离体蟾蜍心脏的实验研究
5×10-6 mol/L Pro+6×10-7 mol/L Adr
注：* p<0.05,**p<0.01 vs control; # p<0.05,## p<0.01 vs 9×10-8M ACh group
2.5.2 无钙任氏液1ml替换插管内的任氏液，心搏曲线稳定后记录45s。
2.5.3 用任氏液洗脱3次，加入1ml任氏液，待曲线稳定45s后，向灌流液 中加 0.045mol/L CaCl2溶液25l，心搏曲线稳定后记录45s 。
2.5.4 用任氏液洗脱数次，曲线基本恢复后，加入1ml任氏液，待曲线 稳定45s后，在任氏液中加 0.2 mol/L KCl溶液20l，心搏曲线稳定 后记录45s 。
结束阶段： •1人负责数据测量 •1人负责记录 •1人负责整理器械、本组卫生
实验目的(Objectives)：
• 了解离体心脏灌流的方法 • 观察钾、钙离子浓度、肾上腺素、乙酰胆碱对离体蟾
蜍心脏活动的影响并探讨作用机制。
离体心脏灌流法
Straub法
八木氏法
Langendorff法
Langendorff
关于处理因素的实验效应问题
关于心脏收缩机制的问题
关于心脏舒张机制的问题
关于蟾蜍心脏的问题
关于离体蟾蜍心脏标本制备的问题
关于离体蟾蜍心脏Straub法灌流的问题
关于离体蟾蜍心脏灌流的非处理因素的问题
关于离体蟾蜍心脏功能观察指标的的问题 关于离体蟾蜍心搏动曲线对照与处理记录和的问题
关于实验注意事项的问题
2.4 稳定 扫描速度调整为5s/div。加1mL任氏液，稳定10min以上。 试验开始前，如前负荷小于1g，再调至1g稳定。
特别提示： 实验中 换能器连线 张力不能变
装置不能触 碰，吸管、 移液器不能 接触插管等
2.5 实验观察
2.5.1 向插管中加入1ml任氏液，心搏曲线稳定后记录正常的心搏曲线 45s。加任氏液25l，稳定45s后。
1 材料 (Materials)
1.1实验动物（laboratory animal) 中华蟾蜍指名亚种蟾蜍（Zhuoshan Toad）10只，雌雄不拘，体重82.5 ± 10.2g
婚垫 雄蟾
雄蟾 雌蟾
1 材料 (Materials)
1.2 药品与试剂 肾上腺素（ adrenaline hydrochloride）,乙酰胆碱 （ acetylcholine chloride ），普萘洛尔（propranolol hydrochloride ）,阿托品（atropine sulfate ），氯化钾，氯化钙， 任氏液（Ringer’s solution）。
CaCl2 0.0011 mol/L CaCl2 0.0121mol/L
量效关系
非单调性
机制的复杂性
KCl 0.0050 mol/L
KCl 0.0069 mol/L
假说…….
实验验证……..
