配置间沉降菌测试方法
洁净室沉降菌测试标准操作规程
洁净室沉降菌测试标准操作规程1、菌落:细菌培养后，由一个或几个细菌繁殖而形成的一细菌集落，简称CFU。
通常用个数表示。
2、测试方法:沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，经48小时以上培养，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数，来评定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室的洁净度。
3、所用的仪器和设备1)高压消毒锅:使用时参照文件GZ-ZL-SOP-066-00进行操作。
2)恒温培养箱:必须定期对培养箱的温度计进行检定。
3)培养皿:一般采用中90mm×15mm硼硅酸玻璃培养皿。
使用前将培养皿置于121?湿热灭菌20分钟。
4、培养基:普通营养琼脂培养基。
将培养基加热熔化，冷却至约45?在无菌操作条件下将培养基注入培养皿，每皿约15m1。
待琼脂培养基凝固后，将培养基平皿放入30,35?恒温培养箱中培养数小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可供采样用，制备好的培养基平皿应在2,8?的环境中存放。
5、测试步骤1)采样方法:将已制备好的培养皿放置在预先确定的取样点，打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5小时，再将培养皿盖上盖后倒置。
2)培养，时间不少于48小时。
每批培养基应有对照试验，检查培养基本身是否污染，可每批选定3只培养皿作对照培养。
3)菌落计数:用肉眼直接计数，然后用5,10倍放大镜检查，有否遗漏。
若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上的菌落计数。
6、注意事项1)测试用具要做灭菌处理，以确保测试的可靠性、正确性。
2)采取一切措施防止人为对样本的污染。
3)对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。
4)由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察，不要漏计培养皿边缘生长的菌落，并须注意细菌菌落与培养基沉淀物的区别，必要时用显微镜鉴别。
5)采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔除。
静脉用药调配中心 培训测试题(答案版)
静脉用药调配中心培训测试题（答案版）一、填空题（每空2分，共60分）1.根据《二、三级综合医院药学部门基本标准（试行）》规定，静脉用药调配中心（室）配置量为每日调配3001袋(瓶)以上，每增加500袋(瓶)则调配中心面积递增 30㎡。
2.危害药品包括肿瘤化疗药物和细胞毒药物。
3.根据管理规定要求，肠外营养液、危害药品静脉用药应当实行集中调配供应。
4.PIVAS总体区域设计布局应保证洁净区、辅助工作区和生活区的划分，不同区域之间的人流和物流出入走向合理。
5.PIVAS各功能室的洁净级别要求：一次更衣室、洗衣洁具间为十万级；层流操作台、生物安全柜为百级。
二次更衣室、加药混合调配操作间为万级；6.在静脉用药配置药师贴签摆药时，应当采取双人核对制度，并签名或盖签章。
7.静脉用药调配中心药库应具备确保药品与物料储存要求的温湿度条件，库房相对湿度 40％～65％；常温区温度 10℃～30℃，阴凉区温度不高于20℃，冷藏区温度 2℃～8℃。
8.药库中药品使用应遵循先产先用、先进先用、近期先用和按批号发药使用的原则。
9.医药工业洁净厂房中，不同空气洁净度等级的医药洁净室之间或洁净室与非洁净室之间空气静压差不应小于 5 Pa 。
10.医药洁净室（区）应有相应照度，其中主要工作室一般照明照度值宜为300lx 。
11.医药用注射用水输送管道系统应采用循环方式。
12.在使用洁净操作台进行药品调配时，每天在操作开始前，提前启动层流操作台循环风机和紫外线灯，30 分钟后关闭紫外灯，再使用 75%乙醇擦拭工作区域的顶部、两侧及台面，顺序应当从上到下、从里向外。
