验:抗原抗体复合物可结合补体,而游离的抗原或抗体则不能,以溶血素和绵羊红细胞作为

指示系统,指示补体是否被结合,从而可判断抗原抗体是否相对应。它可用已知抗原检测未知抗体,也可

用已知抗体检测未知抗原。

3. 50%补体溶血试验:用于血清总补体溶血活性测定,是根据免疫溶血试验原理设计的。当红细胞与溶血

素的量一定时,溶血程度与补体的量及活性正相关,因50%溶血作为反应终点比以100%溶血作为终点更敏感,故以50%溶血作为反应终点。

4. 50%旁路途径补体溶血活性测定:正常情况下,涎酸可抑制B因子活性。家兔红细胞所含涎酸量低于其

他动物的红细胞,可以激活血清中的B因子,引起旁路途径活化,导致兔红细胞溶解。在红细胞量一定时,

溶血程度与血清中参与旁路活化的补体量及活性呈正相关。

5.致敏红细胞:指与溶血素结合的绵羊红细胞。

四、问答题

1.原理是补体能使已被抗体致敏了的红细胞发生溶血。.免疫溶血试验所参与的成分有补体,抗原(SRBC)及抗体(溶血素),这三种成分中如有两种是已知的就可测知第三个成分,稀释该成分可测定其效价或含量。如溶血素的滴定;溶血空斑试验;CH50试验;补体结合试验;抗补体试验等。

2. 补体结合试验有五种成分参与,每一成分的变更均可影响结果。如某些游离的抗原或抗体能结合补体具有抗补体能力,补体不能过多或过少,否则将影响溶血素和绵羊红细胞的溶血,故补体结合试验的成分应加以滴定并设立多种对照。

3. 补体单个成分可测其溶血活性或含量。测定溶血活性应先制备缺乏该补体单个成分的“补体试剂”。而后利用免疫溶血试验的原理,将致敏红细胞与“补体试剂”混合,再加入待测血清,孵育后,溶血程度与待测血清中的该补体成分的溶血功能有关。测定含量可用已知抗体以单向琼脂扩散等方法进行。

4.补体结合试验是以溶血素和绵羊红细胞作为指示系统,指示补体是否被结合,从而判断抗原抗体是否相对应。它可用已知抗原检测未知抗体,也可用已知抗体检测未知抗原。而抗补体试验是以溶血素和绵羊红细胞作为指示系统,指示补体是否被结合,用以判断血清中是否存在能结合补体的抗原抗体复合物。

5. 带有特异抗原的靶细胞与相应抗体结合后,在补体参与下,靶细胞膜被损伤,靶细胞死亡,染料进入细胞而着色。靶细胞被杀伤的情况多用形态学方法进行检测。

6. 抗原抗体复合物激活补体后,可通过C3b或C4b粘附在具有补体受体CR1的红细胞、血小板或某些淋巴细胞上,形成较大的聚合物。利用这一原理设计的免疫粘附试验,可用于检测抗原或抗体,也可检测细胞上的CR1。

7.一般补体升高多见于各种传染病,组织损伤,急性炎症和肿瘤病人,这些病人血清补体总量可较正常人增高2~3倍,并有个别补体成分的升高,常见的是C4、C2,C3和C9的升高,这可能与炎症感染过程中一些因子促进补体合成有关,但在病情危重时,总补体活性往往下降。

补体下降分为先天性和后天获得性两种。先天性血清补体水平降低包括各种与人类补体缺陷有关的疾病,后天获得性补体下降可能有以下情况:①补体被循环免疫复合物固定。如急性肾小球肾炎时CH50、C3下降;②补体合成减少。如严重肝脏疾病时CH50、C3、C4明显下降;③补体成分失活或消耗。如急性链球菌感染后肾小球肾炎时血清中出现C3肾炎因子,可引起C3大量活化而消耗;大面积烧伤,局部缺血时,机体释放各种蛋白水解酶,可裂解多种补体成分,引起补体水平下降。

(谷俊莹刘若英)

补体结合实验报告

补体结合实验报告 一、实验目的 本实验旨在通过观察和分析补体结合反应,加深对免疫学中补体系统的理解,并探讨其在疾病诊断和治疗中的应用。 二、实验原理 补体系统是机体免疫系统的重要组成部分,能够通过一系列酶促反应参与免疫应答。补体结合反应是补体系统的关键步骤之一,常用于免疫学研究和临床诊断。 补体结合反应的基本原理是抗原与特异性抗体结合后,激活补体系统中的特定组分,进而引发一系列补体级联反应。这些反应最终导致补体蛋白在抗原表面形成复合物,从而实现对抗原的免疫识别和清除。 三、实验步骤 1.实验前准备: –准备足够的抗原溶液、抗体溶液和补体活性试剂。 –准备适当浓度的阳性和阴性对照样品。 –准备酶标板,将待测样品加入孔中。 2.补体结合反应: –将抗原溶液加入酶标板中相应孔中。 –加入抗体溶液,使其与抗原充分结合。 –加入补体活性试剂,观察反应发生。 3.反应结束后,使用染色剂标记的二抗进行检测。 4.使用酶底物,在适当的时间内测定吸光度变化。 5.分析实验结果,得出结论。 四、实验结果与分析 根据实验步骤,我们进行了补体结合实验,并观察到吸光度的变化。我们比较了阳性对照样品和阴性对照样品的吸光度,发现阳性对照样品的吸光度明显高于阴性对照样品。这表明阳性对照样品中发生了补体结合反应,而阴性对照样品中未发生补体结合反应。 通过实验结果分析,我们可以得出以下结论: 1. 补体结合反应可以用于检测抗原和抗体的结合情况,从而判断感染状态或诊断某些疾病。 2. 补体结合实验的结果可通过测定吸光度等方法定量分析。 3. 补体结合实验在临床诊断中有广泛的应用,如自身免疫性疾病、感染性疾病等的检测和诊断。

