溶剂提取法提取银杏叶中得黄酮实验报告
银杏叶中黄酮提取技术研究进展
食品科技银杏叶中黄酮提取技术研究进展蒋迪尧1,2，吴肖肖1,2，梅秀明1,2（1.南京市产品质量监督检验院（南京市质量发展与先进技术应用研究院），江苏南京 210019；2.国家市场监管重点实验室（生物毒素分析与评价），江苏南京 210019）摘 要：黄酮是银杏中重要的一类功效成分，主要存在于银杏叶中，具有抗氧化、促进血液循环、调节血管、降低血糖以及增加血流量等作用，被广泛应用于保健食品等健康领域。
因此，研究并开发银杏叶中黄酮类功效成分的高效提取方法尤为重要。
本文梳理了当前银杏叶中黄酮成分常见的提取技术，并对各类方法进行了对比评估，旨在找到绿色高效、便捷可靠的前处理方法，为银杏叶中黄酮的提取技术改良和创新提供思路。
关键词：黄酮；银杏叶；提取Research Progress on Extraction Techniques for Flavonoidsfrom Ginkgo biloba LeavesJIANG Diyao1,2, WU Xiaoxiao1,2, MEI Xiuming1,2(1.Nanjing Institute of Product Quality Inspection (Nanjing Institute of Quality Development and AdvancedTechnology Application), Nanjing 210019, China;2.Key Laboratory of Biotoxin Analysis & Assessment for State Market Regulation, Nanjing 210019, China)Abstract: Flavonoids are an important class of functional components in Ginkgo biloba. They mainly exist in Ginkgo biloba leaves. They have the effects of anti-oxidation, promoting blood circulation, regulating blood vessels, reducing blood sugar and increasing blood flow. They are widely used in health food and other health fields. Therefore, it is particularly important to research and develop effective and efficient techniques for extraction of flavonoids from Ginkgo biloba leaves. This article summarizes common techniques for extracting flavonoids from Ginkgo biloba leaves, compares and evaluates different methods, aiming to find green, efficient, convenient and reliable pretreatment methods, to provide ideas for improving and innovating extraction techniques of flavonoids from Ginkgo biloba leaves.Keywords: flavonoids; Ginkgo biloba leaves; extraction银杏叶中的化合物组成多样且复杂，目前已知其中主要的生物活性功效成分为黄酮类化合物和银杏萜类内酯类化合物。
