培养基(06零)
六种培养基对平菇(Ph06)母种分离对比试验

庶糖加热至完全溶化。在 10 2" C高压灭菌 3m n 0 i.倒平
扳待用 。
养基、综合马铃薯培养基、马铃薯 葡萄糖培养基。
表 1六种培养基分离黑平菇菌丝生长状态对照
4 .玉米粉蔗糖培养基
玉米 粉 4 g 0 ,蔗 糖 2g 0 ,蛋 白胨 2 .琼 脂 2g g 0 .水
l 0 m1 p 7 0 8 0 O0 . H. ~ .。
7m的 平板 ,待 用 。 m
2 .综合马铃薯培养基 (PA CD )
马 铃薯 20 . 葡萄糖 2 g 0 g g O .g 0g 0 ,K P4 .M S・ 5 . 3 1 维 生素 B lm .琼脂 2g t Og 0 .水 l0m , O0 l
、
研究方 法
p 7 0 .。 H . ~8 0 方法同上。 10 在 2 ℃高压灭菌 3m n 0 i,
倒 平板 待 用。
( )菌株 一
供试平菇 (h 6 P 0 )母种取自佳木斯大学生命科学
学院微生物实验室.菌种编号为 58 。于 20 44 06年 1 0
3 .小麦粒琼脂培养基
小 麦 粒 15 .琼 脂 2 g 2g 0 ,兼 糖 lg O .水 l0m , O0l
p 7 0~ 8 0 H . .。
( 二)培养基的制备
1 马铃 薯 葡萄糖 培 养基 ( D )… . PA
马 铃薯 ( 皮 )0 g 葡萄 糖 2 g 去 20 . 0 ,琼 脂 2g 水 0。
l 0 m1 p 7 O 8 0 O0 . H . ~ . 。
侧耳属。该属有 2 余种,都可食用。平菇是秋来春初 0 生长的一种低温型、 经济价值高的食用菌和药用菌.以 其繁殖周期短而广泛栽培。平菇子实体一般丛生,菌 盖直径 2 c .扁半球形。后伸展.中央稍凸出.淡  ̄3m
培养基的组成、配制与灭菌

1、大量元素:
组织培养中,各种矿质营养主要从培养基中获得, N、P、K、Ca、Mg、S等6种大量元素依靠各种无机 盐提供。
不同植物种类和不同试验目的对元素的使用量要求 不同,需经试验确定。
目前已选择出多种培养基配方用于植物组织培养。 其中以MS应用最广泛。
通常激素母液浓度生长素类为0.1~0.5 mg/ml, 细 胞分裂素母液浓度为0.2~1.0 mg/ml.
四、培养基的配制:
1、量取母液:营养元素和激素。 2、称量蔗糖、琼脂,放入600ml左右蒸馏水的锅 内,电路上加热,使琼脂溶化。 3、加入母液,混合均匀,调整pH值。 4、分装入瓶,每瓶40-50ml。 5、封口:用4-6层称量纸封口,之后灭菌备用。
在植物组织培养中,主要通过植物激素 及生长调节物质对离体的组织、器官的形 态发生进行调控。包括诱导细胞分裂、愈 伤组织的生长、根芽的分化以及体细胞胚 胎发生等。
常用的植物激素及生长调节物涉及五大类植物 激素:
1、生长素类:IAA、IBA、NAA、2,4-D 2、细胞分裂类:6-BA、KT(Kin)、ZT、2ip 3、赤霉素类:GA3、GA4、GA7 4、脱落酸:ABA 5、乙烯:ETH
五、培养基的灭菌(高压蒸汽灭菌):
1、加热:
灭菌前检查灭菌锅内水量是否充足, 然后将培养基放于灭菌锅内,改好盖,关 闭放气阀,打开电源,加热升温。
2、排气:
当温度升至0.5kg/cm2时,打开放气阀 彻底排出锅内冷空气。然后关闭放气阀, 促使压力继续上升。
3、温度控制:
当锅内压力升至1.1kg/cm2时,计时15-20 分钟,计时结束后,关闭电源。
二、培养基的类型: 1、高盐浓度培养基:MS、B5、SH等。
培养基及其配制

4、培养皿 规格:9、12cm直径; 适于:游离细胞、 原生质体、花粉等的静置培养、 看护培养、无菌种子的发芽、植物材料的分离等。 5、果酱瓶 规格:200ml罐头瓶,加盖半透明的塑料盖; 特点:成本较低,操作方便,也减少了培养材料的
损伤;缺点是易引起污染。
6、瓶口封塞
要求:要具有一定的通气性和密闭性, 以防止培养基干燥和杂菌污染。
MS salts reduced to 0.47 g. l-1
Some root growth but reduced development of shoots
MS salts increased to 9.52 g. l-1
Shoots developed on upper surface of
Profuse development of roots over the explant upper and lower surface, and few shoots. Some callus
No MS salts
No sign of regeneration from explant
at all.