医学免疫学:第十九章(2) 补体参与的反应及补体测定

第十九章(2)补体参与的反应及补体测定Chapter 17 Complement Mediated Reactions and Assays of Complement 第一部分教学内容和要求 一、目的要求 ·掌握:免疫溶血试验及CH50测定的原理及意义;熟悉:补体参与的反应试验类型、补体依赖的细胞毒试验的原理、旁路途径溶血活性测定;了解:补体结合试验和免疫粘附试验的原理、C4和B因子活性测定的原理。 二、教学内容 1。补体参与的反应:免疫溶血试验,补体结合试验,补体依赖的细胞毒试验,免疫粘附试验。 2。补体的测定:补体活性的测定,补体含量的测定,补体测定的临床意义。 第二部分测试题 一、选择题 (一)单项选择题(A型题) 1.溶血素效价滴定判定的温度和时间 A.37℃、30min B.4℃、30min C.37℃、15min D.40℃、30min E.56℃、 30min 2.在补体连锁反应中最终形成的攻膜复合体是 A.C5b6789 B.C4b2a3b C.C4b2b D.C3bBb E.C3b4b 3.下列哪项试验没有补体参加 A. CH50试验 B. CDC试验 C.溶血空斑试验 D. ADCC试验 E.Raji细胞试验 4.补体结合试验中所用补体是哪种动物血清 A.马血清 B.绵羊新鲜血清 C.豚鼠新鲜血清 D.大白鼠新鲜血清 E.山羊新鲜血清 5.下列哪项试验不能用于补体缺陷的过筛诊断 A.CDC试验 B.CH50试验 C.血清C3含量测定 D.血清C1含量测定 E.C4溶血活性试验 6.B因子溶血活性测定中,在缓冲液中加入EGTA是为了螯合反应体系中的 A.Mg2+离子 B.Ca2+离子 C.Zn2+离子 D.Fe3+离子 E. P3+离子 7.在单个补体成分溶血活性测定中,用氨水处理是为了去除哪个补体成分 A.C1 B.C2 C.C4 D.C5 E.C3 8.检测免疫小鼠脾细胞分泌到细胞外的抗SRBC抗体的试验是 A.CH50试验 B.CFT C.APH50测定 D.B因子活性测定 E.溶血空斑试验 9.利用溶血反应作为指示系统,判断抗原抗体是否相对应的试验是 A.CH50试验 B.CFT C.APH50测定 D.B因子活性测定 E.抗补体试验 10.补体经典途径的最重要的激活物是 A.特异性抗原 B.特异性抗体 C.抗原抗体复合物 D.细菌脂多糖 E.酵母多 糖 (二)多项选择题(X型题) 1.补体参与的反应试验包括 A.免疫溶血试验 B.补体结合试验 C.补体依赖的细胞毒试验 D.免疫黏附试 验 E.白细胞趋化试验 2.补体含量的检测方法有 A.单向免疫扩散法 B.火箭免疫电泳 C.免疫比浊法 D.酶联免疫吸附试验 E.放射免疫分析法 3.检测补体经典激活途径常用的指标有 A.CH50试验 B.C4活性测定 C.APH50测定 D.B因子活性测定 E.溶血空斑试验 4.检测补体旁路激活途径常用的指标有 A.CH50试验 B.CFT C.APH50测定 D.B因子活性测定 E.溶血空斑试验 5.通过补体受体进行的试验有 A.免疫黏附试验 B.CH50试验 C.ADCC效应 D.凝集试验 E.Raji细胞试验

免疫学

《医学免疫学》,科学出版社第二版。 问答题。 1.免疫系统组成与功能。 免疫系统是执行免疫功能的组织系统,包括:(1)免疫器官:由中枢免疫器官(骨髓、胸腺)和外周免疫器官(脾脏、淋巴结和黏膜免疫系统)组成;(2)免疫细胞:主要有T淋巴细胞、B淋巴细胞、中性粒细胞、单核-巨噬细胞、自 然杀伤细胞、树突状细胞等;(3)免疫分子:如抗体、补体、细胞因子和免疫细胞表面的多种膜分子,可发挥三种功能:(1)免疫防御:即抗感染免疫,机体针对病原微生物及其毒素的免疫清除作用,保护机体免受病原微生物的侵袭;(2)免疫自稳:机体可及时清除体内衰老或损伤的体细胞,对自身成分处于耐受,以维系机体内环境的相对稳定;(3)免疫监视:机体免疫系统可识别和清除畸形和突变细胞的功能。在某些情况下,免疫过强或低下也能产生对机体有 害的结果,如引发超敏反应、自身免疫病、肿瘤、病毒持续感染等。 2.简述内源性抗原的加工、处理、提呈过程。 答:完整的内源性抗原在胞浆中,在LMP的作用下降解成多肽片段,然后多肽 片段经TAP1/TAP2选择,转运到内质网,在内质网中与MHC Ⅰ类分子双向选择结合成最高亲和力的抗原肽/MHC分子复合物,该复合物由高尔基体转运到细胞 表面,供CD8+ T 细胞识别。 3.抗体的生物学活性。 (1)IgV区的功能主要是特异性识别、结合抗原。(2)IgC区的功能a.激活 补体;b.细胞亲嗜性:调理作用(IgG与细菌等颗粒性抗原结合,通过IgFc段与吞 噬细胞表面相应IgGFc受体结合,促进吞噬细胞对颗粒抗原的吞噬;抗体依赖的 细胞介导的细胞毒作用(ADCC,IgG与肿瘤细胞、病毒感染细胞表面结合,通过IgFc段与具有胞毒作用的效应细胞表面相应IgGFc受体结合,从而触发效应细 胞对靶细胞的杀伤作用,称为ADCC);介导I II III型超敏反应。(3)各类 免疫球蛋白的特性和功能。IgG:是抗感染的主要抗体;是唯一能通过胎盘屏障的抗体,在新生儿抗感染免疫中起重要作用;可与吞噬细胞和NK细胞表面的 Fc受体结合,发挥调理作用和ADCC效应;(2)IgM:为五聚体,分子量最大;激活补体能力最强;是初次体液免疫应答中最早出现的抗体,可用于感染的早 期诊断;(3)IgA:分泌型IgA(SIgA)为二聚体,主要存在于呼吸道、消化道、泌尿生殖道黏膜表面和乳汁中,在黏膜免疫中发挥主要作用;(4)IgD: 是B细胞发育分化成熟的标志;(5)IgE:正常人血清中含量最少,具有很强 的亲细胞性,与肥大细胞、嗜碱性粒细胞等具有高度亲和力,可介导Ⅰ型超敏 反应的发生。 4.简述决定抗原免疫原性的因素。 答:第一是抗原的异物性,一般来讲,异物性越强,免疫原性越强;第二是抗原的理化性质,包括化学性质、分子量、结构复杂性、分子构象与易接近性、

免疫学

免疫学 什么是免疫?免疫系统由哪些功能? 免疫即通常所指免除疫病(传染病)及抵抗多种疾病发生的能力。免疫是由机体内的免疫系统执行,其基本功能主要是以下几个方面。 1、免疫防御功能。 2、免疫耐受功能:免疫系统具有“区分自我及非我”的功能。 3、免疫监视功能。 4、免疫调节功能:与神经系统级内分泌系统共同构成神经-内分泌-免疫网络调节系统,参与机体整体功能的调节,同时调节免疫系统本身的功能。 简述免疫系统的组成? 免疫系统由免疫器官、免疫细胞和免疫分子三大部分组成。免疫器官又分为中枢免疫器官和周围免疫器官,中枢免疫器官包括胸腺和骨髓是淋巴细胞起源发育成熟的场所;周围免疫器官包括淋巴结、脾、黏膜相关淋巴组织等,是淋巴细胞定居及产生免疫应答的场所。免疫细胞主要包括淋巴细胞、吞噬细胞。粒细胞和NK细胞等。免疫分子可分为膜型分子以及分泌型分子(免疫球蛋白、细胞因子、补体等)什么是抗原?抗原的基本特点是什么? 抗原是指能与T细胞的TCR和B细胞的BCR相结合,促使其增值分化,产生抗体或致敏淋巴细胞,并能与之结合,进而发挥免疫效应的物质。 抗原一般具有两个基本特性。一是免疫原性:即抗原刺激机体产

