水果蔬菜汁类胡萝卜素含量的测定
高效液相色谱法测定15种蔬菜中的胡萝卜素
2、重复性和精密度
此外，该方法具有较好的重复性和精密度，能够满足实际测定的要求。通过 本研究的开展，为准确评估蔬菜的营养价值提供了科学依据。
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2、样品中胡萝卜素的测定结果
表1 15种蔬菜中胡萝卜素的含量（mg/100g）
3、样品中水分含量的测定结果
3、样品中水分含量的测定结果
采用烘干法测定了15种蔬菜中的水分含量，结果如表2所示。由表可知，不同 蔬菜中的水分含量也存在显著差异。其中，生菜和芹菜中的水分含量较高，分别 为94.7%和92.5%；红薯和土豆中的水分含量较低，分别为79.3%和78.6%。其他 蔬菜中的水分含量介于上述两者之间。
采用高效液相色谱法测定蔬菜中类胡萝卜素，需对方法进行重复性和精密度 评估。实验结果表明，该方法的重复性和精密度均较好，能够满足实际测定的要 求。
2、重复性和精密度
结论 本次演示介绍了高效液相色谱法测定蔬菜中类胡萝卜素的方法及注意事项。 该方法具有分离效果好、分析速度快、灵敏度高等优点，能够准确测定蔬菜中类 胡萝卜素的含量。通过对不同种类蔬菜中类胡萝卜素含量的测定，发现叶菜类蔬 菜中类胡萝卜素含量较高，而根茎类蔬菜中类胡萝卜素含量较低。
2、实验方法
（2）色谱条件：采用高效液相色谱仪进行分离分析，色谱柱为C18柱（5μm， 4.6mm×250mm），流动相为甲醇-丙酮（1:1），流速为1ml/min，检测波长为 450nm，柱温为30℃。
2、实验方法
（3）标准曲线绘制：精确称取适量胡萝卜素标准品，用甲醇-丙酮（1:1）混 合溶剂配制成不同浓度的标准溶液。分别进样分析，以峰面积（A）对胡萝卜素 浓度（C）绘制标准曲线。
3、高效液相色谱法测定类胡萝 卜素
3、高效液相色谱法测定类胡萝卜素
AMAMFSIs0074 水果、蔬菜及其衍生产品——胡萝卜素含量的测定—第二部分：常规方法
AMAMFSIs0074 水果 蔬菜 水果衍生产品、蔬菜衍生产品 胡萝卜素 光谱法AMAMFSIs0074水果、蔬菜及其衍生产品——胡萝卜素含量的测定—第二部分：常规方法1适用范围：本方法适用于水果、蔬菜及其衍生产品中胡萝卜素含量的测定。
分方法A和方法B。
方法A用于产品中脂肪含量不超过5%(m/m)时胡萝卜素含量的测定；方法B 则用于产品中脂肪含量5%(m/m)以上时胡萝卜素含量的测定。
2方法A：产品中脂肪含量不超过5%(m/m)时胡萝卜素含量的测定2.1原理概要：用石油醚和丙酮的混合物抽提胡萝卜素。
蒸掉丙酮，通过柱色谱从类胡萝卜素中分离出胡萝卜素，用光谱法测定胡萝卜素含量。
2.2 主要仪器和试剂：2.2.1 仪器常规实验室仪器，分光光度计、过滤装置、水泵、水浴、减压蒸发器、色谱柱、过滤器、石棉布、研钵和杵、干燥器、锥形瓶、圆底烧瓶、分液漏斗、容量瓶。
2.2.2 主要试剂使用的所有试剂均为分析纯，水至少要用蒸馏水或至少同等质量的水。
主要试剂有：沸程50～70℃的石油醚、石油醚/丙酮抽提混合物、无水硫酸钠、石英砂、色谱柱填料(氧化铝、氧化镁/粉末玻璃混合物、氧化铝/无水硫酸钠混合物、氧化铝/氢氧化钙混合物)、氯化钠溶液。
2.3 过程简述：2.3.1样品制备分液体非均相产品、粘稠产品和固体产品、冷冻和深冷产品三类分别取样，并制成溶液。
