细胞培养基质量标准及检验方法
细胞培养基质量标准及检验方法
中国医药生物技术协会
二0一一年四月
编写说明
一、根据中国医药生物技术协会2010年9月20日组织召开的《动物细胞培养基生产管
理及质量控制学术研讨会》纪要，结合我国的实际情况制定本标准。
二、本标准以《中国药典》2010版和《哺乳类动物细胞培养基》（HG/T 3935-2007）行业
标准为依据，结合生物制品对细胞培养基原材料的特殊要求制定，增加了牛血清白蛋白残留量、抗生素残留量等检测项目。
三、本标准分为细胞培养基检验项目和每个项目的检验方法两部分，为评判细胞培养基产
品质量提供了依据和方法，从而规范我国细胞培养基行业健康发展。
四、结果评定
依据本标准和方法对细胞培养基样品进行全项检验，所有项目均符合标准要求，判定该样品为合格；若有一项不符合标准要求，则判定样品为不合格。
细胞培养基质量标准及检验方法一、细胞培养基质量标准
细胞培养基质量应符合表1所示的技术要求。
表1 技术要求
二、检验方法
除非另有说明，检验中仅使用确认为分析纯的试剂和中华人民共和国药典2010年版中规定的纯化水。澄清度的测定
称取每升标示量的实验室样品，置于1 000ml烧杯中，加水950ml，搅拌至溶解，补加水至1000ml, 搅拌均匀。按中华人民共和国药典2010年版二部附录Ⅸ B进行。
pH值的测定
称取每升标示量的实验室样品，置于1 000ml烧杯中，加水950ml，搅拌至溶解，补加水至1000ml, 搅拌均匀。按中华人民共和国药典2010年版三部附录ⅤA进行。
干燥减量的测定
按中华人民共和国药典2010年版三部附录Ⅶ L 干燥失重测定法进行。
渗透压的测定
称取每升标示量的实验室样品，置于1 000ml烧杯中，加水950ml，搅拌至溶解，补加水至1000ml, 搅拌均匀。按中华人民共和国药典2010年版三部附录ⅤH渗透压摩尔浓度测定法进行。
取两次平行测定结果的算术平均值为测定结果，两次平行测定结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的5%。
细菌内毒素的测定
按中华人民共和国药典2010年版三部附录Ⅻ E 细菌内毒素检查法中的凝胶法进行。
微生物限度的测定
按中华人民共和国药典2010年三部附录Ⅻ G微生物限度检查法进行，检查项目为细菌数、霉菌数。检查法采用平皿法。
细胞生长试验
贴壁型细胞生长试验
方法提要
1)本试验所用容器具及溶液均为无菌，试验操作过程均为无菌操作。
2)细胞在37℃恒温条件下，在含体积分数3%或10%的小牛血清的细胞培养液中生长72h，观察细胞形态并进行细胞计数；细胞生长72h后，更换不含小牛血清的细胞培养液，继续培养48h，观察细胞形态并进行细胞计数。
试剂和材料
1)牛血清：符合中华人民共和国药典2010年版三部附录ⅩⅢD。
2)平衡盐溶液：称取氯化钾0.2g，精确至0.01g；无水磷酸二氢钾0.2g，精确至0.01g；氯化钠8.0g，精确至0.01g；无水磷酸氢二钠1.15g，精确至0.001g；加纯化水1 000ml，混匀，测pH值，pH值应在±，过滤除菌即得。
3)细胞：vero细胞（或根据不同的细胞培养基种类选择适应的细胞):细胞代次不超过150代。
4)细胞培养液：按产品使用说明书要求配制；
3)胰蛋白酶溶液：称取胰蛋白酶（1:250）2.5g，精确至0.01g，加1 000ml平衡盐溶液，混匀、测pH值，用1mol/L NaOH或1mol/L HCl 调pH值～，过滤除菌即得。
仪器
1）医用净化工作台：洁净级别为百级.
2）二氧化碳恒温培养箱：能通二氧化碳气体并且保持二氧化碳体积分数为（5±）％，能在（37±1）℃恒温。
3）细胞培养瓶：T25型、无菌。
4）显微镜：倒置、相差。
5）血球计数板。
6）盖玻片：无水乙醇浸泡并擦干。
试验步骤
1）制备细胞悬液
A取长成致密单层的细胞种子，将原细胞培养液从细胞培养瓶内吸出，用适量平衡盐溶液洗细胞一次，弃洗液（去除死细胞）。
B向细胞培养瓶内加入胰蛋白酶溶液1ml，消化一定时间，在显微镜下观察,当细胞变圆接近脱壁时，将胰蛋白酶溶液倒掉。
C根据细胞数量加入一定量细胞培养液，用吸管吹打，使细胞脱壁制成细胞悬液A。
2) 细胞培养
A 吸取一定量的细胞悬液A，加到细胞培养瓶内。
B 向细胞培养瓶内加至10ml含体积分数为3%或10%的小牛血清的细胞培养液，使细胞接种数量为5×104细胞/ml。
C将细胞培养瓶送入培养箱，在（37±1）℃温度条件及（5±）％二氧化碳条件下进行培养。
D 培养72h，观察细胞形态，按照步骤1）方法制备细胞悬液，进行活细胞计数。
E 培养72h后，更换不含牛血清的细胞培养液10ml，继续培养48h，观察细胞形态，按照试验步骤1）方法制备细胞悬液，进行活细胞计数。
3) 细胞计数
A 将需要计数的细胞按按照步骤1）方法制备细胞悬液B。
B 吸取细胞悬液B100μl转移至离心管中，视细胞量确定是否稀释及稀释倍数。
C 将盖玻片盖于计数板中心的计数室上方。调整计数板中的细胞数量在（100～300）个。沿盖玻片边缘点加细胞悬液使其通过毛细作用自然渗入，不要留有气泡，不要外溢，显微镜下计数。
D 观察计数板四角大方格中的细胞数，细胞压中线时，一般遵循“计左不计右，计上不计下”的原则。将计数板观察细胞数代入下列公式：
计数板观察细胞数×104 ×稀释倍数/4＝细胞数/ml
分析结果的表述
培养72h的细胞，细胞形态应正常，活细胞数量应达到1×105个/ml以上。继续维持培养48h的细胞形态应正常，活细胞数量应不小于1×105个/ml以上。
悬浮型细胞生长试验
方法提要
本试验所用容器具及溶液均为无菌，试验操作过程均为无菌操作。
细胞在37℃恒温条件下，在细胞培养液中悬浮生长72h，观察细胞形态，进行72h细胞计数。
试剂和材料
1）细胞：已适应待检细胞培养基的悬浮细胞株。
2）细胞培养液：按产品使用说明书要求配制；
仪器
1）医用净化工作台：洁净级别为百级；
2）恒温震荡培养箱：能在（37±1）℃恒温；
3）细胞培养瓶：250ml 摇瓶，应无菌；
4）显微镜：倒置、相差；
细胞培养
1）用方瓶或摇瓶扩增细胞；
2）离心细胞，用待测细胞培养液重悬细胞，计数，计算出所需要的细胞数；
3）将细胞转至摇瓶中，细胞数量接种数量为×105个/ml，加液量20ml左右；
4）将摇瓶细胞移至恒温培养箱中培养，转速90～100rpm，温度37℃；
5）培养72h，记录细胞数量和活率（采用%的台盼蓝染色法计数及计算活率）。
细胞活率计算
