过碘酸-Schiff染色法与苏丹黑B双重染色在肌病诊断中的应用
过碘酸-雪夫反应

过碘酸-雪夫反应一、正常血细胞的染色反应1、粒细胞系统分化差的原粒细胞阴性,分化好的原粒细胞至中性分叶核粒细胞均呈阳性反应,并随着细胞的成熟,阳性反应程度逐渐增强,阳性呈细颗粒、均匀红色;嗜酸性粒细胞中的嗜酸性颗粒本身不着色,而颗粒之间的胞质呈红色;嗜碱性粒细胞中的嗜碱性颗粒呈阳性,而颗粒之间的胞质不着色。
2、红细胞系统幼红细胞及红细胞均呈阴性。
3、单核细胞系统分化差的原单细胞呈阴性,其他阳性,绝大多数阳性呈细颗粒,有时分布于细胞边缘的阳性颗粒较粗大。
4、淋巴细胞系统大多数淋巴细胞系统的细胞呈阴性,少数淋巴细胞呈阳性(阳性率常小于0.20),阳性呈粗颗粒状或块状。
5、巨核细胞系统巨核细胞系统的细胞(包括血小板)呈阳性,阳性呈颗粒状或块状。
6、其他细胞浆细胞一般呈阴性,少数呈阳性,呈细颗粒状;巨噬细胞可阳性,呈细颗粒状。
二、临床意义1、红细胞系统疾病红血病、红白血病、骨髓增生异常综合征中幼红细胞可阳性(呈均匀红色或块状),有时幼红细胞阳性反应强且阳性率高,甚至红细胞也呈阳性。
在某些红系良性疾病,如缺铁性贫血、地中海贫血中幼红细胞也可呈阳性,有时阳性率也较高;巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血等中幼红细胞常呈阴性,有时个别细胞可呈阳性。
2、白细胞系统疾病主要用于辅助鉴别急性白血病的细胞类型等作用,因为不同细胞类型的急性白血病其阳性反应可不同。
急性淋巴细胞白血病时原淋及幼淋巴细胞的阳性率升高,呈粗颗粒状或块状;急性粒细胞白血病时少数原粒细胞呈阳性,阳性呈细颗粒状或均匀红色;急性单核细胞白血病时原单及幼单细胞可呈阳性,阳性呈细颗粒状、弥散分布,有时胞质边缘处颗粒较粗大。
慢性淋巴细胞白血病时淋巴细胞的阳性率增加,呈粗颗粒状或块状;恶性淋巴瘤时淋巴瘤细胞阳性率高、阳性强,呈块状或粗颗粒状。
3、其他细胞戈谢细胞呈强阳性,尼曼-皮克细胞呈阴性或弱阳性;巨核细胞强阳性,Reed-Sternberg细胞阴性或弱阳性;骨髓转移性腺癌呈强阳性。
过碘酸雪夫染色法

过碘酸雪夫染色液说明书【产品名称】过碘酸雪夫染色液【包装规格】货号:DG0005单瓶包装规格分别为:100ml、250ml、500ml;每套/盒包装规格分别为:4×20ml/盒、4×100ml/盒、4×250ml/盒、4×500ml/盒。
【预期用途】用于组织细胞学染色从而定性检测组织切片中的糖原、粘多糖。
【检验原理】过碘酸雪夫染色主要用于糖原的染色,是病理学中常规的染色方法之一,McManus在1946年最先使用过碘酸(又称高碘酸)-雪夫技术显示粘蛋白,该染色法不仅能够显示糖原还能显示中性粘液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。
过碘酸是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛与雪夫(Schiff)试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色,过碘酸雪夫染色液主要用组织细胞学糖原和霉菌的染色。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、过碘酸溶液过碘酸2、雪夫(Schiff)试剂品红3、苏木素染色液苏木素4、酸性乙醇分化液乙醇【储存条件及有效期】2℃~8℃冷藏保存(有效期内可在-20~2℃或2~35℃温度范围7天内短时运输),原包装未开封染色液的有效期为12个月,在有效期内的已开封染色液建议在开封后3个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