2.3.2 测定分析应在黑暗处（远离光源）进行。
称取1-10g样品2.3.2.1测试溶液的制备：在研钵中将样品20ml抽提混合物，20g无水Na2SO4和30g石英砂混合彻底研磨。
过滤，重复抽提，直至抽提液无色。
抽提液全部移入1000mL分液漏斗中，用300-400mL水洗涤，加入15g无水Na2SO4，15分钟后过滤，在减压蒸发器中30-35℃水浴中加热浓溶滤液，然后移入100或50mL容量瓶中用石油醚稀释至刻度2.3.2.2洗提：色谱术准备。
过控2.3.2.3光谱测量：用10mm吸收池在波长450nm处测量吸光度。
高效液相色谱定量分析新鲜加工过的水果中的主要类胡萝卜素
高效液相色谱定量分析新鲜加工过的水果中主要类胡萝卜素的含量概念一、类胡萝卜素（carotenoid）不溶于水而溶于有机溶剂。
叶绿体中的类胡萝卜素含有两种色素，即胡萝卜素（carotene）和叶黄素（lutein），前者呈橙黄色，后者呈黄色。
功能为吸收和传递光能，保护叶绿素。
类胡萝卜素是一类重要的天然色素的总称，属于化合物。
普遍存在于动物、高等植物、真菌、藻类和细菌中的黄色、橙红色或红色的色素。
二、番茄红素(lycopene)番茄中的红色素，是胡萝卜素的母体化合物。
番茄红素是成熟番茄的主要色素,是一种不含氧的类胡萝卜素。
番茄红素是植物中所含的一种天然色素。
主要存在于茄科植物西红柿的成熟果实中。
它是目前自然界中被发现的最强抗氧化剂。
番茄红素清除自由基的功效远胜于其他类胡萝卜素和维生素E，它可以有效的防治因衰老，免疫力下降引起的各种疾病。
三、β-胡萝卜素(β-carotene)β-胡萝卜素是类胡萝卜素之一，也是橘黄色脂溶性化合物，它是自然界中最普遍存在也是最稳定的天然色素。
许多天然食物中如绿色蔬菜、甘薯、胡萝卜、菠菜、木瓜、芒果等，皆存有丰富的β—胡萝卜素。
β-胡萝卜素是一种抗氧化剂，具有解毒作用，是维护人体健康不可缺少的营养素。
β-胡萝卜素在进入人体后可以转变为维生素A，不会有因过量摄食而造成维生素A累积中毒现象。
另外，在促进动物的生育与成长也具有较好的功效。
四、毛细管柱色谱法(capillary column chromatography)开管柱气相色谱(open tubular gas chromatography)，又称高分辨气相色谱(high resolution gas chromatography)，是气相色谱的重要分支。
用内壁上涂附有固定液的空心的毛细管柱进行组分分离的色谱法。
与填充柱色谱法相比，其分离效率高、分析速度快、样品用量少。
HPLC法定量分析芒果和木瓜中类胡萝卜素的含量摘要：采用高效液相色谱法定量分析芒果、木瓜样品及一些加工产品的主要类胡萝卜素,使用外标法和标准加入校准技术。
类胡萝卜素含量方法
（一）检测原理：类胡萝卜素含量测定(酶标仪96T)叶绿体中所含色素主要有两大类，叶绿素(包括叶绿素a和叶绿素b)和类胡萝卜素(包括胡萝卜素和叶黄素)，它们与类囊体膜上的蛋白质结合，成为色素蛋白复合体，其含量多少及其组成决定了植物对不同光的吸收、利用效率，常常作为研究光合生理的重要指标。
根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收，在649nm和665nm处测定叶绿素提取物的吸光值，在470nm处测定类胡萝卜素；然后利用经验公式计算出样品中叶绿素a含量、叶绿素b含量、叶绿素总含量及类胡萝卜素含量。
