激素对血糖浓度影响及血糖浓度的测定
实验十 胰岛素及肾上腺素对血糖浓度的影响
原理
胰岛素能降低血糖，肾上腺素能升高血糖 给动物注射胰岛素或肾上腺素
取注射前、后兔的静脉血，测定血糖含量 通过公式计算血糖改变百分率
血糖改变%= 注射后BS－注射前BS 注射前BS ×100%
原理
本实验是葡萄糖氧化酶 (GOD)和过氧化物 酶 (POD) 相偶联发生的偶联反应
注射激素
计算结果
注射激素和取血
计算注射剂量：胰岛素为0.75U/Kg体重， 肾上腺素为0.4mg/Kg体重； 皮下注射激素； 注射激素后取血，时间：肾上腺素30min， 胰岛素1h（心脏取血）； 采血后静置10min至血清析出； 3000r/min离心分离10min，吸取血清至新 的EP管中，做好标记。
葡萄糖＋ O2 ＋ H2O GOD 葡萄糖酸＋ H2O2
2H2O2＋4-氨基安替比林＋酚
POD
红色醌类化合物＋H2O
操作步骤
动物准备 称体重，重 的注射胰岛 素，轻的注 射肾上腺素 已准备 测定血糖 腹部皮下4 5°注射， 不要穿入 腹腔内脏 注射后 取血 作好标记 防止溶血
注射前 取血
加样要准 反应时间一致 505nm比色
注意事项
1. 腹部皮下注射 ，以45°进针，针头不要刺 入腹腔，更不要穿破皮肤注射到体外。
2. 最后加酶酚混合试剂，各管反应时间应一致。 3. 葡萄糖氧化酶法可直接测定脑脊液葡萄 糖含量，但不能直接测定尿液葡萄糖含 量
结果计算
血糖浓度(mmol/L)= A测定管 A标准管 ×C标准管
血糖改变%=
注射后BS－注射前BS
×100%
注射前BSቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
思考题
葡萄糖氧化酶法不能直接测定尿液葡萄糖
实验十一 激素对血糖浓度的影响
实验十一激素对血糖浓度的影响【目的】1.掌握血糖的测定原理及方法。
2.掌握血糖的正常范围及意义。
3.熟记胰岛素及肾上腺素对血糖浓度的影响并解释其作用机制。
【原理】人和动物体内的血糖浓度均维持在一定范围内。
这是由于体内存在多种激素及调节物质，在它们的共同作用下，使糖酵解、糖氧化、糖原合成与分解、糖异生、脂肪合成与分解等代谢途径协同进行。
胰岛素可通过以下几种途径降低血糖：①促进肌肉、脂肪细胞的载体转运葡萄糖人内；②抑制蛋白激酶A，继而使糖原磷酸化酶活性降低：激活糖原合酶脱磷酸酶，从而使糖原合酶活性升高，加速肌肉、肝脏的糖原合成；③通过第二信使间接激活丙酮酸脱氢酶，加速丙酮酸氧化脱羧生成乙酰CoA；④抑制磷酸烯醇式丙酮酸激酶活性，促进氨基酸进入肌肉合成蛋白质，从而降低糖异生；⑤抑制脂肪动员，促进糖有氧氧化。
肾上腺素的作用与胰岛素相反，起升高血糖的作用。
肾上腺素升高血糖的作用迅速而明显，它通过与肝和肌肉细胞膜受体结合而激活磷酸化酶，产生级联放大效应，从而加快糖原的分解、肝释放葡萄糖、肌肉输出乳糖供肝糖异生等，最终导致血糖升高。
本实验观察家兔在注射胰岛素和肾上腺素前后空腹血糖浓度的变化。
血糖含量的测定采用葡萄糖氧化酶法。
首先用钨酸钠及盐酸沉淀血清中的蛋白质，制备血滤液。
在葡萄糖氧化酶的催化作用下，血滤液中的葡萄糖被氧化成葡萄糖酸，并产生1分子过氧化氢；过氧化氢被偶联的过氧化物酶催化放出氧，氧将试剂中的4-氨基安替吡啉偶联酚(还原性氧受体)的酚氧化，生成红色的醌类化合物，其颜色深浅与葡萄糖的含量成正比，此溶液与经同样处理的标准葡萄糖溶液进行比色测定，即可求出血糖含量。
