麦长管蚜AFLP银染分析体系的建立与优化
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庆阳市麦长管蚜发生期预测模型的建立
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文章 编号 ：１０ — ４ ３２ １ ）７ ０ １ — ２ ０ １ １６ （０ ０ ０ — ０ ６ ０
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１ ６
甘 肃农业 科技
２１ ００年 第 ７ 期
Ｇ ｎ ｕ Ａ ｒ ｃ． ｎ ｅ ｈ ． Ｎ ． ２ １ ａ ｓ ｇ．Ｓ ｉａ ｄ Ｔ ｃ ｎ ｏ７ ０ ０
庆阳市麦长管蚜发生期预测模 型的建立
陈 红
（ 东学院农林科 技 学院 ，甘肃 陇
庆 阳 ７ ５０ ） ４００
摘要 ：利用庆阳市西峰 区 后官寨乡１８－２０ 年麦长管蚜发生量的调查数据，分别建立了麦长管蚜的发 ９８ ０ １
１ 材料 与方法
１１ 数据 来源 ．
麦 田麦 长 管 蚜 发 生量 的数 据 来 自 １８－ ２０ ９ １ ００ 年 庆 阳 市西 峰 区后 官 寨 乡 的 定 点调 查 资 料 ，气象 资料 来 自庆 阳市 气象局 。 １ 分析 方法 ． ２ 以 ２０ ００年 的资料 为依 据 ，分 析麦 长管 蚜 的 田 间消长 态 势 。根据 麦 田麦 长 管蚜 发 生 量 的 调查 资 料 和 ５月 上 、中旬 平 均 温 度及 相对 温 湿 系 数 ２个 气 象 因子 的观察 值 ，对 麦 长管 蚜 的发 生 期 进行 回 归分 析 ，建立 了一元 线性 回归 模型方 程 。 ２ 结果 与分析 ２１ 田间 消长态势 分析 ． 麦长管蚜具有喜光 、耐湿、特嗜穗 部等习性 【 ， ６ 圳 因此其消长规律与小麦的生长发育期密切相关。从图 １ 可以看出，随着气温的升高 ， 麦长管蚜的发生密度增 大，数量增多。在 田问自然条件下 ，５ 月上 、中旬开始
小麦叶片cDNA—AFLP扩增反应体系的优化
（ ． 疆 农 业 科 学 院 核技 术 生 物技 术 研 究 所 ， 鲁 木 齐 １新 鸟 ８０９ ；． 疆 农 业 大 学 农 学 院 ， 鲁 木 齐 ３０ １２ 新 鸟 ８０５ ） ３０ ２
摘
要 ：目的】 【 建立并优化小麦叶片 ｅ Ｎ Ｄ Ａ—Ａ Ｌ Ｆ Ｐ扩增反应体系 ， 进行 ｃ Ｎ Ｄ Ａ—Ａ Ｌ Ｆ Ｐ分 析 ， 掘新春 ６号相关 挖
新 疆 农业科 学
２ １ ，７ ３ ：８ —４ ４ ０ ０ ４ （ ）４ ９ ９
Ｘｎｉ ｇＡ ｒ ｕ ｕａ Ｓｉ ｃｓ ｉ ａ ｇ ｃ ｌ ｒ ｃ ｎｅ ｊｎ ｉ ｔ ｌ ｅ
小麦叶 片 ｃ Ｎ Ｄ Ａ—Ａ Ｌ Ｆ Ｐ扩增反应体 系的优化
李剑 峰 张 跃 强 樊 哲儒 王 岩 军 王 浩 曲延 英２ 范 玲 ， ， ， ， ， ，
Ｏｐ ｉ ｉａｉｎ ｆｃ ｔｍ ｚ ｔｏ ｏ ＤＮＡ —ＡＦＬＰ Ａｍ ｐｌ ｃ ｔｏ ａ ｔｏ ｉ ａｉｎ Ｒｅ ｃｉｎ ｉ ｆ
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摘
要 ：目的】 【 建立并优化小麦叶片 ｅ Ｎ Ｄ Ａ—Ａ Ｌ Ｆ Ｐ扩增反应体系 ， 进行 ｃ Ｎ Ｄ Ａ—Ａ Ｌ Ｆ Ｐ分 析 ， 掘新春 ６号相关 挖
新 疆 农业科 学
２ １ ，７ ３ ：８ —４ ４ ０ ０ ４ （ ）４ ９ ９
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小麦叶 片 ｃ Ｎ Ｄ Ａ—Ａ Ｌ Ｆ Ｐ扩增反应体 系的优化
李剑 峰 张 跃 强 樊 哲儒 王 岩 军 王 浩 曲延 英２ 范 玲 ， ， ， ， ， ，