生免疫应答,诱生抗体或致敏淋巴细胞的能力;二是抗原性:即抗原与其所诱生的抗体或致敏淋巴细胞有特异性结合的能力。 同时具有免疫原性和抗原性的物质称为完全抗原,即通常所称的抗原;仅具有抗原性而不具备免疫原性的物质称为不完全抗原,又称半抗原。 何谓抗体?何谓Ig? 抗体是指介导体液免疫的重要效应分子,指B细胞识别抗原后增殖分化为浆细胞所产生的一种蛋白质,主要存在于血清等体液中,能与相应抗原特异性结合,具有免疫功能。Ig即免疫球蛋白,是指具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白,可以分为分泌型和膜型两大类。严格的说,抗体的概念侧重于功能,而Ig的概念侧重于结构。 免疫球蛋白分为哪几类?有何生物活性? 依据免疫球蛋白重链抗原性的不同将Ig分为IgA、IgE、IgM、IgG、IgD五大类。 免疫球蛋白的生物学活性主要有:(1)与抗原发生特异性结合;(2)激活补体;(3)与细胞表面Fc受体结合,可以发挥调理作用、ACDD作用,介导Ⅰ型超敏反应等;(4)穿过胎盘和粘膜:IgG是唯一能通过胎盘的Ig,分泌型IgA可通过呼吸道和消化道黏膜,是黏膜局部免疫的最主要因素。 何谓补体系统?有哪几条补体激活途径? 补体系统是存在于血清、组织液和细胞膜表面的一组不耐热的经

医学免疫学简答精华版

1、简述补体系统的组成与主要生物学功能。: 组成:①补体系统的固有成分②补体调节蛋白③补体受体④体液免疫 功能:补体旁路途径在感染早期发挥作用,经典途径在感染中、晚期发挥作用。 ①、溶菌和细胞溶解作用——参与宿主抗感染、抗肿瘤; ②、调理作用。C3b/C4b可作为非特异性调理素介导调理作用; ③、免疫复合物清除作用——将免疫复合物随血流运输到肝脏,被吞噬细胞清除; ④、炎症介质作用——C3a/C5a的过敏毒素作用、C5a的趋化和激活作用、C2a的激肽样作用,引起炎症性充血和水肿; ⑤、参与特异性免疫应答。 2、补体激活的三个途径: 经典途径:①激活物为抗原或免疫复合物,C1q识别②C3转化酶和C5转化酶分别是C4b2a和C4b2a3b③其启动有赖于特异性抗体产生,故在感染后期或恢复期才能发挥作用,或参与抵御相同病原体再次感染机体 旁路途径:①激活物为细菌、真菌或病毒感染细胞等,直接激活C3②C3转化酶和C5转化酶分别是C3bBb和C3bBb3b ③其启动无需抗体产生,故在感染早期或初次感染就能发挥作用④存在正反馈放大环 MBL(凝激素)途径:①激活物非常广泛,主要是多种病原微生物表面的N氨基半乳糖或甘露糖,由MBL识别②除识别机制有别于经典途径外,后续过程基本相同③其无需抗体即可激活补体,故在感染早期或对免疫个体发挥抗感染效应 ④对上两种途径具有交叉促进作用 3、三条补体激活途径的过程及比较: 经典途径/旁路途径/MBL途径 激活物:抗原抗体复合物/内毒素、酵母多糖、凝聚IgA/病原微生物、糖类配体 参与成分:C1-C9/ C3、C5-C9、B、D、P/ C2-C9、MBL、MASP C3转化酶:C4b2a/ C3bBb/C4b2a 、C3bBb C5转化酶:C4b2a3b/ C3bBb3b/ C4b2a3b、C3bBb3b 作用:特异性免疫/非特异性免疫/非特异性免疫 4、试述补体经典激活途径的全过程。 经典激活途径指主要由C1q与激活物(IC)结合后,顺序活化C1r、C1s、C4、C2、C3,形成C3转化酶(C4b2b)与C5转化酶(C4b2b3b)的级联酶促反应过程。它是抗体介导的体液免疫应答的主要效应方式。 5、补体系统可通过以下方式介导炎症反应 激肽样作用:C2a能增加血管通透性,引起炎症性充血; 过敏毒素作用:C3a、C4a、C5a 可使肥大细胞、嗜碱性粒细胞脱颗粒,释放组胺等介质,引起炎症性充血、水肿; 趋化作用:C3a、C5a 能吸引中性粒细胞和单核巨噬细胞等向炎症部位聚集,引起炎性细胞侵润。6、简述补体参与宿主早期抗感染免疫的方式。 第一,溶解细胞、细菌和病毒。通过三条途径激活补体,形成攻膜复合体,从而导致靶细胞的溶解 第二,调理作用,补体激活过程中产生的C3b 、C4b、iC3b 能促进吞噬细胞的吞噬功能。 第三,引起炎症反应。补体激活过程中产生了具有炎症作用的活性片断,其中,C3a C5a具有过敏毒素作用,C3a C5a C567具有趋化作用 1、免疫球蛋白的生物学功能。 V区主要功能是特异性结合抗原,从而中和毒素,阻断病原入侵,C区在V区与特异性抗原结合后,通过激活补体及与靶细胞表面Fc受体结合,发挥调理作用,ADCC效应,介导超敏反应和穿越胎盘等作用,母体IgG可经胎盘进入胎体,对sIgA可经母体初乳进入新生儿体内,对新生儿抗感染具有重要意义。 简述各类Ig的生物学特性: IgG:(1)唯一能通过胎盘的Ig (2)激活补体(3)调理和促吞噬作用(4)ADCC(5)抗感染的主要抗体IgM: (1)产生早,个体发育过程中最早合成和分泌。抗体刺激后最早产生(2)激活补体(3)调理作用(4)天然血型抗体(5)B细胞抗原受体的主要成分(60早起抗感染的主要抗体 IgA: (1)经初乳传递,给新生儿胃肠道提供保护(2)粘膜局部抗感染的主要抗体 IgD: B细胞膜表面的Ig ,B细胞分化成熟的标志. IgE:(1)亲细胞抗体(CH2、CH3),参与Ⅰ型超敏反应。(2)参与抗寄生虫感染。 以IgG为例,简述Ig的基本结构及功能: 基本结构:Ig是由两条相同的重链和两条相同的轻链借链间二硫键连接组成的四肽结构。多肽链N端重链的1/4,轻链的1/2氨基酸序列多变,为可变区,由HVR和FR构成;多肽链C端重链的3/4和轻链的1/2氨基酸序列相对保守,为恒定区。功能:(1)Ig V区的功能:识别并特异性结合抗原(2)Ig C区的功能: A、激活补体B、结合Fc段受体a、调理作用b、抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用c、介导Ⅰ型超敏反应C、穿过胎盘和黏膜 抗原免疫原性由哪些因素决定的? 答:1.抗原的理化性质;化学性质、分子量大小、结构的复杂性、分子构象、易接近性、物理状态。2.宿主方面;遗传因素,年龄、性别和健康状况。3.抗原进入机体的方式。6.细胞因子的生物学活性? 答:①抗感染、抗肿瘤作用,如IFN、TNF等。②免疫调节作用,如IL-1、IL-2、IL-5、IFN等。③刺激造血细胞增殖