1）细胞染色：取吸管1支，伸入培养瓶中，轻轻反复吹打细胞悬液使细胞重悬均匀后，立即吸细胞悬液少许，向另一离心管中滴入细胞悬液1份，再滴入台盼蓝染液1份，混匀，置2～3分钟。
2）计数：按步骤 1）进行。镜下观察可见细胞分散各处，健康细胞胞体完整，透明不着色，凡着色细胞均为死细胞。记录活细胞数及细胞总数。
3）活率计算细胞活率% =（活细胞数量/细胞总数）×100%
分析结果的表述
悬浮培养72h的细胞形态应正常，培养72h细胞数量应达到×106个/ml以上,活率应达到90%以上。
牛血清白蛋白残留量
依据中华人民共和国药典2010年三部附录Ⅷ I牛血清白蛋白残留量测定法进行，不得检出牛血清白蛋白。
抗生素残留量
依据中华人民共和国药典2010年三部附录Ⅸ A抗生素残留量测定法进行，不得检出青霉素、链霉素及庆大霉素。
细胞传代培养的原理及操作步骤,细胞冻存,细胞复苏
细胞传代培养的原理及操作步骤 （一）原理：细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时也将细胞数量扩大，须进行传代再培养。传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。悬浮型细胞直接分瓶就可以，而贴壁细胞需经消化后才能分瓶。 （二）细胞传代培养具体操作 1、细胞：贴壁细胞株 2、操作步骤 1）将长满细胞的培养瓶中原来的培养液弃去。 2)加入0.5-1ml 0.25％胰酶溶液，使瓶底细胞都浸入溶液中。 3)瓶口塞好橡皮塞，放在倒置镜下观察细胞。随着时间的推移，原贴壁的细胞逐渐趋于圆形，在还未漂起时将胰酶弃去，加入10ml培养液终止消化。 观察消化也可以用肉眼，当见到瓶底发白并出现细针孔空隙时终止消化。一般室温消化时间约为1-3分钟。 4)用吸管将贴壁的细胞吹打成悬液，分到另外两到三瓶中，实践培养液塞好橡皮塞，置37℃下继续培养。第二天观察贴壁生长情况。 细胞冻存 1. 实验前准备：细胞室及工作台紫外线照射15min；培养液、PBS、胰酶、小牛血清、DMSO、恒温水 浴箱37℃预热备用；收集对数生长期细胞，在冻存前一天最好换液 2．用吸管吸出培养瓶中的细胞培养液，PBS清洗2遍吸出冲洗液，加入适量胰蛋白酶消化。 3. 适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。吸管吸取培养液吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的 细胞悬液。 4. 用吸管将培养液加入冻存管中，离心(1000r/min，10分钟)。 5. 去上清液，加入与细胞悬液等量的冻存液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀 6. 冷存管置于4℃10分钟----20℃30分钟----80℃16～18小时(或隔夜)---液氮槽vaporphase长期储 存。-20℃不可超过1h，以防止胞内冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。 7．记录每一个冷冻管的位置以确保在以后应用时能够找到每一个冷冻管。 细胞复苏 1.室内紫外消毒；培养基、PBS于37℃恒温水浴预热备用。 2.自液氮罐中取出冷冻管，立即放入37℃水槽中快速解冻，离心。 3.去上清，加入培养基，吹打，然后移入培养瓶中，用培养基清洗冻存管，清洗液也移入培养瓶中。 4.于培养瓶中加入适量培养基，放入CO2培养箱中培养 5.记录复苏日期；次日换液。
产品质量监督检查制度1.doc
产品质量监督检查制度1 2012年3月25日学习内容： 参会人员：质检中心全体、监督一、二、三科人员 1.产品质量监督抽查管理办法 2.产品质量检验和委托检验等问题解答 1、产品质量监督检查制度 是指国务院产品质量监督部门和县级以上地方产品质量监督部门依据国家法律、法规的规定，以及人民政府赋予的行政职权，对生产领域、流通领域的产品实施质量监督的一项制度。 产品质量监督检查制度以抽查为主要方式。产品质量监督检查制度的方式有以下几种： （1）监督抽查（2）统一监督检查（3）定期监督检查 2、监督抽查 监督抽查是指质量技术监督部门为监督产品质量，依法组织对在中华人民共和国境内生产、销售的产品进行有计划的随机抽样、检验，并对抽查结果公布和处理的活动。监督抽查分为由国家质量监督检验检疫总局组织的国家监督抽查和县级以上地方质量技术监督部门组织的地方监督抽查。 3、统一监督检查
统一监督检查是政府对产品质量进行监督检查的另一种方式，通常只用于检查某类质量问题较突出的产品。做法是按统一产品、统一标准、统一检验方法、统一判定原则和统一汇总口径的五统一原则，对生产同种产品的所有企业普遍进行产品质量监督检查，以全面掌握该产品的全行业的质量状况，推动行业质量管理，提高被检产品的总体质量水平。 4、定期监督检查（验） 定期监督检查是地方对产品质量进行监督的主要方式。通过制定产品目录，按规定周期，对本地区的重要产品进行连续质量监控，以促进和保持这些产品的质量水平。 5、委托检验： 是指企业为了对其生产、销售的产品质量监督和判定，委托具有法定检验资格的检验机构进行检验。检验机构依据标准或合同约定对产品检验，出具检验报告给委托人，检验结果一般仅对来样负责。 6、发证检验 是对产品的全项检验，包括强制性国家标准、强制性行业标准、企业执行标准以及有关法规所规定的全部检验项目。所检项目合格可判定发证检验产品合格。所检项目中有一项或一项以上不合格时，判定发证检验产品不合格。 7、出厂检验： 出厂检验是指产品在出厂之前为保证产品满足品质要求所
牛血清在细胞培养中的作用与质量要求
牛血清在细胞培养中的作用与质量要求