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龙眼AFLP银染体系的建立与优化
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牡丹基因组AFLP银染反应体系的建立和优化
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维普资讯
４ Ｏ卷 第 ６期
２ ０ 伍 ０６
河 南 农 业 大 学 学 报
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ｌ ２月
文章 编 号 ： ０ １ ０—２ ４ （ ０６ ０ —０ ０ — ５ ０ ３ ０ ２０ ｝６ ６ ２ ０
中国小麦条锈病菌源基地综合治理技术体系的构建与应用
中国小麦条锈病菌源基地综合治理技术体系
的构建与应用
近年来，中国小麦条锈病严重危害了小麦产业的可持续发展。
为
了减小小麦条锈病的危害，中国小麦条锈病菌源基地综合治理技术体
系得以建立并应用。
该技术体系主要包括四个方面的内容，即菌源病株的基础研究、
定量检测技术的研发、菌源基地的动态监测以及综合防治技术的研究。
在菌源病株的基础研究方面，研究人员通过分子标记和功能基因组学
等方法，研究了小麦条锈病菌的群体遗传变异和发生规律，对其发生
与流行机理有了更为深入的认识。
在定量检测技术方面，利用PCR技
术和抗体等手段，实现了对小麦条锈病病原菌的快速、准确检测。
在
菌源基地的动态监测方面，建立了一套涵盖不同地区菌源基地的监测
体系，并通过多种途径进行调查，实现了对菌源基地的全面、精确监测。
在综合防治技术方面，通过纸带病害防治、生物防治、化学防治
和栽培技术措施等多种手段，将小麦条锈病的危害降至最低程度。
通过该技术体系的建立与应用，中国小麦条锈病的菌源基地综合
治理已经取得了显著的成效。
该技术体系的成功应用，在预防与控制
小麦条锈病、促进小麦产业发展等方面具有重大意义。
小麦抗病性研究的AFLP分析体系的建立
础上发展起来 的一种 检测 Ｄ ＮＡ多态性 的新方法 ．该
作物 ， 国内外 利用 Ａ Ｌ Ｆ Ｐ技术对小麦 的遗 传多样性 以 及抗病性研究 已有不少报道 ， 对于小麦 Ａ Ｌ 但 Ｆ Ｐ反应 体 系的研 究报道不多．因此 ， 研究 以抗 白粉病 品系 本 和感 自粉病 品系为试材 ， 旨在建立 适合小麦 抗病性研 究的 Ａ Ｌ Ｆ Ｐ反应体 系 ， 为小 麦遗 传连 锁 图谱 的构建 、 分子标记 等研究 奠定基础．
技术综 合 了 Ｒ Ｌ Ｆ Ｐ和 Ｒ Ｄ的 优 点 ：（ ） ＡＰ １ 多态 性 丰
富， 利用放射性标记在变性 的聚丙烯 酰胺 凝胶上 可检
测 １０ ５ 个扩增 产物［ ；（） ０ ￣１ ０ ２ ２ 稳定性强 、 重复性好 、 自动化程度高 ；３ 可 以通过 控制 引 物的 数 目和种 类 （）
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作物 ， 国内外 利用 Ａ Ｌ Ｆ Ｐ技术对小麦 的遗 传多样性 以 及抗病性研究 已有不少报道 ， 对于小麦 Ａ Ｌ 但 Ｆ Ｐ反应 体 系的研 究报道不多．因此 ， 研究 以抗 白粉病 品系 本 和感 自粉病 品系为试材 ， 旨在建立 适合小麦 抗病性研 究的 Ａ Ｌ Ｆ Ｐ反应体 系 ， 为小 麦遗 传连 锁 图谱 的构建 、 分子标记 等研究 奠定基础．
技术综 合 了 Ｒ Ｌ Ｆ Ｐ和 Ｒ Ｄ的 优 点 ：（ ） ＡＰ １ 多态 性 丰
富， 利用放射性标记在变性 的聚丙烯 酰胺 凝胶上 可检
测 １０ ５ 个扩增 产物［ ；（） ０ ￣１ ０ ２ ２ 稳定性强 、 重复性好 、 自动化程度高 ；３ 可 以通过 控制 引 物的 数 目和种 类 （）
