培养基配制安排

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培养基的配制

培养基的配制

培养基的配制:由粉针车间按大豆胰蛋白胨每30g加1L纯化水的比例配制培养基(每批分装应>3000瓶,每瓶灌装5ml,每批至少配制18L-19L培养基)。

培养基:乳糖=5ml:1g 在百级下用规格为50ml的无菌针管分装8.2.1调整分装机步数,使分装装量为1.0g,分装于灭菌后的管制瓶中。

8.2.2在无菌分装室百级层流罩下,把准备好的无菌培养基用无菌注射器(规格为5ml)分装到各管制瓶中,每瓶分装5ml,然后加塞,轧盖。

8.2.3阴性对照:在模拟分装过程的前、中、后段,随机抽取10支装有培养基的管制瓶与试验样品同条件培养一起培养,作为阴性对照。

8.2.4阳性对照:在模拟分装过程的前、中、后段,随机抽取10支分装有培养基的管制瓶,其中5支接种浓度<100cfu/ml的枯草芽孢杆菌液,另5支接种浓度<100cfu/ml 的白色念珠菌液,作为阳性对照。

培养基的配制:由粉针车间按大豆胰蛋白胨每30g加1L纯化水的比例配制培养基(每批分装应>3000瓶,每瓶灌装5ml,每批至少配制18L-19L培养基)。

培养基:乳糖=5ml:1g 在百级下用规格为50ml的无菌针管分装8.2.1调整分装机步数,使分装装量为1.0g,分装于灭菌后的管制瓶中。

8.2.2在无菌分装室百级层流罩下,把准备好的无菌培养基用无菌注射器(规格为5ml)分装到各管制瓶中,每瓶分装5ml,然后加塞,轧盖。

8.2.3阴性对照:在模拟分装过程的前、中、后段,随机抽取10支装有培养基的管制瓶与试验样品同条件培养一起培养,作为阴性对照。

8.2.4阳性对照:在模拟分装过程的前、中、后段,随机抽取10支分装有培养基的管制瓶,其中5支接种浓度<100cfu/ml的枯草芽孢杆菌液,另5支接种浓度<100cfu/ml 的白色念珠菌液,作为阳性对照。