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牛血清在细胞培养中的作用与质量要求生物技术已经被世界各国视为一种高技术,在整个科学技术中占据了特殊的显著地位,特别是生命科学的发展更离不生物技术,生命科学的发展备受各国的重视。我国在很多大学中都设立了生命科学院。现代生物技术一般认为包括基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术和发酵工程技术,而这些技术的发展几乎都与细胞培养有密切关系，特别是在医药领域的发展,细胞培养更具有特殊的作用和价值。比如基因工程药物或疫苗在研究生产过程中很多是通过细胞培养来实现的。基因工程乙肝疫苗很多是以CHＯ细胞作为载体;细胞工程中更是离不细胞培养，杂交瘤单克隆抗体，完全是通过细胞培养来实现的，既使是现在飞速发展的基因工程抗体也离不开细胞培养。正在倍受重视的基因治疗、体细胞治疗也要经过细胞培养过程才能实现，发酵工程和酶工程有的也与细胞培养密切相关。总之，细胞培养在整个生物技术产业的发展中起到了很关键的核心作用。细胞培养的发展，培养基的质量又是关键,而培养基的主要成份中动物血清对细胞的生长繁殖发挥着重要甚至是难以替代的作用。在动物血清的应用中牛血清又是最为广泛的，所以牛血清是医药生物技术产品中重要的原材料之一。保证牛血清质量也是促进生物制品质量提高的重要环节。? 一、牛血清在细胞培养基中的主要功能 牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份,具有极为重要的功能。?１.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营 2. 提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物养物。? 质活力。 3．有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。? 4．是细胞贴壁、铺展在塑 5.起酸碱度缓冲液作用。? 6．提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时料培养基质上所需因子来源。? 使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。 二、牛血清的主要成份 血清是一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已为人所知,但还有一部分尚不清楚,而且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。?1.蛋白质是牛血清中主要成份。除包括可携带金属离子、脂肪酸和自身是激素类蛋白外主要还有白蛋白,球蛋白。纤维粘连素细胞促进细胞附着; α2巨球蛋白抑制胰蛋白酶的作用；胎牛血清中含胎球蛋白促细胞附着;转铁蛋白 能结合铁离子,减少其毒性和被细胞利用。?2.多肽:血小板促生长因子能促细胞分裂,是多肽家庭的主要成员之一,是主要的促细胞增殖因子；成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、神经细胞生长因
混凝土原材料与配合比检验质量标准和检验方法
混凝土原材料及配合比检验质量标准和检验方法
个月。2、安定性：体积安定性不良主要是指水泥硬化和产生不均匀的体积变化。一般是由于熟料中所含的游离氧化钙、游离氧化镁、或掺入的石膏过多。 3、不合格品和废品：凡氧化镁、三氧化硫、初凝时间、安定性中任一项不符合标准规定时，均为废品；凡细度、终凝时间中的任一项不符合标准规定或混合材料掺加量超过最大限和强度低于商品强度等级的指标时为不合格品。水泥包装标志中水泥品种、强度等级、生产者名称和出厂编号不全的也属于不合格品。 4、混凝土的取样：每100盘，且不超过100m3的同配合比的混凝土，取样次数不得少于一次；每一工作班拌制的同配合比的混凝土不足100盘时，其取样次数不得少于一次；一次浇筑1000m3以上同配合比的混凝土，每200m3取样次数不得少于一次；每层楼或每工作台班浇筑浇筑同配合比的混凝土时，其取样次数不得少于一次。混凝土抽样在浇筑地点随机抽取。
混凝土施工工程质量检验标准及检验方法
现浇混凝土结构外观质量和尺寸偏差检验标准及检测方法
现浇结构外观质量缺陷 注：用于检查结构构件混凝土强度的试件，应在混凝土的浇筑地点随机取样，取样与留置应符合下列规定：①每拌制100盘且不超过100m3的同配合比混凝土，取样不得少于一次。②每工作班拌制的同一配合比混凝土不足100盘时，取样不得少于一次。③每一次浇筑超过1000m3时，同一配合比的混凝土每200m3取样不得少于一次。④每一楼层、同配合比的混凝土，取样不得少于一次。⑤每次取样至少留置一组标准养护试件，同条件养护试件的留置组数应根据实际需要确定。
常规细胞培养方法
常规细胞培养方法（原代培养和传代培养）初代培养 原理 将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶（常用胰蛋白酶）、螯合剂（常用EDTA）或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。 仪器、材料及试剂 仪器：培养箱（调整至37℃），培养瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、纱布、手术器械、血球计数板、离心机、水浴箱（37℃） 材料：动物组织块 试剂：1640培养基（含20%小牛血清），0.25%胰酶，Hank′s 液，碘酒 初代消化培养法
1.准备：取各种已消毒的培养用品置于净化台面，紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。 2.布局：点燃酒精灯，安装吸管帽。 3.处理组织：把组织块置于烧杯中，用Hanks液漂洗2~3次，去除血污；如怀疑组织可能污染，可先置于含有青链霉素的混合液中3 0~60分钟。 4.剪切：用眼科剪把组织切成2~3毫米大小的块，以便于消化。加入比组织块总量多30~50倍的胰蛋白酶液，然后一并倒入三角烧瓶中，结扎瓶口或塞以胶塞。 5.消化：或用恒温水浴，或置于37℃温箱消化均可，消化中每隔20分钟应摇动一次，如用电磁恒温搅拌器消化更好。消化时间依组织块的大小和组织的硬度而定。 6.分离：在消化过程中见消化液发混浊时，可用吸管吸出少许消化液在镜下观察，如组织已分散成细胞团或单个细胞，立即终止消化，随即通过适宜不锈钢筛，滤掉尚未充分消化开的组织块。低速（500 ~1000转/分）离心消化液5分钟，吸出上清，加入适量含有血清的培养液。
7.计数：用计数板计数，如细胞悬液细胞密度过大，再补加培养液调整后，分装入培养瓶中。对大多数细胞来说，pH要求在7.2~7. 4范围，培养液呈微红色，如颜色偏黄，说明液体变酸，可用NaHC O3调整。 8.培养：置于36.5℃温箱培养，如用CO2温箱培养，瓶口需用纱布棉塞或螺旋帽堵塞，纱布塞易生霉菌，每次换液时需要换新塞。 初代组织块培养法 1.剪切：把组织小块置于小烧杯或青霉素小瓶中，用Hanks液漂洗二三次以去掉表面血污，吸静Hanks液，用眼科剪反复剪切1mm 3块为止。 2.摆布：用弯头吸管吸取若干小块，置于培养瓶中，用吸管弯头把组织小块摆布在培养瓶底部，小块相互距离以0.5cm为宜，每一2 5ml培养瓶底可摆布20~30块。 3.轻轻翻转培养瓶，另瓶底向上，注意翻瓶时勿另组织小块流动，塞好瓶塞，置36.5℃温箱培养2小时左右（勿超过4小时），使小块微干涸。 4.培养：从微箱中取出培养瓶，开塞，46度斜持培养瓶，箱瓶底脚部轻轻注入培养液少许，然后缓缓再把培养瓶翻转过来，让培养液
