伤寒、副伤寒沙门菌生物学特性

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沙门菌检验技术和方法

沙门菌的增菌液
四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)：含有胆盐，抑制革兰氏阳性球菌和部分大肠埃希氏菌的生长，而伤寒与付伤寒沙门菌仍能生长。
亚硒酸盐胱氨酸增菌液（SC）：可对伤寒及其他沙门菌作选择性增菌，亚硒酸与蛋白胨中的含硫氨基酸结合，形成亚硒酸和硫的复合物，影响细菌硫代谢，从而抑制大肠埃希氏菌、肠球菌和变形杆菌的增殖。
➢ 现修改为：在接种TSI琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基的同时增加一项营养琼脂（NA），经TSI琼脂和赖氨酸脱羧酶试验培养基的选择后，可筛掉大部分非沙门氏菌株，大大减少了工作量，同时也满足了API 20E或 Vitek GNI鉴定的需要。
➢ 为保持与原标准的一致性，新标准也保留了可以同时直接接种蛋白胨水 (供做靛基质试验)、尿素琼脂 (pH7.2)、KCN 培养基的内容。本部分还增加了对疑似菌落进行留样确认的部分，以备必要时复查，这对生化鉴定不确定的菌落进行进一步验证是非常必要的。
沙门菌的菌落形态：产H2S的菌落为黑色有金属光泽、棕褐色或灰色。菌落周围培养基可呈黑色或棕色，有些不产H2S的菌落，形成灰绿的菌落，周围培养基不变。
注：此培养基在制作过程中过分加热可使培养基的选择性降低，与TTB或SC合用可获得更高的检出率。
沙门菌的分离培养基
HE琼脂：在保证细菌所需营养的基础上，加入了一些抑制剂，如：胆盐、柠檬酸盐、去氧胆酸钠等，可抑制某些肠道致病菌和革兰氏阳性菌的生长，但对革兰氏阴性的肠道致病菌则无抑制作用。
样品液增加调整pH值。选择性增菌：使用“TTB、SC”，取消“MM”。
分离培养基：使用BS、XLD、HE、科玛嘉显色培养基。取消DHL、SS。
生化鉴定： 1.采纳API 20E或Vitek GNI为传统生化鉴定方法的选择性替代方法。 2.生化鉴定项目进行调整：

微生物-沙门氏菌

沙门氏菌Ⅲ （即亚利桑那菌）黑色有金属光泽
乳糖迟缓阳性或阴性的菌株与沙门氏菌Ⅰ、 Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ相同；乳糖阳性的菌株为粉红色，中心带黑色。乳糖阳性的菌株为黄色，中心黑色或几乎全黑色；乳糖迟缓阳性或阴性的菌株为蓝绿色或蓝色，中心黑色或几乎全黑色。乳糖迟缓阳性或阴性的菌株，与沙门氏菌 Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ相同；乳糖阳性的菌株为粉红色，中心黑色，但中心无黑色形成时与大肠艾希氏菌不能区分.
培养基全黄色
制好的培养基
斜面、底部黄色，并产生H2S
对照管
斜面红色，底部黄色，产生H2S
底面黄色，并产生CO2
食品安全检验技术（微生物部分）沙门氏菌检验
（1）斜面碱性（红色-）底部酸性（黄色+）产气或不产气（产气时会造成琼脂裂开）：表示仅葡萄糖发酵。因微生物优先分解葡萄糖产酸，使培养基变黄，但因葡萄糖含量低，于斜面产生之微量酸立即氧化而呈碱性反应，同时培养基中的蛋白质也随之利用而产碱，培养基底部则因氧张力较小，且微生物生长较慢，故仍维持酸性反应。（2）斜面酸性（黄色+）底部酸性（黄色+）产气或不产气：表示除了葡萄糖发酵外，乳糖与（或）蔗糖也发酵。由于乳糖与蔗糖浓度高，经继续发酵，可维持培养基斜面与底部保持酸性反应。
10mL＋MM （或TTB）100mL
42 ℃ 18h～24h
10mL＋SC100mL
36 ℃ ± 1 ℃ 18h～24h
直接增菌法 25g＋灭菌生理盐水25mL
检样匀液25mL ＋MM （或TTB）100mL
42 ℃ 18h～24h
检样匀液25mL
＋SC100mL
36 ℃ ± 1 ℃ 18h～24h
（二）分离培养