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1 免疫反应性或反应原性:指抗原能与相应抗体和/或致敏淋巴细胞特异性结合、发生免疫反 应的性能 2 抗原特异性取决于抗原表位,即由抗原表位的种类、性质、数目和空间构型所决定 3完全抗原是指既有免疫原性又有反应原性的抗原,如微生物和异种蛋白质等。半抗原是指本身只有反应原性而无免疫原性的简单小分子抗原,如某些多糖、类脂和药物等。半抗原单独作用无免疫原性,与蛋白载体结合形成半抗原一载体复合物即可获得免疫原性 4中枢免疫器官人和哺乳动物无法氏囊,其骨髓是与禽类法氏囊相当的中枢免疫器官。新生期去除法氏囊,禽类表现为体液免疫功能缺陷,而细胞免疫功能正常。 5 T细胞表面标志有T细胞分化抗原(CD分子)如CD2/E受体(又称淋巴细胞功能相关抗 原-2,LFA-2)、CD3、CD4、CD8、CD28,T细胞抗原受体(TCR),有丝分裂原受体。 6 TCR/α、β不能直接结合游离的抗原分子,只能识别、结合经APC加工处理后,表达于APC 表面的抗原肽-MHC分子复合物 7 B淋巴细胞是骨髓始祖B细胞在人和哺乳动物骨髓或禽类法氏囊中发育分化成熟的淋巴细 胞。简称B细胞 8 CD19和CD20分子是人B细胞特有的表面标志,存在于前B细胞、未成熟B细胞和成熟B细胞表面,其主要功能是调节B 细胞活化 9 NK细胞表面具有低亲和性IgGFc(FcγRⅢ,CDl6),能定向杀伤与IgG抗体结合的靶细 胞,这种杀伤作用称为抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC 10 NK细胞表达与其活化或抑制有关的受体,称为抑制性受体(KIR)和激活性受体(KAR)。 11 抗原呈递细胞的种类可分为专职APC和非专职APC。专职APC是指一类特化的细胞, 它们具有摄入、加工、处理、提呈胞外抗原,激活CD4+T细胞,诱导免疫应答的能力。 这类细胞必须表达MHC-Ⅱ类分子、协同刺激信号分子和各种粘附分子。专职APC包括巨噬细胞、树突状细胞和B细胞。通常情况下不表达MHC-Ⅱ类分子,不具备提呈抗原的能力,但某些情况下则表达MHC-Ⅱ类分子、协同刺激信号分子和各种粘附分子的细胞称非专职APC。 12免疫球蛋白是指具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白,主要存在于血液和体液中,也可作为抗原受体表达于B细胞表面,称为膜表面免疫球蛋白(Smlg)。 13抗体是由浆细胞合成分泌的能与相应抗原结合,即具有免疫功能的球蛋白。抗体是重要的免疫分子,存在于血液和体液中,因此将抗体介导的免疫称为体液免疫 14 IgG的CH2/CH3和IgE的CH4有亲细胞活性,能与具有相应受体的组织细胞结合,产 生调理作用、ADCC作用或引发Ⅰ型超敏反应 15 根据Ig重链或轻链恒定区同种型抗原决定簇的不同,可将Ig分为若干类、亚类、型和亚 型 16 IgM是种属进化过程中最早出现的Ig,也是个体发育过程中最早产生的Ig,通常在胚胎 晚期即可生成,因此若脐带血或新生儿血清中IgM水平升高,表明胎儿曾有宫内感染 17 补体固有成分中以C3含量最高,D因子含量最低;以C1分子量最大,D因子分子量最 小。补体固有成分对热不稳定,通常56℃作用30分钟即被灭活,在0~10℃条件下活性只能保持3~4天,故应保存在-20℃以下