【样本要求】组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】1、常规固定,切片常规包埋;2、蒸馏水洗数分钟,然后自来水冲洗,入蒸馏水浸洗;3、入过碘酸溶液,室温放置;4、自来水冲洗,入蒸馏水浸洗;5、入雪夫(Schiff)试剂,置于室温阴暗处浸染;5、流水冲洗,甩去多余水分;6、入苏木素染色液,接着染细胞核,然后用酸性乙醇分化液分化;8、冲洗,更换蒸馏水清洗,使其返蓝;9、逐级常规乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
【检验方法的局限性】仅限于病理组织内容物染色观察。
过碘酸-Schiff(PAS)染色方法的改良及其在病理诊断中的应用

过碘酸-Schiff(PAS)染色方法的改良及其在病理诊断中的应用祁珊珊【期刊名称】《临床与实验病理学杂志》【年(卷),期】2016(032)007【总页数】2页(P825-826)【关键词】PAS;染色;改良;病理【作者】祁珊珊【作者单位】峡西理工大学维生素D生理与应用研究所病理室,汉中723000【正文语种】中文【中图分类】R361.2PAS作为一种特殊染色技术最早发现于1946年,该技术最早仅用于生物化学,后经不断改进,广泛应用于临床生化、组织化学及病理诊断中。
PAS染色不仅能显示糖原,而且还能显示中性黏液性物质以及软骨、脑垂体、霉菌、脂质、色素、淀粉样物质及基膜等,广泛应用于人体和实验动物组织的诊断和研究。
PAS染色过程中关键染液的配制方法及氧化时间等对染色效果影响较大。
本实验室经过反复试验,对影响其染色效果的因素加以总结分析,并做相应的调整和改进,染色效果较为满意,现介绍如下。
1.1 实验动物健康成年SD大鼠6只,由西安交通大学实验动物中心提供。
1.2 取材与固定 CO2麻醉处死大鼠,取十二指肠(标本大小不超过1.0 cm×1.0 cm)固定于3.7%多聚甲醛溶液中4 ℃保存,固定24 h后梯度乙醇脱水,二甲苯透明,常规石蜡包埋。
1.3 试剂配制 (1)多聚甲醛溶液:取3.7 g多聚甲醛至80 ml PBS(0.1 mol/L,pH 7.4)中加热至60 ℃,边加热边搅拌,同时滴加1 mol/L NaOH至溶液透亮,自然冷却后用0.1 mol/L的PBS定容至100 ml。
(2)1%过碘酸水溶液:过碘酸1 g,蒸馏水100 ml,溶解后避光贮存于4 ℃冰箱,临用前取出,待溶液温度达室温时使用。
(3)Schiff试剂的配制:所需试剂为1 N盐酸20 ml,碱性品红1 g,活性炭2 g,亚硫酸氢钠1 g,蒸馏水200 ml。
先将蒸馏水加热煮沸后,去火加入碱性品红,置于磁力搅拌器使其充分溶解;待溶液冷却至50 ℃时过滤,再加入适量盐酸;冷却至25 ℃时加入亚硫酸氢钠。
PAS染色法

PAS染色法—概况、原理PAS染色法概况PAS染色法(P eriodic A cid-S chiff stain)在组织学上,主要用来检测组织中的糖类。
过碘酸把糖类相邻两个碳上的羟基氧化成醛基,再用Schiff试剂和醛基反应使呈现紫红色。
PAS染色法原理PAS染色又称过碘酸雪夫染色,糖原染色。
一般用来显示糖元和其它多糖物质。
原理:过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛,再与Schiff氏液的无色品红结合,红色,定位于胞浆上。