肌醇:使用浓度一般为100mg/L 氨基酸:是很好的有机氮源,可直接被细胞吸收
利用,常用甘氨酸。
4、植物生长调节物质
1)生长素类: 作用:诱导愈伤组织形成、根的分化和促进细
胞分裂、伸长生长。 IAA(indo acetic acid吲哚乙酸) NAA(naphthalene acetic acid萘乙酸) IBA(indolebutyri acid吲哚丁酸) 2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸) 作用的强弱顺序:2,4-D > NAA > IBA >IAA
培养基的种类

培养基的种类培养基的名目繁多,种类各异,为便于掌握系统化的知识,这里对其进行以下分类并举例介绍。
(一)按对培养基成分的了解来分培养基中所含的营养要素虽都一样,但具体成分却可迥然不同。
如果按人们对其中成分的了解程度来分类有以下三类:1.天然培养基(complexmedium;undefinedmedium)这是指一些利用动、植物或微生物体或其提取物制成的培养基,人们无法确切知道其中的成分。
例如培养各种细菌所用的肉汤蛋白胨培养基,培养酵母菌的麦芽汁培养基等。
天然培养基的优点是取材方便、营养丰富、种类多样、配制方便;缺点是成分不稳定也不甚清楚,因而在做精细的科学实验时,会引起数据不稳定。
因此,天然培养基只适合配制实验室用的各种基本培养基及大生产中的种子培养基或发酵培养基之用。
现将几种用于配制天然培养基的常用原材料的特性列于表5-17。
2.组合培养基(definedmedium)又称合成培养基或综合培养基(syntheticmedium),是一类用多种高纯化学试剂配制成的、各成分(包括微量元素)的量都确切知道的培养基。
例如培养细菌的葡萄糖铵盐培养基,培养放线菌的淀粉硝酸盐培养基(即高氏一号培养基),培养真菌的蔗糖硝酸盐培养基*(即察氏培养基)等。
组合培养基的优点是成分精确、重演性高;缺点是价格较贵、配制较烦。
因此,一般仅用于作营养、代谢、生理、生化、遗传、育种、菌种鉴定和生物测定等定量要求较高的研究工作上。
习惯常以该培养基中所含的碳源和氮源名称来作该培养基的名称,也有以设计人的姓名来命名的。
3.半组合培养基(semi-definedmedium)既含有天然成分又含有纯化学试剂的培养基即称半组合培养基。
例如,培养真菌用的马铃薯蔗糖培养基等。
严格地讲,凡含有未经特殊处理的琼脂的任何组合培养基,实质上都只能看作是一种半组合培养基。
(二)按培养基外观的物理状态来分如按培养基外观的物理状态来分,培养基可分成三类。
培养基

配制培养基的原则和方法是什么培养基有很多种,你要配制哪一种呢?你要查清楚,你要配的培养基的成分有那些,然后把要用的东西找到。
在配制之前你要把装培养基的容器准备好,是用试管、平皿还是三角瓶。
之后看要配的是固体培养基还是液体培养基,觉得是否放琼脂或明胶。
之后找来一个大烧杯,依次把要放的物质放入,要是配的是固体培养基要把加入琼脂或明胶的培养基放在电炉上加热,待琼脂或明胶完全溶解后趁热迅速分装。
之后把分装好的培养基封口,之后选择是干灭还是湿灭,等灭菌之后,配制培养基的工作就完成了。
培养基的配制与灭菌1目的1.1了解并掌握培养基的配制、分装方法1.2掌握各种实验室灭菌方法及技术。
2原理培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。