乙型副伤寒沙门菌生化鉴定

乙型副伤寒沙门菌生化鉴定摘要：一、乙型副伤寒沙门菌的简介二、乙型副伤寒沙门菌的生化特性三、乙型副伤寒沙门菌的鉴定方法四、鉴定结果及应用正文：乙型副伤寒沙门菌（Salmonella para-typhi B）是一种常见的细菌，属于沙门氏菌属。

它可引起乙型副伤寒，是一种人畜共患的传染病。

下面将从乙型副伤寒沙门菌的生化特性、鉴定方法和鉴定结果及应用等方面进行详细阐述。

一、乙型副伤寒沙门菌的简介乙型副伤寒沙门菌，简称乙副沙门菌，是一种革兰氏阴性菌。

其菌落呈红色、湿润、光滑，无臭味。

乙型副伤寒沙门菌可以通过食物、水、接触等途径传播，人群普遍易感。

二、乙型副伤寒沙门菌的生化特性乙型副伤寒沙门菌在生化试验中，有以下特点：1.发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖，产酸，不产气。

2.发酵蔗糖、阿拉伯糖、木糖，产酸，不产气。

3.产氨，靛基质试验阳性。

4.甲基红试验阳性。

5.V-P 试验阴性。

6.柠檬酸盐利用试验阳性。

7.硝酸盐还原试验阴性。

三、乙型副伤寒沙门菌的鉴定方法乙型副伤寒沙门菌的鉴定方法主要包括生化试验和血清学试验。

其中，生化试验是最常用的方法。

如上所述，乙型副伤寒沙门菌在生化试验中具有独特的特点，通过观察这些特点，可以初步鉴定乙型副伤寒沙门菌。

血清学试验则可以进一步确认鉴定结果。

四、鉴定结果及应用乙型副伤寒沙门菌的鉴定结果对于临床诊断和防治具有重要意义。

通过鉴定，可以及时发现患者感染乙型副伤寒沙门菌，从而采取相应的治疗措施。

此外，对乙型副伤寒沙门菌的鉴定也有助于食品安全监测和动物疫病的诊断。

复件微生物检测-第5章2

3. 生化特性

靛基质-，甲基红+，v-p -，柠檬酸盐反应d，产硫化氢，尿素酶反应-，还原硝酸盐， ℬ-葡萄糖醛酸苷酶d，不能发酵乳糖，可以被噬菌体裂解。
4. 抗原结构
（1）抗原构造菌体抗原（o）：不被乙醇、0.1%石炭酸所破坏。与特异性抗血清呈颗粒状凝集，形成慢，不易摇散。现已知有50多种，多数沙门菌含有两种以上的O抗原，有的O抗原是一种菌独有的，有的是几种菌共有的，凡含有共同特异性抗原成分的血清型归为一个群，可将沙门菌化分为 42群，按A-Z排列，Z以后的顺序以O51-O67表示。引起人类沙门菌病的95%以上都在A-F 6个群内。
E
F
伦敦沙门菌(S. London)
阿伯丁沙门菌 (S. aberdeen)
3,10
11

凝集试验方法

A-F多价O血清稀释接种环沾取2-3环 1.5cm×0.5cm条形涂抹混匀
二者比例适当，菌量过多过少均不易观察到正确结果。阳性反应通常在3min内发生。血清效价低反应迟缓时，应将玻片臵培养皿内，放一个湿棉球，盖上皿盖，经约 20min再观察结果。出现凝集现象的待检菌培养物，应以灭菌的生理盐水溶液代替A-F多价O血清，与培养物混匀做对照试验，对照应无凝集现象，方可判为阳性反应。
苯丙氨酸脱氨酶试验
待检菌新鲜培养物苯丙氨酸琼脂培养基
36℃18-24h
苯丙氨酸脱氨酶
苯丙酮酸阳性
10%三氯化铁 4-5滴
接种培养物要多避免假阴性立即观察，5min之内变形杆菌阳性，肠杆菌科阴性
一、生物学特性 1.形态
两端钝圆的革兰氏阴性杆菌，（0.4-0.9）µ ×(1-3)µ m m，无芽孢，周生鞭毛，一般无荚膜，少数有包膜。光滑型的细菌大小均匀，粗糙型则大小不一，长短不一。

