制备和应用固定化酶
制备固定化酶实验报告
一、实验目的1. 了解固定化酶的概念、原理及其在生物催化领域的应用。
2. 掌握固定化酶的制备方法，提高实验操作技能。
3. 通过实验，了解固定化酶的催化活性、稳定性及重用性能。
二、实验原理固定化酶是指通过物理或化学方法将酶固定在固体载体上，使其在催化反应中保持酶活性的一种技术。
固定化酶具有以下优点：1. 提高酶的稳定性，延长使用寿命；2. 方便酶的回收和重复利用；3. 易于控制反应条件，提高催化效率。
固定化酶的制备方法主要有吸附法、包埋法和结合法。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：纤维素、琼脂糖、聚丙烯酰胺、酶、底物、缓冲液等。
2. 实验仪器：离心机、烘箱、恒温水浴锅、显微镜、酶标仪等。
四、实验步骤1. 吸附法固定化酶（1）将纤维素或琼脂糖溶解于缓冲液中，配制成一定浓度的溶液。
（2）将酶溶液与纤维素或琼脂糖溶液混合，搅拌均匀。
（3）将混合液倒入培养皿中，置于烘箱中干燥，形成凝胶。
（4）将凝胶用离心机离心，去除未固定的酶。
（5）将固定化酶洗涤、干燥，备用。
2. 包埋法固定化酶（1）将聚丙烯酰胺溶解于缓冲液中，配制成一定浓度的溶液。
（2）将酶溶液与聚丙烯酰胺溶液混合，搅拌均匀。
（3）将混合液倒入培养皿中，置于烘箱中干燥，形成凝胶。
（4）将凝胶用离心机离心，去除未固定的酶。
（5）将固定化酶洗涤、干燥，备用。
3. 结合法固定化酶（1）将酶蛋白分子与不溶性固相支持物（如离子交换树脂）进行离子键结合。
（2）将结合后的酶蛋白分子与底物反应，观察催化效果。
五、实验结果与分析1. 吸附法固定化酶：通过吸附法固定化酶，酶的活性保持较好，但固定化酶的稳定性较差，易受外界环境因素影响。
2. 包埋法固定化酶：通过包埋法固定化酶，酶的活性保持较好，稳定性较高，但固定化酶的催化效率较低。
3. 结合法固定化酶：通过结合法固定化酶，酶的活性保持较好，稳定性较高，且催化效率较高。
六、实验结论1. 固定化酶的制备方法有吸附法、包埋法和结合法，各方法有其优缺点。
固定化酶的研究进展和应用前景
固定化酶的研究进展和应用前景固定化酶是指将酶固定在固体载体上，并保持其生物活性的一种技术。
它有许多优点，如可重复使用、稳定性高、易于回收等，因此成为了生物技术领域一种非常有前途的研究方向。
一、固定化酶的发展历程固定化酶的概念最早可以追溯到20世纪50年代。
第一种固定化酶的载体是硅胶，随后又发展了许多种载体，如凝胶、海藻酸盐、纳米材料、磁性颗粒等。
随着技术的进步，目前已有各种方法来制备纳米载体和比之前更优异的凝胶载体。
同时，各种固定化酶的制备方法也在不断改进，包括共价结合、吸附、交联、包埋等。
二、固定化酶的应用固定化酶的应用范围非常广泛，包括生物催化、食品工业、医药工业、制药工业等。
其中，固定化酶在食品工业中的应用最为广泛。
如生产葡萄糖、果汁、醋等。
固定化酶也可以用于制药工业中的药品合成。
此外，还可以在纳米技术、环境保护、制垃圾处理等领域中找到应用。
三、固定化酶的优势1. 重复使用：固定化酶具有可重复使用的优势，节省了时间和成本，具有广泛应用前景。
2. 稳定性：与游离酶相比，固定化酶具有较高的稳定性和耐受性，并可在极端环境中保持其生物活性。
3. 易于回收：固定化酶可以设计成可在固定化酶中回收，增加了其经济价值。
四、固定化酶仍需解决的问题尽管固定化酶在许多领域中具有潜力，但仍存在一些问题。
1. 优化载体：优化载体并不是一件容易的事情，其选择需要结合具体的酶种和应用需求，存在一定的技术难度。
2. 降低成本：目前固定化酶的生产成本仍比较高，限制了其在一些领域中的推广。
3. 稳定性问题：目前许多固定化酶在长时间的储存或使用过程中还会出现酶失活的情况，这需要更好的研究与解决。
综合而言，固定化酶的广泛应用前景与其固有的优势是显而易见的。
在未来，我们需要持续关注固定化酶领域的研究与发展，加快技术优化和成本降低，更好地服务于人类的需求。
课题5制备和应用固定化酶课件
固定化酶与生物反应器的结合
01
通过优化生物反应器的设计和操作条件，提高固定化酶的催化
效率和产物收率。
固定化酶与分离技术的结合
02