由于微生物具有不同的营养类型,对营养物质的要求也各不相同,加之实验和研究的目的不同,所以培养基的种类很多,使用的原料也各有差异,但从营养角度分析,培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。
另外,培养基还应具有适宜的pH值、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压。
琼脂是从石花菜等海藻中提取的胶体物质,是应用最广的凝固剂。
加琼脂制成的培养基在98~100℃下融化,于45℃以下凝固。
但多次反复融化,其凝固性降低。
任何一种培养基一经制成就应及时彻底灭菌,以备纯培养用。
一般培养基的灭菌采用高压蒸汽灭菌。
3材料3.1器皿及材料天平、称量纸、牛角匙、精密pH试纸、量筒、刻度搪瓷杯、试管、三角瓶、漏斗、分装架、移液管及移液管筒、培养皿及培养皿盒、玻璃棒、烧杯、试管架、铁丝筐、剪刀、酒精灯、棉花、线绳、牛皮纸或报纸、纱布、乳胶管、电炉、灭菌锅、干燥箱。
3.2药品试剂蛋白胨、牛肉膏、NaCl、K2HPO4、琼脂、NaNO3、KCl、MgSO4、FeSO4、蔗糖、麦芽糖、木糖、葡萄糖、半乳糖、乳糖、土豆汁、豆芽计、磷酸铵、5%NaOH 溶液、5%HCl溶液。
4流程称药品→溶解→调pH值→融化琼脂→过滤分装→包扎标记→灭菌→摆斜面或倒平板。
微生物试剂配制和灭菌标准

微生物试剂的配制和灭菌是在微生物实验室中非常重要的步骤,以确保实验的准确性和可重复性。
以下是一般的微生物试剂配制和灭菌标准:微生物试剂的配制:1. 培养基配制:-使用高质量的培养基成分,例如肉汤、酵母提取物、葡萄糖等。
-通过称量和混合来准确配制培养基,确保成分的准确性和一致性。
-使用蒸馏水或去离子水作为配制培养基的溶剂。
2. 试剂和缓冲液的配制:-使用高纯度的试剂,确保配制过程的精确性。
-采用标准的实验室操作程序,使用适当的实验室设备,如搅拌器、pH计等。
3. 灭菌步骤:-在配制之前,确保工作区域、仪器和培养器具已经经过适当的清洁和消毒。
-配制过程中,使用无菌技术,避免微生物污染。
微生物试剂的灭菌:1. 高压蒸气灭菌(常用于培养基、培养器具等):-使用高压蒸气灭菌器(例如,高压蒸汽灭菌器或自动压力蒸气灭菌器)。
-遵循制造商的使用指南和操作规程。
-通常,121摄氏度、15分钟是一个常见的高压蒸气灭菌条件。
2. 紫外线灭菌(常用于表面消毒):-将试剂瓶、培养皿等物品暴露在紫外线灯下,以进行表面消毒。
-通常需要较长时间的照射,同时确保灭菌面暴露在紫外线下。
3. 过滤灭菌(用于灭菌液体培养基等):-使用合适的微孔过滤器,选择合适的孔径,将液体通过过滤器。
-这种方法适用于温度敏感的试剂。
4. 酒精喷雾或浸泡(常用于实验台面等表面的消毒):-使用酒精(通常是70%的乙醇)进行喷雾或浸泡,以对实验台面等表面进行消毒。
在进行微生物试验时,遵循实验室安全操作规程和制定的消毒程序非常重要。
此外,对于每种试剂和培养基,应该查阅制造商提供的具体使用说明书,以确保正确的配制和灭菌。
培养基

配方二钾 3克 硫酸镁 1.5克
葡萄糖 20克 维生素 10毫克
琼脂 18克
先配制20%马铃薯煮汁,方法同上。在煮汁中加入上述各种组分,加热溶解后补足水分,调整pH值到6。分装,灭菌,备用。 该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。
把这培养基的pH值调到7.2~7.4,可用来培养细菌和放线菌。
配方四 豌豆琼脂培养基
豌豆 80粒 琼脂 5克
水 200毫升
取80粒干豌豆加水,煮沸1小时,用纱布过滤后,在滤液中加入琼脂,煮沸到溶解,分装,灭菌,备用。