每天操作结束后，应当彻底清场，先用常水清洁，再用 75%乙醇擦拭消毒。
13.生物安全柜每月应当做一次沉降菌监测，方法：将培养皿打开，放置在操作台上半小时（时间），封盖后进行细菌培养，菌落计数。
二、不定项选择题（每小题3分，共计18分）1.现行的《静脉用药集中调配质量管理规范》是由卫生部于何时发布的【 A 】A. 2010年4月20日B. 2010年6月1日C．2011年4月20日 D. 2011年6月1日2.根据《二、三级综合医院药学部门基本标准（试行）》规定，静脉用药调配中心（室）配置量为每日调配1000-2000袋(瓶)，调配中心面积应为：【 C 】A.100㎡-150㎡ B. 150㎡-300㎡C.300㎡-500㎡D. 500㎡-650㎡3.PIVAS洁净区应当设有温、湿度、气压等监测设备和通风换气设施，保持【 A 】A.温度18℃～26℃，相对湿度40％～65%B.温度16℃～24℃，相对湿度40％～65%C.温度18℃～26℃，相对湿度30％～50%D.温度16℃～24℃，相对湿度30％～50%4.静脉用药调配中心（室）地面消毒剂可选用哪些【 ABD 】A.甲酚皂溶液B. 季铵类阳离子表面活性剂C. 醛类消毒剂D. 次氯酸钠5.Ⅱ级B2型生物安全柜的性能特点包括【 ACDE 】A.维持工作台开口的最小平均风速为0.5m/sB.经HEPA过滤后的大部分污染的垂直气流，通过专用风道过滤后排入大气C.安全柜中排出的气体不进入垂直气流的循环过程D.也成为“全排”型E.所有污染的风道和静压箱应保持负压6.根据《静脉用药集中调配质量管理规范》要求，静脉用药调配中心应配备下列哪种设备供肠外营养液和普通输液静脉用药调配使用【 B 】A.生物安全柜 B水平层流洁净台C. 垂直层流洁净台D. 非单向流洁净操作台三、判断题（每小题2分，共计8分）1.静脉用药集中调配是药品调剂的一部分。
沉降菌测试方法范文
沉降菌测试方法范文沉降菌测试方法，也称为沉降法菌落计数法或霉菌菌落计数法，是一种用于测定液体或固体样品中微生物总数的方法。
它是通过将待测样品稀释后，将其均匀涂布在富营养培养基上，然后在适宜的条件下培养并计数菌落数量来进行的。
以下是沉降菌测试方法的详细步骤：材料准备：1.培养基：选择适合菌落生长和明显可见的适宜富营养培养基，如琼脂培养基。
2.空气采样器：使用空气采样器采集空气中的微生物样本。
3.灭菌工具：包括火焰灭菌器、灭菌锅等。
4.精密量筒：用于稀释待测样品。
步骤：1.预处理样品：a.若待测样品为液体，则需要首先将其充分混匀。
b.若待测样品为固体，则需要将其用适宜的方法制备成液体悬浮液，以保证样品中微生物的均匀分布。
2.稀释样品：a.确定合适的稀释倍数，选择合适的容器，并在其中加入适量的培养基。
b.使用精密量筒将待测样品稀释至合适的浓度。
通常情况下，稀释倍数应为10的指数倍数，如10^-1、10^-2等。
3.涂布样品：a.取一支已灭菌的玻璃棒或镊子，沾取一定量的稀释后的样品。
b.将沾有样品的玻璃棒或镊子均匀涂布在琼脂培养基的表面，确保涂布均匀、无气泡和交叉污染。
4.培养样品：a.将琼脂培养基培养皿倒置，放入已灭菌的培养皿，并将其封闭。
b.将培养皿置于适当的温度和湿度条件下，一般为28-37摄氏度。
c.培养时间一般为24-48小时，根据不同微生物种类和培养基的要求可进行相应调整。
5.菌落计数：a.取出培养好的琼脂培养基培养皿，记录上面出现的菌落数量。
b.对于数目较多的菌落，可以进行随机选择部分区域进行计数，然后乘以相应倍数估算总菌落数量。
整个过程中，需注意严格的灭菌操作以及防止交叉污染的发生。
计数结果应及时记录并进行统计分析。
沉降菌监测规程
1.范围适用于本公司生产洁净区的沉降菌的测定和环境的验证2. 质量指标：根据《GBT16294-2010 医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法》进行；洁净度级别技术要求（沉降菌个数）100，000级≤10个/皿10000级≤3个/皿3. 测试方法3.1 本测试方法采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净区的洁净度。