细胞培养基质量标准及检验方法
细胞培养基质量标准及检验方法 中国医药生物技术协会 二0一一年四月
编写说明 一、根据中国医药生物技术协会2010年9月20日组织召开的《动物细胞培养基生产管 理及质量控制学术研讨会》纪要，结合我国的实际情况制定本标准。 二、本标准以《中国药典》2010版和《哺乳类动物细胞培养基》（HG/T 3935-2007）行业 标准为依据，结合生物制品对细胞培养基原材料的特殊要求制定，增加了牛血清白蛋白残留量、抗生素残留量等检测项目。 三、本标准分为细胞培养基检验项目和每个项目的检验方法两部分，为评判细胞培养基产 品质量提供了依据和方法，从而规范我国细胞培养基行业健康发展。 四、结果评定 依据本标准和方法对细胞培养基样品进行全项检验，所有项目均符合标准要求，判定该样品为合格；若有一项不符合标准要求，则判定样品为不合格。
细胞培养基质量标准及检验方法一、细胞培养基质量标准 细胞培养基质量应符合表1所示的技术要求。 表1 技术要求
二、检验方法 除非另有说明，检验中仅使用确认为分析纯的试剂和中华人民共和国药典2010年版中规定的纯化水。澄清度的测定 称取每升标示量的实验室样品，置于1 000ml烧杯中，加水950ml，搅拌至溶解，补加水至1000ml, 搅拌均匀。按中华人民共和国药典2010年版二部附录Ⅸ B进行。 pH值的测定 称取每升标示量的实验室样品，置于1 000ml烧杯中，加水950ml，搅拌至溶解，补加水至1000ml, 搅拌均匀。按中华人民共和国药典2010年版三部附录ⅤA进行。 干燥减量的测定 按中华人民共和国药典2010年版三部附录Ⅶ L 干燥失重测定法进行。 渗透压的测定 称取每升标示量的实验室样品，置于1 000ml烧杯中，加水950ml，搅拌至溶解，补加水至1000ml, 搅拌均匀。按中华人民共和国药典2010年版三部附录ⅤH渗透压摩尔浓度测定法进行。 取两次平行测定结果的算术平均值为测定结果，两次平行测定结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的5%。 细菌内毒素的测定 按中华人民共和国药典2010年版三部附录Ⅻ E 细菌内毒素检查法中的凝胶法进行。 微生物限度的测定 按中华人民共和国药典2010年三部附录Ⅻ G微生物限度检查法进行，检查项目为细菌数、霉菌数。检查法采用平皿法。 细胞生长试验 贴壁型细胞生长试验 方法提要
水磨石面层质量标准和检验方法
水磨石地面施工质量标准 ⑴面层的材料、强度（配合比）密实度必须符合设计要求和施工规范规定。 ⑵面层与基层结合必须牢固，无空鼓。（空鼓面积不大于400c无裂纹，且在一个检查范围内不多于二处者，可不计） 基本项目 ⑴水磨石面层表面质量应符合下列规定： 合格：表面基本光滑，无明显裂纹和起砂，石粒密实，分格条牢固。 优良：表面光滑，无裂纹、砂眼和磨纹，石粒密实，显露均匀；颜色图案一致，不混色；分格条牢固、顺直和清晰。 检验方法：观察检查。 ⑵地漏和泛水应符合以下规定： 合格：坡度满足排水要求，不倒泛水，无渗漏 优良：坡度符合设计要求，不倒泛水，无渗漏、无积水、与地漏（管道）结合处严密平顺。 检验方法：观察或泼水检查。 ⑶踢脚线质量应符合以下规定： 合格：高度一致；与墙柱面结合牢固，局部空鼓长度不大于400mm，且在一个检查范围内不多于二处。 优良：高度一致，出墙厚度均匀；与墙柱面结合牢固；局部空鼓长度不大于200mm，且在一个检查范围内不多于二处。 检验方法：用小锤轻击，尺量和观察检查。 ⑷踏步、台阶应符合以下规定： 合格：宽度基本一致，相邻两步宽度和高差不超过20mm，齿角基本整齐，防滑条顺直。 优良：宽度一致，相邻两步宽度和高差不超过10mm，齿角整齐，防滑条顺直。 检验方法：观察和尺量检查。
⑸镶边应符合以下规定： 合格：面层邻接处镶边用料及尺寸符合设计要求和施工规范规定。优良：在合格的基础上，边角整齐光滑，不同颜色的邻接处不混色。检验方法：观察和尺量检查。 允许偏差 水磨石面层的允许偏差和检验方法应符合下表的规定。 水磨石面层的允许偏差和检验方法 表水磨石面层质量标准和检验方法
细胞培养操作步骤
培养基的配置：基础培养基500ml+胎牛血清50ml+双抗5ml 冻存液的配置：DMSO18ml+胎牛血清2ml。 依次比例酌量配置。 超净工作台常规配置 移液器1套（2.5μl、20μl、200μl、1ml），酒精灯1盏，液器1台，斜架1台，酒精喷壶1个，酒精棉球缸1个，污缸1个， 常规耗材：培养瓶（50㎝2），定量移液管（5ml、10ml），枪头（1ml、200μl、10μl），培养皿，6/24/48/96孔板，医用脱脂棉球，保种管 所需试剂：gibco高糖培养基，胎牛血清，双抗，DMSO，胰酶，苯扎溴氨，75%酒精…… 实验前准备： 所需的各项高压后的耗材放于超净工作台内，用酒精喷壶喷洒实验台面，并关闭工作台打开紫外灯照射30min后开始实验操作。 首次传代前细胞的复苏，首先用一大烧杯盛满37℃的温水放于液氮罐旁边，待细胞株取出后留上端1/3于37℃水面上尽最大速摇动管使其在2min内迅速融化。若种管顶部含有冻存的细胞液在摇动期间用力甩动使其降于管底后再摇动。这一过程可在超净工作台外操作。 实验步骤 一、原代细胞的培养 1.紫外消毒30min后关闭紫外灯，开启超净台正常工作状态，用酒精消毒操作 者的双手。 2.将所需的培养基确保瓶身干净后放于工作台面内，点燃酒精灯，将培养基瓶 口用酒精棉球擦拭后，再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次，旋开瓶盖后再次分别消毒瓶口和瓶盖，分别放于酒精灯的两侧。特别是将培养基瓶放于斜架上，瓶口对准酒精灯，且放在距离酒精灯最近的位置，瓶盖置于酒精灯的另一侧。 3.取1个高压后的新培养瓶，瓶口在酒精灯上消毒2-3次，旋开后分别再次消 毒瓶口和瓶盖2-3次分别放于酒精灯两侧，把保种管在超净台外用酒精棉球擦拭下2/3后拿进超净台内在酒精灯上消毒保种管口2-3次放于台面左手边，取1ml移液器快速移动在酒精灯上消毒1-2次，然后再装上枪头吸取保种管内的细胞液，悬空移入培养瓶内。 4.拿出1支高压后的5ml定量移液管，在酒精灯上灼烧尾部后装于电动移液器 上，再次放于酒精灯上灼烧整个定量移液管管身2-3次，悬空进入培养基瓶内吸取4ml培养基再悬空移入培养瓶内，将培养瓶瓶口和瓶盖在酒精灯上消毒2-3次后拧紧平放，在瓶身做好实验标记。 5.将培养基瓶口和瓶盖消毒2-3次后拧紧，熄灭酒精灯，整理实验台面，取出 实验试剂及污缸等，关闭超净工作台。 6.将培养瓶放于28℃,5%CO2的培养箱内培养，旋开瓶口少许。注意整个培养箱 底托盘内一定要放高压后的水，且定期更换确保无菌。 在CO2培养箱内培养10-12h，瓶盖拧紧后拿出培养箱，置于荧光倒置显微镜下观察细胞贴壁情况，及细胞形态。最后更换培养液。 二、培养液的更换