4、食用菌菌种培养基
配方一 马铃薯—蔗糖--琼脂培养基
把这培养基的pH值调到7.2~7.4,配方中的糖,如用葡萄糖还可用来培养放线菌和芽孢杆菌。
配方三 黄豆芽汁培养基
黄豆芽 100克 琼脂 15克
葡萄糖 20克 水 1000毫升
洗净黄豆芽,加水煮沸30分钟。用纱布过滤,滤液中加入琼脂,加热溶解后放入糖,搅拌使它溶解,补足水分到1000毫升,分装,灭菌,备用。
蛋白胨 10克 琼脂 20克
麦芽糖 40克 水 1000毫升
先把蛋白胨、琼脂加水后,加热,不断搅拌,待琼脂溶解后,加入40克麦芽糖(或葡萄糖),搅拌,使它溶解,然后分装,灭菌,备用。
本培养菌是培养许多种类真菌所常用的。
配方二 马铃薯糖琼脂培养基
把马铃薯洗净去皮,取200克切成小块,加水1000毫升,煮沸半小时后,补足水分。在滤液中加入10克琼脂,煮沸溶解后加糖20克(用于培养霉菌的加入蔗糖,用于培养酵母菌的加入葡萄糖),补足水分,分装,灭菌,备用。
配方二 面粉琼脂培养基
面粉 60克 琼脂 20克
培养基的种类范文

培养基的种类范文培养基是在实验室中为细菌、真菌、植物组织或动物细胞提供生长环境的营养物质。
根据不同的需求,培养基可以分为多种类型。
下面我将详细介绍几种常见的培养基。
1.基础培养基:基础培养基是最基本的培养基类型,提供细菌或细胞生长所需的基本营养物质,如碳源、氮源、无机盐和水等。
常见的基础培养基包括液态LB培养基(用于细菌培养)、液态DMEM培养基(用于动物细胞培养)和固体MS培养基(用于植物细胞培养)。
2. 选择性培养基:选择性培养基是通过添加特定化合物或抑制剂来选择性地促进或抑制其中一种细菌或真菌的生长。
这种培养基可用于筛选特定菌种、分离纯菌或抵制有害微生物。
常见的选择性培养基包括MacConkey培养基(用于分离大肠杆菌)、Sabouraud培养基(用于真菌培养)和MTL培养基(用于胃溃疡杆菌的分离)。
3. 差异培养基:差异培养基是通过添加其中一种化合物来促进一些细菌的可见特征表现,如颜色、形态或结构等。
差异培养基常用于鉴定和鉴别微生物。
常见的差异培养基有MacConkey-Sorbitol培养基(用于分离致病性大肠杆菌),青绿培养基(用于鉴别青霉和念珠菌)和EMB培养基(用于分离发酵杆菌)。
4.增殖培养基:增殖培养基是为了促进细胞或组织的增殖而设计的。
这类培养基通常会添加植物生长素或动物细胞因子,以促进细胞分裂或组织再生。
常见的增殖培养基有MS培养基(用于植物离体培养)和DMEM/F12培养基(用于动物细胞培养)。
5.工业培养基:工业培养基用于工业生产中的微生物发酵过程。
这类培养基通常会优化营养物质的组成,以提高产物的产量和纯度。
常见的工业培养基有液态SGG培养基(用于啤酒发酵)和液态YPG培养基(用于酵母发酵)。
除了上述几种常见的培养基类型,还存在其他一些特殊用途的培养基,如鉴别培养基(用于鉴别微生物的特定代谢能力)、低营养培养基(用于维持微生物菌株的纯度)、分离培养基(用于从混合物中分离纯菌)等。
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73
D11
柠檬酸盐培养基
柠檬酸盐利用试验
96
D12
葡萄糖铵琼脂培养基
细菌利用铵盐试验
100
D13
脲(尿素)琼脂培养基(100g/瓶)
尿素分解试验
90
D14
半固体培养基
动力试验和菌种保存
74
D15
克氏双糖铁琼脂培养基
肠杆菌糖发酵及硫化氢反应
66
D16
三糖铁琼脂培养基(TST)
