病毒学的几个概念:PFUMOITCID50
TCID50 MOI PFU意义及其换算

/viewthread.php?tid=7423&page=1Multiplicity of infection (MOI)The multiplicity of infection (abbreviated MOI) is the average number of phage per bacterium. The MOI is determined by simply dividing the number of phage added (ml added x PFU/ml) by the number of bacteria added (ml added x cells/ml). The average number of phage per bacterium in the population could be 0.1, 1, 2, 10, etc, depending upon how you setup the experiment.Although the MOI tells you the average number of phage per bacterium, the actual number of phage that infect any given bacterial cell is a statistical function. For example, if the MOI is 1, some cells will get infected with one phage but some cells may be infected with 0 phage and other cells infected with two phage. The proportion of cells in a population infected by a specific number of phage (n) can be calculatedfrom the Poisson distribution.PFU:plaque forming unit,空斑形成单位。
TCID50与moi值的计算.doc

实验四病毒感染力的滴定(TCID的测定)50一、实验目的了解病毒感染力测定的几种常用方法,掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。
二、测定病毒感染力的方法( 50% lethal dose):用动物或鸡胚来检测半数致死量LD50(egg 50% infective dose):用鸡胚来检测半数鸡胚感染量EID50(50% tissue culture infective dose):用细胞半数细胞培养物感染量TCID50来检测蚀斑形成单位(plaque forming unit,PFU):用细胞来检测三、材料1、长满单层的细胞1瓶2、胰酶、吸球、吸管、生长液3、96孔细胞培养板4、加样器、枪头5、病毒液(PRV)的操作步骤四、TCID501、在青霉素瓶或离心管中将病毒液作连续10倍的稀释,从10-1-10-10。
2、将稀释好的病毒接种到96孔微量培养板中,每一稀释度接种一纵排共8 孔,每孔接种100µl。
3、在每孔加入细胞悬液100µl,使细胞量达到2~3×105个/ml。
4、设正常细胞对照,正常细胞对照作两纵排。
(100µl生长液+100µl细胞悬液)5、逐日观察并记录结果,一般需要观察5-7天。
6、结果的计算,按Reed-Muench两氏法或Karber法的计算方法五、TCID501、Reed-Muench两氏法CPE:Cytopathic effect距离比例=(高于50%病变率的百分数-50%)/(高于50%病变率的百分数-低于50%病变率的百分数)=(91.6-50)/(91.6-40)= 0.8lgTCID=距离比例×稀释度对数之间的差+高于50%病变率的稀释度的对数50=0.8×(-1)+(-3)=-3.8=10-3.8/0.1mlTCID50含义:将该病毒稀释103.8接种100µl可使50%的细胞发生病变。
TCID50与moi值的计算

实验四病毒感染力的滴定(TCID的测定)50一、实验目的了解病毒感染力测定的几种常用方法,掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。
二、测定病毒感染力的方法( 50% lethal dose):用动物或鸡胚来检测半数致死量LD50(egg 50% infective dose):用鸡胚来检测半数鸡胚感染量EID50(50% tissue culture infective dose):用细胞半数细胞培养物感染量TCID50来检测蚀斑形成单位(plaque forming unit,PFU):用细胞来检测三、材料1、长满单层的细胞1瓶2、胰酶、吸球、吸管、生长液3、96孔细胞培养板4、加样器、枪头5、病毒液(PRV)的操作步骤四、TCID501、在青霉素瓶或离心管中将病毒液作连续10倍的稀释,从10-1-10-10。
2、将稀释好的病毒接种到96孔微量培养板中,每一稀释度接种一纵排共8 孔,每孔接种100µl。
3、在每孔加入细胞悬液100µl,使细胞量达到2~3×105个/ml。
4、设正常细胞对照,正常细胞对照作两纵排。
(100µl生长液+100µl细胞悬液)5、逐日观察并记录结果,一般需要观察5-7天。
6、结果的计算,按Reed-Muench两氏法或Karber法的计算方法五、TCID501、Reed-Muench两氏法CPE:Cytopathic effect距离比例=(高于50%病变率的百分数-50%)/(高于50%病变率的百分数-低于50%病变率的百分数)=()/()=lgTCID=距离比例×稀释度对数之间的差+高于50%病变率的稀释度的对数50=×(-1)+(-3)==TCID50含义:将该病毒稀释接种100µl可使50%的细胞发生病变。
2、Karber法=L-dlgTCID50L:最高稀释度的对数D:稀释度对数之间的差S:阳性孔比率总和=-1-1× =lgTCID50=TCID50含义:将该病毒稀释接种100µl可使50%的细胞发生病变。
TCID50与moi值的计算