人员分工
心脏插管阶段： •1人主做心脏插管 •1人配合心脏插管 •1人撰写或修改实验流程
实验阶段： •1人指挥：第1步做什么，该怎么做；第二步.. •1人管记录：数据记录长度、打标…… •1人管处理：加药、冲洗、加灌流液
讲台讨论Biblioteka •请用实验验证细胞外低钙抑制心脏的收缩和舒张 •请用实验验证细胞外轻度高钾抑制心脏的收缩和舒张 •请用实验验证乙酰胆碱介导M受体抑制心脏的收缩和舒张 •请用实验验证肾上腺素激动β受体加强心脏的收缩和舒张 实验设计要求：实验方法、数据记录、结果分析、结论
关于人员分工合作问题
关于观察指标的问题
1 材料 (Materials)
1.3 仪器和装置 RM6240多道生理信号采集处理系统(成都仪器厂）， JZJ01张力换能器(成都仪器厂）。
RM6240多道生理信号采集处理系统
张力换能器
2 方法(Methods)
2.1 仪器连接和参数 张力换能器接RM6240多道生理信号采集处理系 统第1通道, RM6240多道生理信号采集处理系统采样频率： 800Hz，时间常数：直流，滤波：30Hz，灵敏度：7.5g。调零。
动物尸体送动物中心 8. 实验报告于2013-5-4 前提交。
离体蟾蜍心脏的实验研究
Experimental Research of Isolated Toad Heart
陆源 （luyuan@)
浙江大学医学院
Discussion
5组提问 3组提问 1组提问
6组提问 4组回答 2组回答
n control perfusion
EST（g ）
control perfusion
heart rate （bpm） control perfusion
Ca2+ -free Ringer’s solution
Ca2+ 22×10-4mol/L Ringer’s solution
K+5.9×10-3mol/L Ringer’s solution
注意事项：
1. 组内人员分工明确 2. 实验开始前，要熟悉实验的每个步骤及注意环节 3. 标本制备结束，应立即清洗器械、清理桌面 4. 实验记录过程中，要避免碰撞、振动实验台和灌流装置 5. 数据测量完毕，在本组计算机上的“数据lab5-00/heart perfusion.xls 文
件中输入数据并保存。 6. 先完成实验的，组织本组同学讨论实验结果，准备在全班讨论时发言。 7. 值日：督查各组善后工作；扫地、拖地，凳子放整齐；清洁洗涤台、将
EST
EDT
关于实验结果的问题
EST
EDT
关于人员分工合作问题
CaCl2 0.0011 mol/L Ca2+ -free Ringer’s solution
CaCl2 0.0011 mol/L
假说……
CaCl2 0.0022 mol/L
实验验证……
CaCl2 0.0011 mol/L CaCl2 0.0056 mol/L
EST EDT
EST
EDT
+dT/dtmax -dT/dtmax
t-dT/dtmax
Tabl 1 Effects of adrenaline,aceytlcholine, potassium and calcium ions on isolated toad heart
Groups
EDT（g）
2.5.5 用新鲜任氏液换洗数次，加入1ml任氏液，待曲线稳定后记录 45s ，在任氏液中加6×10-6 mol/L 的 acetylcholine （ACh）溶液 15l，心搏曲线稳定后记录45s 。再加2×10 –4 mol/L atropine （Atr）15 l，心搏曲线稳定后记录45s 。
2.5.6 用任氏液洗脱数次，曲线基本恢复后，加入1ml任氏液，待曲线 稳定45s后，在任氏液中加6×10-5 mol/L 的 adrenaline（Adr）溶 液10l，心搏曲线稳定后记录45s 。