利用分离技术对固定化酶反应产物进行分离和纯化，提高产品
的纯度和产率。
固定化酶与传感器技术的结合
03
将固定化酶应用于传感器技术中，实现对生物分子和化学物质
的快速、灵敏和准确的检测。
注意个人防护
在进行实验操作时，应佩戴防护眼镜、口 罩等个人防护用品，以防止意外伤害。
实验结果分析
数据记录
误差分析
在实验过程中，应认真记录实验数据，包括反应时间、温度、浓度等参数。
对实验结果进行误差分析，找出可能 影响实验结果的因素，提高实验的准 确性和可靠性。
结果分析
根据实验数据，分析固定化酶的催化 性能和应用效果，比较不同条件下的 反应结果。
以控制。
固定化酶的表征
01
02
03
04
酶活性的测定
通过测定固定化酶的催化活性， 评估其催化效果。
载酶量的测定
通过测定载体上固定化酶的质 量或数量，评估固定化效果。
稳定性评估
比较固定化酶与游离酶在不同 条件下的稳定性差异。
传质性能分析
分析固定化酶在催化反应过程 中的传质性能，为其应用提供
依据。
02
04
固定化酶的发展趋势和前景
新技术的应用
01
02
03
纳米技术
利用纳米材料和纳米结构 的特点，提高固定化酶的 稳定性和活性。
生物工程技术
利用基因工程和蛋白质工 程技术，改良酶的特性和 提高固定化酶的效率。
计算机模拟技术
利用计算机模拟酶的催化 反应过程，优化固定化酶 的反应条件和设计新型固 定化酶。
固定化酶的方法和应用
固定化酶是将酶固定在载体上，形成固定化酶催化系统的过程。
通过固定化，可使酶的活性和稳定性得到提高，并能够重复使用。
常用的固定化酶方法包括吸附法、共价连接法、包埋法和交联法等。
1. 吸附法：利用载体表面与酶相互吸附的原理将酶固定在载体表面。
常用的载体包括硅胶、纤维素、聚丙烯酰胺凝胶等。
2. 共价连接法：通过将酶分子与载体分子之间的化学键共价连接，在载体表面上固定酶。
常用的共价连接剂包括辛二酸二酐、戊二酸二酐等。
3. 包埋法：将酶包裹在聚合物中，在聚合物内部形成微观环境，保护酶免受外界环境的影响。
常用的包埋材料包括明胶、蛋白质和聚乙烯醇等。
4. 交联法：将酶和载体分子之间形成交联结构，将酶牢固地固定在载体表面上。
常用的交联剂包括戊二醛、葡萄糖等。
固定化酶在生物技术、食品工业、医药工业等领域有着广泛的应用。
其中，利用固定化酶在生物技术领域中最为突出。
例如，固定化酶可以应用于产生大量纯度高的特定酶，用于DNA重组、制备抗体和识别特定分子等。
此外，在医药工业中也广泛使用固定化酶，如利用固定化酶制备药物、检测生物标志物等方面。
在食品工业中，固定化酶可用于生产乳制品、果汁、啤酒等食品中。
总之，固定化酶是一种重要的生物技术手段，具有广泛应用前景，可推动生物技术、食品工业、医药工业等领域的发展。
固定化酶技术在医疗和环境中的应用
固定化酶技术在医疗和环境中的应用酶是一种生物催化剂，能够催化生物化学反应。
在许多生物工艺和工业生产中，酶已经成为不可或缺的工具。
最近，固定化酶技术也逐渐在医疗和环境中广泛应用。
一、固定化酶技术是什么固定化酶技术的基本思想是将酶固定在一定的载体上，使得酶能够长时间稳定地保存在固定状态下，并能够在环境中起到合适的催化作用。
这种技术以酶的活性稳定性和生物相容性能力作为关键指标，以聚合物材料、微生物或生物大分子材料为载体，利用化学或物理交联的方法将酶硬化在载体中，从而形成固定化的酶催化剂。
二、固定化酶技术在医疗中的应用固定化酶技术在医疗领域中有着广泛的应用。
如近年来广泛用于医疗检测中的糖尿病检测。
糖尿病是一种常见的代谢性疾病，目前以测定人体血液中的葡萄糖含量为常规诊断方法。
固定化酶技术可以将酶嵌入生物传感器中，将它们固定到微小的芯片上，作为一种“传感器”来检测葡萄糖。
这使得检测更加简便、快捷、准确。
同时，固定化酶技术还被广泛应用于脂肪肝和心血管疾病的检测中，使得医学检查和诊断更加科学和精确。
三、固定化酶技术在环境中的应用除了医疗领域，固定化酶技术在环境保护中也有广泛的应用。
例如，我们可以利用过硫酸盐法固定化酶来处理环境污染中的水质问题。
对于一些环境中存在的有机物，通过将其与固定化酶进行作用，能够有效地去除水质中的有机污染物，同时避免了传统化学法对环境的影响和损害，有机地促进了水质的净化和环境的保护。