实验四病毒感染力的滴定(TCID的测定)50一、实验目的了解病毒感染力测定的几种常用方法,掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。
二、测定病毒感染力的方法( 50% lethal dose):用动物或鸡胚来检测半数致死量LD50(egg 50% infective dose):用鸡胚来检测半数鸡胚感染量EID50(50% tissue culture infective dose):用细半数细胞培养物感染量TCID50胞来检测蚀斑形成单位(plaque forming unit,PFU):用细胞来检测三、材料1、长满单层的细胞1瓶2、胰酶、吸球、吸管、生长液3、96孔细胞培养板4、加样器、枪头5、病毒液(PRV)的操作步骤四、TCID501、在青霉素瓶或离心管中将病毒液作连续10倍的稀释,从10-1-10-10。
2、将稀释好的病毒接种到96孔微量培养板中,每一稀释度接种一纵排共8 孔,每孔接种100µl。
3、在每孔加入细胞悬液100µl,使细胞量达到2~3×105个/ml。
4、设正常细胞对照,正常细胞对照作两纵排。
(100µl生长液+100µl细胞悬液)5、逐日观察并记录结果,一般需要观察5-7天。
6、结果的计算,按Reed-Muench 两氏法或Karber 法 五、TCID 50的计算方法 1、Reed-Muench 两氏法CPE :Cytopathic effect距离比例=(高于50%病变率的百分数-50%)/(高于50%病变率的百分数-低于50%病变率的百分数)=(91.6-50)/(91.6-40) = 0.8lgTCID 50=距离比例×稀释度对数之间的差+高于50%病变率的稀释度的对数 =0.8×(-1)+(-3) =-3.8 TCID 50=10-3.8/0.1ml含义:将该病毒稀释103.8接种100µl 可使50%的细胞发生病变。
TCID50-MOI-PFU意义及其换算

Multiplicity of infection (MOI)The multiplicity of infection (abbreviated MOI) is the average number of phage per bacterium. The MOI is determined by simply dividing the number of phage added (ml added x PFU/ml) by the number of bacteria added (ml added x cells/ml). The average number of phage per bacterium in the population could be 0.1, 1, 2, 10, etc, depending upon how you setup the experiment.Although the MOI tells you the average number of phage per bacterium, the actual number of phage that infect any given bacterial cell is a statistical function. For example, if the MOI is 1, some cells will get infected with one phage but some cells may be infected with 0 phage and other cells infected with two phage. The proportion of cells in a population infected by a specific number of phage (n) can be calculatedfrom the Poisson distribution.PFU:plaque forming unit,空斑形成单位。
TCID50与moi值的计算

实验四病毒感染力的滴定(TCID的测定)50一、实验目的了解病毒感染力测定的几种常用方法,掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。
二、测定病毒感染力的方法( 50% lethal dose):用动物或鸡胚来检测半数致死量LD50(egg 50% infective dose):用鸡胚来检测半数鸡胚感染量EID50(50% tissue culture infective dose):用细胞半数细胞培养物感染量TCID50来检测蚀斑形成单位(plaque forming unit,PFU):用细胞来检测三、材料1、长满单层的细胞1瓶2、胰酶、吸球、吸管、生长液3、96孔细胞培养板4、加样器、枪头5、病毒液(PRV)的操作步骤四、TCID501、在青霉素瓶或离心管中将病毒液作连续10倍的稀释,从10-1-10-10。
2、将稀释好的病毒接种到96孔微量培养板中,每一稀释度接种一纵排共8 孔,每孔接种100µl。
3、在每孔加入细胞悬液100µl,使细胞量达到2~3×105个/ml。
4、设正常细胞对照,正常细胞对照作两纵排。
(100µl生长液+100µl细胞悬液)5、逐日观察并记录结果,一般需要观察5-7天。
6、结果的计算,按Reed-Muench两氏法或Karber法的计算方法五、TCID501、Reed-Muench两氏法CPE:Cytopathic effect距离比例=(高于50%病变率的百分数-50%)/(高于50%病变率的百分数-低于50%病变率的百分数)=(91.6-50)/(91.6-40)= 0.8lgTCID=距离比例×稀释度对数之间的差+高于50%病变率的稀释度的对数50=0.8×(-1)+(-3)=-3.8=10-3.8/0.1mlTCID50含义:将该病毒稀释103.8接种100µl可使50%的细胞发生病变。
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实验四病毒感染力的滴定(TCID的测定)50一、实验目的了解病毒感染力测定的几种常用方法,掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。
二、测定病毒感染力的方法( 50% lethal dose):用动物或鸡胚来检测半数致死量LD50(egg 50% infective dose):用鸡胚来检测半数鸡胚感染量EID50(50% tissue culture infective dose):用细胞半数细胞培养物感染量TCID50来检测蚀斑形成单位(plaque forming unit,PFU):用细胞来检测三、材料1、长满单层的细胞1瓶2、胰酶、吸球、吸管、生长液3、96孔细胞培养板4、加样器、枪头5、病毒液(PRV)的操作步骤四、TCID501、在青霉素瓶或离心管中将病毒液作连续10倍的稀释,从10-1-10-10。
2、将稀释好的病毒接种到96孔微量培养板中,每一稀释度接种一纵排共8 孔,每孔接种100µl。
3、在每孔加入细胞悬液100µl,使细胞量达到2~3×105个/ml。
4、设正常细胞对照,正常细胞对照作两纵排。
(100µl生长液+100µl细胞悬液)5、逐日观察并记录结果,一般需要观察5-7天。
6、结果的计算,按Reed-Muench两氏法或Karber法的计算方法五、TCID501、Reed-Muench两氏法CPE:Cytopathic effect距离比例=(高于50%病变率的百分数-50%)/(高于50%病变率的百分数-低于50%病变率的百分数)=(91.6-50)/(91.6-40)= 0.8lgTCID=距离比例×稀释度对数之间的差+高于50%病变率的稀释度的对数50=0.8×(-1)+(-3)=-3.8=10-3.8/0.1mlTCID50含义:将该病毒稀释103.8接种100µl可使50%的细胞发生病变。
几个病毒学的基本概念MOI、TCID50、PFU