PAS染色法—应用、制作PAS染色法—应用随着医学实验技术的发展,近年来,糖原染色应用的范围更加广泛,如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质,心肌病变及其他心血管疾病的诊断,糖原累积病诊断和研究,糖尿病的诊断和研究,用于某些肿瘤的诊断等。
除用于糖原的鉴定和黏液的显示外,还可以观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞中性黏液物质、阿米巴滋养体和霉菌的着色。
临床诊断、分类和治疗提供了重要的依据.PAS染色法-制作1. 固定液:用Carnoy液或75%酒精Carnoy固定液:纯酒精60 ml冰醋酸10ml氯仿30ml2. 染色液1)过碘酸酒清夜配法: 过碘酸(HIO .2H O)0.4g95%酒精35ml M/5醋酸钠(2。
72g+蒸馏水100ml)5ml蒸馏水10ml。
保存于冰箱内,用棕色瓶,可用两周.2)Schiff氏液:0.5克碱性品红加入100毫升蒸馏水中,时时摇动三角瓶5分钟,使之充分溶解。
冷却至50℃后过滤,加入10毫升1N盐酸。
冷却至25℃,加入0.5—1克偏重硫酸钠,在室温中至少静置24小时,然后密封冰箱保存。
3)Schiff氏酒精液配置Schiff氏液11.5ml1N HCI 0。
5ml纯酒精23ml4) 亚硫酸水1%偏重亚硫酸钠10ml1N HCI 10ml蒸馏水180ml的树胶溶解。
PAS染色法-实验效果准备1、10g/L过碘酸液2、Schiff染液:碱性品红0.5g ,DH2O 100ml煮沸后,待片刻,加入碱性品红,振荡数分钟使品红溶解,冷至50℃加入1M的盐酸20ml,混匀。
医院检验中心苏丹黑B染色操作规程

医院检验中心苏丹黑B(SBB)染色操作规程[原理]苏丹黑为一种能溶解于脂肪中的色素。
因此可使细胞内的中性脂肪、碘脂和类固醇着色。
[试剂](1)40%福尔马林。
(2)苏丹黑B备用液,取苏丹黑B粉剂0,68溶于200ml纯酒精中,用研钵慢慢研溶,并在室温下搁置1。
2天,待充分溶解,可冰箱保存1年。
苏丹黑B也可用苏丹黑代替。
(3)缓冲液,苯酚16g加纯酒精30m1,碘酸氢二钠(Na:HPO12HIO)0.38,加蒸馏水100m1,将两份溶液相混而制成,可保存1年。
(4)染色液,以苏丹黑B备用液30m1,缓冲液20ml,两液混合后过滤配成,可保存数周。
[操作](1)血片或骨髓片干后,用福尔马林蒸气固定10分钟(或直接染色)。
(2)浸入苏丹黑B染液中37℃水浴30、60分钟。
(3)求出后立即用70%酒精洗片约10秒钟,水洗。
(4)自然干燥,瑞氏染液复染20。
30分钟。
[结果观察]阴性:胞浆内无棕色颗粒。
弱阳性:细小、分布稀硫的棕黑色颗粒。
强阳性:颗粒粗大,呈黑色,充满整个细胞,常盖到核上。
[临床意义](1)本试验与POX反应平行。
POx染色要求涂片新鲜,而苏丹黑B染色则无此要求。
临床意义与POX染色相似或能相互弥补。
(2)尼曼-匹克细胞及高雪细胞的苏丹黑B染色均呈阳性反应。
[附注](1)苏丹黑B备用液和缓冲液可保存放长时间,但要避光,并密封。
以减少蒸发。
染色液用后放盐水瓶中加盖保存。
染色欠理想时,应及时更换。
(2)70%酒精冲洗时,时间不能太长,否则会将阳性颗粒脱去。
(3)冬天或从冰箱取出的染色液应先放37℃水浴预温5分钟后,再进行涂片染色。
(4)骨髓制片要厚薄得当。
太厚的涂片会影响细胞的观察。
(5)放置时间较长的涂片,应选用SBB染色,不宜作POX染色,因脂类较稳定存在于细胞中。
医学检验·检查项目:苏丹黑B染色_课件模板