四、前景展望固定化酶技术在医疗和环境中已经取得了一定的成果。
人们已经发现了很多潜在的应用，但也面临着一些困难和挑战。
例如酶质稳定性、载体材料的选择和制备等问题。
但随着科技的不断进步和经验的不断积累，这些困难将逐步得到解决，固定化酶技术的应用前景非常广阔，这将使得我们在医疗治疗和环境保护方面有更加优秀的选择和手段，让我们生活得更加健康、环境更加清洁和美丽。
高中生物 3.2 固定化酶的制备和应用课件 苏教版选修1
探究点一 探究点二 探究点三
2.结果分析与评价 (1)凝胶珠的颜色和形状:如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色,说明海藻 酸钠的浓度偏低,固定的酵母细胞数目较少;如果形成的凝胶珠不是圆形或椭 圆形,则说明海藻酸钠的浓度偏高,制作失败,需要再作尝试。 (2)检验凝胶珠的质量是否合格,可以使用下列方法。一是用镊子夹起一 个凝胶珠放在实验桌上用手挤压,如果凝胶珠不容易破裂,没有液体流出,就表 明凝胶珠的制作成功。二是在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易 弹起,也能表明制备的凝胶珠是成功的。
提示:固定化酵母细胞包埋在海藻酸钠内,不容易与葡萄接触。可用葡 萄糖溶液代替鲜葡萄,将固定化酵母细胞加到葡萄糖溶液中发酵,葡萄糖容 易透过海藻酸钠进入到凝胶珠内部。
探究点一 探究点二 探究点三
●名师精讲●
1.实验流程的几点提醒 (1)选用的干酵母要具有较强的活性,而且物种单一。 (2)酵母菌细胞活化时体积会变大,因此活化前应选择体积足够大的容器, 防止酵母菌细胞的活化液溢出。 (3)海藻酸钠溶液的配制是固定化细胞的关键,因为如果海藻酸钠浓度过 高,将很难形成凝胶珠,如果浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母菌细胞的数 量少,也会影响实验结果。 (4)溶化海藻酸钠时要用小火或间断加热,避免海藻酸钠发生焦糊。 (5)将溶化后的聚乙烯醇—海藻酸钠溶液先冷却至 45 ℃,再与预热至 35 ℃ 的酵母菌培养液混合,避免高温杀死酵母菌细胞。要混合均匀,不要进入气泡。 (6)固定化酵母菌细胞时,应将酵母菌—聚乙烯醇—海藻酸钠胶液用注射 器以恒定速度缓慢滴入饱和硼酸—氯化钙溶液中,而不是注射,以免影响凝胶 珠的形成。 (7)细胞的固定要在严格的无菌条件下进行,如定容时要用蒸馏水,冲洗凝 胶珠要用无菌水。
固定化细胞 一系列酶 明胶、琼脂糖、海藻酸 钠、醋酸纤维素、聚丙烯 酰胺 包埋法
固定化实验报告
实验名称：固定化酶实验实验目的：1. 了解固定化酶技术的原理和应用。
2. 学习固定化酶的制备方法。
3. 探究固定化酶的稳定性及其催化活性。
实验时间：2023年3月15日实验地点：生物实验室实验器材：1. 酶制剂2. 底物3. 固定化载体（海藻酸钠）4. 离心机5. 烧杯6. 移液器7. pH计8. 烧瓶9. 恒温水浴锅10. 紫外分光光度计实验步骤：1. 准备固定化酶载体：将海藻酸钠溶解于适量的蒸馏水中，配制成一定浓度的溶液，加入少量CaCl2，搅拌均匀，使其凝固。
2. 制备固定化酶：将酶制剂与底物按照一定比例混合，加入固定化载体溶液，搅拌均匀，使酶与载体充分结合。
3. 固定化酶的制备：将混合液倒入烧杯中，放入恒温水浴锅中，恒温加热，使酶与载体进一步结合，形成固定化酶。
4. 固定化酶的离心分离：将固定化酶溶液放入离心机中，离心分离，收集固定化酶。
5. 固定化酶的稳定性实验：将固定化酶分别在不同温度、pH值、底物浓度等条件下进行反应，观察固定化酶的稳定性。
6. 固定化酶的催化活性实验：将固定化酶与底物按照一定比例混合，放入烧瓶中，进行反应，通过紫外分光光度计检测反应液中的产物浓度，计算固定化酶的催化活性。
实验结果：1. 固定化酶的制备：成功制备了固定化酶，酶与载体结合良好，固定化酶具有良好的稳定性。
2. 固定化酶的稳定性实验：- 在不同温度下，固定化酶的稳定性较好，40℃时催化活性最高。
- 在不同pH值下，固定化酶的稳定性较好，pH值为7时催化活性最高。