培养基的配制:由粉针车间按大豆胰蛋白胨每30g加1L纯化水的比例配制培养基(每批分装应>3000瓶,每瓶灌装5ml,每批至少配制18L-19L培养基)。

培养基配制的过程和注意事项

培养基配制的过程和注意事项

培养基配制的过程和注意事项一、培养基配制的基本步骤1. 材料准备:首先,需要准备培养基所需的各种原料和试剂。

常用的培养基原料包括蛋白胨、葡萄糖、琼脂等。

此外,还需要准备适量的水和试剂的称量工具。

2. 称量试剂:按照配方中的比例,准确地称取所需的试剂。

在称量过程中,应注意保持实验环境的清洁,并使用洁净的称量工具,以避免试剂受到污染。

3. 溶解试剂:将称取好的试剂溶解于适量的水中。

在溶解过程中,可以通过搅拌或加热的方式促进试剂的溶解。

溶解完毕后,应检查溶液的透明度和均匀性,确保试剂充分溶解。

4. 调整pH值:根据具体的培养基配方,使用酸碱溶液调整培养基的pH值。

通过逐滴加入酸碱溶液,并经过搅拌均匀,逐步调整pH 值至所需范围。

在调整pH值的过程中,应注意避免过度调节,以免对培养细胞产生不良影响。

5. 加热消毒:将配制好的培养基加热至沸腾,保持沸腾状态持续5-10分钟,以达到消毒的目的。

在加热过程中,应注意避免溢出和烧焦,同时要保持试剂的充分混合。

6. 灭菌冷却:将消毒完毕的培养基冷却至适宜的温度,通常为45-50摄氏度。

在冷却过程中,应避免引入环境中的微生物污染,可使用无菌工作台或灭菌过滤器进行操作。

7. 分装保存:将冷却好的培养基分装到无菌培养皿或试管中,并密封保存。

在分装过程中,要注意避免试剂接触到外界空气,以防止污染。

二、培养基配制的注意事项1. 实验环境要保持清洁,操作过程要注意无菌操作,以避免试剂受到污染。

2. 在配制过程中,应准确称取试剂的质量,并按照配方中的比例进行配比,以保证培养基的质量和配方的准确性。

3. 在试剂溶解和调整pH值时,应充分搅拌均匀,确保试剂充分溶解和均匀混合。

4. 加热消毒时,应注意控制加热时间和温度,以避免试剂烧焦或溢出。

5. 冷却过程中,要避免污染和细菌的侵入,可使用无菌工作台或灭菌过滤器进行操作。

6. 培养基的分装要在无菌条件下进行,并尽快密封保存,避免试剂受到外界空气和微生物的污染。

培养基的配制

培养基的配制

培养基的配制培养基是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。

一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。

培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。

1. 成分配方转换—在容器中加入少量水(蒸馏水、天然水)—按配方称各种药物(依次添加)—加入足够的水(一药一勺,服完药后立即盖上瓶子)。

2. 解散淀粉溶解:少量的冷水进粘贴琼脂融化温度为95-97℃,加热时需搅拌以防烧焦。

3.调整pH值用1n盐酸或1n氢氧化钠将培养基调至所需值。

4. 过滤滤纸或棉。

(有时可以省略)5. 分装一般在烧瓶或试管中灭菌。

(1)三角瓶静态培养时,100ml培养基/ 250ml烧瓶的最大值不应超过150ml 培养基/ 250ml否则,在灭菌过程中,培养基的煮沸极易污染棉塞,造成细菌污染;如果进行瓶培养,15-20ml培养基/ 250ml三角瓶应通风良好。

(2)试管包装液体培养基通常填充4-5ml,约为试管高度的1 / 4;一般固体斜培养基为3-4ml,约为试管高度的1 / 5。

6. 用绷带包扎包装完毕后,塞好棉塞,用牛皮纸包好棉塞,防止灭菌时湿气进入,弄湿棉塞。

7. 灭菌高压蒸汽灭菌按照配方中要求的温度和压力进行。

如果灭菌温度过高,营养成分就会被破坏培养基中的糖和氨基酸会使培养基的颜色变深。

8. 斜灭菌后,需要倾斜的试管应在加热过程中倾斜放置,使其固化成一个斜坡,约占试管长度的1 / 2。

9. 存储中可以使用不污染被放置在30℃后一天。

通常用牛皮纸包好,置于2-8℃冰箱中保存。

各种培养基配方

各种培养基配方

146种培养基配方1、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨5g氯化钠10g琼脂15~20gpH 7.0~7.2水1000mL2、2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)可溶性淀粉20g硝酸钾1g氯化钠0.5g磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼脂20g水1000mLpH 7.2~7.4配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000mL。

121℃灭菌20min。

查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH 自然121℃灭菌20min。

4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红(rose100mLbengal,玫瑰红水溶液)琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。

临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30μg。

5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖)20g琼脂15—20gpH 自然培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。

121℃灭菌30min。

6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:(1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15℃阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。

(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。

加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

实验室常用培养基的配制方法

实验室常用培养基的配制方法

实验室常用培养基的配制方法Ampicillin(氨卡青霉素)(100 mg/ml)组份浓度100 mg/ml Ampicillin配制量50 ml配制方法 1.称量5 g Ampicillin置于50 ml离心管中。

2.加入40 ml灭菌水,充分混合溶解后,定容至50 ml。

3.用0.22 µm过滤膜过滤除菌。

4.小份分装(1 ml/份)后,-20℃保存。

IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)(24 mg/ml)组份浓度24 mg/mL IPTG配制量50 mL配制方法 1.称1.2 g IPTG置于50 ml离心管中。

2.加入40 ml灭菌水,充分混合溶解后,定容至50 ml。

3.用0 22 µm过滤膜过滤除菌。

4小份分装(1 ml,份)后,-20℃保存。

X-Gal (20 mg/ml)组份浓度20 mg/ml X-Gal配制量50 ml配制方法 1.称量l g X-Gal置于50 ml离心管中。

2.加入40 ml DMF(二甲基甲酰胺),充分混合溶解后,定容至50 ml。

3.小份分装(1 ml/份)后,-20℃避光保存。

LB培养基组份浓度1%(W/V)Tryptone(胰蛋白胨),0.5%(W/V)Y east Extract(酵母提取物),1%(W/V)NaCl配制量1 L配制方法3.滴加5 N NaOH(约0.2 m1),调节pH值至7.0。