（二）试剂组分与配制：试剂名称规格保存要求试剂一粉剂×1瓶4℃保存乙醇（自备）1000mL×1瓶4℃保存抽提Buffer配制：（体积比）乙醇：丙酮=95:5（三）所需的仪器和用品：酶标仪、96孔板、天平、10mL玻璃试管、锡箔纸、无水乙醇，丙酮。
（四）测定步骤：建议正式实验前选取2个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！1、样本制备（1）取新鲜植物叶片或其它绿色组织，去掉中脉。
（2）称约0.1g剪碎，用蒸馏水洗干净，然后加入1mL抽提Buffer，少量试剂一（约50mg），叶绿素对光敏感，务必在黑暗或弱光条件下充分研磨（难磨叶片可以添加少量石英砂助磨），然后转移至10mL玻璃试管。
（3）用抽提Buffer冲洗研钵，将所有冲洗液及研钵中所有的绿色物质转入10mL玻璃试管，用抽提Buffer补充至10mL，玻璃试管置于黑暗条件下或者包上锡箔纸浸提3h，观察试管底部组织残渣完全变白则提取完全，若组织残渣未完全变白，继续浸提至其完全变白。
2、上机检测分别取200μL浸提液和200μL抽提Buffer于96孔板，记为测定管和空白管，分别于665nm 和649nm和470nm处读取吸光值A，△A665=(A测定-A空白)665，△A649=(A测定-A空白) 649，△A470=(A测定-A空白)470。
食物中类胡萝卜素的高效液相色谱测定
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食品中胡萝卜素含量的检测及分析
食品中胡萝卜素含量的检测及分析胡萝卜素是一类存在于植物中的天然色素，在食物中具有重要的营养价值和健康功效。
它们不仅能够赋予食物丰富的颜色，还是人体合成维生素A的前体物质。
因此，食品中胡萝卜素含量的检测和分析对于保证食品质量和人类健康至关重要。
一、胡萝卜素的种类与功能胡萝卜素是一类存在于植物中的化合物，主要包括β-胡萝卜素、α-胡萝卜素、β-葡萄糖胡萝卜素等。
其中，β-胡萝卜素是最常见和最具代表性的一种。
胡萝卜素具有激活细胞免疫、抗氧化、抗癌、维护皮肤健康等多种功效，对人体健康有着重要影响。
二、食品中胡萝卜素的检测方法1. 高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法是目前检测食品中胡萝卜素含量的常用方法之一。
它利用样品中胡萝卜素的特定波长进行检测，通过与标准品进行比对，确定胡萝卜素的含量。
这种方法操作灵活方便，且对小样品量的检测效果也很好。
2. 气相色谱法（GC）气相色谱法是另一种常用的胡萝卜素检测方法。
它通过将样品中的胡萝卜素蒸发成气态，在色谱柱中分离和检测各种胡萝卜素的含量。
这种方法准确性较高，但需要较复杂的操作和设备。
3. 光谱法光谱法是一种非常简便的胡萝卜素检测方法。
通过测量胡萝卜素在特定波长下的吸光度，可以快速确定其含量。
这种方法操作简单、快速，并且适用于大规模食品样品的快速筛查。
三、食品中胡萝卜素含量的分析食品中胡萝卜素含量的分析对于了解其营养价值和确定食品质量具有重要意义。
1. 不同食物中胡萝卜素含量的比较通过对不同食物中胡萝卜素含量的分析，可以比较不同食物的营养价值和选择合适的食物摄入。