第十章肠杆菌科伤寒沙门菌-护理学

Thomson’s theories on typhoid, a major killer, were derided.
伤寒表现：
持续高热泳衣伤寒病容玫瑰疹肝脾肿大相对缓脉
二、致病性与免疫性
小肠粘膜上皮细胞 ↓
伤寒沙门菌
肠壁淋巴组织(吞噬细胞) ↓
血液(第一次菌血症) ↓
肠杆菌科
概述
一、肠杆菌科重要菌属及代表菌种
埃希菌属：大肠埃希菌沙门菌属：伤寒沙门菌
甲型、乙型副伤寒沙门菌志贺菌属：痢疾志贺菌变形杆菌属：变形杆菌克雷伯菌属：肺炎克氏菌
概述
二、生物学特性
1. 形态与结构：革兰阴性短杆菌，无芽胞，多数有周鞭毛，致病菌大都有菌毛。
三、微生物学检查法
肥达反应的结果判断
必须结合临床表现、病程、病史，以及地区流行病学情况。
肥达试验（Widal test）
鞭毛凝集
四、防治原则
1、控制传染源 2、切断传播途径 3、提高人群免疫力
减毒口服活疫苗是研究方向。不同地区伤寒沙门菌有其不同耐药谱。常用喹诺酮类等治疗。
伤寒沙门菌
伤寒
俗称肠热病、大热病，是由伤寒沙门菌引起的肠道传染病，传染性强，夏秋季多见。
中医的“伤寒”
我国古代医学将多种急性发热的疾病统称为伤寒。东汉张仲景著有《伤寒论》。
一、生物学性状
1. 形态与染色：革兰阴性杆菌，有周鞭毛及菌毛。
一、生物学性状
2. 生化反应：不发酵乳糖 3. 血清学反应：主要有O和 H两种抗原。伤寒沙门菌还有Vi 抗原（包膜抗原）。对沙门菌属的型和亚型鉴定有重要意义。
病情共同点：发病初起时多在 38℃左右，但4～5d后持续高热；食欲缺乏；相对缓脉（体温增高，脉搏不增加）；脾脏肿大；皮肤玫瑰疹。白细胞减少。