银杏叶中黄酮类化合物提取工艺研究
２００６年７月中成药Ｊｕｌｙ２００６第２８卷第７期ＣｈｉｎｅｓｅＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＰａｔｅｎｔＭｅｄｉｃｉｎｅＶ０１．２８Ｎｏ．７银杏叶中黄酮类化合物提取工艺研究苗建英（宝鸡文理学院化学化工系，陕西宝鸡７２１００７）关键词：银杏；黄酮类物质；提取工艺中图分类号：Ｒ２８４．２文献标识码：Ｂ文章编号：１００１·１５２８（２００６）０７－１０６０－０２银杏（Ｇｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａ·Ｌ）是我国的特产植物，研究证明：银杏叶中含有数十种活性成份，其中主要成分是黄酮类和萜内酯类化合物。
富含这两类成份的银杏叶活性物，具有捕获游离基、抑制血小板活化因子（ＰＡＦ）、促进血液循环及脑代谢等功能，ｌ临床上可用于治疗冠心病、心绞痛、老年痴呆症和防治皮肤病、脱发等多种疾病¨。
１，目前银杏叶提取物制剂已作为药品、保健品及化妆品等使用，对银杏叶中活性成份的提取和分离亦引起人们的高度重视。
据文献资料报道：浸取法提取银杏叶中的黄酮类化合物常用水、醇．水及丙酮．水体系进行提取。
水提法黄酮的总含量大约在１０％左右，黄酮含量偏低，一般不符合要求。
醇－水（７０％乙醇）一树脂法所得粗品，必须用树脂进行精制，生产周期长，操作过程繁锁，产品中黄酮类化合物含量低。
顽丙酮一水（５０％丙酮）提取法因丙酮易挥发且价格高等，普及应用受到了很大限制。
本文根据银杏叶中黄酮类化合物特点，对醇一水体系的提取物采用碱性溶解，酸性沉淀，溶剂萃取等方法，从银杏叶浸出液中富集分离黄酮类化合物，研究了提取过程的各种影响因素及其最佳工艺条件。
１实验部分１．１药品及仪器银杏叶（采于宝鸡市区）；７０％乙醇（工业级）；芦丁、亚硝酸钠、硝酸铝和其它所用试剂均为分析纯。
Ｒ－２０１旋转蒸发仅及Ｒ－２０１恒温水浴锅（上海申生科技有限公司）；ＰＨＳ－３Ｃ型精密ＰＨ计、７２１Ｂ分光光度计（上海第三分析仪器厂），ＨＰＬＣ一１０Ａ液相色谱仪（日本岛津）。
１．２实验步骤称取２００ｇ干燥、粉碎的银杏叶，每次以７０％乙醇６００ｍＬ浸取剂，在一定温度及ｐＨ条件下浸取３次，每次３ｈ，合并浸取液，经抽滤、浓缩至无醇味，石油醚脱脂后，以２００ｍＬ的乙酸乙酯分两次萃取，合并萃取液，得乙酸乙酯相Ｉ；水相以稀ＨＣＩ调ｐＨ值至３．０，产生黄色沉淀，抽滤，沉淀物用１５０ｍＬ乙酸乙酯充分溶解，滤去不溶物，得乙酸乙酯相Ⅱ，合并乙酸乙酯溶液Ｉ、Ⅱ，真空蒸发，回收溶剂，得黄色粉末。
银杏叶中总黄酮的提取和测定_唐婧
第30卷第5期Vol 130 No 15长春师范学院学报(自然科学版)Journal of Changchun Normal Universi ty(Natural Science)2011年10月Oct.2011银杏叶中总黄酮的提取和测定唐 婧,郑胜彪,朱金坤(安徽科技学院理学院,安徽凤阳 233100)[摘 要]本试验比较了有机溶剂浸提法和超声波法提取总黄酮的效果,选择提取率较高的超声波法来提取。
对料液比、超声时间和乙醇体积浓度对银杏中总黄酮提取效果的影响进行了单因子试验,并采用正交试验法找出最佳提取条件为料液比1g B 30mL 、超声时间30min 、乙醇浓度70%。
采用紫外可见分光法检测黄酮类化合物的含量,不加显色剂,直接以258nm 作为最大吸收波长。
结果表明,银杏中总黄酮的平均含量稳定在2177%,精密度的RSD 为01302%,该方法的平均回收率为10013%。
本试验方法样品处理简单,准确度高,精密度好,适合于银杏叶中总黄酮的提取和测定。
[关键词]银杏叶;黄酮;正交试验[中图分类号]R284[文献标识码]A[文章编号]1008-178X(2011)05-0063-05[收稿日期]2011-07-19[作者简介]唐 婧(1982-),女,安徽马鞍山人,安徽科技学院理学院助教,从事天然产物分析研究。
