分光光度法测定北虫草提取物中多糖的含量
紫外-可见分光光度法在植物多糖含量测定中的应用
紫外-可见分光光度法在植物多糖含量测定中具有重要的应用。
植物多糖是一类重要的生物大分子，对于植物的生长、代谢和功能具有重要作用。
紫外-可见分光光度法通过测量溶液中吸收或透射光的强度来确定样品中多糖的含量。
在测定植物多糖含量时，可以利用紫外-可见分光光度法测定多糖溶液在特定波长下的吸光度，然后根据已知标准曲线或者专门的计算公式，计算出多糖的含量。
这种方法操作简便、快速，并且对于一些常见的植物多糖，如葡萄糖、木糖等，在一定范围内有较好的灵敏度和准确性。
总的来说，紫外-可见分光光度法在植物多糖含量测定中具有较为广泛的应用前景，可以为植物生物化学研究和食品工业中的质量控制提供重要的技术支持。
虫草多糖的分离纯化及含量测定
虫草多糖的分离纯化及含量测定目的采用发酵法从冬虫夏草发酵液及菌丝体中提取、分离虫草多糖。
方法采用乙醇沉淀法分离冬虫夏草发酵液和菌丝体中的多糖；采用苯酚硫酸法测定样品中多糖含量。
结果采用此法进行制备、检测，方法简单快速，结果准确，适宜推广使用。
结论此法无需多糖纯品，具有快速简单、精确度高、灵敏度高、重现性较好的优点，是检测虫草多糖含量的较优方法之一。
标签：发酵液；虫草多糖；菌丝体虫草多糖；分离纯化；含量测定Purification and determination of Cordyceps polysaccharideCUI?Lixun1??ZHANG?Aihua1??SUN?Shouying21.Heilongjiang Biotechnology V ocational College，Harbin 150025，China；2.Heilongjiang New Yisheng Pharmaceutical Co.，Ltd，Jixi 158200，China[Abstract] Objective Using the method of inoculated fermentation to extract and separate the Cordyceps polysaccharide from the zymotic fluid and mycelium of Chinese caterpillar fungus. Methods Separated the polysaccharide of Chinese caterpillar fungus’ zymotic fluid and mycelium in ethanol precipitation；survey and evaluate the polysaccharide content of samples in phenol-sulfuric acid method. Results It is profitable for using widely because of the fast，easy method and exact result for producing and detecting. Conclusion This method is one of excellent ways for detectin g the Cordyceps polysaccharide contents and it doesn’t need the polysaccharide from pure product. The advantages are fast and easy，high accuracy and sensitivity，and good reproducibility.[Key words] Fermentation broth；Cordyceps polysaccharide；Mycelium of Cordyceps polysaccharide；Separation and purification；Content determination 冬虫夏草首载于本草从新，味甘，性温，归肺、肾经，具补肺益肾，止血化痰之功效。
多糖检测方法
四分光光度法测定多糖含量1.范围本标准适用于枸杞、香菇、灵芝、黄芩、茯苓等样品中多糖含量的测定。
2.原理先用80%乙醇提取以除去单糖、低聚糖、甙类及生物碱等干扰成分，然后用蒸馏水提取其中所含的多糖成分。
多糖在硫酸的作用下，水解成单糖，并迅速脱水生成糠醛衍生物，与苯酚缩合成有色化合物，用分光光度法测定其枸杞子多粮的含量。