抗菌药物临床合理应用试题及答案

抗菌药物临床合理应用试题及答案1.关于肠杆菌科细菌的论述，不正确的是A.所有肠杆菌科细菌都不形成芽胞B.肠杆菌科细菌均为G-杆菌C.肠杆菌科细菌中致病菌可分解乳糖D.肠杆菌科细菌中非致病菌可分解乳糖E.肠杆菌科细菌中少数致病菌可迟缓分解乳糖2.关于大肠埃希菌的特性，不正确的是A.多数有普通菌毛和性菌毛B.多数菌株有周身鞭毛C.为肠道正常菌群，无致病作用D.分解乳糖产酸产气E.没有M抗原3.伤寒沙门菌Vi抗原变异属于A.毒力变异B.耐药性变异C.菌落变异D.形态变异E.抵抗力变异4.与立克次体有交叉抗原的肠杆菌科细菌是A.沙门菌的某些菌株B.志贺菌的某些菌株C.埃希菌的某些菌株D.变形杆菌的某些菌株E.克雷伯菌的某些菌株5.典型的大肠埃希菌的生化反应结果是A.乳糖一，IMVC(十、一、一、一)B.乳糖十，IMVC(十、十、一、一)C.乳糖一，IMVC(十、十、一、一)D.乳糖一，IMVC(十、+、十、一)E.乳糖一，IMVC(十、十、一、一)6.初步鉴定肠道致病菌与非致病菌常用的试验是A.IMVC试验B.甘露醇分解试验C.乳糖发酵试验D.胆汁溶菌试验E.葡萄糖发酵试验7.培养肠道致病菌的强选择性培养基是A.S.S平板B.中国兰平板C.双糖铁培养基D.乳糖发酵管E.巧克力色平板8.致病性大肠埃希菌致病特点是A.只引起肠道感染B.不引起泌尿生殖器感染C.内、外毒素同时致病D.外毒素可引起严重的毒血症E.不引起败血症9.致病性大肠埃希菌肠毒素的致病机理是A.抑制蛋白质合成中的延长因子-2B.抑制内毒素脱毒C.作用于肠壁植物神经D.激活腺苷酸环化酶E.封闭乙酰胆碱的释放10.下列尿培养结果，哪项对诊断尿道感染有意义A.每毫升尿含大肠埃希菌量为10000B.每毫升尿含大肠埃希菌量为100000以上C.每毫升尿含大肠埃希菌量为1000以上D.每毫升尿含大肠埃希菌量为5000以上E.尿液培养无菌生长11.下列试验中，哪项试验可区别沙门菌与志贺菌A.动力试验B.尿素分解试验C.甘露醇发酵试验D.甲基红试验E.枸橼酸盐利用试验12.对痢疾病人做微生物学检查，下列哪要是错误的A.分离培养细菌，作生化鉴定B.取粪便标本分离培养C.取粘液性或脓血性粪便涂片，革兰染色镜检D.取标本接种于肠道选择培养基培养E.最后做血清学鉴定13.鉴别致病性非致病性肠杆菌科细菌的重要依据是A.是否发酵葡萄糖B.是否发酵乳糖C.是否液化明胶D.是否产生硫化氢E.是否产生靛基质14.急性中毒性菌痢的主要临床表现有A.全身中毒症状B.剧烈呕吐C.腹泻、腹痛D.相对缓脉E.脓血便15.肠道致病菌的共同特性是A.传播途径是粪-口途径B.在S.S平板上是无色透明小菌落C.一般不分解乳糖D.都有O.H抗原E.以上都不是16.肠杆菌科细菌间常用的主要鉴别依据是A.生化反应B.毒力试验C.抗原构造D.形态染色E.以上都不是17.大肠埃希菌在食品卫生细菌学方面的重要性在于A.大肠埃希菌能产生肠毒素B.大肠埃希菌可引起各种腹泻C.大肠埃希菌是人体肠道中的正常菌群D.常作为被粪便污染的检测指标E.以上都不是18.初步将志贺菌从肠杆菌科细菌中鉴别出来的生化反应方法是A.培养基中加亚碲酸钾B.菊糖发酵试验C.尿素分解试验D.胆汁溶解试验E.双糖铁培养基接种试验19.对细菌性痢疾来说，下列正确的一项是A.病变部位主要在直肠及乙状结肠B.抗菌治疗可延长带菌状态C.结肠和小肠均有炎症D.粪便直接涂片可检出细菌E.粪便中有大量单核细胞20.对志贺菌属而言不易产生耐药性的药物是A.青霉素B.链霉素C.庆大霉素D.红霉素E.黄连素21.伤寒沙门菌的内毒素使A.体温升高，外周血白细胞升高B.体温不变，外周血白细胞升高C.体温不变，外周血白细胞下降D.体温升高，外周血白细胞数下降E.体温升高，外周血白细胞不变22.伤寒沙门菌患者的肠道淋巴组织炎症反应和单核细胞浸润引起的肠壁坏死和溃疡的机理是A.定居因子(CFA)B.伤寒菌裂解后释出的强烈内毒素C.伤寒菌释放的强烈的外毒素D.伤寒菌释出的肠毒素E.伤寒菌具有的侵袭力23.伤寒慢性带菌者的致病菌检出率高的标本是A.血液B.粪便液C.胆汁D.痰E.尿液24.目前筛查伤寒带菌者的方法是检测血清A.O抗体B.H抗体C.K抗体D.Vi抗体E.O加Vi抗体25.疑为肠热症病人常需抽血做细菌学检查，哪个时期采血样最好A.发病第一周B.发病第二周C.发病第三周D.疾病全程E.病程恢复期26.伤寒病人进行粪便培养致病菌的最佳时间是A.潜伏期末B.发病l～4dC.发病5～10dD.发病2～3周E.发病4周后27.伤寒与副伤寒沙门菌致病特点是A.不引起败血症B.于潜伏期，可在肠道淋巴组织内繁殖C.在发病2周内没有第二次菌血症D.不侵犯肝、脾、肾等器官E.可引起内脏化脓性感染28.关于伤寒及副伤寒沙门菌感染的免疫性，正确的描述是A.病愈后可重复感染同一型细菌B.血清抗体量的高低与病情轻重成正比C.血清抗体对此菌无杀伤作用D.因细胞免疫可获得较牢固免疫力E.因体液免疫力获得较牢固免疫力29.某女，发热1周，食欲不振、乏力、腹胀、腹泻、脾肿大。