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相关症状: 粪便黑色并带有血液、血液粘滞度增高、 血液改变、血液粘度增高、胎盘血液灌注 不良、白血病细胞浸润。
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相关疾病:
慢性粒细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白 血病、急性白血病、急性腹型-高脂血症 综合征、高血脂、白血病性咽峡炎、急性 淋巴细胞性白血病、小儿成人型慢性粒细 胞白血病、小儿类白血病反应、小儿雅克 什综合征、原发性混合型冷球蛋白血症性 血管炎、原发性高脂蛋白血症与黄瘤增生 病、Ⅰ型免疫母细胞性淋巴腺病
医学检验·各论 苏丹黑B染色 内容课件模板
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简介:
SBB染色在鉴别白血病类型,尤其在 帮助鉴别急性非淋巴细胞白细胞与急性淋 巴细胞白细胞时较POX更敏感。苏丹黑是 一种脂溶性染料,可将细胞中的中性脂肪、 磷脂及胆固醇等脂类染成棕黑色颗粒,定 位于胞质內。
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临床意义: 与POX染色相似,但比POX染色更敏感。
对急性白血病的鉴别值更大。
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正常值: 阳性产物为黑色或蓝黑颗粒定位于胞
浆中。
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相关检查: 醋酸AS-D茶酚脂酶染色、阿利新蓝染色、 胶体铁染色、特异性脂酶染色、碱性磷酸 酶染色、过氧化酶染色。
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相关疾病: 人类T淋巴细胞病毒感染、类白血病反应。
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糖原染色(Schiff法)

糖原染色(Schiff法)1. 实验原理过碘酸是氧化剂,使含有乙二醇基(-CHOH—CHOH)的多糖类物质(糖原粘多糖、粘蛋白、糖蛋白及糖脂等)氧化,形成双醛基(—CHO—CHO)。
醛基与雪夫试剂中的无色品红结合,使无色的品红变成紫红色化合物,定位于含有多糖类的细胞内。
2. 标本采集2.1 病人准备:了解病人是否对局麻药有过敏史。
凝血因子严重缺陷引起的出血性疾病,穿刺部位有炎症或有畸形,晚期妊娠妇女作骨髓穿刺时要慎重。
2.2 标本种类:新鲜抽取的骨髓穿刺液2.3 标本采集要求2.3.1 高压消毒的穿刺针,一次性无菌手套和抽取骨髓液的无菌注射器。
2.3.2 临床上首选穿刺部位为髂后上棘;翻身困难,需多部位穿刺患者可选择髂前上棘为穿刺部位。
小于3岁的小儿还可选择胫骨头内侧为穿刺部位。
3. 标本储存:滴加固定液盖满血膜5分钟,水洗待干室温避光保存。
4. 标本运输:室温运输5. 标本拒收的标准:溶血、稀释标本不能作测定6. 试剂6.1 试剂名称:血细胞PAS染色测定6.2 试剂生产厂家:xx生物技术公司6.3 试剂组成试剂1:PAS固定液,10%甲醛甲醇溶液。
2℃-8℃避光保存,有效期六个月。
试剂2:PASⅠ液,10g/L(1%)过碘酸溶液。
2℃-8℃避光保存,有效期六个月。
试剂3:PASⅡ液,又称Schiff氏液。
2℃-8℃避光保存,有效期六个月。