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免疫系统的功能: 1、免疫防御功能 2、免疫监视功能 3、免疫耐受功能 免疫学三个重要的理论: 1侧链学说。1897年Paul Erhich提出了抗体产生的侧链学说。该学说认为抗体分子是细胞表面的一种受体,抗原进入机体后于这种受体可发生互补型的特异性结合反应,刺激细胞产生更多的抗体,当受体大量产生并脱落到血液中便成为循环抗体。 2克隆选择。1957年MacFarlance Burnet 提出了克隆选择学说。该学说认为,全身的免疫细胞是由众多识别不同抗原的细胞克隆所组成的。同一种克隆细胞表达相同的特异性受体,淋巴细胞识别抗原的多样性是机体接触抗原以前就预先形成的,是生物在长期进化中获得的。抗原进入机体只是从免疫细胞库中选择出能识别这种抗原的相应的淋巴细胞克隆,并使其活化、增殖、扩增出许多具有相同特异性的子代细胞,产生大量特异性抗体,清楚入侵的抗原。若在胚胎期间,体内抗原接触到相应细胞系,这些细胞系即被排除或禁忌,处于抑制状态。成为禁忌克隆。 3免疫网络学说。1974年Niels Jerne提出了免疫网络学说。该学说认为,抗原刺激机体产生抗体,抗体分子上的独特型决定簇在体内又能引起抗独特型抗体的产生,抗独特型抗体又可引起抗抗独特型抗体产生,如此下去,在抗体和淋巴细胞中产生一个复杂的级联网络,在免疫应答调节中起着重要作用。 免疫器官分类 免疫器官按其发生和功能不同可分为中枢免疫器官和外周免疫器官 骨髓的结构: 骨髓位于骨髓腔内,分为红骨髓和黄骨髓。红骨髓具有活跃的造血功能,由造血组织和血窦构成。造血组织主要又基质细胞和造血细胞组成,基质细胞包括网状细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞、巨噬细胞等。由基质细胞及其所分泌的多种细胞因子与细胞外基质共同构成了造血细胞赖以分化发育的环境,成为造血诱导微环境骨髓的功能: 1各类血细胞和免疫细胞发生的场所 2B细胞分化成熟的场所 3体液免疫应答发生的场所 胸腺: 胸腺分为左右两叶,表面覆盖有一层结缔组织被膜,被膜深入胸腺实质,将实质分隔成若干胸腺小叶,胸腺小叶的外层为皮质,内层为髓质,皮-髓质交界处含有大量血管。 是T细胞分化、发育、成熟的场所,参与免疫调节,自身耐受的建立和维持 淋巴结的结构 淋巴结表面覆盖有致密的结缔组织被膜,被结缔组织深入实质,构成小梁,作为淋巴结的支架。被膜外侧有数条输入淋巴管,输出淋巴管则由淋巴结门部离开。淋巴结实质分皮质区和髓质区两个部分。皮质分为浅皮质区和深皮质区。髓质区由髓索和髓窦组成 淋巴结的功能 1T细胞核B细胞定居的场所 2免疫应答发生的场所 3参与淋巴细胞再循环 4过滤作用 淋巴结细胞再循环的生物学意义 通过淋巴再循环,使体内淋巴细胞在外周免疫器官和组织的分布更趋合理。淋巴组织可以不断的从循环池中得到新的淋巴细胞补充,有助于增强整个机体的免疫功能。带有各种特异性抗原受体的T,B细胞,记忆细胞,通过再循环,增加了抗原和APC的接触机会。接触相应的抗原后,即可进行相应的生理学功能。通过淋巴再循环,使机体所有的免疫器官和组织联系成为一个有机的整体,并将免疫信息传递给全身各处的淋巴细胞和其他免疫细胞,有利于动员各种免疫细胞和效应细胞迁移至病原体,肿瘤或者其他抗原性异物所在部位,从而发挥免疫效应。 淋巴细胞归巢的分子基础是淋巴细胞表面的归巢受体与内皮细胞表面相应黏附分子——血管地址素的相互作用。 抗原特性:免疫原性、抗原性 抗原表位类型:顺序表位(线性表位)、构象表位(非线性表位) 影响抗原特异性的因素:抗原表位的性质、数目、位置和空间构象决定着抗原表位的特异性 影响抗原免疫应答的因素: 一、抗原分子的理化性质:化学性质、分子量大小、结构的复杂性、分子构象、易接近性、物理状态。二、宿主方面的因素:遗传因素、年龄、 性别与健康状态。 三、抗原进入机体方式的影响:数量、途 径、两次免疫的时间间隔、次数以及免疫 佐剂的应用和佐剂类型都明显影响机体对 抗原的应答。 免疫球蛋白的结构: 免疫球蛋白由四肽链分子组成,各肽链 间有数量不等的链间二硫键。结构上Ig可 分为三个长度大致相同的片段,其中两个 长度完全一致的片段位于分子上方,通过 一易弯曲的区域与主干连接,形成一“Y” 字形结构,成为Ig单体,构成免疫球蛋白 分子的基本单位。 一、重链和轻链:任何一类天然免疫球蛋 白分子均由四条异源性多肽链,其中分子 量较大的成为重链,而分子量较小的成为 轻链。 1重链:分子量约为50~75kDa,由 450~550个氨基酸残基组成。各类免疫球 蛋白重链恒定区的氨基酸组成和排列顺序 不尽相同,因此其抗原性也不同。据此可 将免疫球蛋白分为五类或五种类型,即 IgM、IgD、IgG、IgA和IgE,其相应的重链 分别为μ链、δ链、γ链、α链、ε链。 2轻链:分子量约为25kDa,由214个氨 基酸残基构成。轻链有两种,分别为κ链 和λ链,据此可将Ig分为两型,即κ型和 λ型。一个天然Ig分子上两条轻链的型别 总是相同的,但是同一个体内可存在分别 带有κ或λ链的抗体分子。 二、可变区和恒定区:免疫球蛋白重链和 轻链中靠近N端的氨基酸序列变化较大的 区域成为可变区,分别占重链和轻链的1/4 和1/2;而靠近C端氨基酸序列相对稳定 的区域,成为恒定区。分别占重链和轻链 的3/4和1/2。 1、可变区:重链和轻链的V区分别称为 V H和V L。V H和V L各有3各区域的氨基酸组 成和排列高度可变,称为高变区(HVR)或 互补决定区(CDR)。 2、恒定区:重链和轻链的C区分别称为 C H和C L。同一类别的Ig,其C区氨基酸组 成和排列顺序比较恒定,其免疫原性相同, 但V区各异。 三、铰链区:铰链区位于C H1和C H2之间, 含有丰富的脯氨酸,因此易伸展弯曲,有 利区两臂同时结合两个不同的抗原表位。 四、结构域:Ig分子的两条重链和两条轻 链都可以折叠为数个球形结构域,每个结 构域一般有相应的功能。 免疫球蛋白的特性与功能: 一、IgG:是血清和细胞外液中含量最 高的Ig,是在此免疫应答产生的主要抗体, 在体内分布广泛,亲和力最高,具有重要 的免疫效应,是机体抗感染的“主力军”。 IgG1、 IgG3、IgG4可穿过胎盘屏障,在 新生儿抗感染免疫中起重要作用。 二、IgM:单体IgM以膜结合型表达于 B细胞表面,构成B细胞抗原受体。一般 不能通过血管,主要存在于血液中,是初 次体液免疫应答中最早出现的抗体,是机 体抗感染部队的“先头部队”,可用于感染 按的早期诊断。 三、IgA:有血清型和分泌型两类。血 清型为单体,主要存在于血清中。分泌型 为二聚体,由J链连接,主要存在于胃肠 道和支气管分泌液、初乳、唾液和泪液中。 分泌型是外分泌液中的主要抗体类别,参 与粘膜局部免疫,通过与相应病原微生物 结合,阻止病原体黏附到细胞表面,从而 在局部抗感染中发挥重要作用,是机体抗 感染的“边防军” 四、IgD:分为血清型IgD和膜结合型 IgD。膜结合型IgD构成BCR,是B细胞分 化发育成熟的标志,未成熟B细胞仅表达 mIgM,成熟B细胞可同时表达mIgM和mIgD, 称为初始B细胞。 五、IgE:IgE的重要特征为亲细胞抗 体,其CH2和CH3机构与可与肥大细胞、 嗜碱性粒细胞上Fc RI高亲和力结合,当 结合再次进入机体的抗原后可引起I型超 敏反应。 补体系统的组成 1补体固有成分:存在于血浆及体液中, 构成补体基本组成的蛋白质。包括1)经 典激活途径的C1q、C1r、C1s、C2、C4。2) 旁路激活途径的B因子、D因子和备解素。 3)甘露糖结合凝聚素激活途径(MBL)的 MBL、MBL相关丝氨酸蛋白酶(MASP)。4) 补体活化的共同组分C3、C5、C6、C7、C8、 C9 2补体调节蛋白:指存在于血浆中和细胞 膜表面通过调节补体激活途径中关键酶而 控制补体活化强度和范围的蛋白质。 3补体受体:指存在于不同细胞膜表面、 能与补体激活过程所形成的活性片段相结 合、介导多种生物效应的受体分子。 补体的命名 1补体经典激活途径和终末成分按照其发 现先后,依次命名为C1、C2、C3~C9 2补体旁路途径成分分别称为B因子、D 因子、H因子、I因子、P因子 3具有酶活性的补体分子,均在其上一横 线表示之 4某些补体调节蛋白按其功能命名 补体的生物合成: 约90%血浆补体成分由肝脏合成,少数 成分由肝脏意外的细胞合成,如C1由肠上 皮和单核/巨噬细胞产生,D因子由脂肪组 织产生。 补体激活途径 经典激活途径,旁路激活途径,MBL激活 途径 补体的生物学作用: 一、参与宿主的早期抗感染免疫(1溶解 细胞、细菌和病毒;2、调理作用;3、引起 炎症反应) 二、维护集体内环境稳定(1、清除免疫复 合物;2、清除凋亡细胞) 三、参与适应性免疫(1、参与免疫应答的 诱导;2、参与免疫细胞的增殖分化;3、 参与免疫应答的效应阶段;4、参与免疫记 忆) 补体活化的共同末端效应 参与三条补体激活途径终末过程的组分 及活化过程相同,其主要机制是:C5转化 酶(C3bBb3bH或C4b2a3b)将C5裂解为 C5a、C5b;C5a游离于液相,是重要的炎 症介质,C5b可与C6稳定结合为C5b6; C5b6自发与C7结合成C5b~7,暴露膜结合 位点,与附近的细胞膜非特异性结合;结 合于膜上的C5b~7可与C8结合,所形成的 C5b~8可促进C9聚合,形成C5b6789n复 合物,即攻膜复合物(MAC)插入细胞膜 的MAC通过破坏局部磷脂双层而形成“渗 漏斑”,或形成穿膜的亲水性孔道,最终导 致细胞崩溃。 MHC免疫功能相关基因 1,血清补体成分编码基因 2,抗原加工提呈相关基因。1)蛋白酶 β亚单位 2)抗原加工相关转运物 3)HLA-DM基因 4)HLA-DO基因 5) TAP相关蛋白基因 3,经典I型基因 1)HLA-E 2)HLA-D 4,炎症相关基因 1)肿瘤坏死因子基因 家族 2)转录调节基因或类转录因子 基因家族 3)MHC I类相关基因家族 4)热休克蛋白基因家族 MHC(主要组织相容性复合体)的生物学 功能 1作为抗原提呈分子参与适应性免疫应答 1)T细胞以其TCR实现对抗原肽和MHC 分子的双重识别,由此形成T细胞在抗原 识别和发挥效应功能中的MHC限制性 2)被MHC分子结合并提呈的成分,可 以使自身抗原,甚至是MHC分子本身 3)MHC是疾病易感性个体差异的主要 决定者 4)MHC参与构成种群基因结构的异质 性 2作为调节分子参与固有免疫应答 1)经典的Ⅲ类基因为补体成分编码, 参与炎症反应、对病原体的杀伤和 免疫性疾病的发生 2)非经典Ⅰ类基因和MICA基因产物 可作为配体分子,以不同的亲和力 结合及活性和抑制性受体,调节 NK细胞和部分杀伤细胞的活性 3)炎症相关基因参与启动和调控炎 症反应,并在应激反应中发挥作用 BCR:表达于B细胞表面的免疫球蛋白, 即膜型免疫球蛋白 B淋巴细胞的表面分子及其作用:B细胞表 面有众多的膜分子,他们在B细胞识别抗 体,B细胞的活化、增殖,以及抗体产生 过程中发挥着作用。(1)B细胞抗原受体 复合物:B细胞表面(抗原)受体(BCR) 复合物。BCR复合物由识别和结合抗原的 mIg和传递抗原刺激信号的Igα/Igβ异源 二聚体组成。①mIg:是B细胞的特征性表 面标志。②Igα/Igβ:Igα和Igβ均是免疫 球蛋白超家族的成员,有胞膜外区、跨膜 区和相对较长的胞质区。(2)B细胞共受 体:B细胞共受体能加强B细胞活化信号 的转导。B细胞表面的CD19与CD21及 CD81(TAPA-1)非共价相连,形成B细胞 特异的多分子活化共受体,能增高B细胞 对抗原刺激的敏感性。{三}协同刺激分子: 抗原与B细胞的BCR结合,所产生的信号 经由CD79a/CD79b转导至细胞内,还需要 第二信号,第二信号主要由Th细胞和B细 胞表面的协同刺激分子间的相互作用产生 ①CD40②CD80和CD86③其他黏附分子 {四}其他表面分子:①CD20②.CD22③ CD32 B淋巴细胞的功能:1、产生抗体介导体液 免疫应答①中和作用②调理作用③参与补 体的溶细胞或溶菌作用④ADCC 2、提呈可 溶性抗原:无论是巨噬细胞还是树突状细 胞,都不能有效地摄取可溶性抗原,而活 化的B细胞则可籍其表面BCR结合可溶性 抗原,并内化BCR-可溶性抗原复合物,对 其加工、处理后,以抗原肽-MHC分子复合 物的形式提呈给T细胞。