葡萄糖氧化酶葡萄糖——————>葡萄糖酸+H202过氧化物酶H20——————>H20+02O2+4-氨基安替吡啉偶联酚——————>醌类化合物（红色）葡萄糖氧化酶法测定血糖的特异性较高，能干扰测定结果的物质较少，如溶血样本血红蛋白浓度达lOg／L、黄疸样本胆红素浓度达342Um以及样本中所含的少量尿素、肌酐、甘油三脂等均不影响测定结果。
血糖试验实验报告
一、实验目的1. 掌握血糖测定的原理和方法。
2. 熟悉血糖正常范围及意义。
3. 理解胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响。
二、实验原理血糖是指血液中的葡萄糖，是人体细胞的主要能量来源。
血糖浓度受到胰岛素和肾上腺素等激素的调节。
胰岛素可以降低血糖，而肾上腺素则可以提高血糖。
本实验采用葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度，通过比较不同实验条件下血糖浓度的变化，了解胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响。
三、实验器材1. 仪器：血糖仪、葡萄糖氧化酶法试剂、试管、移液器、恒温水浴箱等。
2. 试剂：葡萄糖标准液、胰岛素、肾上腺素、生理盐水等。
四、实验步骤1. 标准曲线的绘制：将葡萄糖标准液分别加入试管中，按比例加入试剂，混合均匀，置于恒温水浴箱中反应一定时间。
然后测定各管中葡萄糖浓度，以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 实验组制备：将实验动物（如家兔）分为实验组和对照组。
实验组注射一定剂量的胰岛素，对照组注射等量的生理盐水。
两组动物在相同条件下饲养一段时间。
3. 血糖测定：分别从实验组和对照组动物体内采集血液，测定血糖浓度。
4. 肾上腺素影响实验：在实验组动物注射胰岛素后，再注射一定剂量的肾上腺素，重复步骤3，观察血糖浓度的变化。
五、实验结果1. 标准曲线绘制：根据实验数据绘制标准曲线，得出葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度的方法。
2. 实验组与对照组血糖浓度比较：实验组血糖浓度显著低于对照组，说明胰岛素可以降低血糖。
3. 肾上腺素影响实验：注射肾上腺素后，实验组血糖浓度显著升高，说明肾上腺素可以升高血糖。
六、实验分析1. 葡萄糖氧化酶法是一种准确、简便的血糖测定方法，适用于临床和科研。
2. 胰岛素可以降低血糖，这是胰岛素的主要生理作用。
胰岛素通过促进葡萄糖进入细胞，促进糖原合成，抑制糖原分解和糖异生，从而降低血糖。
3. 肾上腺素可以升高血糖，这是肾上腺素的主要生理作用。
肾上腺素通过抑制胰岛素分泌，促进糖原分解和糖异生，从而升高血糖。
实验五胰岛素、肾上腺素对血糖浓
6.取4支试管按下表操作（单位：ml）
空白管
标准管 样品管1（空腹）
样品管2（用药）
蒸馏水 1.0
-
-
-
标准液
-
1.0
-
-
血滤液
-
ห้องสมุดไป่ตู้
-
1.0（空腹）
1.0（用药）
邻甲苯
胺试剂 2.5
2.5
2.5
2.5
混匀，100℃水浴8分钟，冷却。630nm比色，读取光密度。