本法简便，显色稳定，灵敏度高重现性好。
3.试剂3.1葡萄糖标准液：精确称取105℃干燥恒重的标准葡萄糖10mg，置50mL的容量瓶中，加蒸馏水溶解并稀释至刻度。
3.2苯酚试液：取苯酚100g，加铝片0.1g，碳酸氢钠0.05g，蒸馏收集182℃馏分，称取捤馏分10g，加蒸馏水150 g，置棕色瓶中备用。
0. 仪器4.1 分析天平4.2 අ声波4.3 容量瓶、移液管、伏斗4.4岛津UV-2501型分光光度、比色皿4.5浴锅4.6塞试管4.7流装置5. 分析步骤5.1 标准曲线的制备。
吸取葡萄糖标准液0.00mL、0.05mL、0.1mL、0.15mL、0.2mL、0.3mL，分置于具塞试管中，各加蒸馏水使体积为2mL，再加入苯酚试液1.0mL,摇匀，迅速加浓硫酸5.0mL，摇匀后放置5min，置沸水浴中加热15min，取出冷却至室温。
于490nm处测吸收值，绘制标准曲线。
5.2 样品溶液的制备。
精确称取样品粉未0.2g,置于圆底烧瓶中，加80%乙醇100mL回流提取胜1hr，趁热过滤，残渣用80乙醇洗涤（10ml×3）。
残渣连同滤纸置于烧瓶中，加蒸馏水100mL，加热提取1hr，趁热过滤，残渣用热水洗涤（10ml×3）。
洗液并入滤液，放冷后移入250mL量瓶中，稀释至刻度，备用。
5.3 样品中多糖的测定。
吸取适量样溶液（若为提取物，称取30mg到50ml,取0.1mLL）,加蒸馏水使体积为2mL，再加入苯酚试液1.0mL,摇匀，迅速加浓硫酸5.0mL，摇匀后放置5min，置沸水浴中加热15min，取出冷却至室温。
紫外分光光度法测定不同产地白及中多糖的含量
紫外分光光度法测定不同产地白及中多糖的含量
李婷
【期刊名称】《特种经济动植物》
【年(卷),期】2024(27)1
【摘要】为检测来自于贵州、安徽、河南所产的白及中的总多糖的含量。
通过建立紫外分光光度法对目标物质总多糖含量进行测定,选取葡萄糖作为试验对照品,并以其最大吸收波长584 nm作为检测波长。
结果表明:贵州、安徽、河南所产的白及中多糖的平均含量分别为38.41%、35.34%和34.62%。
该方法检测出的贵州所产白及总多糖含量高于安徽与河南,该操作便捷、可靠,可应用于白及药材中总多糖的检测。
【总页数】3页(P15-17)
【作者】李婷
【作者单位】南京市中西医结合医院
【正文语种】中文
【中图分类】R28
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5.不同产地鲜品白及的多糖含量测定
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北虫草和北虫草根成分测定及水提液的抗氧化活性
二苯代苦味酰肼 自由基 （ Ｄ Ｐ Ｐ Ｈ・ ） ， 购自Ｓ ｉ ｇ ｍ ａ公司 。苯
酚， 浓硫 酸 ， 盐酸， 硼酸 ， 硫 酸铜 ， 硫 酸钾 ， 氢氧化钠 ， 乙醚 ， 醋
酸铅 ， 硫酸钠 ， 无水 甲醇 ， 无水 乙醇 ， ２ ． 羟基苯 甲酸（ 水杨酸 ） ，
・
６ ０ ２ ・
中国药物与临床 ２ ０ １ ４ 年５ 月第 １ ４ 卷第 ５ 期Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅ Ｒ ｅ ｍ ｅ ｄ ｉ ｅ ｓ ＆Ｃ ｌ ｉ ｎ ｉ ｃ ｓ ， Ｍａ ｙ ２ ０ １ ４ ， Ｖ ｏ １ ． １ ４ ， Ｎ ｏ ． ５
・
药 物 研 究 ・
＝ Ｉ 匕 虫草和＝ Ｉ 匕 虫草根成分测定及水提液的抗氧化活－
别按 固液 比 １ ： １ ０加入蒸馏水 ， ９ ５℃水浴浸提 ４ ｈ ， １ ４ ３ ０ ｘ ｇ离 心 １ ０ ａ ｒ ｉ ｎ 将上清取出 ， 滤渣再加等量蒸馏水 ， 同法提取 １ 次，
合并滤液。将各提取物分别稀释到 ６ ． ２ ５ 、 １ ２ ． ５ 、 ２ ５ 、 ５ ０ 、 １ ０ ０ ｍ咖 ｌ 不 同梯度 的浓度 ， 浓度以浸提干粉质量记 ， 备用【 ３ ］ 。
公 司） ， ＷＦ Ｊ ２ １ ０ ０型 可见分光光度计 ［ 尤尼柯 （ 上海 ） 仪器有 限
公 司］ ， Ｔ Ｄ Ｌ － ４台式离心机 （ 上海 安亭科学 仪器 厂制造 ） ， Ｈ Ｇ ． ９ ２ ４ ３ Ｂ Ｓ ． ｍ电热恒温鼓风干燥箱 （ 上海新 苗医疗器械制造有