肠杆菌糖发酵及硫化氢反应
大肠杆菌检测
96
D27
乳糖发酵培养基
肠道菌生化试验
33
五、抗生素检定用培养基(规格:250g/瓶)
E1
MH肉汤培养基
107
E2
MH琼脂培养基
136
E3
抗生素检定培养基I(PH6.5-6.6)
94
E4
抗生素检定培养基I(PH7.9+0.1)
94
E5
抗生素检定培养基II(PH6.5-6.6)
94
E6
抗生素检定培养基II(PH7.9+0.1)
需气菌和真菌无菌试验
96
A5
真菌培养基
真菌无菌ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ验
69
A6
真菌琼脂培养基
真菌无菌试验
71
A7
改良马丁培养基
生物制品真菌无菌试验
69
A8
改良马丁琼脂培养基
生物制品真菌无菌试验
71
A9
支原体半流体基础培养基(100g)
生物制品支原体检查
233
A10
营养琼脂培养基
细菌总数测定及一般细菌培养
85
A11
血琼脂基础培养基
84
C38
哥伦比亚血琼脂基础培养基
革兰氏阳性球菌及嗜血杆菌分离
90
C39
哥伦比亚琼脂培养基
厌氧菌分离培养基
197
四、鉴别用培养基(规格:250g/瓶)
D1
蛋白胨水培养基
殿基质和霍乱红试验
69
D2
磷酸盐葡萄糖胨水培养基
VP和MR试验
66
D3
硝酸盐胨水培养基
绿脓假单胞菌鉴别
58
D4
乳糖胆盐发酵培养基
大肠杆菌发酵乳糖试验
57
B10
血液增菌培养基
血液中细菌增菌
72
B11
SCDLP液体基础培养基
化妆品中细菌增菌
102
B12
卵磷脂吐温80醇液(100ml)
SCDLP培养基添加剂
45
B13
LB肉汤培养基
大肠杆菌霍乱弧菌培养提取质粒
54
B14
Cary-Blair运送培养基(100g/瓶)
运送和保存一般细菌标本
70
B15
脑心浸培养基液(Oxoid)
淋球菌分离培
106
C21
精氨酸支原体肉汤基础培养基(100g/瓶)
精氨酸支原体培养
261
C22
肺炎支原体肉汤基础培养基(100g/瓶)
肺炎支原体培养
240
C23
支原体琼脂培养基(100g/瓶)
支原体分离
198
C24
解脲支原体肉汤基础培养基(100g/瓶)
解脲支原体分离
227
C25
沙氏琼脂培养基
真菌培养
(普通琼脂斜面培养基)
93
E17
阿奇霉素检定培养基
90
六、其它类培养基(规格:250g/瓶)
F1
生芽孢琼脂斜面培养基
快速生芽孢
72
七、培养基主要原材料(规格:250g/瓶)
1
细菌学蛋白胨
细菌培养基
30
2
胰酪蛋白胨
细菌培养基
96
3
细菌学琼脂粉
细菌培养基
108
4
细菌学酵母浸粉
细菌培养基
96
5
细菌学用牛肉膏粉
94
E7
抗生素检定培养基III
74
E8
抗生素检定培养基IV
85
E9
抗生素检定培养基V
108
E10
抗生素检定培养基VI
74
E11
抗生素检定培养基VII
90
E12
抗生素检定培养基VIII
90
E13
抗生素检定培养基IX
30
E14
多粘菌素B用培养基
102
E15
制霉素检定培养基
74
E16
麦迪、麦白霉素检定培养基
67
C26
改良沙氏琼脂培养基
真菌菌种保存
67
C27
维生素沙氏琼脂培养基
真菌、酵母菌分离
78
C28
抗生素沙氏琼脂培养基
真菌、酵母菌分离
67
C29
察氏(Czapeks)琼脂培养基
真菌、酵母菌分离
71
C30
高盐察氏琼脂培养基
真菌、酵母菌分离
84
C31
山梨醇麦康凯琼脂培养基
大肠杆菌0157分离
142