试剂4:苏木素复染液。
2℃-8℃避光保存,有效期六个月。
7. 操作步骤7.1 涂片滴加固定液5-8滴,盖满血膜即可,5分钟,水洗待干。
7.2 滴加Ⅰ液10分钟,水洗待干。
7.3 置入Ⅱ液内室温(20~25℃左右为宜)暗处放置30分钟,然后流水冲洗数分钟。
7.4 苏木素复染1~2分钟,水洗待干,镜检。
8. 结果判断8.1 阳性结果—细胞内出现红色沉淀物,定位于胞质。
8.2 阴性结果—细胞内无红色沉淀物。
9. 临床意义9.1 粒细胞系统自早幼粒阶段以下均可呈阳性,且随细胞分化而加强。
肾活检用Schiff试剂的配制及保存

肾活检用Schiff试剂的配制及保存孙璟;杨剑辉【摘要】肾活检全称为肾穿刺活体组织检查法,目前临床常用的方法是在B超引导下,利用穿刺枪从肾脏获取微量肾脏标本后,在显微镜下观察肾组织学变化.它能对许多肾脏病的诊断、治疗以及预后评估提供重要的依据,其价值是其它血、尿检验所不能替代的,现已成为肾内科常做的一项重要检查.过碘酸-Schiff(PAS)特殊染色在肾穿刺活检病理中主要用于显示肾小球系膜区的范围和基膜的厚度,也可显示肾小球内某些渗出性蛋白、节段性硬化和结节性病灶.因此在该病理诊断中起着非常重要的作用,但是由于PAS染色常常受到各种因素的影响,在实际工作中常存在Schiff 试剂难以配制且配制好后保存易失效的问题.通过反复实践,笔者总结了一些经验体会,取得了较好的染色效果,现报告如下.【期刊名称】《实用医药杂志》【年(卷),期】2011(028)012【总页数】2页(P1067-1068)【关键词】PAS;肾活检;染色;因素分析【作者】孙璟;杨剑辉【作者单位】250031山东济南,456医院肾内科;250031山东济南,456医院肾内科【正文语种】中文【中图分类】R692.34肾活检全称为肾穿刺活体组织检查法,目前临床常用的方法是在B超引导下,利用穿刺枪从肾脏获取微量肾脏标本后,在显微镜下观察肾组织学变化。
它能对许多肾脏病的诊断、治疗以及预后评估提供重要的依据,其价值是其它血、尿检验所不能替代的,现已成为肾内科常做的一项重要检查。
过碘酸-Schiff(PAS)特殊染色在肾穿刺活检病理中主要用于显示肾小球系膜区的范围和基膜的厚度,也可显示肾小球内某些渗出性蛋白、节段性硬化和结节性病灶。
因此在该病理诊断中起着非常重要的作用,但是由于PAS染色常常受到各种因素的影响,在实际工作中常存在Schiff试剂难以配制且配制好后保存易失效的问题。
通过反复实践,笔者总结了一些经验体会,取得了较好的染色效果,现报告如下。
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显示 , 女性 5 以前 、 性 5 以前同性别 各年龄组 间 比较 , O岁 男 5岁
差异无统计学意义 , 说明侗族女性 5 O岁后 , 男性 5 岁后 骨量丢 5 失 的速度 和幅度 明显增 加 。Y 检验 表明 , 女性 5 O岁 以上 , 男性
6 O岁以上的骨量减少 检 出率增 加 ; 随着 年龄 的增 长 , 激素水 平 下 降、 胃功能减退等 , 吸收和利 用能 力下 降, 代谢呈 负平 肠 钙 骨
[ ] 潘海林 , 4 苏宏业 , 黎英荣 , 广西 南宁地 区成年 女性骨 密度与 年 等.
龄关 系的研究 口 . ] 广西医科大学学报 ,0 7 2 ( ) 848 5 2 0 ,4 6 :8—8 . [ ] 柏根基 , 5 崔建 和 , 士军. 安地 区健康 人群 跟骨 超声调 查研 究 杨 淮
[] 中国骨质疏松杂志 ,0 6 1 () 2 02 1 J. 2 0 ,2 3 :7 —7 .