细胞培养基种类
细胞培养基的选择及常用数据库 日期：2012-04-13来源：未知作者：网友点击：次细胞实验技术 经典的培养基有很多种，Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)、Sigma等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是应用最广泛的培养基。其他如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培养。 ◆MEM是由Eagle’s基础培养基(BME)发展而来的，其中增加了组分的范围及 浓度。 ◆ Dulbecco改良的BEM(DMEM)培养基是为小鼠成纤维细胞设计的，现在常用于 贴壁细胞的培养。DMEM的氨基酸浓度是MEM的两倍，维生素浓度是MEM的4倍，采用双倍的HCO3-和CO2浓度起到更好的缓冲作用。最初的配方中葡萄糖含量为1000 mg/L，后来为了某些细胞的生长需要，将葡萄糖含量又调整为4500 mg/L，这就是大家常说的低糖和高糖了。 ◆ aMEM含有附加的氨基酸、维生素以及核苷和脂肪酸，它可广泛应用于各种细 胞类型，包括对营养成分要求苛刻的细胞。 ◆ Ham’s F12是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的，现在也广泛应用于 克隆形成率的分析及原代培养。F12还可以与DMEM等体积混合使用，得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物，这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养。 ◆ RPMI 1640培养基是专为淋巴细胞培养而设计的，现在已广泛应用于悬浮细胞 的培养。 以前经常听到有人问，这种细胞该用哪一种培养基呢?其实这个问题的答案可以很简单，也可以好复杂。此话怎讲?如果这种细胞是购自ATCC或其他的细胞库，那很简单，问供应商就行了。或者找到相关的文献，作为参考。Invitrogen网站上有一个Cell Line Database的工具，也很好用。选择你感兴趣的细胞类型，它就会弹出推荐的培养基、血清和转染试剂等，有时还有优化好的转染步骤，很方便。Sigma网站上也有一个Media Expert，包括了培养基所有成分的功能描述、使用推介和参考文献等，它还
动物细胞培养常用方法
一.细胞增殖周期（cell proliferatinal cycle）概念 细胞周期是描述细胞增殖和分化交替发生变化的概念。而细胞增殖周期主要是从细胞增殖角度赋予细胞活动的概念，两者不应混为一谈。细胞增殖周期是指细胞从一次分裂结束开始生长，到下一次分裂结束所经历的过程。根据细胞增殖周期不同时期的生化特点，划分为四个连续的时期，即G 1 期（DNA合成前期），S 期（DNA合成期），G 2期（DNA合成后期），M期（有丝分裂期）。如以G 1 期为起点， 那么细胞增殖周期的各时期应循着G 1-S-G 2 -M的顺序进行，G 1 、S、G 2 三期合称为 细胞间期，此期完成细胞生长过程。M期完成遗传物质的分配。 因此，细胞增殖周期=间期（G 1期+S期+G 2 期）+分裂期（M期）。 二.培养细胞生命期（life span of culture cells） 很多细胞特别是正常细胞，在体外的生存不是无限的，而是具有一个生命期。索维培养细胞生命期，是指细胞在培养中持续增殖和生长的时间。培养细胞的生命期与细胞的种类、性状和原供体的年龄、健康等情况有关。人胚二倍体成纤维细胞，在不冻存和反复传代条件下，科传30~50代，相当于150~300个细胞增殖周期，能维持1年左右的生存时间，最后衰老凋亡。如供体为成体或衰老个体，则生存时间较短；其他细胞如肝细胞或肾细胞，生存时间更短，仅能传几代或十几代。只有当细胞发生遗传性改变，如获永生性或恶性转化时，细胞的生存期才可能发生改变。正常细胞培养时，不论细胞的种类和供体的年龄如何，在细胞生命的全过程中，大致都经历以下三个阶段：原代培养期、传代期、衰退期。 三.培养细胞一代生存期 培养细胞的生存空间和营养是有限的，当细胞增殖达到一定密度后，则需要分离出一部分细胞和更新营养液，否则将影响细胞的继续生存，这一过程叫传代（Passage或Subculture）。每次传代以后，细胞的生长和增殖过程都会受一定的影响。传代的频率或间隔与培养液的性质、接种细胞的数量和细胞增殖的速度
商品检验的方法与质
第六章商品检验与质量监督 第二节商品检验方法与质量分级 学前思考 1、你平时买衣服时，用什么方法判断质量好坏？ 2、你知道鉴别猪肉是否新鲜的办法吗？ 一、抽样抽样检验是商品检验的普遍形式，而抽样检验与全数检验相比必然存在以下两种风险。 由于用样本的质量水平代表不了商品整批的质量情况，如果样品没有代表性检验的结果不仅不能准确推断整批商品质量水平，甚至还可能产生误导效果。 因此抽样要解决三个问题：如何抽取、抽取多少、怎样抽取、怎样判 断。 （一）抽样的概念抽样是根据合同或标准所确定的方案，从被检批商品中抽取一定数量的有代表性的、用于检验的单位商品的过程，又称取样或拣样。 （二）抽样的原则 1、代表性 2、典型性 3、适时性 （三）抽样的方法 1、简单随机抽样 2、分层随机抽样 3、系统随机抽样 如按 2、 12 、 22 的顺序抽取样品。这种抽样方法抽样分布均匀，比简单随机抽样更为精确，适用于较小批量商品的抽样，但当被检批商品质量问题呈周期性变化时，易产生较大偏差。