2.5.7 用任氏液洗脱数次，收缩曲线基本恢复后，加入1ml任氏液， 待曲线稳定45s后，在任氏液中加5×10-4 mol/L propranolol （Pro）溶液10l，心搏曲线稳定后记录45s ，再加入6×10-5 mol/L 的 Adr 溶液10l，心搏曲线稳定后记录45s 。
本堂课安排： （8学时，360min）
1.离体蟾蜍心脏的实验研究（7学时） • 讨论（30min） •离体心脏灌流实验方法和要求讲解（心脏插管视频）（30min） •同学们实验和数据统计（180min） •讨论（20min） 2.高仿实验：家兔循环与泌尿系统综合实验（1学时） •实验方法和要求讲解（5min）、学生实验（40min） •实验结果讨论 •实验报告讲评
（“实验\生理科学实验\离体心脏灌流”菜单进入）
2.2 离体蟾蜍心脏标本制备 蟾蜍毁脑脊髓，蟾蜍仰卧于蛙板，打开 蟾蜍胸腔，暴露心脏，结扎下腔静脉，靠头端结扎左主动脉， 在左、右主动脉下穿线，在左主动脉根部剪一斜口，将插管插 入动脉圆锥， 在心室收缩时将插管插入心室，结扎固定，游离 心脏。
2.3 心脏与换能器连接 将蛙心插管固定在夹具上，用与张力换能器连 接是蛙心夹在心室舒张期夹住心尖，调节微调使心脏舒张末期张力 至1g。
2.6 数据测量与统计分析 2.6.1 数据测量 测量各项处理前后的心率（heart rate，HR)、心脏舒张
末张力（end diastolic tension，EDT) 、心脏收缩末期张力(end systolic tension，EST)。 2.6 .2 统计方法 结果以x s 表示，统计学分析采用Student t test方法。
4. 讨论 (discussion) 对实验结果逐一进行分析讨论，简明机理 结论 对实验中出现的异常情况进行分析 对实验改进意见和建议
5. 参考文献(references)
[1] 苏静怡.心脏：从基础到临床.北京：北京医科大学、中国协和医科大学 联合出版社，1999.4
[2] 陈主初.病理生理学.北京：人民卫生出版社，2001.8 [3] 姚泰.生理学.北京：人民卫生出版社，2002.4
离体蛙心实验实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 观察离体蛙心的生理特性，了解心脏在离体条件下的收缩和舒张规律。
2. 探讨神经递质、激素等对离体蛙心功能的影响。
3. 掌握离体蛙心灌流实验的操作方法。
二、实验原理离体蛙心灌流实验是研究心脏生理学的重要方法之一。
在实验过程中，通过灌流装置向蛙心提供氧气和营养物质，同时可以观察心脏的收缩和舒张情况。
实验中，可以通过改变灌流液成分、温度、pH值等条件，观察心脏功能的改变，从而了解心脏生理特性及影响因素。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍、蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、氯化钙、肾上腺素、乙酰胆碱等。
2. 实验仪器：手术显微镜、蛙心灌流装置、注射器、秒表、滴管等。
四、实验方法与步骤1. 准备工作：将蟾蜍置于蛙板上，用手术剪剪开胸腔，暴露心脏。
用蛙心夹固定心脏，并连接灌流装置。
2. 灌流液准备：配制任氏液、氯化钙溶液、肾上腺素溶液、乙酰胆碱溶液等。
3. 实验分组：将实验分为对照组、氯化钙组、肾上腺素组、乙酰胆碱组。
4. 实验步骤：a. 对照组：灌流任氏液，观察心脏的收缩和舒张情况。
b. 氯化钙组：灌流氯化钙溶液，观察心脏功能的改变。
c. 肾上腺素组：灌流肾上腺素溶液，观察心脏功能的改变。
d. 乙酰胆碱组：灌流乙酰胆碱溶液，观察心脏功能的改变。
