葡萄糖钳夹技术

3. 分别在两侧上肢静脉留置穿刺针，以生 理盐水维持通道，以备抽血及输注20% 葡萄糖。
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高葡萄糖钳夹操作流程 2
4.分别于-30，-15，0分钟留取基础血 样后，一侧上肢置于一温度为50°C， 湿度为70%的恒温箱中以获得动脉化 的静脉血样，另一侧静脉通道用于 输注20%葡萄糖。
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高葡萄糖钳夹操作流程 3
葡萄糖钳夹技术的建立与应用
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钳夹技术
高葡萄糖钳夹技术
高胰岛素正葡萄糖钳夹技术
DeFronzo RA,Tobin JP,Andres R.Am J Physiol,1979,237:E214-S223
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相关背景知识
糖尿病是高度异质性疾病， 目前认为主要是由于胰岛素 抵抗合并胰岛B-细胞分泌胰 岛素缺陷或B-细胞分泌缺陷 伴或不伴胰岛素抵抗引起。
受试者应排除肝肾疾病。 试验前三天，受试对象每日至少进食250克以上
碳水化学物，维持体重稳定。
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主要试剂
1、葡萄糖液：50%。 2、葡萄糖液：10%。 3、氯化钠溶液：0.9%。
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高葡萄糖钳夹操作流程 1
1. 配备20%葡萄糖液：可在10%葡萄糖液 中加入50%葡萄糖混合配制。
2. 令受试者排空小便后仰卧于床，整个实 验过程中保持清醒安静状态。
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一 原理及应用 1
通过持续输注外源性胰岛素 和葡萄糖，抑制内源性肝糖 产生和胰岛素分泌，达到外 源性胰岛素-葡萄糖代谢平衡 状态后，评价个体内胰岛素 对葡萄糖代谢的作用程度， 也就是胰岛素的敏感性。
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二 实验仪器
1. 输液泵一台。 2. 注射泵一 台。 3. 快速血糖测定仪一台。 4. 温度控制仪一台。 5. 多功能计时秒表两个。
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高葡萄糖钳夹技术 的建立与应用
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原理及应用 1
通过输注外源性葡萄糖使血糖浓度较空 腹状态迅速升高,并在一定时间内维持相 对平稳的高糖状态。在这种持续的高糖 状态下，可以观察到胰岛素在糖刺激后 的快速分泌相（第一相），以及随后出 现的与高糖持续时间一致的第二相分泌， 并能测定稳态下机体最大的分泌胰岛素 的能力，从而能完整的评估胰岛B细胞的 储备和分泌胰岛素的功能。
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实验物品
1、输液管（输液泵专用）。 2、三通管3个。 3、连接管2条。 4、静脉留置针2个。 5、针筒：1ml，5ml，60ml针筒各若干个。
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受试者准备
试验前晚8点钟后禁食，可少量饮水，早晨8点 到实验室，排空小便后仰卧。
试验前，将试验的性质、目的以及可能产生的不 良反应告知受试对象，并填写知情同意书。
1.计算第一时相胰岛素分泌（first-phase insulin release,1PH）：
1PH =∑Ins(2,4,6,8,10 mins). 2.计算第二时相胰岛素分泌（second-phase insulin
release,2PH）；
2PH=∑Ins（20-150 mins）/14 3 . 最 大 胰 岛 素 分 泌 量 （ maximum
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五 受试者准备：
1. 试验前三天，受试对象每日至少进食 250克以上碳水化学物，维持体重稳定。
2. 试验前晚8点钟后禁食，可少量饮水， 早晨8点到实验室，排空小便后仰卧。
3. 试验前，将试验的性质、目的以及可能 产生的不良反应告知受试对象，并填写 知情同意书。
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三 实验物品
1. 输液管（输液泵专用）。 2. 三通管4个。 3. 连接管2条。 4. 静脉留置针2个。 5. 针筒：1ml，5ml，60ml针筒各若干个。 6. 胰岛素针管（BD笔）。
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四 主要试剂：
1. 葡萄糖液：50%。 2. 葡萄糖液：10%。 3. 氯化钠溶液：0.9%。 4. 人正规胰岛素。
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原理及应用 2
同时由于大部分的内源性葡萄糖生 成被抑制，外源性葡萄糖的输注率 即被认为是组织葡萄糖的利用率， 通过计算可以得到胰岛素敏感性指 数，其与评价胰岛素敏感性的“金 标准”-----高胰岛素正葡萄糖钳夹的 相关性较好。
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实验仪器：
1、输液泵一台。 2、快速血糖测定仪一台。 3、温度控制仪一台。 4、多功能计时秒表两个。
5. 20%葡萄糖的输注分两个阶段：第一阶 段为初始剂量阶段，使血糖在14分钟内 升 高 7 . 9 mmol/L， 其 具 体 的 输 注 率 按 DeFronzo提供的体表面积经验值及实际 操作中每2分钟测得的血糖值调节。第二 阶段为维持剂量阶段，葡萄糖输注率以 实验15-150分钟内每5分钟测得的血糖值 根据负反馈原则调节，并记录调节时间。
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高葡萄糖钳夹操作流程4
6. 标本采集；于，测定胰岛素。每30分钟 取血一次测定胰高糖素。实验结束后收 集实验过程中的尿液，测定尿糖含量。
7.留取部分实验中输注的葡萄糖液测定精 确的葡萄糖浓度。
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结果处理 1
一） 评价B细胞功能：
secretion,INS120-150）: INS120-150=∑Ins（120-150 mins）/4
insulin
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结果处理 2
二） 评价胰岛素敏感性： 1.葡萄糖输注率（INF，mg/kg/min）:根据
输液泵调节情况及个体体重校正实际葡 萄糖浓度后计算。 2.空间校正值（SC，mg/kg/min）： 是对实 际血糖变化时葡萄糖空间充溢或不足的 情况加以校正。
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结果处理 3 二） 评价胰岛素敏感性
4.尿糖（UC，mg/kg/min）：实验过程中尿 糖的排出量。
5 . 葡 萄 糖 代 谢 率 （ M，mg/kg/min）： M=INF-SC-UC
6. 胰 岛 素 敏 感 性 指 数 （ SI）：SI=M120150/I120-150*100
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高胰岛素正葡萄糖钳夹技术 的建立与应用
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如何评价胰岛素抵抗？
1. 高胰岛素正葡萄糖钳夹技术。（可 重复性好，最精确。）
2. 微小模型法（MMT）。 3. 各种简易指数。
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如何评价B-细胞功能?
葡萄糖刺激的胰岛素分泌： 高葡萄糖钳夹、最小模型法、IVGTT、 OGTT
非糖物质刺激： 胰高糖素试验、精氨酸试验、甲苯磺丁脲
B-细胞产生的非胰岛素肽类： C-肽、胰淀素。