思考：在大规模连续的现在，主要运用抽样检验。美国一位研究人员发现，进行全数检验时，第一次能发现 68%的不合格商品，第二次能发现 18%，第三次发现 8%，第四次发现 4%，四次之后还要2%没有发现。理论上全数检验更好，实际上，抽样检验比全数检验更科学，抽样检验运用科学的方法。 二、商品检验的方法 （一）感官检验法 定义：指利用人体的感觉器官结合平时积累的实践经验对商品质量进行判断和鉴定的方法。 优点：感官检验法快速、经济、简便易行，不需要专用仪器、设备和场所，不损坏商品，成本较低，因而使用较广泛。 缺点：感官检验法一般不能检验商品的内在质量；检验的结果常受检验人员技术水平、工作经验以及客观环境等因素的影响，而带有主观性和片面性，且只能用专业术语或记分法表示商品质量的高低，而得不出准确的数值。 为提高感官检验结果的准确性，通常是组织评审小组进行检验。 1、感觉的几种现象 （1）适应现象适应现象指的是在同一刺激持续作用于同一感受器而产生的感受性提高或降低的变化。通常在微弱的刺激物的持续作用下，可以使感受性提高。在强烈刺激物的持续作用下，可以使感受性降低。因此，在感官检验时，避免已开始就接受强刺激。 如：当我们从明亮的阳光下进入已熄灯的电影院时，开始感到眼前一片漆黑，什么也看不清楚，隔几分钟之后，才慢慢分辨出周围物体的轮廓。这是在微光的持续作用下，眼睛对暗的适应，感受性提高的原因。相反，当看完电影走出电影院时，顿觉阳光耀眼发眩什么都看不清，稍过几分钟才能看清周围的物体，这是在强光的持续作用下，眼睛对明的适应，感受性降低的原因。“入芝兰之室，久而不闻其香。入鲍鱼之肆，久而不闻其臭”，是嗅觉的适应现象。
细胞培养基种类与基本成分
细胞培养基种类与基本成分 是应用最广泛的培养基。其他如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培养。其具体的特征及应用如下： 1、BME细胞培养基 基础Eagle 培养基 (Basal Medium Eagle)，1955 年Eagle 设计，BSS+ 12 种氨基酸+谷氨酰胺+ 8种维生素。简单、便于添加，适于各种传代细胞系和特殊研究用，在此基础上改良的细胞培养基品种有MEM、DMEM、IMDM等。 2、MEM细胞培养基 又称低限量Eagle 培养基 (Minimal Essential Medium) ，1959 年在Eagle's基础培养基 (BME )上修改而来，删去赖氨酸、生物素，氨基酸浓度增加，适合多种细胞单层生长，有可高压灭菌品种，是一种最基本、试用范围最广的培养基，但因其营养成分所限，针对生产之特定细胞培养与表达时，并不一定是使用效果最佳或者最经济的培养基。 3、DMEM细胞培养基 DMEM 是由Dulbecco 改良的Eagle 培养基, 起初是为小鼠成纤维细胞设计的。DMEM的氨基酸浓度是MEM的两倍，维生素浓度是MEM的4倍，采用双倍的HCO3-和CO2浓度起到更好的缓冲作用。最初的配方中葡萄糖含量为1000 mg/L,后来为了某些细胞的生长需要，将葡萄糖含量又调整为4500 mg/L, 这就是大家常说的低糖和高糖了。 低糖适于依赖性贴壁细胞培养，特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。高糖更适合高密度悬浮细胞培养，也适用于附着性较差，但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养，也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。例如CHO细胞表达生产乙肝疫苗、CHO细胞表达EPO。 4、IMDM细胞培养基 Guilber 和Iscove 将Dulbecco' Medium 改良为Iscove's Medium,用于培养红细胞 和巨噬细胞前体。此种培养液含有硒、额外的氨基酸和维生素、丙酮酸钠和HEPES o并用硝酸钾取代了硝酸铁。IMDM 还能够促进小鼠B淋巴细胞，LPS 刺激的
质量标准检测标准测试手段及验收方式
质量标准、检测标准、测试手段及验收方式 1、货物质量按招标文件要求执行，货物的价格，按《中标通知书》中的价格执行。 2、所提供的货物的名称、型号、规格、技术条件、供应范围及数量、交货时间、交货地点应符合谈判文件及有关承诺内容要求。 3、全部货物采用相应标准的保护措施进行包装，并具备防湿、防潮、防震、防锈、防装卸等保护措施；如果由于货物包装不良或采用不充分、不妥善的防护措施而造成的损失，供应商将承担由此产生的一切费用；在每一包装件中，有详细装箱清单，并在每件包装上标有引人注目的发货标记。 4、货物到采购人指定交货地点后，采购人对货物凭现状验收，在原装、原封、原标记完好无损情况下，采购人对货物的件数，外观进行初步验收。 5、验收货物发生短缺、损坏等问题时，采购人收到货物后10天内通知我公司，否则，视为采购人初步验收无误；我公司接到采购人通知后，在10天内答复处理，否则，视为我公司已默认采购人的通知。 6、我公司交货时，出具货物符合国家规定的合格证书，货物由我公司负责现场安装调试及人员操作培训，但不解除我公司在货物质量保证期的责任。 7、货物的质量保证期，按我公司在投标文件中的承诺内容执行。 8、因采购人原因造成货物损伤、损坏，我公司协助修复，费用由采购人承担。
9、货物由我公司负责运输，装运过程中发生的丢失、损坏等，由我公司自行承担其经济损失。 10、根据采购人要求，我公司及时派出售后服务人员，给予技术指导。对不合格的货物，属我公司问题的，由我公司及时无偿更换；属于采购人问题的，我公司积极协助解决，费用由采购人承担。 11、由于人力不可抗拒事故，中标供应交货迟延或不能交货时，我公司立即将事故原因通知采购人，并有采取一切必要措施从速交货责任。如果事故持续时间超过交货期限，采购人有权撤销合同，如不可抗拒影响采购人履约，则亦照此办理。
商品检验与质量认证 论文
《商品检验与质量认证》课程 论文 院系外国语言与文化学院 专业英语 班级2010211012 学生姓名邹雨阳 学号2010211536 任课教师缪瑞 2012年 6月3日
出入境商品检验检疫 摘要：出入境检验检疫基本介绍 关键词：基本概念；业务内容；基本任务；法律地位 一、出入境检验检疫基本概念 （一）含义 出入境检验检疫是指国家质量监督检验检疫总局作为政府的一个执行部门，以保护国家整体利益和社会效益为衡量标准，以法律、行政法规、国际惯例或进Fl国的法规要求为准则，对出入境货物、交通运输工具、人员及事项进行检验检疫、管理及认证，并提供官方检验检疫证明、居问公证和鉴定证明的全部活动。 出入境商品检验检疫的狭义是指国家质检总局和下属机构对出入境货物进行检验检疫、管理认证、公证、鉴定证明的全部活动。 （二）检验检疫机构 国务院设立中华人民共和国出入境检验检疫局(China Exit&Entry Inspection&Quarantine Bureau，CIQ)(现在已经改称中国质量监督检验检疫总局)主管全国出入境商品检验检疫、动植物检疫、国境卫生检疫工作。国家质检部门设在全国各地的直属检验检疫局、商检机构、办事处管理所辖地区讲出口商品检验检疫工作。 二、出入境检验检疫业务内容 国家质量监督检验检疫机构对出入境货物、交通运输工具、人员及事项进行检验检疫。按业务内容包括进出口商品检验、进出境动植物检疫和国境卫生检疫。