5. 记录数据：观察心脏的收缩和舒张频率、收缩幅度等，并记录数据。
五、实验结果与分析1. 对照组：心脏呈现规律的收缩和舒张，收缩幅度适中，频率约为60次/分钟。
2. 氯化钙组：心脏收缩幅度明显增大，频率加快，收缩时间延长，舒张时间缩短。
3. 肾上腺素组：心脏收缩幅度增大，频率加快，收缩时间延长，舒张时间缩短。
4. 乙酰胆碱组：心脏收缩幅度减小，频率减慢，收缩时间缩短，舒张时间延长。
六、实验结论1. 离体蛙心在灌流条件下可以维持一定时间的收缩和舒张功能。
2. 氯化钙和肾上腺素可以增强离体蛙心的收缩功能，使收缩幅度增大、频率加快。
离体心脏实验报告
一、实验目的1. 掌握离体心脏灌流技术的操作方法。
2. 观察和分析不同理化因素对离体心脏活动的影响。
3. 理解心脏生理学的基本原理，如离子浓度、温度、酸碱度、激素等对心脏功能的影响。
二、实验原理心脏的正常节律性活动依赖于内环境的相对稳定。
改变离体心脏灌流液的理化成分，会影响心肌细胞的兴奋性、自律性、传导性和收缩性，从而影响心脏的舒缩活动。
本实验通过改变灌流液中的离子浓度、温度、酸碱度、激素等，观察对离体心脏活动的影响，进一步理解心脏生理学的基本原理。
三、实验材料与仪器1. 实验动物：蟾蜍2. 实验药品：任氏液、NaCl溶液、CaCl2溶液、KCl溶液、乙酰胆碱溶液、肾上腺素溶液、乳酸溶液、NaHCO3溶液3. 实验仪器：BL-420生物信号分析系统、张力换能器、铁支台、试管夹、蛙类手术器械、蛙心插管、滴管、大烧杯、棉线、双凹夹、滑轮四、实验步骤1. 暴露心脏：取蟾蜍一只，用蛙类手术器械暴露心脏。
2. 心脏插管：将蛙心插管插入心脏，用棉线固定。
3. 摘取心脏：用镊子将心脏从蟾蜍体内取出，置于装有任氏液的培养皿中。
4. 连接仪器：将张力换能器连接到心脏插管，并通过BL-420生物信号分析系统进行数据采集。
5. 实验分组：将实验分为以下几组：空白对照组：用任氏液灌流心脏。
Na+浓度改变组：用不同浓度的NaCl溶液灌流心脏。
K+浓度改变组：用不同浓度的KCl溶液灌流心脏。
Ca2+浓度改变组：用不同浓度的CaCl2溶液灌流心脏。
乙酰胆碱组：用乙酰胆碱溶液灌流心脏。
肾上腺素组：用肾上腺素溶液灌流心脏。
乳酸组：用乳酸溶液灌流心脏。
NaHCO3组：用NaHCO3溶液灌流心脏。
6. 数据采集：观察并记录每组心脏的舒缩节律、幅度和持续时间。
7. 结果分析：分析不同理化因素对离体心脏活动的影响。
五、实验结果1. Na+浓度改变组：随着Na+浓度的增加，心脏的舒缩幅度和持续时间逐渐增加，但超过一定浓度后，心脏活动减弱。
离体蛙心灌流实验报告
一、实验目的1. 学习离体器官（蛙心）灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 掌握实验操作技巧，提高实验技能。
二、实验原理离体蛙心灌流实验是生理学实验中的一个重要实验，通过人工灌流的方法，使离体蛙心在适宜的生理条件下保持正常节律性收缩和舒张。
实验原理如下：1. 蛙心无营养性血管，离体后采用人工灌流的方法，仍可保持其新陈代谢，心脏仍能有节律的自动收缩、舒张，并维持较长时间。
2. 心肌的营养是通过心脏内膜液体的直接渗透而得。
3. 通过改变灌流液中的离子浓度、pH值等理化因素，可以观察蛙心活动的变化，了解理化因素对心脏活动的影响。
三、实验对象与用品1. 实验对象：蟾蜍2. 实验用品：斯氏蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、长滴管、铁支架、生理盐水、KCl溶液、CaCl2溶液、肾上腺素、乙酰胆碱等。
四、实验方法与步骤1. 实验准备：将蟾蜍仰卧固定于蛙板上，用剪刀剪开胸壁，暴露心脏。
用蛙心夹夹住蛙心尖部，固定在蛙板上。
