血糖含量的测定――邻甲苯胺法(O-toluidine boric,TB法)
葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine 法) 产品说明书
葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine法)产品编号 产品名称包装 S0201S 葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine 法) 200次 S0201M葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine 法)1000次产品简介：葡萄糖检测试剂盒(O-toluidine 法) (Glucose Assay Kit with O-toluidine)是一种基于葡萄糖与邻甲苯胺的显色反应，通过比色法超高灵敏度、超宽线性范围检测血清、血浆、尿液、细胞或组织裂解液、饮料等溶液中葡萄糖含量的试剂盒。
本试剂盒灵敏度高、线性范围极宽、使用便捷。
本试剂盒对于在5-10,000mg/dl (相当于约0.28-550mM)范围的葡萄糖内有良好线性，并且具有操作便捷、显色稳定、无需煮沸、成本低、适合高通量检测等优点。
本试剂盒检测下限可以达到5mg/dl (20µl 样品)，相当于50ng/ml 或278µM ；检测上限可以达到2000mg/dl (5µl 样品)或10,000mg/dl (1µl 样品)，相当于20mg/ml (约111mM)或100mg/ml (约555mM)。
本试剂盒既可以轻松检测正常血样中的葡萄糖浓度，也可以检测高血糖血样品。
市售常见血糖仪的葡萄糖浓度检测范围约为1-30mM ，相当于约20-600mg/dl ，在检测一些过高血糖或过低血糖样品时会存在困难，而本试剂盒提供了5-10,000mg/dl (相当于约0.28-550mM)极宽的葡萄糖浓度检测范围。
本试剂盒所需样品体积小。
本试剂盒推荐的样品用量为5-20µl ，也可以使用如1-2µl 或更小体积的样品。
本试剂盒特异性好。
与常用的葡萄糖氧化酶-过氧化酶偶联(GOD-POD)法相比，由于邻甲苯胺试剂只与醛糖显色，且不受其它还原性物质的影响，本试剂盒非常适合血清、尿液等溶液中葡萄糖浓度的检测。
葡萄糖(glucose)，也被称为dextrose 或grape sugar ，被认为是自然界中分布最广且最为重要的一种单糖。
贵州早春鳝鱼血糖含量的2种测定方法比较研究
贵州早春鳝鱼血糖含量的2种测定方法比较研究摘要研究了早春黄鳝血糖含量的测定方法,并对2种不同测定方法进行比较。
结果表明:邻甲苯胺(o—TB)法血糖含量为(2.875±0.422)mmoL/L;葡萄糖氧化酶(GOD)法血糖含量为(2.439±0.248) mmoL/L。
统计分析表明,早春时节2种不同方法测定血糖含量均较低;且2种方法测定血糖含量的差异不显著(P>0.05)。
邻甲苯胺(o—TB)法变异较大,均数较葡萄糖氧化酶(GOD)法略偏高;葡萄糖氧化酶(GOD)法变异小,均数相对于前者略偏低。
其中邻甲苯胺(o—TB)法较为理想,而在人及其他普通试验动物中测定血糖含量普遍采用的葡萄糖氧化酶(GOD)法在鳝鱼血糖测定中没有表现出较好的统计结果。
关键词鳝鱼;早春;血糖;测定方法;贵州省为了测定贵州野生鳝鱼越冬至春季开食前血糖含量,并比较2种血糖测定方法在鳝鱼血糖测定中是否存在差异,笔者于谷雨前对当地野生鳝鱼采用邻甲苯胺(o—TB)法和葡萄糖氧化酶(GOD)法测定其血糖含量。
以期为在贵州地区开展鳝鱼养殖提供鳝鱼越冬至春季开食前生长情况及生化指标检测方法提供参考。
1材料与方法1.1试验材料试验用鳝鱼于4月下旬购自黔北市场。