Ｄ Ｐ Ｐ Ｈ・ 溶液， 充 分摇匀后 于暗处 在室温下反 应 ３ ０ ａｉ ｒ ｎ ， 然后 于５ １ ７ ｎ ｍ处测定吸光值 Ａ 。用 ０ ． ５ ｍ ｌ 样品提取液加等体积 、 北虫草 ， 是我 国特 有 的传 统名
分光光度法测定北虫草提取物中多糖的含量
分光光度法测定北虫草提取物中多糖的含量摘要:目的:建立北虫草提取物中多糖的含量测定方法。
方法:采用将多糖水解成单糖,经与显色剂3,5-二硝基水杨酸试液显色后,在520nm处测定吸收度的分光光度法。
结果:虫草多糖在0.0006mg～0.030mg范围内时与吸收值有良好的线性关系,R=0.9992,平均加样回收率为99.54%,回收率的RDS为0.63%（n=11）。
结论:该方法操作简便、灵敏、准确、重现性好,适用于虫草多糖的质量控制。
目前国内的北虫草人工养殖规模不断加大,北虫草子实体及北虫草培养基中含有多种生理活性物质,其中的虫草多糖是含量最高的,可以占到总干重量的3%～8%[1],虫草多糖具有提高免疫功能、抗肿瘤、抗衰老、降血糖、抗放射、保护肾脏、抗病毒、降血脂、抗动脉粥样硬化、保肝、耐缺氧等作用[2] [3]。
北虫草提取物是以人工栽培的北虫草子实体及北虫草培养基为原料,经水提－醇沉工艺生产所得,为有效控制北虫草提取物的质量,采用分光光度法对北虫草提取物中多糖的含量进行了测定。
关键词:分光光度法北虫草提取物虫草多糖含量测定1、仪器与试剂北虫草提取物（黑龙江新医圣制药有限责任公司）;UV754N型可见—紫外分光光度计（上海精密科学仪器）;葡萄糖对照品（中国药品生物制品检定所,批号:110833-200902）;试剂均为分析纯,水为重蒸馏水。
2、方法2.1 单糖供试品溶液的制备取本品,研细,精密称取0.8g,置研钵中,加少量水研磨片刻,并用水分次转移至100ml 量瓶中,加水至刻度,摇匀,离心,取上清液,即得。
2.2 总糖供试品溶液的制备取本品,研细,精密称取0.8g置研钵中,加少量水研磨片刻,用盐酸溶液（1→2）10ml分次将糊状物转移至烧瓶中,加热回流30分钟,放冷,加40%氢氧化钠溶液调节PH值至中性,移入500ml瓶中,加水至刻度,离心,取上清液,即得。
2.3 北虫草多糖含量的测定精密量取对照品溶液与单糖、总糖供试品溶液各1ml,分别置25ml量瓶中,各加3,5-二硝基水杨酸试液2ml,摇匀,置沸水浴中加热5分钟,立即冷却。
虫草多糖的分离纯化及含量测定
虫草多糖的分离纯化及含量测定作者：崔立勋张爱华孙守英来源：《中国医药科学》2012年第21期[摘要]目的采用发酵法从冬虫夏草发酵液及菌丝体中提取、分离虫草多糖。
方法采用乙醇沉淀法分离冬虫夏草发酵液和菌丝体中的多糖；采用苯酚硫酸法测定样品中多糖含量。
结果采用此法进行制备、检测，方法简单快速，结果准确，适宜推广使用。
结论此法无需多糖纯品，具有快速简单、精确度高、灵敏度高、重现性较好的优点，是检测虫草多糖含量的较优方法之一。
[关键词]发酵液；虫草多糖；菌丝体虫草多糖；分离纯化；含量测定[中图分类号] R28 [文献标识码] B [文章编号] 2095-0616（2012）21-95-02Purification and determination of Cordyceps polysaccharideCUI Lixun1 ZHANG Aihua1 SUN Shouying21.Heilongjiang Biotechnology Vocational College，Harbin 150025，China；2.Heilongjiang New Yisheng Pharmaceutical Co.，Ltd，Jixi 158200，China[Abstract] Objective Using the method of inoculated fermentation to extract and separate the Cordyceps polysaccharide from the zymotic fluid and mycelium of Chinese caterpillar fungus. Methods Separated the polysaccharide of Chinese caterpillar fungus' zymotic fluid and mycelium in ethanol precipitation；survey and evaluate the polysaccharide content of samples in