3.2 培养皿一般采用90c m×15mm规格的培养皿。
3.3 恒温培养箱必须对培养箱的温度计进行鉴定4. 测试步骤4.1将已制备好的培养皿按采样点放置，然后从里到外逐个打开培养皿盖，使培养基表面暴露在空气中。
4.2静态测试时，培养皿暴露时间为30min以上；动态测试时，培养皿暴露时间为不大于4h.4.3全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。
4.4采用大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）配置的培养皿经采样后。
在30℃～35℃培养箱中培养，时间不少于2d；采用沙氏培养基（SAD）配置的培养皿采样后，在20℃～25℃培养箱中培养，时间不少于5d.4.5每批培养基应有对照试验，检验培养基本身是否污染。
可每批选定3只培养皿作对照培养。
4.6菌落计数4.6.1若平板上有2个或2个以上的菌落重叠，可以辨时仍以2个或2个以上菌落计数。
4.7注意事项4.7.1测试用具要作灭菌处理。
以确保测试的可靠性、正确性。
4.7.2采取一切措施防止人为对样本的污染。
5. 测试规则5.1 沉降菌测试前，被测试的洁净区的温度、静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定值内；温度和相对湿度的测试，温度在18℃～26℃，相对湿度在45﹪～65﹪为宜。
5.2 测试状态静态和动态两种状态均可进行测试。
静态测试时，室内测试人员不得多于2人。
沉降菌测试前，被测试的洁净区已经过消毒5.3沉降菌菌落数计算5.4采样点数量及其布置5.4.1.1采样点的位置5.4.1.2采样点布置及放置平皿数应按5.4.1采样点：100000级≤20m2洁净区应布置2个采样点；10000级≤20m2洁净区应布置2个采样点；带：·的为布点位置5.4.2 平皿数：100000级≤20m2洁净区每个采样点应放置2个平皿；10000级≤20m2洁净区每个采样点应放置2个平皿；5.4.3平均菌落数的计算：5.4.4记录监测结果。
沉降菌检测操作规程
沉降菌检测操作规程受控状态文件编号 ZHSS03—09—01版环境监测沉降菌检测操作规程(试行本)编制:审核:批准:发布日期: 实施日期:北京京中宏塞思生物技术有限公司北京中宏赛思生物技术有限公司受控状态沉降菌检测操作规程文件编号 ZHSS03—09—01版1. 目的规范检测人员对有洁净要求的洁净区域的沉降菌指标进行检测的操作方法的行为。
2. 范围适用于本工厂内洁净生产车间、微生物实验室和百级工作台等洁净区域。
3. 职责质量控制负责人、微生物检验员对本标准的实施负责。
4. 检测方法4.1 检测依据引用标准《医药工业洁净厂房设计规范》标准号 GB50457—2008执行标准《医药工业洁净室(区)沉降菌的检测方法》标准号 GB/T1629—20104.2 仪器设备立式压力蒸汽灭菌器、恒温培养箱、百级工作台4.3 玻璃仪器Φ90mm培养皿、三角烧杯4.3 检测药品大豆酪蛋白琼脂、纯化水4.4 培养基制备4.4.1 将大豆酪蛋白琼脂按照比例加水配置，并加热溶解。
4.4.2 将溶解后的培养基置于立式蒸汽压力灭菌器中，121?灭菌20min。
4.4.3 将灭菌合格的培养基，冷却至60?左右，移入百级工作台，以每皿约20ml 的量分装在平皿中，待凝固备用。
4.5 采样4.5.1 测试前培养皿表面严格消毒。
4.5.2 将制备好的培养皿按照采样布点图的位置放好，然后由里到外逐个打开，使培养基表面完全暴露在空气中。
4.5.3 静态测试时，培养皿暴露时间为30min以上;动态监测时，培养皿暴露时间不大于4h。
4.5.4 全部采样结束，将培养皿倒置于恒温培养箱中进行培养。
4.6 培养:采用大豆酪蛋白琼脂培养基采样结束后，在30?~35?培养箱中培养不少于2d。
4.7 每批培养基应有对照试验，检验培养基本身是否有污染。
每批做3个对照培养。
4.8 菌落计数4.8.1 用肉眼对培养皿上所有的菌落计数，然后用5~10倍放大镜检查，是否有遗漏。
沉降菌测试方法..