普 遍不足 , 的摄 入量偏 少 , 能是侗 族 峰值 骨量 偏低 的主要 钙 可
原因 。
[ ] 薛延 , 6 李瑾 , 张海文 , 北京市 区 7 7 跟骨定 量超 声测定结 果 等. 0例
( eidcai c i , AS , p r i c shf P ) 是一 种常用 的糖原 染色 方法 ; 丹 o d 苏 黑 B是常用脂 肪染 色方法之一 。笔者 尝试将这 2种染色方法 在 同一 张切 片上 先后 进行染 色 , 实验结 果表 明 , 方法可行 、 结果满 意; 并且给观察提供方便 。
( 辑 : 会龙 ) 编 黄
过碘 酸一c i 染 色 法与 苏丹 黑 B双 重染 色在 肌 病诊 断 中的应 用 S hf f
高美钦 张 文敏 晋 雯
( 福建 医科 大学基础 医学 院病理学 系 , 福州 3 00 ) 50 4
在肌病病 理诊 断过程 中 , 骨骼 肌活检 标本冰 冻切 片进行 对 H- E染色后 , 观察时发现有空泡现象的组织切片 , 除排除冰 晶以 外, 一般考虑是否有糖原 累积或脂质沉积 , 需要分别 进行糖原染 色与脂肪染色 , 以做进 一步 的鉴别 诊断 。过碘 酸一c i 染 色 法 S hf
C N S U N LO N T MY V 13 o 12 1 HI E EJ R A FA A O o.5N . 0 2 O
解剖学杂志
2 1 年第 因此 , 5 对 O岁后 的中老年人 , 应积极 采
3 讨 论
取适 当措施防止骨质疏松 。
的分 析[] 中国骨质疏松杂志 ,0 0 6 1 :65 . J. 2 0 , () 5 —9
本研究结果显示 , 江侗族 女性 5 三 O岁后 , 性 5 后 , 男 5岁 随 着年龄的增长 , 、 男 女性 的 B UA值 均呈 增龄性 降低 , 对男 、 性 女
跟骨 B UA值进行方差分析表 明 , 差异有统计 学意 义 ; 两两 比较
京、 淮安等地 区[ ] 三江侗 族 的居 住地 多 为重 峦叠 嶂 山 区, 5 , 日 照时 间相 对较短 , 农村 的主食 以大米 、 玉米为 主 , 类 的摄 取量 奶
[ ] 李伟 , 3 吴桐 , 张勤 , 成都 市城市 居 民跟骨超声 结果 的分析 [ ] 等. J.
四川 医学 ,0 7 2 ( ) 5 96 1 2 0 ,8 6 :9—0 .
参 考 文 献
峰值骨量是个体 在生命 中所 达到 的最大 骨量值 , 一般 在青 壮年时期达到高峰 , 以后随年龄增加 , 骨量开 始逐 渐丢失 。许 多 研究表明峰值骨量的大小存在明显 的性别 和地 区差异[ 。本 次 2 ]
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密度分布情况 调查 分 析 [ ] 中 国骨 质疏 松 杂 志, 0 8 1 ( ) J. 20 , 4 4 :
2 6 2 9 6 -6 .
岁 年龄组 。三 江侗 族峰值 骨 量年龄 分 布 与 国内其他 地 区 的文 献 报道有所不 同[ ]可 能与检测部位 、 3, 检测 仪器 、 抽样 方法 、 样 本 数量及年龄 组跨度 不 同有关 。本研 究 骨量 峰值 结果 低 于北
调查结果显示 , 三江侗 族男性 各年龄 组的 B A值 均高 于女性 , U
男性 B UA峰值为 (9 5 士6 9 ) bMHz 出现在 3  ̄3 6.1 .0 d/ , 5 9岁年
龄组 , 女性 B UA峰 值为 (2 8 ±8 4 ) b MHz出现在4  ̄4 6.3 .5d/ , 0 4
1 材 料 和 方 法
1 1 组 织切 片 .
煮 5mi, n 移开火源冷却至 5 ℃ , 0 加入 1 lL盐酸 1 , / mo 0 混匀 ; ml 待冷却 至 3 ℃ , 入偏 重亚 硫酸 钠 1g 摇匀 。避光 冷藏 1 ~ 5 加 , 2 2 , 4 溶液变为土黄色时 , 活性碳 2g 摇匀 过滤 于洁净 的磨沙 h 加 , 口玻璃瓶 内, 严 。4 盖 ℃保存 。( ) 丹黑 B染液 : 7 %乙醇 3苏 于 O 1 0ml 0 中加 入苏丹黑 B 0 5g 加温 3 ℃溶解 , 冷却后 4 . , 7 待 ℃保