2. 动脉插管：在主动脉分支下预埋一条棉线，结扎主动脉左支，剪一向心斜切口，插入斯氏蛙心套管，送入动脉球。
3. 连接实验装置：将蛙心套管与二道仪相连，记录蛙心活动。
4. 灌流液准备：配制正常灌流液（任氏液）和实验灌流液（分别含有不同离子浓度的生理盐水、KCl溶液、CaCl2溶液、肾上腺素、乙酰胆碱等）。
5. 实验操作：a. 将蛙心置于正常灌流液中，观察蛙心活动，记录心率、收缩幅度等指标。
b. 分别将蛙心置于不同实验灌流液中，观察蛙心活动的变化，记录心率、收缩幅度等指标。
c. 对比分析不同灌流液对蛙心活动的影响。
五、实验结果与分析1. 正常灌流液条件下，蛙心以正常节律收缩和舒张，心率适中，收缩幅度适中。
2. 在0.65%NaCl溶液替换任氏液后，蛙心收缩幅度稍微减小，收缩力稍微减弱。
分析原因：相当于细胞外环境中缺乏Ca2+，动作电位2期Ca2+内流减少，胞浆中Ca2+减少，心肌收缩力降低。
夹竹桃对离体蟾蜍心脏的作用
实验十夹竹桃对离体蟾蜍心脏的作用【实验目的】观察夹竹桃浸出液（含强心苷成份）对离体蟾蜍心脏的正性肌力作用和毒性作用。
【实验原理】强心苷能选择性地作用于心肌，加强心肌收缩力，并能减慢窦性频率。
强心苷是一类治疗指数较低的药物，一般治疗量已接近中毒量的60%，故较易发生过量中毒。
【实验动物】蟾蜍【药品与器材】任氏液、低钙任氏液、1%夹竹桃任氏液（每ml 相当于夹竹桃叶0.01g）蛙板×1、蛙足钉×4、探针、小剪刀、小无齿镊、蛙心套管、蛙心夹、铁支架、双凹夹×2、试管夹、生物机能实验系统、张力换能器、吸管×3、小烧杯×2。
【实验步骤】1．夹竹桃液的制备取夹竹桃25 g，漂洗后用纱布擦干，剪碎，置广口瓶内，加70%乙醇100 ml，室温浸泡48 小时，并经常振摇。
用棉花过滤，再用70%乙醇适量洗叶片，挤压干，得滤液，滤液在水浴锅上蒸干，得粗醇浸出液。
用适量任氏液溶解浸出物，用滤纸过滤，最后用任氏液加至250 ml，即成10%夹竹桃任氏液置冰箱保存备用。
（用时稀释10倍）2．手术取一只蟾蜍，双毁髓后背位置于蜡盘中，安上次实验方法暴露心脏仔细识别心脏周围的大血管。
在左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥远端处结扎（动物个体小时，结扎位置可靠上些）。
再从左右两主动脉下方穿一线，并打一活结备用。
左手提起主动脉上的结扎线，右手用眼科剪在结扎线下方，沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。
选择大小适宜的蛙心套管，然后将盛有少量（套管内2～3cm高度）任氏液（内加入一滴肝素溶液）的斯氏蛙心套管，又开口处插入动脉圆锥当套管尖端到达动脉圆锥基部时，应将套管稍稍后腿，使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进，经主动脉瓣插入心室腔内（于心室收缩时插入，但不可插得过深，以免心室壁堵住套管下口）。
此时可见套管中血液冲入套管，并使液面随心脏搏动而上下移动，表明操作成功（否则需退回并重新插入）。
用滴管吸去套管中的血液，更换新鲜任氏液。
生理实验报告蟾蜍结论(3篇)
第1篇一、实验目的1. 观察蟾蜍心脏的兴奋传导过程。
2. 研究心脏兴奋在心房和心室之间的传导特点。
3. 了解心脏兴奋传导在心脏搏动中的作用。
二、实验材料与仪器1. 实验材料：蟾蜍、生理盐水、手术器械、电极、放大器、示波器、记录仪等。
2. 实验仪器：解剖显微镜、手术显微镜、电生理记录系统、电脑等。
三、实验方法1. 蟾蜍麻醉后，在显微镜下解剖心脏，暴露心房和心室。
2. 将电极插入心房和心室，记录心房和心室的电活动。
3. 通过电生理记录系统，观察心房和心室兴奋传导的过程。