银杏(Ginkgo biloba L 1)又名公孙树,是我国的特产植物,其叶中含有丰富的的黄酮类化合物。
黄酮类化合物具有改善心脑血管循环、抵制血小板活化因子、降低胆固醇、抗病毒、防癌抗癌以及清除自由基等功效[1-2]。
我国拥有世界银杏树资源的70%以上,其提取方法常见报道。
通过对银杏叶中黄酮类化合物最佳提取条件的研究,可提高叶片黄酮提取率,最大化地实现银杏叶的药用和经济价值,使我国丰富的银杏树资源得到更加有效的利用。
本实验以芦丁为对照品。
芦丁(Rutin),又称芸香甙(Rutioside),属于黄酮苷类化合物,具有多种药用、生理活性作用,临床上用于治疗各种因毛细血管脆性增加而引起的出血性疾病[3],如高血压等。
银杏叶中黄酮类化合物提取研究
编号：（）字号本科生毕业设计（论文）题目：银杏叶中黄酮类化合物的提取工艺研究姓名：学号：班级：二〇一一年六月中国矿业大学本科生毕业设计姓名：学号：学院：材料科学与工程学院专业：材料科学与工程设计题目：银杏叶中黄酮类化合物的提取工艺研究专题：指导教师：职称：二O一一年六月徐州中国矿业大学毕业设计任务书学院材料科学与工程专业年级任务下达日期：2011年3月1日毕业设计日期：2011年3月1日至2011年6月15日毕业设计题目：银杏叶中黄酮类化合物的提取工艺研究毕业设计主要内容和要求：银杏叶中除含有黄酮类化合物外，还含有大量的蛋白质、鞣质、糖类和多酚类等水溶性物质。
黄酮类化合物在有机溶剂中溶解度较高，可以利用有机溶剂对黄酮类化合物进行提取。
研究表明，实验条件和工艺参数对于银杏中的黄酮类化合物的提取率具有显著的影响。
本论文主要研究了银杏叶黄酮类化合物的工艺参数，讨论试验结果得出最佳的提取工艺。
毕业设计任务如下：1 查阅有关国内外文献资料，了解银杏的营养价值，学习银杏中有关黄酮提取的研究现状和常用的提取方法，具体研究黄酮类化合物的有机溶剂萃取方法。
完成开题报告和毕业论文的综述部分（至少30篇文献，其中英文文献不少于5篇）。
1）了解银杏的历史，营养价值，药用价值。
2）了解银杏应用的历史，应用现状，和银杏的应用发展前景。
3）学习提取银杏中黄酮类化合物的常用方法，研究现状和前沿的研究方向。
4）研究本课题的目的和意义。
2 根据查阅文献结果，确定具体采用的实验方法，规划好实验流程做好实验设计。
购买实验所需仪器和药品，对实验结果进行分析总结，1）根据所查文献，设计实验方案，根据方案确定实验流程。
2）购买实验所需的药品和实验仪器，根据拟定的实验方案进行尝试性实验。
3）研究不同溶剂浓度，浸取温度，料液比，浸取温度对黄酮产量的影响。
4）对于通过实验得到的黄酮进行标定，得出最佳的实验方案。
3 翻译一篇与本课题密切相关的英文文献。
银杏黄酮制备实验
实验四、银杏黄酮的提取与检测一、实验目的：1、了解黄酮类物质的分离提取和检测方法。
2、了解大孔吸附树脂的特性和在生化分离中的应用。
二、实验原理：1、提取原理溶剂加到原料中进行提取的过程中，由于扩散、渗透作用，逐渐通过细胞壁透入细胞中，溶剂进入细胞后溶解可溶性物质，造成了细胞内外浓度差，于是细胞内的浓溶液不断向外扩散，溶剂又不断进入植物细胞中，可溶性成分不断被提取出来，如此多次反复，直到细胞内外浓度相等，达到动态平衡为止。
2、大孔吸附树脂纯化原理：大孔吸附树脂是一种具有多孔立体结构人工合成的聚合物吸附剂，是在离子交换剂和其它吸附剂应用基础上发展起来的一类新型树脂，为用于固体萃取而设计。
是依靠它和被吸附的分子（吸附质）之间的范德华引力，通过它巨大的比表面进行物理吸附而工作的。
大孔吸附树脂吸附能力高，易解吸，内部微孔即多又大，表面积也大，具有较多的活性中心，使离子、分子扩散速率增大，交换速度加快，在使用上可以缩短生产周期，提高效率，而且大孔吸附树脂可以进行再生重复使用，因此使生产成本大为降低，适于工业化生产。