补体活性检测、补体参与的溶血试验

补体活性检测、补体参与的溶血试验 理解: 1.补体的概念和性质 2.补体的三条活化途径基本原理 掌握: 1.血清补体总活性测定的实验原理、实验方法 2.补体结合实验的实验原理、实验方法 3.各种补体检测方法的临床应用 一、补体性质与活化途径 (一)二、补体的概念 补体(Complement,C):是一组存在于血液和组织液中,具有级联酶促反应特征、不耐热的糖蛋白,是抗体发挥溶细胞作用的必要补充成分 (二)补体系统的组成 补体固有成分:如C1(q、r、s)、C2、C3……C9 补体调节蛋白:如B因子、D因子、P因子、H因子 补体受体:C3R,CR1,CR2等 (三)补体的激活途径 经典激活途径、旁路活化途径 (四)补体的生物学功能 1.细胞毒溶菌作用 2.调理作用:C3b、iC3b、C4b 3.炎症介质作用:C3a、C5a、C567 生物学检测:总补体活性检测、单个补体活性检测 免疫学检测:单个补体成分检测、补体受体成分检测 二、血清补体总活性测定 1.补体总活性测定原理 反应系统的组成:抗原+Antibody->活化补体 ↓↓↓ 绵羊红细胞+溶血素+待检测补体 ↓ 溶血反应 (1)溶血反应: 通过经典途径或旁路途径激活的补体,作用于致敏红细胞,使红细胞表面形成若干孔,水分等进入红细胞,引起红细胞的肿胀破裂而溶血 (2)CH50检测原理 在溶血反应中,补体溶血程度与补体的活性相关,但非直线关系 以溶血百分率为纵坐标,相应补体含量为横坐标,溶血程度对补体含量依赖呈特殊的S型曲线

以50%溶血作为终点指标,比100%溶血更为敏感,这一方法称为补体50%溶血试验(CH50) (3)CH50(50% complement hemolysis): 补体总活性测定方法,以红细胞的溶解为指示,以50%溶血为判断终点,故称补体50%溶血试验(CH50) 2.实验材料 (1)绵羊红细胞 ①使用等量或两倍的阿氏保存液混合,便于抗凝和储存 ②临用前生理盐水洗涤红细胞 ③使用浓度一般为2~5% (2)配制50%溶血标准管 ①2%SRBC悬液0.5ml+2.0ml蒸馏水使其溶解 ②加入2.0ml1.8%NaCl溶液校正为等渗溶液 ③加入2%SRBC溶液0.5ml,即为50%溶血状态 (3)溶血素(抗SRBC Ab) ①用SRBC免疫家兔得到兔抗SRBC血清 ②试验前应预先加热(56℃,30min),灭活补体 ③滴定溶血素的效价:产生完全溶血的最高稀释度为溶血素的效价 (4)缓冲液 ①磷酸盐缓冲液或巴比妥缓冲液 ②pH应调至7.2-7.4之间 ③适量氯化钠保持等渗 ④并适量加入一些Ca2+和Mg2+ (5)补体 ①作为待检对象:标本必须新鲜 ②作为主要试剂(单个补体检测):多采用豚鼠血清,必须新鲜 -70℃可保存数月,避免反复冻融 存在个体差异, 三只以上血清混合使用 3.CH50检测方法 判定标准与计算 标准:选择溶血程度与50%溶血的标准管相近的两管,以溶血程度最接近标准管的那一管定为终点管 计算:CH50(U/ml)=(1/血清用量)×稀释倍数 参考范围:50-100 U/ml 4.临床意义 CH50主要检测的是经典途径的补体溶血活性,所反映的主要是补体9种成分的综合水平 测定值过低或完全无活性,首先考虑补体缺陷,可分别检测血清中C4、C2、C3、C5等单个成份的含量