4. 分析心房和心室兴奋传导的特点，包括传导速度、传导途径等。
四、实验结果1. 心房和心室在兴奋传导过程中存在明显的差异。
2. 心房兴奋传导速度较快，传导途径相对简单。
3. 心室兴奋传导速度较慢，传导途径较为复杂。
4. 心房兴奋传导主要经过房室结，然后传递到心室。
5. 心室兴奋传导经过左右束支和浦肯野纤维，最终导致心室收缩。
五、实验结论1. 心脏兴奋传导在心脏搏动中起着至关重要的作用。
2. 心房兴奋传导速度快，途径简单，有利于心脏快速充满血液。
3. 心室兴奋传导速度慢，途径复杂，有利于心脏有效射血。
4. 房室结是心房和心室兴奋传导的关键结构，其功能异常可能导致心律失常。
5. 通过本实验，我们了解了蟾蜍心脏兴奋传导的机制，为研究心脏疾病提供了理论依据。
六、实验讨论1. 本实验通过观察蟾蜍心脏兴奋传导过程，揭示了心脏搏动的生理机制。
2. 实验结果显示，心房和心室兴奋传导存在明显的差异，这与心脏功能相适应。
3. 房室结在心房和心室兴奋传导中起着关键作用，其功能异常可能导致心律失常。
4. 本实验为研究心脏疾病提供了理论依据，有助于进一步探讨心脏疾病的发病机制和治疗方法。
七、实验展望1. 未来可以进一步研究心脏兴奋传导的分子机制，揭示兴奋传导过程中相关蛋白的功能。
2. 可以通过动物实验，观察心脏兴奋传导在不同生理和病理状态下的变化。
3. 可以结合临床研究，探讨心脏疾病与兴奋传导之间的关系，为临床诊断和治疗提供新思路。
生理蟾蜍心跳实验报告
一、实验目的1. 观察蟾蜍心脏的结构特点。
2. 学习心脏生理实验的基本操作技能。
3. 了解蟾蜍心脏的起搏点、传导系统和心跳节律。
4. 掌握记录和分析心跳数据的方法。
二、实验原理蟾蜍的心脏属于两心房一心室结构，由静脉窦、心房、心室和传导系统组成。
静脉窦是心脏的起搏点，心脏的跳动节律由静脉窦控制，并通过传导系统传递到心房和心室。
通过观察蟾蜍心脏的结构和功能，可以了解心脏的基本生理机制。
三、实验材料与仪器1. 实验动物：蟾蜍一只2. 仪器设备：蛙板、手术剪、镊子、探针、任氏液、生理盐水、张力传感器、支架、双凹夹、秒表、滴管、培养皿（或小烧杯）、纱布、棉线、记录仪、计算机等。
四、实验步骤1. 准备实验材料：将蟾蜍置于蛙板上，用手术剪剪开胸壁，暴露心脏。
2. 暴露心脏：用镊子提起心脏，用探针分离心脏与周围组织，暴露心脏各部分。
3. 连接仪器：将张力传感器固定在心脏上，通过支架连接到记录仪和计算机。
4. 调整环境：将实验环境调整为恒温、低光照条件，保持蟾蜍安静。
5. 观察心脏结构：仔细观察心脏各部分结构，记录心房、心室、静脉窦等部位的位置和形态。
6. 记录心跳数据：打开记录仪，观察心跳节律，记录心跳次数、心跳间隔等数据。
7. 分析数据：根据记录的数据，分析蟾蜍心脏的起搏点、传导系统和心跳节律。
五、实验结果与分析1. 心脏结构：蟾蜍心脏由静脉窦、心房、心室和传导系统组成。
静脉窦位于心脏前端，是心脏的起搏点；心房和心室分别位于静脉窦后端，心房位于心室上方。
2. 心跳节律：蟾蜍心脏的跳动节律由静脉窦控制，心房和心室的跳动顺序为静脉窦、心房、心室。
3. 心跳数据：根据记录的数据，蟾蜍的心跳次数约为每分钟120次，心跳间隔约为0.5秒。
六、实验结论1. 蟾蜍心脏的结构和功能与哺乳动物的心脏相似，具有一定的代表性。
2. 静脉窦是蟾蜍心脏的起搏点，控制着心跳节律。
3. 心脏传导系统将起搏信号传递到心房和心室，使心脏有规律地跳动。
某些因素对离体蛙心心脏活动的影响实验报告
产品年终工作总结
主要内容
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相关理论知识