计算
血糖mg/dl =
(mg%)
测定管吸光度 标准管吸光度
4.邻甲苯胺具有毒性和腐蚀性，操作时要注意。
临床意义 1.血糖升高：病理性主要见于糖尿病，其
他内分泌疾病如肾上腺皮质机能亢进，垂体 前叶机能亢进等。
2.血糖降低：病理性如胰岛细胞瘤、胰岛 素分泌过多，过量胰岛素治疗，肾上腺皮质 功能减退等。
本次实验报告已论文形式书写
标题 作者 单位 邮编 【摘要】目的： 方法： 结果： 结论： 【关键词】3-5个 正文 简介 材料与方法 1 实验材料 1.1仪器 1.2试剂 2 实验方法 详述实验步骤（如给药、取血等） 结果 各管OD值，给药前后OD及计算 讨论 参考文献 作者（3人以上就写等） 标题 杂志名 年，卷（期）：页码（起-止）
血糖实验
题目激素对血糖浓度的影响及血糖浓度的测定系部医学院专业临床班级临床1004学号200909155140姓名刘兴志指导教师赵雪花完成日期2011 年9 月16日【摘要】目的:（1）掌握血糖测定的原理和方法。
（2）掌握血糖正常的范围和意义。
（3）熟记胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响，并解释其作用机制。
方法：取正常家兔两只，饥饿14-16小时，各空腹取血10ml，在相同的实验条件下，其中一只注射胰岛素（5单位/公斤），另一只注射肾上腺素（0.5mg/只），半个小时后再次取血。
测量血糖浓度。
结果：注射胰岛素的家兔，血糖浓度降低，注射肾上腺素的家兔，血糖浓度升高。
结论：胰岛素可以降低血糖，肾上腺素可以升高血糖。
【关键词】胰岛素，肾上腺素，血糖浓度。
材料与方法1.实验材料与试剂正常家兔两只。
肾上腺素（1mg/ml）,胰岛素（5单位/ml）,碘酒，消毒酒精，棉球，饱和硼酸溶液（6g溶于100ml蒸馏水中摇匀后放置过夜后过滤即可），邻甲苯胺-硼酸，5%三氯醋酸溶液，饱和苯甲酸溶液，标准葡萄糖贮存液，标准葡萄糖应用液。
2.实验对象正常家兔3.实验方法步骤3.1取正常家兔两只。
实验前预先饥饿14-16h，称其体重并记录（2-3公斤为宜）。
3.2药前取血。
先用剪刀剪去家兔耳缘的兔毛，然后用酒精擦拭，使其耳缘静脉充血，再用干棉球擦干。
碘酒，酒精消毒后用7号针头穿刺耳缘静脉，然后用盛有抗凝剂（草酸钠，2mg/ml血）的小烧杯收集10ml左右的血液。
收集时注意摇匀以防血液凝固。
取血完毕，用干棉球压迫止血。
3.3 注射胰岛素和肾上腺素。
取血完毕后，给其中一只家兔注射胰岛素（5单位/公斤为宜），另一只注射肾上腺素（0.5mg/只为宜）。
注射完毕后，稳定家兔情绪，放回兔笼。
3.4药后取血。
药后半小时，再次从耳缘静脉取血。
方法同3.2。
3.5制备无蛋白学滤液。
用微量加样器取抗凝血0.4ml，滤纸擦净粘附于吸管尖端外表的血液，缓慢注入洁净小试管。
胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响
激素对血糖浓度的影响及血糖浓度的测定刘峡汛11. 武汉科技大学医学院临床1105班湖北武汉430065[摘要]目的：观察家兔注射肾上腺素或胰岛素前后血糖水平的变化方法：采用邻甲苯胺法测血糖浓度。
结果：注射胰岛素的家兔空腹血糖含量为182mg/dL，药后血糖含量为129mg/dL；注射肾上腺素的家兔空腹血糖含量为81mg/dL，药后血糖含量为119mg/dL。