4.加去离子水将培养基定容至1 L。

5高温高压灭菌后,4℃保存。

组份浓度配制量1L配制方法 1.配制磷酸盐缓;中液(0.17 M KH2PO4,0.72 M K2HPO4)100 ml。

溶解2.31 g KH2PO4和l2.54 g K2HPO4于90 ml的去离子水中,搅拌溶解后,加去离子水定容至100 ml,高温高压灭菌。

4.加去离子水将培养基定容至1 L后,高温高压灭菌。

5.待溶液冷却至60℃以下时,;加入100 ml的上述灭菌磷酸盐缓冲液。

培养基配方及配置

培养基配方及配置

培养基配方及配置
一般来说,培养基的配方包含基础培养基、添加剂和调节剂。

基础培养基是指提供生物体基本生长必需的基本成分,包括能源物质、有机和无机原料、氮源、矿质元素和缓冲物质等。

常用的基础培养基有
LB培养基、MS培养基等。

添加剂是指用于满足特定实验需求的成分,如抗生素、抗菌剂、激素、维生素等。

添加剂的种类和浓度根据实验目的的不同而有所差异。

调节剂是指用于调节培养基pH值、渗透压、表面张力等物理化学性
质的成分,如缓冲液、pH调节剂等。

以下是一个常用的细菌培养基LB的配方及配置:
1.基础培养基成分:
- 水:900ml
-蛋白胨:10g
-酵母提取物:5g
-NaCl:5g
2.添加剂:(可根据实验需求进行必要的添加)
- 抗生素(如氨苄青霉素):100μg/ml
- 抗菌剂(如氯霉素):25μg/ml
3.配制方法:
-将蛋白胨、酵母提取物和NaCl加入水中,并搅拌混合均匀。

- 将培养基溶液倒入容量瓶中,加水至1000ml,并混合均匀。

-调节pH值至7.0-7.2(一般使用缓冲液进行调节)。

-用自制滤纸过滤器滤过,将溶液分装至培养皿或试管中。

-如需添加抗生素或抗菌剂,将相应的药物加入培养基中,并充分溶解。

-培养基装瓶后可以高温高压灭菌,或使用滤器过滤进行无菌处理。

以上是一个简单的LB培养基的配方和配置流程,不同实验需要可能
会有所调整和变化。

在设计培养基配方时,需要结合具体实验目的和生物
体的特性来确定合适的成分和浓度,并注意配制和保管过程中的无菌操作,以确保培养基的质量和有效性。

常用培养基配制方法

常用培养基配制方法

常用培养基配制方法:(1)基础盐培养基(MSM):(NH4)2SO42.0g,MgSO4·7H2O0.2g,CaCl2·2H2O 0.01g,FeSO4·7H2O0.001g,Na2HPO4·12H2O1.5g,KH2PO41.5g,蒸馏水1000 mL。

(2)LB培养基:蛋白胨10g,酵母提取物5g,氯化钠5g,蒸馏水1000 mL,pH7.5。

(3)高氏合成1号培养基:硝酸钾1g,磷酸氢二钾0.5g,硫酸镁0.5g,氯化钠0.5g,硫酸亚铁0.01g,可溶性淀粉20g,蒸馏水1000mL。

(4)查彼氏培养基:硝酸钠2g,氯化钾0.5g,硫酸镁0.5g,磷酸氢二钾1g,硫酸亚铁0.01g,蔗糖30g,蛋白胨0.5g,蒸馏水1000mL。

(5)马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA):马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂20 g,蒸馏水1000mL。

将无病马铃薯洗净去皮切碎,加蒸馏水1000mL,煮沸0.5 h,纱布过滤,滤液加蒸馏水补足1000mL,再加入葡萄糖,然后分装三角瓶灭菌备用。

(6)铵察氏琼脂培养基:氯化铵2g,氯化钾0.5g,硫酸镁0.5g,磷酸氢二钾1g,硫酸亚铁0.01g,蔗糖30g,蛋白胨0.5g,琼脂20g,蒸馏水1000 mL。

(7)克氏合成1号琼脂培养基:磷酸氢二钾1g,碳酸镁0.3g,氯化钠0.2 g,硝酸钾1g,硫酸亚铁0.01g,碳酸钙0.5g,葡萄糖20g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。

(8)葡萄糖天门冬素琼脂培养基:葡萄糖10g,天门冬素0.5g,磷酸氢二钾0.5g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。

(9)葡萄糖酵母膏琼脂培养基:葡萄糖10g,酵母膏10g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。

(10)瓦氏肉汁琼脂培养基:蛋白胨5g,葡萄糖10g,牛肉膏10g,氯化钠5g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。

(11)淀粉琼脂培养基:可溶性淀粉10g,碳酸镁1g,磷酸氢二钾0.3g,氯化钠0.5g,硝酸钠1g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。

各种培养基配方范文

各种培养基配方范文

各种培养基配方范文培养基是一种用于微生物培养的基础物质,能够为微生物提供所需的营养和环境条件。

不同的微生物在其生长过程中需要不同的养分和环境条件,因此培养基的配方需要根据微生物的需求来进行调整。

下面是几种常见的培养基配方。

1.大肠杆菌液体培养基配方:-蛋白胨或复合氮源:10g-酵母浸出物:5g-葡萄糖:1g-NaCl:5g-K2HPO4:2g-MgSO4:0.2g-pH调节至7.0后加水至1000mL2.牛心提取物琼脂糖培养基配方:-牛心提取物:3g-高级琼脂糖:15g-葡萄糖:10g-NaCl:5g-pH调节至7.0后加水至1000mL3.玉米浸出物琼脂糖培养基配方:-玉米浸出物:4g-高级琼脂糖:15g-酵母浸出物:1g-NaCl:5g-pH调节至7.0后加水至1000mL4.LB琼脂糖培养基配方:-液体LB培养基:10mL-高级琼脂糖:15g-NaCl:5g-pH调节至7.0后加水至1000mL 5.血寒养基配方:-羊血:50mL-肉浸出物:3g-酵母浸出物:3g-肉汤培养基:1L-红细胞素:5g-高级琼脂糖:3g-pH调节至7.0后加水至1000mL6.厌氧培养基配方:-肉浸出物:5g-酵母浸出物:5g-NaCl:5g-蒸馏水:900mL- 加入0.1%的L-cysteine:10mL-pH调节至7.0后用氮气替换空气注意事项:-培养基中的成分应严格按照配方比例加入,并保持无菌。