phenol-sulfuric acid method. Results It is profitable for using widely because of the fast， easy method and exact result for producing and detecting. Conclusion This method is one of excellent ways for detecting the Cordyceps polysaccharide contents and it doesn't need the polysaccharide from pure product. The advantages are fast and easy， high accuracy and sensitivity，and good reproducibility.[Key words] Fermentation broth；Cordyceps polysaccharide；Mycelium of Cordyceps polysaccharide； Separation and purification； Content determination冬虫夏草首载于本草从新，味甘，性温，归肺、肾经，具补肺益肾，止血化痰之功效。
紫外分光光度法测定北虫草片剂中腺苷的含量
紫外分光光度法测定北虫草片剂中腺苷的含量
姚玉兰;李芳;郑一敏;胥秀英;傅善权
【期刊名称】《重庆理工大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2014(028)006
【摘要】为了测定北虫草片剂中腺苷的含量,采用紫外分光光度法进行了腺苷含量的测定.结果表明:腺苷线性范围为0.004～0.012 g/L,r=0.999 7,回收率为100.94％(n=5),RSD=1.12％.该方法操作简单、快速,线性关系良好,可用于北虫草制剂的质
量控制.
【总页数】3页(P78-80)
【作者】姚玉兰;李芳;郑一敏;胥秀英;傅善权
【作者单位】重庆理工大学药学与生物工程学院,重庆400054;重庆理工大学药学
与生物工程学院,重庆400054;重庆理工大学药学与生物工程学院,重庆400054;重
庆理工大学药学与生物工程学院,重庆400054;重庆理工大学药学与生物工程学院,
重庆400054
【正文语种】中文
【中图分类】Q525
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1.紫外分光光度法测定北虫草片剂中腺苷的含量 [J], 姚玉兰;李芳;郑一敏;胥秀英;
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分光光度法测定北虫草提取物中多糖的含量作者：张爱华吕立新宋艳高秀萍
来源：《中国科技纵横》2012年第23期
摘要:目的:建立北虫草提取物中多糖的含量测定方法。
方法:采用将多糖水解成单糖,经与显色剂3,5-二硝基水杨酸试液显色后,在520nm处测定吸收度的分光光度法。
结果:虫草多糖在0.0006mg～0.030mg范围内时与吸收值有良好的线性关系,R=0.9992,平均加样回收率为99.54%,回收率的RDS为0.63%（n=11）。
结论:该方法操作简便、灵敏、准确、重现性好,适用于虫草多糖的质量控制。
目前国内的北虫草人工养殖规模不断加大,北虫草子实体及北虫草培养基中含有多种生理活性物质,其中的虫草多糖是含量最高的,可以占到总干重量的3%～8%[1],虫草多糖具有提高免疫功能、抗肿瘤、抗衰老、降血糖、抗放射、保护肾脏、抗病毒、降血脂、抗动脉粥样硬化、保肝、耐缺氧等作用[2] [3]。
北虫草提取物是以人工栽培的北虫草子实体及北虫草培养基为原料,经水提－醇沉工艺生产所得,为有效控制北虫草提取物的质量,采用分光光度法对北虫草提取物中多糖的含量进行了测定。
关键词:分光光度法北虫草提取物虫草多糖含量测定
1、仪器与试剂
北虫草提取物（黑龙江新医圣制药有限责任公司）;UV754N型可见—紫外分光光度计（上海精密科学仪器）;葡萄糖对照品（中国药品生物制品检定所,批号:110833-200902）;试剂均为分析纯,水为重蒸馏水。
2、方法
2.1 单糖供试品溶液的制备
取本品,研细,精密称取0.8g,置研钵中,加少量水研磨片刻,并用水分次转移至100ml 量瓶中,加水至刻度,摇匀,离心,取上清液,即得。