结论：胰岛素会使血糖浓度降低，肾上腺素会使血糖浓度升高。
[关键词]血糖浓度胰岛素肾上腺素引言：正常情况下，血糖浓度在各种因素调解下，维持相对恒定，但现如今糖尿病可谓是医学界的一大顽症，目前并无良药可医，对于此种病当以预防为主。
因此身为医学生，掌握激素对血糖浓度的影响及如何测量血糖浓度显得有为重要。
原理：1.血糖浓度即指血液中的葡萄糖浓度。
血糖水平相当恒定，维持在80—120mg/dL之间。
空腹血糖水平的相对恒定是在神经激素调节下血糖的来路和去路达到动态平衡的结果，其中激素调节站主导地位。
调节血糖的激素有：胰岛素，肾上腺素，胰高血糖素，肾上腺皮质激素，生长素和甲状腺激素。
胰岛素是体内唯一能使血糖降低的激素，其他激素均使血糖升高。
2.葡萄糖在热的冰醋酸溶液中可脱水生成5-羟甲基-2-呋喃甲醛，后者与邻甲苯胺缩合，生成蓝绿色的西夫氏碱，其色泽的深浅与葡萄糖浓度成正比。
1.材料与方法1.1材料仪器：722型分光光度计试剂：1.正常家兔(实验前预先使其饥饿14—16小时)两只。
称体重，一只为2.55kg，另一只为1.8kg。
2.肾上腺素（1mg/1ml）3.胰岛素（5单位/ml）4.碘酒,消毒酒精5.饱和硼酸溶液：取硼酸6g,溶于100ml蒸馏水中，摇匀，放置过夜后过滤，即可应用。
6.邻甲苯胺试剂：取冰醋酸（AR）940ml,加入硫脲（AR）1.5g，溶解后加入邻甲苯胺60 ml混匀，置棕色瓶中，室温保存。
新配试剂应放置24小时后（待老化）使用。
此试剂腐蚀性极强，应避免与皮肤接触而造成灼伤。
激素对血糖浓度的调节
胰岛素所致低血糖休克及药物和激素对血糖的影响一、胰岛素所致低血糖休克【实验原理】胰岛素过量可致低血糖，低血糖反应以交感神经兴奋为主，严重的低血糖亦可致中枢神经系统因缺少能量来源，出现许多功能障碍。
本实验在腹腔注射过量的胰岛素的同时，将小鼠置于37~38℃恒温水浴箱，加速小鼠体内糖的消耗，致严重的低血糖反应，再给予20％葡萄糖注射液，以观察其抢救效果。
【实验目的】观察胰岛素性低血糖反应【实验对象】小鼠【实验药品及器材】恒温水浴箱，烧杯，注射器，胰岛素，20％葡萄糖注射液。
【实验步骤】1、调节恒温水浴箱的温度，使之保持在37~38℃，并将烧杯置于水浴箱中。
2、取禁食不禁水的健康小白鼠2只，称重后标记，甲鼠腹腔注射胰岛素10U/10g，乙鼠腹腔注射等容量的生理盐水，然后将两鼠放置于恒温水浴箱内的不同烧杯中，观察甲乙小鼠有何变化。
3、当出现惊厥时（注射胰岛素后20~30min后，表现为尾上翘或双后肢强直性伸直），迅速把预先准备好的20％的葡萄糖0.5~1ml腹腔注射，并观察小白鼠的活动有何改变。
二、激素及药物对血糖的影响【实验原理】参与血糖浓度调节的激素有两类：一类是降低血糖的激素，只有胰岛素一种；一类是升高血糖的激素，这类激素包括：肾上腺素、胰高血糖素、肾上腺皮质激素、生长激素等。
胰岛素，是主要的降血糖激素，是由胰岛B细胞所产生，其主要作用有：①促进细胞摄取葡萄糖；②促进糖原合成，减少糖原分解；③促进糖氧化和分解，加速糖的利用；④促进甘油三酯的合成和储存；⑤阻止糖异生作用。
高血糖、高氨基酸、胰泌素、胰升糖素和迷走神经兴奋等都可促进胰岛素的释放。
胰高血糖素，是升高血糖浓度的最重要的激素，由胰岛A细胞产生，其主要作用有：①激活糖原分解和糖异生的关键酶，促进肝糖原分解成血糖，促进糖异生作用；②抑制糖原合成和糖氧化的关键酶，使血糖升高。