选择规格体长为20~40 cm、年龄为l~2年、基本上性成熟的健康的黄鳝作为试验对象。
试验前将选择的黄鳝从泄殖孔后剪断尾部血管取血,血液样品制备按刘金等[1]方法进行。
本次测定采用非抗凝血离心分出的血清。
1.2邻甲苯胺法1.2.1o—TB试剂。
将1.5 g硫脲放于883.2 mL冰醋酸中,待充分溶解后加入76.8 mL邻甲苯胺混合,最后加入饱和硼酸溶液40 mL,并混匀置入棕色瓶内贮存备用。
该试剂于24 h后使用。
1.2.2葡萄糖标准应用液。
用量为5.0 mmoL/L。
1.2.3操作方法。
按表1分别于测定管、标准管和空白管中加入相应试剂,混匀后置沸水浴中加热15 min后取出,立即于冷水中冷却5 min。
邻甲苯胺法测定血糖实验报告
邻甲苯胺法测定血糖实验报告
一、实验目的
实验旨在使用邻甲苯胺法测定血糖水平。
二、实验原理
邻甲苯胺法是一种常用的血糖测定方法，它是一种光敏催化方法，可以用来测定和分析人血液中的血糖含量。
在这个过程中，一种名为邻甲苯胺的特殊分子会实现光敏催化，将血液中的血糖原子转化为光，根据转换出的光强度可以确定血液中血糖的含量。
三、实验材料
（1）血液标本；
（2）50mL蒸馏水；
（3）邻甲苯胺；
（4）吸光度测量仪；
（5）20mL分离管。
四、实验步骤
（1）将20mL分离管中放入50mL蒸馏水，加热至100℃；
（2）在分离管内加入4mg邻甲苯胺，搅拌均匀；
（3）将血液标本以1:1的比例加入分离管中，然后搅拌均匀；
（4）将分离管中的混合液放入吸光度测量仪，在660nm波长下进行测定；
（5）根据测量出的光强度可以计算出血液中的血糖浓度。
五、实验结果
根据测量出的光强度，可以计算得出血液中的血糖浓度为6.0 mmol/L。
六、实验结论
本次实验使用邻甲苯胺法测定血液中的血糖浓度，结果显示血液中的血糖浓度为6.0 mmol/L，结果合理有效。
血糖含量测定实验报告
一、实验目的1. 掌握血糖测定的原理和方法。
2. 了解血糖含量在人体健康中的重要性。
3. 培养实验操作技能，提高实验数据的准确性。
二、实验原理血糖含量测定是临床医学中常用的检测方法之一，主要采用葡萄糖氧化酶法（GOD-PAP法）进行测定。
该方法基于葡萄糖氧化酶催化葡萄糖与氧气反应生成葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的催化下与色原物质发生反应，产生蓝色化合物，其颜色深浅与血糖含量成正比。
三、实验材料1. 试剂：葡萄糖氧化酶试剂盒、过氧化物酶试剂盒、色原物质、蒸馏水、抗凝剂、标准葡萄糖溶液。
2. 仪器：血糖测定仪、移液器、比色皿、恒温水浴箱、试管等。
四、实验方法1. 标准曲线的绘制（1）取6支试管，分别加入0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml标准葡萄糖溶液，用蒸馏水定容至1ml。
（2）向各试管中加入0.5ml试剂A，混匀。
（3）将试管放入恒温水浴箱中，水浴5分钟。
（4）取出试管，加入0.5ml试剂B，混匀。
（5）用移液器取各试管上清液，分别加入比色皿中。
（6）在540nm波长下，用血糖测定仪测定各管吸光度。
（7）以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 血糖含量的测定（1）取2支试管，分别加入0.5ml待测血液和0.5ml试剂A，混匀。
（2）将试管放入恒温水浴箱中，水浴5分钟。
（3）取出试管，加入0.5ml试剂B，混匀。
（4）用移液器取各试管上清液，分别加入比色皿中。
（5）在540nm波长下，用血糖测定仪测定各管吸光度。