3、银杏黄酮含量的分光光度法测定原理黄酮类化合物的测定使用较广泛的是络合—分光光度法，该法的基本原理是，黄酮类化合物分子结构中，凡在C 3或C 5位上有羟基，都会与铝盐形成有颜色的配位化合物，见图：O O OAl 2+O OOAl2黄酮和铝盐的络合物芦丁因此，银杏叶中的黄酮类化合物包括单黄酮、双黄酮和黄酮苷都能与铝盐形成络合物，比色测定结果是总黄酮含量。
硝酸铝络合分光光度法测定总黄酮的原理为:在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在条件下,黄酮类化合物与铝盐生成螯和物,加入氢氧化钠溶液后显红橙色,在500波长处有吸收峰且符合定量分析的比尔定律,一般与芦丁标准系列比较定量.如果细说,硝酸铝显色法是先用亚硝酸钠还原黄酮，再加硝酸铝络合，最后加氢氧化钠溶液使黄酮类化合物开环，生成2’羟基查耳酮而显色.它的显色原理发生在黄酮醇类成分邻位无取代的邻二酚羟基部位,不具有邻位无取代邻二酚羟基的黄酮醇类成分加入上述试剂时是不显色的.三、仪器：电子天平（0.1mg ）、紫外分光光度计、恒温水浴摇床、电热恒温水浴锅、索氏提取器、电热恒温干燥箱、微波炉、超声波破碎仪、超声波清洗机、旋转蒸发器、循环水式真空泵、布式漏斗、真空抽率瓶、真空泵。
银杏叶黄酮的提取纯化工艺研究
1、实验材料
银杏叶：采集于健康无病虫害的银杏树，清洗干净后晾干备用。
Hale Waihona Puke 2、提取方法将清洗晾干的银杏叶粉碎成细粉，称取一定量的细粉加入到80%乙醇溶液中， 在60℃下进行回流提取，每次提取时间为1小时，提取3次。将提取液过滤，回 收乙醇，并加入适量水稀释至适当浓度备用。
3、纯化方法
采用大孔吸附树脂法进行纯化。将备用液通过大孔吸附树脂柱，用水洗脱至洗 脱液接近无色，再用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇并加入适量水稀释 至适当浓度备用。
参考内容
引言
银杏叶是一种具有多种生物活性的天然植物，其提取物中含有丰富的黄酮类化 合物，如儿茶素、黄酮醇、黄烷醇等。这些化合物具有显著的抗氧化、抗炎、 抗肿瘤等生物活性。因此，研究银杏叶总黄酮的提取纯化及其抗氧化性能具有 重要意义。本次演示旨在探讨银杏叶总黄酮的提取纯化方法及其抗氧化性能。
材料与方法
4、抗氧化性能测定
采用DPPH自由基清除法测定抗氧化性能。取适量纯化后的银杏叶总黄酮溶液与 等体积的DPPH溶液混合，室温下放置30分钟，在517nm处测定吸光度A1。同时 以无水乙醇为空白样品的吸光度A0进行对照。以Vc为阳性对照。根据公式：清 除率=（A0-A1）/A0×100%，计算银杏叶总黄酮对DPPH自由基的清除率。
结论
本研究成功地探索了一种高效提取纯化银杏叶总黄酮的方法，并对抗氧化性能 进行了研究。实验结果表明，采用80%乙醇回流提取和过大孔吸附树脂纯化可 以得到高纯度的银杏叶总黄酮，并且对DPPH自由基具有较强的清除作用。这一 发现为开发高效安全的抗氧化药物提供了新的思路和方法。
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银杏叶黄酮的提取纯化工艺研究
01 引言
03 研究目的 05 结果与讨论
(完整版)银杏叶黄酮类化合物的提取研究进展
银杏叶黄酮类化合物的提取研究进展银杏树Ginkgo biloba L.又称白果树、公孙树，是我国古老的树种之一，具有“活化石”的美称。
由于其生长规律特殊，抗病能力强而受到国内外的重视。
有关银杏叶的有效成分及疗效的研究日益受到重视，已开发出保健品、化妆品、药品等多达100多种，形成国际市场上销售额20多亿美元的新兴产业。
银杏叶的化学成分有黄酮类、萜类、内酯类、酚酸类以及生物碱、聚异戊二烯等化合物。