低血糖、低氨基酸可刺激胰高血糖素释放。
肾上腺素主要促进糖原分解，为细胞提供葡萄糖的来源。
胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响
三、实验材料
1、 家兔。 、 家兔。 2、721分光光度计。 分光光度计。 、 分光光度计 3、试剂。 、试剂。 （1）草酸钠。 ）草酸钠。 （2）25％葡萄糖。 ） ％葡萄糖。 （3）肾上腺素 mg/ml。 ）肾上腺素l准备：取正常家兔两只，实验前预先饥饿 ．动物准备：取正常家兔两只， 16 h，称体重 一般为 ～3 kg)。 一般为2～ ，称体重(一般为 。 2．取血：从耳缘静脉取血，分别制成血浆。 ．取血：从耳缘静脉取血，分别制成血浆。 3．注射激素后取血：取饿兔血后，其中一只兔皮 ．注射激素后取血：取饿兔血后， 下注射胰岛素，剂量按0.75 U/kg体重计算，并记录注 体重计算， 下注射胰岛素，剂量按 体重计算 射时间。 后再取血制成血浆 后再取血制成血浆。 射时间。1 h后再取血制成血浆。取血后立即腹腔或皮 下注射25％葡萄糖10 ， 下注射 ％葡萄糖 ml，以免家兔发生胰岛素性休 克而死亡。 克而死亡。 另一只兔皮下注射肾上腺素，剂量按0.4 mg/kg体 另一只兔皮下注射肾上腺素，剂量按 体 重计算。并记录注射时间。 后再取血制成血浆。 重计算。并记录注射时间。0.5 h后再取血制成血浆 后再取血制成血浆
五、实验思考
1．升高血糖和降低血糖的激素各有哪些？ ．升高血糖和降低血糖的激素各有哪些？ 2．为何应激时血糖水平会升高？ ．为何应激时血糖水平会升高？ 3．溶血对血糖值有什么影响？ ．溶血对血糖值有什么影响？
胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响
一、实验目的 1、掌握胰岛素和肾上腺素对血糖水平的调节作用 2、复习血糖水平调节机制。 、复习血糖水平调节机制。
二、实验原理
人和动物体内， 人和动物体内，血糖浓度受各种激素调节 而维持恒定。胰岛素能降低血糖； 而维持恒定。胰岛素能降低血糖；其他很多激 素则具有升高血糖的作用，其中以肾上腺素作 素则具有升高血糖的作用， 用较为迅速而明显。 用较为迅速而明显。胰岛索促进肝和肌将葡萄 糖合成糖原，又加强糖的氧化利用， 糖合成糖原，又加强糖的氧化利用，故可降低 血糖；肾上腺素促进糖原分解而增高血糖。 血糖；肾上腺素促进糖原分解而增高血糖。
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生物化学实验
实验名称：激素对血糖浓度影响及血糖浓度的测定
时间：2014年6月9日星期一
姓名：
学号：201312201202003
指导老师：毛水龙老师
一，实验目的
掌握血糖的测定原理和方法；掌握血糖的正常范围及意义；熟悉调节血糖的激素对血糖浓度的影响。
二，实验原理
家兔动物实验。
获取家兔注射激素前后的血液样本并对其；进行血糖测定。
邻苯甲胺方法测定血糖浓度。
实验采取前后对照的方法，对家兔注射肾上腺素和胰岛素，并通过耳缘静脉采血，获取激素注射前后的血液样本，采用邻甲苯胺法处理样本，最终与标品比色得出结论。
1.调节血糖的激素有：胰岛素、肾上腺素、胰高血糖素、肾上腺皮质激素、生长素和甲状腺素等。