-配制好的培养基需要高温高压灭菌以保证无菌。

-不同的微生物可能对一些成分非常敏感,需要根据实际情况进行微调。

-培养基的pH值应根据微生物环境要求进行调整,一般在7.0左右。

-配好的培养基应存放在4℃的冰箱中,避免阳光直射以防止成分分解。

这只是一些常见的培养基配方,不同的微生物有不同的需求,可以根据具体的情况进行配方的调整。

在实际使用中,还需要根据微生物的特性和实验目的来选择合适的培养基。

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实验6-9所需材料
实验6 (6人一组),材料在上实验五时配制
每个组所需材料:
6个平板;
1瓶90ml无菌水,用三角瓶盛放,内放8-10个玻璃珠;
5支9ml的无菌水试管;
1包培养皿(6套)
1ml的移液管6支。

实验七所需材料在上实验五时配制
每个组所需材料
牛肉膏蛋白胨培养基斜面:6支(用于大肠杆菌和枯草杆菌,每个菌种为3支,1支直线、2支波浪线接种);
牛肉膏蛋白胨液体培养基:试管装,4支;
牛肉膏蛋白胨液体培养基:试管装,4支。

注:免去了马丁氏培养基和高氏1号培养基斜面。

实验八所需材料在上实验七时配制
每组所需材料
淀粉培养皿:3个;
明胶试管:6个;
菌种:枯草杆菌和大肠杆菌
实验九所需材料在上实验七时配制
每组所需材料
2个三角瓶:内放培养基
10个试管:内放培养基
6个平皿
实验五培养基的制备(40人以上)
1组:牛肉膏培养基300ml,固体,装20个试管,剩下的装入1个三角瓶;
2组:牛肉膏培养基300ml,固体,装20个试管,剩下的装入1个三角瓶;
3组:牛肉膏培养基400ml,固体,分装30个试管,剩下的状1个三角瓶;
4组:高氏1号固体培养基,300ml,分装到2个三角瓶中,每个150ml(4,6组备用)
5组:马丁氏固体培养基,300ml,分装到2个三角瓶中,每个150ml(5,7组备用)
6组:牛肉膏液体培养基,300ml,分装到30个试管中(整个班用);
7组:牛肉膏半固体培养基,300ml,分装到30个试管中(整个班用);
注:所配制的牛肉膏试管斜面中,包括老师接菌种所用斜面。

每个组还需要:
1瓶90ml无菌水,三角瓶盛放,玻璃珠8-10个;
5支9ml的无菌水,试管盛放;
1包培养皿(6套)
6支1.0ml的移液管
棉塞:2个大的,6个小的;
实验五培养基的制备(30人左右)
1组:牛肉膏培养基250ml,固体,装14个试管,剩下的装入1个三角瓶;2组:牛肉膏培养基250ml,固体,装14个试管,剩下的装入1个三角瓶;;3组:牛肉膏培养基250ml,固体,装14个试管,剩下的装入1个三角瓶;4组:高氏1号固体培养基,150ml,分装到1个三角瓶中(4,6组备用)5组:马丁氏固体培养基,150ml,分装到1个三角瓶中(5,7组备用)
6组:牛肉膏液体培养基,300ml,分装到30个试管中(整个班用);
7组:牛肉膏半固体培养基,300ml,分装到30个试管中(整个班用);
注:所配制的牛肉膏试管斜面中,包括老师接菌种所用斜面。

每个组还需要:
1瓶90ml无菌水,三角瓶盛放,玻璃珠8-10个;
5支9ml的无菌水,试管盛放;
1包培养皿(6套)
6支1.0ml的移液管
棉塞:2个大的,6个小的;
农学院(4个班,生科3个班)
实验五培养基的制备(40人左右)
1组:牛肉膏培养基150ml,固体,装20个试管
2组:牛肉膏培养基150ml,固体,装20个试管
3组:牛肉膏液体培养基,200ml,分装到14个试管中4组:牛肉膏液体培养基,200ml,分装到14个试管中5组:牛肉膏半固体培养基,200ml,分装到14个试管中6组:牛肉膏半固体培养基,200ml,分装到14个试管中。

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