黄酮类为银杏叶的主要有效成分之一，含量随品种、产地、树龄、不同的采摘时间而不同。
黄酮类化合物优异的抗氧化、抗病毒、防治心血管疾病、增强免疫力等作用而受世人瞩目。
药学研究表明，有38种银杏黄酮类化合物从银杏叶中分离出来，其中黄酮类化合物主要有3类：黄酮(醇)及其昔28种：如槲皮黄酮等；黄烷醇类：如儿茶素等4种；双黄酮：如白果双黄酮等6种(儿茶素)。
1 银杏叶黄酮的提取分离1.1 溶剂提取法目前国内外掀起了研究开发银杏叶热。
国内银杏叶常用溶剂例如乙醇、丙酮、醋酸乙酯、水以及某些极性较大的混合溶剂浸泡银杏叶进行提取，溶剂提取方法一般有：煎煮、冷浸、回流、渗施等经典方法。
1.1.1 水提取树脂分离法有关水浸提银杏黄酮苷的文献报道不多。
肖顺昌等报道了用l6倍量沸水分3次浸提银杏叶，得到的水溶液，经冷藏、分离杂质得溶液，然后用D101型吸附树脂吸附得到浓度达38％的黄酮苷。
胡敏等研究水浸提银杏叶黄酮苷并用树脂精制的工艺，探讨了影响黄酮苷浸出的主要因素以及最适的精制方法，结果表明：水为提取剂，在90℃水溶回流浸提银杏叶2次，4h／次，经沉淀，过滤，浓缩后，用树脂精制、冷冻干燥后，制得总黄酮苷含量高的提取物、产品得率为银杏叶干重的 1.2％-1.5％。
水提取成本低，没有任何环境污染，产品安全性高，但是水对有效成分的选择性差，提取率低。
1.1.2 有机溶剂浸提法一般的有机溶剂浸提法。
田呈瑞等研究了乙醇浸提银杏叶黄酮的方法。
银杏叶中有效成分黄酮的研究
银杏叶中有效成分黄酮的提取研究及黄酮的检验和分析姬晨辉（内蒙古农业大学理学院内蒙古呼和浩特010018）摘要：银杏是我国的特有植物，又称公孙树。
银杏叶为最古老的中生代孑遗植物银杏的干燥叶。
银杏有裸子植物活化石之称。
据《本草纲目》记载，银杏果具有敛肺平喘、止遗尿、白带的作用。
在医药上有很高的利用价值。
银杏叶的提取方法有有机溶剂萃取法、水提取法、碱性稀醇或碱性水提取法、超临界萃取法、超声波提取法、酶法等。
本文采取乙醇提取总黄酮的方法，用分光光度法测定总黄酮的含量。
关键词：银杏叶总黄酮乙醇含量测定Abstract: Ginkgo biloba is our country's endemic plants, also known as maidenhair tree. Ginkgo biloba is the oldest Mesozoic relict plant Ginkgo biloba dried leaves. Ginkgo has gymnosperms living fossil. According to the "Compendium of Materia Medica" records, ginkgo fruit with convergence lung asthma, only enuresis, vaginal discharge effect. In medicine has a high value in use. Ginkgo biloba extract organic solvent extraction method, water extraction, dilute alkali or alkaline aqueous alcohol extraction, supercritical extraction, ultrasonic extraction, enzymatic and so on. This paper adopts ethanol extract flavonoids method, using spectrophotometric determination of total flavonoids.Key word s: Ginkgo biloba Flavonoids Ethanol Determination1 材料与方法1.1 试验材料银杏叶采集于自然生长的银杏树叶、75%酒精、石油醚、旋转蒸发器、丙酮、4～5碳烷基醇、醋酸酯1.2 试验方法1.2.1 银杏叶总黄酮提取率计算方法银杏叶总黄酮提取率（%）=提取液中心黄酮的重/提取所用银杏叶中总黄酮含量*100%。