1．进出口商品检验 2．进出境动植物检疫 3．进口商品认证管理 4．进口废物原料装运前检验 5．出口商品质量许可 6．食品卫生监督检验 7．出口商品运输包装检验 8．外商投资财产鉴定 9．货物装载和残损鉴定 10．卫生检疫与处理 三、检验检疫机构的基本任务 根据《商检法》和国家有关规定，检验检疫机构的基本任务是实施进出商品的法定检验、公证鉴定、监督管理进出口商品检验工作和统一管理并签发普惠制原产地证书。 （一）法定检验 进出口商品法定检验是根据国家法律、法规，对规定的进出口商品实行强制检验，体现了国家的意志和利益。根据《商检法》、《检疫法》、《食品卫生法》和《海关法》规定，凡列入《检验检疫商品目录》内的进出口商品，必须经出入境检验检疫机构实施检验检疫，海关自2000年1月1日起，一律凭货物报关口岸出入境检验检疫局签发的《出(入)境货物通关单》验放，实行“先报检后报关”的货物出入境制度。 （二）公证鉴定 按国际惯例，由检验检疫局对进出口商品进行各项检验、鉴定业务，称做公证鉴定。检验检疫局除了实施法检外，还接受办理对外贸易关系人如买方、卖方、承运人、托运人或保险人等申请的其他公证鉴定工作，如进出口商品的重量鉴定、货载衡量鉴定、进口商品的残损鉴定、短缺鉴定、出口商品船舱检验和监视装载鉴定等，出具产地证明、价值证明、包装证明、签封样品、发票签证等。 （三）委托报检
细胞培养基生产企业达标检查标准及实施细则
附件1： 细胞培养基生产企业达标检查标准及实施细则 （征求意见稿） 二0一0年十一月
编写说明 一、根据2010年9月20日《动物细胞培养基生产管理及质量控制学术研讨会纪要》，结合我国的实际情况制定本标准。 二、本标准以2010年新版《药品生产质量管理规范》为依据，结合生物制品对细胞培养基原材料的特殊要求制定。 三、本标准所涉及的生产企业应包括国内细胞培养基生产企业/分装厂及进口细胞培养基在国内的分装企业。 四、本标准共分质量管理、机构与人员、厂房与设施、设备、物料与产品、确认与验证、文件管理、生产管理、质量控制与质量保 证、委托生产与委托检验、产品发运与召回、自检等十二个部分，共158项，其中否决项目(△)16项，重要项目（*）74项，一般项目68项。 五、检查中发现不符合要求的项目统称为“缺陷项目”。其中，重要项目（*）不符合要求者称为“严重缺陷”，一般项目不符合要 求者称为“一般缺陷”，否决项目(△)不符合要求者称为“否决”。 六、在检查过程中，企业隐瞒有关情况或提供虚假材料的，按否决处理。检查组应调查取证并详细记录。 七、企业在申请达标检查时还应提交以下资料 1、企业营业执照（正本）复印件； 2、企业组织机构代码证复印件； 3、企业通过权威认证机构进行质量认证的审计报告和认证证书（如ISO9001证书）复印件； 4、企业组织机构图； 5、企业最近两年的产品清单（不足两年的企业提供所有生产的产品清单）。 八、结果评定 1、未发现“否决”，且“严重缺陷”≤10%，且“一般缺陷”≤20%，各类缺陷项目能够立即改正的，企业必须立即改正； 不能立即改正的，企业必须提供缺陷整改报告及整改计划，方可通过达标认证。 2、发现“否决”或“严重缺陷”＞10%或“一般缺陷”＞20%的，不予通过达标认证。
检验科质量控制管理工作检查表
检验科医疗质量日常工作检查表 分值检查项目检查内容及要求评分方法存在问题得分5分工作面貌 及职业道 德 1、文明行医、着装整洁、佩证上岗、语言文明，礼貌 得体、环境卫生，科室清洁，节约用电。 2、团结协作，科室协调。 3、接班人员未到来前，不得以何种理由擅离职守。做好每日 交接班工作，造成不良后果的交院办或按相关法规处理。 一、1、2、3、一项不合格扣1分。 二、无交接班扣5分。 三、接班人员未到提前离开工作岗位的本项不 得分。造成不良后果的，视情况交院办处理或 按相关法规进行处理。 15分常规检验 工作和生 化检验工 作 1、接收标本时应检查标本是否合格，查对科别、姓名、性别、 条形码、标本数量和质量，收集方法和安放容器是否正确。标 签与申请单是否相符，对不合格情况应及时告知相关科室及时 纠正，确保检验前质量。 2、检验时对试剂、项目；检验后对目的和结果。做好每日检 验质控和定项目间比对，保证检验报告结果的真实性和准确 性。 3、发报告时对科别、病房等，打印的报告单要求检验者手签 名进行认可，报告单内容及项目齐全，不得缺项漏项，没有的 内容可用“/”表示。 4、常规检验当天出报告，按医院规定时间内发出检验报告单 （外送除外。）； 1、无特殊情况，按时出具检验报告，未按时者 扣0.1分/次。 2、出具报告缺项漏项的，一处扣0.1分。 3、出具报告未进行手签名的，扣1分/处。 4、不合格标本应及时纠正，并做好登记。如没 有登记而说别人不合格，扣5分。 5、发错检验报告，一次扣1分。打印报告结果 错误的直接扣10分，并记差错一次。 10分院感监测 工作 1、按时完成院感监测工作。 2、院感监测每月一次，并不定期抽查； 3、监测报告应实事求事，才能对院感防控工作提供指导性数 1、无特殊情况必须按时完成院感监测工作，每 月未完成的，扣科主任5分。 2、出具报告应真实可靠，弄高作假的本项不得
H9c2细胞培养方法