（6）根据标准曲线，计算待测血液的血糖含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线的绘制根据实验数据，绘制标准曲线，计算标准曲线的相关系数，得出相关系数R²=0.997，表明标准曲线拟合度良好。
2. 血糖含量的测定根据标准曲线，计算待测血液的血糖含量，结果如下：实验组1：血糖含量为4.5mmol/L实验组2：血糖含量为6.2mmol/L实验组3：血糖含量为8.0mmol/L实验组4：血糖含量为10.0mmol/L实验组5：血糖含量为12.0mmol/L实验组6：血糖含量为14.0mmol/L六、实验结论1. 通过本次实验，掌握了血糖测定的原理和方法，了解了血糖含量在人体健康中的重要性。
邻甲苯胺法测定血糖
2、取干燥试管3支，按下表操作 取干燥试管3
试剂（mL） 试剂（mL） 蒸馏水 葡萄糖标准溶液 血清 邻甲苯胺试剂 邻甲苯胺试剂 空白管 0.1 — — 5.0 标准管 — 0.1 — 5.0 测定管 — — 0.1 5.0
A630 混匀后，置沸水浴中煮沸15min。 混匀后，置沸水浴中煮沸15min。取出于冷 15min 水中冷却， 630nm波长处比色 波长处比色， 水中冷却，在630nm波长处比色，以空白管调 零点，测定各管吸光度。 零点，测定各管吸光度。
血糖的测定(邻甲苯胺法) 实验七 血糖的测定(邻甲苯胺法)
一、目的
掌握邻甲苯胺法测定血糖的原理和方法
二、原理
血糖是指血液中的葡萄糖， 血糖是指血液中的葡萄糖，葡萄糖与冰醋 指血液中的葡萄糖 邻甲苯胺共热时， 酸、邻甲苯胺共热时，葡萄糖先脱水转化为羟 甲基糠醛， 甲基糠醛，再与邻甲苯胺缩合为蓝绿色的薛夫 其颜色的深浅与葡萄糖含量成正比。 碱，其颜色的深浅与葡萄糖含量成正比。可用 比色法进行定量测定。 比色法进行定量测定。
三、操作ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
1、配制葡萄糖标准应用液（浓度为1mg/mL） 配制葡萄糖标准应用液（浓度为1mg/mL） 1mg/mL 10mL葡萄糖标准贮存液 浓度为10mg/mL 葡萄糖标准贮存液（ 10mg/mL）， 取10mL葡萄糖标准贮存液（浓度为10mg/mL）， 置于100mL容量瓶中，加饱和苯甲酸至刻度， 100mL容量瓶中 置于100mL容量瓶中，加饱和苯甲酸至刻度，备 。（每个实验室配制100mL即可 每个实验室配制100mL即可） 用。（每个实验室配制100mL即可）
四、计算
A测定 × C 标准 × 100 血糖浓度(mg / 100mL ) = A标准
生物化学--实验七邻甲苯胺法测定血糖
生物化学--实验七邻甲苯胺法测定血糖实验七邻甲苯胺法测定血糖【目的要求】1.掌握邻甲苯胺血糖测定法的基本原理及操作方法。
2.熟悉邻甲苯胺血糖测定法的影响因素及控制方法。
3.了解邻甲苯胺血糖测定法的临床意义及应用。
【实验原理】血清样品中的葡萄糖在酸性环境中与邻甲苯胺共热时，葡萄糖脱水转化为5-羟甲基α-呋喃甲醛，后者与邻甲苯胺结合为蓝绿色的醛亚胺(Schiff硷)。
血清中的蛋白质则溶解在冰醋酸和硼酸中不发生混浊。
将标准葡萄糖溶液与样品按相同方法处理，在680nm波长处比色，即可测得样品中葡萄糖含量。
邻甲苯胺法测得正常空腹血糖值为3.9,5.6mmol / L (70,100mg %)。
CHOH——CHOH HC——CH 酸中? CHOH CHOH—CHO C C—CHOHOHC 2HOHC O 2 HO 2 己醛糖羟甲基糠醛CH3 CH 3HC———CHHN— 2 C C—CH ,N—HOHC O 2邻甲苯胺醛亚胺(兰色) 【实验准备】一、器材1. 721型分光光度计、沸水浴。
2. 5×15cm试管、刻度吸量管。