沉降菌测试方法1、把ф90m m×15mm硼硅酸玻璃培养皿包在报纸里，放入恒温烤箱中加热至180℃后，干烤2小时。
2、取X克培养基放入X克蒸馏水，放入高压消毒锅中加热溶化，冷至45℃时，在无菌操作要求下将培养基注入培养皿，每皿约15ml。
3、待琼脂凝固后，将培养基平皿倒置于33℃恒温培养箱中培养48小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可采样用。
制备好培养皿宜在2—8℃环境中保存。
4、采样时，一般在100级层流罩中放置3个培养皿，在100000级，10000级按面积大小一般放2个培养皿。
打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5小时，再将培养皿盖上后倒置于恒温培养箱33℃—1.5m左右。
5、将培养皿举起用肉眼直接计数，用记号笔点记然后用5—10倍放大镜检查是否遗漏，若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠，分辨时仍以2个或2个以上菌落计数，不要漏计培养皿边缘生长菌落，并注意细菌菌落与培养基沉淀物区别。
6、沉降菌测试前，被测洁净室已消毒。
被测洁净室温湿度须达到规定要求，静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定值内，测试状态有静态和动态两种，测试状态选择须符合生产要求，并在报告中注明测试状态。
7、测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别工作服，静态测试时，室内测试人员不得多于2人。
测试时间对单向流100级净化房间及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10min后开始，对非单向流，100000级以上净化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30min后开始。
8、平均菌落数计算：M 1+M 2+M 3平均菌落数=.........21nMn M M ++ n —培养皿总数M 1—1号培养皿菌落数M 2—2号培养皿菌落数M n —n 号培养皿菌落数用平均菌落数判断洁净空气中微生物。
洁净室内平均菌落数必须低于所选定的评定标准，（100级≤1个；10000级≤3个；100000级≤10个）。
若某洁净室内平均菌落数超过标准，则必须对此区域先进行消毒，然后重新采样两次，测试结果均须合格。
洁净室沉降菌测试方法
文件编号
版号
A.0
洁净室(区)沉降菌检验方法
页次
生效日期
2020/01/02
1．目的
制订洁净室(区)沉降菌检验方法，对从事测试的工作人员进行培训指导，规范检验方法及操作。
2．适用范围
本方法适用于洁净室(区)或无菌区域（包括超净工作台）沉降菌的检测和环境的验证。
3.职责
质检部对本规程实施负责。
注：如采用其他规格的平皿，可适当增减培养基的量，使之在平皿中形成至少2mm厚的琼脂层。
4.6.1.3制备好的培养基平皿如需存放后使用，应标记名称、制备日期等，存放在2℃～8℃环境下，1周内使用有效。
4.6.1.4使用前应仔细检查每个培养皿的质量，培养基及培养皿有变质、破损或污染的不能使用。
4.6.2测试步骤
≥1000～＜2000
≥2000
2～3
4
8
16
40
80
160
400
800
2
2
2
4
10
20
40
100
200
2
2
2
2
3
6
13
32
63
注：表中的面积，对于100级的净化工作台，指的是送风口面积；对于10 000级，100 000级的非单向流洁净室，指的是房间面积。
b. 在满足最少监测点数的同时，还宜满足最少培养皿数：
4.6测试步骤
4.6.1制培养皿（平板）
4.6.1.1培养基配制：按瓶签上的《用法》进行配制。以下配制量为1000ml。
a.称量：称取瓶签上《用法》标示的大豆酪蛋白琼脂（TSA）培养基粉末的量，倒入1000ml烧杯中。
b.溶解：在装有大豆酪蛋白琼脂（TSA）培养基粉末的烧杯中加入蒸馏水1000ml，搅拌均匀后，加热煮沸至完全溶解。
洁净室(区)沉降菌检测标准操作规程
洁净室(区)沉降菌检测标准操作规程目的制定标准的洁净室（区）沉降菌的测试方法，指导沉降菌的测试工作。
范围适用于洁净室（区）沉降菌的测定和验证。
责任QC微生物室检验员负责洁净室（区）沉降菌的测试，QC主管和QA部门负责对测试的数据进行统计分析。
程序1.定义1.1.菌落：微生物培养后，由一个或几个微生物繁殖而形成的微生物集落，简称CFU。
1.2.沉降菌：通过自然沉降原理收集在空气中的活微生物粒子，通过专用的培养基，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数。
1.3.动态测试：洁净室（区）已处于正常生产状态设备在指定的方式下进行，并且有指定的人员按照规范操作的状态。
2.测试方法2.1.测试过程2.1.1.设备和培养基：恒温培养箱、购买预灌装TSA平皿或者自制TSA平皿。