- 在不同底物浓度下，固定化酶的稳定性较好，底物浓度为0.1mol/L时催化活性最高。
3. 固定化酶的催化活性实验：- 通过紫外分光光度计检测反应液中的产物浓度，计算固定化酶的催化活性，结果表明固定化酶具有较好的催化活性。
实验结论：1. 固定化酶技术是一种有效提高酶稳定性和催化活性的方法。
2. 通过固定化酶技术，可以降低酶的失活率，延长酶的使用寿命。
固定化酶在工业中的应用
固定化酶在工业中的应用
一、固定化酶在工业中的应用
固定化酶在工业中的应用越来越广泛，被作为一种新的分离、催化技术而被广泛应用于各种工业生产过程中。
一般来说，固定化酶可以替代传统的酶分离，并具有更加优越的特性，如易于分离、低成本、易于控制等。
此外，固定化酶也可以用于燃料、食品、药品和其他行业的分离、催化过程，从而提高产品质量和改进生产过程。
1. 食品工业中的固定化酶应用
在食品工业中，固定化酶被广泛用于一些食品的加工、分离和增加营养素的提取等方面。
例如，酶法可以实现葡萄糖的发酵，从而产生乳酸、酒精等食品添加剂；酶可以分解木质素，使食物具有更好的口感和发酵性；还可以用于蛋白质、蔗糖和植物油等提取，从而提高食品产品的营养价值。
2. 医药工业中的固定化酶应用
在医药工业中，固定化酶也被广泛应用。
例如，固定化酶可以用于蛋白质分离，例如免疫球蛋白等；同时，固定化酶也可以用于抗体、抗原的分离，以及抗肿瘤药物和酶制剂的开发等。
与传统酶分离相比，固定化酶更加有效、安全、稳定，可以更好地服务于医药工业发展。
3. 燃料工业中的固定化酶应用
在燃料工业中，固定化酶可以用于燃料的催化氧化反应，从而制备汽油、柴油和航空燃料等燃料。
此外，固定化酶也可以用于煤炭的催化气化，提高煤炭的热值和燃烧性能，从而提高燃料的使用效率，
并减少环境污染。
综上所述，固定化酶在工业中的应用越来越广泛，可以为各种工业发展提供重要的支持，从而促进经济发展，解决问题，改善生活品质等。
3.2制备和应用固定化酶
第三章酶的应用技术实践3.2制备和应用固定化酶探究目的：1、说出固定化酶和固定化细胞的作用和原理2、尝试制备固定化酵母细胞，并利用固定化酵母细胞进行酒精发酵。
探究预习：固定化酶技术的发展也促进了固定化细胞技术的发展。
20世纪70年代后期出现了固定化细胞技术。
通过各种方法将细胞与一定的载体结合，使细胞仍保持原有的生物活性，这一过程称为细胞固定化。
固定化细胞仍能进行正常的生长、繁殖和代谢，由于保留了细胞内原有的多酶系统，这对多步催化的连续反应优势就更加明显。
细胞固定化的方法也有多种，主要是吸附法和包埋法两大类。
吸附法是制备固定化动物细胞的主要方法。
动物细胞大多数具有附着特性，能够很好地附着在容器壁、微载体和中空纤维等载体上。
吸附法制备固定化植物细胞，是将植物细胞吸附在泡沫塑料的大孔隙或裂缝之中，也可将植物细胞吸附在中空纤维的外壁上。
包埋法是指将细胞包埋在多孔载体的内部而制成固定化细胞的方法。
凝胶包埋法是应用最广泛的细胞固定化方法，适用于各种微生物、动物和植物细胞的固定化。
凝胶包埋法所使用的载体主要有琼脂、海藻酸钠凝胶、角叉菜胶、明胶等。
海藻酸钠凝胶包埋法制备固定化细胞的操作简便，条件温和，对细胞无毒性。
通过改变海藻酸钠的浓度可以改变凝胶的孔径，适合于多种细胞的固定化。
用海藻酸钠凝胶制备的固定化细胞已用于多种酶的发酵生产与研究。
固定化细胞技术可以取代游离的细胞进行发酵，生产各种物质。
材料用具：干酵母，聚乙烯醇，海藻酸钠，无水CaCl2，蒸馏水，烧杯，玻璃棒，酒精灯，三角架，石棉网，注射器等。
探究反思：固定化酵母菌技术有哪些优点？探究示例：请参照细胞固定化技术的相关基础知识，完成下列问题。
（1）细胞固定化技术一般采用包埋法固定化，采用该方法的原因是____________________________________________________________________。
（2）包埋法固定化是指_________________________________。
固定化酶的制备及应用
固定化酶的制备及应用徐玉尚 08生工（2） 20080804243摘要：酶的固定化技术是用固体材料将酶束缚或限制于一定区域内，酶仍能进行其特有的催化反应、并可回收及重复利用的一类技术。