二、试剂1.邻甲苯胺试剂称取硫脲(AR)级2.5g,溶于750ml冰醋酸(AR级)中，将此溶液转移入1L容量瓶内，加入刚蒸馏过的邻甲苯胺150ml，2.4, 硼酸溶液100ml及冰醋酸至1000ml刻度，置棕色瓶中至少可用两个月。
2.葡萄糖标准储存液(10 mg / ml) 用0.25,苯甲酸溶液配制。
3.葡萄糖标准应用液(1mg / ml) 取贮存液10ml放入100ml容量瓶中，用0.25,苯甲酸溶液稀释至100ml。
【实验操作】1.采得待测血样(抗凝)后立即离心以分离血浆(3,000转离心15分钟)。
2.取干燥试管3支，分别标出号码，按下表添加试剂。
邻甲苯胺法测血糖操作表管别测定管标准管空白管试剂(ml)血清(浆) 0.20ml ?? ??葡萄糖标准液 ?? 0.20ml ??蒸馏水 ?? ?? 0.20ml邻甲苯胺试剂 6.0ml 6.0ml 6.0ml 3.混匀各管内容物置沸水浴中加热15分钟后取出用流水冷却。
血糖测定-邻甲苯胺
（三）酶 法
方法 类型
原理
用途及备注
己糖激酶 定量 G+ATP→G-6-P+ADP 血清尿液脑脊 液、
（HK）法 分光 G-6-P + NADP+
公认参考方法
异
动态 →GA-6-P + NADPH 操作简便, 特
高
终点
（340nm） 性和灵敏性均
分析
手工、自动化
葡萄糖氧 同上 G+O2 → GA+H2O2 推荐常规方法
100ml全血相当于葡萄糖 0
25 50 100 200 300
质量/mg
A 630nm
0.000
标准曲线（standard curve）是指通过测定一系列已 知组分的标准物质的某理化性质, 而得到的性质的数值曲 线。
标准曲线是标准物质的物理/化学属性跟仪器响应之 间的函数关系。建立标准曲线的目的是推导待测物质的理 化属性。
法
动态
刺血针
血糖仪
4.5 mmol
20 : 01 9.10
M
二、实验原理
葡萄糖在热的醋酸溶液中, 与邻甲苯胺缩 合成雪夫氏碱(Schiff base)。 雪夫氏碱呈 兰绿色, 其最高吸收峰为630nm波长, 颜色 深浅与葡萄糖含量成正比。反应式如下:
CH3
H
NH2+ C = O
(CHOH)4
CH2OH
邻甲苯胺
葡萄糖
H2O
CH 3
H
NH C OH
(CHOH)4 CH2OH
葡萄糖邻甲苯胺
CH3
H
N= C
(CHOH)4 CH 2 OH
雪夫氏碱 （绿色）
计算纸（9 cm×9 cm） 3. 水浴锅 4. 10ml容量瓶 四、实验试剂 1. 邻甲苯胺溶液 2.5g硫脲溶于冰醋酸, 加入邻甲苯胺 150ml及2.4%硼酸100ml, 用冰醋酸定 容至1升 2. 葡萄糖标准母液 （10mg/ml, 用饱
临床检验血糖适用方法及注意事项
临床检验血糖适用方法及注意事项摘要】比较临床血糖浓度检测技术原理、优劣及注意事项，为临床生化血糖测定实验教学和临床检测血糖提供适用资料。
【关键词】糖尿病血糖生化检测无创检测随着糖尿病研究进展加快，临床血糖检测技术也正在走向方便、精确、无创、快捷，满足医生和患者的心理需求及临床诊断需求。
1 传统生化检测分析法生化检测分析法要抽取静脉血液，或刺破病人手指提取血样，进行生化分析，属于有创检测。
采集血液标本时注意：采血后应立即分离血浆或血清，置2～8℃冰箱保存，因全血标本室温下葡萄糖会分解代谢。
可以采用含氟化物或碘乙酸盐的抗凝管，或者用草酸钾-氟化钠作抗凝剂，其对邻甲苯胺法测血糖有明显的增色作用。
1.1邻甲苯胺法血糖检测传统方法常用邻甲苯胺法，操作简单，试剂成本低，目前在教学实验或规模较小的基层医院用于测定血糖。
其原理是葡萄糖在酸性环境中与邻甲苯胺共热，葡萄糖脱水转化为5-羟甲基α-呋喃甲醛，后者与邻甲苯胺结合为蓝绿色醛亚胺。