沙门菌感染病情说明指导书

沙门菌感染病情说明指导书一、沙门菌感染概述沙门菌感染（salmonellosis）是沙门菌所致感染的总称，包括伤寒、副伤寒及其他非伤寒沙门菌感染。

临床常见的沙门菌属感染以伤寒和副伤寒多见，分别由伤寒沙门菌和副伤寒沙门菌所致，还包括鼠伤寒沙门菌感染以及其他非伤寒沙门菌感染。

消化道传播是引起人类沙门菌感染的主要途径，呼吸道传播、直接或间接接触也可引起沙门菌感染。

患者临床常见症状有腹痛、腹泻、恶心、呕吐、乏力、发热、食欲减退等。

沙门菌感染以药物治疗为主，同时应做好隔离措施。

英文名称：salmonellosis。

其它名称：无。

5.12伤寒沙门菌走进医学微生物

伤寒细胞
伤寒肉芽肿
二、致病性
2. 胃肠炎(食物中毒):最常见
鼠伤寒沙门菌猪霍乱沙门菌肠炎沙门菌
食物中毒
3. 败血症：
希氏沙门菌鼠伤寒沙门菌猪霍乱沙门菌肠炎沙门菌
败血症（高热、寒战、厌食、贫血）血
脑膜炎、骨髓炎、胆囊炎、关节炎
4. 无症状带菌者
“伤寒玛丽”
三、免疫性
伤寒痊愈后会获得终生免疫力吗？细胞免疫为主,病后可获牢固免疫力
OH抗原性强:可用血清凝集试验
(肥达反应,Widal test)来测定
Vi抗原: 抗吞噬,不稳定,抗原性弱
二、致病性
致病性取决于:细菌数量,细菌毒力,入侵部位,人体抵抗力
侵袭力内毒素肠毒素
Vi-Ag
二、致病性所致疾病
1.肠热症 ★
传染源患者,带菌者传播途径粪-口途径临床表现:持续发热,相对缓脉,玫瑰疹, 肝脾肿大等。
真诚感谢上述所用图片的所有作者！！
Thanks for your attention！
13
玫瑰疹
二、致病性所致疾病
1.肠热症 ★
发生变态反应，肠局部坏死溃疡致肠出血、肠穿孔
发热、不适、全身疼痛
病人粪-口带菌者
肠壁固有层淋巴液淋巴结肠系膜淋巴结胸导管
血第菌一血次症
（吞噬细胞）
第二次菌血症
胆囊、骨髓、肝、肾、脾
随尿排出
二、致病性
所致疾病
1.肠热症 ★
感染特点:胞内寄生,以巨噬细胞增生为特征。基本病理变化:伤寒细胞,伤寒肉芽肿。
伤寒沙门菌(Salmonella typhi)
学习内容
一、生物学性状二、致病性三、免疫性

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伤寒、副伤寒沙门菌生物学特性
伤寒、副伤寒甲乙丙均属于肠杆菌科、沙门菌属，为革兰氏阴性直杆菌，大小0.7～1.5μm×2.0～5.0μm，多具有周鞭毛，能运动，无芽胞无荚膜。

兼性厌氧，最适的生长温度为35～37℃，Ph6.8～7.8.它们对营养的要求不高，普通培养基即可生长出圆形、光滑、湿润、半透明边缘整齐的菌落，但沙门菌经人工传代后会从光滑型菌落逐步过渡为粗燥型菌落。

不发酵乳糖，在SS琼脂平板上形成的菌落中心呈黑色。

伤寒和副伤寒甲乙丙具有的抗原结构包括菌体抗原（O）、鞭毛抗原（H）及表面抗原。

O抗原具有耐热性，能耐受100℃2.5h，它是分群的依据，其刺激机体产生的抗体以IgM为主，能够与相应的抗血清反应表现出颗粒状凝集；H抗原为不稳定的蛋。

白质抗原，加热或用乙醇处理均会被破坏。

沙门菌的H抗原有两个相，第一相特异性较高，在种间不同。

第二相为非特异相，为沙门菌属共有。

H抗原是定型的依据，其刺激机体产生的抗体以IgG为主，与相应的抗血清反应表现为絮状沉淀；表面抗原包括Vi、M和5抗原三种，Vi抗原不耐热，加热60℃30min或经石炭酸处理即可破坏，经人工培养基传代后也易失活。

新分离的伤寒以及副伤寒丙沙门菌常带有此抗原，它位于菌体的最表层，有抗吞噬及保护细菌免受相应抗体补体的溶菌作用。

当Vi抗原存在时可用于分型，但它也可阻止O抗原与相应抗体的凝集反应，必须在血清学鉴定时加以注意；M抗原又称粘液抗原，虽不能用于分型，但它的存在也可阻止O抗原与相应抗体的凝集反应；5抗原可被1mol/L的盐酸所破坏，属于一种表面抗原。

沙门菌的抵抗力都不强，加热60℃15～20min即被杀死。

在水中可存活2～3周，粪便中可存活1～2个月，它们对胆盐和煌绿等染料有抵抗力，可以此制备选择性培养基。