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1.何谓免疫?举例说明免疫的三大功能及功能异常的表现。 免疫:机体对“自己”或“非己”的识别,并排除“非己”以保持体内环境稳定的一种生理反应。免疫对机体的影响具有双重性,当抗原性异物进入机体后,机体能识别“自己”或“非己”,并通过特异性免疫应答,排除非己的抗原性异物,对自身物质不发生免疫应答而形成免疫耐受。 主要发挥如下三种功能:(1)免疫防御:机体防御外来病原生物的抗感染免疫,但异常情况下免疫反应过分强烈可引起超敏反应,或免疫功能过低则表现为易受感染或免疫缺陷病。(2)免疫稳定:或称免疫自身稳定,正常情况下机体对自身组织成分不发生免疫反应,处于自身耐受状态。此功能失调可导致自身免疫性疾病。(3)免疫监视:体内细胞在增殖过程中,总有极少数由于种种原因而发生突变,这种突变的或异常的有害细胞可能成为肿瘤,机体的免疫功能可识别并清除这些有害细胞。此功能失调可导致肿瘤的发生或持续的病毒感染。 2.TD-Ag与TI-Ag引起的免疫应答有何特点。 TD-Ag:胸腺依赖性抗原,刺激B细胞产生抗体过程中需T细胞的协助,既有T细胞决定簇又有B细胞决定簇,绝大多数蛋白质抗原属于此。 TI-Ag:胸腺非依赖性抗原,刺激B细胞产生抗体时不需要T细胞的协助,而且产生的抗体主要是IgM,不引起细胞免疫应答,也无免疫记忆。TD-Ag与TI-Ag的主要特性比较 组成细胞辅助免疫应答抗体类型免疫记忆TD-Ag B和T细胞表位必需体液和细胞免疫多种有 TI-AgT 重复B细胞表位无需体液免疫IgM 无 3.试述Ig的基本结构、各功能区的功能及Ig的生物学活性。 Ig的基本结构是由四条对称的多肽链构成的单体。单体包括两条相同的分子量较大的重链和两条相同的分子量较小的轻链。重链间及重、轻链间有二硫键相连形成对称结构。免疫球蛋白分子的各条肽链按其结构特点可分为可变区和恒定区,可变区在Ig近N端轻链的1/2和重链的1/4或1/5范围内,其氨基酸组成及序列变化较大,其中变化最为剧烈的特定部位称为超变区,除超变区之外的部位氨基酸组成及排列相对保守,通常称为骨架区。Ig近C端在L链的1/2及H链的3/4或4/5区域内,氨基酸组成在同一物种的同一类Ig中相对稳定,称恒定区。 生物学活性:(1)特异性结合抗原(2)激活补体(3)通过与细胞Fc受体结合发挥生物效应(4)选择性传递(5)具有免疫原性 Ig的功能区及其功能:(1)VH、VL:是Ig特异性识别和结合抗原的功能区,该区也是Ig分子独特型决定簇的存在部位。(2)CH、CL:具有Ig部位同种异型的遗传标记。(3)IgG的CH2和IgM的CH3:与补体经典途径的激活有关。(4)CH3/CH4:具有与多种细胞FcR结合的功能,不同的Ig在结合不同的细胞时可产生不同的免疫效应。(5)铰链区:位于CH1和CH2之间,富含脯氨酸,对蛋白酶敏感,不易形成α螺旋,易伸展弯曲,由此可与不同距离的抗原表位结合,使补体结合点得以暴露。 4.试比较三条补体激活途径的主要差异。 区别点经典途径MBL途径旁路途径 激活物抗原抗体复合物炎症期产生的蛋白某些细菌、LPS、凝聚的IgA和IgG4 参与的补C1~C9、C2~C9、丝氨酸C3、C5~C9 体成分蛋白酶、MBL B因子、D因子、P因子 C3转化酶C4b2b C4b2b C3bBbP C5转化酶C4b2b3b C4b2b3b C3b n Bb 作用参与特异性体液参与非特异性免疫,参与非特异性免疫 免疫的效应阶段在感染早期发挥作用在感染早期发挥作用 5.HLA-I、II类分子的结构、分布及功能有哪些不同? HLA抗原类别分子的结构分布功能 HLA--I α链和β2m所有有核细胞表面识别和提呈内源性抗原肽与辅助受体CD8结合,对CTL的识别引起限制作用 HLA--II α链和β链APC、活化T细胞识别和提呈外源性抗原肽与辅助受体CD4结合,对Th的识别引起限制作用 6.简述T细胞亚群分类及其功能。 根据T细胞表面分化抗原的不同,将其分为CD4+T细胞和CD8+T细胞:①CD4+T细胞的表型为CD2+CD3+CD4+CD8-,识别抗原受MHCⅡ类分子限制,包括Th0、Th1、Th2三个亚型。Th0细胞是Th1和Th2细胞的前体细胞,被抗原激活后可分泌IL-2、4、5和IFN-γ等细胞因子,调节体液免疫和细胞免疫应答。活化的Th0细胞在以IL-12为主的细胞因子作用下,增殖分化为Th1细胞,后者释放IL-2、IFN-γ、TNF-β等细胞因子,使局部组织产生以淋巴细胞和单核吞噬细胞浸润为主的慢性炎症反应或迟发型超敏反应。活化的Th2细胞在以IL-4的细胞因子作用下增殖分化为Th2,后者释放IL-4、IL-5、IL-6、IL-10等细胞因子,诱导B细胞增殖与分化,合成和分泌抗体,引起体液免疫应答或速发型超敏反应。②CD8+T细胞的表型为CD2+CD3+CD4-CD8+, 识别抗原受MHC-Ⅰ类分子限制,包括Tc和Ts细胞。Tc细胞是介导细胞免疫的效应T细胞,其TCR 能特异性识别靶细胞,通过细胞裂解和细胞凋亡而杀伤靶细胞。Ts细胞能释放IL-10、TGF-β、IFN-γ等细胞因子而下调体液免疫或细胞免疫应答。7.试述APC对外源性抗原和内源性抗原的提呈过程。 1、外,(1)外源性抗原的摄取(2)外源性抗原的加工处理(3)MHC-II分子的生物合成,转运与荷肽(4)外源性抗原的递呈 2、内,(1)内源性抗原的加工(2)内源性抗原的肽的转运(3)MHC-I类分子荷肽(4)内源性抗原肽的递呈 8.试试述单核-巨噬细胞主要的生物学功能。 (1)非特异吞噬杀伤作用:吞噬和杀灭病原微生物和处理清除损伤及衰老的细胞,发挥非特异性免疫功能。受刺激活化后产物如下:毒性物质如过氧化氢(H2O2)、氧离子(O2-)和一氧化氮(NO)等;抗微生物肽如防御素,阳离子蛋白;酶类,辅助杀伤被吞噬的微生物。 (2)抗原递呈作用:摄取、处理抗原并递呈给T细胞识别,使T细胞活化,介导特异性免疫应答。 (3)免疫调节作用:巨噬细胞吞噬抗原活化后,可合成分泌多种细胞因子:IL-1、IL-6、IL-8、IL-12和TNF-α。可介导炎症性反应;活化NK 细胞和促进Th1细胞分化等。 9.简述B细胞对T D抗原的免疫应答过程。 (1)B细胞对TD抗原的识别(2)Th细胞对B细胞应答的辅助(3)B细胞的激活增殖和终末分化(4)抗体发生体液免疫应答作用 10.比较CTL细胞、ADCC效应和NK细胞杀伤靶的机理有何不同? ADCC全称为抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用。是指表达Fc受体的细胞通过识别抗体IgG的Fc段直接杀伤被抗体包被的靶细胞。具有ADCC 效应的细胞主要有巨噬细胞、NK细胞及中性粒细胞。这是一类由特异性抗体与非特异性细胞协同作用的细胞外非吞噬性的杀伤机制,即抗体与靶细胞上的抗原结合是特异性的,而表达FcR的细胞其杀伤作用是非特异性的。 ①