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银合欢AFLP分子标记体系的优化
１１１ 植 物 材 料 银 合欢 种 子 采 集 于 国 内野 生及 ．．
种 植 的新银 合 欢树 ．部 分银 合 欢种 子从 美 国夏 威夷 大学 引进 银 合 欢 种 子 通 过 ６ Ｏ℃热 水 处 理后 播 于
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合欢 种 质 资 源遗 传 多 样 性研 究 ．但 未 对 影 响 Ａ Ｌ ＦＰ 标 记反 应体 系 的各个 因素进 行研 究 。本研 究对 影 响
林 木 、植 物修 复 、水 土保 持 、培养 食 用菌 、保 健 和
药用 等 ．被联 合 国粮农 组 织 的饲料 专 家誉 为干 旱地 区的 “ 白质仓 库 ” 和 “ 迹 树 ” 银 合 欢 具 有 抗 蛋 奇
银 合欢 叶 片 的 ＡＦ Ｐ标 记 的反应 体 系 的各个 因素 进 Ｌ
小麦条锈菌mflp分子标记体系的建立与优化
小麦条锈菌mflp分子标记体系的建立与优化小麦条锈菌是小麦上常见的病原菌之一，对小麦的生长和产量有很大的影响。
为了有效地控制小麦条锈菌的病害，研究其遗传多样性和分子特征是非常必要的。
分子标记技术是一种研究遗传多样性和分子特征的有效方法，因此建立和优化小麦条锈菌的分子标记体系非常重要。
1.样品准备。
选取50个不同来源的小麦条锈菌菌株，进行分子标记研究。
根据不同的来源进行分组，每组随机选取10个菌株。
2.DNA提取。
从每个菌株的培养物中提取基因组DNA，采用基因组DNA提取试剂盒进行操作。
将提取的DNA按照比例混合，制备为模板DNA。
3. mflp引物的设计。
根据小麦条锈菌基因组序列，设计并合成适合的mflp引物。
每个引物长度为20bp-25bp，GC含量在40%～60%之间，Tm值在55℃左右，引物之间的距离在300bp-500bp之间。
4.PCR反应。
采用脱氧核苷酸三磷酸（dNTPs）、Taq聚合酶、引物和模板DNA，进行PCR反应。
反应体系为20μL，PCR反应条件为：预变性（94℃，3min）；循环反应（94℃，30s，58℃，40s，72℃，30s），共循环35次；终止延伸（72℃，10min）。
5.PAGE分离。
将PCR产物进行PAGE分离，把凝胶中与DNA条带相同大小的部分切下来，将其溶解于无水甲醇中，离心沉淀、洗涤、干燥，最后溶解于硫酸钠水溶液中。
6.其他操作。
将得到的PCR产物进行扩增和PCR产物纯化。
使用基因测序仪进行DNA序列的测定和分析。
通过以上步骤，可以建立和优化小麦条锈菌mflp分子标记体系，为后续的遗传多样性研究和分子特征分析提供有力支持。
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第２ ８卷 第 １ 期
２１ ００年 ２月
贵州师范大学学报 （ 自然科学 版）
Ｊｕｎｌ ｆ ｕｚｏ ｏｍ ｌ ｎ ｅｓｙ（ ａ ｒｌ ｃ ｎｅ） ｏｒａ ｏ ｉ ｕＮ ｒ ａ Ｕ ｉ ｒ ｔ Ｎ ｔ ａ Ｓ ｉ ｃｓ Ｇ ｈ ｖ ｉ ｕ ｅ
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摘要 ： 以麦长管蚜 Ｓｔ ｉ ｖｎｅ Ｆ ｂｉｉ ） 研 究材 料 ， Ａ Ｌ ｉｂｏ ａｅａ （ ａｒ ｕ 为 ｏ ｎ ｃｓ 以 Ｆ Ｐ技 术为 基 础 ， 采用 限制 性 内切 酶 Ｅ ｏｕ和 ｃＩ ＭｓＩ对影 响麦长管蚜 Ａ Ｌ ｅ， Ｆ Ｐ技术体系中的关键技术 ， Ｄ Ａ的提取质量 、 如 Ｎ 酶切与连接 、 扩增 条件 、 引物选择 、 染 色方法等进行 了优化处理 ， 构建 了麦长管蚜 Ａ Ｌ Ｆ Ｐ银染 技术 体系。酶切 与连接分 步进行 ， 预扩增 与选择性扩 增 同体系完成 。在此优化体系下 ， 以得到重 复性好 、 可 稳定 性和多 态性 高的麦长管蚜 Ａ Ｌ Ｆ Ｐ条带 。该体系 的构 建 为蚜虫种 间分子遗传学研究提供 了新的技术手段。