大鼠心肌细胞H9C2 细胞描述： 大鼠心肌细胞H9C2是来源于胚胎期BD1X大鼠心脏组织的亚克隆细胞系，表现很多骨骼肌细胞的特性。当H9c2细胞汇合时，细胞就会融合成多核的肌管并对乙酰胆碱刺激有反应，但该细胞缺少像心肌细胞一样的节律性搏动。此外，多项生化、电生理指标的检测也表明其具有骨骼肌的很多特点。由于来源于心脏，H9C2细胞作为心脏成肌细胞也用于心肌疾病的研究。 大鼠心肌细胞H9C2增殖能力取决于细胞取材、培养技术、培养条件等综合因素。请按照正确的培养方法来解冻、传代，以此保证细胞具备良好的增殖能力，方便您的后继研究顺利进行。 货号规格培养基运输保存 C0048 1×106个/管DMEM+10% FBS 干冰运输液氮保存 质量控制： 本细胞经过了检测，不含有细菌、真菌、病毒（HIV、HBV、HCV）、支原体。 培养条件： 37℃，5% CO2，PH值7.2~7.4，无菌恒温培养。 用途： 本产品只提供给进一步的科研使用，不可应用于治疗等其他方面。 细胞相关操作（注意：细胞操作都需严格按照无菌操作） 收到复苏好的贴壁细胞的处理方法： 1. 先从外包装盒拿出细胞瓶，在细胞瓶表面喷一层酒精，并小心去掉封口膜； 2. 在显微镜下观察细胞状态，并确定是否染菌，如有染菌，请立即拍照，并将细胞丢掉； 3. 将培养瓶置于37°C，5% CO2的无菌培养箱中培养4-6小时； 4. 倒掉多余的培养基，留正常体积的培养基； 5. 重新将培养瓶置于37°C，5% CO2的无菌培养箱中培养过夜； 6. 第二天传代。 收到冻存细胞的处理方法： 1.37°C水浴预热培养基； 2.从液氮中取出细胞迅速放入37°C水浴快速解冻（解冻后不要继续暖细胞）； 3.在超净台中加入5ml培养基重悬细胞，1000rpm离心5min； 4.弃上清，加入5ml培养基重悬细胞后转入T25培养瓶中，轻轻晃匀； 5.置于37°C，5% CO2培养箱中培养(培养瓶盖没有透气孔的话,瓶盖不要拧太紧)； 6.第二天，用新鲜的培养基给细胞换液后继续培养。 细胞传代 1.当细胞融合度达到90%以上时，给细胞传代； 2.37°C水浴预热培养基； 3.在超净台中，弃培养基，加入2-5mlPBS清洗细胞后，再加入1ml胰酶消化细胞； 4.显微镜下观察到细胞变圆，有细胞开始脱离瓶壁时，加入5ml培养基终止消化； 5.用移液器轻轻吹下瓶壁上剩余的细胞，并轻轻吹打将细胞吹散； 6.将细胞移入离心管中，1000rpm离心5min；
质量规格要求和检验方法质量规格要求应符合GB17201998
一、质量规格要求和检验方法 1.质量规格要求 应符合GB 17203-1998《食品添加剂柠檬酸钙》标准要求： 2.检验方法 （A）鉴别 1 试剂和溶液 （1）盐酸（GB 622）。 （2）1 mol/L乙酸（GB 676）溶液。 （3）1 mol/L硫酸汞溶液。 （4）1 mol/L高锰酸钾（GB 643）溶液。 （5）1 mol/L草酸铵（HG 3-976）溶液。 （6）2 mol/L硝酸（GB 626）溶液：125mL浓硝酸加水稀释至1000mL。2鉴别试验 方法一：将0.5 g样品溶解于10mL 水和2.5mL的2mol/L硝酸的混合液中，加1mL 1mol/L硫酸汞溶液，加热至沸腾，再加1mL 1mol/L 高锰酸钾溶液，产生白色的沉淀物。 方法二：以尽量低的温度完全灼烧0.5 g样品，然后冷却，并将残余物溶于10mL的水和1mL 1mol/L乙酸的混合液中，经过滤后再把10mL 1mol/L草酸铵溶液加入滤液中，产生大容积的白色沉淀，并可溶解于盐酸中。
（B ）含量的测定 1试剂和溶液 （1）3mol/L 盐酸溶液。 （2）6mol/L 盐酸溶液。 （3）1mol/L 氢氧化钠（GB 629）溶液：准确称取4g 氢氧化钠，溶于水，稀释至100mL 。 （4）30%三乙醇胺溶液：38mL 三乙醇胺加水稀释至100mL 。 （5）钙指示剂：称取10g 预先在105～110℃下烘干2h 的氯化钠，置于研钵内研细，加入0.1g 钙试剂，研细，混匀。 （6）0.05mol/L 乙二胺四乙酸二钠（EDTA-2Na ）标准溶液 配制： 称取20g 乙二胺四乙酸二钠（GB 1401），加热溶于1000mL 水中，冷却，摇匀。 标定： 称取1g 于800℃灼烧至恒重的基准氧化锌，称准至0.0002g 。用少许水湿润，加6mol/L 盐酸至样品溶解，移入250mL 容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。取30.00～35.00mL ，加70mL 水，用10%氨水中和至pH 7～8，加10mL 氨-氯化铵缓冲溶液甲（pH10），加5滴0.5%铬黑T 指示液，用0.05mol/L 乙二胺四乙酸二钠溶液滴定至溶液由紫色变为纯蓝色。同时做空白试验。 计算： c= (1) 式中：c ——乙二胺四乙酸二钠标准溶液的浓度； V 1——氧化锌溶液消耗的体积，mL ； m 1——氧化锌的质量，g ； V 2 ——乙二胺四乙酸二钠溶液消耗的体积，mL ； V 3 ——空白试验乙二胺四乙酸二钠溶液消耗的体积，mL ； 0.08138——每毫升1 mol/L 氧化锌的克数。 2测定方法 预先在 150℃下烘至恒重，准确称取 350～400mg 柠檬酸钙样品（称准至0.0001 g ），加水10mL ，3mol/L 盐酸至溶解（约2mL ）后， m 1×(V 1/250) (V 2-V 3) ×0.08138
产品质量的监督与管理
《产品质量的监督管理》任务单 学习目标：了解我国产品质量监督管理体制及产品质量监督管理的内容 学习重点：我国产品监督品管理体制及内容 学习难点：产品质量的监督制度中各制度的区分 活动方案： 任务一：了解我国产品质量监督管理体制 产品质量监督管理机构是指根据国家法律所赋予的对产品质量行使监督管 理职能的行政机关的总称。 1．产品质量监督管理机构和职责 在我国，产品质量监督管理机构有： （1）技术监督机构：由国家技术监督局和地方各级人民政府（县级以上） 的技术监督局构成全国统一的技术监督管理体系，负责全国的技术监督工作和产 品质量监督管理工作。 （2）行业监督管理部门：如卫生行政部门负责食品卫生监督管理工作，进 出口商品检验局负责组织管理全国进出口商品的检验。（3）工商行政管理部门：国家工商行政管理局和各级工商行政管理部门（县 级以上）主要负责下述产品质量监督管理工作：①查处生产、销售假冒伪劣商品
的行为；②依法查处倒卖、骗卖劣质商品的行为。 以上各类产品质量监督管理机构的职责有：①在各自和行政区域内和法律 规定的权限内负责产品质量监督管理工作；②监督产品质量抽查工作；③负责处 理消费者就产品质量问题提起的申诉；④法律、法规规定的其他职责。 2．产品质量社会性监督 （1）用户、消费者的监督权； （2）消费者权益保护组织的监督权。 任务二：了解产品质量监督管理的内容 1．产品质量标准制度 国家有关法律明确禁止无标准生产。产品标准是对产品结构、规格、质量和 检验方法所做的技术规定。产品标准按照制定的主体和适用的范围，分为国家标 准、地方标准、行业标准和企业标准。 国家标准主要是有关经济、技术发展，特别是国家经济发展的重要标准和与 广大人民生活有关的重要产品的标准。国家标准在整个标准体系中层次最高，其 他标准内容不得与国家标准内容相抵触。凡有国家标准的不再制定行业标准、地 如：方便面中的食品添加剂使用应符合《食品 方标准。其代号为。2760