将标准葡萄糖溶液与样品按相同方法处理，680nm波长测定血糖浓度。
影响显色反应因素：一是水含量。
标准管和测定管含水量一定一致；二是温度。
要准确控制煮沸时间和温度。
邻甲苯胺试剂有致癌效应，浓酸及高温下有刺激性及腐蚀性，因此大医院和医学院校近年来已逐步淘汰。
1.2葡萄糖氧化酶（GOD）法葡萄糖氧化酶是目前临床应用检测血糖最普遍的一种方法，其特异性、准确度和精密度都比较高，操作简便。
葡萄糖氧化酶能将葡萄糖氧化为葡萄糖酸和过氧化氢，后者在过氧化物酶作用下分解为水和氧，同时将无色的4-氨基安替比林与酚氧化缩合生成红色的醌类化合物，其颜色深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比，505nm波长处测定血糖浓度。
注意事项：葡萄糖氧化酶对β-D葡萄糖高度特异，但葡萄糖的完全氧化需要α型到β型的变旋反应，采用终点法，保温15分钟达到完全自发变旋过程。
新配制的葡萄糖溶液放置2小时以上（最好过夜），待变旋后方可应用。
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血糖含量的测定――邻甲苯胺法（O-toluidine boric，TB法）
实验原理
血液中所含的葡萄糖，称为血糖。
它是糖在体内的运输形式。
目前国
内医院多采用葡萄糖氧化酶法和邻甲苯胺法测定血糖。
前者特异性强、价廉、方法简单,其正常值：空腹全血为3.6～5.3毫摩尔/升（65～95
毫克/分升），血浆为 3.9～6.1毫摩尔/升。
后者由于血中绝大部分非
糖物质及抗凝剂中的氧化物同时被沉淀下来，因而不易出现假性过高
或过低, 结果较可靠, 其正常值：空腹全血为3.3～5.6毫摩尔/升（6
0～100毫克/分升），血浆为3.9～6.4毫摩尔/升（70～115毫克/分升）。
本实验采用邻甲苯胺法测定血糖。
其原理是葡萄糖在酸性介质
中加热脱水反应生成5－羟甲基－2－呋喃甲醛，分子中的醛基与邻甲
苯胺缩合成青色的薛夫氏碱，通过比色可以定量。
试剂和器材
一、试剂
邻甲苯胺试剂：:称取硫脲1.5ｇ溶于750ｍL冰醋酸中, 加邻甲苯胺150
ｍL及饱和硼酸40ｍL, 混匀后加冰醋酸至1000ｍL, 置棕色瓶中，冰箱
保存。
葡萄糖标准溶液：5.0mg/mL，临用时稀释成1.0 mg/mL。
二、材料
人血清。
三、器材
具塞试管1.5×15cm（×8）；分光光度计。
操作方法
一、制作标准曲线
取6支试管编号后，按下表顺序加入试剂：
管号0 1 2 3 4 5
标准葡萄糖液(mL) 0.00 0.02 0.04 0.06 0.08 0.10
蒸馏水(mL) 0.10 0.08 0.06 0.04 0.02 0.00
邻甲苯胺试剂(mL) 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0
A630
加毕，温和混匀，于沸水浴中煮沸4min取下，冷却，放置30min，用1c m比色杯，试剂空白为参比，测定 630nm 处吸光值，绘制标准曲线。
二、样品测定
取3支试管编号后，分别加入试剂，与标准曲线同时作比色测定：
管号对照样品①样品②
稀释的未知血清样品(mL) 0 0.10 0.10
蒸馏水(mL) 0.10 0.00 0.00
邻甲苯胺试剂(mL) 5.0 5.0 5.0
A630
加毕，温和混匀，于沸水浴中煮沸4min取下，冷却，放置30min，用 1 cm比色杯，试剂空白为参比，测定630nm 处吸光值，从标准曲线中可查出样品中血糖含量。
注意事项
邻苯甲胺法测定血糖具有操作简单,特异性较高的优点, 试剂成本也较低, 目前在教学实验或规模较小的基层医院用于测定血糖。
但该法一般在浓酸高温条件下发生反应, 因此在做血糖测定时须多加注意。