例如，某些深色蔬菜和水果，如胡萝卜、甜椒、南瓜等，富含高量的胡萝卜素，适合作为人体补充维生素A的来源。
2. 食品加工对胡萝卜素的影响食品加工和烹饪过程中会对胡萝卜素含量产生影响。
例如，高温烹饪和长时间煮沸会导致一部分胡萝卜素被破坏或丢失，降低食品中胡萝卜素的含量。
因此，在食品加工过程中需要注意合理选择烹饪方法，以保留食物中的胡萝卜素。
高效液相色谱法分析蔬菜水果及其制品中类胡萝卜素含量的研究
营养功能高效液相色谱法分析蔬菜水果及其制品中类胡萝卜素含量的研究*刘新艳吕军刘中笑李凌云张延国郑姝宁徐东辉渊中国农业科学院蔬菜花卉研究所，农业部蔬菜质量安全控制重点实验室，农业部蔬菜产品质量安全风险 评估实验室（北京），农业部园艺作物生物学与种质创制重点实验室，北京100081)摘要：通过优化样品前处理和色谱分析条件，建立了蔬菜水果及其制品中类胡萝卜素含量的髙效液相色谱测定方法。
试样中的类胡萝卜素经丙酮-石油醚（V+ V=1 + 1，0.1%BHT)混合溶液提取后，用石油醚液液萃取，再用丙酮定容、乙腈 稀释，最后用配有紫外检测器的髙效液相色谱仪在C3。
色谱柱、波长450 nm处测定，根据色谱峰的保留时间定性，外标法 定量。
结果表明，该方法前处理简单髙效，适用范围广，测定结果精密度髙，可快速分析测定蔬菜水果及其制品中多种类胡 萝卜素含量。
关键词：类胡萝卜素曰蔬菜曰水果曰髙效液相色谱法类胡萝卜素，又称多烯色素，是在天然食品原 料中分布最广泛的色素。
红色、黄色和橙色水果及 根用作物和蔬菜是富含类胡萝卜素的食品。
一般来 说，富含叶绿素的植物组织也富含类胡萝卜素，因为叶绿体和有色体是类胡萝卜素含量较丰富的细胞 器。
根据其结构划分，类胡萝卜素可归为两大类院 一类是纯碳氢化物，被称为胡萝卜素，包括番茄红 素、琢-胡萝卜素、茁-胡萝卜素和酌-胡萝卜素；另一类具有羟基、环氧基、醛基、酮基等含氧基 团，称为叶黄素类，包括叶黄素、玉米黄素、辣椒 红素、隐黄素等。
动物和人不能自身合成胡萝卜 素，主要通过食物获得。
茁-胡萝卜素是人体合成 维生素A的重要前体物质，称为维生素A原。
维 生素A在人体正常生长和组织修复过程中起着重 要作用，对维持人体视觉系统和免疫系统的正常生 理功能尤为重要[2]。
番茄红素是一种红色素，存在于许多水果和蔬菜中，可以作为单线态氧的有效猝 灭剂，能消除羟自由基，在细胞中和脂类结合而有 效抑制脂质的氧化，是非常好的食用抗氧化剂，对 降低恶性肿瘤和冠心病发病率起着重要作用[3]。
胡萝卜素含量的测定
4. 稀释与测定
将滤液稀释到适当浓度，用分光 光度计在450nm波长处测定吸光 度。
1. 样品处理
将样品（如蔬菜、水果等）清洗 干净，晾干后切碎并称重，放入 研钵中研磨成匀浆。
5. 数据处理
根据吸光度值，利用标准曲线或 回归方程计算胡萝卜素的含量。
实验结果分析
数据处理
将测定的吸光度值代入标准曲线或回归方程，计算出样品中胡萝卜素的含量。
参考文献
06
参考文献
作者
01
张三
发表时间
02
XXXX年
期刊名称
03
食品科学
谢谢聆听
结果与文献比较
我们将实验结果与相关文献中的数据进行比较，以验证我们的实验方法和结果的可靠性。 通过比较，我们可以发现我们的结果与其他研究者的结果基本一致，说明我们的实验方法 是可靠的。
结果的意义和影响