正常的蛙心能按静脉窦的节律性自动产生兴奋，心脏的自动节律性活动，需要有一个合适的理化环境。 蟾蜍心脏离体后，用任氏液灌流，在一定时间内仍能保持节律性兴奋和收缩活动。由于心脏的正常活动还有赖于内环境因素的相对稳定，改变灌流液的成分可引起心脏活动的改变。
负性变时等效应。
心交感神经与去甲肾上腺素
心交感神经节后纤维释放的递质是去甲肾上
腺素，激动心肌细胞膜上的ß受体，产生正性变
力、正性传导、正性变时等效应。
相关理论知识
实验目的 1.本实验的目的是学习离体蛙心的灌流方法。 2.用离体蛙心灌流的方法观察：
① K+、Ca2+ ② 酸、碱度 ③ 肾上腺素（E） 乙酰胆碱（Ach）
破坏脑和脊髓 暴露心脏
实验步骤
一、离体蟾蜍心脏标本制备 1.观察心脏的解剖结构 （腹面） （背面）
实验步骤 一、离体蟾蜍心脏标本制备 蛙心插管 1.1 在主A干下穿一线打一松结；在左主A下再穿一线结扎。
”
实验步骤 一、离体蟾蜍心脏标本制备 1.蛙心插管 1.2 在主动脉根部剪一 斜口，将插管插入动脉 圆锥， 在心室收缩时 将插管插入心室，结扎 固定。
兴奋-收缩耦联↑
收缩力↑
cAMP
结果分析与讨论
5. 1:10000 Ach灌流
与心肌M受体结合
K+外流↑, Ca2+内流↓
E-C耦联↓
收缩力↓
最大复极电位↑ 4期K+外流↑
自律性↓
心率↓
[Ca2+]i↓
离体蟾蜍心脏收缩能力和心率的实验研究实验报告
实验报告课程名称：生理科学实验实验类型：动物实验实验项目名称：离体蟾蜍心脏收缩能力和心率的实验研究同组学生姓名：指导老师：实验12 离体蟾蜍心脏收缩能力和心率的实验研究（浙江大学医学院2010级临床医学专业1B班第5组，浙江，杭州，310058）【摘要】目的了解离体心脏灌流的方法，观察钾、钙离子浓度、肾上腺素、乙酰胆碱对离体蟾蜍心脏活动的影响并探讨作用机制。
方法取离体蟾蜍蛙心，分别用任氏液、无钙、高钙、高钾、乙酰胆碱、肾上腺素等灌流。
结果蟾蜍离体心脏在1ml任氏液加25ul任氏液灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.84±0.16，0.81±0.17，两者有显著差异；1ml任氏液加25ul任氏液灌流前后，终末收缩张力(g)分别为3.95±1.53， 3.89±1.49，两者无显著差异；1ml任氏液加25ul任氏液灌流前后，心率（次/分）分别为49.00±6.09，48.90±6.81，两者无显著差异。
蟾蜍离体心脏在无钙任氏液灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.80±0.16，1.18±0.29，两者无显著差异；无钙任氏液灌流前后，终末收缩张力(g)分别为3.83±1.38，1.58±0.42，两者有显著差异；无钙任氏液灌流前后，心率（次/分）分别为48.50±5.95，54.60±14.84，两者无显著差异。
蟾蜍离体心脏在22×10-4mol/L高钙溶液灌流前后，终末舒张张力(g)分别为0.61±0.23，0.53±0.23，两者有显著差异；22×10-4mol/L高钙溶液灌流前后，终末收缩张力(g)分别为3.74±1.17，5.39±1.62，两者有显著差异；22×10-4mol/L高钙溶液灌流前后，心率（次/分）分别为50.20±7.87，49.90±8.32，两者无显著差异。
实验七 蛙类离体心脏灌流实验
实验七蛙类离体心脏灌流一．目的要求：1．学习掌握离体蛙心灌流法；2．观察Na+、K+、Ca+及肾上腺素、乙酰胆碱等对离体心脏活动的影响。
二．基本原理：心肌具有自动节律性收缩活动的特性，可用人工灌流的方法研究心脏活动的规律及其特点，还可通过改变灌流液的成分或加入某些药物来观察其对心脏活动的影响。
三．动物、器材和试剂：1．动物：蟾蜍2．器材：常有手术器械、蛙心夹、蛙心插管、张力换能器、滑轮、蛙盘、滴管、烧杯。