胰岛素是体内唯一能使血糖降低的激素，其他激素均使血糖升高。
2.肾上腺素升高血糖的机制主要作用于肝细胞膜受体，通过cAMP-蛋白激酶系统激活肝磷酸化酶，同时抑制糖原合成酶，导致肝糖原分解加速。
胰岛素降低血糖的机制是：降低肝细胞cAMP水平，从而抑制
肝磷酸化酶，激活糖原合成酶，促进肝糖原的合成；胰岛素诱导糖酵解关键酶类的合成，阻遏糖异生关键酶的合成；胰岛素促进葡萄糖进入红细胞、肌肉等组织的异化扩散，促进糖的利用。
3.血液中的葡萄糖，在热的冰醋酸溶液中可脱水生成5-羟甲基-2-呋喃甲醛（或称羟甲基糠醛）。
后者在与邻甲苯胺缩合，生成蓝绿色的西夫式碱（Schiffbase）。
其色泽的深浅与葡萄糖浓度成正比。
与同样处理的标准葡萄糖溶液比色，即可求得待测血液中葡萄糖的含量。
三，实验材料
1.材料：家兔两只,刀片，草酸钠，小烧杯。
2.试剂：①肾上腺素(1mg／lml)②胰岛素(20单位／ml)③碘酒、消毒酒精④饱和硼酸溶液⑤邻甲苯胺-硼酸⑥5％三氯醋酸溶液⑦饱和苯甲酸溶液⑧标准葡萄糖贮存液⑨标准葡萄糖应用液
四，实验方法
1.取健康正常家兔一只，实验前饥饿14~16h左右，称体重。
2.耳缘静脉采血。
小刀刮去耳缘的毛，用酒精棉球擦拭使其充血，再用干棉球擦干。
刀片划开耳缘静脉，使血液滴入成有足够草酸钠的小烧杯中，注意收集期间要不断地晃动烧杯防止血液凝固。
采集完毕后干棉球压迫血管止血。
3.给家兔注射肾上腺素（0.5mg/只），半小时后同样方法采得血液。
4.缓缓放入洁净试管内，加5%三氯醋酸3.6ml，同时摇动使之充分混匀。
3000rpm离心5min，制得无蛋白血滤液（上清液）。
5.取四支试管，分别加入2.5ml邻甲苯胺试剂。
并向试管1加入1ml 蒸馏水，试管2加入1ml标准葡萄糖应用液，试管3加入1ml注射激素前的血液的无蛋白滤液，试管4加入1ml注射激素后的血液的无蛋白滤液。
6.混匀后沸水加热8min，取出并用自来水冲洗试管使之冷却。
而后置于722型分光光度计630nm比色，空白管校正零点。
7.表加试剂如下表：
同理，对家兔进行肾上腺素注射（剂量为5单位/公斤体重）并进行上述步骤，最终得出结果。
五，实验结果
据试验，在注射胰岛素实验中，家兔重量为2.95公斤，依照比例注射15单位的胰岛素。
在注射肾上腺激素的实验中，家兔重量为2.90
公斤，注射1mg的肾上腺激素。
血糖测定：（葡萄糖标准液浓度为5.50m m o l/L）
由此得出：
注射胰岛素前血糖浓度为14.79mmol/L。
注射胰岛素后血糖浓度为4.73 mmol/L。
注射肾上腺激素前血糖浓度为12.83 mmol/L。
注射肾上腺激素后血糖浓度为20.70 mmol/L。
得出结论：注射胰岛素可有效的降低血糖。
2．注射肾上腺素能使血糖上升。
六，讨论
实验中要注意如下问题：
1.采血及注射激素时，应尽量使家兔保持安静。
家兔不安静的情况下，肾上腺素分泌增多，血糖浓度升高，对实验结果有影响。
2.采血后要及时分离出血浆，避免溶血。
溶血时红细胞内糖类扩散到血浆中，会对实验结果有影响。
3.采血量要准确，不能采得太少不够实验需要的血量，也不能采得太多伤及家兔。
4.由于血细胞不断从血浆摄取葡萄糖加以利用，因此, 采血后及时进行检测，否则血糖浓度将逐渐降低。
（注：可编辑下载，若有不当之处，请指正，谢谢!）。