2.2.测试条件2.2.1.洁净室（区）的温度和相对湿度应与其生产及工艺要求相适应（无特殊要求时，温度在18~26℃，相对湿度在45%~65%为宜）。
2.2.2.风速、压差应在合格范围内。
2.2.3.动态测试。
2.3.测试方法2.3.1.将准备好的培养皿按采样点要求放置或放在沉降架上（约1.0m）。
将采样台面取样位置或采样辅助设施表面消毒，打开培养皿，将培养皿盖置于已消毒位置，将培养皿置于培养皿盖上，使培养基表面充分暴露后，将培养皿盖盖上后倒置。
2.3.2.在每一只培养皿上标记好具体的取样位置及取样日期，将所有培养皿在QC微生物室进行培养观察。
2.4.培养观察计数2.4.1.全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养，在20~25℃培养箱中培养3天，30~35℃培养箱中培养2天后观察计数。
2.4.2.每批培养基应有阴性对照试验，检验培养基本身是否污染。
可每次选定2只培养皿作对照培养。
2.5.计算2.5.1.平均菌落数M= M1＋M2＋…MNNM1＝1号培养皿菌落数M2＝2号培养皿菌落数Mn＝n号培养皿菌落数n＝培养皿总数2.5.2.结果判定2.5.2.1.最终结果采用平均值。
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配液洁净室沉降菌空气采样及检测方法
1、净化系统在开启状态，房间清洁并擦拭消毒后，紫外线照射30分钟，关闭紫外线后30分钟，无人使用条件下开始采样。
2、测试人员穿着洁净服，戴口罩，手消毒或戴手套。
动作要轻，避免产生污染干扰。
3、取直径90mm×15mm无菌普通培养液平板培养皿，编号备用。
4、采样方法：
①普药间及抗化间每月各抽取一个操作台进行监测（1-14为采样点，15为对照点），在洁净间、二更和一更各选取两点（距地面0.8m～
1.5m），监测结果取平均值；
②将培养皿按采样点布置图逐个放置，然后按编号从小到大的顺序逐个打开培养皿盖，使培养基表面暴露在空气中，沉降30min后，盖上平板盖后倒置收起；15号打开后立即封盖，作为空白对照；
③收取培养皿时与放置时顺序相反，从大到小依次收取；
④将采样平板送至检验科。
5、注意事项：
①采样时，采样者应站在采样口的下风侧，并尽量少走动；
②拿开平板盖时，手部不能穿越平板上空，将平板盖搭放在培养皿边上不重叠。
6、结果的评定：
①每个测点的沉降菌平均菌落数必须低于所选定评定标准中的界限；
②在静态监测时，若某测点的沉降菌平均菌落数超过评定标准，应重
新采样两次，两次测试结果均合格才能判为符合；
③洁净室沉降菌技术要求如下：
采样点布置图
洁净间、一更、二更采样点布置图
物表和手表微生物采样方法
一、物体表面采样方法：
用5cm×5cm的标准灭菌规格板，放在被检物体表面，采样面积
≥100cm2，连续采样4个，取一支无菌棉拭子在10ml采样液的试管内浸湿，于管壁上挤压一下，在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次（从下向上5次，从左向右5次），并随之转棉拭子，然后以无菌操作方式将采样的棉拭子头剪断并落入采样试管内，立即送检。
门把手等不规则物体表面用棉拭子直接涂擦采样。
二、手部表面采样方法：
监测对象采取五指并拢姿势，操作者将无菌棉拭子蘸采样液挤干，在被采手指屈面自手指根到指尖往返涂擦2次直到采完全手，每只手采样面积约计30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子。
然后以无菌操作方式将采样的棉拭子头剪断并落入采样试管内，立即送检。
物体表面和医务人员的手卫生标准
细胞毒药物破损和溢出应急预案
1.发生细胞毒药物破损和溢出时，如直接接触皮肤，应立即用肥皂或者清水清洗被污染的皮肤，溢出地点应隔离并有明确标记。
2.取出溢出包，穿戴好个人防护用品，包括手套、鞋套、眼罩或者防溅眼镜。
如果是可能产生气雾或气化的细胞毒性药物溢出，必须佩戴防护面罩。
3.液体药物必须使用吸收性的织物吸收掉，可轻轻将垫子覆盖在溢出的液体药物之上。
4.粉状药物用湿垫子或毛巾将药物除去，可轻轻将湿的吸收垫子或湿毛巾覆盖在药物之上，防止药物进入空气中去。
5.将所有的被污染的物品放入溢出包中备有的密封的细胞毒废物垃圾袋中。
6.当药物安全被除去以后，被污染的地方必须先用清水冲洗，再用清洁剂清洗三遍，清洗范围应由小到大进行。
清洁剂必须彻底用清水冲洗干净。
7.所有用来清洁药物的物品必须放置在一次性密封细胞毒废物垃圾袋中，再套一层细胞毒废物垃圾袋；所有防护用品应丢置在外层垃圾袋中。
外层垃圾袋封口后放置于细胞毒废物专用一次性防刺容器中。
8.记录以下信息：药品名称、大概的溢出量、溢出如何发生、处理溢出的过程、暴露于溢出环境中的人员等，并填写“不良事件报告表”。
细胞毒药物破损和溢出处理流程
备注：溢出包用物
防护服1、鞋套1、乳胶手套2、防溅眼罩1、防护面罩1、塑料背面吸收毛巾2、一次性海绵2、利器盒1、专用垃圾袋2、标记牌1.。