本文主要从传统固定化酶技术以及新型固定化酶技术两大方面介绍了固定化酶的制备方法。
另外，又对固定化酶在医药、食品、环保、生物传感器、能源五大方面的应用作了综述。
本文旨在进一步研究固定化酶的制备方法以及探究固定化酶在多个领域的应用。
关键词：固定化酶；制备；载体；应用酶是重要的生物催化剂，具有专一性强、催化效率高、无污染、反应条件温和等特点，在制药、食品、环保、酿造、能源等领域都得到了广泛的应用。
但在实际应用中，酶也存在许多不足，如大多数的酶在高温、强酸、强碱和重金属离子等外界因素影响下，都容易变性失活，不够稳定；与底物和产物混在一起，反应结束后，即使酶仍有很高的活力，也难于回收利用，这种一次性使用酶的方式，不仅使生产成本提高，而且难于连续化生产；并且分离纯化困难，也会导致生产成本的提高等。
固定化酶的研究始于1910年,正式研究于20世纪60年代,70年代已在全世界普遍开展。
酶的固定化(Immobilization of enzymes)是用固体材料将酶束缚或限制于一定区域内,仍能进行其特有的催化反应、并可回收及重复利用的一类技术。
与游离酶相比,固定化酶在保持其高效专一及温和的酶催化反应特性的同时,又克服了游离酶的不足之处,呈现贮存稳定性高、分离回收容易、可多次重复使用、操作连续可控、工艺简便等一系列优点。
现今，固定化酶的制备方法已由传统走向新型，并在多个领域有重要应用[1]。
1固定化酶的传统制备方法1.1吸附法吸附法是利用物理吸附法，将酶固定在纤维素、琼脂糖等多糖类或多孔玻璃、离子交换树脂等载体上的固定方式。
显著特点是：工艺简便及条件温和，包括无机、有机高分子材料，吸附过程可同时达到纯化和固定化；酶失活后可重新活化，载体也可再生。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
制备和应用固定化酶
（2012上海）9．酶在大规模产业化应用中的核心问题是固定化技术，而酶固定化所依据的基本原理在于酶具有
A．热稳定性B．催化高效性C．催化特异性D．可反复使用性
【答案】D
【解析】固定化酶指通过物理或化学的方法，将水溶性酶与非水溶性载体结合，既能与反应物接触又能与产物分离，与直接使用酶相比，除催化效率高、特异性强外，还可反复使用酶；酶的热稳定性一般都不强。
故D正确。
【试题点评】本题考查了固定化酶与直接使用酶的区别及酶的特性，重点在于理解两者的区别，找出固定化酶依据的基本原理，难度中等。
（2012江苏）17.下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述，错误
．．的是（）
A.从酶的固定方式看，吸附法比化学结合法对酶活性影响小
B. 作为消化酶使用时，蛋白酶制剂以口服方式给药
C. 尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用
D.将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗，目的是洗去CaCl2和杂菌
【答案】C
【解析】化学结合法可能影响酶的活性部位而影响反应效果，而吸附法是物理方法不影响酶的分子结构，A正确；消化酶在消化道内起作用，B正确；尿糖试纸由于使用后不能将反应物和酶分开，而不能再次使用，C错；固定化酵母细胞在凝胶珠中，用无菌水冲洗可洗去CaCl2和表面的杂菌，D正确
【试题点评】本题考查酶的应用，涉及固定化酶中的原理、操作和应用等知识。
属于了解层次。
（2011上海）38．通过酶工程可将联苯水解酶用于生产实践。
酶工程通常包括酶的生产、＿＿＿＿＿＿＿、酶的固定化和酶的应用等方面。
酶固定化的好处是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
【答案】酶的分离纯化便于重复利用能连续进行反应
（2010山东）34. 【生物—生物技术实践】生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一
定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。
用于生产生物柴油的植物油不易发挥，宜选用_____、_____方法从油料作物中提取。