2.2 总糖供试品溶液的制备
取本品,研细,精密称取0.8g置研钵中,加少量水研磨片刻,用盐酸溶液（1→2）10ml分次将糊状物转移至烧瓶中,加热回流30分钟,放冷,加40%氢氧化钠溶液调节PH值至中性,移入500ml 瓶中,加水至刻度,离心,取上清液,即得。
2.3 北虫草多糖含量的测定
精密量取对照品溶液与单糖、总糖供试品溶液各1ml,分别置25ml量瓶中,各加3,5-二硝基水杨酸试液2ml,摇匀,置沸水浴中加热5分钟,立即冷却。
加水至刻度,取水1ml,同法制成空白溶液,作空白,照分光光度法（中国药典2010版一部附录VA）,分别在520nm波长处测定吸收度,按公式计算虫草多糖的含量,即得。
公式:
式中:C样:供试品的浓度;C对:对照品溶液浓度; A对:对照品溶液吸收度;A总:总糖供试品溶液吸收度;A单:单糖供试品溶液的吸收度;W总:总糖测定取样量W单:单糖测定取样量。
3、结果与分析
3.1 线性相关性实验
分别精密量取对照品溶液（浓度0.03mg/ml）0.1ml、0.5ml、1.0 ml、1.5 ml、2.0ml、
2.5ml、
3.0ml、3.5ml、
4.0ml、4.5ml、
5.0ml置50ml容量瓶中,加1.5ml的3,5-二硝基水杨酸试液,混匀,置水浴中加热5分钟,迅速冷却,加水至刻度,摇匀,照分光光度法,在520nm的波长处分别测定吸收度（见表1）,以吸收度A为纵坐标,对照品浓度为横坐标绘制标准曲线（见图1）,计算。
回归方程为:Y＝0.0496X+ 17.3021R＝0.9992
线性范围0.0006mg～0.030mg,相关性良好。
3.2 测定波长选择与稳定性实验
用3,5-二硝基水杨酸测定多糖中还原糖时,在475-486nm及520nm处有两个最大吸收波长[4]。
本试验样品加显色剂后放置不同的时间分别在486nm及520nm处测定总糖的A值,比较其稳定性,结果见下表2:
3.3 样品水解时间的考查
取本品三份,每份0.8g,精密称定,置研钵中,加少量水研磨片刻,用盐酸溶液（1→2）10ml分次将糊状物转移至烧瓶中,分别加热回流10分钟、20分钟、30分钟、40分钟、50分钟,含量结果见下表3。
3.4 精密度实验
分别取总糖、单糖供试品溶液（批号:20100801）,连续取样分别测定6次,记录吸收度如下表4。
3.5 重复性试验
取本品6份（批号:20100801）,依试验方法测定含量结果见表5。
3.6 回收率试验
采取加样回收试验法,取本品6份,每份0.75g,精密称定（总糖含量:31.5%）,依试验方法制备供试品溶液,直至水解完成,用40%氢氧化钠中和,在总糖供试液中精密加入葡萄糖对照品溶液1.0ml(0.3mg/ml),进行含量测定,计算回收率见表6。
加样回收率（%）=×100%
4、讨论
(1)北虫草提取物取样后应及时测定含量,不能马上分析时,应放入冰箱保存,否则,由于多糖变质,使分析结果偏低;分析样品时的稀释样,不能放久,由于容量瓶对糖有吸附,会造成糖含量偏低。
(2)实验表明盐酸的用量、浓度、显色液的用量及配制时间、显色温度及时间等因数对吸光度值均有不同程度的影响。
(3)色素等还原性物质可与显色剂显色,可采用水解前测定值校正水解后测定值的方法,简便而有效地排除了色素等杂质的干扰。
(4)本实验表明利用3,5-二硝基水杨酸显色的分光光度法测定北虫草提取物中多糖的含量是可行的,方法具有操作简便、快速、精密度和回收率较高、重现性好等特点。
参考文献
[1]Li S P, Li P, Dong T T, et al. Anti - oxidation activity of differenttypes of natural Cordyceps sinensis and cultured Cordyceps mycelia[J].Phytomedicine,2001,8(3):207- 212.
[2]肖建辉,梁宗琦,刘爱英.虫草无性型及其相关真菌多糖的研究开发现状.药学学
报,2002,37(7):589-592.
[3]X iao JH,Zhong JJ,Seconda ry m etabo lites fro m Cordyce p sspec ies and their antit umo r ac ti v ity st udies, Recent Pa -ten ts B iotechnol 2007,1(2):123 -137.。