银杏叶提取天然活性黄酮工艺研究
ｌ ６一
Ｚ ＨＥ Ｊ Ｉ ＡＮＧ ＣＨＥ ＭＩ Ｃ ＡＬ Ｉ ＮＤＵ Ｓ Ｔ Ｒ Ｙ ０ １ ３ ）
．
银杏 叶提取天然活性 黄酮 工艺研究
齐 建 衡 朝 晖
（ 周 口市 质 量 技 术 监 督 检 验 测 试 中心 ， 河南 周 口 ４ ６ ６ ０ ０ ０ ）
２ ０ １ ３ 年 第４ ４ 卷 第１ ０ 期
２ ． １ ． １ 对黄 酮 类 化 合 物 的 红 外表 征
渐｝ ２化 工
进行压片 ， 其红外光谱如 图 ｌ 所示 ：
一 １ ７ —
合 一 起 放 置研 钵 中研 磨 ， 待 研 细 匀 后 在 压 片 机 中
取 少量 目标 产 物黄 酮类 化 合 物 与溴 化 钾 混
分光公 司） 。 １ ． ２ 实 验 步 骤
将 银杏 叶烘 干 ， 粉碎 ， 称取 ｌ ０ ｇ投 入 到 １ ０ ０ ｍＬ
０ ． ２ ％ 的 氢 氧 化 钠 溶 液 中 。然 后 在 ５ ０℃的 恒 温 水
杏 资源 进行 有效 的开发 和利 用 ， 其 中， 对 银 杏 黄
酮类 化 合物 提取 分 离 方法 的研 究 更 加值 得 科 研
２ 结 果 与 讨 论
２ ． １ 产 物 的表 征
有 毒杂质 等等 ， 限制 了提取 工艺 的推广 使用 。此
收 稿 日期 ： ２ ０ １ ３ — ０ ７ — ０ ５
作者简介 ： 齐建 （ １ ９ ７ ６ 一 ） ， 男， 河南 省 淮 阳 县 人 ， 工程师 ， 从事产品的质量检测。Ｅ － ｍ ａ ｉ ｌ ： ｌ ｉ ｑ ｕ ａ ｎ ｌ ｉ ａ ｎ ｇ １ ９ ７ ８ ＠１ ６ ３ ． ｃ ｏ ｍ。
一
银杏叶中总黄酮提取工艺研究
０． Ｏ・
宋 ０ ． 督
Ｏｔ
２ １２ 标 准 曲 线 的 绘 制 分 别 配 制 ６种 芦 丁 标 ．．
０．
准溶 液 于 ５ ０ ｎ 波 长 下 测定 吸 光 度 ， １ ｍ 乙醇 的体 积分 数为 ６ 的试 剂为空 白参 比液 ， 验 数据 见 ０ 试
表 ２ 。
分 析纯 。
１ ２ 试 验 方 法 ．
大， 而水 又将 降低水 提 液表 面 张力 ， 摇 后产 生持 振
久性 泡沫 而影 响 分离 ， 们 则 采用 不 同浓 度 的 乙 我
主要有 ：
１２ １ 总黄 酮含 量 的测 定 ． ．
醇 水 溶 液 提 取 所 测 样 品 中 的 银 杏 叶 黄 酮 。 根 据 银 杏 叶 中 主 要 活 性 成 分 黄 酮 的 特 性 ， 照 药 舆 原 有 依 的 提 取 方 法 ， 用 加 热 回 流 提 取 ， 单 因 素 试 验 的 采 在 基础 上 ， 出 影 响 因素 主要 有 ： 醇 的体 积 分数 、 得 乙 温 度 、 液 质 量 浓 度 、 取 时 问 。 采 用 Ｉ （ 正 料 提 ３） 交 表 优 化 提 取 条 件 ， 点 考 察 上述 四个 素 ， 总 重 以
仪 器 ：２ ７ １型 分 光 光 度 计 、 氏 提 取 器 、 分 索 万
之 一 电子天 平 。
１ ２ ２ 试验 设计 黄 酮类 化合 物 的提取 、 离通 ．． 分
常 以 甲醇 或 水 为 主 要 提 取 剂 ， 由 于 甲 醇 其 毒 性 但
芦 丁标 准 品 ： 化试剂 ， 海试剂 二 厂 ； 生 上 乙醇 ：
酮 含量 。
银 杏 叶 ： ０ ９年 ９月 采 于 陕 西 杨 凌 ， 龄 为 ２０ 树 ｌ ， ０ａ 每次采 收 的银 杏叶 都及 时放 人 ６ 一７ Ｏ Ｏ℃ 的 干 燥箱 中 干燥 ２ ， 粉 碎 装 人 广 口瓶 ， 处 保 ４ｈ 经 暗 存， 供提 取 、 测定 黄酮 用 。 ，