分析实验结果的意义和影响，可以帮助我们更好地了解胡萝卜素含量的影响因素以及其在 食品和健康领域的应用价值。例如，高胡萝卜素含量的食品可能具有更高的营养价值，对 人们的健康有益。
结果分析
比较不同样品中胡萝卜素的含量，分析其影响因素，如品种、生长环境、采摘 时间等。同时，将实验结果与国家标准或行业标准进行比较，评估样品的营养 价值或质量。
03
实验材料与设备
实验材料
新鲜胡萝卜
用于提取胡萝卜素，要 求新鲜、无病虫害。
甲醇
用于提取胡萝卜素，具 有较高的溶解度。
石油醚
用于提取胡萝卜素，具 有较高的溶解度和较低 的沸点。
硅藻土
用于过滤提取液，去除 杂质。
实验设备
电子天平
用于称量实验材料，要求精度高。
定胡萝卜素含量，通过比色法进行定 量分析。
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水果、蔬菜汁类胡萝卜素含量的测定
1 主题内容与适用范围
本标准规定了水果、蔬菜汁中类胡萝卜素的分离提取方法及提取物中类胡萝卜素总量的测定方法。
本标准适用于水果、蔬菜汁中类胡萝卜素总量的测定。
2 原理
果蔬滤液通过溶剂萃取,分离提取类胡萝卜素,在特定波长下用分光光度法测其吸光度。
该吸光度与类胡萝卜素含量成线性关系,通过换算即可得知类胡萝卜素之含量。
3 试剂和溶液
本标准所用试剂除特殊规定外,均使用符合国家标准的分析纯试剂,均采用蒸馏水。
3.1 石英砂(Q/HG 22--467)；
3.2 萃取剂,2/1(v/v)氯仿(GB 682)-甲醇(GB 683)混合。
4 仪器设备
4.1 抽滤器；
4.2 无灰分滤纸；
4.3 分液漏斗：250mL；
4.4 容量瓶,100mL；
4.5 移液管,20mL；
4.6 烧杯,50mL；
4.7 分光光度计,使用的测量波长为440±10nm。
5 分析步骤
注：由于类胡萝卜素本身性状的不稳定性,即见光易氧化分解,建议所有操作应避光进行。
5.1 试样的制备
5.1.1 液体样品：混合均匀后取样。
5.1.2 固体样品：捣碎机捣碎后,纱布挤汁。
5.2 用移液管吸取20mL样液置50mL烧杯中。
5.3 过滤：在烧杯(5.2)中加入3g石英砂,摇动后用布氏漏斗过滤(布氏漏斗预先铺有无灰滤纸,纸上铺有2g石英砂),然后再用5mL水冲洗滤渣3次。
5.4 萃取：在250mL的分液漏斗中倒入滤液(5.3),再加入20mL萃取剂(3.2),振摇后静置,收集下部分有机相,再用20mL萃取剂提取两次,将三次萃取所得有机相合并,用萃取剂定容为100mL。
注：对果胶含量大的果蔬,萃取时,将三次合并的有机相重新倒回原分液漏斗,继续用20mL萃取洗涤一次,然后用萃取剂定容至100mL。
5.5 测定：在440±10nm波长下测定提取液的最大吸光度A。
6 结果的计算和表示
类胡萝卜素总量用mg/L表示,按下式计算：
类胡萝卜素(mg/L)＝A×20
式中：A——测定的最大吸光度；
20——换算系数。
此计算公式是以公认的胡萝卜素分子平均吸收系数250为依据的。
7 允许差
同一分析者连续进行两次测定,其结果相对偏差不得超过5％。
附加说明：
本标准由中华人民共和国农业部提出。
本标准由中国农业科学院分析测试中心负责起草。
本标准主要起草人李伟格、陈必芳、李兰。
本标准等效采用法国国家标准NFV 76--110 1980《水果、蔬菜汁中类胡萝卜素全量的测定》。