几个病毒学的基本概念: MOI、TCID50、PFUMult iplicity of infection (MOI)The multiplicity of infection (abbreviated MOI) is the average number of phage per bacterium. The MOI is determined by simply dividing the number of phage added (ml added x PFU/ml) by the number of bacteria added (ml added x cells/ml). The average number of phage per bacterium in the population could be 0.1, 1, 2, 10, etc, depending upon how you set up the experiment.Although the MOI tells you the average number of phage per bacterium, the actual number of phage that infect any given bacterial cell is a statistical function. For example, if the MOI is 1, some cells will get infected with one phage but some cells may be infected with 0 phage and other cells infected with two phage.The proportion of cells in a population infected by a specific number of phage (n) can be calculated from the Poisson distribution.PFU:plaque forming unit,空斑形成单位。
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*** 病毒学的几个概念:PFU MOI TCID50
PFU:plaque forming unit ,空斑形成单位。
感染性滴度的单位一般表示为PFU/ml 。
由于测定pfu 往往重复性较差,因此近些年许多研究又开始采用TCID50 方法来计算病毒的感染单位。
因此建议也可使用TCID50 法。
MOI :multiplicity of infection ,感染复数。
传统的MOI 概念起源于噬菌体感染细菌的研究。
其含义是感染时噬菌体与细菌的数量比值,也就是平均每个细菌感染噬菌体的数量。
噬菌体的数量单位为pfu 。
一般认为MOI 是一个比值,没有单位,其实其隐含的单位是pfu number/cell 。
后来MOI 被普遍用于病毒感染细胞的研究中,含义是感染时病毒与细胞数量
的比值。
然而,由于病毒的数量单位有不同的表示方式,从而使MOI 产生了不同的含义。
能产生细
胞裂解效应的病毒例如单纯疱疹病毒等习惯上仍用pfu 表示病毒数量,因此其MOI 的含义与传统的概念相同。
传统意义上的MOI 的测定,其原理是基于病毒感染细胞是一种随机事件,遵循Poisson 分布规律,可计算出感染一定比例的培养细胞所需的感染复数(MOI )。
其公式为:
P = 1- P(0) ,P(0) = e-m 或m = -InP (0)。
其中:
P 为被感染细胞的百分率
P(0) 为未被感染细胞的百分率
m 为MOI 值
例如,如果要感染培养皿中99% 的培养细胞,则:
P(0) = 1% = 0.01
m = -In(0.01)= 4.6 pfu/cell 。
TCID50 Protocol :
1:制备96 孔板单层细胞
2:将病毒做系列稀释,横向接种单层细胞板,每稀释度重复 3 孔
3:每日观察细胞病变,记录高于50 和低于50%病变孔的病毒稀释度,
4:计算比距,获得TCID50
计算比距:
(高于50%的病变率-50%)/(高于50%病变率-小于50%病变率)=比距;
比距与接近50% 病变率的病毒的稀释度的指数相加,就获得了指数。
比如:比色计算或者显微镜观察病毒的TCID50 在10 的负7 和8 次方之间,那么,指数-8 与比距相加,获得的新的指数,就是TCID50 的指数,TCID50=10 的-7.几次方
TCID50 与PFU 换算: PFUs=0.7 ×TCID50 的滴度。