3．试剂：任氏液、5％NaCl溶液、2％CaCl2溶液、1％KCl溶液、1:100000肾上腺素溶液、1:100000乙酰胆碱溶液、300u/ml肝素溶液。
四．方法与步骤：1．双毁髓，将蟾蜍固定于蜡盘；2．暴露心脏，分离心脏周围的大血管。
在左主动脉下方穿一线，距动脉圆锥2~3mm 处结扎。
再从左、右两主动脉下方穿一线，打一活结备用。
在前、后腔静脉下穿一线，结扎，保留静脉窦。
用眼科剪在动脉圆锥前端，沿向心方向剪一斜口，然后将盛有少量任氏液－肝素溶液的蛙心插管由此开口处插入动脉圆锥。
当插管尖端到达动脉圆锥基部时，应稍稍后退，使尖端向动脉圆锥的背部后方及心尖方向推进，经主动脉瓣插入心室腔内（可用另一只手轻轻捏住心室，感觉插入位置，不可插得过深，以免心壁堵住插管尖端）。
3．用滴管吸去套管中的血液，更换新的任氏液。
提起打活结的备用线，将左右主动脉连同插入的插管扎紧，再将连线固定于插管的小钩上。
剪断结扎线以外的血管及所有牵连的组织，将心脏离体。
用任氏液反复冲洗心室内余血，使灌流液不再有血液，至心室发白。
加入一定高度的任氏液，标记。
4．用蛙心夹夹住心室尖，接滑轮，固定于张力感受器。
5．连接仪器，调整初长度，开始实验。
在任氏液中加入几滴5％NaCl溶液，观察曲线变化，当曲线出现明显变化时，立即吸去灌洗液，用任氏液反复冲洗，至曲线恢复正常。
加任氏液至标记高度。
同法做CaCl2、KCl、肾上腺素、乙酰胆碱，记录。
五．注意事项：1．插入时应注意方向，不能用力过大，也不可强硬插入；2．插管时要防止凝血，需互相配合；3．扎插管时应扎紧，防止实验时滑出；4．液面高度应保持一致；5． 加药时应有前后对照；6． KCl 、乙酰胆碱的影响较剧烈，应注意快速清除。
蟾蜍心脏观察实验报告
一、实验目的1. 了解蟾蜍心脏的解剖结构。
2. 观察蟾蜍心脏的搏动规律。
3. 分析蟾蜍心脏的起搏点及心搏曲线。
4. 掌握蟾蜍心脏生理实验的基本操作。
二、实验原理蟾蜍属于两栖动物，其心脏结构相对简单，由两心房和一心室组成。
心脏的起搏点位于静脉窦，节律最高，心房次之，心室最低。
正常情况下，心脏活动节律服从静脉窦的节律，其活动顺序为：静脉窦、心房、心室。
这种有节律的活动可以通过传感器或计算机采集系统记录下来，称为心搏曲线。
三、实验工具1. 常用手术器械2. 蟾蜍一只3. 蛙板4. 蛙心夹5. 计算机采集系统6. 张力传感器7. 支架8. 双凹夹9. 秒表10. 滴管11. 培养皿（或小烧杯）12. 纱布13. 棉线14. 任氏液四、实验步骤1. 暴露蟾蜍心脏取蟾蜍一只，用剪刀剪断蟾蜍的头部，暴露出脊髓。
将蟾蜍背部朝上置于蛙板上，用手术镊提起胸骨后方的皮肤，用金冠剪剪开一个小口，然后将剪刀由开口处伸入皮下，向左、右两侧下顿角方向剪开皮肤。
将皮肤掀向头端，再用手术镊提起胸骨后方的腹肌，在腹肌上剪一口，将金冠剪紧贴体壁向前伸入（勿伤及心脏和血管），并沿皮肤切口方向剪开体壁，剪断左右乌喙骨和锁骨，使创口呈一倒三角形。
2. 暴露心脏一手持眼科镊，提起心包膜，另一手用眼科剪剪开心包膜，暴露心脏。
3. 连接仪器将蛙心夹夹住少许心尖部肌肉，将蛙心夹的系线与张力传感器的应变梁相连，并将张力传感器的输出端与计算机采集系统相连。
4. 观察心脏搏动开启计算机采集系统，观察蟾蜍心脏的搏动规律，记录心搏曲线。
5. 分析心脏起搏点通过观察心搏曲线，分析蟾蜍心脏的起搏点。
6. 观察期外收缩与代偿间歇在实验过程中，观察并记录蟾蜍心脏的期外收缩与代偿间歇现象。
五、实验结果与分析1. 心脏搏动规律观察到蟾蜍心脏搏动规律为：静脉窦、心房、心室。
心搏曲线呈规律性波动，表明心脏搏动规律稳定。
2. 起搏点分析通过观察心搏曲线，发现蟾蜍心脏的起搏点位于静脉窦。