（2）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中的添加的植物油为微生物生长提供____，培养基灭菌采用的最适方法是____法。
（3）测定培养液中微生物数量，可选用_____法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测______，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产技术，可利用______技术使脂肪酶能够重复使用。
（4）若需克隆脂肪酶基因，可利用耐热DNA聚合酶催化的_____技术。
【答案】（1）压榨；萃取（注：两空顺序无先后）
（2）碳源高压蒸汽灭菌
（3）显微镜直接计数酶活性（或酶活力）固定化酶（或固定化细胞）
（4）PCR（或多聚链式反应，聚合酶链式反应）
【命题立意】本题综合考查多种生物技术
【解题思路】（1）因为植物油不挥发，所以不适合采用蒸馏法提取，应用压榨法或萃取法提取。
（2）植物油中不含矿物质元素，只为微生物提供碳源。
培养基适合用高压蒸汽灭菌发进行灭菌。
（3）测定微生物的数量，可以用显微镜直接计数。
分离出的脂肪酶要对其活性进行检测，以确定其实用价值。
可以利用酶固定技术重复
使用脂肪酶。
（4）利用PCR技术可以扩增基因。
（2010江苏）25．右图1表示制备固定化酵母细胞的
有关操作，图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵
的示意图．下列叙述正确的是
A．刚溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液
CaCl溶液，其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠
B．图1中X溶液为
2
C．图2发酵过程中搅拌的目的是为了使培养液与酵母菌充分接触
D．图1中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图2装置中
【答案】BCD
【解析】本题考查了固定化细胞技术的操作过程。
熔化的海藻酸钠应冷却后与活化的酵母细胞混合，A项错误；图1中氯化钙溶液可使海藻酸钠形成凝胶珠，B项正确；图2中要进行搅拌以使培养液与细胞充分接触，C项正确；图1中制备的凝胶珠要以过洗涤再移到图2装置中，D项正确。
（2009江苏）3．下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述，正确的是
A．固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显
B．固定化酶的应用中，要控制好pH、温度和溶解氧
C．利用固定化酶降解水体中有机磷农药，需提供适宜的营养条件
D．利用固定化酵母细胞进行发酵，糖类的作用只是作为反应底物
【答案】A
(2007山东)34．（8分）【生物—生物技术实践】
乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注。
利用玉米秸杆生产燃料酒精的大致流程为：Array
（1）玉米秸杆经预处理后，应该选用酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。
（2）从以下哪些微生物中可以提取上述酶？（多选）
A．酿制果醋的醋酸菌 B.生长在腐木上的霉菌
C．制作酸奶的乳酸菌 D.生产味精的谷氨酸棒状杆菌
（3）若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所需要的培养基为（按功能分），
培养基中的碳源为。
（4）从生物体提取出的酶首先要检测，以便更好地将酶用于生产实践。
在生产糖液的过程中，为了使酶能够被反复利用，可采用技术。
（5）发酵阶段需要的菌种是，在产生酒精时要控制的必要条件是。
【答案】（8分）（1）纤维素（酶）（2）B、E （3）选择培养基纤维素
（4）酶的活性（活力）固定化细胞（固定化酶）
（5）酵母菌无氧（密闭、密封）。