关 键 词： 麦长管蚜； Ｆ Ｐ 分子标记； ＡＬ ； 优化
文献标识码 ： Ａ 中 图分 类 号 ： ３ １ Ｑ １ ８
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文 章 编号 ：０４ ５ ７ （０ ０ ０ — ０ １ ０ １０－ ５０ ２ １ ） １ ０ ０ — ５
麦 长 管蚜 Ａ Ｌ Ｆ Ｐ银 染 分 析 体 系 的建立 与优 化
赵 永 田 ， 兴娥 赵 惠 燕 陈 文 王 ， ，
（． １ 西北农林科技大学 ， 陕西 杨凌 ７ ２ ０ ；． １ １０ ２ 四川广 播 电视大学 ， 四川 成都 ６ ０７ ） １０ ３
（ ． ｏｔ ｅｔ ＆ＦＵ ｉ ｒ ｔ，Ｙ ｎｌ ｇ Ｓ ａｎｉ ７ ２ ０ ， ｈ ａ １ Ｎ ｒ ｗ ｓ Ａ ｎｖ ｓｙ ａ ｇｎ ， ｈａｘ ， １１０ Ｃ ｉ ； ｈ ｅｉ ｉ ｎ
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第２ ８卷 第 １ 期
２１ ００年 ２月
贵州师范大学学报 （ 自然科学 版）
Ｊｕｎｌ ｆ ｕｚｏ ｏｍ ｌ ｎ ｅｓｙ（ ａ ｒｌ ｃ ｎｅ） ｏｒａ ｏ ｉ ｕＮ ｒ ａ Ｕ ｉ ｒ ｔ Ｎ ｔ ａ Ｓ ｉ ｃｓ Ｇ ｈ ｖ ｉ ｕ ｅ
Ｖｏ ． ８ Ｎ ． １２ ． ｏ １ Ｆ ｂ２ １ ｅ ０ ０
Ｙａ ｄｈｇ ｅ ｏ ｍ ｒｈｃＳｔ ｉ ｖｎｅ Ｆ ｂｉ ｕ ）Ａ Ｌ ａ ｄ ｅｅｏ ｔｎ ｄｕｉｇ１ ｒ ｒ ｏ — ｎ ｉ ｒ ｌ ｏｐ ｉ ｉ ｂ ｎａｅａ （ ａ ｒ ｉｓ Ｆ Ｐｂｎ ｓ ｒ ｂ ｉｅ ｓ ８ｐ ｍｅ ｃｍ ｈ ｓ ｓ ｍ ｒＳｔ ｉｎａｅａ （ ａ ｒ ｉｓ ｎ ｌ ｉ ｓ ｔ ｆ ｉ ｂｏ ｐｎ ｅ Ｆ ｂ ｉ ｕ ） ｙ ｓｙ ｅ ｏ ｏ ｃ
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摘要 ： 以麦长管蚜 Ｓｔ ｉ ｖｎｅ Ｆ ｂｉｉ ） 研 究材 料 ， Ａ Ｌ ｉｂｏ ａｅａ （ ａｒ ｕ 为 ｏ ｎ ｃｓ 以 Ｆ Ｐ技 术为 基 础 ， 采用 限制 性 内切 酶 Ｅ ｏｕ和 ｃＩ ＭｓＩ对影 响麦长管蚜 Ａ Ｌ ｅ， Ｆ Ｐ技术体系中的关键技术 ， Ｄ Ａ的提取质量 、 如 Ｎ 酶切与连接 、 扩增 条件 、 引物选择 、 染 色方法等进行 了优化处理 ， 构建 了麦长管蚜 Ａ Ｌ Ｆ Ｐ银染 技术 体系。酶切 与连接分 步进行 ， 预扩增 与选择性扩 增 同体系完成 。在此优化体系下 ， 以得到重 复性好 、 可 稳定 性和多 态性 高的麦长管蚜 Ａ Ｌ Ｆ Ｐ条带 。该体系 的构 建 为蚜虫种 间分子遗传学研究提供 了新的技术手段。
关 键 词： 麦长管蚜； Ｆ Ｐ 分子标记； ＡＬ ； 优化
文献标识码 ： Ａ 中 图分 类 号 ： ３ １ Ｑ １ ８
Ｅｓａ ｌｓ ｍ ｅ ｔａ ｄ ｏ ｔｍ ｉａ ｉ ｎ ｏ ｈｅ ＡＦＬＰ ｉｖ ｒ ｓ ｉ ｎｇ ｔ ｂ ｉｈ ｎ ｎ ｐ ｉ ｚ ｔｏ ｆｔ ｓｌ ｅ －ｔ ｎｉ ａ
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文 章 编号 ：０４ ５ ７ （０ ０ ０ — ０ １ ０ １０－ ５０ ２ １ ） １ ０ ０ — ５
麦 长 管蚜 Ａ Ｌ Ｆ Ｐ银 染 分 析 体 系 的建立 与优 化
赵 永 田 ， 兴娥 赵 惠 燕 陈 文 王 ， ，
（． １ 西北农林科技大学 ， 陕西 杨凌 ７ ２ ０ ；． １ １０ ２ 四川广 播 电视大学 ， 四川 成都 ６ ０７ ） １０ ３