C32
胰酪胨大豆琼脂培养基
C15
NAC琼脂培养基
金黄色葡萄球菌分离
82
C16
甘露醇氯化纳琼脂培养基
(甘露醇高盐琼脂培养基)
绿脓杆菌分离鉴别
84
C17
乙先铵琼脂培养基
绿脓杆菌分离鉴别
90
C18
贝怕克(Baird-perkar)琼脂基础培养基
金黄色葡萄球菌分离
159
C19
淋球菌基础培养基(100g/瓶)
淋球菌培养
95
C20
淋球菌琼脂基础培养基(100g/瓶)
66
D17
赖氨酸脱羧酶试验培养基
(脱羧酶试验对照培养基)(各50g/套)
细菌脱羧酶试验
189
D18
精氨酸脱羧酶试验培养基
(脱羧酶试验对照培养基)(各50g/套)
细菌脱羧酶试验
191
D19
D20
月桂酸盐肉汤培养基
出口食品大肠杆菌测定
90
D21
OF试验培养基(100g/瓶)
细菌糖代谢类型的鉴别
58
D22
大肠杆菌增菌
85
B3
亚硒酸盐增菌培养基
沙门氏菌增菌
114
B4
亚硒酸盐半胱酸增菌培养基
食品中沙门氏菌增菌
142
B5
四硫磺酸纳亮绿基础培养基
沙门氏菌增菌
66
B6
GN肉汤培养基
志贺氏菌增菌
69
B7
碱性蛋白胨水培养基
霍乱弧菌增菌
61
B8
7.5%氯化纳肉汤培养基
金黄色葡萄球菌增菌
40
B9
缓冲蛋白胨水培养基
沙门氏菌增菌
氰化钾基础培养基(100g/瓶)
沙门氏菌分离
28
D23
DNA(脱氧核糖核酸)酶培养基(100g/瓶)
金黄色葡萄糖球菌确认试验
283
D24
乳糖肉汤培养基
肠道菌生化试验
63
D25
4-甲基伞形酮葡糖苷酸(MUG)培养基(34g/瓶)(按药典处方,国产MUG试剂)
大肠杆菌检测
144
D26
MUG快速检定大肠杆菌试剂
链球菌、奈瑟氏菌增菌
369
B16
液体沙氏培养基
真菌、酵母菌增菌
53
B17
0.1%蛋白胨水溶液
供试品稀释液
50
B18
PH7.0氯化钠-蛋白缓冲液
供试品稀释液
50
三、分离培养用培养基(规格:250g/瓶)
C1
沙门、志贺菌属琼脂培养基(SS)
(SS琼脂培养基)
沙门氏和志贺氏菌属分离
102
C2
C3
胆盐硫乳琼脂培养基(DHL)
细菌、真菌分离培养
108
C33
脑心浸液琼脂培养基(Oxoid)
链球菌、奈瑟氏菌分离
462
C34
马铃薯葡萄糖(PDA)琼脂培养基
食品中酵母菌、真菌分离
71
C35
煌绿琼脂培养基
沙门氏菌分离培养
78
C36
XLD琼脂培养基
志贺氏、沙门氏菌分离
226
C37
卵黄氯化纳琼脂培养基
(卵黄高琼脂基础培养基)
金黄色葡萄糖球菌分离
C9
WCG无血琼脂培养基
空肠弯曲菌分离
90
C10
TCBS琼脂培养基
霍乱、副溶血弧菌分离
90
C11
庆大霉素琼脂培养基
EL-tor弧菌分离
73
C12
碱性琼脂培养基
霍乱弧菌分离
79
C13
溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基
(十六烷三甲基溴化铵琼脂培养基)
绿脓假单胞菌增菌
90
C14
NAC液体培养基
绿脓假单胞分离
66
大肠、沙门氏和志贺氏菌属分离
90
C4
HE琼脂培养基
志贺氏菌分离鉴别
136
C5
中国蓝琼脂培养基
肠道菌分离鉴别
81
C6
曙红亚甲蓝琼脂培养基(EMB)
(伊红美蓝琼脂培养基)
大肠杆菌、产气杆菌分离鉴别
84
C7
麦康凯琼脂培养基(MacC)
肠道致病菌分离
84
C8
无盐麦康凯琼脂培养基
尿液中变形和大肠杆菌分离
102
中国药品生物制品检定所干粉培养基(1)
一、无菌试验和测定菌数用培养基(规格:250g瓶)