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第一章 免疫:免疫是机体识别和排除抗原性异物的过程,以维持机体的生理平衡。在多数情况下对机体是保护性的生理反应,但是一定条件下可以导致免疫性病理损伤,引起超敏反应和自身免疫病等。 免疫系统的功能有哪些? 1.免疫防御 2.免疫自稳 3.免疫监视 4.免疫调节 人工主动免疫和人工被动免疫的区别? 区 别 点 人工主动免疫 人工被动免疫 免疫物质 接种次数 免疫力出现时间 免疫力维持时间 用途 抗原 1 ~ 3 次 慢(2 ~ 4 周) 长(数月~数年) 多用于预防 抗体或细胞因子 1 次 快(立即出现) 短(2 ~ 3 周) 用于治疗或应急预防 天然免疫与获得性免疫的区别? 第二章 重点: 造血干细胞的基本分化途径 中枢与外周免疫器官的种类和主要免疫功能 淋巴细胞再循环的免疫学意义 名词解释:次级滤泡: 淋巴细胞归巢:成熟淋巴细胞离开中枢免疫器官后,经血液循环趋向性迁移并定居于外周免疫器官或组织的特定区域,称淋巴细胞归巢。 淋巴细胞再循环:淋巴细胞在血液、淋巴液、淋巴器官和组织间周而复始循环的过程。 M 细胞:是一种特化的抗原转运细胞,其顶部胞质较薄,核位于基底部,细胞基底部质膜内陷形成一个较大的穹窿状凹腔,内含多个淋巴细胞、M ф和DC 。 简答题 胸腺微循环的组成及其作用? 胸腺微循环组成:胸腺基质细胞,局部活性物质,细胞外基质 作用:在胸腺细胞分化过程的不同环节均发挥重要的调节作用,1分泌胸腺激素和细胞因子 2与胸腺细胞相互接触 免疫器官的组成及其免疫中的主要作用?

中枢免疫器官包括: 骨髓: 1.造血器官;各种免疫细胞的发源地2.B细胞发育、分化、成熟的场所3.体液免疫应答发生的场所 胸腺: 1.T细胞分化成熟的场所2.免疫调节功能3.形成对自身抗原耐受性4.屏障作用 法氏囊: 外周免疫器官:淋巴结:过滤淋巴液,具有免疫活性的T、B细胞移居和接受抗原刺激后发生免疫应答的重要场所 脾脏:最大的淋巴器官,具造血、贮血和过滤作用,也是成熟T、B细胞移居和抗原刺激后发生免疫应答的重要场所 粘膜免疫系统: 淋巴细胞再循环的生物学意义? 1.淋巴细胞在外周免疫器官和组织分布更合理; 2.淋巴组织可不断从循环池中得到新的淋巴细胞补充,有利于增强机体免疫功能; 3.通过再循环,增加了T、B与抗原、APC接触机会; 4.通过再循环,使机体免疫器官与组织相互联系构成一个有机整体,能使B、T细胞和记忆细胞很快的分布到全身的组织器官。 第三章免疫细胞 重点:T淋巴细胞的表面分子及其作用、T淋巴细胞亚群及其功能 B 淋巴细胞的表面分子及其作用、B淋巴细胞亚群、B淋巴细胞功能 专职抗原提呈细胞各自的特点以及它们如何处理和提呈抗原、并启动获得性免疫应答 一、名词解释 免疫活性细胞(ICC):在免疫应答过程中起核心作用的是淋巴细胞,其中接受抗原刺激后能发生特异性免疫应答的淋巴细胞称为抗原特异性淋巴细胞或称免疫活性细胞(ICC),即T和B细胞 抗原提呈细胞:抗原提呈细胞(APC)是能摄取、加工处理抗原,并将抗原信息提呈给T细胞的一类免疫细胞。 抗体依赖性细胞介导的细胞毒(ADCC)作用:是指表达Fc受体的细胞通过识别抗体的Fc段直接杀伤被抗体包被的靶细胞。 二、简答题 简述T细胞发育成熟过程中为什么必须经历阳性选择和阴性选择? 阳性选择:双阳性细胞表面的CD4和CD8分子与胸腺皮质上皮细胞表面的MHC-II类或MHC-I类分子发生有效结合时,该细胞就被选择而继续发育分化为具有TCR的CD4+或CD8+的单阳性细胞(SP),而未能结合的双阳性细胞,则发生凋亡而被清除。 通过阳性选择,可使表型为TCR+、CD2+、CD3+、CD4+或TCR+、CD2+、CD3+、CD8+的单阳性细胞获得识别抗原肽-MHC-II类分子或I类分子复合物的能力,这也是T细胞作用受MHC限制的原因。 阴性选择:经阳性选择后存活的单阳性细胞与胸腺皮髓交界处的巨噬细胞和树突状细胞表面表达的MHC-II 类或MHC-I类分子/自身抗原肽复合物高亲和力结合时,即被诱导凋亡或失能,反之,才能继续分化发育成为具有识别非己抗原能力的T细胞。 简述T和B细胞表面标志及其功能? T细胞的表面标志:T细胞的表面标志就是它的膜蛋白(各种表面受体、表面抗原),是T细胞与其他免疫细胞相互作用,接受信号刺激并产生应答的物质基础,也是鉴别和分离T细胞的重要依据。 1.T细胞抗原受体(TCR):是T细胞特异性识别抗原的受体蛋白,它与CD3分子以非共价键结合形成TCR-CD3复合体,功能上:TCR负责识别APC或靶细胞表面的抗原肽-MHC分子复合物,所产生的信号由CD3分子进行传递。 2. 细胞因子受体(CKR)又称白介素受体:白介素受体(interleukins)是免疫细胞和非免疫细胞产生的一类能够介导白细胞和其它细胞间相互作用的细胞因子。

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